Esterilizacin > Generalidades

Esterilizacin: eliminacin o muerte de todos los microorganismos que contiene un objeto o sustancia, y que se
encuentran acondicionados de tal forma que no pueden contaminarse nuevamente.

Sanitizante: agente que disminuye la carga microbiana total a un nivel el cual es seguro para la salud de la
poblacin. Slo es aplicable sobre objetos inanimados.

Desinfectante: agente que elimina la carga microbiana total en superficies inanimadas tales como habitaciones.
Antisptico: agente que controla y reduce la presencia de microorganismos potencialmente patgenos sobre piel
y/o mucosas (slo pueden aplicarse externamente sobre seres vivos).

Agentes antibacterianos esterilizantes y/o desinfectantes

1.

Provocan prdida de la viabilidad en los microorganismos

Fsicos (calor, radiaciones)

2.

Qumicos (xido de etileno, formaldehdo, agentes oxidantes, soluciones antispticas.)

Provocan una separacin de los microorganismos de la sustancia lquida

Filtracin (se eliminan los microorganismos presentes en un fluido).

Esterilizacin > Agentes fsicos

Calor

Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la accin del calor. El calor provoca desnaturalizacin de
protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o procesos oxidativos irreversibles en los microorganismos.
La efectividad del calor como mtodo de esterilizacin depende de:

Temperatura
Tiempo de exposicin

Calor Hmedo

El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se deben principalmente a dos
razones:

El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas (DNA, RNA, protenas, etc) son
producidas por reacciones que eliminan agua.

El autoclave es el aparato ms comnmente utilizado en los laboratorios para esterilizar cultivos y soluciones que
no formen emulsiones con el agua y que no se desnaturalicen a temperaturas mayores a 100 C. Una temperatura
de 121 C (una atmsfera de sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor a 15 minutos sirve para destruir
organismos formadores de esporas.

Calor Seco
El calor seco produce desecacin de la clula, efectos txicos por niveles elevados de electrolitos, procesos oxidativos y
fusin de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que
estn en contacto con stos.
La estufa de esterilizacin es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por calor seco. Se requiere mayor
temperatura y tiempo de exposicin que el autoclave. La temperatura vara entre 120 y 180C, requirindose distintos
tiempos de exposicin. A 140C se necesitan por lo menos 5 horas de exposicin, mientras que a 160C se requieren al
menos 2 horas de exposicin.
Sirve para esterilizar material de vidrio. El papel y el algodn no pueden ser esterilizados a ms de 160C.

Radiaciones

Su accin depende de:

Tipo de radiacin
Tiempo de exposicin
Dosis

Ionizantes
Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos nucleicos, estructuras proteicas y lipdicas, y
componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolbiles (termosensibles) como jeringas
descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por sus costos.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen alteraciones de los componentes.

Ultravioletas
Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos debido a que forman dmeros de pirimidinas adyacentes que
inducen errores en la duplicacin y por lo tanto la prdida de la viabilidad de las clulas.
Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies.

Esterilizacin > Agentes qumicos

Dentro de los compuestos qumicos podemos encontrar agentes esterilizantes, desinfectantes y antispticos.
La efectividad de estos agentes depende de las condiciones bajo las que actan.

Concentracin: vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues una misma concentracin del agente puede
producir un efecto diferente en distintos microorganismos.

Tiempo: los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma, por lo que no todos los
microorganismos mueren al mismo tiempo.

pH: afecta tanto a los microorganismos como a los agentes qumicos. El aumento de pH por encima de 7 incrementa la
carga negativa de los microorganismos afectando la concentracin del agente sobre la clula. El pH determina el grado
de disociacin y la efectividad del agente qumico, pues a menor disociacin mayor permeabilidad y mayor efectividad.

Antispticos
Alcoholes

Lesionan la membrana celular de los microorganismos y desnaturalizan protenas celulares. Desorganizan la estructura
fosfolipdica.
No destruyen esporas y tienen una accin germicida lenta. Los alcoholes de cadena corta tienen un efecto nocivo mayor que los
de cadena larga.
Se utilizan en concentraciones del 50 al 70%. Los ms utilizados son el etanol e isoproplico.

Iodo
Es un agente oxidante que modifica grupos funcionales de protenas y cidos nucleicos. Inactiva protenas y enzimas por
oxidacin de los grupos -SH a S-S, pudiendo atacar tambin grupos amino, indoles, etc.
Se utiliza como desinfectante de la piel (tintura de iodo: yodo molecular 2% y yoduro de sodio 2% en alcohol), aunque es
irritante.
Es efectivo contra esporas en una concentracin de 1600 ppm de iodo libre.

