PRACTICA N2

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO

I.

INTRODUCCIN

El crecimiento de los microorganismos no se puede estudiar individualmente debido a

su tamao tan pequeo, por lo que es necesario recurrir a medios nutritivos artificiales,
donde se puedan desarrollar rpidamente y producir grandes poblaciones. En estas
condiciones se pueden manipular y efectuar las investigaciones deseadas.
Muchas especies bacterianas son tan parecidas morfolgicamente que es imposible
diferenciarlas solo con el uso del microscopio; en este caso, para identificar cada tipo
de bacteria, se estudian sus caractersticas bioqumicas sembrndolas en medios de
cultivo especiales. As, algunos medios contienen un producto que inhibe el crecimiento
de la mayora de las especies
El control de microorganismos mediante procesos de esterilizacin, tiene especial
importancia en el laboratorio, dado que la escogencia del mtodo a utilizar y del
material a procesar me definen la eficacia del proceso de eliminacin microbiana y por
ende garantizan la no contaminacin de muestras o cultivos, hechos fundamentales en
la validez de un resultado en el laboratorio.
Un medio de cultivo intenta el crecimiento y reproduccin in vitro de las bacterias, para
observar sus propiedades y conseguir un mejor estudio bioqumico e inmunolgico, al
contar con material en cantidad suficiente. Por ello constara de lagunas propiedades
(pH adecuado, sales, nutrientes, condicione de aero-anaerobiosis, etc.), que sern las
ms idneas para la bacteria que deseamos estudiar y se citan en cada una de ellas
en particular, en la bacteriologa sistemtica.

II.
OBJETIVOS
II.1.
OBJETIVO GENERAL
Preparar adecuadamente medios de cultivo a partir de sus ingredientes y a partir
de medios de cultivo deshidratados e indicar el mtodo de esterilizacin apropiado.
II.2.

OBJETIVOS ESPECFICOS
-

Esterilizar correctamente el material que se utilizara en el proceso de

esterilizacin para los medios de cultivos.

Preparar cuidadosamente el medio de cultivo con las cantidades establecidas

para el desarrollo de los microorganismos.

III.
MARCO TERICO
III.1. DE LOS EQUIPOS Y MATERIALES
3.1.1. EL AUTOCLAVE (JSAT-65, 40kg Max.)
Elemento indispensable en el laboratorio de Microbiologa. Produce una
esterilizacin por calor hmedo. Se necesita menos tiempo y temperatura
que en una estufa. El autoclave es un sistema similar a una olla presin
domstica y consta de una cuba o recipiente de tamao variable con una
resistencia en el fondo, de un sistema de cierre hermtico, de diversas
vlvulas y de manmetro y termmetro

para control de la presin y

temperatura en el interior de la cuba. Usos: esterilizacin de material y

soluciones siempre que se trate de sustancias termorresistentes (material
de vidrio y metlico, soluciones y reactivos, medios de cultivo, etc.).
(Bermejo, 2006)
3.1.2. LA ESTUFA (5C hasta 80C. Estabilidad 0,1C. Homogeneidad 0,5% a
temperatura de trabajo).
Recipiente termostatizado, con cierre hermtico y aislamiento del exterior.
La temperatura del aire del interior puede ajustarse y mantenerse. Los hay
de diversos tipos segn el rango de temperaturas que pueden alcanzar.
Usos: incubacin de cultivos microbiolgicos, secado de medios empleados
en electroforesis, secado de material de vidrio, etc. (Bermejo, Valiente, &
Snchez, 2003)

