UNIVERSIDAD NACIONAL DE FORMOSA

FACULTAD DE RECURSOS NATURALES

CARRERA INGENIERA ZOOTECNISTA

Ctedras:
-NUTRICIN Y ALIMENTACIN ANIMAL
-MICROBIOLOGA
-QUMICA ANALTICA AGRCOLA

TRABAJO PRCTICO: Confeccin de microsilos experimentales

Objetivo:
-Confeccionar microsilos con material forrajero para identificar
colonias de bacterias que se desarrollen en los mismos.

Materiales a utilizar:
-Tubos de PVC de 110 cm de dimetro de 60 a 70 cm de longitud.
-Tapas (2 por cada tubo).
-Sellador y pegamento para las tapas.
-Machetes o cuchillos de gran tamao.
-Pizn o trozo de madera, de mayor longitud que los caos, con
diseo cilndrico para introducir en cada cao para el compactado del
pasto.
-Crayn o marcador para identificar los tubos.
-Elementos de seguridad (guantes, anteojeras, etc)
-Cuaderno con planilla para registro de los tubos. Ejemplo de diseo
debajo de estas lneas:
N de Material forrajero
Tipo de
Material
Observaciones
tubo
compactaci adicional
n*
**

*a)Buena. b) Regular. c) Mala

** a) Tierra. b) Bacterias fermentativas. c) Sin aditivo.

Consigna de tareas:
Das antes de la confeccin de los microsilos:
1) Preparar los tubos de PVC de 110 mm de dimetro de 60 a 70
cm de longitud y en uno de sus extremos colocar y pegar una
tapa de PVC con pegador comercial (o sellador) para
mantenerlo cerrado permanentemente.
1)
2)

3)

4)

5)
6)

El da de la confeccin de los microsilos:

Se conformarn grupos de alumnos.
Cortar, con el uso del machete, el forraje. Luego picar el forraje
sobre una tabla de madera a un tamao de partcula no
superior a 3 cm y no inferior a 1 cm.
Separar una muestra de material picado de aproximadamente
100
gramos
y
guardar
en
recipientes
previamente
acondicionados para realizar las determinaciones analticas y
microbiolgicas iniciales.
El forraje picado se incorporar dentro de cada tubo de la
siguiente manera:
a) Se coloca el material forrajero picado dentro de cada tubo a
razn de un espesor de unos 3 a 5 cm y se compacta bien
con la madera o pizn cilndrico. Se repite sucesivamente el
procedimiento, es decir cada vez que se compacte el
material incorporado, se incorporar nuevo material y se
compacta nuevamente.
b) Una vez llenado cada tubo, y compactado suficientemente el
material forrajero picado, se debe cargar el material picado
hasta que sobresalga del borde del tubo, es decir se carga
en exceso. Con el fin de que no haya posibilidad de que
queden espacios con aire dentro del tubo al momento de
cerrarlo y sellarlo. (Segn indicaciones del docente, TENER
EN CUENTA QUE: habrn diferencias de compactacin entre
microsilos segn lo programado)
c) Se tapa el tubo con el pegamento.
Se identifica cada tubo con el crayn o marcador ponindole un
nmero.
En una planilla se registra cada tubo con su nmero
correspondiente y se describe el material incorporado, el nivel
de compactacin, el agregado o no de aditivos, de bacterias o
de tierra, y observaciones que puedan existir.

7) Los tubos sern almacenados en lugar seco y fresco durante un

mnimo de 45 das.

Aclaraciones:
El procedimiento de confeccin de cada tubo ser realizado de a
uno por vez en cada grupo de alumnos.
MICROBIOLOGA
TRABAJO PRCTICO: Evaluacin de la microbiota de microsilos
experimentales
Objetivo:

Determinar la microbiota epiftica del material vegetal antes y

post ensilado
Evaluar y comparar la variacin microbiana de los microsilos
segn su modalidad de confeccin a los 30 das.

Materiales a utilizar:
Mecheros
Tubos con tapa de 50 mL plsticos estriles
Placas de Petri estriles
Pesafiltros
Balanza
Erlenmeyer de 250 mL
Solucin fisiolgica estril
Ansas
Pinzas
Pipetas automticas
Puntas estriles
Tubos de 7 mL con solucin fisiolgica estril
Medios de cultivo: HyL, RPA y MRS
Agua destilada
Etanol 96
Fibrn para rotular
Metodologa
El procedimiento se dividir en dos etapas: inicial y post fermentacin

1. En la etapa inicial se tomar muestra del material a ensilar y se

colocar en un recipiente estril, especialmente preparado para
ello. Se colocar aproximadamente 100 g y se llevar al
laboratorio. Se pesar 5 g en condiciones de esterilidad y se
colocar en un tubo estril de 50 mL, se agregar 45 mL de
solucin fisiolgica, es decir en dilucin 1/10. Se agitar por 10
minutos. Posteriormente se tomar 500 ul y se disolver en
tubo a rosca con
4,5 mL de solucin fisiolgica estril
obteniendo una dilucin 1/100, luego se repetir la operacin
hasta obtener una dilucin 1/1000. El mismo procedimiento se
seguir con un duplicado. Se tomar 500 ul de las diluciones
1/100 y 1/1000 y se sembrar en profundidad en cajas de Petri
con los medios de cultivo previamente fundidos en bao Mara,
HyL (Hongos y Levaduras), RPA (recuento en placa) y MRS (para
identificar bacterias cido lcticas), correspondera entonces
que por cada muestra se siembren 12 placas.
2. Incubar las placas a 37C por 24 y 48 h. Aquellas sembradas
con MRS se cultivarn en condiciones de microaerofilia (en lata
con vela).
3. Cumplido el tiempo de incubacin, contar las colonias de la
placa con mxima dilucin donde se evidencie crecimiento. Para
el clculo tener en cuenta el volumen sembrado (500 uL) y la
dilucin. Por ejemplo si se cuentan 3 colonias en la placa con
dilucin 1/100 la poblacin microbiana se calcular:
3 colonias x 2 (para convertir 500ul a 1000 ul=1mL) x 100 (inversa de
dilucin) =
6 x 102 UFC/mL
4. Registrar los resultados para comparar con el desarrollo de la
microbiota post fermentacin.

Fuente: http://bagginis.blogspot.com.ar/2016_07_01_archive.html