Reviews of reproduction (1998)3, 130-140

LA DIFERENCIACIN SEXUAL DE LA FUNCIN REPRODUCTIVA

NEUROENDOCRINA EN OVINOS
R.I. Wood and D.L. Foster

En muchas especies, el momento de la pubertad es diferente tanto en machos como

en hembras. Esto no es simplemente reflejar diferencias en el curso del tiempo de
activacin de los testculos y los ovarios. Ms bien, las diferencias sexuales en inicio de
la pubertad residen dentro de los mecanismos del cerebro que controlan la secrecin
de GnRH, como se ejemplifica en estudios conducidos en ovejas. La exposicin de los
fetos de ovejas a los esteroides testiculares altera el momento de la pubertad,
principalmente mediante la reduccin de la capacidad de respuesta al fotoperiodo. Esto
se manifiesta como un incremento temprano en la secrecin de LH en los machos o las
hembras expuestas experimentalmente a la testosterona antes del nacimiento. Los
esteroides tambin actan sobre los mecanismos no fotoperiodicos para suprimir la
oleada preovulatoria de la gonadotropina. En vista de estas acciones, mltiples
organizacionales de los esteroides para controlar la secrecin postnatal de
gonadotropinas, est quedando claro que hay muchos perodos crticos del desarrollo
del cerebro para organizar el sistema neurosecretor de GnRH, y que estos pueden ser
sensibles a los diferentes metabolitos de la testosterona. Aunque las neuronas de
GnRH no presentan dimorfismo sexual con respecto al nmero, la distribucin y
morfologa general, las preguntas fundamentales siguen en cuanto a cmo los
esteroides ejercen sus efectos en la clula a travs de acciones en las fibras aferentes
de GnRH. Teleolgicamente, estos cambios en especificaciones del sexo en
mecanismos cambios en el momento de la pubertad, maximiza los cambios de la
actividad reproductiva que en ltima instancia, tendr xito en cada sexo.
La pubertad, es la transicin de un estado de inmadurez sexual a una actividad
reproductiva completa, es medida por seales que actan en el cerebro para
incrementar la actividad del eje hipotlamo-pituitaria que estimula la produccin de
gametos maduros. Hay profundas diferencias sexuales en el momento de la pubertad
en muchas especies. Esto ocurre por la diferenciacin sexual del control
neuroendocrino de la secrecin de pituitaria-gonadotropina. Los estudios con ovejas
como modelo experimental han definido algunos de los factores responsables de esta
diferencia en el desarrollo de la funcin neuroendocrina reproductiva. Se han estudiado
los organizadores prenatales (esteroides prenatales), seales postnatales (crecimiento
y respuestas al fotoperiodo) y los efectores (las neuronas GnRH) y el tiempo del
proceso de pubertad. Nuestra estrategia experimental se ha conducido en
investigaciones anatmicas complementarias y fisiolgicas para vincularla con la forma
y funcin en la diferenciacin sexual de la funcin reproductiva neuroendocrina.
Estrategias reproductivas en machos y hembras
Para asegurarse de que la actividad sexual sea exitosa en ltima instancia, los machos
y las hembras responden a las seales tanto de sus ambientes internos y externos. El
apareamiento es medido para que las cras nazcan cuando las condiciones somticas

son las apropiadas y de temporada son favorables. Sin embargo, las diferencias en las
estrategias reproductivas entre hembras y machos a menudo puede ser tan amplias
como las que existen entre diferentes especies (Bronson, 1989). Estas diferencias
surgen debido a que el curso temporal de la gametognesis y las inversiones
metablicas en la reproduccin puede ser muy diferente en los dos sexos.
La tpica hembra mamfera pare relativamente pocas cras durante su vida til, pero
gasta mucha energa en su crecimiento y desarrollo temprano (para una revisin, ver
Bronson, 1989). Por lo tanto, la mayor parte de su esfuerzo reproductivo se invierte
despus del apareamiento. Las demandas metablicas de la gestacin y la lactancia
son considerables y pueden poner en riesgo las posibilidades de supervivencia de la
hembra si se inicia en un momento inapropiado. Sin embargo, el ciclo gamtico de las
hembras es relativamente corto, y slo unos pocos das se requieren para el desarrollo
de un folculo preovulatorio. En conjunto, estos factores estimulan a la hembra
inmadura para retrasar la madurez sexual hasta que las condiciones sean ptimas.
Despus de la pubertad, la vida tpica de la hembra adulta en condiciones naturales
puede tener slo unos pocos ciclos frtiles en 1 ao. En gran parte del ao, est
reproductivamente suprimida como resultado de la preez y la lactancia, la anovulacin
estacional o, posiblemente, el consumo inadecuado de alimentos. Sin embargo, una
vez que las seales internas y externas son favorables, la actividad reproductiva puede
iniciarse rpidamente. El macho utiliza una estrategia completamente diferente a la
actividad sexual. El macho polgamo tpico produce un gran nmero de hijos, pero hace
poco para asegurar su supervivencia. Por lo tanto, la mayor parte de la energa para su
actividad reproductiva se gasta antes del apareamiento, principalmente en la
competencia por las hembras (Bronson, 1985). A pesar de que las demandas
energticas para la produccin de espermatozoides y fluido seminal son
comparativamente pequeas, la espermatognesis lleva semanas a meses para
completarse (Ortavant, 1958). As, los beneficios de los machos por comenzar y
mantener la espermatognesis a pesar de una nutricin inadecuada y las condiciones
ambientales adversas (Bronson, 1989).
En los ovinos, la pubertad en los machos comienza aproximadamente 20 semanas
antes que en las hembras (Fig. 1b). Los corderos nacidos en primavera comienzan el
desarrollo reproductivo en pleno verano en alrededor de 10 semanas de edad, segn lo
evidenciado por el inicio de ciclos de espermatognesis (Ortavant, 1958; Claypool y
Foster, 1990), mientras que las corderas permanecen siendo prepberes hasta
mediados de otoo, cuando ovulan por primera vez (aproximadamente a 30 semanas;
Foster y Ryan, 1979; Claypool y Foster, 1990). Ciertamente, esta comparacin sola es
de escaso valor. Los puntos finales de la maduracin sexual en machos y hembras de
cualquier especie son difciles de igualar debido a las diferencias en la produccin de
gametos masculinos y femeninos (produccin continua de espermatozoides en los
machos en comparacin con la produccin cclica de vulos en las hembras). Sin
embargo, los cambios neuroendocrinos fundamentales que conducen a la pubertad en
ambos sexos son similares.
Secuencia neuroendocrina para el momento de la pubertad en corderos macho y
hembra.

