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(Reacciones de aminocidos y protenas)

Daniel Jimnez 1244997 (daniel.jimenez@correounivalle.edu.co)


Diana Sabogal 1236432 (diana.sabogal@correounivalle.edu.co)
Laboratorio de Qumica Orgnica General
Universidad del Valle
Departamento de Qumica

RESUMEN
Los aminocidos son las unidades elementales constitutivas de las molculas
denominadas Protenas, las cuales desempean un nmero mayor de funciones en las
clulas de todos los seres vivos. Para este laboratorio se realizaron diferentes ensayos
(Acidez, formacin de una sal, coagulacin, precipitacin etc.), con el fin de evidenciar los
efectos causados por la temperatura, cidos y sales, en estas molculas orgnicas.
RESULTADOS
Acidez de los aminocidos:
Tabla N1. Reaccin de Glicina con solucin acuosa de tornasol.
Compuesto
Cantidad
Resultado
cido aminoactico 2% 1 mL
Al momento de adicionar la
(Glicina)
solucin acuosa de tornasol
a la glicina no se observ
Solucin acuosa de tornasol 2 gotas
ningn cambio de color. Fig.
1.
[Fuente: Los autores]

Figura 1. Mezcla de solucin acuosa de tornasol y cido aminoactico [Fuente: Alejandro


Sosa]

Formacin de una sal compleja de cido aminoactico:


Tabla N2. Reaccin en la formacin de una sal compleja de cido aminoactico con
oxido de cobre II.
Compuesto
Cantidad
Resultado
Al mezclar estos tres
compuestos,
dio
como
cido aminoactico
5 mL
resultado un color oscuro
(Glicina)
negro, despus de calentar
por aproximadamente 5
min, se observ que en la
parte media del tubo de
ensayo la mezcla fue
cambiando a un azul claro y
se precipit el exceso de
Agua
3 mL
cobre II en la parte superior
e inferior Fig.2. Despus de
filtrar, se calent formando
cristales de color azul (sal
compleja
de
cido
aminoactico
y
cobre)
Fig.
Oxido de cobre (II)
1g
3.
[Fuente: Los autores]

Figura 3Formacion de precipitado de cobre II


[Fuente: Alejandro Sosa]

Figura 2. Reaccin despus de calentar formacin de cristales


[Fuente: Alejandro Sosa]

Coagulacin de la albmina:
En cinco tubos de ensayo se colocan 1 mL de solucin de clara de huevo, el cual se hace
reaccionar con los siguientes compuestos (Fig. 4):
Tabla N3. Observaciones prueba de coagulacin de la albumina.
Compuesto
Cantidad
Resultado
Al calentar un 1mL de clara de
huevo en bao mara, este se
Calor
93C
coagulo cuando el agua alcanzo la
temperatura de 93C
Etanol
4 mL
Se observa algo de coagulacin.
HCl concentrado
Gotas
Se observa coagulacin.
cido ntrico

Gotas

Se observa coagulacin.

Hidrxido de Sodio concentrado


[Fuente: Los autores]

Gotas

No se observa coagulacin.

a)

b)

c)

d)

Figura 4. Reaccin de desnaturalizacin de la albumina de huevo. En la imagen a. no


hubo reaccin (Hidrxido de Sodio), b, c y d si hubo desnaturalizacin. [Fuente: Alejandro
Sosa]
Precipitacin de protenas con metales pesados:

Tabla N4. Reaccin de precipitacin de protenas con sulfato de cobre (II).


Compuesto
Cantidad
Resultado
Solucin de clara de
Al realizar la mezcla de
huevo
1 mL
estos dos compuestos,
se observa un color azul
claro con precipitado.
Sulfato de cobre (II), al
gotas
(Fig.5).
5%
[Fuente: Los autores]

Figura 5. Coloracin azul claro de la reaccin de precipitacin de las protenas [Fuente:


Alejandro Sosa]

Reaccin Xantoproteica:
Tabla N5. Resultados de la reaccin Xantoproteica.
Compuesto
Cantidad

Solucin de clara de huevo

1 mL

cido ntrico concentrado

5 mL

Hidrxido de Sodio
[Fuente: Los autores]

Figura 6. Mezcla de clara de huevo y

Reaccin
de Biuret:
cido ntrico
concentrado (formacin
de espuma) [Fuente: Alejandro Sosa]

Gotas

Resultado
Al momento de calentar la
albumina y el cido ntrico,
se formaron dos fases, una
de color amarilla en el fondo
y una clara con espuma en
la superficie (Fig.6).
Al adicionar el hidrxido de
sodio
en
exceso
se
formaron tres fases, una en
el fondo de color claro, en la
superficie traslucida y en el
medio una de color amarillo
oscuro el cual se coagulo
(Fig.7).

