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El Cuaderno N 70
La biotecnologa y el ciclo biolgico de las plantas
Conocer para mejorar
Uno de los logros de la biotecnologa moderna es el mejoramiento de cultivos a travs de la
transferencia de caractersticas especficas y tiles, de manera predecible y controlable. Para lograrlo
es necesario entender cules son y cmo estn regulados los mecanismos que determinan la expresin
de esas caractersticas a lo largo del ciclo de las plantas.
El conocimiento del ADN, la comprensin del proceso por el cual los genes se expresan en funciones o
caractersticas, y el desarrollo de las tcnicas de transformacin gentica ha permitido en las ltimas
dcadas la produccin de plantas con caractersticas agroforestales de importancia econmica como lo
constituyen la tolerancia a herbicidas, y la resistencia al estrs bitico (insectos, hongos, virus y
bacterias) y abitico (salinidad, sequa, altas y bajas temperaturas, etc.). Tambin pueden ser
modificadas caractersticas relacionadas con el crecimiento y el desarrollo de las plantas, como la
maduracin de semillas, frutos y tubrculos, la diferenciacin de granos de polen, la arquitectura de la
planta, la floracin y la eficiencia fotosinttica, entre otras.
Actualmente, existen muchos proyectos destinados a descubrir los genes involucrados en el
crecimiento, reproduccin y desarrollo, su funcin y regulacin, y cuyos resultados podrn ser
aplicados en el mejoramiento vegetal mediante tcnicas de ingeniera gentica.
Crecimiento y desarrollo de las plantas
Desde la formacin de la cigota hasta la muerte de un individuo (ciclo de vida) ocurren cambios
cualitativos y cuantitativos que constituyen su desarrollo y que acompaan al crecimiento.
Durante el crecimiento de una planta se producen muchos cambios morfogenticos y fisiolgicos,
sujetos a un control complejo de factores internos y externos. Su manifestacin ms visible ocurre
cuando ese individuo pasa del estado vegetativo al reproductivo.
Los cambios morfogenticos que ocurren durante el crecimiento y desarrollo de una planta estn
sometidos a tres tipos de control:
a)
control intracelular o gentico: toda clula de un ser vivo contiene la informacin gentica
necesaria para originar un individuo similar. La expresin de esa informacin est controlada por la
actividad de los genes.
b) control intercelular: es ejercido por las hormonas, las cuales por su accin a distancia determinan
interacciones celulares que se manifiestan como fenmenos de correlacin.
"El Cuaderno de Por Qu Biotecnologa" es una herramienta didctica creada y desarrollada por el equipo pedaggico
del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa. Su reproduccin est autorizada bajo la condicin de que se aclare la
autora y propiedad de este recurso pedaggico por parte del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa.
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c)
control extracelular o ambiental: es el que ejercen los factores ambientales como luz (intensidad,
duracin y calidad), temperatura, etc.
En la mayora de los casos, crecimiento y desarrollo se cumplen en forma armnica y paralela, es decir
que la planta se desarrolla a medida que crece. Sin embargo, no siempre ambos procesos mantienen el
mismo ritmo. En las plantas efmeras (completan su ciclo vital en un ao) puede observarse un
desarrollo muy rpido que va acompaado por escaso crecimiento. Por ejemplo las semillas de algunas
plantas del desierto germinan luego de una lluvia de relativa intensidad y forman sus frutos antes que
el suelo est nuevamente seco. Durante este ciclo que puede alcanzar 10-15 das alcanzan a formar
hojas y su tamao no supera los 5-7cm. El caso opuesto puede observarse en algunas conferas en las
cuales el cambio de una etapa del desarrollo (perodo juvenil) a otra (perodo reproductivo) puede
demorarse varios aos llegando el individuo a alcanzar gran tamao.
Un repaso del ciclo de vida en las plantas
A diferencia de los animales, el ciclo de las plantas presenta una alternancia de generaciones con
diferente ploida (nmero de juegos de cromosomas por clula), es decir haploides y diploides.
Adems, las plantas tienen fases multicelulares haploides (n = mitad de la dotacin cromosmica de la
especie) y fases multicelulares diploides (2n = dotacin completa de cromosomas). Estas fases estn
delimitadas por el proceso de meiosis que da origen a las clulas sexuales, y por la unin de las gametas
en la fecundacin.
Cuando madura, una generacin forma sus propias clulas
reproductivas por el proceso de meiosis. Si las clulas
reproductivas son esporas, la generacin que las origin se llama
esporoftica, en cambio si origina gametas se denomina generacin
gametoftica. Los conjuntos de clulas vegetativas, originadas por
mitosis a partir de una determinada clula reproductiva (espora o
cigota) constituyen las generaciones.
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Se forma un gametofito masculino, los granos de polen, donde se desarrollan las gametas masculinas, y
un gametofito femenino que es el saco embrionario donde se desarrollan los vulos. La fertilizacin
ocurre cuando el polen llega al estambre de la flor. La fecundacin en las angiospermas es doble:
dentro de los granos de polen se forman dos gametas masculinas, una fecunda la gameta femenina u
ovoclula, formando la cigota, la otra gameta masculina se une al ncleo del endosperma (2n) ubicado
dentro del saco embrionario, formando el endosperma o sustancia de reserva de la semilla. Cuando las
gametas haploides se unen y forman una cigota se reinicia una nueva generacin esporoftica, diploide.
La generacin esporoftica puede ser mantenida en estado de latencia protegido por la capa de la
semilla.
Ciclo de vida en una gimnosperma
En las gimnospermas (planta con semilla desnuda), la generacin esporoftica tambin est
representada por la formacin de una planta a partir de la germinacin de una semilla. Esta planta
formar estructuras reproductivas cnicas masculinas y femeninas, donde se forman las microsporas
que dan origen a los granos de polen y las megasporas que forman a los vulos.
Se resume la alternancia de generaciones. En las
Gimnospermas la planta es el esporofito. En el cono
masculino y femenino del esporofito se producen las
esporas, que a su vez generan los gametofitos (masculino
y femenino) que finalmente se diferencian en las
respectivas gametas. La semilla es producto de la fusin
de las gametas.
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El entendimiento de la relacin entre las generaciones y su importancia en el desarrollo de las plantas
es un paso necesario en los proyectos de mejoramiento vegetal.
Reproduccin sexual
La fecundacin cruzada genera variabilidad gentica de las poblaciones mediante la mezcla de genes.
Esta ventaja slo existe si hay cruzamiento con otro organismo que aporte una dotacin de genes
diferente, no as en la autofecundacin cuando se combinan los mismos genes. La fecundacin
cruzada es tradicionalmente aprovechada por los fitomejoradores para introducir nuevas
caractersticas en las plantas. En aquellos casos en los que las barreras reproductivas generan
incompatibilidad sexual y por lo tanto una limitante en los cruzamientos, se utilizan tcnicas de
polinizacin artificial y rescate de embriones mediante cultivo in vitro de modo que resulten en
individuos normales y frtiles.
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en la produccin comercial de plantas. Muchos ctricos y pastos comerciales se propagan
eficientemente por este mtodo.
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Modificacin del ciclo de floracin y senescencia. Estas aplicaciones son muy importantes, por ejemplo,
en forrajeras perennes donde el crecimiento de las caas florales, la floracin y senescencia
disminuye el valor nutritivo. La calidad del forraje podra mejorarse por lo tanto inhibiendo la
produccin de caas florales que son poco digeribles o retardando la senescencia. Se han
informado modificaciones en el tiempo de floracin a travs de la regulacin de la expresin de
genes involucrados en la iniciacin del meristema floral.
Induccin de apomixis. Esta forma de reproduccin constituye una herramienta nica para desarrollar
cultivares superiores y preservar combinaciones hbridas indefinidamente. Esto permitir a los
agricultores aprovechar parte de los granos de una planta hbrida como simiente para la siguiente
siembra. Sin embargo la transformacin de cultivares sexuales con genes que controlen la apomixis es
an hipottica ya que la identificacin de esos genes an no se ha logrado. El desarrollo de las tcnicas
de biologa molecular harn posible en un futuro la comprensin del mecanismo de la apomixis, as como
su transferencia a especies de inters.
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Retardo en la maduracin de frutos. El primer cultivo OGM en comercializarse en USA fue un tomate
de maduracin retardada obtenido por la tcnica de antisentido al que se denomin Flavr Savr, y
fue aprobado para consumo en 1994. Estos tomates maduran con ms lentitud por lo que pueden
permanecer en la planta por ms tiempo y adquirir mejor sabor, en comparacin con las variedades
comerciales que se cosechan cuando estn verdes.
La maduracin de un fruto est relacionada con el reblandecimiento de las paredes celulares, ms
precisamente con la degradacin de la pectina (un polisacrido que da rigidez a la pared celular), por la
enzima poligalacturonasa. La tcnica del antisentido consiste en introducir el gen de esta enzima pero
en sentido inverso, de modo que el gen es inhibido. En consecuencia los frutos resultaron ms
resistentes a la maduracin y al movimiento durante el transporte.
Plantas con esterilidad masculina. Se han obtenido plantas macho estriles de tabaco y canola, con un
gen que provoca esterilidad junto a un promotor que direcciona la expresin del gen en la regin de las
anteras. La expresin del gen impide el desarrollo normal del polen y en consecuencia la esterilidad
masculina. Las produccin de vegetales con esterilidad masculina impiden la polinizacin cruzada y la
formacin de hbridos menos valiosos, mientras que posibilita la produccin de hbridos de alto valor
mediante cruces dirigidos
Reduccin en la altura de la plantas. Se demostr que regiones especficas de un gen de la bacteria
Agrobacterium rhizogenes son responsables del bajo porte de las plantas que son transformadas con
este gen, ya que reducen los entrenudos. El potencial de utilizacin de este gen en la reduccin de la
altura de plantas de inters agronmico est siendo estudiado.
Existen otros proyectos de mejoramiento vegetal basados en:
a)
estudios genticos y moleculares de los procesos que regulan la formacin del vulo, el saco
embrionario, y los gametos femeninos tanto en plantas modelo ( Arabidopsis thaliana) como en
plantas de inters agrcola (maz y papa);
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ACTIVIDADES
Actividad 1. Crucigrama. Repaso de conceptos
Completar el crucigrama a partir de los conceptos trabajados en el Cuaderno. Una vez completado,
definir el trmino que se forma en la columna marcada.
Definiciones:
1.
FECUNDACION
2.
DIPLOIDE
3.
GINECEO
4.
POLEN
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5.
Estructura de la generacin haploide del ciclo de vida de una angiosperma, donde se desarrollan las
gametas.
GAMETOFITO
6.
Cambios que ocurren en un individuo durante su ciclo de vida y que acompaan el crecimiento.
DESARROLLO
7.
ESPOROFITO
8.
FLAVRSAVR
9.
Mtodo de reproduccin por el cual se obtienen plantas genticamente iguales a la planta madre a
travs de la propagacin por semilla sin que haya ocurrido fecundacin de la gameta femenina
APOMIXIS
10. Estructura o clula que contiene la mitad de la cantidad de cromosomas propias de la especie.
HAPLOIDE
11. Tecnologa de ingeniera gentica utilizada para inhibir la expresin de un gen.
ANTISENTIDO
Resolucin del crucigrama:
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Ciclo de vida: perodo y procesos que ocurren desde la formacin de la cigota hasta la muerte de un
individuo, durante el cual ocurren cambios cualitativos y cuantitativos que constituyen su desarrollo, y
que acompaan al crecimiento. Es un proceso peridico que comienza y se repite de una generacin a la
siguiente.
Actividad 2. Ciclo reproductivo de las plantas
El siguiente esquema representa el ciclo de vida de una planta angiosperma. Completar el esquema a
partir de las consignas que se enumeran a continuacin.
Nota: en azul se incluyen las respuestas.
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d. Indicar cul de las estructuras representa la planta y cul representa la estructura
multicelular dnde se forman las gametas.
Las gametas se forman en el gametofito que est en las flores de la planta (esporofito).
e. Indicar en qu momento del ciclo se realiza la fecundacin y la meiosis.
La fecundacin ocurre entre las gametas para formar la cigota (y luego el embrin). La meiosis
ocurre en el gametofito y da origen a las gametas.
Actividad 3. Reproduccin sexual y reproduccin asexual
A partir del cuadro que figura a continuacin se propone establecer similitudes y diferencias entre los
principales aspectos de la reproduccin sexual y la asexual.
Reproduccin sexual
Reproduccin asexual
2 o 1 (en organismos
hermafroditas)
Formacin de gametas
NO
Etapa de Fecundacin
NO
Formacin de la cigota
S, por mitosis
Animales, plantas
Cantidad de progenitores
Explicar por qu desde el punto de vista evolutivo, se considera que la reproduccin sexual
ofrece ms ventajas que la asexual.
A qu se denomina Apomixis?
Es un mtodo de reproduccin por el cual se obtienen plantas genticamente iguales a la planta madre a
travs de la propagacin por semilla sin que haya ocurrido fecundacin de la gameta femenina. Es decir,
un modo de reproduccin asexual por el que se produce progenie del vulo sin fecundar. Por lo tanto,
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las semillas contienen embriones cuyo origen es totalmente materno y se generan clones de la planta
materna (partenognesis).
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- Cmo afectara esta modificacin gentica la funcin de inters en la planta?
Se podra modificar el perodo de floracin de cultivos importantes econmicamente y de esta
forma adaptarlo a ambientes diferentes a sus hbitats naturales. De esta forma, la produccin de
alimentos a partir de cultivos vegetales no estara limitada a determinadas estaciones o regiones del
mundo.
Material de consulta
Biologa. Ciencia que estudia la estructura de los seres vivos y de sus procesos vitales.
Biotecnologa y mejoramiento vegetal.
biotecnologa es un rea multidisciplinaria, que emplea la biologa, qumica y procesos, con gran uso en
agricultura, farmacia, ciencia de los alimentos, ciencias forestales y medicina.
Cuaderno 71
ACTIVIDADES
Actividad 1: Comprensin de los conceptos
Se sugiere realizar la siguiente actividad que ayudar a rever y comprender el tema abordado,
colocando V o F en las afirmaciones:
1.
2.
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c) a pesar de ser ms seguras, las vacunas de microorganismos muertos poseen una
efectividad inferior respecto a las de organismos vivos atenuadas
la opciones a) y c) son verdaderas.
3.
a) Plsmidos en los que se introduce la pequea fraccin del material gentico del patgeno contra
el que se pretende inmunizar.
b) Bacterias recombinantes con genes inofensivos de organismo patgenos.
c) Microorganismos patgenos cuya virulencia ha sido atenuada al eliminar los genes de virulencia
de un agente infeccioso manteniendo la habilidad de provocar una respuesta inmune.
d) Subunidades de protenas del patgeno producidas en bacterias o levaduras.
todas son correctas
4.
tipo:
a) inactivada
b) de ADN
c) de virus vivo recombinante
d) de subunidades
la opcin d) es verdadera
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Relacionar con la interaccin entre seres vivos y con los beneficios de esta interaccin en la
evolucin de las especies.
3. Qu relacin se puede establecer entre los genes de las plantas y las caractersticas de
sus ptalos?
La pregunta hace referencia a la relacin gen / protena / caracterstica. Ms precisamente al
hecho de que los genes son la porcin de ADN que codifican para que se sinteticen las protenas, las
cuales a su vez determinan las caractersticas que manifiesta el organismo.
4. Explicar cul fue el procedimiento empleado para obtener claveles azules por ingeniera
gentica.
Agregado por ingeniera gentica de genes de sntesis del pigmento delfinidina obtenidos (clonados
a partir) de las flores de pensamiento.
5. Para lograr la madurez retardada de flores una vez cortadas de la planta se expres una
versin antisentido del gen que codifica para la enzima ACC oxidasa. Explicar en qu ruta
metablica interviene la enzima ACC, cul es el resultado de la expresin antisentido del
gen y cmo influye esto en la maduracin de la flor.
La enzima interviene en la ruta de sntesis del etileno responsable del marchitamiento de la flor (y
tambin de frutos); la expresin antisentido del gen que codifica para esta enzima inhibe su
fabricacin y esto impide la sntesis de etileno, y en consecuencia del marchitamiento.
Actividad 2. Flores de colores casera
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4. Luego, cambiar de florero y colocar la flor en agua limpia o en soluciones con diferentes pH.
5. Dejarla en reposo durante varias horas y anotar las observaciones.
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rojos o naranjas. Suntory invirti 27,8 millones de dlares en el desarrollo de rosas, claveles y otras
flores azules por ingeniera gentica.
Actividad para el anlisis de la Novedad A):
A partir de la lectura de esta Novedad se sugiere que los alumnos realicen un esquema que represente
ambos mtodos, el convencional y por ingeniera gentica, mencionados para lograr el cambio de color
de las flores, y que redacten un breve texto que explique las diferencias entre ambos mtodos. Nota:
sugerimos repasar el texto y la actividad N 2 del Cuaderno N1 en donde se incluye el esquema que
compara
ambas
tecnologas.