El incremento de la secrecin de gonadotropinas, particularmente LH, de la pituitaria

conduce la transicin de la inmadurez sexual a la competencia reproductiva en ambos
sexos (Fig. 1c) (Kosut et al., 1997). Antes de la pubertad, el cerebro, controla la
secrecin de LH a travs de GnRH, es muy sensible a los efectos inhibitorios de los
esteroides de las gnadas en desarrollo. Por lo tanto, la frecuencia de pulsos de GnRH
sigue siendo baja. En la pubertad, en respuesta a seales procedentes del medio
interno (crecimiento) y externa (fotoperodo), el cerebro se vuelve menos sensible a los
efectos inhibitorios de los esteroides gonadales. La frecuencia de los aumentos de la
secrecin de GnRH que, a su vez, aumenta la secrecin pulstil de LH para conducir el
crecimiento folicular y la espermatognesis. Adems, en las hembras, el aumento de
las concentraciones circulantes de estradiol en la pubertad desencadena el primer pico
preovulatorio de LH (Fig. 1d) (para revisin, vase Foster, 1994). En los machos, el
pico de LH preovulatorio ni est presente ni es inducible (Karsch y Foster, 1975) debido
a los incrementos de estradiol no puede producir un aumento de la GnRH (Herbosa et
al., 1996).
Ni la gnada ni la pituitaria anterior de la inmadurez sexual de los ovinos limita la
fertilidad ya que ambos son capaces de funcionar mucho antes del momento de la
pubertad. El concepto que centralmente regula el hipogonadotropismo limita la
pubertad est basada en varias consideraciones: (1) el potencial de producir altas
frecuencias de pulsos de LH se alcanza a las pocas semanas de edad, (2) la gnada
es capaz de mantener un crecimiento sostenido de la esteroidognesis temprana en
desarrollo postnatal, y (3) en las hembras el mecanismo de aumento de gonadotropina
puede responder a las acciones estimulantes de retroalimentacin de estradiol en unas
pocas semanas despus del nacimiento (para una revisin, vase Foster, 1994).
En ovinos, la "hiptesis gonadostat 'es aplicable a la pubertad en ambos sexos. El
gonadostat se refiere a la sensibilidad del sistema neurosecretor de GnRH para inhibir
la retroalimentacin de los esteroides gonadales. Segn esta hiptesis, la produccin
de gonadotrofinas en el individuo prepber es bajo debida a la alta sensibilidad a la
retroalimentacin. Esta sensibilidad a los esteroides gonadales disminuye durante la
madurez sexual y, como consecuencia, la secrecin de GnRH aumenta para estimular
la secrecin de LH. Este importante concepto ha sido demostrado en un modelo
experimental en el que las gnadas son removidas y una seal constante de
retroalimentacin esteroidal es proporcionada por implantes de Silastic. El estradiol se
utiliza en este modelo experimental porque tanto machos como hembras ovinas tienen
un grado similar de respuesta al estradiol o testosterona con respecto a la inhibicin
frecuencia del pulso de la LH (Olster y Foster, 1986), y porque el estradiol juega un
papel importante en la retroalimentacin inhibidora de esteroides no slo en las ovejas,
sino tambin en los carneros (Schanbacher, 1984). En los gonadectomizados, el
tratamiento de estradiol es til para comparar la madurez sexual neuroendocrina en
machos y hembras debido a que la misma variable, el incremento de LH en pubertad,
se mide en ambos sexos (Fig. 1c). El modelo elimina las diferencias entre machos y
hembras en la produccin de esteroides, la gametognesis y el comportamiento sexual.
Antes de la pubertad, la frecuencia de pulsos de LH se mantiene baja en el cordero
gonadectomizado de cualquier sexo que llevan un implante de esteroide (macho: Olster

y Foster, 1986; hembra: Foster et al, 1986) de retroalimentacin esteroide inhibidor, y

ocurren en sincrona con la maduracin gonadal en el macho o hembra intacta (Fig. 1b)
(Claypool y Foster, 1990). Esta madurez sexual neuroendocrina depende del sexo del
cordero. En las hembras, la disminucin de la sensibilidad que conduce a un aumento
de la LH se produce en aproximadamente 25-35 semanas de edad (Foster y Ryan,
1979; Claypool y Foster, 1990). Por el contrario, en los machos, la duracin de la
hipersensibilidad dura slo la mitad de este tiempo, y por cerca de 10-15 semanas de
edad, de alta frecuencia de pulsos de LH son expresados (Olster y Foster, 1986).
Mecanismos para
neuroendocrina

