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Facultad de Ciencias Naturales e Ingeniera

Departamento de Ciencias Bsicas


Qumica Organica
GUA No 1.- Desnaturalizacin y reconocimiento de aminocidos
Ivonne Pamela Moreno Aguilar

Ivonne Pamela Moreno Aguilar


1. INTRODUCCION
En la prctica de laboratorio nmero 1 se emplearan unos mtodos para el
reconocimiento de aminocidos y la desnaturalizacin de protenas, dichos procesos
consisten en lo siguiente:
Reconocimiento de aminocidos:
Reaccin xantoproteica: Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado
de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. La
prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de
grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la
prueba se neutraliza con un lcali vira a un color anaranjado oscuro. (ANARKIMIA, s.f.)
Reaccin con acetato de plomo:
Los Aminocidos azufrados como Metionina, Cisteina y Cistina se reconocen por la for
macin deprecipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman
cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio alcalino.
La mayora de las especies animales tienen valores de protena sricas de alrededor
de 7.6 g por 100 ml. En general aumenta cuando hay una ingesta disminuida de fluidos
o cuando hay prdida de lquidos (diarrea, vmitos, quemaduras, etc.). Cuando los
niveles disminuyen a 5.3 o menos se presenta edema inmediatamente. La disminucin
puede deber sea muchas causas tales como excrecin renal (albuminuria) o cuando la
sntesis de protena esta disminuida debido a la desnutricin, deficiencia de vitaminas o
enfermedades de las vas digestivas y del hgado. (Determinacion de Proteinas
Sericas, s.f.)
Desnaturalizacin de protenas:
La conformacin de una protena basada en sus estructuras secundarias y terciarias la hace
muy frgil. Las protenas sufren un proceso conocido como desnaturalizacin, en la cual se
altera la disposicin espacial de las cadenas polipeptdicas dentro de la molcula y
transformndose la estructura tpica de ella, en otra ms desordenada. Esta modificacin no va
acompaada por la ruptura de los enlaces peptdicos implicados en la estructura primaria (Fig.
1).

Muchas molculas proteicas slo retienen su actividad biolgica dentro de una fluctuacin muy
limitada de temperatura y de pH. La exposicin de las protenas globulares a pH extremos o a
temperaturas muy altas les hace experimentar un cambio conocido, como ya se dijo: la
desnaturalizacin.
Los efectos de la desnaturalizacin son numerosos y entre ellos se pueden destacar:
1. descenso de la solubilidad, resultado del desbloqueo de grupos hidrfobos.
2. alteracin en la capacidad de retencin de agua.
3. prdida de la actividad biolgica (enzimas, hormonas).
4. aumento de la sensibilidad al ataque de proteasas, debido al desbloqueo de los enlaces
peptdicos correspondientes a los sitios de accin especfica de las proteasas

Ilustracin 1Protena nativa desnaturalizada


5. aumento de la viscosidad intrnseca.
6. su capacidad de cristalizar.
La desnaturalizacin puede ser reversible o irreversible, pero cuando se rompen los enlaces
dislfuros que contribuyen a la conformacin de las protenas, este proceso es normalmente
irreversible.
Bajo ciertas circunstancias puede ser o no reversible; esto ltimo ocurre, generalmente cuando
las condiciones de desnaturalizacin no han sido demasiado drsticas, ni el tiempo necesario.
En algunas ocasiones el proceso de desnaturalizacin puede ocasionar otras estructuras
diferentes a la de la protena nativa, al establecer interreacciones y enlaces entre regiones de
aminocidos diferentes a los originales.
Entre los principales agentes de desnaturalizacin de las protenas se encuentran agentes
fsicos y agentes qumicos (chile, s.f.)
2. CONSULTA

3. FICHAS TECNICAS
NOMBRE
FORMUL
A

ACIDO
TRICLORO
ACETICO

Isopropanol
(Xn) (F)

Hidrxido de
sodio
(Xi) (Xn)

C2HCl3O2
/ CCl3
COOH

C3 H7 OH

NaOH

ASPECTO

Cristales
incoloros e
higroscpic
os, de olor
acre.

