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1.

Que cada alumno y alumna del grupo conozca su grupo sanguineo y el


factor rh.
2. Presenciar la tcnica que se utiliza para determinar el grupo sanguineo.
(Esta determinacin debe ser realizada por el profesor o profesora)
3. Interpretar dicha tcnica

Solucin anti-A

Material punzante estril

Solucin anti-B

Algodn

Solucin anti-D(anti Rh)

Agua oxigenada

Tarjetas de identificacin

Una gota de sangre

1. Colocar en la tarjeta una gota se suero anti-A, una de anti-B, una


mezcla de anti-A y anti-B, y una gota de anti-D, cada una en su casilla
correspondiente, como se indica en la FIGURA 1.

FIGURA 1
2. Pinchar la yema del dedo, previa desinfeccin con alcohol o agua
oxigenada. Depositar una gotita de sangre en cada casilla y mezclar
con los sueros. FIGURA 2.

FIGURA 2
3. Observar los resultados. El grupo sanguineo del individuo
corresponder con el de la casilla en la que la sangre haya coagulado. Si
el individuo es del grupo AB, la sangre coagular en las tres primeras
casillas. Adems, si la sangre coagula en la casilla "anti-D", el individuo
ser Rh positivo, de lo contrario ser Rh negativo.
Personalmente, prefiero hacer la determinacin del factor Rh en un
porta, en el que puedo observar mejor la coagulacin sanguinea.
FIGURA 3.

FIGURA 3

En las tarjetas de la FIGURA 4, se


puede observar el aspecto que presentan dos
casos opuestos. En la tarjeta superior se
observa que no existe coagulacin en
ninguna casilla. Las tres primeras
corresponden a los sueros del grupo
sanguineo, por lo que interpretamos que
esta persona pertenece al grupo O, la cuarta
es la del factor Rh, y al no existir
coagulacin interpretamos que es Rh
negativo.
En la tarjeta inferior, vemos coagulacion en
todas las casillas, por lo que de una forma
similar interpretamos que el alumno es del
grupo sanguineo AB y Rh positivo. (Nota: El
grupo sanguineo AB es poco frecuente, y en el
anlisis a 45 alumnos y alumnas, solamente sali en
una alumno)

FIGURA 4

El "quiz" de esta prctica se encuentra en los glbulos rojos. Los glbulos


rojos o hemates son clulas sanguineas, por lo tanto todos los tenemos. Sin
embargo, en la membrana de los glbulos rojos pueden existir unas
proteinas especiales: son las glucoprotenas A y B. As, un glbulo rojo puede
tener protena A, protena B, tener ambas o no tener ninguna. De manera que
un individuo tendr grupo sanguneo A si sus glbulos rojos tienen la
glucoprotena A en su membrana, siguiendo el mismo criterio para el resto de

los grupos (si no existe protena, entonces ser de grupo sanguineo O). Estas
protenas corresponderan a lo que denominan antgenos.
Ahora bien, en el plasma sanguineo tenemos anticuerpos. Evidentemente, un
individuo del grupo A no podr tener anticuerpos anti-A, pues sto no sera
viable (la sangre coagulara).
As :
los individuos A tendrn anticuerpos anti-B
los individuos B tendrn anticuerpos anti-A
los individuos AB no tendrn anticuerpos de este tipo
los individuos O tienen los dos tipos de anticuerpos.

Grupo sanguineo

AB

Glbulos rojos

En la membrana
En el plasma

Antgeno A
Anti-B

Antgeno B
Anti-A

Antgenos A y B
No anticuerpos

No antgenos
Anti-A y
Anti-B

De la misma manera, el factor Rh es otra protena que existe en los glbulos


rojos de algunas personas. Su nombre viene del mono en el que fue
descubierta, el macacco rhesus. El factor Rh positivo es un factor
hereditario dominante.
Este asunto tiene especial importancia en donaciones de sangre. Como hemos
visto, un individuo A tiene en su plasma anticuerpos anti-B, as que no podr
recibir sangre de un individuo B, pues estos anticuerpos provocaran la
coagulacin de la sangre del donante en los vasos sanguineos de la persona
receptora.
En la siguiente tabla vemos las compatibilidades a la hora de donar y recibir
sangre.
Como vemos, el grupo AB puede recibir de cualquier otro grupo y de s
mismo, as que se llama "receptor universal". El grupo O ,sin embargo, puede
donar a cualquier grupo, as que se conoce como "donante universal"