la

diferenciacin

sexual

de

la

funcin

reproductiva

En ambos la organizacin prenatal y la activacin postnatal del sistema reproductivo

neuroendocrino han sido examinados para entender cmo la funcin reproductiva
neuroendocrina los convierte en sexualmente diferenciados. Se han utilizado tres
enfoques: (1) evaluacin de los esteroides gonadales prenatales en el control postnatal
de la secrecin de gonadotropinas para comprender cmo surgen las diferencias de
sexo en la funcin neuroendocrina, (2) la investigacin de las diferencias sexuales en
respuesta a estmulos internos y externos que activan el sistema reproductivo
neuroendocrino despus del nacimiento, y (3) la comparacin de la secrecin de GnRH
y la neuroanatoma en machos, hembras y hembras prenatalmente androgenizadas
para descubrir una base anatmica de las diferencias de sexo en la funcin
reproductiva neuroendocrina.

Masculinizacin del cerebro

Ahora es evidente que las hormonas sexuales testiculares son los efectores principales
de la diferenciacin hacia un fenotipo masculino (revisado en Goy y McEwen, 1980).
Los esteroides sexuales tienen acciones distintas en el desarrollo del cerebro de sus
efectos en la pubertad y ms all. A diferencia de los efectos transitorios activacionales
de los esteroides en la edad adulta, la exposicin a estos esteroides durante un
perodo crtico en el desarrollo temprano produce cambios organizacionales en la
estructura y funcin del SNC (see Gorski 1985). El tamao del ncleo sexualmente
dimrfico del rea preptica en ratas descritos por Gorski et al. (1978) es tal vez el
ejemplo ms conocido de los cambios organizacionales en el SNC. Los cambios
funcionales asociados a los efectos organizacionales de los esteroides gonadales
incluyen masculinizacin de la conducta sexual y la desfeminizacin del pico de LH
(MacLusky y Naftolin, 1981). Dentro del amplio periodo crtico para la diferenciacin
sexual, cada rasgo sexualmente dimrfico se presume que tiene un perodo individual
de susceptibilidad a los esteroides (es decir, perodos individuales crticos) (Clarke et al,
1976; Christensen y Gorski, 1978; Gorski y Jacobson, 1981). Estos perodos crticos
ocurren antes del nacimiento en el ganado ovino y otras especies con largos perodos
de gestacin (por ejemplo, los primates y cerdos de guinea), en contraste, el cerebro se
vuelve sexualmente diferenciado principalmente en los primeros das despus del
nacimiento en ratas y otras especies con perodos de gestacin corta (Goy y McEwen,

1980). Como una estrategia experimental para estudiar cmo las hormonas esteroides
alteran la funcin neuroendocrina reproductiva, los machos pueden ser feminizados
privndolos de esteroides gonadales durante el perodo crtico o alternativamente, las
hembras pueden ser masculinizadas con esteroides exgenos. Ambos enfoques se
han utilizado en los roedores, en el que el perodo crtico es en gran parte postnatal,
para estudiar la diferenciacin sexual de la conducta sexual y el aumento de LH
(MacLusky y Naftolin, 1981). En ovinos, la castracin de los machos a los 30 das de
gestacin no es tcnicamente factible (145 das es el trmino). Sin embargo, la
administracin de esteroides para las hembras prenatales se ha usado para revelar
rasgos sexualmente diferenciados que estn determinados por las acciones de los
andrgenos prenatales, cuando los perodos crticos son para la diferenciacin sexual,
y que los esteroides estn involucrados (Short, 1974; Clarke et al, 1976;. Wilson y
Tarttelin, 1978).
Andrgenos prenatales antes de la pubertad neuroendocrina
Determinada inicialmente por Short (1974), y posteriormente refinada por Clarke et al.
(1976), la diferenciacin sexual en ovinos ocurre aproximadamente de los 30 a 100
das, de una gestacin de 145 das. Las hembras nacidas de madres tratadas con
testosterona mostraron masculinizacin de los genitales externos, postura al orinar y la
conducta, as como la alteracin de la funcin reproductiva indicada por la falta de celo,
la ovulacin espordica, y un mitigado pico de LH (Short, 1974; Clarke et al, 1976;.
Clarke y Scaramuzzi, 1978). Sin embargo, en corderos hembra gonadointactas
androgenizada, el momento de la madurez sexual no es fcilmente identificable. El
mecanismo de aumento de LH es a menudo silenciado, y la ovulacin es espordica.
Este problema se ha superado mediante el uso del modelo de esteroide-abrazadera
descrito anteriormente (datos que se ilustra en la figura. 1c). La secrecin pulstil de LH
en hembras gonadectomizadas tratadas con estradiol o hembras androgenizadas
proporciona una medida de la maduracin sexual neuroendocrina despejada por los
efectos de los esteroides sobre la oleada de LH en el ovario. La exposicin de las
corderas a la testosterona 30 a 86 das de gestacin mediante una inyeccin semanal
materna de 200 mg de cipionato de testosterona caus masculinizacin de los
genitales externos y desfeminizacin del pico de LH (Fig. 2b) (Wood et al., 1991a). La
exposicin a esta misma dosis en una etapa posterior de la gestacin (entre 89 das y
135 das de gestacin) no tuvo efecto (Herbosa y Foster, 1996). Estos resultados
confirman las conclusiones de los estudios anteriores por Ian Clarke y Roger Short
(corto, 1974; Clarke et al., 1976).
La figura. 2. Efectos del tratamiento con andrgenos en el tero en los genitales
externos, la maduracin sexual neuroendocrina, y el pico de LH en hembras. Columna
1: esquema del tipo de tratamiento de andrgenos. Columna 2: Seccin sagital
esquemtica a travs de los cuartos traseros de un cordero macho representativo,
hembra y hembra androgenizada que ilustra la posicin del pene, el escroto o la vulva.
Columna 3: concentraciones de LH en corderos gonadectomizados tratados con
estradiol. Las muestras se recolectaron dos veces por semana. Columna 4: respuesta
de LH a concentraciones de estradiol de la fase folicular ms de 60 h. La
androgenizacin ocurri durante todo el perodo crtico (Wood et al., 1991a). (a)

