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digo: CAVRR APL-HEMO01 Revision 00 Fecha Eisin: 20.06.2011 PROCEDIMIENTOS TECNICOS AREA HEMATOLOGIA 2010 Etaboradopastamy Revisado por ‘Aprobado por: Director TM. Log ‘osag RY) Mat. P: 8: Complejo Asistencia! Dr. Revise p Ne | unidg i Calidad y ctor Rios Ruiz BO. Be Esl hae Seq} Po Pacientt ant sae Aprotlsjo einen cm Feclls, 9 Junison /, ~ BQ. Ligjano Rosales Re epee er DIR Fecha: $05,201 FIRMA: SS FIR Asisteneial \'esroec.c Dr, Vielo Rios Ruiz” Los Angeles Cig: CAVRR APL HEM.OOT Resin: 00, Fecha Emisién: 20052011 Indice Contador Hematolégico 1, Recuento Eritrocitario y hematocrito. 1, Hemoglobina I, Recuento Leucocitaio.....rerrstn IV. Recuento de plaquetas. V. Recuento de reticulocitos... Coagulometro Vi. Determinacién de fibrindgeno Vil. Tiempo de protrombina.. VIIL. Tiempo de tromboplastina parcial activada .. 1X Dimero D ( D- Dimero plus)... Técnicas manuales o semi-automatizadas IX. Test para lupus eritromatoso .. X. Test para mononucleosis infecciosa XL. Pruebas tificas XII. Tincién de May-Grunwald Giemsa Xill. Velocidad de Sedimentacion Eritrocitari Anexos Caracteristicas del funcionamiento y especificaciones del sistem Mensajes de alertas de los parémetros. Cont ios Revision N° Cambio Fecha | Aprobado por, M Centro de Costo Lavoratore Cnica CAVRR Rea Publica (42) 336085 Reg Hineal 436065, fisistencial "="... ei wt Meo ns Ruz Los Cbg: CAVRR-APLHEM-OOt Revistn: 00 Fecha Eisién: 2006.2011 |. RECUENTO ERITROCITARIO Y HEMATOCRITO (4 OBJETIVO Estandarizar la determinacion del nimero de glébulos rojos contenidos en una muestra de sangre y ‘1 volumen que ocupan los eritrocitos, expresados en porcentaje del volumen de sangre total cexistente en una muestra determinada, i 1.2 CAMPO DE APLICACION El siguiente procedimiento aplca al érea de hematologia, ‘ ! Los glébulos rojos son las células sanguineas que contnen en su inferior la hemoglobing, Los glébulos rojos son los principales portadores de oxigeno a las células y tejidos del cuerpo. | una forma bicdncava para adaptarse a una mayor superficie de intercambio de oxigeno por dibxido i J i ed } | ‘ de carbono en los tedos. Ademés su membrana es flexible lo que permite a los globules tpjos atravesar los mas estrechos capilares. t Los glébulos rojos se producen en la médula ésea, a partir de células madre que se multpican af 1 gran velocidad. ‘Se deben interpretar con otros parametros de la forma, aspectos y con los indices hemati (hemoglobina, hematocrto, VCM, HCM, CMHC) pero como generalidad: Valores disminuidos: © Alleraciones en a dieta a © Anemias de diversa indole + Cancer + Enfermedades sistémicas + Embarazo + Fallo en medua ésea ( Radiaciones, toxinas, ios, tumores) © Hemoragias es « Hemolisis Leucemia © Déficit alimentario erro. de Con abaator Cinco CANA Complejo fea musics cas) 3606s fed mines! 436065 Asistencial ==. Vict Ros Rue” Los Angeles Revisén: 00 Valores aumentados: + Cardiopatias © Enfermedades pulmonares crénicas i ‘© Estancias en lugares de gran atitud | ‘© Poliglobulia de diferentes causas i © Deshidratacion © Policitemia vera ‘Tras una centrifugacion de la sangre total se pueden apreciar dos niveles, uno con el depésito dp os j globules rojos, principalmente, y otro nivel del plasma total. La relacion porcentual entre ambos és lo | que describe el hematocrito y describe el porcentaje de células transportadoras de oxigeno ‘oon i respecto al volumen total de sangre. \ } 1.3 METODO RECOMENDADO \ ; Citomettia de fio y laser semiconductor. if 1.3.4 Fundamento W Los analizadores hematolégicos poseen 2 bafios, uno de eritrocitos y otro de leucocitos, en el band de eritrocitos se encuentra una apertura de 50 jm. En el bafio de los eritrocitos el sistema identifiga los eritocitos como aquellas particulas que poseen un volumen igual o mayor qué“%6 AL (femtolitro).Para la realizacién del histograma e interpretacién de los resultados el analizafor mantiene una estadistica de los volimenes celulares, y luego realiza una distribucién de cantilad relatva versus volumen de_ tres poblaciones (etitrocitos, plaquetas y leucocios) la separaciéh de 256 canales Numero Relativo woot of ae 2 29 mat 334 388TH pewcnocn Femtoliros Canal = ‘Vicor Roe Bo Lon Angles Cig: CAVRR-APLHEM-OOt 1 Fecha Emisién: 20.06.2017 peers (Codigo: CAVRR APL-HEM Ot Revisié: Fecha Emisin: 20.05 2011 volimenes se hace con una resolucion de 256 canales para cada parametro. preteen | i tn i i ji ‘Sarina de weet eortente 77 canes i ' ' Electrodo { Extemo i contenedoe supnsin Detalle dela, dermesta —f decéiulas Apertura j Sanguineas i Tubo de Apeitura ; - Apertura GALENicA AMATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS Recurso Humano: Profesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio Recursos Fisicos: Seccién hematologia Equipamiento: Meo ca CContro ce Costo Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea nies (43) 336065 insa scoes Asistencial ===. +; «-'Dt VielorRies Ruz’ Los Angeles (Gbciga: CAVRRAPL-HEM-0T Revisén: 00 Fecha Emison: 20.06.2011 1.4.4 Reactivos Cell-Dyn Ruby [ Solucién ~hemoglobina sin | Sal de amonio cuaternario <10% | canuro Sal de hidroxilemina <3% | Diluyenie envolvenie | Fosfato de sodio bibasico <0,05% i | Fosfato de potasio monobésico <0,03% i i EDTA dis6dico dihidratado | | Cloruro de sodio <1,0% | | Cloruro de potasio < 0,05% Agente benzoativo <0,002% | Conservantes <0,04% 142 Control interno — : Controles comerciales de muestras de sangre que vienen incluidas en el auloanalizagor | hematologic. Vf 1.4.3 Equipos a CELL DYN Ruby iy 15 DESARROLLO DEL PROCESO 1.5.1. Aspiracién de la muestra El sistema CELL-DYN Ruby uliiza dos modos de aspiracién de la muestra: + El modo abierto se utiiza para aspirar las muestras contenidas en un tubo de recogid: [a después de destaparto se sostiene debajo de la sonda de aspiracién en modo abierto. + EI modo cerrado se utiiza para mezclar y aspirar la sangre directamente desde un tubo recogida cerrado perforando el tapén del tubo. Una vez seleccionado el modo de aspiracién, la muestra de sangre es aspirada mediante la accién del vaciolpresién hacia la valvula de segmentacién. Un sensor ultras6nico, situado en la parte superior de la valvula de segmentacién, veriica el estado del flujo de la muestra antes de entrar en la valvula de segmentacién. Un sensor ultrastnico y un diodo emisor de luz (LED), situados en la Centro de Cos Labaatovo Cinco CAVE Complejo Rea rises (a) Saetes wDrei Red vince ascues “Asistencial “ss... 55 q/Dt Viele Rios Ruz’ Los Angeles Codigo: CAVRR-APL-HEM O01 Revisin: 00 Fecha Emisién: 20062011 parte inferior de la vélvula, comprueba que se haya transferido un volumen suficiente de muestra a través de la valvula de segmentacion. 7 ereimicne La muestra es aspirada y transferida a la valvula de segmentacién, tanto en el mado abierto como en el modo cerrado. | Alicuotas de la muestra: i La sangre aspirada es dividida en tres alicuotas mediante la rotacin de la valvula de segmentacién, Las tes alicuotas son: : j © 20p! para ta dilucién WBC (leucocitos) | ‘© 1,67 plpara la dilucién RBCIPLT (eritrocitos/plaquetas) i i © 12 para la dilucién HGB (hemoglobina) aol ! 1.5.2. Requerimientos de la muestra id 1.5.24 Seleccién y condiciones de la muestra y paciente if ‘Sangre venosa con EDTA. La estabilidad de la muestra es de 24 horas a 4°C (Tubo tapa lila) 1 ' 1.5.2.2. Recoleccién y bioseguridad de la toma de muestra i} * Tomar 2 mi de sangre venosa y verti sobre el anticoagulante (EDTA) limitando tai compresién venosa. ' Transportar la muestra a la Seccién de hematologia, 1.5.2.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra a) Ellaboralorio aceptara muestras con menos de seis horas de extraidas. b) Se rechazaran muestras que presenten coagulos. C) Muestras que no cumplan con el volumen necesario para mantener ta relacion con, el anticoagulante 15.2.4, Informe Expresar los resultados dados por el equipo para las muestras de sangre en cantidad de eritrocitos. Por pL y en porcentaje de eritrocitos en relacién al total de sangre, |, Cero. de Cos Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea rtes 25) 386008 re rns 3e0es ASistemelial v'rs:ctesmzces. Or Viet Rios Ruiz’ Los Angeles Cig: CAVRR- APL. HEM-001 Revisién: 00, Fecha Emison: 20.06.2011 15.2.5. Procedimiento a) La jeringa del diluyente/reactivo envolvente dispensa 2,79 ml de diluyente a trav de la valvula de segmentacion, de los cuales 1,67 JI se transfieren a la camara de mezcla parael anélsis de los ertrocitos. | 'b) Esta alicuota y el diluyente son dirigidos hacia la cémara de mezcla RBC/PLT, donde se 1 mezcla la dilucién. Finalmente, se obtiene una diluci6n 1:1675. i ©) La bomba de transferenciaconduce la cucién RBCIPLT de lacémara de. mena 2 f tobera de inyeccén de muestra dela ced de jo 6pica. d) El diluyente/reactivo envolvente, sometido a una presién constante en el depdsito, se transi ala oelda de fj dptica. €) La jeringa volumétrica dispensa secuencialmente 24 jl de la dilucion REC/PLT en la.celda de fujo con una presion (y velocidad) inferior ala del diuyentereactvo envoWvente. | f) Debido a que el reactivo envolvente, que rodea la dilucién RBCIPLT, fye a rfffor { velocidad y a la geometia especial de la cea de fio, las oéllas son enfocades individualmente en el fj de la diucién RBCIPLT para pemitr su recuento, m | 9) Se enfoca un rayo ser hacia ta celda de fyjo. A medida que el fyjo de muestra interaccjpna_{ con el rayo laser, el esparcimiento luminico se mide a 0°, 10° y 90° para los eritrocitos, y a i 0° y 10° para las plaquetas. ome one i { | 1.5.2.6. Medicién y recuento de los eritrocitos y las plaquetas (RBCIPLT) ty Para determinar los datos eritrocitarios y plaquetatios se utliza un canal éptico, Durante la aspiracién de la muestra, se separa una alicuota de 1,67 pl en la valvula de segmentaci6h para el andiisis RBC/PLT. La jeringa del divyenteleactivo envolvente dspensa 2,79 mi de dityente en la vélwlafe segmentacion. La muestra y el diluyente son dirigidos a la cdmara de mezcla RBCIPLT, sands dilucién es mezclada, dando lugar a una dilucion del 1:1675. La bomba de transferencia de muestra conduce la dilucién RBCIPLT de la cimara de mezcla p la tobera de inyeccién de muestra de la celda de flujo éptica, La jeringa volumétrica inyecta 24 yl de esta dilucién sobre la corriente del reactivo envolvente. A continuacién, se procede al enfdque hidrodinémico de la muestra, con objeto de alinear las células en una sola hilera, a su paso pay la celda de flujo Optica, que es una camara de cuarzo. La fuente luminosa es un rayo laser helioneén polarizado vertcalmente. Existen 256 canales medidores del tamafio para cada uno de los parémetros; cada canal de tamafio. “= de los eritrocitos equivale a 1 fly cada canal de tamaiio de las plaquetas a 0,137 Los pardmetros eritrocitarios se calculan utilizando los datos del sensor 0°, 10° y 90°, mientras que los parametros de las plaquetas se calculan utilzando los datos del sensor 0° 10°, Cento de Coste Laberatora Cinco CAVRR Complejo Rea monies 3) 336068 fea rns aseoes Asistencial ==>... «br Vitor Rios Ruiz’ Los Angeles Cbg: CAVRR.APL-HEM-O01 Revisin: 00 Fecha Emisin: 20.08.2011 Recuento RBC El recuento de eritrocitos se mide directamente y se expresa de la siguiente manera: 7 RBC = n° x 1026) | Todo recuento inferior a 1,0 x 10e6/ul se visualiza con tres cifras decimales. El recuento de fac es : corregido, segin la coincidencia y la interferencia WBC. j Mev : i | El volumen corpuscular medio es el volumen medio de todos los eritrocitos. Este parémetyo se obtiene a partir de los datos de la distribucién del tamafo de ls eritoctes en los hslogramdaem""") 410° y 90° y se expresa en femtoltros. HCT El hematocrito es la proporcién entre los eritroctos y el plasma y se expresa como el porcentaje del! volumen de sangre. El hematocrito se calcula a partir del recuento de eritrocitos y del volumen ! corpuscular medio mediante la ecuacién: — ig HCT = (RBC x MCV)/10. in MCH t La hemoglobina corpuscular media es la cantidad media de hemoglobina contenida en el eritrocitoty expresada en picogramos. Este parametro se calcula a partir de RBC y de HGB medisitile/la ecuacion: MCH = (HGBIRBC) x 10 j MCHC La concentracién de hemoglobina corpuscular es la relacién entre el peso de la hemoglobina y el volumen medio de los erirocitos y se expresa en gramos por deciiro. Este parametro se calcula partir de HGB y de HCT mediante la ecuacin: MCHC = (HGBIHCT) x 100 ROW La amplitud de distribucién de los eritrocitos representa una medida de la heterogeneidad de la Poblacién eritrocitaria. El sistema CELL-DYN Ruby expresa un valor relativo, equivalente al CV Centro de Casto Laberatori nico CAVRR Complejo Rea Padi (43) 336068 Red Wines 426065 Asistencial ==". “Br. Vitor Rios Raz’ Los Angeles CHCM = Concentracién de hemoglobina corpuscular media CHM = hemoglobina corpuscular media HCT = hematocrito EDTA = Sal tripotasica del acido etilendiamino tetra acético, es un anticoagulante. 17, INTERVALO DE REFERENCIA if Glébulos Rojos id Hombre: 45-60 106/u1 j Mujer 3,8-5,2x 106/p1 i Hematocrites 40-50% 18, OBSERVACIONES ) Cuando el equipo de aviso de RRBC pasar la muestra por ese modo b) Para limitar al maximo las posibilidades de error el equipo realizan los recuentos por dupa lo triplcado, se efectian dos o més lavados entre muestra y muestra afin de eliminar el arastre. 6) Partculas que midan 35 fo més son contadas como leucocios. Hay que hacer notarqueos niicleos de eriroblastos si existiesen también son contados, por lo que si el instrumento sefiala sospecha de su presencia se deben buscar en el frotisy de tener un nimero considerable, se debe corregir el recuento de leucocitos. 1.9. REFERENCIAS a) CELL DYN Ruby manual de operaciones 2006 'b) Osorio, G.: Hematologia: Técnicas y procedimientos de laboratorio. 1996. ) Gil, J: Hematologia sin microscopio: E! hemograma en la préctica clinica. Roche diagnostics. 2002 10 Centro 6e Coste Lavoratona Cinico CAVRR Complejo Rea Pies 3) 390085 fed Minel 26065 ES ASIST@MC HAL rratessreces.« eg eR Met Rls Ru Los Angeles (Cbdige: CAVAR.APL-HEM.001 Revisin: 00 Fecha Emsién: 2006.2011 (Coeficiente de variacién) en gramos por deciltro. Este parémetro se obtiene a partir del histograma de etrocitos utlizando percentiles de 20° y 80°, ~ 1.6. TERMINOLOGIA RBC = células rojas de la sangre Fl = unidad de medida para volumen VPM = unlumen enmnitenilar modin j (Cbdigo: CAVAR APL-HEM.01 Revision 0) Fecha Emisin: 20062011 I HEMOGLOBINA OBJETIVO i Estandarizar la determinacion de la cantidad de hemoglobina contenida en una muestra de Sanore | humana, { 1.2, CAMPO DE APLICACION El siguiente procedimiento aplica al area de hematologia. } La hemoglobina (Hb), es el transportador de oxigeno en la sangre. El papel funcional de la Hb es uni en forma reversible O2 molecular (O=0) a los hierros de cada heme en los pulmones y entregar | este O2 para consumo celular en la periferia. Una segunda tarea de la Hb es traer el CO2 desde bs | tejidos a los pulmones para su eliminacién, La determinacion de Hb se ulilza entonces, para calificar a un paciente esta normal, anémico poiicitémico. 13, METODO RECOMENDADO ; Sodium Lauryl Sulfate - hemoglobin ef |. Fundamento i El método de SLS-hemoglobina hace uso de las partes més buenas de dos métodos: el métodofde! ‘oxymemoglobin y el método del cyanmethemoglobin. | hnemogiobina. Las globinas de la molécula de hemoglobina son alleradas por el grupo del ra alcalino del sulfato lauryl de sodio. Esto induce la conversion de hemoglobina ferrosa al estado se {érrico que forma la metahemoglobina que se combina con sulfato de Lauryl de sodio para volerse SLS-Hb. La SLS-Hb se mide a 555 nm de longitud de onda 113.2, Reaccién GRR.+ Sulfoluser-SLE ———————> Iberacién de la hemoglobina lca: CARR PHO Fecha rai: 20062011 Hb (Fe+2) + grupo hidréfilo alcalino de! Sis —————> metahemogiobina (Fe+3) - SLS (mide a 585 nm) Gr re 114 MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS ' Recurso Humano: Profesional Tecndlago Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio ! Recursos Fisicos: Seccién hematologia | Equipamiento: | 11.4.1. Reactivos i [ Solucién” hemoglobina sin | Sal de amonio cuaternario <10% _ j | cianuro Sal de hidroxilemina <3% i j [Diluyente envolvente | Fosfalo de sodio dibasico <0,05% Hh | Fosfato de potasio monobasico <0,03% | | EDTA disédico dihidratado | Cloruro de sodio <1,0% Cloruro de potasio < 0,05% ‘Agente benzoativo <0,002% Conservantes <0,04% 1142. Control de calidad interno Contles comeriles de mussas de sangre que vienen includes en el autcenaizedor hematol6gico. _ 1143. Equipos CELL DYN Ruby 15 DESARROLLO DEL PROCESO 15.1. Requerimientos de la muestra 15.4.4. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente ‘Sangre venosa con EDTA. La estabilidad de la muestra es de 24 horas a 4°C. (Tubo tapa lita) 15.1.2. Recoleccién y bloseguridad de la toma de muestra a) Tomar 2 ml de sangre venosa y vertir sobre el anticoagulante (EDTA) limitando la compresién venosa. 12 Cerro d Covi tabeatro ines ANNA Complejo Rea pias (a) Saeaes fea nina cs “Asist ENGIal ocr. “Or sis st Ruiz’ Les Angeles (Gbcigo: CAVRR:APL-HEM-O01 Revision: 00 Fecha Emisin: 20062011 b) Transportar la muestra a la Seccién de hematologia, 1.5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra = os ) Ellaboratorio aceptara muestras con menos de seis horas de extraidas : j b) Se rechazaran muestras que presenten coagulos. | ©) Muestras que no cumplan con el volumen necesario para mantener la relacién jcon el | anticoagulante 4 i 118.44, Informe i Expresar los resultados dados por los equipos para muestras de sangre en mg/dl. ‘ 5 Procedimiento anseneel a) La jeringa del diluyentelreactiva envolvente dispensa 1,7 mi de diuyente a través be ta valvla de segmentacion, de los cuales 12 i se tansferen a la celda de fyjo pala el j analisis de la hemoglobina, b) La jeringa del reactive hemolizante HGB dispensa 0,9 ml de reactivo hemolzante al tubo, Una vez que el dluyente ha transferido la alicuota HGB a la celda de fluo de la hemoglobina, | conducto de entrada del reactio hemolzante HGB se encuenta ene la vali de | segmentacin y la celda de flujo HGB, 1, ) Esta aicuota, el reactive hemolizante y el diuyente son dirigidos hacia la celda de flujo HGB, donde se mezcla la dilucién. Finalmente, se obtiene una dilucién 1:218, 4) Un dodo LED dba potecia acopled ala celda de fjo HGB mide a absorbencia de ub 2555 nm. La absorbencia es proporcional a la concentracién de HGB de la muestra. .6 Medicién de la hemoglobina (HGB) “ a El canal HGB se utiliza para la determinacién colorimétrica de ta hemoglobina. Durante la aspiracin de la muestra, se separa una alicuota de 12 jl en la valvula de segmentation para el andiisis HGB. La jeringa del diuyente/reactivo envolvente dispensa 1,7 mia través de la valvula de segmentacign y transfiere la alicuota de hemoglobina a la cémara de mezcla para el analisis de la hemoglobina.\\a Jeringa del reactivo hemolizante HGB dispensa 0,9 ml de reactivo hemolizante en la cémara mezcla. La dilucién se mezcla dando como resultado una dilucion 1:218. El reactivo hemolizante “~.... HGB hemoliza los eritrocitos diluidos y convierte la hemoglobina liberada mediante un proceso quimico sin cianuro. Una vez finalizado el proceso de lisis, un diodo emisor de luz de baja potencia incluido en la celda de flujo de hemoglobina y conectado a la camara de mezcla, mide la absorbancia que es proporcional a la concentracién de hemoglobina. Se realizan cinco lecturas separadas de hemoglobina con la muestra, 13 Cento de Cost Laberatora Cinco CAVE Complejo Rea ruotes cas) a3c0es fea minal aa60es Asistencial “==. ‘Victor Rs Ru’ Los Angeles CChdigo: CAVRR.APL-HEM-00t Revisin: 00 Fecha Emisén: 20052011 Se elimina el valor minimo y maximo y se promedian las tres lecturas restantes para obtener el valor final de hemoglobina en la muestra. Después de realizar las lecturas de hemoglobina, la oelda de flyjo HGB se lava con diluyentefreactivo envolvente { A continuacién, se obtiene un valor de referencia usando el diuyente/reactivo envolvente en la celda de fiyjo HGB. Se obtiene entonces una lectura de cero o de blanco con el dilyente, que sive de referencia para ser comparada con la seftal de la muestra. Usando el dlluyente se oblienen cinco lecturas de blanco diferentes. Se elimina el valor minimo y maximo y se promedian los tres tepantes para oblene la lectura final de referencia de hemoglobina. Lafuente luminosa es un diodo emisor de luz con una longitud de onda de 855 nm. ; t Un detector fotométrico mide la luz transmitida, 1 Las lecturas de referencia y de la muestra se comparan entre si, para establecer la concentracion de hemoglobina en la muestra. El resultado de hemoglobina se expresa en gramos de hemoglobina por deciliro de sangre. Los resultados de hemoglobina inferiores a 10,0 g/dl pueden visualizarse a4 niimero maximo de dos decimales. i 15.1.7 Parametros de hemoglobina it La hemoglobina se mide drectamente y se expresa en gramos de hemoglobina por declito, de! sangre. ) 116, TERMINOLOGIA ie Hb = hemoglobina i Policitemia = hiperproduccién de globulos rojos : SLS = laurel sulfato de sodio 4 IL7. INTERVALO DE REFERENCIA Hombres: 13 mgidl Mujeres 42 mgidl 18, OBSERVACIONES En determinadas condiciones, como disproteinemia, alteraciones lipidicas, transtomos metabélicos 0%... estructurales que afecten a la membrana de las células, esta se hace resistente a la lsis producida Por los reactivos que el contador introduce para llevar a cabo su funcién, lo que resulta en una imposibiidad de una determinacién fiable 11.9, REFERENCIAS 4 ceric 6 Cost tabarato Cinco CAVA Complejo Sed Siss ca Saetes tea nost eves ASISteMC Hal wrists {Gr Vielor Ries Ruiz" Los Angeles eaeaan Cig: CAVRR-APLHEM-OOt Revisién: 00 Fecha Emision: 20.06.2011 CELL DYN Ruby manual de operaciones 2006 * Osorio, G.: Hematologia: Técnicas y procedimientos de laboratorio. 1996. eo * Gil J: Hemalolgia sin microscopio: EI hemograma en la pricca clniza. Roche diagnostics. 