I.

ALT (ALANIN TRANSAMINASE)

Dasar :
ALT

L-alanin + -Ketoglutarat
Piruvat + NADH+ + H+

LDH

L-Glutamat + Piruvat
L-laktat + NAD+

Kecepatan penurunan kadar NADH diukur secara fotometrik dan berbanding lurus
dengan aktivitas ALT dalam bahan sampel.
Reagensia :
1. TRIS-HCl buffer pH 7,8 100 mM
2. L-alanin 500 mM
3. -Ketoglutarat 15 mM
4. NADH 0,18 mM
5. NaHCO3 10 mM
6. LDH 1428 ukat/l
ALAT-ALAT : Waterbath, pipet, tabung reaksi, spektrofotometer
Cara Kerja :
1. Siapkan sebuah tabung reaksi bersih.
2. Pipet 2 ml reagen ALT
3. Inkubasi selama 1 5 menit pada suhu 37 oC (waterbath)
4. Tambahkan 200 l sampel serum/plasma
5. Dikocok kemudian pada spektrofotometer (dengan panjang gelombang 340 nm)
6. Hasil dibaca pada spektrofotometer dalam U/L
Perhitungan : Konsentrasi ALT = abs x 1745 U/L
Nilai Normal :
(perempuan) = 39 U/L
(laki-laki) = 47 U/L

II. AST (ASPARTAT TRANSAMINASE)

Dasar :
L-aspartat + 2-oksoglutarat
Oksaloasetat + NADH+ + H+

AST

MDH

L-Glutamat + Oksaloasetat
L-malat + NAD+

Kecepatan penurunan kadar NADH diukur secara spektrofotometri dan berbanding

lurus dengan aktifitas AST dalam bahan sample
Reagens:
1. TRIS-HCl buffer pH 7,8 80 Mm
2. Na-azide 0,3%
3. LDH 28 ukat/l
4. L-Aspartat 240 mM
5. MDH 10 ukat/l
6. NADH 0,18 mM
7. 2-oksoglutarat 12 mM
Alat-Alat : Waterbath, pipet, tabung reaksi, spektrofotometer
Cara Kerja :
1. Kedalam tabung reaksi, pipet 1 ml reagen AST
2. Inkubasi selama 1 5 menit pada suhu 37 oC (waterbath)
3. Tambahkan 100 l sampel serum/plasma
4. Dikocok kemudian diisap pada spektrofotometer
5. Hasil dibaca pada spektrofotometer dalam U/L
Nilai Normal :
(perempuan) = 37 U/L
(laki-laki) = 31 U/L

III. ALKALINE PHOSPHATASE p-NPP (DGKC METHOD)

Dasar :
p - Nitrophenylphosphate + H2O

Alk. PHOSPHATASE

p nitrophenol + phosphate

Kecepatan pembentukan p-NPP diukur secara spektrofotometri dan berbanding

lurus dengan aktifitas ALT dalam bahan sample
Reagens:
1. Diethanolamine/HCl buffer pH = 9.8 1M
2. P-nitrophenylphosphate 10 mM
3. MgCl2 0.5 mM
4. Pengawet dan stabilisator
Alat-Alat : Waterbath, pipet, tabung reaksi, spektrofotometer
Cara Kerja :
1. Pipetkan ke dalam tabung reaksi sejumlah 2 ml Reagen ALT
2. Inkubasi selama 2 3 menit pada suhu 25, 30 atau 37 oC (waterbath)
3. Tambahkan 40 l sampel serum/plasma
4. Dikocok kemudian Set stopwatch, untuk kemudian diisap pada spektrofotometer .
Dilakukan pengukuran pada menit ke 1, 2, 3 dan 4.
5. Hasil dibaca pada spektrofotometer dalam panjang gelombang 405 nm
Gunakan sampel serum yang bebas hemolisis. Dapat digunakan serum yang telah
disentrifuse sebelumnya, dan disimpan dalam suhu 2 8 0C. Sampel yang disimpan
dalam suhu ini dapat bertahan hingga 7 hari.
Nilai Normal :
Temperature oC
25
30
37

Dewasa
(Dalam U/L)
60 170
73 207
98 279

Perhitungan :
Kadar = Abs/menit x 3300

Anak-anak 3 15 tahun
(Dalam U/L)
151 471
185 575
250 - 775

LEMBAR KERJA MAHASISWA

PERCOBAAN ALT (ALANIN TRANSAMINASE)

Hasil:

Interpretasi:

Kesimpulan:

PERCOBAAN AST (ASPARTAST TRANSAMINASE)

Hasil:

Interpretasi:

Kesimpulan:

PERCOBAAN ALP (ALKALINE PHOSPHATASE)

Hasil:

Interpretasi:

Kesimpulan: