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Caldo nutritivo: medio usado para el cultivo

de microorganismos poco exigentes en sus


requerimientos nutricionales. No contiene
inhibidores del desarrollo bacteriano. La
pluripeptona es la fuente de carbono y
nitrgeno para el desarrollo bacteriano.
AGAR GELATINA
en esta prueba se pretende determinar la
capacidad de un microorganismo de producir
enzimas de tipo proteolticas (gelatinasas)
que licuan/hidrolizan la gelatina o muestran
cambios caractersticos debido
a los
productos de degradacin. La gelatina como
protena derivada del colgeno animal es
hidrolizada por la gelatinasa en sus
aminocidos constituidos, con prdida de sus
caractersticas gelificantes.
Hidrolisis + liquido solidifica
La peptona y el extracto de carne
proporcionan los nutrientes necesarios para
el desarrollo de los microorganismos.

HgCl 2 precipita las proteinas del medio ,

si es que estas estan presentes .


Prueba (+) : Presencia de halos
transparentes alrededor del crecimiento.
Prueba (-) : Ausencia de halos transparentes
alrededor del crecimiento.
Caldo nutritivo 8.0 g
Gelatina 30.0 g
Agar 7.5 g
Agua, aforar a 1000 ml
pH 7.0
http://microcereus.blogspot.mx/2012/05/gela
tina-nutritiva-peptona-y-el.html
LECHE DESCREMADA
fundamento
Enzima: Caseinasa (Proteasa, exoenzima).
Protena encontrada en la
leche(casena).Formacin de complejos
coloidales insolubles. Presencia de
exoenzima casenasas. Peptonizacin.
Prueba (+) : Presencia de halos
transparentes alrededor del crecimiento.
Prueba (-) : Ausencia de halos transparentes
alrededor del crecimiento.
Caldo nutritivo deshidratado 8.0 g
Leche descremada en polvo 25.0 g
Agar 15.0 g

Agua, aforar a 1000 ml


pH 7.2 +/- 0.2

AGAR ALMIDON
El almidn es un carbohidrato complejo que
es degradado por microorganismos que
contienen amilasas.
La amilosa y la amilopectina se comportan
de manera diferente con el yodo; la fraccin
amilosa del almidn se combina con mucho
mas yodo y produce un complejo azul
intenso. El complejo amilosa-yodo es un
complejo de adsorcin de almidn yodo mas
que un compuesto definido. Las molculas
de yodo estn atrapadas dentro de la hlice
no ramificada de unidades de glucosa de la
cadena de amilosa para formar un
compuesto de inclusin azul. Si esta red de
desintegra, como ocurre durante la hidrolisis
del almidn el color azul se pierde. El curso
de la hidrolisis del almidn en una placa
puede ser seguido por el uso del reactivo de
yodo, ya que a medida que procede la
reaccin el color producido por el yodo
cambia gradualmente de un color azul
intenso a purpura y luego a una falta de
color si se esta produciendo la hidrolisis del
almidn.
El lugol con el almidn forman un complejo
color caf
prpura que desaparece cuando el almidn
ha sido degradado. hidrlisis positiva (zonas
transparentes que rodean a la bacteria sobre
un fondo azul). Negativa color negro
alrededor del cultivo.
Caldo nutritivo deshidratado 8.0 g
Almidn soluble 5.0 g
Agar 15.0 g
Agua
Ajustar el pH a 6.8-7.2
LECHE TORNASOLADA
Fermentacin de lactosa. La leche
tornasolada presenta un color purpreo a pH
= 6,8. Si el microorganismo fermenta la
lactosa con produccin de cido lctico, el
descenso de pH hace virar el indicador a
color rojo rosado. Si labacteria no fermenta la
lactosa, y por su metabolismo se alcaliniza el
medio, el indicador vira de prpura a prpura
azulado.

