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Cromatografa

Introduccin
La cromatografa es un mtodo que consiste bsicamente en la separacin fsica
de los componentes de una sustancia por medio de una fase estacionaria y una
fase mvil, en la que estos componentes se mueven a distinta velocidad segn su
afinidad con una u otra de las fases 1. La fase mvil o eluyente, se refiere al fluido
lquido o gaseoso, que segn su afinidad con los compuestos los separa,
mediante la retencin de dichos compuestos en la fase estacionaria que es
generalmente un slido o un lquido 1. La cromatografa depende del equilibro que
ocurre entre los componentes y ambas fases1.

Seccin Experimental
El procedimiento se tom del Manual de Laboratorio de Fundamentos de Qumica
Orgnica (QU-0211)2, pginas 72-74, experimento 6: Cromatografa. La prctica
consisti en la realizacin de una cromatografa de columna para separar los
pigmentos presentes en la espinaca usando como fase estacionaria slica y como
eluyente una mezcla 50:50 entre ter de petrleo y acetato de etilo; se realiz una
cromatografa de papel con una disolucin de NaCl al 0.1% como eluyente para
separar los colorantes de los M&Ms.

Resultados y observaciones
Figura 1. Cromatografa de columna aplicada a los pigmentos presentes en la
espinaca.

Figura 2. Cromatografa de papel aplicada a los pigmentos presentes en los


M&Ms.

Observaciones: El orden de los colores de los M&Ms en el cromatograma de


izquierda a derecha es: amarillo, rojo, verde, azul, naranja y caf.

Cuadro I. Rf de los pigmentos presentes en los M&Ms.


Pigmentos

Rf1

Rf2

Rf3

Amarillo

0,562

Azul

0,912

Caf

0.225

0,488

0,762

Naranja

0,400

Rojo

0,262

Verde

0,526

0,825

Observaciones: Los colorantes presentes en los M&Ms, indicados en la etiqueta


del producto son: Azul 1(laca), amarillo 6, rojo 40, rojo 40 (laca), azul 2 (laca),

amarillo 6 (laca), amarillo 5 (laca), azul 2. Un pigmento laca es una versin


insoluble en agua del pigmento de origen.
Discusin
La cromatografa es un mtodo estrechamente relacionado con la separacin e
identificacin de los pigmentos vegetales. La espinaca (Spinacea oleracea), posee
los pigmentos fotosintticos propios de las plantas superiores, que son la clorofila
A, clorofila B y carotenoides3. Como se puede observar se diferencian en el
sustituyente del carbono C-3, en el que la clorofila A presenta un grupo metilo y la
clorofila B un grupo aldehdo, diferencia que define su coloracin y polaridad. La
clorofila A presenta una coloracin verde-azulada con una polaridad menor que la
clorofila B, de coloracin amarillenta 3. Esto se puede ver reflejado en la
cromatografa presentada en la figura 1, donde se puede observar que la clorofila
B al ser ms polar se deposita antes que la clorofila A.

Figura 3. Estructuras de la clorofila A y B.


Los carotenoides abarcan un amplio grupo de pigmentos fotosintticos, el caroteno es el principal carotenoide presente en la espinaca 3. Este grupo de
pigmentos son hidrocarburos, como se puede observar en la figura 4, por lo tanto
no son polares; por lo que su retencin es la ms retardada en el proceso. Debido
a la caracterstica no polar del -caroteno en oposicin a la polaridad de la
clorofila A y B, es muy importante que el eluyente o fase mvil no sea totalmente
no polar, pues no permitira que se separen estas ltimas.

.Figura 2. Estructura del -caroteno.


En el caso de los colorantes presentes en los M&Ms, se puede observar segn la
figura 2, que los dulces de coloracin caf y verde poseen una mezcla de dos
colorantes, mientras que los de coloracin azul, amarilla y roja slo uno. Debido a
la naturaleza de la disolucin de NaCl utilizada como eluyente, los colorantes
menos polares son los que se encuentran en la parte superior del papel, como se
observa en la figura 2, los colorantes amariilo y azul.

Conclusiones
La cromatografa es un mtodo extensamente utilizado en diversas reas de la
ciencia y la salud para la separacin e identificacin de componentes. La polaridad
de los componentes involucrados es un factor fundamental en la determinacin de
la fase mvil y estacionaria que se vayan a utilizar en la cromatografa. Estas
caractersticas afectan no slo la posibilidad de que los componentes puedan
separase sino tambin la velocidad con la que estos recorren una distancia en la
fase estacionaria.

Referencias
1. Correa, Y. M.; Mosquera, O.M.; Nio, J. Manual de laboratorio. Qumica
Orgnica I. Universidad Tecnolgica de Pereira, 2007; p 1-8.
2. Prez, A.; Lamoureux, G.; Artavia, G.; Corts, C.; Arias, C. Manual de
laboratorio de Fundamentos de Qumica Orgnica. Universidad de Costa
Rica, 2016; p 48.
3. Torossi, F. D. Una experiencia sencilla con fundamentos complejos: la
separacin de los pigmentos fotosintticos mediante cromatografa de
papel. An. Qum, 2007, 103, 45-51.