2002. | | + Mezzano, D. Fisiologia de la sangre, 1997, j | lll RECUENTO DE LEUCOCITOS i ILA, OBJETIVO \ i Estandarizar la determinacién del nimero de leucocios contenidos en una muestra de sangre y |! analisis diferencial de sus subpoblaciones (linfocitos, monocitos y granulocitos). i j 2, CAMPO DE APLICACION El siguiente procedimiento aplica al area de hematologia,Los leucocitos o gldbulos blancos son i ‘células que estan principalmente en la sangre y circulan por ella con la funcién de combatir las infecciones o cuerpos extrafos; pero en ocasiones pueden atacar los tejidos normales del propio ‘cuerpo. Es una parte de las defensas inmunitarias del cuerpo humano. 4 Se llaman glébulos blancos ya que éste color es el de su aspecto al microscopio. i? Hay diferentes grupos de glébulos blancos: los lamados polimorfonucleares (neutrfilos, eosindfilbs # los bas6filos) y los mononucleares (los linfocitos y los monocitos). i Elorigen de todas las formas de leucocitos es a partir de células madres de la médula dsea, ' La modificacién de la cantidad de leucocitos puede orientar al diagndstico de enfermedades infecciosas, inflamatorias, cancer y leucemias, y otros procesos. Por ello el recuento es.efty orientativo en diferentes enfermedades. Ademés el porcentaje de cada grupo de leucocitos fe ofreceré una mayor informacion para precisar un diagn6stico. { Cuando en la medicién de leucocitos se ven células jOvenes aparecen los neutrOfios en forma de nicleo en forma de bastén (cayados), y un aumento del porcentaje de los gldbulos blar polimorfonucleares, esto se denomina como desviacién ‘a la izquierda’. Este término sugit infecciones bacterianas agudas. Un nimero disminuido de leucocitos (leucopenia) pueden aparecer en ciertas enfermedades: * Fallo de la médula ésea (por tumores, fibrosis, intoxicacién, etc.) © Enfermedades autoinmunes (Lupus, etc.) © Enfermedades del higado o rifién ‘© Exposicién a radiaciones Cento 6 Casto Laberaterie Cinco CAVRR Complejo Rea niscs a3) 336008 feo Mines 4 ASISTOMCIAL “ro risiccroces.« Victor Rios Rui’ Los Angeles (Ctigo: CAVRR-APL-HEM-O0t Revisién: 00 Fecha Emisién: 20.06.2011 * Presencia de sustancias citotoxicas } Un niimero aumentado de leucocitos (leucocitosis) puede deberse a: Dafio de tejidos en quemaduras | ‘© Enfermedades infecciosas Enfermedades inflamatorias (por autoinmunidad-reuméticas 6 por alergia) \ © Estrés # Leucemia } La formula de leucocitos o leucocitaria mide el porcentaje presente de cada tipo de leucocitos en el total de glébulos blancos. Al ser un porcentaje al aumentar un grupo de leucocitos te | aunque en ocasiones solo exile un aumento o disminucién de un tipo concreto y por ello sjo el j porcentaje ofrece una valoracién orientativa pero se debe contar el nimero total de cada grupo para | saber cul es la variable a tomar en cuenta y estudiar. \ 13, METODO RECOMENDADO ‘ Citometria de flujo y laser semiconductor. 1.3.1. Fundamento " Los analzadores hematoligices poseen 2 bafos, uno de eitocias y otro de leuocios, en el bajo de leucocites se encuentra una apertura de 100 jm, eal En el bafio de leucocitos posterior a la dilucion con dituyente isotinico, se aplica agente io dl cual destruye la membrana citoplasmatica de leucocitos, permaneciendo los nucleos intactos dara Posteriormente hacer la diferenciacion de la subpoblaciones de los leucocitos. 1.3.2. Reaccion La muestra una ver tratada es dirigida a una celda de flujo (Flow cel) en la cual por Aisefo hidrodinémico, los leucocitos se alinean y pasan formados uno a uno y en donde se realizan las siguientes mediciones: Volumen, Conductividad y Scatter Volumen ‘* Mediante impedancia de baja frecuencia se determina el volumen de la célula 16 anoratrie Clnico CAVAR fs36065 ‘Asist aa Dr Victor Ros Cig: CAVRR APL HEM-001 Revision: 00, Fecha Emisién: 206.2011 ‘3Conductividad i { La conducvidad de ata recuencia de Raiorecuencia (RF) determina la conducvidad intemé dela | célula 4 ( Scatter La dispersion (scatter) de luz ldser indica la estructura y forma de ta célula if De esta manera son realizadas las 3 determinaciones de manera simultanea. Las lecturas de estas sefiales analogas son enviadas al analizador para su amplificacion y proceso, luego el sistema“... genera 3 graficos © DF1: Volumen vs. Scatter © DF2: Volumen vs, Conductividad ‘* DF3: Volumen vs, Conductividad extrayendo las sefiales de Neutrofilo y Eosinéfilos Centro oe Coste Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea rates a3) a2coes a piel Red mines! 36008 ASISR@MEI AE whstectocrcesa 45) Vitor Ris Ria Los Anges CCbdigo: CAVRR.APL HEMOOt Revisén: 00 Fecha isin: 2008.2011 DFA: Volumen vs. Scatter foe DF2: Volumen vs. Conductividad i i 7} | 1 | \ ¢DF3: Volumen vs. Conductividad extrayendo las sefiales de Neutréfilos y Eosindfilos” Cento se costo Laberaxane Cinco CAVRR Complejo Rea rustes cas) oss icles minal s360es PS ASISteMeial wr rssiccrcces. eid aint Vet Rios Ru Los Angeles (Cig: CAVRR APL-HEM-O01 Revisin: 00 Fecha Emisitn: 2006.2011 M.4, MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS: Recurso Humano: Profesional Tecnélogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio. a Recursos Fisicos: Seccién hematologia Equipamiento: | Reactive Hemolizante WBC | Oxialcohol aromético <1.00% : | Eter de Polioxiefileno < 1,00% 1 Diluyente envolvente Fosfato de sodio dibésico <0,05% 1 j Fosfato de potasio monobasico <0,03% i ! EDTA disédico diidratado | j i | Cloruro de sodio <1,0% ewe | Cloruro de potasio < 0,05% oy ‘Agente benzoativo <0,002% iol | Conservantes <0,04% ji j } 1.4.2, Control de calidad interno ‘ ’ Controles comerciales de muestras de sangre que vienen incuidas en el autoanalzador) hematologic. " ' 11.4.3. Equipos ' CELL DYN Ruby - “| 11.5. DESARROLLO DEL PROCESO. { 11.5.1. Requerimientos de la muestra 1.5.1.4. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente ‘Sangre venosa con EDTA. La estabilidad de la muestra es de 24 horas a 4°C.El Paciente debe ome en ayunas por lo menos 12 horas antes. L5.1.2, Recoleccién y bioseguridad de la toma de muestra a) Tomar 2 ml de sangre venosa y vertir sobre el anticoagulante (EDTA) limitando la compresién venosa. b) Transportar la muestra a la Secci6n de hematologia, Cento de Costa Labertoro Cini CAVRR Complejo ea ames (a 3308s eo nine aacoes ‘rt hoxptatonagees sp «Dt VietorRins Ruz’ Los Angeles (Codigo: CAVRR-APL-HEM-O01 Revisén: 00 Fecha Emisin: 20.06.2011 {I1.5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra El laboratorio aceptara muestras con menos de seis horas de extraldas. “ Se rechazarén muestras que presenten coagulos. Muestras que no cumplan con el volumen necesario para mantener la relacién con el anticoagulante 1.5.1.4, Informe i Expresar los resultados dados por el equipo para las muestras de sangre en cantidad de leucocitos por ply sus subpoblaciones en cantidad por ul y en porcentaje, UL5.1.5. Procedimiento Los leucocitos se analizan épticamente como sigue: a) b) 9) La jeringa del reactivo hemolizante WBC dispensa 0,973 mi de reactivo hemolizente a través de la valvula de segmentacién, de los cuales 20 yl se transfieren a la c&mara de mekcla 1 WBCicalefactor WOC. eo! Esta alicuota de la muestra y el reactivo son dirigidos hacia la cémara de mezela WBCicalefactor WOC, donde se mezcia la dilucién. Finalmente, se obtiene una dilucion de ; 1:50. La muestra diluida permanece en la cémara de mezcla durante 14 segundos para laj hemblisis de fos eritrocitos. i La bomba de transferencia de muestra conduce la dilucion WBC de la camara d8 mezclalcalefactor WOC a la tobera de inyeccién de muestra de la celda de flujo Optica. EI diuyentefteactivo envoWvente, sometido @ una presién constante en el depésto, ge transfiere a la celda de flujo Optica, wot La jeringa volumetrica dispensa secuencialmente 46,5 iil dela ditucion WBC en la celda flujo con una presién (y velocidad) inferior a la del diluyente/reactivo envolvente. Debido a que el reactivo envolvente, que rodea la ditucién WBC, fluye a mayor velocidad’ a la geometria especial de la celda de fiyjo, las células son enfocadas individuaimente dn el flujo de la dilucién WBC para permitir su recuento, Se enfoca un rayo léser hacia la celda de flyjo. A medida que el flujo de muestra interacc con el rayo léser, el esparcimiento luminico por las células es medida por cuatro detecto diferentes situados en los &ngulos de avance (0° y 10°) y laterales (90° y 90°0). Medicién de los leucocitos El canal dptico se usa para determinar el recuento de los leucocitos. Durante la aspiracién de ta muestra, se separa una alicuota de 20 pl en la valvula de segmentacién para el andlisis de los leucocitos. La jeringa WBC dispensa 0,973 ml de reactivo hemolizante WBC en la valvula de 20 Centro de Costo Laboratorio Ginica CAVRR Complejo Rea rabies (a3) 336088 Rea Minsa! 436065 Asistenclal =="... gf Vitor Ris Ruiz Los Argues (Codigo: CAVRR APL-HEM 001 Revisén: 00 Fecha Emisén: 20.06.2011 segmentacion. La muestra y el reactive hemolizante son dirigidos a la cémara de mezcla WBCicalefactor WOC, donde se mezcla la diluci6n, dando lugar a una dilucién 1:50. “ La bomba de transferencia de muestra conduce la dilucién WBC de la camara de mezcla ala'tobera de inyeccion de muestra de la celda de fiujo dptica. Simulténeamente, el reactivo envolvente, que se | encuentra a una presi6n constante en el depésito, es transferido a la tobera de inyeccién de reactivo | envolvente de la celda de flujo Optica y se inyecta en la célula, Paralelamente, la jeringa volumétrica inyecta 46,5 pl de la dilucin WBC en la corrente del reactivo envolvente. Luego, se procede al enfoque hidrodinamico de la muestra, con objeto de alinear las céluas en una sola hilera, a su paso, Bor la celda de fujo éptica, ue es una cémara de cuarzo. La fuente luminosa es un rayo laser de helio-neén polarizado verticalmente. : El analizador mide: | i | + Ambos tipos de esparcimiento luminico en el angulo de avance (de 1° a 3°, conocida’ enero ’,¥ 7° a 11°, conocida como 10° o éngulo estrecho). ' j inbos pos de esparcimientocrogonal lateral) (70° a 110°, conocida como $0", y 70° aj 110° despolarizada, conocida como 90°D). it ! Esta tecnologia se denomina MAPSS (que significa separacién mediante esparcimiento (scaler) ! tuminic polarizado en miliples angus). Para clasicr las subpoblacionesleucoitaias y obtener ! las alertas morfologicas se pueden combinar estas cuatro mediciones de forma diversa. \ { iy 1 Rayo laser enfocado 2. Esparcimiento (scatter) a0" 3. Esparcimiento {scatier)a 10° 4 Esparcimiento, (scatter) a 90° & Esparcimiento (scatter) a 90°D En la figura anterior se lustra la medicién del esparcimiento luminico durante el proceso de recuento 6plico de los leucocitos. El recuento leucocitario se establece enumerando los eventos situados por encima del umbral del canal 0°. La informacién de las cuatro mediciones sirve para separar los leucocilos en cinco subpoblaciones distntas: a Complejo ea roses as sncoas ="? VRE fea nina! 436065 Asistencial === 5 «xD Vielor Rios Ruz’ Los Angeles ‘Codigo: CAVRRAPL-HEM.O0t Revise: 00 Fecha Enis: 20082011 = Neutréfilos - = Linfocitos i ons = Monocit ! * Eosindtilos i = Baséfilos El recuento leucocitario se representa gréficamente como un diagrama de esparcimiento un histograma, i 1IL5.1.7. Reactivo WBC £1 reacivo WAC ullizado en el sistema CELL-DYN Ruby es el reactvo hemolzante WBC Gaeet"""t DYN. Este rescvo forma parte integral del andlsis WBC. Los leucoctosdiuides en el redctvo mantenen su integrided celular, précicamente como en su estado original. La estuctura dé los \ basOfils varialigeramente, debido a la naturaleza higroscépica de los grénulos basofi Este reactivo también altra la nalurleza de los efrocitas, Debido a que lapesién osmtica délos eritrecitos es mayor que la del reactvo, la hemoglobina de los eritrocitos se difunde hacia el exterior! de la célula y el agua del reactivo envolvente penetra dentro de ésta. La membrana celular se! mantiene intacta, pero el eritrocito posee, en ese momento, el mismo indice de refraccién qui react envohente, es decir, resulte visible para los rayos laser. 