Obtencin de cepas mutantes de Aspergillus japonicus con alta
actividad -Fructofuranosidasa a partir de cepa ATCC20611.
J Cisneros; B Gutarra; H Quispe; G Calixto
1. Universidad Continental, Per
La enzima -Fructofuranosidasa de los hongos Aspergillus tiene la capacidad de sintetizar
Fructooligosacridos (FOS), un prebitico con beneficios para la salud. Con el objetivo de obtener mutantes superproductores de esta enzima se han determinado parmetros fsicos y qumicos que nos permitan obtener linajes de Aspergillus japonicus ATCC 20611 con alta actividad enzimtica. Para ello se evalu la resistencia a diferentes concentraciones de dodecil sulfato de sodio (SDS) con la finalidad de reducir el crecimiento desmesurado de los micelios en placas Petri. Igualmente se determin la curva de supervivencia a la radiacin (UVC 100 280 nm). Posteriormente a ello se realiz un aislamiento de cepas con apariencia normal para evaluar la actividad -D- Fructofuranosidasa y se cuantific los azcares reductores mediante el mtodo del DNS a 540 nm. Finalmente se verific la estabilidad de la actividad enzimtica mediante 6 generaciones consecutivas. Los resultados muestran que la concentracin de SDS 0.150 reduce en un 68% el crecimiento del micelio. Por otro lado la letalidad de 99.9% se alcanz a los 5 minutos eligindose para los ensayos 3 minutos donde la sobrevivencia es del 5% (1x 107 esporas/mL). Las cepas mutantes J1-M1; J3-M42; J5-M17 mostraron valores significativamente (p<0.05) superiores de actividad hasta 1.5 veces la actividad de la cepa parental. Las 6 generaciones analizadas muestra la estabilidad gentica de estos mutantes y la cintica mostr un comportamiento significativamente superior (p<0.05) en los tiempos evaluados respecto a la cepa parental.
Financiamiento: contrato N 213-FINCYT-IA-2013 del Programa Nacional de Innovacin