Figura 7. Coagulacin de la albumina


en el centro de las mezclas [Fuente:
Alejandro Sosa]

Reaccin de biuret
Tabla N6. Cantidades de compuestos y resultados de la reaccin de Biuret.
Compuesto
Cantidad
Resultado
Al momento de la mezcla de
la solucin de clara de
Solucin de clara de huevo
1 mL
huevo y el hidrxido de
sodio, se presenta una
mezcla
homognea;
al
adicionar el sulfato de cobre
se formaron dos fases, la
traslucida y una azul oscura
Hidrxido de Sodio al 10%
1 mL
en el fondo. Se procede a
calentar al bao mara y el
color se torna violeta (Fig.
Sulfato de cobre (II) al 2%
Gotas
8).
[Fuente: Los autores]

Figura 8. Coloracin violeta de la reaccin de Biuret [Fuente: Alejandro Sosa]


Reaccin coloreada del formaldehido para protenas:
Tabla N7. Reaccin de solucin de clara de huevo, solucin diluida de formaldehido y
cido sulfrico concentrado.
Compuesto
Cantidad
Resultado
Despus de realizar el
Solucin de clara de huevo
0.5 mL
proceso de mezclado se
formaron dos capas, donde la
capa superior fue blancuzca y
la capa inferior traslucida, es
Solucin diluida de
una reaccin exotrmica ya
Formaldehido.
1 gota
que al agregar el cido
sulfrico concentrado el tubo
de ensayo se calent (Fig. 9).
cido sulfrico concentrado
gotas
[Fuente: Los autores]

Figura 9. Resultados de la reaccin coloreada del formaldehido [Fuente: Alejandro Sosa]

ANLISIS DE RESULTADOS
Durante esta prctica se llevaron a cabo varios ensayos y pruebas qumicas para la
determinacin los aminocidos y las protenas. Los aminocidos son los monmeros de
las protenas y estn unidos por enlaces peptdicos. la estructura de las protenas se
pueden considerar cuatro niveles de organizacin: primario, secundario, terciario y
cuaternario [1].

Figura 10. Nivel se organizacin de las protenas [Fuente: Internet ref 2]

Acidez de los aminocidos:


Los aminocidos presentan propiedades no muy comunes, debido a que son solubles en
agua y otros disolventes polares, pero son insolubles en disolventes no polares como el
ter dietlico o benceno; en este caso el cido aminoactico o Glicina que es uno de los

aminocidos ms sencillos y presentan estas propiedades; los aminocidos son menos


cidos que la mayora de los cidos carboxlicos y menos bsicos que la mayora de las
aminas [17].
Los aminocidos existen en disolucin acuosa principalmente en la forma de un ion
dipolar o zwitterion (hibrido) [18], estos iones dipolares en los aminocidos son sales
internas. Adems los aminocidos son anfteros ya que contienen en la misma molcula
ambos iones, el carboxilato y el amonio, ya que pueden reaccionar como cidos o como
bases. El pH en el cual un aminocido tiende a adoptar una forma dipolar neutra (igual
nmero de cargas positivas que negativas) se denomina punto isoelctrico.

Figura 11. Nivel se organizacin de las protenas [Fuente: Internet ref 19]
Al adicionar la solucin de tornasol no se observ reaccin aparente de cambio de color,
quiere decir que la glicina se encontraba en forma de ion dipolar, ya que este ion se
encuentra en estado neutro y no reacciona. Puede ser que desde que se prepar la
solucin de cido aminoactico y el momento de la mezcla haya pasado el tiempo
suficiente para que la solucin se estabilizara a la forma de ion dipolar.

Formacin de una sal compleja de cido aminoactico:


Al mezclar cido aminoactico o glicina con xido de cobre (II) pulverizado (color negro)
se obtiene una solucin azul con precipitado negro que corresponde al exceso de xido
de cobre; se filtr y calent el slido de color azul claro hasta que empez la formacin de
los cristales de color azul claro. La coloracin azul de la sal se present por la formacin
del complejo neutro de cobre/cido aminoactico, esta reaccin est dada mediante la
siguiente ecuacin:

CH2COOH
+ CuO
NH2

H2O

En el cual dos molculas de cido aminoactico se coordinan al cobre el cual esta


enlazado a tomos de oxgeno y nitrgeno presentando una gran estabilidad, el cual
puede tomar dos configuraciones trans o cis, las cuales tiene un grupo de cuatro ligantes
coplanares con geometra cuadrada [20]

