LABORATORIO DE TERMOFILOS Y PSICROFILOS

COMPETENCIA: Analizar
muestras para control de calidad
microbiolgico de alimentos segn
protocolos establecidos

RESULTADO: Realizar los anlisis

microbiolgicos de los alimentos de
acuerdo con las tcnicas de anlisis
y protocolos establecidos,
siguiendo las buenas prcticas de
laboratorio y normatividad vigente

FICHA:
1131570

FECHA:
09/11/2016

NOMBRE DEL APRENDIZ: Yuly Rey, Yolanda Caldern , Paola Gaitn, Mara Cristina Fuquene

1)INTRODUCCION

Esta tcnica se puede utilizar para obtener informacin preliminar sobre los diferentes
productos alimenticios
en un medio de cultivo especfico de agar BHI para
microorganismos termfilos y psicrofilos, realizando la siembra en profundidad. Se
asume que cada una de las clulas presentes en el inoculo dar lugar a una unidad
formadora de colonia (UFC) lo que permite realizar el recuento de microorganismos
presentes en las muestras.
En este informe se realizara el Recuento de microorganismos termfilos y psicrofilos
en 2 producto diferentes para cada prueba, en la de termfilos se utiliz una quesadilla
de marca, y para psicrofilos un jugo de en la cual se va a realizar susprocedimientos,
diferenciar y/o identificar los tipos de microorganismos presentes en cada medio de
cultivo y que tipos de colonias formadoras se encuentran all, de acuerdo al resultado
se analiza y se compara segn la normas establecidas.
2)OBJETIVO GENERAL
Realizar el recuento de Termfilos y Psicrofilos en un medio de cultivo especfico de
Agar BHI (caldo BHI + Agar Agar).
3)OBJETIVO ESPECIFICO
.

Formular el medio de cultivo , Agar BHI , agua peptonada ( 2 veces)

Realizar 2 procesos respectivos para cada muestra.
Identificar la calidad del producto para saber si es inocuo para el consumo
humano.
Analizar los resultados obtenidos y realizar su frmula y verificar si las 2 muestra
utilizadas cumple o no con los parmetros establecidos segn la normas
vigentes.

3)MATERIALES
1.1 Laboratorio:
Agar (BHI)
Agua peptonada (2 VECES)
L y M 20 ml de alcohol al 70%
8 Cajas Petri
4 tubos de ensayo , 3 frascos de vidrio scotch

Mortero o Probeta
8 Puntas azules o pipetas de 1ml
Cabina bioseguridad clase 2
CALCULO DEL ALCOHOL AL 70%