3.1.3. AGITADOR
Para la gran mayora de reactores, as como para la mayor parte de las
operaciones que comprenden la mezcla de sistema liquido-lquido, y en
menor

extensin

para

los

sistemas

liquido-solido,

el

quipo

mas

corrientemente utilizado est constituido por un agitador o una turbina

situados en un recipiente.
3.1.4. ASA DE CULTIVO (0,1 x 135mm)
Es un alambre con un aro en la punta, se esteriliza e introduce en una
suspensin, convenientemente diluida, de organismos y se utiliza luego
para hacer una serie de estrias paralelas, no superpuestas, sobre una
placa de agar previamente solidificada. (Ingraham et al, 1992).
3.1.5. AGAR MACCONKEY
El agar MacConkey es un medio empleado frecuentemente para separar
bacterias fermentadoras de lactosa de aquellas que no la fermentan,
provenientes de aguas, alimentos y muestras clnicas. Contiene sales
biliares y cristal de violeta que inhiben a bacterias Gram positivas y algunas
Gram negativas que no pertenecen a la familia Enterobacteriaceae.
Contiene lactosa, unico carbohidrato y rojo neutro como indicador de ph,
cuyo mbito de viraje esta entre pH 8,0 (amarillo) y pH 6,8 (rojo). Las
bacterias fermentadoras de lactosa producen colonias que varan en el tono
rojo: rojas, rojo fucsia o incoloras con el centro rosado, depende de la
cantidad de cido producido y las no fermentadoras de lactosa producen
colonias incoloras. En este caso, el medio adquiere un ligero tono amarillo,
pues las bacterias utilizan las peptonas y alcalinizan el medio de cultivo.
(Gamboa et al, 2005).

TABLA n01: formula del agar MacConkey

Fuente: Koneman et al, 2008

Figura n 01: el agar de MacConkey posee propiedades diferenciales dado
que los bacilos gramnegativos caoaces de fermentar la lactosa aparecen
de color purpura intenso (flecha A) mientras que los que no fermentan la
lactosa aparecen de color rosa palido o relativamente incoloros (flecha B).

Fuente: Bailey & Scott. (2009)

III.2.

DE LA ESTERILIZACIN
La esterilizacin consiste en la destruccin completa de todos los
microorganismos, incluidos las formas resistentes como esporas bacterianas,
virus sin envoltura y

hongos. Ello

puede conseguirse mediante la

esterilizacin fsica.
Los esterilizantes fsicos como el calor hmedo y el calor seco, son los
mtodos de esterilizacin utilizados ms a menudo en los hospitales y

laboratorios

y estn indicados para la mayora de los materiales, con

excepcin de los termosensibles o los que poseen componentes qumicos o

voltiles (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009).
III.2.1. CALOR HMEDO
Este tipo de calor tiene un efecto mayor y ms rpido sobre las bacterias
que el calor seco. Como el agua es muy buen conductor de temperatura, el
calor penetra mejor y se distribuye en forma ms uniforme. El calor hmedo
se puede aplicar por cualquiera de los siguientes procedimientos: 1) vapor
a

presin,

2)

pasteurizacin.

esterilizacin
Estos

fraccionada,

procedimientos

3)

causan

agua
la

hirviente
muerte

de

4)
los

microorganismos porque coagulan y desnaturalizan sus constituyentes

proteicos y por ende sus enzimas. (Montoya, 2008)
Vapor a presin: es la forma ms prctica y segura para esterilizar porque
alcanza temperaturas muy altas en corto tiempo, adems hay penetracin
de la temperatura y humedad en abundancia que facilitan la coagulacin y
desnaturalizacin de las protenas. El aparato para esterilizar que utiliza
vapor de agua a presin regulada se denomina autoclave
mencionaba simplemente como

(antes se

olla a presin). En este proceso de

esterilizacin no es la temperatura o el vapor de agua o la presin en forma

independiente las que destruyen los microorganismos sino la alta
temperatura del vapor a presin. Este es el principio fsico para la
destruccin de microorganismos empleando la autoclave.
Se utiliza para la esterilizacin de ropa de ciruga, gasas, guantes,
instrumental, cortante, medios de cultivo solidos o lquidos, soluciones y
cultivos que se van a desechar. En condiciones normales la autoclave
funciona a: 121C a 15 lb de presin (1 atmosfera) por 15 minutos.
(Montoya, 2008).
III.3. DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
III.3.1. Medio de cultivo
Un material nutritivo preparado para el crecimiento de microorganismos en
un laboratorio se denomina medio de cultivo. Algunas bacterias pueden