Coagulacin de Albmina

Se estudi el comportamiento de las protenas bajo condiciones de calor y variacin del


pH; en este caso la albumina de huevo o clara de huevo. Cuando las protenas son
sometidas a estos cambios se dice que se desnaturalizo; es decir, la solubilidad de las
protenas puede verse reducida (perdida de las estructuras de orden superior, secundaria,
terciaria y cuaternaria), hasta el punto de producirse su precipitacin .Esto se debe a que
los enlaces que mantienen la conformacin globular se rompen y la protena adopta la
conformacin filamentosa. De este modo, la capa de molculas de agua no recubre
completamente a las molculas proteicas, las cuales tienden a unirse entre s dando lugar
a grandes partculas que precipitan (coagulacin). Las protenas que se hallan en ese
estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que fueron diseadas, en resumen, no
son funcionales. [2].
La desnaturalizacin no afecta a los enlaces peptdicos: al volver a las condiciones
normales, puede darse el caso de que la protena recupere la conformacin primitiva, lo
que se denomina renaturalizacin. [2].
En la reaccin de la clara de huevo con solventes orgnicos miscibles con el agua como
el etanol, precipitan las protenas porque sus bajas constantes dielctricas reducen el
poder de solvatacin de sus soluciones acuosas hacia los iones disueltos, como las
protenas [3].
La sensibilidad de las protenas a la desnaturalizacin trmica depende de numerosos
factores, tales como la naturaleza y concentracin de protenas, la actividad de agua, el
pH, la fuerza inica y la naturaleza de los iones presentes. Esta desnaturalizacin,
frecuentemente, va acompaada de un descenso de la solubilidad, de segregacin de
molculas proteicas desplegadas, as como de un aumento de la capacidad de absorcin
de agua por la protena [4].En el caso de la clara de huevo, esta desnaturalizacin por
temperatura hace que no sea reversible, la albumina se precipita, dando como resultado
un solido blanco.
El pH del medio en el cual est la protena tiene influencia considerable en el proceso de
desnaturalizacin. La mayora de las protenas son estables para una determinada zona
de pH y frecuentemente se desnaturalizan cuando se someten avalores de pH muy, altos
o muy bajos (cidos o bases); el cual se observ cuando de agrego el cido ntrico y el
cido clorhdrico [3].
Con el hidrxido de sodio no se observa coagulacin, entonces se puede decir que los
sitios cidos de la albmina no se ven afectados por la presencia del hidrxido de sodio,
probablemente porque la cantidad de este reactivo no fue lo suficiente para la
desnaturalizacin y precipitacin de la protena.

Precipitacin de protenas con metales pesados:


Se estudi el comportamiento de las protenas, en este caso la albumina, con el sulfato de cobre
(II). Cuando el metal pesado reaccin a con la protena genera enlaces entre los grupos amino libre
y carboxilo libre, lo que provoca que haya un precipitado, este precipitado es una sal insoluble.
[15]
Esta misma reaccin la podemos evidenciar con iones como Zn2+, Hg2+, Fe3+, Cu2+, Sb3+, Ag1+, Cd2+,
Pb2+.[16]
As como se ve en la figura 5, la albumina de clara de huevo (ovoalbmina) reacciono con el sulfato
de cobre (II) que es de color azul, generando un precipitado blancuzco, por lo cual podemos saber
que exista presencia de protena y que esta reaccin efectivamente con el metal pesado que
adicionamos.
Reaccin Xantoproteica:
Esta reaccin es una prueba cualitativa la cual nos va a decir si hay presencia de grupos
de aminocidos aromticos como fenilalanina, tirosina, triptfano en las protenas
estudiadas; con la adicin de cido ntrico concentrado (HNO3), nos mostrara con una
coloracin amarilla que es una protena con aminocidos aromtico cuando los grupos
bencenos hayan reaccionado con el cido ntrico [5], esta reaccin se explica por la
nitracin de grupos cclicos de la familia del benceno, este proceso se puede acelerar al
aumentar la temperatura durante la reaccin.
Luego se alcalina la reaccin adicionndole hidrxido de sodio la solucin pasa de un
color amarillo claro a un color naranja o amarillo oscuro.
Reaccin de biuret
Es una reaccin que tiene como fin identificar la presencia de pptidos y/o de protenas,
debido que la reaccin entre CuSO4 en un medio acuoso y los enlaces peptdicos.
Cuando la reaccin da una color entre azul y violeta, sabemos que la reaccin ha dado
positiva para los elementos en cuestin, como lo hemos presenciado en el laboratorio, en
el caso de que no se encontraron peptidos o proteinas como lo es la albmina, nos
encontraramos con un precipitado de color amarillo.