4.8. Formula leucocitaria La informacién sobre el esparcimiento (scatter) luminico se representa gréficamente en forma de diagrama de esparcimiento luminic. (Los dalos también pueden representarse como histogratia.) Cada célula analizada se representa mediante un punto en el diagrama de esparcimiento luminigo. Los puntos de! grafico son representados por la intersecci6n de los ejes X e Y con la informagia correspondiente de los canales. Por ejemplo, si una célula esté en el canal 50 en el eje X y ah el canal 50 en el eje Y, quedaré representada en el punto de interseccién de los dos canales. La informacion sobre el esparcimiento se puede representar de varias maneras disintas. El s CELL-DYN Ruby utiliza los diagramas de esparcimiento luminico para separar las subpobl. leucocitarias en cinco grupos diferentes: Basofilos ‘Monocitos 22 Com u “Asistencia “Be Vitor Rie Ru’ Los Argues Cbg: CAVRR APL HEM 001 Revision: 00, Fecha Emisién: 20.06.2011 IIL6. TERMINOLOGIA WBC = Células blancas de la sangre oo FLOW CELL = Celda de flujo. EDTA = Sal tripotasica del acido etilendiamino tetra acético, es un anticoagulante. IZ. INTERVALO DE REFERENCIA [Valores absolutos Porcentaje % i Leucocitos 45-110 . } | Neutrofilo [2500-8000 50-88. i i [Baciiformes 50-500 05 i Linfocitos: 7000-4000, 26-40 y Monocitos 100-700 28 eon Eosinafilos 50-500 14 1 Vf | Basofilos 50-100 of | ff IIL8, OBSERVACIONES A * ELEDTAen exceso en relacién ala muestra, puede allerar la morfologia leucocitaria, * En determinadas condiciones, como dlsproteinemia, alleraiones ipidicas transtoms metabdlicos 0 estructurales que afecten a la membrana de las células, esta se hace, resistente a fa lisis producida por los reactivos que el contador introduce para llevar a cabé su funcién, lo que resulta en una imposibilidad de un recuento fiable. -4 IIL9, REFERENCIAS * CELL DYN Ruby manual de procedimientos 2008, ‘* Osorio, G.: Hematologia: Técnicas y procedimientos de laboratorio, 1996. © Gil, J: Hematologia sin microscopio: £1 hemograma en ta practice clinica, Rdghe diagnostics, 2002 * http:shvww.qalenica,clhematologialprincipio couller.himl ~s + http svww.tuotromedico.com/temas/leucocitos.htm © http:/Awww.tuotromedico.com/temas/eucocitos.htm ‘+ htto/www.tuotromedico.com/temas/leucocitos.him + htts/www.qalenica,cl/hematologia/tecnologia-ves.himl. 2B Centr oe Coste Laboratorio Cio CAVAR Complejo Rea nustcs (a3) 336085 Asistencial “===. agg gue Meo Ros Rar Los anges (Cbdigo: CAVRR-APL-HEMO01 IV.RECUENTO DE PLAQUETAS: W.1, OBJETIVO Estandarizar le determinacion del namero de plaquetas contenidas en una muestra de sangre. 1V.2. CAMPO DE APLICACION i El siguiente procedimientoaplica al rea de hematologia.Las plaquelas son oélulas producidas por los megacariocitos en la médula ésea mediante el proceso de fragmentacion ciloplasmatica, ci por fa sangre y tiene un papel muy importante en la coagulacién. Para ello forman nudos en la red de fibrina, fiberan substancias importantes para acelet coagulacion y aumentan la retraccién del codgulo sanguineo. : En las heridas las plaquetas aceleran la coagulacion, y ademés al aglutinarse obstruyen pequafios vasos, y engendran substancias que los contraen U La disminucién en el nimero de plaquetas (por debajo del limite menor normal) se denomi trombocitopenia y el aumento en el nimero de las mismas (superior al limite nornal mas a llama trombocitosis. ‘Cuando existe una trombocitopenia aislada, la causa mas comin es la destruccién inmune, pert’ cexisten rombositopenias asociadas a un gran nimero de otras enfermedades como son: ' ¢ Coaguacién intravascular diseminada (C.1.0) : . i microangiopatica coal ! © Hiperesplenismo (exceso de funcién del bazo) ‘© Disminucién de la producci6n en el caso de anemia aplastica, ¢ Invasién de la médula ésea por enfermedades malignas como leucemias, neuroblastfa, linfoma. ‘© Quimioterapia por cancer \ ‘© Parpura trombocitopénica idiopdtica (PT!) = Leucenia ‘© Protesis de valvula coronaria Transfusion de sangre © Choque anafilactioo 24 sto Laboratorio Cinco CAVRR, Complejo Red ets (a aastes Ms REMEDY re sestcetsocescs Rios Ruz’ Los Angeles (Cbdiga: CAVRR APL -HEM.001 Revision: 00 Fecha Emisién: 2.082011 ‘* Algunas infecciones que producen hemorragias (pirpuras con trombocitopenia), en las que se hallan muy disminuidas, “ o La trmbocitsises el aumento en et recuento de plaques y puede ser secundario Las infecciones suelen ser la causa mas frecuente (vires, bacterianas o por micoplasma), pero existen muchas | otras enfermedades que se asocian a trombocitosis como son: j ‘© Anemia por défcit de hierro ' © Enfermedad de Kawasaki i i © Sindrome nefréico i ! © Sindrome post-esplenectomia (tras extraer el bazo) 4 © Traumatismos et * Tumores 4 * Trombocitosis primaria i ; 1.3, METODO t Citometria de flujo y laser semiconductor. i : 1V.3.1, Fundamento ; Los analizadores hematolégicos poseen 2 bafios, uno de eritrocitos y otro de leucocitos, en el bafio de eritocitos se encuentra una apertura de 60 um, en este mismo bao se realiza el recuento de plaquetas las cuales tienen un volumen entre 2 y 20 fL, en el cual si existe un recuento peqligiio fe plaquetas, el tiempo de recuento se extiende por 4 segundos més, a fin de tener un mayor ‘f estadistico. | Para la reaizacién del hislograma e interpretacién de los resultados el analizador mantene una estadistica de los vollmenes celulares, y luego realiza una distibucién de cantiad relava velkus Volumen de tes poblaciones (eritrocitos, plaquetas y leucocites) la separacion de volumenes hace con una resoluci6n de 256 canales para cada parametro. 7 cans Femtaiios centr de Coste Complejo Rea pisces) Saeaes ed mst s3coes Asistencial ===. = x:Dr-Vielor Rios Ruiz" Los Angeles Ci: cave AP HEN Revise: Foch Era: 2062011 1V.3.2, REACCION - | $ i : i i i | i of 1 i V.4. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS iy aj Recurso Humano: Profesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio “ Recursos Fisicos: Seccién hematologia ‘ Equipamiento: A Diluyente envolvente Fosfato de sodio dibasico <0,05% 4 | Fosfato de potasio monabésico <0,03% | EDTA disédico dinidratado I Cloruro de sodio <1,0% | Cloruro de potasio < 0,05% Agente benzoativo <0,002% Conservantes <0,04% , 1V.4.2. Control de calidad interno Controles comerciales de muestras de sangre que vienen incluidas en el autoanalizador hematol6gico. 26 Cento de Coste Laboratorio cinco CAVRR Complejo Rea Pisuea (43) 336065 Rea Mingal 496065 ‘Asist iste encial Som hommateeipeenct ‘De Vitr Ros Ruz Los Arges (Ceiga: CAVAR APL HEM 001 Revisin: 00 Fecha Emisitn: 200.2011 1V.43. Equipos CELL DYN Ruby IVS. DESARROLLO DEL PROCESO 1V.5.1. Requerimientos de la muestra j IV5.1.1. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente Sangre venosa con EDTA. La estabilidad de la muestra es de 24 horas a 4°C.El paciente debe estar i en ayunas poro menos 12 horas antes. 4 1V.5.1.2. Recoleccion y bioseguridad de la toma de muestra a) Tomar 2 mi de sangre venosa y vertir sobre el anticoagulante (EDTA) limitando la comprésién venosa. i i b) Transportar la muestra a la Seccion de hematologia. io} 1V.5.1.3. Criterio de aceptacion o rechazo de la muestra if a) El laboratorio aceptard muestras con menos de seis horas de extraidas, b) Se rechazarén muestras que presenten coagulos, iy ©) Muestras que no cumplan con el volumen necesatio para mantener la relacién con ell anticoagulante. ' 1V5.1.4. Informe Expresar los resultados dados por el equipo para las muestras de sangre en canlidad de aa por ul de sangre i 1V.5.1.5. Procedimiento | ‘© La jeringa del diuyente/reactivo envolvente dispensa 2,79 mi de diuyente a través vvalvula de segmentacion, de os cuales 1,67 ui se transfieren a la cAmara de mezcta parcel andlisis de los eritrocitos. + Esta alicuota y el diluyente son dirigidos hacia la cémara de mezcla RBCIPLT, donde se “>... ‘mezcla la dilucion. Finalmente, se obtiene una dilucién 1:1675. * La bomba de transferencia conduce la dilucién RBC/PLT de la camara de mezcla a la tobera de inyeccién de muestra de la celda de flujo dptica. ‘* El diluyente/reactivo envolvente, sometido a una presién constante en el depésito, se transfiere ala celda de flujo Optica a Centro de Casto Laporatore Clinica CAVRR Rea Publica (43) 336085 Reg minsal 436065 woreshosplallosangeles.ct, eg ght ee Ros Rua Los Angeles Cig: CAVRR-APLHEM.COt Revisén: 00, Fecha Emison: 20.06.2011 ‘ Lajeringa volumétrica dispensa secuencialmente 24 il de la dlucién RBCIPLT en la celda de flujo con una presién (y velocidad) inferior ala del diuyente/reactivo envolvente. © Debido a que el reactivo envolvente, que rodea la dilucién RBC/PLT, fluye a {mayor velocidad y a la geometria especial de la celda de flujo, las células son enfocadas individualmente en el flujo de la dilucién RBC/PLT para permitir su recuento. i * Se enfoca un rayo léser hacia la celda de flujo. A medida que el flujo de muestra interacciona Con e rao ser, el espaciient luminca se mide a 0°, 10° y 90° para os ertocos, ya 0° y 10° para las plaquetas. ie i 1V5.1.6, Parémetros plaquetarios : El ndimero de eventos en los que la diucon REC/PLT est entre los umbrales fuctuantes se icuye ood en los datos plquelaris (PL), ls cuales se oben uiizando ls sensores de O"y 10°. El uRtal”™" 7 inferior se encuentra entre 1 fly 3 fly el umbral superior entre 15 fly 35 fl. Si no hay suficientes foe para determinar el némero de plaquetas, los umbrales inferior y superior se ajustan a 2 fl y i respectivamente. Una vez ajustados estos umbrales, se estima el recuento de plaquetas a par fds i los datos de 10° : Los datos se pueden ver en dos formatos. Se pueden representar como un diagrama ide ! esparcimiento luminico (0°/10*) incluyendo los eritrocitos 0 como uno de los tres histograms ; siguientes: iy * PLT Gnicamente utiizando los datos de 10° = PLT y RBC utilizando los datos de 0° = PLT y RBC utlizando los datos de 10° é a En a siguiente figura se muestran los datos de las plaquetas en un histograma con los. caees i ig EI niimero de eventos que se encuentran en la regién por debajo del umbral arti n normalmente inlerferencias épticas © pequefias particulas en suspension. Los recuegtos Contabilizados en la region sobre el umbral superior se cuentan como eritrocitos. Si se prodycen demasiadas interferencias con cualquier regién del umbral por encima del limite predeterminadd| los. arémetros PLT aparecen sefializados con alertas, 1V5.1.7. Recuento de plaquetas El recuento de plaquetas se expresa como millares por microtro (10e3/pL). “ MPV El volumen plaquetario medio se deriva del histograma de las plaquetas, después de delerminar el Tecuento de plaquetas. Este pardmetro se expresa en femtoitros. PCT 28 Cerro de Cost abate Cinco CAVE Complejo Rea piss (a) Saetes Res rica aaeoes “Asistenclal "22. CChdigo: CAVRR.APLHEM.O0t Revisin: 00 Fecha Emisién: 20052011 El plaquetocrito es el producto de PLT y MPV (del recuento de plaquetas y volumen plaquetar medio) y tiene un significado analogo al hematocilo. Se expresa en porcentae y se calcula de la nn siguiente manera: PCT = (PLT x MPVVI0 POW La ampitud de ta dsttucién de las plaquetas representa una medida dela heterogeneidad de las plaquetas y se expresa como la desviacién estandar geométrica. 