crecer bien en casi cualquier medio de cultivo; otras requieren medios

especiales y otras no pueden crecer en ninguno de los medios inertes
existentes hasta ahora, Los microbios que se introducen en un medio de
cultivo para que comiencen a crecer se denominan inoculo. Los microbios
que crecen y se multiplican en un medio de cultivo se denominan cultivo,
(Case et al, 2007).
III.3.2. Preparacin de medio de cultivo
Segn (Gamboa et al, 2005). Para la preparacin de un medio de cultivo,
nos dice que:
Un medio de cultivo apropiado para el crecimiento de microorganismos
debe contener los nutrientes esenciales; por ejemplo, para el aislamiento
de bacterias la mayora de los medios son ricos en protenas o derivados
como proteasas, peptonas, pptidos o aminocidos. Tambin se incluye el
extracto de carne, que es un componente bsico de muchos medios,
adems de carbohidratos y sales minerales. Si se desea favorecer el
crecimiento de bacterias nutricionalmente exigentes, se puede enriquecer
con sangre, suero,

vitaminas e incluso algunos carbohidratos o

aminocidos especficos.
Los medios de cultivo solidos incluyen algn agente solidificante; el primero
que se utiliz en bacteriologa fue la gelatina; sin embargo, muchos
microorganismos la hidrolizan y a la temperatura de incubacin optima de
un buen nmero de bacterias (35C) se licua. El segundo agente
solidificante que se ha empleado es el agar, introducido por Robert Koch
(1843-1910) y todava hoy sigue siendo el agente solidificante ms
utilizado. El agar se obtiene a partir de algas marinas de la familia
Rhodophyceae, que se encuentran en el ocano Pacifico, Indico y Mar de
Japon, tiene caractersticas deseables como solubilidad en agua,
resistencia a la actividad de la mayora de los microorganismos, fusin a
98C y solidificacin entre 41 y 45C;tiene el inconveniente del precio
elevado, por lo que debe racionalizarse su uso.
La concentracin usual de agar en los medios de cultivo solidos es del
1.5% y en los medios semislidos de 0.3 a 0.5%. Ambos tipos de medios se

pueden disponer en tubos o en placas de Petri, aunque usualmente los

medios semislidos se colocan en tubos. Como el agar para movilidad.
Antes de 1930, la preparacin de los medios de cultivo inclua la
incorporacin y medicin de cada uno de los componentes del medio e
incluso la preparacin de algunos de ellos; por ejemplo, los extractos de
carne. En la actualidad, la preparacin de la mayora de los medios de uso
rutinario es un proceso mucho ms simple, debido a que estn disponibles
comercialmente en forma de polvos deshidratados completos y solo hay
que disolverlos en

la cantidad de agua indicada, ajustarles el pH,

distribuirlos en tubos y esterilizados.

III.4.

Clasificacin de los medios de cultivo

Segn Montoya, (2008), los medios de cultivo pueden clasificarse segn su
consistencia, origen, composicin y utilizacin.
Segn su consistencia: segn la consistencia los medios de cultivo se clasifican
en:
1. Lquidos: contienen los nutrientes antes citados, a los cuales se les adiciona
una sustancia capaz de mantener el Ph adecuado. Entre los ms
empleados estn: el caldo nutritivo y el caldo peptona.
2. Slidos: se obtienen agregando agar, sustancia polisacrida e inerte
obtenida de algas marinas del genero Gellidium, en una concentracin de
1.5 a 2.0%, a un medio liquido determinado. Este conjunto, debidamente
esterilizado, se vierte en una caja de Petri o en un tubo de ensayo. Las
exigencias nutritivas y las condiciones fisicoqumicas son similares a los de
los medios lquidos. Pero a diferencia de ellos, ofrecen la posibilidad de
obtener

colonias aisladas, siempre que la cantidad del inoculo este

suficientemente diluida. En este caso se observa la existencia de colonias

separadas unas de otras.
3. Semislidos: son muy semejantes a las medios slidos, con la diferencia
que a estos se les disminuye la concentracin del agar agregado a 0.5%.