Tambin
se
puede
consultar
esta
informacin
en
http://www.argenbio.org/h/biotecnologia/09.php
B) Orqudeas vistosas, duraderas y resistentes a enfermedades
Publicado el : 07/09/2004 en Novedades en Biotecnologa www.porquebiotecnologia.com.ar
Cientficos del Instituto de Investigacin y Desarrollo Agrcola de Malasia (MARDI) estn empleando
la biotecnologa para obtener orqudeas ms coloridas, duraderas y resistentes a enfermedades. El
mayor obstculo que tenemos es que a las orqudeas les lleva mucho tiempo alcanzar su madurez.
Muchas florecen despus de dos aos, explic la Dra. Umi Kalsom Abu Bakar, directora del
Departamento de Biologa Molecular e Ingeniera Gentica del MARDI. La mayora de las orqudeas
duran apenas entre dos o tres semanas, dependiendo de cmo se las cuide. Esto se debe, en parte, al
gas etileno liberado por las flores y que eventualmente hace que se marchiten (el etileno es el mismo
gas que producen las frutas y que las hace madurar), agreg. Para que las flores duren ms, hay que
suprimir a los genes involucrados en la formacin de etileno. No podemos suprimir a estos genes
completamente, y aunque pudiramos, no podramos evitar que las flores se marchiten por otros
mecanismos, como la degradacin celular. El equipo de la Dra. Umi consigui clonar y transferir otro
gen, que le otorgara a las orqudeas otras dos semanas de vida. Otra caracterstica que se puede
modificar para que estas flores luzcan ms vistosas, es el color. La mayora de las orqudeas son lilas,
rosas, amarillas y de otros colores plidos. Queremos introducir nuevos colores para crear orqudeas
nicas y llamativas. Esto lo podemos lograr eliminando ciertos genes relacionados con colores que
atenan o intensifican la tonalidad final de la flor. Por ejemplo, podemos eliminar a los genes del
pigmento naranja o amarillo para lograr orqudeas completamente blancas. Con respecto a las
enfermedades, las orqudeas son susceptibles a los virus, los que reducen el tamao y el nmero de las
flores y las deja con manchas marrones. Para producir variedades resistentes no podemos usar el
mejoramiento convencional (por cruzamiento), ya que no hay orqudeas naturalmente resistentes,
explic la Dra. Umi. Es por eso que eligieron introducir genes virales en las plantas de orqudeas, una
estrategia empleada para generar resistencia. Ya introdujimos los genes en las plantas, ahora estamos
esperando que stas crezcan.
Preguntas para el anlisis de las Novedades:
1. Dnde y quines son responsables de este nuevo desarrollo biotecnolgico?
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En si aquellos que es especialicen en el estudio relacionado a la gentica en plantas y seres vivos
2. Cules son las caractersticas modificadas? Qu beneficios traeran estas modificaciones
para las personas?
La idea es tomar en cuenta beneficios para el productor y para el consumidor (comprador).
3. Por qu, segn el artculo, el largo perodo que lleva alcanzar la madurez resulta un
obstculo?
Esto hace que las modificaciones por procesos convencionales resulten muy lentas y poco
eficientes.
4. Cul es el motivo por el cual las orqudeas duran poco al ser cortadas, y cul es la
tcnica que se puede emplear para transformar esta propiedad?
El marchitamiento se debe a la formacin de etileno. Las tcnicas que se pueden emplear es
suprimir a los genes involucrados en la formacin de etileno, o clonar y transferir otro gen, que
prolonga la vida de la flor.
5. Cmo buscan en este caso modificar el color de las flores?
Mediante ingeniera gentica eliminando ciertos genes relacionados con colores que atenan o
intensifican la tonalidad final de la flor.
6. Explicar por qu no es posible emplear las tcnicas de mejoramiento convencional para
lograr flores resistentes a enfermedades y cmo se lograra por ingeniera gentica.
No se emplean tcnicas de cruzamiento ya que no hay plantas que manifiesten esa caracterstica.
Por ingeniera gentica se introducen genes que otorgan resistencia a travs de genes virales
(mecanismo que funciona para otorgar resistencia a virus y conocido como resistencia mediada por
genes del patgeno).
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