Liquido
incoloro ,
fuerte olor
alcohlico

slido
blanco

PELIGROSIDAD
Inhalacin: Dolor de garganta.
Tos. Sensacin de quemazn.
Dolor de cabeza. Nuseas.
Vmitos.
Jadeo.
Dificultad
respiratoria.
Sntomas no inmediatos.
Piel:
Dolor.
Enrojecimiento.
Ampollas.
Quemaduras
cutneas.
Ojos: Dolor. Enrojecimiento.
Quemaduras
Profundas graves.
Sensacin
de
quemazn.
Ingestin: Dolor abdominal.
Shock o colapso.
La ingestin o inhalacin de
grandes cantidades de vapores
puede ser nociva para la salud.
Inhalacin: Los vapores causan
irritacin suave de los ojos y de
las vas respiratorias superiores.
Contacto con la piel: Inofensivo
para la piel.
Contacto con los ojos: Irritante
de los ojos, puede causar
lesiones.
Ingestin: Al ser ingerido puede
causar embriaguez y vmitos.
Peligro medio ambiente: El
producto constituye un peligro
de toxicidad moderada para
las personas y para la vida
acutica.
Peligro especial: El Isopropanol
es fundamentalmente un lquido
inflamable.

Inhalacin: La inhalacin de
polvo o neblina causa irritacin y
dao del tracto respiratorio. En
caso
de
exposicin
a
concentraciones
altas,
se
presenta ulceracin nasal.
Contacto con ojos: El NaOH es
extremadamente corrosivo a los
ojos por lo que las salpicaduras
son muy peligrosas, pueden
provocar desde una gran
irritacin
en
la
crnea,
ulceracin, nubosidades y,
finalmente, su desintegracin.
Contacto con la piel: Tanto el
NaOH
slido,
como
en
disoluciones concentradas es
altamente corrosivo a la piel.
Ingestin: Causa quemaduras
severas en la boca, si se traga
el dao es, adems, en el

PRIMEROS AUXILIOS
-Aire limpio, reposo. Posicin de
semiincorporado. Respiracin
artificial si estuviera indicada.
Proporcionar asistencia mdica.
-Quitar las ropas contaminadas.
Aclarar la
piel con agua abundante o
ducharse.
-Enjuagar con agua abundante
durante
varios minutos (quitar las lentes de
contacto si puede hacerse con
facilidad),
-Enjuagar la boca. NO provocar el
vmito. Dar a beber agua
abundante. Reposo. (IPCS, 2005)
Inhalacin: Trasladar a la persona
afectada al una atmsfera no
contaminada para que respire aire
puro, y proveer de oxgeno a la
vctima si su respiracin es
dificultosa, est mareada o no
responde. Si no se produce una
rpida recuperacin, obtener
atencin mdica.
Contacto con los ojos: Lavar de
inmediatamente con abundante
agua manteniendo los prpados
abiertos por lo menos 15 minutos.
OBTENER ATENCIN MDICA
INMEDIATAMENTE.
Contacto con la piel: Lavar con agua
y jabn, remover la ropa
contaminada.
Lave la ropa antes de usarla
nuevamente.
Ingestin: Si se traga, no inducir el
vmito: transportar al servicio
mdico ms cercano para continuar
el tratamiento. Sise produce
espontneamente el vmito,
mantener la cabeza por debajo de la
altura de las caderas para evitar la
aspiracin. (Dideval, s.f.)
Inhalacin: Retirar del rea de
exposicin hacia una bien ventilada.
Si el accidentado se encuentra
inconciente, no dar a beber nada,
dar
respiracin
artificial
y
rehabilitacin cardiopulmonar. Si se
encuentra conciente, levantarlo o
sentarlo lentamente, suministrar
oxgeno, si es necesario. Ojos:
Lavar con abundante agua corriente,
asegurndose de levantar los
prpados, hasta eliminacin total del
producto. Piel: Quitar la ropa
contaminada inmediatamente. Lavar
el rea afectada con abundante
agua corriente. Ingestin: No
provocar vmito. Si el accidentado
se encuentra inconciente, tratar
como en el caso de inhalacin. Si
est conciente, dar a beber una
cucharada de agua inmediatamente

