REA DE BIOLOGA CELULAR

DEPARTAMENTO DE BIOLOGA AMBIENTAL Y SALUD PBLICA

FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES
UNIVERSIDAD DE HUELVA

ESTRS OXIDATIVO

Concepto de estrs oxidativo.

Formacin de especies reactivas de oxgeno.
Efectos del estrs oxidativo sobre la fisiologa celular.
Mecanismos defensivos celulares frente al estrs
oxidativo.

La paradoja del oxgeno

La vida sobre la tierra ha evolucionado dando lugar a
organismos aerbicos, que no pueden sobrevivir sin el
oxgeno, ya que es clave para sus procesos metablicos.
Sin embargo, cuando este oxgeno es activado se
convierte en txico para estos organismos. El exceso de
formas activas de oxgeno conduce al llamado
ESTRS OXIDATIVO

Algunas enfermedades asociadas al estrs oxidativo

Activacin del Oxgeno

La estructura electrnica del
oxgeno hace que sea susceptible
de reducciones parciales,
producindose Especies
Reactivas de Oxgeno (EROs)

GENERACIN DE LAS ESPECIES REACTIVAS DE OXIGENO (1)

GENERACIN DE RADICAL
SUPERXIDO (O2.-)

GENERACIN DE PERXIDO
DE HIDRGENO (H2O2)

Origen: Dismutacin del superxido

(espontnea o catalizada por SOD)

Origen: Reduccin enzimtica de O2

ORIGEN
No enzimtico
Metales de transicin
Tioles, quinonas, flavinas
Hemo-, mioglobina

Enzimtico
Xantina y aldehido oxidasa
Citocromo P-450 ORasa
NADPH oxidasa (macrfagos)

GENERACIN DE LAS ESPECIES REACTIVAS DE OXIGENO (2)

GENERACIN DE RADICAL HIDROXILO (HO.)
Es la especie ms oxidante: afecta al ADN, protenas, lpidos...
- Roba protones:
- Se une a dobles enlaces (por ej. G insaturados)

Origen: Reaccin de Haber-Weiss

Origen: Reaccin de Fenton

GENERACIN DE LAS ESPECIES REACTIVAS DE OXIGENO (3)

GENERACIN DE RADICALES ORGNICOS (R, RO, ROO)

Estos radicales se producen cuando una ERO ataca a molculas

orgnicas (lpdos insaturados en particular), lo que produce
formas reactivas de estas molculas, que pueden a su vez daar a
molculas vecinas, en una reaccin en cadena.

Generacin de EROs en compartimentos celulares (1)

Las EROS se pueden originar en cualquier
compartimento celular como resultado
normal de su fisiologa.

GENERACIN DE ROS
EN RETCULO ENDOPLSMICO

GENERACIN DE ROS EN MITOCONDRIAS

Generacin de EROs en compartimentos celulares (2)

En clulas
vegetales, es
frecuente la
generacin de EROS
en los cloroplastos,
durante el proceso
fotosinttico,
aunque existen
numerosos
mecanismos
defensivos para
contrarrestar este
estrs oxidativo de
origen fisiolgico.

Equilibrio Oxidantes-Antioxidantes
Las especies reactivas del
oxigeno (EROs) se producen
normalmente en las clulas
como producto del
metabolismo celular
La concentracin de EROS
es finamente controlada por
accin de los antioxidantes
Si un agente estresante induce un aumento en la produccin de EROs, este
equilibrio puede romperse causndose daos en las estructuras celulares
Los daos sern reparados por mecanismos
celulares especficos. Si no se recupera el equilibrio
se producirn disfunciones que pueden desembocar
en la muerte celular.

Dao Oxidativo
Lpidos

Protenas

EROs
ADN

Otras Biomolculas

Reaccin en cadena de
peroxidacin
Alteraciones
estructurales. Estructura
1, 2 y 3
Deleciones, roturas y
uniones a protenas
Pigmentos fotosintticos
Azcares

Ejemplo: dao por EROs en una membrana celular.

SECUENCIA

Inicio de la peroxidacin por

ataque de un radical X.
Formacin de un radical
peroxilo por oxigenacin
Aproximacin del radical
peroxilo y el tocoferol
Formacin de un
hidroperxido; regeneracin
del tocoferol
Regeneracin del ascorbato
por sistemas enzimticos

A MEDIDA QUE SE PRODUCE

EL DAO SE ACTIVAN LOS
SISTEMAS DE DEFENSA !

CITOTOXICIDAD Y DAOS OXIDATIVOS

PRODUCIDOS POR EL ATAQUE DE EROs:
EVOLUCIN TEMPORAL

(C)

(D)

(A) En fracciones de segundo...

EROs atacan a lpidos de
membrana, activando el ciclo GSH.
Se genera GSSG que puede formar
disulfuros mixtos con protenas. Las
ROS pueden atacar directamente a
protenas, lpidos, carbohidratos y
cidos nucleicos.
(B) Segundos despus... Cambia el
potencial de membrana, el reciclado
mitocondrial, se eleva el NADPH,
disminuye el ATP, se produce
xantina y nuevos EROs (por xantina
oxidasa). Disminuye actividad
glucoltica. Se estimula la
actividadad poli(ADP-ribosil-)
polimerasa para reparar el ADN:
disminuyen los niveles de NAD+, y
se altera el estado energtico de la
clula

En una hora... Disminuye la capacidad de reparacin del ADN, disminuye el transporte de Ca+ al
exterior celular. El aumento intracelular de calcio estimula proteasas y afecta al citoesqueleto.
Tambin se afecta el equilibrio K+/Na+
La consecuencia es... Prdida de integridad celular (por disfuncin metablica), burbujeo (por daos
en citoesqueleto), daos mutagnicos (por daos en ADN), y apoptosis o necrosis (por elevacin del
calcio intracelular)

Mecanismos de defensa
Superxido Dismutasa

Enzimas

Catalasa
Peroxidasas
Etc.

Ascorbato
Glutatin

Antioxidantes

Coenzima Q
Vitamina E
Etc.

Los
antioxidantes
pueden, en
algunos casos,
reaccionar
directamente
con las EROs,
o servir de
sustrato de
enzimas
defensivas.

Superxido dismutasa (SOD)

Acta sobre el radical superxido,
que proviene de la primera reduccin
del oxgeno.
Elimina el anin superxido pero
como producto se obtiene el perxido
de hidrgeno.

Existen 3 tipos de SOD segn el metal que usen como cofactor: Cu/Zn, Mn y Fe.

Catalasa
Elimina el perxido de hidrgeno sin necesidad de un
agente reductor.

Su Km es relativamente baja, sin embargo su Vmax es muy

alta. Por lo que slo es activa cuando se encuentran altas
concentraciones de perxido de hidrgeno.

Peroxidasas
Catalizan las
reacciones

H2A

H2O2

A + 2H2O

H2A

ROOH

A + ROH + H2O

Necesitan un agente reductor para llevar a cabo su reaccin

(H2A: ascorbato, glutatin, etc..)

Funciones
a) Oxidan compuestos en reacciones con un sentido fisiolgico sin
relacin con el estrs oxidativo (ej. lignificacin de las paredes
vegetales)

b) Eliminar perxido de hidrgeno u otros radicales orgnicos,

derivados de procesos de estrs oxidativo.
Existen peroxidasas que son capaces de realizar ambas
funciones

Antioxidantes
Son molculas con capacidad antioxidante per se que
pueden reaccionar directamente con las EROs
eliminndolas o inactivndolas.
Es un tripptido (GluCys-Gly)

Glutatin

Su funcin antioxidante
es
debida
al
grupo
sulfhidrilo (-SH) de la
cistena

Puede reaccionar con:

O2

*OH

Radical

Radical

Superxido

hidroxilo

1O
2
Oxgeno
singlete

* El glutatin es una molcula

multifuncional en plantas y
animales. Adems de su accin
antioxidante, participa en el
equilibrio redox general de la
clula, transporta azufre, etc.

CIDO ASCRBICO
El cido ascrbico es la molcula
antioxidante ms abundante en las
plantas. Se sintetiza en la
mitocondria, aunque est presente
en todos los compartimentos
celulares. Casi todos los animales
pueden sintetizarlo, excepto los
seres humanos y alguna otra
excepcin.
La forma reducida del cido ascrbico (ASC) inactiva directamente a las
EROs, o acta como sustrato de enzimas antioxidantes. Cuando el ASC se
oxida, se forman sus derivados MDHA y DHA.

INTERACCIN DE ANTIOXIDANTES Y ENZIMAS DEFENSIVAS

(Ejemplo: clulas vegetales)
Se observa un conjunto de reacciones catalizadas por una variedad de
enzimas, lo que explica la complejidad de la respuesta de defensa celular.

Ciclo de Halliwell-Asada