C1=85%
C2=70%

V1=
V2=20ML

V1=70%*20ML = 16,47ml de alcohol

85%
- 20ml
3,05ml de agua

CALCULO DEL AGUA PEPTONADA AL 0.1% PARA TERMOFILOS

(C)% P/V
0.1 %
100

P/V =

P.S
= 0.001g/ml *108ml = 0.108gr
108ml

CALCULO DEL AGUA PEPTONADA AL 0.1% PARA PSICROFILOS

(C)% P/V
0.1 %
100

P/V =

P.S
= 0.001g/ml *108ml = 0.108gr
108ml

CALCULO DEL AGAR BHI

(CALDO BHI)
37gr

1000ml

160ml
37gr*160ml

= 5.92gr

1000ml

(AGAR AGAR)
15gr

1000ml

160ml
15gr*160ml
1000ml

= 2.4gr

MARCO TEORICO
Las bacterias Termfilasson aquellas que se desarrollan a temperaturas superiores a
45C, pudiendo superar incluso los 100C (hipertermfilos) siempre que exista agua en
estado lquido, lo que se consigue si la presin es elevada como ocurre en las
profundidades ocenicas. Actualmente se estn descubriendo muchas especies
nuevas de bacterias termfilas en chimeneas hidrotermales de las profundidades
marinas,tasa de crecimiento muy alta pero muy cortase pueden encontrar en aire, suelo
como en los alimentos. Bacterianos: basillus y clostridium mohos aspergillus.
Los termfilos se caracterizan a nivel de membrana porque poseen una proporcin alta
de lpidos saturados de cadena larga, lo que hace que tenga la fluidez adecuada a altas
temperaturas. En cuanto a las protenas, se ha visto que poseen gran estabilidad
debido a enlaces de tipo covalente e interacciones hidrofbicas.
Las industrias dedicadas a blanquear papel, textil y otros productos ven mejor usar
para el blanqueo el perxido de hidrgeno que el cloro txico, aunque sera deseable
eliminar el perxido una vez utilizado para que el agua empleada en el proceso pueda
reutilizarse o eliminarse al ambiente sin problema. Actualmente, el perxido del proceso
se diluye en grandes cantidades de agua limpia que suele tener alto coste o se trata
con agentes como bisulfito de sodio o hidrosulfito que dejan sal en el agua.
Las bacterias Psicrofilos son microorganismos adaptados al frio, no suelen
encontrarse en alimentos a no ser en regiones polares. Las Psicrofilos o criofitas
crecen a partir de entre -5 a 5 C.
a) las llamadas Psicrofilos obligadas: tienen temperatura optima a 15 -18C, como
flavobacterium. La bacteria polaromonas vacuolata recientemente aislada en aguas
heladas de la Antartida es llamado Psicrofilos extremo, tiene su ptimo de crecimiento
en 4C y es incapaz de crecer a 14C (se muere de calor).

b)

las Psicrofilos facultativas: presentan temperatura ptima en torno a los

20-30C. Las bacterias y hongos psicrotrofos son los responsables de
que los alimentos guardados en neveras se estropeen al cabo del
tiempo.
Los
psicrotrofos (Psicrofilos facultativos) son ms abundantes, ya que estn
adaptados a soportar grandes oscilaciones trmicas, y en verano pueden crecer a unos
30C-40C. Algunas bacterias y hongos pueden crecer en alimentos (carne, leche,
frutas y hortalizas) que se guardan en frigorficos, alterando las cualidades
organolpticas e incluso, echndolos a perder (una experiencia que casi todos hemos
tenido).

4)METODOLOGIA
INICIO

Alistamiento de material

Limpieza y
Realizar clculos del alcohol, Agar BHI (Caldo +Agar Agar) y Agua
Peptonada al 0.1% p/v(2 veces) a utilizar para este proceso.
Se lleva el Agar a una plancha hasta punto
de ebullicin, se retira y se saca el aire.

Se llevan los materiales a

esterilizacin en la autoclave

Se deja durante una hora hasta que llegue a 121c y su

presin a 15 PSI, se apaga y se desconecta y durante
15 min la aguja de presin baje a 0

Se toma 10 gr de muestra de una quesadilla

marca para la prueba de termfilos

En la cabina bioseguridad clase 2,Se macera la

quesadilla en un mortero, se aade en los 90ml de
agua peptonada, se agita hasta quedar homognea

De los 90ml de dilucin, se toma una muestra de 1ml

y se aade en un tubo de ensayo de 9ml de agua
peptonada, se agita hasta queda homogenizada

De los 9ml de dilucin se toma una muestra de

un 1ml y se aade a los 9ml de agua peptonada y
se agita hasta quedar diluida.

Luego se siembra por duplicado todas las diluciones

seriadas de 10-1 hasta 10-3 a profundidad tomando
1ml de muestra de cada una

Luego se toma 10ml de muestra de un jugo

de mango de marca Hit para la prueba de
Psicrofilos

RESULTADOS
TERMOFILOS

Se tom la muestra de una quesadilla queso pera de marca lcteos

San Carlos vence el 25- nov-2016
De los 90ml de dilucin, se toma una muestra de 1ml
y se aade en un tubo de ensayo de 9ml de agua
peptona da,En
se la
agita
hasta queda
muestra
delhomogenizada
seriado 10-1 se

hall 30UFC

de microorganismos termfilos.
De los 9ml de dilucin se toma una muestra de
un 1ml y se aade a los 9ml de agua peptonada y
se agita hasta quedar diluida.