Se utilizan para la conservacin de cepas bacterianas y la observacin y

registro de bacterias mviles,
Segn su origen: segn su origen, los medios de cultivo se dividen en medios
sintticos y medios naturales.
Los medios sintticos: o qumicamente definidos son medios compuestos
por productos qumicos conocidos y se usan para estudios metablicos.
Ejemplo: agar nutritivo, agar blando, caldo nutritivo, agar eosina azul de
metileno, etc.
Los medios naturales o qumicamente definidos: son aquellos medios
preparados a partir de sustancias naturales animales o vegetales, de
composicin no rigurosamente constante, Ejemplo: el suero, la leche, la
papa, etc.,
SEGN COMPOSICIN Y UTILIZACIN: Segn su composicin y utilizacin
los medios de cultivo se clasifican en simples, enriquecidos, selectivos,
diferenciales, de enriquecimiento, de recuento y de transporte.
Medios simples: Poseen los requisitos nutricionales mnimos para permitir
el desarrollo bacteriano en general. Ejemplos: agar nutritivo, caldo nutritivo,
entre otros.
Medios enriquecidos: son medios simples o comunes, a los que se aaden
ciertos componentes como sangre, suero, liquido asctico, huevo, glucosa,
vitaminas, entre otros, que permitan el aporte de factores de crecimiento o
sustancias que neutralizan agentes inhibidores del crecimiento en bacterias
exigentes nutricionalmente. Son diferentes para cada tipo de bacterias.
Ejemplo: agar, sangre, enriquecido con sangre; medio de Lowestein
Jennsen, enriquecido con huevo para facilitar el crecimiento de bacterias
del genero Mycobacterium; agar desoxicolato-lactosa (DLA), enriquecido
con lactosa y desoxicolato.

Medios selectivos: se consiguen aadiendo el agar nutritivo compuestos

qumicos nocivos para las bacterias cuyo crecimiento no interesa o tambin
alterando las condiciones fsicas del medio, El cristal violeta, por ejemplo,

impide el crecimiento de bacterias Gram negativas. Ejemplos: agar Mac

Conkey que contiene cristal violeta; Thayer-Martin selectivo para Neisseria
gonorrhoeae, porque posee antibiticos como vancomicina, colistina, y
nistatina; caldo lactosado bilis verde brillante (caldo brila), selecciona
bacterias del grupo coliforme, posee bilis que inhibe las Gram positivas y
lactosa que favorece el crecimiento de los coliformes; el DLA tambin
favorece el crecimiento de coliformes; medio de Lowestein Jennsen ms
cerdo de malaquita, selecciona Mycobacterium tuberculosis.

Medios diferenciales: a estos medios de cultivo se les adicionan sustancias

para que solo crezcan determinadas bacterias y estas, al actuar sobre
algunas

de

las

sustancias

adicionadas,

permiten

observar

macroscpicamente ciertas propiedades de crecimiento que ayudan a

diferenciar sus colonias de otras de especies diferentes.
Como medios diferenciales se utilizan: el agar eosina azul de metileno
(EMB), que diferencia colonias de Escherichia coli (color verde metlico
brillante), de las colonias de Enterobacter aerogenes (color rosado,
consistencia mucosa y crecimiento abundante); el DLA, que, diferencia las
colonias de coliformes (rojo oscuro) de las otras bacterias; el agar sangre
que diferencia variedades de Streptococcus pyogenes en Streptococcus hemoltico (produce una zona de hemolisis amplia que se visualiza como
un halo transparente alrededor de la colonia).entre otras.

