1.

OBJETIVO
-Familiarizar al estudiante en el uso de diferentes instrumentos,
materiales y equipos utilizados en el laboratorio de microbiologa para el
anlisis microbiolgico de aguas.
-Aprender el anlisis microbiolgico de aguas por el mtodo del Nmero
Ms Probable.
-Determinar la presencia de coliformes totales en muestras de aguas
representativas.
-Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua
2. DIAGRAMA DE FLUJO (PROPUESTO)

Pr
ueba Presuntiva

Prueba confirmatoria
Con los tubos que dieron positivo en la prueba presuntiva se
procede a:

3. VARIANTES DEL PROCESO

-En el laboratorio los grupos usaron diferentes caldos para las pruebas
presuntivas y confirmatorias, en nuestro grupo se trabaj con el caldo
lactosado para la prueba presuntiva y el caldo verde brillante para la
confirmatoria
-Como en todo laboratorio se us otro tubo como blanco para el control
del proceso.

4. CALCULOS Y RESULTADOS

Datos de toma de muestra

Zona: Achachicala

Hora: 11:08
Muestrador: Callisaya Paredes Noely
T aproximada de la muestra: 9C

Datos de la recepcin muestra

Hora de llegada: 15:08

16/05/16

Zona: Laboratorio de Cota Cota IDEPROQ

Muestrador: Grupo 1
T aproximada de la muestra: 9C
Color: Incoloro
Caractersticas: Pequeas partculas en suspensin
Volumen: 500 ml aprox.

Clculos para preparar los caldos

Prueba Presuntiva
Caldo Lactosado
Concentracion Simple
13 g 1000ml
xg 80ml
x 1.04 g
Concentracion Doble
2 13 g 1000ml
xg 40ml
x 1.04 g

Prueba Confirmatoria
Caldo Verde Brillante

40 g
xg

1000ml
1200ml

x 4.8 g

Prueba presuntiva
1ra Lectura despus de 24 horas

Serie 1
Serie 2
Serie 3
Blanco

Vol. Agua
(ml)
10
1
0,1
-

Tubo 1
+
+
+

Tubo 2
+
+
-

Tubo 3
+
-

Tubo 2
+
+

Tubo 3
+
-

2da Lectura despus de 48 horas

Serie 1
Serie 2

Vol. Agua
(ml)
10
1

Tubo 1
+
+

Serie 3
Blanco

0,1
-

Tubo 1
+
+
+

Tubo 2
+
+
-

Tubo 3
+
No aplica
No aplica

Prueba confimatoria
Despus de 48 horas

Serie 1
Serie 2
Serie 3
Blanco

Vol. Agua
(ml)
10
1
0,1
-

Recuento total de coliformes

Con la anterior tabla se encuentra

que:
NMP de coliformes totales= 150
UFC/33.3ml de agua

5.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS

Nuestra muestra de agua de Achachicala segn el NMP tiene 4.5

coliformes totales, excediendo los lmites permisibles para agua potable.
Se tom los tubos como positivos cuando exista turbidez o
desprendimiento de gas
Solamente se present tubos negativos en los tubos ms diluidos.
Se puede considerar que el trabajo se realiz inocuamente porque
nuestro blanco no presentaba contaminacin.
6. CONCLUSIONES
Se realiz el anlisis microbiolgico del agua por el mtodo del NMP
encontrndose 150 coliformes en 33.3 ml de agua, excediendo el valor
permisible, implicando que la muestra tomada estaba contamindada.
Con nuestro anlisis se comprueba la existencia de coliformes en la
muestra, concluyendo que no es potable, sin una previa esterilizacin.
7. RECOMENDACIONES
- Traer mecheros para crear una zona an ms estril.
- No olvidar agitar la muestra para que esta sea lo ms uniformemente
posible.

- Los tubos duhman inicialmente no tienen que tener burbujas antes de

inocular la muestra.
- Para meter al autoclave nuestro tubos, estos deben estar semi-abiertos
ya que la presin que se crea puede romperlos.
- Preparar los caldos con algn exceso porque existen perdidas en el
proceso y hasta se evapora en el autoclave a la hora de esterilizar.

8. CUESTIONARIO

5.1 Cules son los lmites mximos permisibles para

asegurar la calidad microbiolgica del agua?
R. Para filtro de membrana 0 UFC/100ml
Para el mtodo del nmero ms probable 2 UFC/100ml
5.2 Dnde se encuentra normalmente las bacterias coliformes?
R. Generalmente se encuentra en las heces fecales de los hombres y
animales, tambin en los intestinos de animales de sangre caliente.
5.3 Por qu se investigan las bacterias coliformes?
R. Aunque no son bacterias patgenas estos nos sugieren la presencia
de bacterias patgenas como la Salmonella.
5.4 A qu microorganismos incluye el grupo coliformes?
R. Al grupo Escherichia Coli.
5.5 Qu cantidad de agua mnima se debe recepcionar en laboratorio
para su respectivo anlisis microbiolgico?
R. Como mnimo se debe recepcionar 500ml o gramos de muestra.
5.6 Cmo se realiza la toma de muestra para aguas de ro?
R. Se debe llevar un recipiente para tomar la muestra que previamente
debe estar esterilizado, se va al medio del ro o donde se vea que es la
zona ms representativa y se abre la tapa cuando se toma el agua, se
debe esperar unos 10 segundos y recin taparlo de nuevo, se debe
refrigerar la muestra.
5.7 Dnde se deben tomar muestras de aguas para los exmenes
bacteriolgicos en una planta de tratamiento y potabilizacin de aguas?

Se debe tomar en puntos representativos e importantes de la planta

como en la recepcin de la muestra (para ver la calidad de la muestra
prima), en el tanque de almacenamiento de agua y en la salida del agua
para su futuro uso como agua potable.
5.8 Cul es el tiempo mximo transcurrido entre la toma de muestra y
el examen bacteriolgico del agua?
R. Pueden pasar como mximo 24 horas, aunque otras fuentes
recomiendan como mximo 6 horas.
5.9 Cmo se puede identificar realmente el tipo de microorganismos
coliformes?
R. Se realiza la prueba de IMVIC para conocer los microorganismos que
se encuentran en la muestra. Los coliformes son bacilos cortos Gramnegativos, entonces se los puede identificar haciendo la tincin
respectiva.
5.10 En qu consisten las pruebas de IMVIC?
R. Son cuatro pruebas que se usa en la biologa para identificar
bacterias.
Consiste en la prueba de Indol, Rojo de Metilo, Voges-Proskauer, y la
prueba de citrato, estos dan positivo o negativo a cada una de las
pruebas y con tablas se determina el origen de la bacteria.

Universidad Mayor de San

Andrs
Facultad de Ingeniera

LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA
Prctica N4

Anlisis Microbiolgico
De Aguas

Nombre: Chalco Castro Bryan Javier

Carrera: Ing. Qumica
Fecha: 30/05/16

Docente: Ing. MARIA CONDE

2016