cordero normal. (b) Cordera tratados con altas dosis de testosterona a partir del da 30
al da 86 de la gestacin. (c) cordera normal. (d, e) Efecto de la etapa de desarrollo
(Wood et al., 1995). (d) Cordera tratados con testosterona desde el da 30 hasta el da
50 de la gestacin. (e) Cordera tratados con testosterona a partir del da 65 al da 85 de
la gestacin. (f-h) Efecto de la cantidad de testosterona (Kosut et al., 1997). (f) cordero
hembra tratadas con altas dosis de testosterona (200 mg semana-1). (g) cordero
hembra tratadas con dosis media de testosterona (80 mg semana-1). (h) Cordera
tratados con dosis bajas de testosterona (32 mg semana-1). (i) Efecto del tipo de
esteroide: hembras androgenizadas expuestos a altas dosis de dihidrotestosterona
(DHT) durante todo el perodo crtico (K. Masek, Wood R., y D. Foster, no publicado).

De gran inters fue el patrn de secrecin de LH en estas corderas gonadectomizadas,

tratadas con estradiol androgenizadas. Estaba claro que los andrgenos prenatales
avanzaron el inicio de la maduracin sexual neuroendocrina a 10 semanas de edad, lo
mismo que ocurre en los machos (Fig. 2a) (32 mg semana -1). (i) Efecto del tipo de
esteroide: hembras androgenizadas expuestos a altas dosis de dihidrotestosterona
(DHT) durante todo el perodo crtico (K. Masek, Wood R., y D. Foster, no publicado).
Esto proporcion, por primera vez, una explicacin para la activacin ms temprana de
las gnadas en los machos, es decir, que el incremento puberal de LH ocurre a una
edad joven en corderos macho debido a que el modo tnico de la secrecin de LH est
masculinizada por la testosterona en el tero. Esto proporcion, por primera vez, una
explicacin para la activacin ms temprana de las gnadas en los machos, es decir,
que el incremento puberal de LH ocurre a una edad joven en corderos macho debido a
que el modo de tnico de la secrecin de LH est masculinizado por testosterona en el
tero. Por otra parte, esta observacin sent las bases para investigaciones
subsecuentes de cmo los esteroides prenatales puede masculinizar y defeminizar el
control de los modos de tnicas y aumento de la secrecin de gonadotropina.
Masculinizacin diferencial de pico tnico de LH
En vista del concepto emergente que es el perodo crtico no una sola entidad, es
importante entender si los dos los modos de la secrecin de gonadotropinas tienen
requisitos nicos para la androgenizacin. Esto ha sido estudiado con respecto a la
etapa de desarrollo y la cantidad y tipo (andrgenos frente a estrgenos) de exposicin
a esteroides (Fig. 2).
Influencia de la etapa de desarrollo. El tiempo de exposicin a los esteroides contribuye
al tipo y grado de masculinizacin (Fig. 2d, e). La Administracin de andrgenos a las
madres durante 20 das durante la parte temprana del perodo crtico (das 30-50) se
compar con la que durante la porcin final del perodo crtico (das 65-85.; Wood et al,
1995). Estos dos tratamientos de andrgenos tuvo efectos muy diferentes en los
genitales externos, similares a los de estudios previos (Short, 1974;. Clarkeet al, 1976).
Las hembras expuestas a la testosterona durante la gestacin temprana posean un
pene y escroto vaco, mientras que las tratadas durante el desarrollo posterior fueron
normales. A pesar de las claras diferencias en su apariencia externa, la funcin
reproductiva neuroendocrina fue similar en los dos grupos de hembras
androgenizadas. En ambos grupos, la secrecin tnica de LH aument a las 18-20
semanas de edad, antes que en hembras normales, pero mucho ms tarde que lo hace
en los machos. Adems, estas hembras androgenizadas fueron capaces de responder
a la estimulacin de estradiol con un aumento en la secrecin de LH. Sin embargo, en
comparacin con las hembras normales, los picos de la LH en hembras
androgenizadas se retrasaron por varias horas. Estos resultados sugieren que es
posible hacer avanzar el incremento puberal en LH tnica significativamente sin
suprimir la oleada de LH. La consecuencia general es que la desfeminizacin completa
del pico de LH requiere una exposicin ms larga a la testosterona comparado con la
requerida para masculinizar la LH tnica.