Medios de enriquecimiento: medios lquidos que favorecen o permiten la

multiplicacin de bacterias cuando la muestra obtenida es muy pobre.
Ejemplos:

el

caldo

de

Thioglicolato

favorece

el

crecimiento

de

microaerofilas; los caldos de bilis y de Muller- Kauffman favorecen el

crecimiento del genero Salmonella; caldo o agua de peptona alcalina se
utiliza para el crecimiento de Vibrion cholerae

Medios de transporte: Se utilizan para asegurar la viabilidad de las

bacterias y evitar que se produzcan alterando el nmero de bacterias
iniciales, desde el momento de la toma de la muestra hasta su posterior
siembra en el laboratorio. Para evitar la reproduccin de las bacterias estos

medios no presentan nitrgeno, que es un elemento indispensable para la

divisin celular.
IV.
MATERIALES Y MTODOS
IV.1. MATERIALES
01 Matraz (de vidrio 250ml)
03 Placas Petri (de vidrio de 200x30 mm)
01 Pipeta (de vidrio 10 ml)
04 Tubos de ensayo (20x200 mm)
Asa de cultivo (0,1 x 135mm)

01 Papel craft
Tapones de algodn
Agar MacConkey
Agua destilada
IV.2.

EQUIPOS
Balanza analtica
Autoclave
Estufa elctrica
Incubadora
Agitador
Cmara de flujo laminar

IV.3.

MTODO
Aislamiento de cultivos puros por mtodos de siembra en placa

La manera ms fcil de obtener cultivos puros de los microorganismos que

forman

colonias directas sobre medios solidos (como, por ejemplo, la

mayora de las bacterias, levaduras, muchos hongos y la salgas

unicelulares) se lleva a cabo utilizando una de las modificaciones del
mtodo de siembra en placa. Este mtodo implica la separacin e
inmovilizacin de los organismos particulares sobre o dentro de un medio
nutritivo solidificado por agar o algn otro agente gelificante adecuado.
Cada organismo viable da origen, al multiplicarse, a una colonia de la cual
pueden hacerse transferencias fcilmente.

La siembra por estra es: en general, el mtodo ms til de sembrar

en placa. Un alambre con un aro en la punta (asa de cultivo) se
esteriliza e introduce en una suspensin, convenientemente diluida, de
organismos y se utiliza luego para hacer una serie de estrias paralelas,
no superpuestas, sobre una placa de agar previamente solidificada. El
inoculo se va diluyendo progresivamente con cada estra sucesiva, de
tal manera que si las estrias iniciales proporcionan un crecimiento
confluente, a lo largo de las ultimas estras se van desarrollando
colonias bien aisladas. Alternativamente, los aislamientos pueden
hacerse con placas sembradas por vertido, para lo cual sucesivas
diluciones del inoculo se van colocando en placas de Petri estriles y se
van mezclando con el medio de agar fundido, pero enfriado, que se deja
entonces

solidificar.

Las

colonias

subsiguientes

se

desarrollan

incorporadas del agar. (Ingraham et al, 1992).

V.

PROCEDIMIENTO
PREPARACIN DE LOS MATERIALES
Las 03 placas Petri, 04 tubos de ensayo, 01 matraz y 01 pipeta utilizadas fueron
lavadas antes de ser esterilizadas, luego pasaron a ser envueltas con papel
craft y aseguradas con cinta masket. Para evitar cualquier tipo de
contaminacin.
PREPARACIN DEL MEDIO DE CULTIVO
La elaboracin del medio de cultivo se realiz con el Agar MacConkey, se pes
5g en la balanza analtica y se disolvi con 100ml de agua destilada en el

matraz pero se utiliz el mechero de alcohol para la obtencin de una solucin

ms homognea,
Figura n 02: solucion de Agar MacConkey

Fuente: elaboracin propia

ESTERILIZACIN DEL MEDIO DE CULTIVO Y MATERIALES
Las 04 placas Petri, 04 tubos de ensayo, la pipeta y el matraz con el medio de
cultivo liquido se llevaron al autoclave para proceder con la esterilizacin; pero
antes se introdujo agua destilada hasta cubrir la resistencia del autoclave para
evitar el calentamiento de este; se introdujeron las 04 placas Petri, 04 tubos de
ensayo, la pipeta y solucin de Agar en la canastilla y se cerr el autoclave a
una temperatura de 115c y una presin de 1 atm. Y hasta que este alcance los
0.0025MPa despus de ello dejar enfriar los materiales y la solucin hasta que
puedan ser manipulados.
INOCULACIN DEL MEDIO DE CULTIVO
Una vez enfriados los materiales los desenvolvemos del papel manteca y
cuidadosamente vertimos