Figura 12. Reaccion de Biuret positiva. [Fuente: Ref. 14]


Algunos de los resultados pueden ser que El reactivo, de color azul, cambia a violeta en
presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena

corta. El hidrxido de potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio


alcalino necesario para que tenga lugar.[14]

SOLUCIN AL CUESTIONARIO
1. Qu es una protena globular?
Las protenas pueden ser de dos clases, fibrosas o globulares. Las protenas fibrosas son
materiales estructurales de animales, insolubles en agua. Las globulares son muy
diferentes, ya que tienden a ser solubles en agua y tienen forma casi esfrica. Estas
protenas no son estructurales sino que realizan funciones bilgicas. Pueden ser enzimas,
hormonas, protenas de trasporte (hemoglobina) o protenas de almacenamiento.
Las protenas globulares tienen ms aminocidos con cadenas laterales polares o inicas
que las protenas fibrosas, que son insolubles en agua. Las protenas globulares son
principalmente helicoidales, pero forman pliegues que les permiten que la forma total sea
globular. [6]

Figura 13. Protena Globular [Fuente: Internet ref 7 ]

2. Qu es el punto isoelctrico de una protena?


El punto isoelctrico (PI) de un aminocido depende de su estructura; y es el promedio de
las dos constantes de disociacin cida que incluyen el zwitterion neutro (igual nmero de
cargas positivas que negativas). En cuanto a los aminocidos con una cadena lateral que
sea un cido fuerte o un cido dbil, el PI es el promedio de los dos valores de pKa ms
bajos. En el caso de los aminocidos con una cadena lateral bsica, el PI es el promedio
de los dos valores de pKa ms altos. [8]

Figura 14. Ejemplos de punto isoelctrico [Fuente: Internet ref 8 ]


As como los aminocidos tienen sus PI, las protenas tambin tienen un PI global debido
a los numerosos residuos cidos o bsicos que pueden contener.

3. Cmo se determina la presencia de azufre en las protenas?


Los aminocidos azufrados se diferencian del resto en que contienen azufre en su
composicin, de ah su nombre. El azufre es un mineral necesario para la formacin del
colgeno y otros componentes proteicos que forman parte del tejido conectivo, como la
queratina y otros mucopolisacridos que componen los huesos, los cartlagos, los
tendones y los ligamentos. Para aminocidos azufrados utilizamos un medio alcalino y
junto con sales de plomo formamos un precipitado negro (pbs). [9]
Reaccin de los aminocidos azufrados se pone de manifiesto por la formacin de un
precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin en la separacin
mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin
de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.

Figura 15. Reaccin para determinar azufre en las protenas [Fuente: Internet ref 10 ]
Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de
plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar
protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre. [10]

4. Qu propiedades presentan las albminas? Qu funcin tiene la albmina de suero


sanguneo?
La albumina presenta carga elctrica negativa, la membrana basal del glomrulo renal,
tambin est cargada negativamente, lo que impide la filtracin glomerular de la albmina
a la orina por ende esta no va a ser eliminada [11], tiene como funcin transportar
molculas de bajo peso molecular como bilirrubina, hormonas sexuales, cidos grasos
libres, algunos medicamentos entre otras molculas que son transportadas en sangre
[12], y adems es importante para el mantenimiento de la presin onctica, necesaria
para la distribucin correcta de los lquidos corporales entre el compartimento
intravascular y el extravascular, localizado entre los tejidos.
CONCLUSIONES
Las protenas tienden a sufrir cambios fsicos y qumicos los cuales se aprecian
cualitativamente.
Los aminocidos tienen un rango de pH entre 6-7, lo cual confirma la presenta del estado
dipolar zwitterion, en medio neutro.
Los aminocidos tienen una propiedad que los hacen ser anfteros, ya que contienen en
la misma molcula ambos iones, el carboxilato y el amonio, y pueden reaccionar como
cidos o como bases.
Los diferentes cambios de color en las reacciones, as
como en la reaccin xantoproteca en la cual las protenas que contengan grupos
bencnicos darn positivo. En general las reacciones coloridas nos ayudan a saber con
qu grupo funcional est formada la protena y as tambin de que aminocido est
formado.
Se lograron realizar las practicas sugeridas en el laboratorio y observar el comportamiento
de una protena, como la albumina, estas reacciones nos sugieren mtodos para
deteccin de enfermedades o tratamientos a alguna condicin, como la de precipitacin
de metales pesados que nos muestra un posible tratamiento por intoxicacin por metales
pesados; o la identificacin de elementos que podemos encontrar pero no sabemos si es
solo un aminocido o es una protena.