1V.6 TERMINOLOGIA LD. = Coagulacién intravascular diseminada. EDTA = Sal tripotasica del acido etilendiamino tetra acético, es un anticoagulante. wz. INTERVALO DE REFERENCIA 150.000 - 400.000 sl Va. OBSERVACIONES ‘* Sie recuento en el tiempo predefinido de lectura (4 segundos) es muy bajo, el analizad ‘cuenta por otros 4 segundos mas. ‘© EIEDTA en exceso con relacion a la muestra puede alterar la morfologia de las plaquetas. 1V8. REFERENCIAS ‘ http:/Avww.tuotromedico.comitem: ‘© CELL DYN Ruby manual de operaciones 2008 Osorio, G.: Hematologta: Técnicas y procedimientos de laboratorio, 1996. * Gil, J: Hematologia sin microscopio: E! hemograma en la préctica clinica. diagnostics. 2002 29 Complejo ““iAsistencial ad gig VEO Ris Rta Los Angels CCbdigo: CAVRR.APLHEMOOt Resin: 00 Fecha nisin: 2008.2011 V RECUENTO DE RETICULOCITOS V1. OBJETIVO Estandarizar la determinacién recuento de reticulocitos en frotis de sangre humana tefido con azul de cresil brilante. V.2. CAMPO DE APLICACION El siguiente procedimiento aplica al area de hematologia.Los retculocitos se definen como erifocitos transicionales, entre los ertrocitos nucleados y los eritrocitos maduros .A diferencia de los ertfocitos mars, los reeuleios contienen RNA ibesémizo. Este RNA se puede ver con alg coorante catiénico, que tie y precipita a la vez el polianion para formar una red o reticul. “ ne V.3 METODO RECOMENDADO 1 i Tincién con el reactivo azul cresil bitant. ‘eeeel V3.1. Fundamento i ' Los reticulocitos son células rojas jovenes no nucleadas, que contienen restos de ribosomas, RNA mensajero y otros organelas celulares. Cuando estos son tefiidos con azul cresil brilante, predpita | i ‘sobre estos organelos observandose una sustancia reticulada granulofilamentosa, V.3.2. Reaccién Reticulocitos + azul cresil brillante —-——-———> células con sust. Reticulada 4 V.4 MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS nN Recurso Humano: Profesional Tecnlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio Recursos Fisicos: Seccién hematologia Equipamiento: j V4. Reactivos i Azul de creel brilante en solucin fisilégica al 1% i V.4.2 Equipo | Microscopio \V.5. DESARROLLO DEL PROCESO V.5.1. Requerimientos de la muestra V5. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente ‘Sangre venosa con EDTA o sangre capilar. (Tubo tapa Lila) V.5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra a) Ellaboratorio aceptara muestras con menos de 6 horas de extraidas. 30 Centro de Coto Laboratorio Cinco CAVAR Complejo fea piss a3) S2coes fed mingal 436065 Asistencial ===... Dr Vietor Rios Ruz’ Los Angeles CChdigo: CAVRR-APLHEM-O01 Revision: 00 Fecta Emisin: 20052011 b) Muestras que no cumplan con el volumen necesario para mantener la relacién con el anticoagulante. 7 7 V5.4. Informe : Expresar los resultados en porcentaje, V.5.1.5. Procedimiento — 2 i © Usar 2 a 3 gotas del colorante y en igual cantidad sangre. Colocaria en tubo y mezclarta bien © Colocar el tubo a bafio maria 37° por 15 minutos ‘* Retirar del bafo y volver a mesclar. Hacer 1 0 2 extendidos i + Observar a microscopio contando 1000 células (entregar resultado a porcentaje) 31 Centro de Costo Laboratori Cinico CAVRR Complejo Rea rubies as) a3coes ASISt@MeIal *rristcsroees agg WOO Rls Rar Loe gees Cio: CAVRR APL HEM.CO1 Revisién: 00, Fecha Emisién: 20.06.2011 VI. DETERMINACION DE FIBRINOGENO- Vit OBJETIVO i foe va de fbrindgeno en el plasma, | Estandarizar la determinacién cuanti V2. CAMPO DE APLICACION EI siguiente procedimiento aplica al area de hematologia. { Un nivel disminuido de fibrindgeno se halla en a) Hipo-o afibrinogenemia adquirida Estados de deficiencia adquirida de fibrindgeno aparecen especialmente a consecuenci protedlsis intravascular del fibrindgeno por la trombina, por venenos de serpientes 0 por violet Ademés, pueden aperecer hipobrinogenemias moderadas por produccién disminuida, por pétdida en el espacio intravascular o por desintegracién aumentada (shock o en carcinomas). i | 1. En hipo- 0 afrinogenemias congénitas niveles elevados transitorios de fibrinogenemid se | encuentran en razén del comportamiento del fibrinogeno como ‘proteina de la fase aguda’; i 2 En hiperiinegenemias trensioias que pueden aparecer después de operaconts ‘ traumatismos, infartos cardiacos e infecciones. ud 3. En neoplasias y enfermedades inflamatorias crénicas en donde se pueden comprobae hiperfibinogenemias de larga duracién. : 4. Con el aumento de la edad se observan aumentos insignificantes del nivel de fibrinogenp. Los niveles elevados de fibrindgeno representan un factor de riesgo en las enfermeti cardiovasculares. | V3. METODO RECOMENDADO Método de Clauss VI3.4. Fundamento El plasma citratado se coagula con una cantidad excesiva de trombina, El tiempo de coagulacién depende aqui considerablemente de la concentracion de! fibrindgeno en la muestra, V13.2. Reaccion Plasma citratado + trombina ——————> coagulacion Centro de costo Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea pusies (a3) ae0es feo mnsol 36068 ASISTOMETAY ve tsestesemces. og aight Veo" Rs Ruz Los Angeles Cécigo: CAVRR-APLHEM-OD1 Revision: 09 Fecha Emisin: 20.08.2011 VL4, MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS Recurso Humano: Profesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio - Recursos Fisicos: Seccion hematologia i Equipamiento: VL4.1. Reactivos (Dade Behring) MULTIFIBRENU Trombinadebovino =—Ss—s=. sg Vitor Rios Rie" Los Angas Cig: CAVRR-APLHEM.O0t Revisi Fecha Ei: 2062011 ‘VIILS.1.3. Criterio de aceptacion o rechazo de la muestra 2) Ellaboratoro aceptara muestras con menos de una hora de extraidas, - = b) Se rechazaran muestras que presenten coagulos, y que no contengan el volumen necesario j de muestra. j ‘VULS5.1.4. Informe t Expresar los resultados dados por el equipo para las muestras de plasma en segundos VIILS.1.5. Procedimientos ‘+ Centrfugar inmediatamente por lo menos durante 15 minutos a 3000 r.p.m. ‘+ Con 100 ul de reactivo ACTIN FS y 100 ul de plasma se incuba durante 2 minutos a 37 ° © Se agrega 100 ul de cloruro de calcio a 37 °C. een ‘© Instrumento expresa el TTPK en seg. X16. TERMINOLOGIA iy Bidxido de silicio = actvador de superficie. EDTA = Sal tripotasica del acido etilendiamino tetra acético, es un anticoagulante. i X17. INTERVALO DE REFERENCIA Determinados por cada laboratorio: 22.1- 28.1 segundos 4 X18. OBSERVACIONES + Las muestras lipemicas o que tienen niveles de bilrrubina muy alta, pueden interfer ef a determinacién de punto final, con las técnicas automaticas, ‘* Una preactivacion de la muestra ocasionada por la toma de esta y reconocible pot la desviacion sistematica del rango de referencia, puede conducir a resultados falsos. X19. REFERENCIAS: a) Sysmex CA-1500 operator's manual 2002 b) Dade Behring REF: OQGS G29 E0541 (139) W. Edicion febrero de 2003, ©) Osorio, G.: Hematologia: Técnicas y procedimientos de laboratorio, 1996. Cerro Gxt taboratoro cinco CAVA Complejo ea noses (as) 336085 fea rina oes Asistencial “rr... 'Dr. Vier Rios Ruz" Los Angeles (Cbigo: CAVRR APL HEM-01 Rovsin: 00 Fecha Emisén: 20062011 DIMERO D ( D-DIMERO PLUS) Vill, OBJETIVO ~ Estandarizar la determinacién de Dimero D en plasmas humanos citratados i VIIl2, CAMPO DE APLICACION El siguiente procedimiento aplica al area de hematologia, £1 Dedmero de PLUS es un lest Inmunotridimein con particular intensiicador delle, para la determinacién cuantativa de los productos de degradacién de la malla de fibrina (dimero; D) en plasma humano ‘VUIL3, METODO RECOMENDADO D- dimero plus Vil3. Fundamento Las particulas de poliesterieno, a la que se ha unido de forma covalente un anticuerpo monoclonal! (005) contar las regiones entrecruzadas de los productos de degradacién de la malla de fibtina ; (dimero D), se aglutina cuando se mezclan con muestra que contiene dimero D. La regiénide / enlrecruzamiento tiene una estructura con una simetria de espejo (simetia radial), esto quiere dei ue el epitope para el anticuerpo monoclonal existe dos veces. Por lo tanto, se necesita solamente un anticuerpo para lograr una reaccién de aglutinacién, lo cual se puede termina turbimetricamente mediante el aumento de la turbidez VilL3.2, Reaccién A VIll4, MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS oe } j i Recurso Humano: Profesional Tecnélogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio Recursos Fisicos: Seccién hematologia Equipamiento: VIIL4.1. Reactivos Siemens © Dimero plus reagent + Dimero plus activado Preparacién del reactivo Dimero plus reagent disolver un frasco dimero plus reagent con 4 mL. de dimero plus reagent diluent y dejar en reposo durante 5 minutos a temperatura ambiente, mesctan esporédicamente por a Centro de Cost Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea rdnueace3) 33005 fed Minst 96065 Asistenclal “<><. Be Vitor Rios Rte Los Argues Cigo: CAVRR-APL-HEM-CO1 Revisén: 00 Fecha Emisn: 20.06.2011 inversién, Alicutar el reactivo 400 jl y congelar. Descongelar cada vez que se va usar y colocar el reactvo en una de las posiciones para el reactivo para el analizador de la coagulacion =~: ea Dimero d plus activador: Disolver un frasco con 5 mi de agua destilada, dejar en reposo durante 5 minutos a temperatura ambiente mezclando esporadicamente por inversién, alicutar en pocllo 400 LiL, descongelar cada vez que se necesita y colocarlo en fa posicién correspondiente en el analizador de la coagulacion, i Antes de usar mezclarto cuidadosamente { VIlL42. Control interno i Plasma control normal, VIIL43. Equipos ‘Sysmex CA-1500 VIIL5. DESARROLLO DEL PROCESO VIIL5.1. Requerimientos de la muestra (Tubo tapa celeste) VIILS.1.1. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente j Plasma, extraido con citrato de sodio, los otros anticoagulantes como; oxalato heparina, EDTA tei son aceptables, debido a que algunos factores de coagulacién son inestables con los! anticoagulantes anteriormente mencionados e inhiben directamente el proceso de coagutacién & interfieren con la determinaci6n de punto final. Su estabilidad en el plasma de los factores analizados son de hasta 14 dias entre 0-8°C VIIL5.1.2. Recoleccién y bloseguridad de la toma de muestra j ‘© La proporci6n de sangre anticoagulante es de 9:1 ‘© La puncién venosa debe ser alraumdtica, para preservar la integridad de los factores ‘coagulacién; debe evitarse e! sondeo, la aspiracién de burbujas de aire, la formacion de hematomas, la contaminacién con liquido tisular 0 la éxtasis venosa prolongada, la q ’ 74 puede activar el mecanismo de la coagutacién, alterando los resultados. ‘Las muestras deben ser transportadas a la seccién de Hematologia lo mas pronto posible y ser centrifugada dentro de los 60 min, Después de la extraccion VIIL5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra €) Ellaboratorio aceptara muestras con menos de una hora de extraidas. 