RECEPTOR
D
O
N
A
N
T
E

grupo A
grupo A
grupo B
grupo AB

grupo B

grupo AB

grupo O

SI
NO
NO

NO
SI
NO

SI
SI
SI

NO
NO
NO

SI

SI

SI

SI

grupo O

Microscopio

Lanceta

Portas y cubre-objetos

Alcohol

Soporte de preparaciones

Metanol

Cubeta

Giemsa

Sangre obtenida por un pinchazo en el pulpejo del dedo

1. Limpiar el pulpejo del dedo con una gota de alcohol, hacer una puncin
para conseguir una gota de sangre.

2. Depositar la gota de sangre, en un lado y en el centro de un porta bien


limpio.
3. Seguidamente, con el empleo de un porta de borde esmerilado se hace
un frotis o extensin de sangre.
El porta con el que se hace la extensin debe deslizarse bien colocado
y lo ms perfectamente aplicado en su borde contra el otro porta
sobre el que se hace la extensin. Slo debe pasarse una vez, de forma
continua e ininterrumpida.

4.

Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de


seleccionar para la tincin la mejor lograda.
Las extensiones o frotis deben secarse al aire lo ms rpidamente
posible. La desecacin se facilita con movimiento en forma de abanico,
nunca soplando o por calor. La rpida desecacin evita la deformacin
de los glbulos sanguneos.

1. Depositar el porta con la extensin de sangre encima del soporte de


tinciones y ste sobre la cubeta.

2. Dejar caer sobre la extensin unas gotas de metanol y esperar que el


alcohol se evapore, con lo que se consigue el fijado.
3. Depositar cubriendo toda la extensin, unas gotas de Giemsa, evitar la
desecacin y dejar actuar el colorante unos cinco minutos.
4. Lavar la preparacin, hasta que arrastre todo el colorante.
5. Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor
muy lento de la llama del mechero.

1. Con dbil aumento explorar la preparacin para localizar la zona en la


que el frotis es ms perfecto. Los lugares ms aptos son aquellos en los
que la extensin de los glbulos se ha conseguido en una sola capa,
estn bien teidos y no se han producido precipitados de los
colorantes. Cuando se observe una zona apta, pasar a aumentos ms
fuertes.
2. En el campo del microscopio, se vern con un dominio predominante
los glbulos rojos, hemates o eritrocitos , teidos en color rojo. No
tienen ncleo y son ms delgados por el centro que por los bordes.
Los glbulos blancos o leucocitos de identifican fcilmente por la
presencia de ncleo. Hay varias clases de glbulos blancos:
o los linfocitos algo mayores que los glbulos rojos, con un ncleo
muy voluminoso que ocupa casi todo el glbulo, aparece
fuertemente teido en color violeta oscuro.
o los monocitos son los leucocitos mayores, poco frecuentes
normalmente, hay que desplazarse por la preparacin para
encontrar alguno. Tienen un ncleo muy grande y redondeado que
aparece teido en color violeta.(Es bueno que recuerdes su
funcin que es la de fagocitosis).
o los polinucleares presentan el ncleo como fragmentado o con
aspecto arrosariado.
o los eosinfilos, con granulaciones abundantes de color rojizo y el
ncleo teido de color azul marino. Estos glbulos aumentan su
nmero en caso de parasitosis o procesos alrgicos.