Agentes inicos y anfteros

Son sustancias que lesionan la membrana celular debido a que desordenan la disposicin de las protenas y de los fosfolpidos,
por lo que se liberan metabolitos desde la clula, se interfiere con el metabolismo energtico y el transporte activo.
No son esporicidas ni tubercolicidas an en altas concentraciones. Sus principales ventajas se hallan en que son inodoros, no
tien, no son corrosivos de metales, estables, no txicos y baratos.

Catinicos: Sales de amonio cuaternarias. Tienen mayor actividad a pH alcalino y los Gram + son ms susceptibles.
Aninicos: Jabones y cidos grasos. Tienen mayor actividad a pH cido y son eficaces contra Gram +.
Anfteros: Actan como catinicos o aninicos segn el pH.

Organo Mercuriales
Estos tipos de compuestos se combinan con los grupos -SH de las protenas, inactivando enzimas. Dentro de los mercuriales
orgnicos se encuentran el metafen y el mertiolate

Perxido de Hidrgeno

Es un antisptico dbil, con capacidad oxidante y formadora de radicales libres.

Actualmente, el perxido de hidrgeno gaseoso se est utilizando como desinfectante de superficies o descontaminante de
gabinetes biolgicos debido a que no posee las propiedades txicas y cancerigenas del xido de etileno y formaldehdo.

Colorantes

Interfieren en la sntesis de cidos nucleicos y protenas (acridina) o interfieren en la sntesis de la pared celular (derivados del
trifenilmetano). La acridina se inserta entre dos bases sucesivas del DNA separndolas fsicamente. Esto provoca errores en la
duplicacin del DNA. Los derivados del trifenilmetano (violeta de genciana, verde de malaquita y verde brillante) bloquean la
conversin
del
cido
UDP-acetilmurmico
en
UDP-acetilmuramil-pptido.
Violeta de Genciana

Desinfectantes y/o Esterilizantes

Cloro

El cloro, los hipocloritos y las cloraminas son desinfectantes que actan sobre protenas y cidos nucleicos de los
microorganismos. Oxidan grupos -SH, y atacan grupos aminos, indoles y al hidroxifenol de la tirosina.
El producto clorado ms utilizado en desinfeccin es el hipoclorito de sodio (agua lavandina), que es activo sobre todas las
bacterias, incluyendo esporas, y adems es efectivo en un amplio rango de temperaturas.
La actividad bactericida del hipoclorito de sodio se debe al cido hipocloroso (HClO) y al Cl 2 que se forman cuando el hipoclorito
es diluido en agua. La actividad germicida del ion hipocloroso es muy reducida debido a que por su carga no puede penetrar
fcilmente en la clula a travs de la membrana citoplamtica. En cambio, el cido hipocloroso es neutro y penetra fcilmente en
la clula, mientras que el Cl2 ingresa como gas

Aldehdos
Son agentes alquilantes que actan sobre protenas, lo que provoca modificacin irreversible de enzimas e inhibicin de la
actividad enzimtica (Adicin nucleoflica de grupos -NH2 y -SH). Se utilizan como desinfectantes y esterilizantes. Destruyen
esporas

Oxido de Etileno

Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos lbiles como los que tienen grupos carboxilos, amino,
sulfhidrilos, hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria farmacutica. Sirve para esterilizar material termosensibles
como el descartable y plstico, equipos electrnicos, bombas cardiorrespiratorias, etc. Es muy peligroso por ser altamente
inflamable y explosivo, y adems cancerigeno

Esterilizacin > Controles en esterilizacin

Controles de Esterilizacin

Son controles que se realizan sobre el mtodo de esterilizacin. Monitorean o controlan si el proceso de
esterilizacin funciona correctamente.
Controles Biolgicos
Utiliza indicadores biolgicos como controles del proceso de esterilizacin. Estos indicadores son preparaciones
estandarizadas de microorganismos relativamente resistentes al mtodo de esterilizacin que se emplea. Los
indicadores se procesan en forma conjunta con el material a esterilizar y el nmero de microorganismos presentes
en el indicador es mayor que el que se encuentra en el material.
Una vez concluido el proceso de esterilizacin los indicadores son inoculados en medios de cultivo adecuados e
incubados durante un determinado perodo de tiempo. Si el proceso de esterilizacin fue correctamente empleado y
funciona bien no debe observarse desarrollo del indicador incubado.
Controles fisicoqumicos

Termocuplas: son mtodos directos que registran la temperatura a la que se desarrolla la esterilizacin.
Sustancias de punto de fusin conocido: se utilizan en autoclaves generalmente, son sustancias con un
punto de fusin similar al de la temperatura de esterilizacin del proceso. Estas sustancias estn mezcladas
con un colorante y al fundir indican si se alcanz la temperatura ptima de esterilizacin y el tiempo que se
mantuvo.