El hallazgo de que la temporizacin de la oleada fue alterado, pero no suprimido

completamente, por la testosterona prenatal plantea la interesante posibilidad de que
ciertos tipos de infertilidad idioptica podra ser explicados por un sutil retraso del
desarrollo inducido en sincrona del mecanismo de pico preovulatorio con el desarrollo
folicular. Tal vez, en tal condicin, el mecanismo de aumento de GnRH ha reducido la
sensibilidad a la retroalimentacin estimuladora de estradiol, y el aumento se retrasa
hasta una fase avanzada de la fase folicular, lo que resulta en la ovulacin de un
folculo post maduro.
Influencia de la cantidad de esteroides. Adems de la etapa de desarrollo y la duracin
de la exposicin a andrgenos, la cantidad de testosterona en el tero es un
determinante importante de la masculinizacin postnatal (Fig. 2f-h). Por lo tanto, se
determin el efecto de dosis crecientes de la testosterona sobre la androgenizacin de
modos tnicos y oleada de la secrecin de LH (Kosut et al., 1997). Ovejas gestantes
recibieron inyecciones semanales de 200 mg, 80 mg o 32 mg de cipionato de
testosterona para la duracin del perodo establecido como crtico (30-90 das de
gestacin). Despus del nacimiento, la masculinizacin de los genitales externos fue
dosis dependiente de modo que las altas dosis de cipionato testosterona
masculinizaron completamente los genitales, mientras que dosis bajas de tratamiento
con andrgenos no tuvo efectos. Las dosis intermedias de andrgenos produjo una
masculinizacin moderada de los genitales. La masculinizacin de la secrecin tnica
de LH tambin mostr un efecto dosis-respuesta. LH tnica en ovejas tratadas
prenatalmente con altas dosis de andrgenos mayor a las 10 semanas, al igual que lo
hizo en los machos normales. Dosis media en hembras androgenizadas mostraron un
aumento de de LH tnica a las 16 semanas, mucho antes que en hembras control. LH
tnica se mantuvo a concentraciones basales en dosis bajas en hembras
androgenizadas hasta 25 semanas, de forma similar al caso en las hembras control (27
semanas). Sin embargo, ninguna de las hembras androgenizadas tratadas con dosis
alta o media de testosterona, y solamente dos de seis hembras expuestas a dosis
bajas de andrgenos, produjo una oleada de LH en respuesta a estradiol exgeno.
Este hallazgo sugiere que los mecanismos de desarrollo que organizan el sistema de
oleadas son ms sensibles que la secrecin tnica que a la cantidad de testosterona
expuesta en el tero.
Influencia del tipo de esteroide (andrgeno frente a estrgeno). La caracterstica
sorprendente de la diferenciacin sexual del SNC es que, en muchas especies, el
estradiol es un agente ms potente de 'masculinizacin' que es la testosterona
(MacLusky y Naftolin, 1981) (Fig. 2I). Presumiblemente, esto se debe a que la
testosterona se convierte en estrgeno localmente por la enzima aromatasa. La
testosterona tambin se puede reducir a dihidrotestosterona (DHT) por la 5-reductasa.
Debido a que la DHT no puede ser metabolizada a estrgenos, se considera que posee
una actividad andrognica pura. La DHT es sin efecto una diferenciacin sexual en la
mayora de los roedores (Whalen y Rezek, 1974; Korenbrot et al, 1975). Sin embargo,
hay evidencia creciente de especies con largos perodos de gestacin, incluyendo
cobayas y monos, que los andrgenos por s solos contribuyen a la masculinizacin de
la conducta sexual y la funcin neuroendocrina (G y van der Werff diez Borsch, 1975;
K. Wallen, comunicacin personal), aunque los estrgenos tambin desempean un

papel (Hines et al, 1987; Goy y Deputte, 1996). De hecho, la informacin preliminar de
un estudio en curso en la que La DHT se utiliz para masculinizar corderos hembra
indic que el incremento de LH puberal es avanzado a 8-10 semanas de edad, pero
que el sistema de oleada de LH est todava presente (K. Masek, V. Mehta , R. Wood, y
D. Foster, indito). Si este resultado se mantiene verdadero, plantea la interesante
posibilidad de que la masculinizacin del modo de tnico de la secrecin de GnRH
ocurra a travs de un mecanismo dependiente de andrgenos, mientras que la
desfeminizacin del modo de oleada es va estrgeno producido por aromatizacin de
la testosterona local. En conjunto, los estudios anteriores revelan que la
masculinizacin del modo de tnico de la secrecin de GnRH y de desfeminizacin del
modo de oleada de la secrecin de GnRH es diferencialmente sensible a
caractersticas de la seal de esteroides prenatal. En particular, parece que la
masculinizacin de la secrecin tnica de GnRH conduce a la pubertad temprana y se
logra mediante una relativamente breve, a una exposicin concentrada de andrgenos
antes del nacimiento, mientras que el pico de LH es defeminizado por bajas
concentraciones de estrgeno (convertidos de la testosterona) durante un perodo ms
largo de desarrollo fetal. La implicacin ms importante es que los mecanismos de
control tnico pulstil liberacin de LH son distintos de los que determinan la respuesta
de retroalimentacin positiva a estradiol. Sin embargo, los elementos neurales que
controlan la secrecin tnica y aumento de GnRH, todava no se han identificado.
Factores internos, externos y momento de la pubertad
En todas las especies, las seales internas se utilizan para garantizar que el
crecimiento apropiado se ha conseguido hasta el tiempo de la pubertad. En la mayora
de las especies, las seales externas relacionadas con factores estacionales o sociales
tambin se utilizan. El crecimiento es claramente importante en las ovejas, en el que la
duracin del da tambin se usa para el inicio de la pubertad en la secrecin tnica de
LH en la estacin apropiada (Foster, 1994).
Debido a que los corderos machos comienzan la maduracin sexual 20 semanas
antes que la hembra en desarrollo, lo hacen en una parte inferior del cuerpo, peso y
durante una estacin diferente. As, el crecimiento o fotoperodo, o ambos, requieren
tiempo para la pubertad y deben ser diferentes en oveja macho y hembra. Una forma
en que la exposicin prenatal a los esteroides, tiempos de maduracin sexual
neuroendocrino es estableciendo la sensibilidad postnatal a estos factores internos y
externos.
Crecimiento
La consideracin general es que la informacin sobre el crecimiento y el metabolismo
se transmiten por seales neurales va sangunea al SNC. Si estas seales somticas
indican que el crecimiento no es adecuado, de modo que la reproduccin pondr
excesivas demandas metablicas sobre el cordero joven, la maduracin sexual se
inhibe. Esto es comparable a la anorexia nerviosa en los seres humanos (Foster et al.,
En prensa). La alta frecuencia de secrecin tnica de LH inicia slo una vez, se logra
en una etapa adecuada del crecimiento. La identificacin de las sustancias exactas
utilizadas como seales, la ubicacin de los sensores, y las vas por los cuales se enva
esta informacin al sistema neurosecretor de GnRH son an desconocidos pero son de
considerable inters (Foster et al., En prensa). Es poco probable que cualquiera de
estas seales o sus vas sean sexualmente diferenciadas, pero hasta que alguno de
ellos ha sido determinado, esto no ser posible evaluar. En teora, la sensibilidad a las