o los basfilos presentan un ncleo teido de rojo y las


granulaciones del citoplasma de color muy oscuro.
Las plaquetas aparecen como pequeos fragmentos teidas de color
violeta. Estas clulas intervienen en el proceso de coagulacin
sangunea.
3. Si la extensin ha salido bien, merece la pena conservarla. Para ello,
aadir una gota de euparal, dpx, u otro producto similar y colocar
un cubre-objeto.
4. El nmero promedio de glbulos rojos en el hombre es de 5.000.000
por mm3 de sangre. La cifra media de glbulos blancos es de 7.000 a
8.000 por mm3. Hay por tanto un glbulo blanco por cada 600 700
glbulos rojos. Por lo tanto para ver todos los tipos de glbulos blancos
debes buscarlos en distintos campos de la preparacin. El nmero de
plaquetas es de unas 250,000 por mm3

El objetivo de esta prctica es observar e interpretar figuras de distintas


fases de la mitosis en clulas vegetales.

Microscopio

Cuchilla de afeitar

Porta y cubre-objetos

Tiras de papel de filtro

Pinzas de madera

Vidrio de reloj

Orcena actica clorhdrica

Mechero

Pinzas finas

un bulbo de cebolla

El proceso de reproduccin celular conocido con el nombre de mitosis, puede


ser estudiado eligiendo un material constituido por clulas que se hallen en
continua divisi. Esta condicin la reunen los meristemos terminales o
primarios, tales como los que se encuentran en el pice de las races.
Un bulbo de cebolla cuya base se mantenga en contacto con el agua durante
4 5 das, nos proporciona abundante cantidad de raicillas jvenes, muy
apropiadas para la obtencin de muestras destinadas a observar figuras de
mitosis.

FIGURA 1

Unos cinco das antes de realizar la prctica, se colocar un bulbo de cebolla


tapando la boca de un frasco, que se llena hasta que el agua toca la base de
la cebolla . FIGURA 1. Se logra as el desarrollo de numerosas raicillas
jvenes, cuando stas tengan una longitud de 3 centmetros es el momento
adecuado para hacer la preparacin.
1. Cortar con unas tijeras finas o cuchilla de afeitar, los 5 ltimos
milmetros de las raicillas, depositndolas en un vidrio de reloj
2. Cubrir la muestra con orcena actica clorhdrica. Aproximadamente
unos 2 cm3 de orcena.
3. Dejar que actue el colorante durante 10 minutos.
4. Tomar el vidrio de reloj por los bordes, ayudndonos de una pinza de
madera y calentarlo suavemente a la llama del mechero, evitando la
ebullicin y esperar hasta que se emitan vapores tenues.
5. Con las pinzas finas tomar con cuidado una raz y colocarla sobre un
porta, cortar los ltimos 2 3 milmetros y desechar el resto.
6. Colocar el cubre-objetos y encima una almohadilla hecha con papel de
filtro sobre la que se ejerce presin con el dedo pulgar, primero suave,
despus ms intensa, para aplastar la muestra, tcnica conocida
como squash
7. Aspirar con el papel de filtro el exceso de colorante.

8. Observar al microscopio primero a pequeo aumento y luego con


aumentos mayores, recorriendo diversos campos para descubrir en las
clulas observadas, las distintas fases de la mitosis.

La preparacin presenta el aspecto de una dispersin de clulas por todo el


campo que abarca el microscopio. Se observarn clulas en distintas fases o
estados de divisin celular. Con esta tcnica de tincin se ven los
cromosomas impregnados por la orcena en color morado. El aspecto
reticulado, as como el mayor tamao de algunos ncleos, corresponde a las
clulas que se encontraban en los procesos iniciales de la divisin mitsica.

Observar los orificios respiratorios (estomas )de las hojas.

Microscopio

Bistur

Pocillo de montar

Portas y cubres

Agujas enmangadas

Verde de metilo actico

Pinzas finas

Cubeta

Tijeras finas

Soporte de tinciones

Hoja de lirio o de otra planta similar.


Es conveniente tratar la hoja con cido ntrico al 25%,que facilitar separar
ms fcilmente la epidermis.

