Integrantes:

Jimenez Arellanes, Diana Daniela

440101911
Ramirez Pedraza, Mara Fernanda
440102590
Snchez Colunga,Vasti Gisel
4400101924
Sauza Gonzalez,Victoria
440009484
Tolentino Moreno,Naara Asenaht 440099310

Nombre del trabajo: Investigacin- Tcnica histolgica

Fecha de entrega: jueves 20 de octubre

Carrera: medicina
Materia: biologa celular
Docente: Dr. Juan Carlos Segoviano Ramrez.

Fijacin:

Cuando los tejidos se retiran de un organismo, pueden sufrir autolisis

(autodigestin; realizado por enzimas intracelulares) e incluso puede sufrir de
putrefraccin (realizado por bacterias). Para mantener el tejido con sus
caractersticas morfolgicas y moleculares parecidas a las que se presentan en su
estado vivo, se requiere de un proceso llamado fijacin.
Existen dos tipos de fijacin: fsicos y qumicos. Los fijadores fsicos se usan para
congelar o para aplicar calor elevado a un tejido. Por otro lado, los fijadores
qumicos poseen molculas fijadoras las cuales crean puentes entre las molculas
del tejido que se quiere estudiar. Estos fijadores afectan qumica y fsicamente al
tejido; su resultado fsico es el endurecimiento del tejido. Existen mtodos de
fijacin con fijadores qumicos lquidos: inmersin y perfusin.

Inmersin: en este mtodo el tejido es sumergido en la solucin fijadora. Es

importante considerar lo siguiente:
o Las piezas del tejido no pueden ser mayores a 0.5 cm de ancho.
o El volumen del fijador debe de ser de 10 a 20 veces ms grande que
el de la pieza.
o La osmolaridad (nivel de concentracin) debe ser equilibrado.
Perfusin: en este mtodo el fijador es introducido al sistema circulatorio.

Los siguientes fijadores qumicos son los ms utilizados:

Etanol, metanol, acetona

Estos fijadores coagulan y deshidratan el tejido. El metanol, a diferencia
del etanol, no endurece en su mayora el tejido. Estos fijadores
preservan las protenas (enzimas, glucgeno y pigmentos). Sus efectos
son el endurecimiento y la retraccin del tejido.

cido actico
Este cambia el estado coloidal de las protenas. Su concentracin puede
ser de 1% hasta un 5%. Este fijador es utilizado principalmente para
cidos nucleicos y nucleoprotenas.

Cloruro o sulfato de zinc

Se utiliza junto con paraformalhedo al 4%; el cloruro de zinc fija y
mantiene la antigenecidad (el tejido actua como un antgeno).

cido pcrico
Las sales de tipo picrato realizan una coagulacin en las protenas del
tejido. Se usa del 2% hasta un 15% de una solucin saturada de cido
pcrico. Mantiene el glucgeno y los lpidos. Comnmente es usado con
el fijador Bouin al 4%.
El lquido Bouin, es una mezcla que contiene cido pcrico, formol (al
40%) y cetico glacial.

Formaldehdo
Este mtodo provoca la inactivacin de enzimas, de las cuales se
incluyen las enzimas hidrolticas. Se une a grupos amino, sulfidrilos,
guanidilos, grupos hidroxilo, alifticos, entre otros. Su concentracin es
de 4%.

Glutaraldehdo
Este mtodo fija las protenas, lo cual mantiene la estructura celular
estable. Se usa en un porcentaje de 0.5% a 3%.

Tetrxido de osmio

Es un fijador de membrana celular, el cual se usa en un porcentaje del

2%.
Biopsia:
Diseccin en zona abdominal:

Se inmoviliza sujetando las extremidades con alfileres de diseccin con la

parte ventral hacia arriba.
Para facilitar el corte, se humedece la piel en la regin abdominal con
alcohol 96%.
Se levanta la piel abdominal y se realiza una corte en la lnea medio-ventral
(desde los genitales hasta el hocico).
Se retira esta capa sujetndola con alfileres.
Se realiza otra incisin en la lnea media con las tijeras de punta roma sin
daar las vsceras.
Se sujetan ambos labios al lado con alfileres.

Diseccin en zona craneal:

Con la cara del ratn dorsal hacia arriba, se ha ce una incisin desde el
cuello hasta el hocico.
Se estira la piel y con el dedo pulgar y medio se sujeta para perforar el
hueso craneal.
Con las pinzas se rompe el techo del crneo hasta estar descubierto el
bulbo olfatorio, los hemisferios y parte del cerebelo.
Se extrae el cerebro.