seales metablicas podran diferir entre los dos sexos en ovinos, como se ha
demostrado en ratones (Hamilton y Bronson, 1985). Sin embargo, un estudio
comparativo de la restriccin del crecimiento y la realimentacin en corderos macho y
hembra sugiere una sensibilidad neuroendocrina equivalente a las seales metablicas
(Wood et al., 1991b). Este hallazgo indica que las diferencias sexuales en el
crecimiento y requerimientos metablicos para la pubertad no son los principales
factores determinantes de la aparicin ms temprana de la pubertad en los machos.

Fotoperiodo
Profundas diferencias sexuales en la sensibilidad a seales externas se han
identificado. Despus de alcanzar la etapa apropiada del crecimiento corporal, una
cordera debe asegurarse de que la actividad reproductiva se inicia durante la
temporada ptima de ao. Slo cuando ambos requisitos para la pubertad se cumplen
se puede exhibir madurez sexual (Foster et al., 1986). En Michigan, las ovejas (raza
Suffolk) nacidos en primavera alcanzan la pubertad en la otoo (aproximadamente a
las 30 semanas de edad), poco despus del inicio de la temporada adulta de
reproduccin (vase Foster et al., 1989). En contraste, los machos jvenes comienzan
la
espermatognesis
en
aproximadamente
10-15
semanas
de
edad,
independientemente de la temporada (Courot et al., 1975).
El factor estacional en la pubertad de las hembras es el fotoperiodo, ms
especficamente cuando la duracin del da largo disminuye a das cortos (Yellon y
Foster, 1985), como ocurre al aire libre despus del solsticio de verano (Fig. 1a, b). En
contraste, los carneros son relativamente insensibles a los cambios en el fotoperiodo
(Courot et al., 1975). De hecho, la pubertad incrementa las gonadotropinas en machos
nacidos en la primavera y comienza durante los das largos de verano (Olster y Foster,
1986), un fotoperiodo que normalmente inhibe la pubertad en la hembra (Ebling y
Foster, 1988).
Las diferencias sexuales en fotoperiodo tambin se ha descrito para los hurones (vase
Wood et al., 1991c). Sin embargo, en otras especies, los machos y las hembras ambos
son sensibles al fotoperiodo en la pubertad (por ejemplo, los hmsters Djungarian), o
ambos no son sensibles a los cambios en la duracin del da hasta despus de la
madurez sexual (por ejemplo, hmsteres sirios).
Esta diferencia sexual en la respuesta reproductiva al fotoperiodo en corderos jvenes
es el resultado de la accin organizativa de los andrgenos testiculares durante el
desarrollo fetal, como se evidencia por el momento de la madurez sexual en ovinos
hembras androgenizadas mantenidas bajo fotoperiodos controlados (natural simulado o
natural simulado o inverso (la fig. 3a, b)). Bajo un fotoperiodo natural simulado, la
secrecin tnica de LH aumenta en gonadectomizados, machos de 7 semanas tratados
con estradiol, cuando los das se alargan. En hembras normales tratadas de manera
similar, la madurez sexual ocurre a las 27 semanas cuando duracin del da disminuye.
El fotoperiodo inverso no tiene efecto en los machos, pero se retrasa la expresin de la
madurez sexual en hembras ms all de 32 semanas de edad. El tratamiento prenatal

de hembras con andrgenos, masculiniza la respuesta reproductiva al fotoperiodo y las