1. Hacer con el bistur, un corte transversal en una hoja de lirio o planta


similar.
2. Coger con una pinza fina la fina epidermis y tirar hasta conseguir una
pequea muestra que sea lo ms transparente posible.
3. Llevar el trozo desprendido a la cubeta o caja de Petri con agua.
Apoyar el portaobjeto en el fondo de la caja y ayudndose con la pinza
extender el trocito de epidermis de cebolla sobre el porta.
4. Depositar el porta-objetos sobre el soporte de tinciones, aadir unas
gotas de verde de metilo actico, dejando actuar este colorantefijador durante cinco minutos, procurando aadir ms gotas si se
evapora.
5. Escurrir el colorante sobrante y lavar, dejando caer agua con un
cuentagotas sobre la preparacin.
6. Colocar encima de la preparacin un cubreobjetos y observar al
microscopio, primero a pequeo aumento y luego a un aumento mayor.

Se utilizarn primero los aumentos dbiles con el fin de centrar la


preparacin y determinar la zona mejor para la visualizacin. Cambiar
despus a un aumento mayor.
Las clulas de la epidermis de las hojas del lirio , son de forma alargada y
bastante grandes. La membrana celular celulsica se destaca muy clara
teida por el colorante. Los ncleos son grandes y muy visibles. En
el citoplasma se distinguen algunas vacuolas grandes dbilmente coloreadas.

Lo mas significativo en esta preparacin, es la observacin de los orificios


respiratorios o estomas. Se observa que estn constituidos por dos clulas
con aspecto arrionado o de habichuela, clulas en las que se pueden
observar orgnulos verdes correspondientes a los cloroplastos. Estas dos
clulas limitan un orificio que puede variar de dimetro y que se
denomina ostiolo. En el siguiente dibujo puedes reconocer las distintas
estructuras.

Observar clulas vegetales describiendo las estructuras visibles al


microscopio ptico.

Microscopio

Bistur

Pocillo de montar

Portas y cubres

Agujas enmangadas

Pinzas finas

Cubeta

Tijeras finas

Soporte de tinciones

Verde de metilo actico

Una cebolla

1. De la parte cncava de una de las hojas carnosas del bulbo de la


cebolla y con la ayuda de un bistur y una pinza fina, separar una
pequea porcin de epidermis, procurando no arrancar el tejido
subyacente, de tal forma que la parte desprendida tenga el aspecto de
una fina pelcula traslcida como el celofn. FIGURA 1.

Figura 1

Figura 2

Figura 3

Figura 4

2. Llevar el trozo desprendido a la cubeta o caja de Petri con agua.


Apoyar el portaobjeto en el fondo de la caja y ayudndose con la pinza
extender el trocito de epidermis de cebolla sobre el porta. FIGURA 2
3. Depositar el porta-objetos sobre el soporte de tinciones, aadir unas
gotas de verde de metilo actico, dejando actuar este colorantefijador durante cinco minutos, procurando aadir ms gotas si se
evapora. FIGURA 3
4. Escurrir el colorante sobrante y lavar, dejando caer agua con un
cuentagotas sobre la preparacin.
5. Colocar encima de la preparacin un cubreobjetos FIGURA 4y
observar al microscopio, primero a pequeo aumento y luego a un
aumento mayor.

Se utilizarn primero los aumentos dbiles con el fin de centrar la


preparacin y determinar la zona mejor para la visualizacin. Cambiar
despus a un aumento mayor.
Las clulas de la epidermis de las hojas internas del bulbo de la cebolla, son
de forma alargada y bastante grandes. La membrana celular celulsica se
destaca muy clara teida por el colorante. Los ncleos son grandes y muy
visibles. En el citoplasma se distinguen algunas vacuolas grandes dbilmente
coloreadas.FIGURA 5

Figura 5

1. Ver la estructura pluricelular de un rgano vegetal


2. Familiarizarse en el manejo del microtomo.
3. Conocer una tcnica de tincin doble.
4. Diferenciar distintos tejidos vegetales

Microscopio

Pincel

Portas y cubre-objetos

Cubeta

Microtomo
Pinzas finas
Agujas enmangadas

Alcohol de 70

Verde brillante

Carmn alumnico

Euparal o glicerina

Batera de pocillos de tincin


Pocillo de montaje
Batera de alcoholes

Puede utilizarse un tallo joven de maz, pednculo


floral de lirio, azucena, gladiolo, etc. En general cualquier tallo o pednculo
floral de una planta monocotilednea.

1. Se realizan los cortes del tallo con el microtomo, si no se dispone de l,


puede hacerse con una cuchilla de afeitar intentando sacar los cortes
muy finos, casi transparentes. Los cortes se van tomando con un pincel
y depositndolos en un pocillo con agua.
2. Se seleccionan los cortes ms finos y completos y se pasan a un pocillo
de vidrio en el que se ha depositado el colorante verde brillante. Se
deja que actue el colorante un minuto.
3. A continuacin los cortes deben lavarse con agua, por lo que se van
llevando los cortes del tallo, ayudndose de una aguja enmangada a
travs de varios pocillos que contengan agua, para quitarles el exceso
de colorante.
4. Como slo nos interesa que nos quede teido una pequea parte de la
muestra, a continuacin ponemos el corte en un pocillo de
vidrio con alcohol de 70 para terminar de quitar el exceso de
colorante verde brillante.
5. Se lavan con agua para eliminar todo residuo de alcohol, para que pueda
admitir el segundo colorante.
6. Colocar la muestra en un pocillo de vidrio que contenga carmn
alumnico y dejarlo actuar como mnimo 15 minutos.

7. Lavado con agua transcurrido el tiempo de tincin.


8. Montaje de la preparacin con una gota de glicerina o euparal.

La preparacin debe ser observada, primero con aumentos dbiles, haciendo


un recorrido desde la corteza a la zona interna para que se logre obtener
una visin general de la preparacin.
En la observacin con el aumento menor se pueden observar estas distintas
capas:
1. Epidermis, formada por una capa de clulas, en la que se puede
observar los estomas teidos de verde brillante.
2. El parnquima cortical , formado por varias capas de clulas.
3. El parnquima medular, clulas con membrana celulsica.
Al observar con mayor aumento pueden verse en detalle los vasos
conductores:
Cada haz conductor est formado de:
1. Un anillo de fibras lignificadas, teidas con el verde brillante.
2. Vasos leosos, cuyo conjunto constituyen el xilema, por el que circula la
savia bruta.
3. Vasos liberianos, que forman el floema, por el que circula la savia
elaborada.
4. Clulas del parnquima, teidas por el carmn a causa de la constitucin
celulsica de sus membranas.

estructuras.

Observar clulas animales y diferenciar en ellas algunas

Microscopio

Soporte de tinciones

Portas y cubre-objetos

Mechero de alcohol

Cubeta

Cuentagotas

Pocillo de montar

Azul de metileno

Aguja enmangada

Mucosa bucal del hombre

1. Introducir el dedo en la cavidad bucal.


2. Raspar suavemente con la ua la cara interna del carrillo.
3. Limpiar el producto obtenido, del borde interno de la ua, con una
aguja enmangada
4. Depositarla junto con una gotita de agua sobre el porta-objetos.
5. Hacer una extensin frotando con la aguja sobre el porta.
6. Calentar a la llama del mechero sin que llegue a quemar el porta sobre
el dorso de la mano.
7. Colocar el porta sobre el soporte de tincin encima de la cubeta.
8. Agregar unas gotas de azul de metileno o de verde de metilo actico,
dejando actuar el colorante 2 3 minutos.
9. Verter el colorante sobrante y lavar la preparacin hasta que no suelte
color.

10.Poner encima un cubre-objetos, de forma que ste caiga como se


cierran las tapas de un libro; dejando caer suavemente el cubre se
evita todo riesgo de que queden burbujas de aire entre el porta y el
cubre.

