UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE ENFERMERIA

BIOQUMICA
PRCTICA N 1
DEMOSTRACIN DE LA NATURALEZA PROTEICA DE LAS ENZIMAS
I.- JUSTIFICACIN
II.- OBJETIVOS
III.- MATERIAL Y REACTIVOS:
Solucin de amilasa salival l 10% . Tubos de ensayo
Sol de cloruro de sodio al 0,15 M . Pipetas
Buffer fosfato pH = 6,6 . Gradillas
Solucin de almidn al 10% . Frasco lavador
Agua destilada . Mechero de alcohol
Soluc. NaOH 1N . Vasos de precipitacin
Soluc. CuS04 20% . Pinzas
Solucin. HCl 3 N . Trpode y rejilla metlica
Solucin HCl 0,05 N
Solucin yodada
cido tricloroactico 20%

IV.- PROCEDIMIENTO:

COMPONENTES I II III IV V VI
Solucin de amilasa 10% 1 mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL
NaOH 1N ----- 2,4 mL ---- ----- ----- -----
HCl 3N ----- ----- 2,4 mL ----- ---- ----
cido tricloroactico ------ ----- ------ 2,4mL ------ ------
CuSO4 20% ------- -------- 2,4mL ------

Buffer Fosfato pH 6,6 ------- --------- ------ ------- --------- 2.4 mL

Dejar los tubos I al V en reposo durante 10 minutos a la temperatura del ambiente y el

tubo VI colocarlo en bao de agua hirviendo por el mismo tiempo.

Durante este lapso constituir el siguiente sistema:

 COMPONENTES / TUBOS I II III IV V VI
Solucin de almidn 1 mL 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL
Buffer fosfato pH 6,6 5 mL 5mL 5mL 5 mL 5 mL 5 mL
NaCl 0,15 M 1,4 mL 1,4 mL 1,4 mL 1,4 mL 1,4 mL 1,4 mL
Agua destilada 2 mL 2mL 2 mL 2 mL 2 mL 2 mL
Pre incubar este sistema por dos minutos a 37C.
Luego agregar 1,00 mL de la enzima tratada en el paso anterior a su tubo correspondiente y
dejar en incubacin a 37C por 20 minutos,
DETERMINACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
Construir el siguiente sistema:
COMPONENTES / TUBOS I II III IV V VI
HC l 0,05 N 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5mL

Tubos de reac.del Sist anterior. 0,5 mL 0,5mL 0,5mL 0, 5 mL 0,5 mL 0,5 mL

Solucin yodada 0,5 mL 0,5mL 0,5mL 0, 5 mL 0,5 mL 0,5 mL
Observar.
V.- RESULTADOS
VI.- DISCUSIN
VII.- CONCLUSIN
VIII.- BIBLIOGRAFA
CUESTIONARIO
1 Que entiende por Km?
2 Que cofactor es necesario para mayor eficacia actividad enzimtica de la amilasa
saliva?
3 De que manera afecta la temperatura a la velocidad de una reaccin enzimtica?.
4 De qu manera influye el pH a la velocidad de una reaccin enzimtica?.
5 Explique el proceso por el cual el lugol tie de azul intenso al almidn
6 Haga la estructura qumica del almidn ( un fragmento).
7 Como se prepara una solucin de lugol?

J/02/17 Q.F. Nelson H. Urcia Yengle

DOCENTE