hace insensibles a los efectos inhibitorios de fotoperiodos largos; en estas hembras
androgenizadas bajo un simulado fotoperiodo natural invertido, LH aumenta a las 7
semanas, un tiempo similar al aumento de LH en los machos (Herbosa et al., 1995).
Los andrgenos masculinizan esta respuesta reproductiva al fotoperiodo slo durante
el perodo crtico, como lo demuestra la edad de la madurez sexual en las corderas
tratados con testosterona durante la mayor parte del perodo crtico (das 30-76), o
despus de la gestacin (das 89 a 135) cuando son criados bajo un fotoperiodo de da
(das largos constantes) normalmente inhibitorios para las hembras (Herbosa y Foster,
1996) (Fig. 3c). Al final del estudio (40 semanas), slo una de las siete hembras
normales tena en la pubertad un aumento de LH. En contraste, en todos los machos
hubo un aumento de la secrecin de LH en un promedio de 7 semanas. En hembras
androgenizadas durante el perodo crtico, un aumento sostenido de LH ocurri a las 17
semanas, ms tarde que en los machos normales, pero mucho antes del aumento en
las hembras control. Es posible que la exposicin para todo el perodo conocido como
crtico (das 30-90), en lugar de slo el 75% de l (das 30-76), habra resultado en una
masculinizacin completa de la respuesta al fotoperiodo y la pubertad incrementa por si
misma la edad como para los machos (Fig. 3a, b). El tratamiento con testosterona
despus del perodo crtico durante el ltimo tercio de la gestacin tuvo poco o ningn
efecto sobre la secrecin tnica de LH, slo tres de las ocho hembras haban sufrido
aumentos de LH. Estas hembras eran capaces de producir un aumento de LH en
respuesta a la estimulacin del estradiol, mientras que las expuestas durante el perodo
crtico no lo eran.
Aunque se ha hecho evidente que los esteroides contribuyen al momento de la
pubertad en corderos macho y hembra a travs de la diferenciacin sexual de los
requerimientos de fotoperiodo, no se sabe en qu lugar del cerebro se manifiestan
tales diferencias. Esto es porque hay una escasez de informacin sobre los
mecanismos neuronales a travs de la cual la informacin estacional es comunicada al
sistema reproductivo neuroendocrino en cualquier especie. Para usar los cambios en la
duracin del da, las ovejas jvenes y adultas adquieren una historia de fotoperiodo
construido sobre los cambios en el patrn circadiano de la melatonina pineal (Foster et
al., 1986). Sin embargo, est claro que las diferencias sexuales en fotoperiodo estn
relacionadas con la interpretacin del ritmo de la melatonina, y no a la secrecin de la
melatonina en s. Los ritmos de melatonina de corderos machos y hembras no son
diferentes (Claypool et al., 1989), a pesar del hecho de que los machos y las hembras
responden diferencialmente a los cambios en la duracin del da, cada uno de acuerdo
con sus propios requisitos particulares de fotoperiodo para la madurez sexual.

Efectos funcionales y anatmicos de los andrgenos prenatales en GnRH

neuronal

Investigaciones neuroanatmicas que complementan lo expuesto por estudios

fisiolgicos han comenzado a evaluar dnde y cmo los esteroides son percibidos por
el cerebro para inducir una reduccin temprana en respuesta a la retroalimentacin de
los esteroides y defeminizar a el pico de LH. La diferenciacin sexual de los circuitos
neurales que controlan la funcin reproductiva neuroendocrina, sin duda, se incluyen
las neuronas que responden a los esteroides, que transducen seales de esteroides, y
las neuronas de GnRH, que son los efectores principales de control de gonadotropina.
Sin embargo, la informacin sobre los grupos de receptores de esteroides que
contienen las neuronas que controlan la funcin neuroendocrina y su vinculacin a las
neuronas GnRH es limitado.
Por lo tanto, los estudios hasta la fecha se han centrado en el patrn de secrecin de
GnRH y la neurona GnRH en s.
Secrecin de GnRH
Durante mucho tiempo se ha asumido que la incapacidad de oveja macho para
producir un aumento de LH deriva de la ausencia de un mecanismo estimulador de
retroalimentacin y la falta de un aumento de GnRH. Hasta hace poco tiempo, esta
hiptesis no pudo ser probada directamente, ya que no fue posible medir la secrecin
de GnRH en machos en respuesta a la estimulacin aguda de estradiol. Mtodos para
accesar a la vasculatura portal hipofisaria se han desarrollado (Caraty et al., 1994) y
adaptado para su uso en el cordero (Herbosa et al., 1996), lo que nos permiti poner a
prueba la hiptesis de que la diferencia de sexo en el patrn de secrecin de estradiol
estimulada por GnRH se establece por los esteroides gonadales durante el desarrollo
prenatal. El sistema portal Pituitaria-GnRH se monitore en los machos, hembras y
androgenizadas. Como se esperaba, en cada hembra normal, hubo un aumento
inequvoco en GnRH despus del tratamiento con estradiol, y cada aumento de GnRH
fue acompaado por un aumento concomitante de la LH (vase la fig. 1d izquierda para
el femenino representante). En marcado contraste, en los machos, no hubo un
aumento sostenido de la GnRH en respuesta al estradiol (derecha Fig. 1d). El
tratamiento con testosterona en el tero claramente modific el patrn de secrecin de
GnRH en la medida en que no se produjeron picos de la LH en las hembras
androgenizadas, lo que sugiere que la unidad hipotalmica que estimula aumento de
LH no es funcional en oveja macho y que este mecanismo es organizado por la
testosterona prenatalmente, probablemente a travs de la conversin a estradiol.

La figura. 3. Efecto del fotoperiodo en la maduracin sexual neuroendocrina en los corderos. El comienzo de la
pubertad aumento en la secrecin tnica de LH en cada cordero gonadectomizado y tratado con estradiol
(a)
En fotoperiodo natural simulado, la pubertad increment LH en hembras normales ocurri durante la disminucin de
duracin del da mientras que, en las hembras androgenizadas, esto ocurre al mismo tiempo, como en los machos
normales. (b) en fotoperiodo natural simulado retras la pubertad y hubo aumento de LH en las hembras, pero no en
los machos o en las hembras androgenizadas. (c) Das largos constantes retrasan la maduracin sexual en hembras
normales y en hembras androgenizadas expuestas a los andrgenos despus del periodo crtico de diferenciacin
sexual (final de la gestacin, los das 89 a 135). Para las hembras masculinizadas durante la parte temprana del
perodo crtico (das 30-76), la pubertad incremento LH y es intermedia entre la de los machos normales y hembras.
Redibujado de Herbosa et al., 1995 (a, b) y Herbosa y Foster, 1996 (c).