el medio de cultivo liquido por cada placa Petri,

esperamos a que estas se gelifiquen el proceso se realiz dentro de la cmara

de flujo laminar.
En los tubos de ensayo se colocaron 9ml de agua destilada a 03 tubos de
ensayo destilada utilizando la pipeta denominndolos A, B, Y C; al tubo A se le
aadi 1ml de la muestra, al tubo B se le aadi de la solucin de A 1ml y para
C se le aadi de la solucin de B 1ml.
Y Luego estas fueron llevadas a la cmara de flujo laminar para colocar con la
asa de cultivo a cada placa Petri un tipo de tubo de ensayo, pasando a cada
placa la muestra (AGUA DE CEBADA) en forma de estras.
INCUBACIN DEL MEDIO DE CULTIVO
Las placas Petri con las muestras A, B y C con medios de cultivo de agar de
MacConkey fueron llevados a la incubadora a 25C durante 3 das.
VI.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
VI.1. ESTERILIZACIN DE MATERIALES Y MEDIO DE CULTIVO
En la esterilizacin se hizo en la autoclave en donde se utiliz los siguientes
parmetros:
Tabla n02: medidas para la esterilizacin del medio de cultivo (Agar de MacConkey)
Tiemp
o
(minut

Temperat

Presin(a

os)

ura (C)

tm)

15

121

Fuente: elaboracin propia

Sin embargo, Sagardo y Mandolesi (2004), menciona que la esterilizacin del
medio de cultivo agar MacConkey se esteriliza al autoclave durante 15 minutos a
121C. Asimismo Mandolesi y Sagardo (2004), hacen referencia a que los medios
de cultivo deben estar libre de grmenes (estril) cuando se transfiere un
microorganismo al mismo. El mtodo normal para una inmediata esterilizacin de
un medio de cultivo, es el uso de la autoclave. Para cantidades de medio de cultivo

liquido de hasta un litro se recomienda una esterilizacin en autoclave de quince

minutos a una temperatura de 121C. Por lo tanto el procedimiento utilizado tiene
validez y en consecuencia aceptable,
VI.2.

DE LA PREPARACIN DEL MEDIO DE CULTIVO

En la preparacin del medio de cultivo utilizado Agar MacConkey el cual Se
solidifico despus de que fuera esterilizado y trasladado a la cmara de flujo
laminar. Y segn Gamboa et al (2005) el Agar de MacConkey contiene sales
biliares y cristal violeta, lo que permite que este medio de cultivo se torne de color
morado y el agar que contiene en un 1.5% permite que este se solidifique a
temperatura ambiente, Por lo tanto las pruebas realizadas tienen concordancia y
validez,

VI.3.

INCUBACIN DE MEDIO DE CULTIVO (Agar MacConkey) CON LA MUESTRA

(agua de cebada)
Tabla n03: preparacin de los medios de cultivos

Tubo de
ensayo
A
B
C

agua
medio de
muestra
destilada
A (ml)
cultivo
(ml)
(ml)
10^(
-1)
9
1
10^(
-2)
9
1
10^(
-3)
9
Fuente: elaboracin propia

B (ml)

