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Cromatografa

Diagrama de procesos
Resultados
Cromatografa en capa fina:

Fig 1. Resultados cromatografa en capa fina


Distancia
recorrida (cm)

Rf

Sustancia
O-Nitrofenol

0,9

0,16

Rojo

0,3

0,05

Amarillo

1,2

0,21

Sudan IV

Eluyente

5,7

Colorante

Tabla 1. eluyente: ter

Rf

Sustancia

Distancia
recorrida (cm)

O-Nitrofenol

2,9

0,52

Rojo

1,6

0,28

Amarillo

2,3

0,41

Sudan IV

1,9

0,34

Eluyente

5,6

Colorante

Tabla 2. Eluyente: ter y acetato de isopropilo relacin 30:1 respectivamente

Rf

Sustancia

Distancia
recorrida (cm)

O-Nitrofenol

3,0

0,54

Rojo

2,2

0,39

Amarillo

3,1

0,55

Sudan IV

2,0

0,36

Eluyente

5,6

Colorante

Tabla 3. Eluyente: ter y acetato de isopropilo relacin 20:1 respectivamente

Rf

Sustancia

Distancia
recorrida (cm)

O-Nitrofenol

2,6

0,46

Rojo

2,1

0,38

Amarillo

2,8

0,5

Sudan IV

2,2

0,39

Eluyente

5,6

Colorante

Tabla 4. Eluyente: ter y acetato de isopropilo relacin 10:1 respectivamente

Cromatografa en columna:

Fig 2. Inicio de la cromatografa en columna (Eluyente: ter)

Fig. 3. Cromatografa en columna. (20:1)

Fig. 4. Cromatografa en columna (40:1)

Fig. 5. Colorantes separados tras la cromatografa en columna.


Discusin
La prctica de capa fina tena como objetivo principal, la eleccin de un eluyente con el cual
se obtuviera una buena resolucin, selectividad y separacin de los colorantes presentes en
la muestra problema(mezcla de Sudn IV y O-Nitrofenol). Esto con el fin de trabajar en la
prctica de cromatografa en columna con el mismo eluyente para la separacin de cada
componente.
En cromatografa en capa fina se inici con una fase mvil de relacin 20:1, donde se
obtuvo una RESOLUCIN( cuando una mancha se solapa con la otra) es decir un resultado
donde no hay una separacin clara, debido a esto, se realiz dos pruebas ms 10:1 y 30:1
obteniendo un resultado similar a la relacin 20:1 ( vase la Fig.1), esto sucedi debido a
que tanto el Sudn IV como el O-Nitrofenol presentan polaridades similares, motivo por el

cual se tuvo que esperar hasta cromatografa en Columna para tratar de realizar una buena
separacin de esta mezcla aumentando o disminuyendo la polaridad de uno de los dos.
En cromatografa en columna, se inici con una fase mvil de relacin 20:1 de ter y acetato
de isopropilo (vase Fig. 3), donde sucedi exactamente lo mismo que en cromatografa en
capa fina con una separacin no tan clara, razn por la cual se opt en reducir la polaridad
preparando una fase mvil de relacin 40:1 ( vase Fig. 4) donde ambos colorantes se
separaron al estar muy cerca del final de la columna. si no hubiramos realizado este
cambio de relaciones del eluyente, los colorantes no se habran separado, sin embargo,
cuando se deposit la pasta fluida de gel de slice con ter en la preparacin de la columna
se generaron grumos y burbujas. A pesar de intentar compactar la pasta con leves golpes
con una manguera no fue posible deshacerse de estos. Estos grumos no afectaron en
mayor medida al proceso de separacin, sin embargo, al momento de iniciarse la
separacin estos grumos presentaron una leve obstruccin haciendo que el colorante
bajase de forma inclinada.(vase Fig. 2 y 4).
Por ltimo, al comparar los factores de retencin obtenidos al cambiar el eluyente en la
cromatografa en capa fina, podemos ver tanto en la tabla 3 y 4 que los datos obtenidos
fueron muy cercanos, por ejemplo con el colorante rojo vemos una diferencia de tan slo de
0,01 en el factor de retencin. Concluyendo as que a pesar de realizar un aumento de la
polaridad en el eluyente, este colorante no sufre un cambio drstico en su desplazamiento a
travs del gel de slice.
Conclusiones
Es de bastante utilidad realizar primero la cromatografa en capa fina en con el fin de
conocer el eluyente adecuado para luego tomar este como la fase mvil en la cromatografa
en columna y as obtener un separacin adecuada de los colorantes presentes en una
muestra problema.
Es recomendable que al sembrar la muestra y sus patrones en la placa de gel de slice, esta
sea pequea y hacerlo con ayuda de un capilar, pero an as al sembrar estos con una
mayor cantidad, se aprecia mejor la distancia recorrida del compuesto y se puede
determinar su factor de retencin mejor.
Ambos colorantes presentan una polaridad similar por esta razn al realizar la cromatografa
en capa fina con fases mviles como la que se muestra en la tabla 2. , tanto el o-nitrofenol
como el sudn IV tuvieron factores de retencin cercanos. Por esta razn al aumentar la
polaridad (Tabla 4.) no se puede ver una separacin ptima de ambos compuestos. Debido
a que el o-nitrofenol mostr mayor afinidad a eluyentes con baja polaridad mientras que el
sudn IV no, los eluyentes apolares son los adecuados para obtener una separacin de
ambos colorantes presentes en la mezcla trabajada.
Al obtener ya separados los colorantes presentes en la muestra, podemos observar que la
mezcla presentaba una mayor cantidad de colorante rojo (Imagen 5.) a diferencia del
colorante amarillo, el cual debido a estar disuelto en ter no se puede apreciar bien su color
tras haberlo separado.

Bibliografa
Quintana, A. Montes, A. Palmeth, C. Brito, D. Hernandez, J. (2014). Cromatografa en capa
delgada, separacin de pigmentos de una planta. Universidad de Cartagena. FAcultad de
ciencias exactas y naturales.
Monasterio, V. Mendoza, A. (s,f) Cromatografa en capa fina. Universidad Central de
venezuela. Departamento de Qumica y Tecnologa

BIB FINA
https://es.scribd.com/doc/35958862/Cromatografia-de-Capa-Fina
http://www.slideshare.net/alfredomontesrobledo/informe-5-34011505
http://documents.tips/documents/informe-de-cromatografia-de-capa-fina.html
https://es.scribd.com/doc/202354271/Informe-Cromatografia-de-Capa-Fina
https://es.scribd.com/doc/14172689/5-Cromatografia-en-Capa-Fina
https://www.academia.edu/8407204/Informe_Cromatografia
BIB COLUMNA
http://myslide.es/documents/informe-vi-cromatografia-en-columna.html
https://es.scribd.com/doc/14172697/6-Cromatografia-en-Columna
https://www.youtube.com/watch?v=94KL0avjR1Q
https://www.youtube.com/watch?v=rHeH3cOm_nI