42 Centro de Coto Lasratrie Cinco CAVRR Complejo ea rdscs (a5) 336088 fea rinca 3606 Asistencial ="... ss 2 gcOt Vietor Rios Ruz’ Los Angeles (Cbigo: CAVRR-APL-HEM.0t Revision: 00 Fecha Emistn: 20052011 @) Se rechazaran muestras que presenten coagulos, y que no contengan el volumen necesario de muestra, - ws VILS.1.4. Informe Expresar los resultados dados por el equipo para las muestras de plasma en segundos 4 i VIILS.1.5. Procedimientos. ; ' ‘© Centrifugar inmediatamente por lo menos durante 1 minutos a 3000 p.m. ‘© Colocar reactivos en el equipo X16. TERMINOLOGIA X17. INTERVALO DE REFERENCIA Determinados por cada laboratoro: 63-246 pgit. X18. OBSERVACIONES \ + Las muestras lipemicas 0 que tienen niveles de biirubina muy alta, pueden interfer en lay determinacién de punto final, con las técnicas aulomaticas. + Una preactvacién de la muestra ocasionada por la toma de esta y reconocble por desviacion sistematica del rango de referencia, puede conduc a resultados falsos. ' we } X19. REFERENCIAS | d) Sysmex CA-1500 operator's manual 2002 t e) Dade Behring REF: OQGS G29 E0541 (139) W. Edicién febrero de 2003. Osorio, G.: Hematologia: Técnicas y procedimientos de laboratorio he 43 Centro de Coste Laboratorio Cinco CAVAR Complejo Rea rivis 3) a0c00% fed nines! 436065 ASIST MEMAY ve resscatessnoces ff Vitor Ris Ruz Los Argues IX.TEST PARA LUPUS ERITEMATOSO 1X1. OBJETIVO (Cbdiga: CAVRR APL HEMO01 Revisién: 00 Fecha Emisitn: 20062011 a ee oa Estandarizar la deteccion presuntiva del lupus eritematoso sistémico (LES) en suero humano, detectando anticuerpos antinucleoproteina. 1X2. CAMPO DE APLICACION El siguiente procedimiento aplica al area de hematologia. Los anticuerpos demostrados son aquellos Girigidos contra las DNP, que son los mas frecuentes asociados al LES. Se piensa que estos ~anticuerpos son los causantes de la formacin en Vitro de las células LE; este fendmeno se unl 75- 80% de los pacientes diagnosticados de LES. i 1X3. METODO RECOMENDADO AVITEX-SLE prueba de létex. a 1 { 1X31. Fundamento i i Las particulas de latex del reactivo AVITEX_SLE, estén recubiertas con DNP. Cuando se mezcla la} suspension de particulas de latex y un suero con anticuerpos antinucleares se producen una if aglutinacion visible una vez transcurrido un minuto. di X32. Reaecion \ } yy ‘ Particulas de latex + suero (Ac.) ——— _ Ablutinacion 1X4. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS Recurso Humano: Profesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio. Recursos Fisicos: Seccién hematologia Equipamiento: IX.4.1. Reactivos (Omega Diagnostics) latex t—“‘i‘SOSOS™;~;C*@Y AVITEX-SLE ‘Suero Conte postive [Suero | Control negatvo 44 Contre de Costo Laboratorio Cinice CAVRR Red Pobtca (43) 336065 Red Minsal 436065 wore nospiallosangetes.ct, Complejo “iAsistencial Victor Ros Ruiz’ Los Angeles CChdiga: CAVRR APL. HEM-OOt Revisin: 00 Fecha nisin: 006.2011 1X.4.2. Control de calidad interno ‘Sueros control positivo y control negativo que viene incluido con el Kit. * 1X5, DESARROLO DEL PROCESO 1X51, Requerimientos de la muestra IX5.1.1. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente Suero mpi, e cul puede conservarse 2-20 °C hasta un maximo de 6 semanas, No liza sures hemolizados, contaminados o lipémicos. 1X5.1.2. Recoleccién y bioseguridad de la toma de muestra © Suero (tubo tapa roja) * Transportar la muestra a la Seccién de hematologia, 1X.5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra El aboratorio rechazara muestras hemolizadas y lipemicas. 1X5.1.4. Informe La presencia de aglutinacién evidente se interpreta como resultado positvo. Sino se observa ‘cambio en la suspensién de latex, el resultado seré negativo IX5.1.5. Procedimiento ‘Permit que los reactivos y muestras alcancen la temperatura ambiente. ‘Depositar una gota de suero en el circulo de fa porta, + Agitar la suspension de tex, Empleando el gotero, depositar sobre el crculo unaryslay fe reactivo. ‘© Mezclar las dos gotas con el agitador, cubriendo con la mezcla toda el drea del circuld De forma suave, rolar y balancear el porta durante 1 minuto, mientras observamos la aparfion de la aglutinacién. IX.6. TERMINOLOGIA LES = Lupus eritematoso sistémico DNP = Desoxiribonucleoproteinas LE= Células lupus eritematoso 45 centro de Coste Laboratorio Cinco CAVAR Complejo Rea Pubic (as) 36065 el hed tineat 3600s Asistencial ===—-.. “Dr. Vitor Rios Ruz’ Les Angeles (Cédigo: CAVRR-APL-HEM 001 Revisibn: 00 Fecha Emision: 20.06.2011 1X8. OBSERVACIONES a) El ensayo SLE es una ayuda importante para la deteccién de varias enfenffédades auloinmunes @ inflamatorias. Debemos tener en cuenta que no todos los' casos diagnosticados como LES proporcionan resultados positivos en esta prueba. | b) Aproximadamente un 1% de los individuos sanos pueden tener una reaccién SLE létex positiva. Esta proporcién es notablemente inferior a la encontrada con la técnica ANA aplicada a los mismos sueros (6%). ©) Pacientes con esclerodermia, artis reumatoide, dermatomiositis y una amplia gama de ‘trastomos del tejido conectivo pueden mostrar reaccién positiva a la prueba SLE latex. 4 d) Se han descrito casos en los que la utilizacién de farmacos tales como hidralgpineeee isocianida, procainamida y ciertos anticonvulsionantes pueden inducir un sindrome Les! i | { ' } Xo. REFERENCIAS } Omega Diagnostics REF: 8028 46 Centro de Costo Laboratorio tinica CAVRR Complejo Reardon gan s3c088 ea in aacoss Asistencial “=~. ‘Or. Veter Rios Ruiz"Los Angeles t (Cbdigo: CAVAR-APL-HEM-001 Revisién: 00 Fecha Emisin: 20 052011 X.TEST PARA MONONUCLEOSIS INFECCIOSA : wo X1, OBJETIVO Estandarizar la deteccién de anticuerpos heterofilos de mononucleosis infecciosa, preserites en ‘suero humano, i X.2. CAMPO DE APLICACION 1 El siguiente procedimiento aplica al area de hematologia.Con esta prueba pueden detectarse anticuerpos heterofios a los 5 a 10 dias después de la apariencia de los primeros sintomas clinjcos cde mononucleosis infeccioso. La prueba es muy espectfica diferenciando entre los mononucleosis infecciosos y las enfermedades infecciosas como influenza, rubeola, o hepatitis. En la maya et ‘casos, los anticuerpos son normalmente demostrables durante por lo menos 8 a 10 semanas. Nb t hay ninguna coelacn ene nivel de actiidad del anieverg ye severdad de la enfermedad, 0 : el grado de linfocitosis, X.3, METODO RECOMENDADO Cellognost® Mononucleosis. X.3.4. Fundamento 1 Silos anticuerpos helerofios tipicos de mononucleosis infeccioso estan presentes ellos reaccionany con efitrocitos de caballo pre-tratado, asi producen aglutinacién visible. Si no estan presentes tdl anticuerpo la suspension permanecera homogénea, 4 ‘Muestra (Tubo de tapa roja) eo) X3.2. Reaccion Ac. + Eritrocitos de caballo © —————> __Aglutinacion X.4, MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS Recurso Humai *rofesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio Recursos Fisicos: Seccién hematologia Equipamiento: ss X.4.1, Reactivos (Dialab) | Celiognost® Mononucleosis a7 Centra de Coo Laboratorio Cinco CAVER Complejo Sea isis a5) S3c0es fea tinal 43coes RENAE me hssrossencs Los Angeles CCidigo: CAVRR APL HEM-OOt Reva: 00 Fecha Emision: 20052011 Control positive "J Suero- dé origenhumano especiico para} mononucleosis infecciosa. 7 Ca ' Control negativo Oo ‘Fragmento de suero animal { X.5, DESARROLLO DEL PROCESO X.5.1. Requerimientos de la muestra : 4 X.5.1.4. — Seleccién y condiciones de la muestra y paciente : ! Suero limpio, el cual puede conservarse a -20 °C hasta un maximo de 6 semanas. No uliizar queros hemolizados, contaminados o lipémicos. ° ; X.5.1.2.Recolecci6n y bioseguridad de la toma de muestra A a) Obtener una muestra de sangre venosa, permitiendo la formaci6n y retraccion del coagulo. b) Transportar la muestra a la Seccién de hematologia. A X.5.4.3. Criterlo de aceptacion o rechazo de la muestra vf El laboratorio rechazara muestras hemolizadas y lipemicas i : 5.1.4. Informe ij La presencia de aglutinacién evidente se interpreta como resultado positivo. Si no se beer Cambio en la suspensién de latex, el resultado serd negativo. XS.15, — Procedimiento . a) evar el suero y reacivos para lograr temperatura ambiente (+15 a +25 °C). agla(el ‘eactivo para mononucleosis infecciosa. Suavemente para asegurar la suspensién completa de eritocios antes del uso. ] 5) Ponga 1 gota de suspension de eto en cada cuarado de a aota de pruca. | ¢) Agregue 1 gota de muestra de suero (aprox. 35 pi) y 1 gota de suero control positive | el suero control negativo, 4) Mezcle a ambas gotas de reactvo y suero formando una mancha oval y incinar la tata. durante 2:min, @) Deje la tarjeta durante 1 min. En posicién horizontal, entonces examine si existe aglutinacién, comparando la reaccién con los controles. Sila aglutinacién aparece mas tarde no debe evaluarse. 48 Contre de Costo Laboratorio Geico CAVRR Complejo Rea Pada (a3) 336088 fea Minet 435005 TT ASISt@MeH al Pctosrces< + Vieor Rios Ruz Los Angas CCbdiga: CAVRR APL.HEM.OOt Revisién: 00 Fecha Emisién: 20.06.2011 X.9. REFERENCIAS Dade Behring Ref. OSMA G11 E0631 (0272) H 1 edicion febrero de 1999 a Xl, PRUEBAS TIFICAS | XIA. OBJETIVO i Estandarizar la deteccién de anticuerpos febies. X12. CAMPO DE APLICACION El siguiente procedimiento aplica al rea de hematologia. El diagnéstico de una infeccion por! : bacterias se realiza a través del aislamiento de la bacteria en sangre, heces, orina, aspirado de, médula 6sea y bilis. Estas pruebas tardan dos a tres dias en aportar los resultados, pues la mi se diluye en un medio de cultivo y, dado que se estima que un paciente con fiebre lifoidea presefita, por ejemplo, 20 bacterias o menos por ml de sangre, se requiere esperar a que se mullipique lo, suficiente para ser observada por turbidez del medio. Pruebas bioquimicasy seol6gicas se realizan para conimar el diagnéstco E serdiagnéstco de la ifecion por S. typhi, usando el ensayo de agluinacién Bacteco. El Bactacol es una prucha)de diagnostico répida que asegura confianza al usuario, para iniciar el tratamiento antimicrobiand lo) ‘mas pronto posible. i i X13, METODO RECOMENDADO- j Immuno’ Bactacol febrile Antigens. X13, Fundamento E_ principio dela prueba es una reaccién del inmunolgica entre los anticuerpos producidos porflas bacterias viables y su correspondientes antigenos febrile. X1.3.2. Reaccion Anlicuerpos + antigenos febriles —————» _aglutinacion Ac - Ag 49 Cento de Coste Laberstora Cinco cavRR Complejo Rea ramies (a) 336088 fee nna 26068 ASIST@MEHAL wr restctesroces.< ge Vitor Ris Ria"Los Argues (Chigo: CAVRR-APLHEM-001 Revision: 00 Fecha Emisin: 20.06 2011 X14. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS Recurso Humano: Profesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio“ Recursos Fisicos: Seccién hematologia Equipamiento: | ween XL44 Reactivos (Merck) Anligenos febriles de opci6n ] L : _ : rucella ‘Abortus, Suis y Melitensis, | Paratiphi : [A,B,C (sométicos) | Paaighi (ABC. WoniH fags) Proteus: ‘OX2, Ox19 y OXK. Typhi ~~ | 0, typhi vi . X14.2. Control de calidad interno ‘Suero de control negativo y positive includo en el Kit X15, DESARROLLO DEL PROCESO XI 4, Requerimientos de la muestra XI.5.1.1, Seleccién y condiciones de la muestra y paciente 4 ‘Suero limpio, el cual puede conservarse a -20 °C hasta un maximo de 6 semanas. No ullizar sues hemolizados, contaminados o lipémicos.( Tubo tapa roja) X15.1.2, Recoleccién y bioseguridad de la toma de muestra 4) Obtener una muestra de sangre venosa, permitiendo la formacin y retraccién del codgu b) Transportar la muestra a la Seoci6n de Hematologia. X1.5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra ~ El aboratorio rechazara muestras hemolizadas y lipemicas. X15.1.4. Informe La presencia de aglutinacién evidente se interpreta como resultado positive. Si no se observa ‘cambio en la suspension de latex, el resultado sera negativo. 50 ‘Cento.d¢ Coste Laberatone Cinco CAVRR, Complejo Rea ristes a3) 336008 fi i Red Minsal 436065 iAsistemcial ss ‘Vitor Ris Ruz Los Angeles (Céaigo: CAVRR-APLHEM.O0t Resin: 00 Fecha Emisién: 2005.2011 X1.5.1.5, Procedimiento a) Sacar antigenos y suero para que alcancen temperatura ambiente. “ peweow 'b) Utilizar las tarjetas incluidas en el Kit para observar mejor el color de la reaccién. 1 ¢) Usando una pipeta conveniente, agregue las cantidades siguientes del suero de la izquierda hacia derecha usando los cuadrados 0 anillos consecutivos: .08 ml, .04ml, .02ml, ot ml y OSml. Repita este procedimiento con los controles positivo y negativo. d) Agite el reactivo del antigeno para asegurar suspension uniforme. i €) Agregue una gota del reactivo del antigeno sblo debajo de cada cantidad de suero. j j 1) Mezcte el suero y antigeno utiizando un aplicador. Cada mezcla debe formar una aipa de j aproximadamente 1 pulgada. — 9) Suavemente mueva la tarjeta de un lado a otro durante un minuto. ‘ ' h) Presencia de aglutinacién se informa positivo, haciendo la siguiente dilucion id i ' t X16. TERMINOLOGIA Ac ‘Ag = antigenos comerciales de la bacteria correspondiente. inticuerpos presentes en el suero del paciente. X18, OBSERVACIONES €) Aunque la prueba en tarjeta no se recomienda para establecer titulo la cantidad de sueyo que da 50% la aglutinacién puede usarse para establecer el ftulo aproximado del suero:” | b) Los antigenos son estables tres aos a 4°C. X19, REFERENCIAS: a) Immunostics, inc. PS-196 Rev. 02 06/01. b)_http:/biblioweb.dqsca.unam mx/libros/microbios/Cap4/ 1 j } i j | 51 Centro de Cost Laboraterio Cinco CAVRR Complejo Rea rubies a3) a3eoes fed minal 360s Asistencial “=="--« sg Vitor Rios Ru Los Angetes u Cig: CAVRR-APLHEM-001 Revisén: 00 Fecha Emisén: 20.06.2011 Xl. TINCION DE MAY-GRUNWALD GIEMSA Xi, OBJETIVO " ~~ Estandarizar la tincién que se realiza a frolis de sangré, frotis de médula ésea, secrecion nasal u otros para tefir las células. i XIL2. CAMPO DE APLICACION i ! El siguiente procedimiento aplica al area de hematologia Se usa para tefir céulas sanguineas u Ota cone nde reatzar el reevento erence, Se usa como nica de una enol hemograma ‘como en el mielograma, Enla sere roja se liza esta tncién para verficarlacorelacin entre ls indices o constants y el aspecto de los glébulos rojos en el frotis. La CHCM disminuida se acompatiara siempre de franca} hipocromia en el frois. : fi EI VCM disminuido no siempre es posible apreciarto como microcitosis en el fois. Los hallazgos | morfolégicos en frotis sanguineos tefidos con MGG todavia juegan un papel importante fa } i diagnéstico de las anemias, facilitando conclusiones esenciales y orientadoras. : En la serie blanca se realiza la formula leucocitaria y la observacién de alleraciones cualitativas y | cuantitativas. XiL3. METODO RECOMENDADO Tincién May-Grunwald Giemsa, XIL3.1. Fundamento z Se ullizan dos coloranes: el May-grunwald, ue contiene alcohol metlico el cual fala muesta or preciptacién de prteinas, ademés este colorante es de cardcter aco por lo tanto tite el itoplagina de los leucocitos, los ertrocitos y plaquetas que son acidéfios. { El colorante Giemsa, es de cardcter basico y tie nicleos, cromatina y grénulos aztirofios dq las plaquetas. XIL3.2. REACCION « MG + — Sustancias acidéfilas ——————» colorrojo Giemsa+ Sustancias basoflas ———————» color azul 52 centro de Costo Laboratorio Giico CAVRR Complejo fea rote cs) eats fea nates ‘Asistencial ===. Vielo Rios Ruz’ Los Angeles Cig: CAVRR APL HEM.COt Revisién: 00 Fecha Emision: 20082011 Xil.4. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS Recurso Humano: Profesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio ™. Recursos Fisicos: Seccidn hematologia i Equipamiento: | XIL4, Reactivos | Reactivo 1 Buffer fostato pH64-68 i | Reaclivo 2 | colorante | | | May-Grunwald | i | 4 | Reactivo 3 Colorante ‘| j Giemsa ‘ XIL5. DESARROLLO DEL PROCESO / XIL5.1. REQUERIMIENTOS DE LA MUESTRA xis. |. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente . od ‘Sangre venosa con EDTA o sangre capilar. La estabilidad de la muestra es de 24 horas a 4°C. { El paciente debe estar en ayunas por lo menos 12 horas antes. (Tubo tapa lila) XIL5.1.2. Recoleccién y bioseguridad de la toma de muestra a) Se utiliza 1 mg de EDTA por ml de sangre, concentraciones superiores de EDTA pueden alferar la morfologia celular. b) Lamuestra debe ser trasladadas a la Seccién de Hematologia. XIL5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra a) Ellaboratorio aveptara muestras con menos de 6 horas de extraidas. b) Muestras que no cumplan con el volumen necesario para mantener la relacion con el anticoagulante. 53 Centro de Coste Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea Puotes (a3) aseoss “Asistencial = {Gr Vilor Rios Ruz" Los Angeles Codigo: CAVRR-APL HEM.0Ot Revisién: 00 Fecha Emisén: 205.2011 XIL5.14, Informe Expresar los resultados en; la formula diferencial en porcentaje, morfologia de los efftoctos, gsi cantidad de plaquetas en cruces. 7 } 1 i XIL5.1.5. Procedimiento j 2) Preparacién de la solucién Giemsa a partir de la solucion madre: | Solucién madre de Giemsa f25mL | solucién de Buffer (o H2O neutra) 100 mL \ )_ Se cubre el rolis con May-Grunwald y se deja actuar por 3 minutos ©) Seagyegeun lumen gal ator, de soln bry dja seterpr minuto 4) Seeeliina el colorantey se enjuaga con agua i €) Se cubre con la soluciénrecién preparada de Giemsa y se deja actuar durante 15 mind i f) Finalmente se enjuaga con agua y se deja secar al aire, inclinando la lamina para que / escurra el agua. Limpiar el portacbjetos por el reverso. XII. TERMINOLOGIA CHCM = Concentracion de hemoglobina corpuscular media HH VCM = Volumen corpuscular medio : BUFFER FOSFATO = Constituido por: + Fosfato de potasio monobésico (KH2PO4) 663g . 4 + Fosfato de sodio dibasico (Na2HPO4) 329 | Agua destilada c.s.p. 1.000 mL { (H=68) | XIL8. OBSERVACIONES a) Si la muestra es sangre capilar se debe realizar el frolis de inmedialo antes de que coagule la sangre. b) Sila muestra es obtenida con anticoagulante EDTA debe ser realizado el frois antes de 5 horas ya que se puede ver alterada la morfologia de las células. ¢) Los frotis se deben dejar secar antes de tefir, XIL9, REFERENCIAS Osorio, G.: Hematologia: Técnicas y procedimientos de laboratorio, 1996. Centro de Costa Laboratoric Cinco CAVRR Complejo Sedniocs a) Saebes rina 308 Asistencial ~~ s-« eg gieh Mta Rs Rue Lov Angles (Codigo: CAVRR APL HEM-01 Revision: 00 Fecha Emisin: 2006.2011 Xill, VELOCIDAD DE SEDIMENTACION ERITROCITARIA XIIL1. OBJETIVO % pai Estandarizar la determinacidn de velocidad de sedimentacién eritrocitaria. il ] i XIIL.2. CAMPO DE APLICACION { EI siguiente procedimiento aplica al érea de hematologla. Es la precipitacién de los eritrocitos | (globules rojos) en un tiempo determinado (1-2 horas), que se relaciona directamente con la} tendencia de los glébuios rojos hacia la formacién de acimulos (pitas de monedas) asi como ala | ‘concentracién plasmatica de proteinas (globulinas y fibrinégeno). } | Los principales usos de la medicion de la VSG son: Led a)Para detectar procesos inflamatorios 0 infecciosos. Como discriminador o reactani presencia de enfermedad. ) Como control de la evolucién de ciertas enfermedades crénicas 6 infecciosas. i ©) Para detectar procesos crénicos inflamatorios ocultos o tumores. \ XIIl3. METODO RECOMENDADO \ Westergren. XIlL3.1.. Fundamento 1} Es la prciptacion de los erittocitos (gldbuls rojos) en un tiempo determinado (1-2 horas), que se relaciona directamente con la tendencia de los glébulos rojos hacia la formacién de actimulos (pitas de monedas) asi como a la concentracién plasmatica de proteinas (globulinas y fbrindgeno) La capacidad y la velocidad de formar estos acumulos dependen de la atraccién de la superfitie los glébulos rojos. XIIL5, DESARROLLO DEL PROCESO | XIll5.1. Requerimientos de la muestra (Tubo tapa lila o negra) paciente en ayuno XIIL5.1.1. Seleccién y condiciones de la muestra y paciente Sangre venosa con anticoagulante citrato trisédico en la proporcién 1 volumen de citrato por 4’ volimenes de sangre. Es estable hasta 24 horas a 4°C. XIIL5.1.2, Recoleccién y bioseguridad de la toma de muestra a) Tomar un minimo de 2 cc. De sangre. b) Transportar la muestra a la Seccién de Hematologia. 55 Centro de Coste Laboratorio Cinico CAVRR Complejo ea rubies 3) a3caes fed mines 436068 “Asistencial ===... og aight Vitor Ries Ru Los Angeles (Ctgo: CAVRR.APLHEM-O01 Revisién: 60 Fecha Emisitn: 2006.2011 XIIL5.1.3. Criterio de aceptacién o rechazo de la muestra El laboratorio rechazara muestras con coagulos y muestras insuficientes. ro XIIL5.1.4. Informe 1 Expresar los resultados en mmhora. | XII1.5.1.5. Procedimiento a) Agitarla muestra de sangre hasta homogenizarla, ; b) Con una pro pipeta, llenar la pipeta de Westergreen exactamente hasta la sefial 0.No pueden quedar burbujas. | ©) Apoyar la pipeta en un sedimentimetro perfectamente limpio. : i 4) Dejar la pipeta con ta graduacion hacia delante, Debe quedar en forma vertical, enyuner™t superticie plana y libre de movimiento. e) Tomar el tiempo de 1 hora exactamente. fo XUIL6. TERMINOLOGIA i VHS = velocidad de sedimentacin. £ XIIL7, INTERVALO DE REFERENCIA Hombre 1-10 mm/hora Hombre 70 afios 11. mm/hora Mujer 1-15 mmv/hora Mujer 70 afios 19. mm/hora XIIL8, OBSERVACIONES A a) La VHS es influenciada por la edad, sexo, ciclo menstrual, embarazoy drogas. ” | b) Las mujeres tienden a tener una VHS mas alta que los varones. | ©) Elembarazo también aumenta la VHS, se presume que por el incremento del fbrindgerlo y plasma. XIIL9, REFERENCIAS: a) Osorio, G.: Hematologia: Técnicas y procedimientos de laboratorio. 