REFERENCIAS
[1]Arquitectura
de
las
molculas
de
protena
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap01/01_01_13_14.htm
l (Consultado el 18 de Noviembre de 2014)
[2]Desnaturalizando Protenas.
http://pendientedemigracion.ucm.es/info/analitic/Asociencia/DesnatProteinas.pdf
(Consultado el 18 de Noviembre de 2014)

[3]Donald Voet, Judith G. Voet; Bioquimica, 3th; Ed. Mdica Panamericana, Buenos Aires,
2006, 140-141p.
[4] 7.1Agentes Fsicos.
http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/penacchiot
tii01/capitulo01/07a.html. (Consultado el 18 de Noviembre de 2014)
[5] Reconocimiento de Protenas
http://www.angelfire.com/scifi/anarkimia/Reconocimiento%20de%20Protenas.htm
(Consultado el 21 de Noviembre de 2014)
[6]
Procesos
biolgicos
integrados
PDF.
http://www.google.com.co/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=10&ved=0CEcQFj
AJ&url=http%3A%2F%2Fcipb.jimdo.com%2Fapp%2Fdownload%2F9017225570%2FPRO
CESOS%2BBIOL%25C3%2593GICOS%2BINTEGRADOS%2Bparte%2B1.pdf%3Ft%3D1
412653568&ei=GUNzVJSYKYyagwT_p4KYAg&usg=AFQjCNE0ZJA1Jsgzs_bhuD_aoEQ
QFVgmXA (Consultado el 17 de Noviembre de 2014)
[7] Estructura terciaria.
http://haruko8.angelfire.com/Estructura/estructura%20terciaria.html(Consultado el 17 de
Noviembre de 2014)
[8]Aminocidos, Pptidos y Protenas.
http://tuylaquimica.files.wordpress.com/2011/03/aminoacidos-peptidos-y-proteinasespectacular.pdf(Consultado el 17 de Noviembre de 2014)
[9]Reconocimiento de aminocidos que contienen azufre en las protenas.
http://es.scribd.com/doc/68940573/Reconocimiento-de-Aminoacidos-Que-ContienenAzufre-en-Las-Proteinas(Consultado el 17 de Noviembre de 2014).
[10]Reconocimiento de protenas.
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso2001/accesit_4/p
roteinas.html(Consultado el 17 de Noviembre de 2014)
[11] La albmina srica, Funcin, Tipos, Propiedades fsicas, Estructura.
http://centrodeartigo.com/articulos-utiles/article_105230.html(Consultado
Noviembre de 2014)

el

21

de

[13]http://www.quimbiotec.com/saber_mas_albumina.php
[13]
Identificacin
de
protenas
mediante
la
reaccin
http://catedras.quimica.unlp.edu.ar/qo3/Apuntes/Biuret.pdf (Consultado
Noviembre de 2014)

el
Biuret
el 23 de

[14]Protenas 1, Ensayo de Biuret. http://quimicaorganicaproteinas1y2.blogspot.com


(Consultado el 27 de Noviembre de 2014)
[15] RECONOCIMIENTO Y PROPIEDADES DE LAS PROTEINAS, 2. PRECIPITACIN
DE
PROTENAS
POR
FOMACION
DE
SALES
INSOLUBLE.
http://academico.upv.cl/doctos/KINE-7011/%7BB1987286-67F3-4C1E-B40E-

59C33C389AE4%7D/2012/S2/GUIALABN%C2%B02-2012.pdf (Consultado el 27 de
Noviembre de 2014)
[16]
PROTEINAS
Y
AMINOCIDOS,
Prueba
para
metales
pesados.
http://agu.inter.edu/halices/caseina.pdf (Consultado el 27 de noviembre de 2014)
[17]Ralph J. Fessenden; Joan S. Fessenden,Ed. Grupo Editorial Iberoamerica; 1983,
864p.
[18]Mc MURRY.; J. Qumica orgnica. 2008. 7a Edicin. Editorial: cengage learning.
[19]Aminoacidos Esenciales
http://www.monografias.com/trabajos94/aminoacidos-esenciales/aminoacidosesenciales.shtml (Consultado el 18 de Noviembre de 2014)
[19]Sntesis de ismeros geometricos
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/jpn/file/Quimica_de_Coordinacion/4_Isomeros_Geom
etricos.pdf (Consultado el 18 de Noviembre de 2014)