La figura. 5. Las diferencias sexuales en la funcin reproductiva neuroendocrina en corderos: hiptesis actuales. Esteroides del
testculo fetal actan en las neuronas que responden a los esteroides en el cerebro masculino para reducir neuronas sinpticas de
GnRH. Especficamente, los estrgenos eliminan conexiones estimuladoras responsables de provocar el pico preovulatorio de
GnRH, mientras que los andrgenos (y posiblemente estrgenos tambin) reducen las sinapsis inhibidoras que determinan la
capacidad de respuesta fotoperiodo postnatal. Sin embargo, los corderos de ambos sexos, son sensibles a las seales sobre el
crecimiento y el metabolismo.

Neuroanatoma del GnRH.

Distribucin y morfologa. Las neuronas de GnRH son pocas en nmero y estn muy
dispersos en todo el rea preptica, la banda diagonal de Broca y, en menor medida,
en el hipotlamo anterior (Fig. 4 un d-). Pocos cuerpos celulares estn presentes en el
ncleo arcuato o el ncleo ventromedial cerca al sitio de la liberacin de GnRH en la
eminencia media. A diferencia de las de la mayora de otras especies, las neuronas
GnRH en ovejas con frecuencia son clulas multipolares con extensos procesos de
ramificacin. No hay diferencias de sexo en el nmero, ubicacin, o la morfologa de las
neuronas GnRH entre los fetos de oveja macho y hembra (Wood et al., 1992), como es
el caso de hembras, ratas y monos. Adems, la anatoma del sistema de GnRH en la
mitad de la gestacin es similar a la de ovejas adultas (Lehman et al., 1986).
Activacin inducida por el estradiol. Los esteroides prenatales evitan la activacin de
las neuronas de GnRH en respuesta al estradiol, tal vez por la disociacin de la
neurona GnRH de entradas estimulatorias de neuronas sensibles a estrgenos. Esto
fue probado por la comparacin de colocalizacin Fos con GnRH en los cerebros de
machos, hembras, y hembras androgenizadas en respuesta a un aumento de la dosis
de induccin de estradiol (Wood et al., 1996). Fos, el producto de protena del gen
temprano inmediato, c-fos, puede ser detectada inmunocitoqumicamente en el ncleo
celular de las neuronas individuales despus de la estimulacin estradiol, y se presume
que reflejan aumento de la actividad de las neuronas. Las diferencias de sexo en la
activacin de las neuronas de GnRH en ratas y hurones se han descrito utilizando Fos
como un marcador de la actividad neural (Hoffman et al, 1990;.. Lambert et al, 1992).
En corderos, los esteroides inducen Fos por a lo largo de la inmunotincin de regiones
lmbicas en respuesta a los esteroides en todos los corderos, independientemente de
su exposicin a los andrgenos prenatales. Sin embargo, la colocalizacin de Fos con
GnRH fue sexualmente dimrfico. En los cerebros de corderos hembras control
despus del pico de la oleada de LH inducida por los estrgenos, Fos se expres en el
67% de las neuronas de GnRH, similar a un informe anterior por Moenter et al. (1993).
Por el contrario, en machos y hembras androgenizadas, slo el 2% de las neuronas
GnRH fueron Fos -positivas.
Entrada sinptica
Conclusiones
Estos estudios en ovejas se aaden a una creciente literatura que describe el proceso
mediante el cual el individuo en desarrollo se diferencia a un fenotipo masculino o
femenino. Segn los conocimientos actuales, la pubertad en machos depende slo de
crecimiento. Esto permite que el macho joven pueda activar la maduracin testicular a
una edad temprana para empezar a competir para las hembras. La hembra sin importar
lo rpido que crezca, es en ltima instancia depende de las seales de duracin del da
para iniciar una gestacin de 5 meses tal que el nacimiento y la lactancia ocurran en la
primavera. Considerando que las necesidades de crecimiento para la pubertad puede
ser similar en machos y hembras, inhibicin del fotoperiodo en la secrecin de
gonadotropinas en las hembras enmascara la expresin temprana de la maduracin

sexual. Una caracterstica importante del modelo de oveja es que la exposicin a

andrgenos durante un perodo crtico para la diferenciacin sexual del cerebro altera
la sincronizacin de la expresin de la madurez sexual por la disminucin de la
dependencia de fotoperiodo (Fig. 5). Adems, y lo ms probable a travs de un
mecanismo separado que involucra una va de estrgeno, la testosterona prenatal
altera el tiempo y la funcin del mecanismo de aumento de la GnRH. Los mecanismos
celulares potenciales para la accin de esteroides prenatal incluyen alteracin en la
conectividad de los elementos neurales que controlan la liberacin de GnRH.

Momento de la pubertad en corderos macho y hembra nacidos en primavera en

relacin con la edad y el fotoperiodo. (a) Curva Anual fotoperiodo en Ann Arbor,
Michigan. (b) ndices de pubertad, maduracin de las gnadas intactas en machos y
hembras. (c) las concentraciones circulantes de LH de machos y hembras
gonadectomizados tratados con estradiol () y femenino () corderos. (d) concentraciones
circulantes de GnRH y LH durante 48 h a partir de un cordero representante hembra
(izquierda) y cordero macho (derecha) en respuesta a un aumento de la dosis de
induccin del estradiol. Redibujado de Claypool y Foster, 1990 (a, b) y los datos de
Kosut et al., 1997 (c) y Herbosa et al., 1996 (d)