En el proceso de incubacin, los resultados obtenidos fueron ms resaltantes en el

tubo A con una mayor cantidad de microorganismos de color moradas rojizas un
color tipo vino. Y en la B y C la cantidad de microorganismos. Gamboa et al (2005)
mencionan que las bacterias fermentadas de lactosa producen colonias que varan
en el tono: rojas, rojo fucsia o incoloro con el centro rosado, depende de la
cantidad de cido producido y las no fermentadoras de lactosa producen colonias
incoloras. En este caso, el medio adquiere un ligero tono amarillo, pues las
bacterias utilizan las peptonas y alcalinizan el medio de cultivo. Por lo tanto, los
resultados obtenidos estn dentro de lo establecido, pero an le falto ms

cantidad de microorganismos debido a la cantidad de muestra empleada o por que

se necesitaba un amuestra ms especfica,
Figura n03: medios de cultivo

Fuente: elaboracin propia

VII.
-

CONCLUSIONES
Se esterilizo los materiales de vidrio utilizados como tambin el medio de cultivo:
Agar de MacConkey todos estos con las mismas condiciones a 120C por 15
minutos a 1 atm. Por calor hmedo en la autoclave.

Se logr preparar los medios de cultivo con un peso de 5g en 100 ml de agua

destilada. Del cual ya solidificado y con la muestra de agua de cebada se logr
obtener microorganismos de color morado rojizo, pero con mayor cantidad en la
placa Petri A de las tres placas preparadas.

VIII.

BIBLIOGRAFA

Bailey & Scott. (2009), Diagnostico Microbiolgico. Buenos aires, Argentina: edit.
Medica panamericana.12va edicin.
Case, C. et al. (2007), Introduccin a la Microbiologa. Buenos Aires, Argentina:
Medica Panamericana.
Gamboa, M. et al. (2005), Bacteriologa general: principios y prcticas de laboratorio.
San Jos, Costa Rica: edit. Universidad de Costa Rica.
Ingraham, J. (1992), Microbiologia. Barcelona, Espaa:edit. Reverte S.A.2da edicin,
Koneman, E. et al. (2008), Diagnostico microbiolgico: texto y atlas en color. Buenos
aires, Argentina: Medica Panamericana. 6ta edicin.
Mandolesi, M. & Sagardo, M. (2004),Biologa del suelo: gua de estudio. Argentina:
Universidad Nacional del sur.
Mira, J. (1973), El diagnostico bioqumico de las mico bacterias. Colombia:
Universidad de Sevilla.
Montoya, H. (2008), Microbiologa bsica para el rea de la salud y afines. Colombia:
Universidad de Antioquia

IX.

ANEXOS

Tabla n 01: Lista de medios de cultivo

Medio

Objetivo principal

Agar bilis esculina

Aislamiento diferencial e identificacin

presuntiva de estreptococos del grupo d
y enterococos

Agar azida bilis

Selectivo y diferencial para el cultivo de

esculina

enterococos resistentes a la vancomicina

en muestras clnicas y de vigilancia
epidemiolgica.

Agar sangre

Cultivo de microorganismos con

requerimientos especiales de cultivo,
determinacion de reacciones

Agar de Bordet -

homoliticas.
Aislamiento de Bordetella pertussis

Gengou
Agar amortiguado

Enriquecimiento y seleccin de especies

con carbon y

de legionella

extracto de
levadura
Agar amortiguado

Enriquecimiento y seleccin de especies

con carbon y

de legionella

extracto de
levadura con
antibioticos.
Agar sangre Campy
Caldo tioglicolato

Selectivopara especies de Camylobacter

Medio de mantenimiento selectivo para

para

el aislamiento de especies de

Campylobacter
Medio con

Campylobacter
Medio selectivo para el aislamiento de

cefoperazone,

especies de Campylobacter

vancomicina y
anfotericina (CVA)
Agar

Selectivo para especies de Yersina;

cefsulodinairgasan

puede ser util para el aislamiento de

- novobiocina (CINI)

especies de Aeromonas

Agar Chocolate

Cultivo de especies de Haemophilus y

especies patogenas de Neisseira

Agar Columbia

Aislamiento selectivo de cocos

colistina-acido

grampositivos

nalidixico (CNA)
Agar sangre con

Aislamiento de c. Diphtheriae

cistina y telurito

Fuente: Bailey & Scott. (2009)