Muestra de sangre:

Se pincha la aorta o una cavidad del corazn con una jeringuilla de insulina
.
Se extrae la sangre y se coloca en un portaobjetos.
Se hace un frotis de sangre.

Muestra de intestino grueso y delgado:

-

Fragmentos (2-3) de 1 cm3

Son depositados en casetes de inclusin e introducidos en lquido de Bouin
(24hrs)
Uno de los fragmentos se deposita sobre una gota de lquido fijador fro
(glutaraldehdo en tampn cacodilato a 4C) en la placa de cera y troceado
en fragmentos de 1 mm3 (10

Muestra de cerebro

se sumerge en un frasco con la solucin de formol al 10% (24 horas)

Tiempos de isquemia de los tejidos

Tras la extraccin, los rganos deben inevitablemente ser almacenados hasta su

trasplante en el receptor adecuado. Esto implica que sean necesarios mtodos
efectivos, seguros y fiables para preservar el rgano ex vivo hasta que se pueda
realizar el trasplante, o sea destinado para algn uso.
1 Corazn y pulmones: El tiempo de isquemia fra es de 4 6 horas.
2 Hgado: El tiempo de isquemia fra tolerable es de 12 24 horas.
3 Pncreas: El tiempo de isquemia fra del pncreas oscila entre 24 36
horas.
4 Intestino delgado: El tiempo de isquemia fra con solucin de preservacin
oscila entre 8 10 horas.
5 Riones: En los riones el tiempo de isquemia caliente oscila entre 20 y 30
minutos, aproximadamente. El tiempo de isquemia fra oscila entre 36 48
horas.

Cerebro: en pocos minutos se produce una prdida permanente de sus

funciones.
Piel: mucho ms resistente, tolera varias horas de isquemia.
La mayora de rganos pueden tolerar una isquemia caliente de 30-60
minutos sin una prdida completa de funcin.

Entre las consecuencias ms importantes de la isquemia, cabe destacar:

Prdida de la capacidad de control de la temperatura.
Deprivacin de los sustratos energticos para el rgano.
Alteracin del funcionamiento de las bombas inicas en la clula.
Tipos de tinciones para cada organelo:
La histoqumica es la aplicacin de reacciones qumicas y bioqumicas en la
tcnica histolgica, con el fin de localizar y determinar de manera cientfica ciertas
sustancias o su actividad.
Las tcnicas histoqumicas comprenden el conjunto de mtodos empleados para
la demostracin de la naturaleza qumica de los componentes tisulares y celulares,
a travs de reacciones qumicas y bioqumicas con el fin de localizar y determinar
ciertas sustancias o su actividad

Organelo
Ncleo

Tincin
Hematoxilina
Tincin de Feulgen

Retculo endoplsmico

Golgi
Lisosoma

Mitocondrias

Citoesqueleto

Bibliografa:

DNA
Tincin de Nissl
Corpsculos de Nissl
Ribosomas del RER
Violeta de cresilo
Tincin Pass
Glucoprotenas
Tinciones citoqumicas especficas para
hidrolass cidas
Rojo congo: amiloide
Ziehl-Neelsen: bacilos alcohol
cido-resistencia
Mucicarmn: mucinas cidas
Tincin Verde Jano/Janus
Citocromoxidasa

Fijadores (2016) Atlas de histologa vegetal y

http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/2-fijadores.php

animal.

En

lnea:

Actividades prcticas, tcnicas instrumentales bsicas, rea de biologa celular. En

lnea:https://digitum.um.es/xmlui/bitstream/10201/17491/1/ACTIVIDADES_PR
%C3%81CTICAS.pdf
Caractersticas
generales
de
las
mitocondrias.
lnea:http://mural.uv.es/monavi/disco/primero/biologia/Tema22

En

Histologa
y
citologa
lnea:http://www.fatedocencia.info/3003/3003.pdf

En

avanzada.

Coloraciones.Enlnea:http://cursosvirtuales.cfe.edu.uy/semipresencial/file.php/1/01/
Primero/8113Organizacion%20celular%20y
%20tisular/paginas/unidades/unidad_2/anexos/anexos21/anexosTema7/anexo1.pd
f
Beta-oxidacin en peroxisomas. En lnea:http://biomodel.uah.es/model2/lip/acgr-boxidacion-peroxi.htm
Teresa I.Fourtoul. Segunda edicin. Histologa y biologa celular.Cap. 2-3.

Alumna:
Tolentino Moreno,Naara Asenaht 440099310

Nombre del trabajo: Tarea- Repaso 2do parcial

Fecha de entrega: jueves 20 de octubre

Carrera: medicina
Materia: Salud Pblica
Docente: Dra. Silvia Gonzlez Esparza.