En la muestra del seriado 10-2 se encontr 11

de microorganismos
termfilos.
Luego se siembra porUFC
duplicado
todas las diluciones
seriadas de 10-1 hasta 10-3 a profundidad tomando
1ml de muestra de cada una

Al agar BHI se le realiza choque trmico y se

aade segn el seriado a las cajas Petri, se deja
gelificar en la cabina bioseguridad clase 2

Despus se tapan, se sellan, se marcan y se lleva a incubadora

Los termfilos a una temperatura de 45C
Los Psicrofilos a una temperatura de 22C durante 24 horas.
Pasada esta se realiza la lectura y conteo de UFC y se realiza su
respectivo anlisis.

En las 2muestra seriada 10-1 se encontraron 20 y 24

UFC de coliformes totales posiblemente Klebsiella
prieumoniae se pudo observar una mucosa de rosa

Parmetro
evaluado
Unidad de
expresin
resultado
Tcnica analtica

Coliformes totales

ecoli

UFC-g/ml

UFC-g/ml

Recuento en
Recuento en
placa
placa
mtodo
NTClaminar
1325hasta que gelifique
NTC
1325
Se deja en la cabina flujo
y luego
se tapa, sellado,
normatividad
<100>500
UFC
<10
UFC
marcado y se lleva
a incubar
lossegn
termfilos
a unaen
temperatura
de 45 C y los
Se aade
una a auna
el seriado
cada cajag/ml
Petri,
psicrofilos a unaluego
T dese-20C
durante
horas, pasada
realiza la lectura y
g/ml
le hace
choque24trmico
al agar estas
hastaseambiente
conteo de colonias UFC
deycada
caja Petri
y sede
realiza
su respectivo anlisis.
medio
se aade
despus
la siembra
conformidad

En la muestra seriada 10-3 se pudo observar 3 UFC de microorganismos

termfilos.

PSICROFILOS
En las muestras tomadas de un jugo
de mango hit se observo en el medio
de cultivo que fue realizado para la
prueba de Psicrofilos no se hallo ninguna fuente de vida
microbiano y por tanto est libre de esta bacteria.

RANGO DE CONTEO
Termfilos Psicrofilos
1.1
10-1
30 UFC
0
1.1
10-2
11 UFC 0
1.1
10-3
3 UFC
0

Parmetro
evaluado
Unidad de
expresin
resultado

TERMOFILOS

PSICROFILOS

UFC-g

UFC-g/ml

Tcnica analtica

Recuento en
placa

Recuento en
placa

Conforme

Conforme

mtodo
normatividad
conformidad

DISCUSION DE
RESULTADOS
Segn los resultados obtenidos en la prueba de termfilos se pudo observar
en el medio de cultivo utilizado presencia de esta bacteria pero su rango fue
< 30 UFC
En la prueba de Psicrofilos se pudo observar en el medio de cultivo utilizado
no se encontr ningn tipo de microorganismo presente.
CONCLUSIONES
* Segn los resultados obtenidos se pudo observar que en la muestra de
quesadilla utilizada para la prueba de Termfilos si hubo presencia pero no

fue

un rango mayor por lo tanto es un alimento apto para el consumo

humano.

Segn los resultados obtenidos se pudo observar que en la

muestra de jugo de mango Hit utilizada para la prueba de
Psicrofilos no hubo presencia de microorganismos por lo tanto el jugo es apto
para el consumo humano .

CIBERGRAFIA
http://www.encuentros.uma.es/encuentros91/bacterias.htm
http://microbiologiabacterianaarquea.blogspot.com.co/2010/09/clases-demicroorganismos-segun-la.html