Empleando aumentos dbiles localizar el rea de la preparacin ms idnea,


deben desestimarse las zonas poco o muy teidas, los apelotonamientos de
clulas unas encimas de otras, etc. Enfocar las clulas aisladas con mayor
aumento.
La preparacin nos muestra una visin parecida a un mosaico formado
por clulas planas, poligonales, ms o menos irregulares; abundan las clulas
aisladas, en cuyas caras se perciben los trazos de insercin de unas clulas
con otras.
Como el material observado procede de la capa superficial, capa de
descamacin, del epitelio pluriestratificado de la mucosa bucal, son en su
mayora clulas muertas o clulas que estn en perodo de degeneracin.

El azul de metileno tie intensamente el ncleo y con menos color


el citoplasma ; ste presenta un cierto aspecto de alteracin y suele ser algo
granuloso.

Reconocer e identificar algunas diferenciaciones del citoplasma vegetal:


amiloplastos.

Microscopio

Soporte preparaciones

Patata

Portas y cubre-objetos
Cuchilla o bistur

Pocillo de montar

Lugol

Semillas de legumbres

El almidn, es un producto de reserva, que se acumula en ciertas partes de la


planta, sobre todo en las races, tubrculos y semillas y que est destinado a
sustentar a la planta.
Podemos extraerla faclmente de la patata. En esta se va acumulando en los
plastos, acumulndose en capas.

1. Partir una patata y raspar con la punta del bistur, depositando el


producto obtenido en un porta-objeto.
2. Dejar secar completamente y teir con unas gotas de lugol o yodo.
Dejar actuar dos minutos.
3. Poner el cubre-objeto y observar al microscopio.
4. Puede rasparse tambin distintas semillas (juda, guisante, habichuela,
maiz, etc, realizando el proceso similar al del raspado de la patata. Es
conveniente para poder ver el aspecto distinto de amiloplastos en
distintas plantas.

Con poco aumento buscar la zona de la preparacin en la que los granos estn
menos aglutinados, localizada sta, cambiar a aumentos mayores. Observar
cerrando el diafragma lo mximo permitido por el foco luminoso.
Los granos de almidn se tien en color violeta intenso por el lugol o iodo. Los
granos muestran por lo general, capas concntricas de crecimiento del
grano, estas formas son muy variadas y por lo general especifica de cada
planta, fruto o semilla. Los de patata presentan las capas de crecimiento en
bandas excntricas alrededor de un punto central o hilio

Observar y diferenciar orgnulos de clulas vegetales: cromoplastos.


Se observa fcilmente en tomate y zanahoria.

Microscopio

Pulpa de tomate

Cubres y porta-objetos

Raz de zanahoria

Bistur o cuchilla afeitar

microtomo

Soporte tinciones

Pulpa de tomate:
1. Cortar con el bistur un pequeo trozo de uno o dos milmetros de
grosor, de la parte pulposa como se indica en el dibujo. FIGURA 1.
2. Llevarlo sobre un porta, sin poner agua.
3. Poner el cubre-objeto y comprimir suavemente la preparacin.

Figura 1
Raz de zanahoria:
1. Preparar un trocito prismtico de la raz de zanahoria.
2. Llevarlo al microtomo para obtener cortes finos.
3. Recoger los cortes con el pincel y llevarlos a la cubeta con agua.
4. Colocar en el porta. Tapar con el cubre-objetos.

1. La pulpa del tomate nos muestra las clulas generalmente bastante


sueltas unas de otras. En el citoplasma se percibe una serie de
grnulos rojizos-anaranjados que son los cromoplastos. El ncleo puede
llegar a observarse por su tpico aspecto y tamao. Es frecuente la
presencia de grnulos de almidn de forma arrionada. En las clulas
menos alteradas por la compresin se ven grandes vacuolas incoloras.
2. En las clulas de la raz de zanahoria se ven multitud de corpsculos
irregulares de color anaranjado que corresponden a los cromoplastos.