Controles de Esterilidad
Permite controlar en forma probabilstica si el material qued completamente esterilizado pues se testea un
porcentaje representativo de todo el material.
Transferencia Directa a Medios de Cultivo
Se transfiere una parte de la muestra a medios de cultivos apropiados que permitan el crecimiento de cualquier
contaminante.

Tioglicolato para anaerobios y aerobios (37C)

Tripticasa-Soja para aerobios (25C)

Las muestras representativas se incuban en estos medios durante un perodo de 14 das, al cabo del cual no se debe
observar ningn tipo de crecimiento.
Puede ocurrir que la muestra no se encuentre estril pero que no se produzca crecimiento durante la incubacin por
algn motivo inherente al medio o a la muestra, por ejemplo presencia de algn inhibidor, etc.
Test de Promocin del Crecimiento
Es un testigo del control de esterilidad. Son testigos que se utilizan para los medios de crecimiento del control ya
que estos medios tienen capacidad de promover el crecimiento. Para estos testigos se utilizan microorganismos con
exigencias nutricionales. Los medios deben ser inoculados con un bajo nmero de microorganismos, se incuban
durante 7 das, al cabo de los que se debe observar un abundante crecimiento.
Test de Bacteriostasis
Es un control que se realiza para determinar si la muestra supuestamente estril no posee propiedades
bacteriostticas. De esta forma se previenen falsos negativos pues no se produce crecimiento habiendo en la
muestra microorganismos viables. Para este test se toman los medios de cultivo con microorganismos de ensayo y
se siembran en las muestras a testear. Se incuban durante 7 das. Si se produce crecimiento esto indica que el
material no contena inhibidores.

CALZADO DE GUANTES
Definicin: Es la tcnica que se aplica para calzarse guantes.

Objetivos:
Manipular material estril

Manipular material contaminado que ofrezca peligro de transmisin de microorganismos.

Efectuar algunos procedimientos en pacientes que ofrezcan peligro de transmisin de

enfermedades.

Precauciones:
Antes de calzarse los guantes, las manos deben estar limpias y secas y las uas cortas.

Trabajar en un rea amplia

Cerciorarse que los guantes estn estriles y en buenas condiciones antes de calzrselos.

Evitar el contacto con superficies no estriles

Mantener las manos enguantadas por arriba de la cintura.

Equipo: 1 par de guantes estriles con su respectiva cubierta.
Procedimiento:
1.
Lavarse y secarse las manos
2.
Abrir la bolsa de modo que la parte interna quede hacia usted y los puos de los guantes hacia
arriba.
3.
Tome los guantes por el puo (sin tocar la parte externa) y colquelos con los pulgares unidos
hacia adelante.
4.
Introduzca despacio la mano derecha en el guante derecho de modo que cada dedo coincida con
el dedo del guante.
5.
Con la mano enguantada tome el otro guante introduciendo los dedos debajo del doblez del
puo sin contaminarlo.
6.

Introduzca la mano izquierda en la misma forma que indica el numeral 4

7.
8.
9.

Ajuste los guantes si es necesario

Al finalizar el procedimiento retire el primer guante tomndolo de la parte externa del puo.
Retire el segundo guante tomndolo de la parte interna del puo.

10.
Colocar guantes en recipiente para
desechos peligrosos, deje el rea limpia y
ordenada.

Tcnica de lavado de
manos
Escuchar entrada

El lavado de manos es imprescindible en el trabajo diario del personal sanitario, para evitar as la transmisin de
enfermedades o infecciones entre los pacientes. Debemos usar la tcnica:
1.
2.
3.
4.
5.

Antes del contacto con el paciente.

Antes de realizar una tarea asptica.
Despus del riesgo a la exposicin de lquidos corporales.
Despus del coctacto con el paciente.
Despus del coctacto con el entorno del paciente.
Pasos para un correcto lavado de manos:
Humedecer las manos

Aplique suficiente jabn para cubrir toda la superficie de la mano.

Frote las manos palma contra palma.

Frote la palma izquierda contra el dorso de la mano derecha, entrelazando los dedos y viceversa.

Repita el lado contrario: palma contra palma, entrelazando los dedos.

Dorso de los dedos con la palma de la mano contraria.

Dedo pulgar de la mano derecha envuelto en la palma de la mano izquierda, frotando circularmente; y viceversa.

Punta de los dedos de la mano izquierda en la palma de la mano derecha, frotando circularmente en ambos sentidos,
y viceversa.

Enjuague las manos con agua.

Seque las manos con cuidado con una toalla de papel desechable.

Usar la toalla para cerrar el grifo de agua.