esfagoproduciendo vmito y
colapso.
Carcinogenicidad: Este producto
est considerado como posible
causante de cncer de esfago.
- Inhalacin : Tos, dolor de
garganta, asfixia. Inflamacin de
los bronquios. Destruccin de
las mucosas nasales y de las
vas respiratorias
- Contacto con los ojos:
Enrojecimiento,
dolor.
Conjuntivitis
(inflamacin
temporal de la conjuntiva).
Visin borrosa. En casos
extremos ceguera permanente
- Contacto
con
la
piel:
Enrojecimiento,
dolor.
Resequedad
de
la
piel,
dermatitis y alergias
-Ingestin:Calambres
abdominales,
estreimiento,
convulsiones, dolor
de cabeza, nuseas, vmitos

y despus,
(UNAM, s.f.)

cada

10

minutos.

- Inhalacin : Suministrar aire fresco.


Situar al accidentado al aire libre,
mantenerle caliente y en reposo.
- Contacto con los ojos : En caso de
llevar lentes de contacto, quitarlas.
Lavar
abundantemente los ojos con agua
Polvo
limpia y fresca durante,
Acetato de
C4H8O6P
cristalino
por lo menos, 10 minutos, tirando
hacia arriba de los
plomo
b2
blanco
prpados y buscar asistencia
(N) (T)
mdica.
- Contacto con la piel : Quitar la ropa
contaminada.
Lavar
la
piel
vigorosamente con agua y jabn o
un limpiador de piel adecuado.
- Ingestin : Si accidentalmente se
ha ingerido, buscar inmediatamente
atencin mdica. Mantenerle en
reposo. (JAVERIANA, s.f.)
Inhalacin: Dolor de garganta. -Aire limpio, reposo. Posicin de
Tos. Sensacin de quemazn. semiincorporado.
Respiracin
Dolor de cabeza. Nuseas. artificial si estuviera indicada.
Vmitos.
Jadeo.
Dificultad Proporcionar asistencia mdica.
respiratoria.
-Quitar las ropas contaminadas.
cido
Lquido
Sntomas no inmediatos.
Aclarar la
Dolor.
Enrojecimiento. piel con agua abundante o
ntrico
HNO3
incoloro a Piel:
Ampollas.
Quemaduras ducharse.
(T)(Xi)(C)
amarillo, de cutneas.
-Enjuagar con agua abundante
Dolor. Enrojecimiento. durante
olor acre. Ojos:
Quemaduras
varios minutos (quitar las lentes de
Profundas graves.
contacto si puede hacerse con
Sensacin
de
quemazn. facilidad),
Ingestin: Dolor abdominal. -Enjuagar la boca. NO provocar el
Shock o colapso.
vmito.
Dar
a
beber
agua
abundante. Reposo. (IPCS, 2005)
*Indique la peligrosidad con el smbolo correspondiente: explosivo (E), comburente (O), inflamable (F), extremadamente inflamable
(F+), txico (T), muy txico (T+), corrosivo (C), nocivo (Xn), irritante (Xi) y/o peligroso para el medio ambiente (N). Pictogramas
SGA

4. PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS DE DESNATURALIZACIN.
4.1 Desnaturalizacin trmica
Resultado esperado: Se espera que al elevar la temperatura de la solucin las
protenas pasen por una desestabilizacin sobre enlaces de la estructura terciaria
causando as el desdoblamiento de la misma esto se demostrara por la formacin de
un precipitado y dar positivo para desnaturalizacin trmica.
Diagrama de flujo:

En tubo de ensayo
3 mL sln
acuosa

Calentar a bao maria

Observar si presenta
cambio
4.2 Desnaturalizacin por pH extremo
Resultado esperado: Al aadir el cido tricloroacetico a la muestra se espera la
formacin de un precipitado para dar positivo la desnaturalizacin del pH, esto por ser
de carcter acido cambiara las cargas de los grupos de las protenas, lo cual causara la
degradacin de las mismas.
Diagrama de flujo:

En tubo de ensayo
3 mL sln
acuosa

Adicionar
0.5 mL
Acido tricloroacetico
(ATA)

Observar si presenta
cambio
4.3. Desnaturalizacin por presencia de solventes orgnicos
Resultado esperado: al adicionar el isopropanol se va a observar la formacin de un
anillo en la cual se ver involucradas las constantes dielctricas, por ello se
incrementaran las fuerzas entre cargas opuestas y ocasionaran disminucin en la
solubilidad de la protena.
Diagrama de flujo:
En tubo de ensayo
5 mL sln
acuosa

Adicionar
0.5 mL
Isopropanol

Agitar

Dejar en reposo

Observar

4.4. Desnaturalizacin por metales pesados


Resultado esperado: Se ver la formacin de un precipitado coloreado por la presencia
de un ion metlico lo cual dar positivo para esta prueba.
Diagrama de flujo:
En tubo de ensayo
3 mL sln
acuosa

Adicionar gota a gota (hasta


10 gotas)
Acetato De
plomo 0,1M

Agitar

Dejar en reposo

Observar

PROCEDIMIENTOS PARA RECONOCIMIENTO DE AMINOCIDOS.

4.5. Reaccin con acetato de plomo alcalino


Resultados esperados: se observara la formacin de una coloracin oscura que
indicara la presencia de aminocidos en la muestra.
Diagrama de flujo:

En tubo de ensayo
3 mL sln acuosa de
cada muestra

Adicionar
2 mL snl
NaOH al
20%

Adicionar
20 gotas sln acetato de
plomo 0.1 M

Calentar a bao maria

Observar

4.6 Reaccin xantoproteca


Resultado esperado: se ver la formacin de un complejo coloreado que determinara el
resultado positivo para la reaccin xantoproteica.
Diagrama de flujo:
En tubo de ensayo
3 mL sln acuosa de
muestra

Adicionar
1 mL snl HNO3
concentrado

Calentar a bao maria

Enfriar en bao con aguahielo

Agitando
cuidadosamente y
en frio

Adicionar
Gota a gota sln
de NaOH al
40%

Observar

Bibliografa
ANARKIMIA. (s.f.). Obtenido de http://www.angelfire.com/scifi/anarkimia/Reconocimiento
%20de%20Protenas.htm
chile, B. d. (s.f.). Mazinger. Obtenido de
http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/penacchi
ottii01/capitulo01/07.html
Determinacion de Proteinas Sericas. (s.f.). Obtenido de SCRIBD:
https://es.scribd.com/doc/18666577/8-Determinacion-de-Proteinas-Sericas
Dideval. (s.f.). Ficha de Datos de Seguridad Isopropanol . Obtenido de
http://www.dideval.com/pdf/seguridad/ISOPROPANOL.pdf
IPCS, C. I. (2005). Obtenido de
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Ficheros
/501a600/nspn0586.pdf
JAVERIANA, U. (s.f.). ficha seguridad acetato de plomo. Obtenido de
http://portales.puj.edu.co/doc-quimica/fds-labqca-dianahermith/Acetato%20de
%20plomo.pdf
UNAM. (s.f.). HOJA DE SEGURIDAD II NAOH. Obtenido de
http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/2hsnaoh.pdf