1996. . )_http:/www.tuotromedico.com/temasivelocidad_sedimentacion.htm RESPONSABILIDAD: Responsables de la ejecucién: Profesional Tecndlogo Medico, Técnico Paramédico de Laboratorio 56 Centro de Costo Laboratoro Cnico CAVRR Complejo ec nes (xs) 336068 ea roa 30 Asistencial “<==. ‘Br Viet Rios Ruz’ Lo Cig: CAVRR-APLHEM.O0 Revisién: 00, Festa Emisén: 20.06.2011 Responsabilidad del encargado: Profesional Tecndlogo Medico ~ r 7. DISTRIBUCION | i Direccion CAVRR i Unidad de Calidad y Seguridad de! Paciente Direccién Técnica i Archivo } i 8, REGISTROS ' Resultado del paciente informado en el LIS i ANEXO adicional: més informacién relevante funcionamiento equipo hematologico i ‘ id Caracteristicas del fun nto y especificaciones del sistema tot Especificaciones de funcionamiento: a = Rendimiento maximo (modo cerrado) iG CBC (hemograma completo): 68 muestras/horat i i Rendimiento maximo (modo abierto) i CBC (hemograma completo}: 76 muestras/horat * Volumen de aspiracién nominal wt Modo cerrado: < 230 ul uy Modo abierto: < 150 pi { = Anticoagulantes recomendados i Todas las caracteristicas de funcionamiento se descrbieron utlizando como anticoagulante kaif Los resultados pueden verse afectados por el uso de otros anticoagulantes. Especificaciones del rendimiento Lectura de fondo Las concentraciones de lectura de fondo representan componentes aparentemente relacionados con la muestra que provienen de los reactivos sin sangre y/o del ‘ruido” electronico. Las concentraciones de la lectura de fondo se utiizan para comprobar el rendimiento base del sistema, cuando no se esta 57 centro oe Coste Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea pistes an Steaes fed rica 36003 Asistencial =". =r. Vieter Rios Ruiz" Los Angeles (Codigo: CAVRR APL HEMO01 Revisén: 00 Fecha Emison: 20.06.2011 aspirando una muestra real. En la siguiente tabla se detallan los limites de la concentracion de i women lectura de fondo aceptables para utilizar el instrumento. Limites de concentracién Partenetre de fa lectura de fondot WBC (WOC y NOC) £0,10 x 10%p1 i 4 £.0,02 x 10%%p1 RBC HGB <0,10 gial PLT $5,00 x 1051 RETC £100 recuentos io il Arrastre La contaminacion por arrastre se define en el EP10-A2 del CLSI2 como una cantidad minima de i anal arastrada por el sistema de una muestra de reaccién a la siguiente, fectando asi is / canlidades aparentes en las muestras subsiguientes. iy Se expresa ya sea como un porcentaje o un efecto absoluto de una muestra en los andl posteriores. Para los instruments de hematologla, la contaminacién por arrastre causa generalmente una desvacién por incremento en los resutados de las muestras subsiguentes,. i arrastre se calcula y expresa como porcentaje mediante la formula siguiente, segin: ee Valor esperado bejoy - Valor esperado bajo . Valor esperado alto, - Valor esparado bajo, % Arrastre 58 Contro de Casto Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Rea rabies (a3) 336065 fea Mingo! «36065 Asistemelial vrsisiectvs.« alt Wer Rios Ruz’ Los Angeles (Cig: CAVRR. APL HEM-001 evisin: 00 Fecha Erision: 2005 2011 Parsmetro Valores egperados’ a — 2 oom Valor bajo Vator alto ' wee 0,05 x 10% 128 x 10%! 51% | (WOC y NOC) | RBC 0,01 x 10%! | 7.98x 10%! <1% i t HGB 0,01 x gia 24g/dl <1% } PLT 0,28 x10%1 | 1458 x 10% 1% ed ! mprecision (reproducibldad La imprecision fa desviacion estandar (DE) 0 el coefiente de vaiacién (CV) de los resulafos analiticos en un conjunto de replicados. Las muestras de sangre recién recogidas, utilizadas para verifcar las especticaciones de imprecisién, deben tener valores medios comprendidos eel intervalo analizado en la tabla siguiente y no deben provocar la visualizacién de ninguna alarmade parametro sospechoso para los parametros que se estan estudiando. Los siguientes dalos han sido obtenidos a partir de varios andlisis de imprecision realizados con. sangre recién extralda (n=31 replicados/procesamientos) en 3 analizadores con diferentes ensayos y modos durante el estudio de validacién medicoclinica llevado a cabo por Abbott. 59 Centro de Costo Laboratorio Cinico CAVRR Complejo Rea Pustes cas) 3008 Reg Ninzal 26065 ASEIST@MCHAl tsetse Victor Ros Ruz’ Los Angeles CChdigo: CAVRR-APLHEM.O0t Revision: 00 Fecha Enisién: 20052011 Partmetro | intervalos analzadoss | Mtervalo% cv | Limes de confenza supeiorest coeemees 95% | 975% | 99% | emeaiw wecwoc) | 44-9,6x 10% 12-27 24 25 27 WBC (NOC) 44-94 X10 12-34 28 30 33 j RBC 4,52 -5,72X 10% 06-18 18 19 zd HGB 13,4 - 16,9 g/dl 03-18 14 15 17 HCT 40,1-51,6.% 06-10 18 19 aie let MCV 825-9730 02-08 08 08 09 i ROW 106-132% 08-16 18 16 wit PLT 168 - 371 X 10%! 17-39 38 49 4a |; MPV 54-991 24-74 62 66 eal RETC 12-18% 81-123 13,98 150° | 165° NEU 46,1 - 69,1 % O7-17 18 19 20 ym 223-426 % 47-34 33 38 37 MONO 45-84% 43-120 11,09 119° | 13,10 Eos 06-70% 50-201 21,28 23,22 | 256° BASO 05-16% 10,1 = 23,1 23,38 248° | 26,70 Frecuencia de fallo esperado por razones estadisticas tnicamente: | 1de20 | 1de40 | ide 100 Intervalo de determinacién anaitc Intervalo en el cual el sistema proporciona resultados con exacltud suficiente. Las especificaciqhes el intervalo de determinacién analitica que se presentan en la siguiente tabla se calculpron analizando diluciones y concentraciones de sangre humana recién extraida a la que se afdgio material comercial. Sélo se usaron muestras que no presentaban alarmas de invalidez sospechosas para el parametro estudiado. Los limites se determinaron mediante un andlisis de“... Tegresién siguiendo el método de procesamiento estadistico descrilo en el documento EPE-A del cis. 60 Centro de Costo Laboratorio Cinco CAVRR Complejo Asistenclal =. 5 Ait Veto Ris Rar" Los Angeles Cig CAVRR APL HEM-COT Revisén: 00, Fecha Emisén: 20.06.2011 Parametro td, dswrminastsn Unidades* ~ analitica ‘ wec 0,00 - 246, 0,02 - 246.8 X 103% | Rec 0,00 - 7,16 0,00-7,16 X 10% HGB 0,00- 19,9 00-199 gid i HCT 0.00 - 99.5 13,0-60,0 % i Mov 0,00 - 139 58-139 fl aoe ROW 0,00 - 29,8, 100-298 % Ci PLT 0,00 - 1903 14-1903 x10% | i ! pv 0,00 - 17,2 43-172 fl ‘ ; RETC 0,00 - 23,0 0,2-22,9 % ni ty i “i ' ~4 I i | ‘Comparacién (correacién) de le formula leucocitaria frente al microscopio 61 Cento 6 Casto Laboratorio cinco CAVRR Complejo Rea me a Saeaes mines 36068, Asistencia) “San. ‘Dr Vieir Ros Rul Los Ang (Coaigo: CAVRR APL HEM-O01 Revision 00 Fecha Emison: 20.08.2011 Complejo ‘Asistencial {Dr Vilor Rios Ruz" Los Angeles centro 4e Coste Laboratorio Cinco CAVRR Rea Publica (43) 336085, Reg Mingoi 436065, ‘wor nosplallosangeles.c| Parsmato | tnteratoanatizadot | Replicados | 1018, | pandiome | Ordenadzencl WM 1- 72% 113 0.921 0.85 +0.94 | ‘MONO. 3-69% 3 0711 1,10 41,93 4 id eam 13 [ome [ew Poe | r 1 { 3 } i cam : t i i i t ty ; i 62 Mensajes de alertas de los parametros Tabla N°1: Resume todos los mensajes de alertas de los pardmetros segin cada paraietro y CChdigo: CAVRR APL HEM.O0t Revisin: 00, Fecha Emisin: 20:06 201 1 - categoria ; 1 ‘Alonas de] Aleras dl Parimetro. | Aleriasdedispersién doles | sarsmetos | poblaciones | ,,Mensales sospechosos sospechosas interpret ‘s Elresulado se vieualza en [WAC wee Leucopenia color amarillo, si se encuentra FWwec Leucocitosis ot debajo delimit infenor Hite El esulado se vsualza en RBC color violeta, si se encuentra pes encima elim supenor wee | Eresutado aparece subrayado en el informe Grscoimpreso, si excede los limites El resuitado se marca con un asterisco (*) si se requiere otra validacion (véase la Tabla 3.4) Férmula DFLT (NLMEB) | BAND Neutropenia leucocitaria DFLT (NE) Is Neutrofiia NEU DFLT (LM) BLASTO Linfopenia LYM Igual que WBC: DFLT (B) VAR LYM Linfocitosis: MONO DFLT (LB) Monocitosis a Eosinoftia Basofia RBC MORPH | Anemia Palctemia Enitrocitos ane microticos HB igual que wae Ernirocios ROW macrociticos Hipocromia Hipercomia Anisoctosis LRI El valor MPV se Trombocitopenia URI ap ‘suprimir Trombocitosis. PLT RI ino aparece en | Piaqueta: Pu | hguat que wee wu pana Plagquetas ene informe Plaguelas impreso) macrociticas 63 Complejo ““Asistencial contro de Costo Laboratorio Clinica CAVRR Rea Min git Vitor Rios Ruiz" Los Angeles Rea Publics (43) 336065 "436065 ‘worn nospiallosangeles.ct (Cbg: CAVRR.APLHEM-O0t Revisén: 00 Fecha Emisin: 20062011 Tabla N°2: Resume todos los parémetros marcados con un asteisco (*) que requieran una validacién adicional de los resultados. Se aplica a las muestras de paciente, ID de control aeealided tee (QCID) de sangre y caibradores de sangre. | | ' ‘Aorta de Pardmetros marcados con un paramatros | Pardmetrarmarcades con unastarsco | Fittnayoe mareades con ‘sospechosos ena pagina laboratorio A ‘WBC WBC, NEU, MONO, EOS, BASO, LYM WBC, SEG, BAND, IG, BLST, MON¢ i EOS, BASO, LYMe, VARL f DFLT (NLMEB) NEU, MONO, EOS, BASO, LYM, %N, ‘SEG, BAND, IG, BLST, MONe, EOS, i Sei, 36,8, BASO, LYMe, VARL, 5, 880, %6, WBLST, Me, KE, %6, she, iv. frm \ DFLT (NE) NEU, EOS, %N, %E ‘SEG, BAND, IG, EOS, %S, %BD, %IG, t we i DFLT (LM) MONO, LYM, %M, %6L BLST, MONe, LYMe, VARL, %BLST, t ‘Me, ibe, VL DFLT ®) BAS, 48 BASO, %8 DFLT as) BASO, LYM, 8, HL BASO, LYMe, VARL, %8, Le, VL ' MCHC RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC | LRI PLT, MPV PLT, MPV, PCT, POW t URI PUT, MPV PLT. MPV, PCT, POW LURE PLT MPV PLT, MPY, PCT, POW * Losanilisis CBC + NOC o CBC + RRBC invalidan cualquier parznetoadiional con un leds Be Primero sospechoso MCHC Complejo ““ifsistencial «= .20r.Vielor Rios Ruz” Los Angeles Centro de Costo Laverotorio Clnico CARR Rea Publica (43) 336085 Rea Minsai 436065, vweernospkallosangees.c ‘Tabla N°2: Continuacién (Codigo: CAVAR APL HEM: 00t Revision: 00, Festa Emisén: 20.05.2011 ‘Alerts det Parémetros marcados con un Parametros marcados con un asterisco analizadory de i 7 asterisco (*)on la pagina de datos no vilidos eae laberaterio Error de Todos los pardmetros Todos los parametos dispensacién — Aspiracién incompleta Error del ealetactor woe WBC (si se selecciona WOC), NEU, MONO, EOS, BASO, LYM, %6N, 96M, %E, %B, %L, SR, RETC WBC (si se selecciona WOC) WoC, ‘SEG, BAND, |G, BLST, MONe, EOS, BASO, LYMe, VARL, %S, %BD, %IG, ‘WBLST, %Me, %EO, %B, %Le, %VL, %R, RETC. Enror del calefactor HGB HGB, MCH, MCHC. HGB, MCH, MCHC Redculockos inmae de |Parmeosmacadesconunasnzce | Parmar mreades on un analizador y de (Yen Ia pagina bésiea Scenes datos no valides labor of Envoctos ragies | WR, RETC WR, RETC Pocos eventos | OR, RETC R, RETC Pérdidaexceswa | #8, RETC WR, RETC de enttrocitos (ERL) Enorde jo | wR, RETC WR, RETC > Tabla N°3: Parémetros con resultados suprimidos _ 1 Pardmetros con resultados MONO, EOS, BASO, LYM, 96N, 96M, %E, 4B, ML Erores de! | Porimeos con osuladossuprinidos Teme la poona bls suprimies on fa piina de Error de je WOC | WBC ise eeccuna WOO) NEU. | WBC(sise eeecena WOO) SEG 16 MONS, £58480 Lin Sse, | BUST WON EOS BAGO sea APL, eh we BL Err de RBC | RBC, WOH. HET MGHG. PLT; PV RBC, MH, HCT, MCHC, PLT NP Per: Pow ror dejo nOC | WSC se anecdora OG) NEU. | WBC (re seeznona NOD) NOE, ‘SEG, BAND, IG, BLST, MONe, EOS, BASO, LYMe, VARL, %N, %M, %E, %B, mL t 65 Contre de Costo Laboratorio Clinico CAVRR Complejo ‘Asistencial «Dr. Viel Rios Ruiz’ Los Angeles Reg Pablica (43) 336085 Rea Minsai 436065 wor hospitallosangetes.cl

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