Formacin y digestin del


cogulo(peptonizacin). La coagulacin
puede deberse a la precipitacin de la
casena por la formacin de cidos, o por la
conversin de la casena en para-casena por
la enzima renina. En el primer caso, el
cogulo es firme y gelatinoso, no se separa
de las paredes del tubo y se disuelve en
medio alcalino. En el segundo caso, el
cogulo es blando, se separa delas paredes
del tubo dando un lquido grisceo (suero).
La peptonizacin o digestin del cogulo se
produce si la bacteria posee la enzima
caseasa.
Formacin de gases. Se generan como
producto final de la degradacin de la
lactosa. Se produce una fermentacin
turbulenta que puede llegar a descomponer
el cogulo cido (Clostridium perfringens) A
partir de la fermentacin de la lactosa
pueden producirse gases (CO2 y H2), la
fermentacin tormentosa sucede cuando el
gas se encuentra en abundancia y rompe el
cogulo cido.
fermentacin de la lactosa:
fermentacin positiva (medio cido): color
rosa.
fermentacin negativa (medio bsico): color
prpura-azul.
reduccin del tornasol:
reduccin positiva: leuco.
reduccin negativa: sin cambios en el tubo.
formacin de cogulo:
coagulo cido: cogulos muy compactos
duros.
coagulo de renina: cogulos suaves.
peptonizacin:
peptonizacin positiva: contenido del tubo
transparente.
peptonizacin negativa: contenido del tubo
opaco.
alcalinizacin:
positiva: anillo prpura.
negativa: sin anillo.
formacin de gas y fermentacin tormentosa
positiva: ruptura del cuajo, burbujas.
negativa: sin ruptura del cuajo, sin burbujas.
Leche descremada en polvo 100 g
Tornasol en polvo 0.75 g
Agua, aforar a 1000 ml
pH 6.8
cido: Color rojo (pH = 4.5)
Alcalino: Color azul (pH = 8.3)

Medio no inoculado: Azul purpura (pH = 6.8)


Indicador de pH: Tornasol
http://www.qo.fcen.uba.ar/quimor/wpcontent/uploads/2012/08/Guia_Medios_2012.
pdf
AGAR SANGRE
La infusin de msculo de corazn y la
peptona, otorgan al medio un alto valor
nutritivo, que permite el crecimiento de una
gran variedad de microorganismos, an de
aquellos nutricionalmente exigentes. El
cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico.
El agregado de sangre al medio de cultivo,
en concentracin final de 5-10 %, aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano, y
permite detectar hemlisis.
La hemolisis alfa es una zona opaca
del agar lo que indica los enlaces ster
fosfato con la formacin de
diglicridos insolubles.
La hemolisis beta es una zona del agar
transparente que indica la hidrolisis de
los enlaces ster.
La hemolisis gama es una zona del
agar donde existe una ausencia de
halo, por lo tanto no utilizaron
fosfolpidos.
Infusin de 500 g de corazn de
ternera, deshidratada (2 g).
Triptosa (10 g).
Cloruro de sodio (5 g).
Agar (15 g).
Agua (100 mL).
Ajustar el pH a 6,8.
AGAR YEMA DE HUEVO
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pdf

Una zona opalescente en el agar en


torno al crecimiento de un
microorganismo indica la hidrolisis de
fosfolpidos.

Este medio se emplea para el aislamiento e


identificacin de estafilococos coagulasa
positivos. El medio contiene telurito de
potasioy cloruro de litio como inhibidores de

la flora acompaante. El piruvato de sodio y


la glicina favorecen el crecimiento de los
estafilococos. El medio de cultivo es opaco
debido a su contenido en yema de huevo.
Las colonias de estafilococos coagulasa
positivos muestran las siguientes
caractersticas diagnsticas: estn rodeadas
por una zona opaca de precipitacin formada
por sales de calcio y magnesio de los cidos
grasos liberados por liplisis. Est seguida de
un halo claro debido a la actividad
proteoltica. Ambas caractersticas
constituyen la reaccin yema de huevo.
Las colonias presentan generalmente centro
negro debido a la reduccin de telurito a
teluro. La reaccin yema de huevoy la

reduccin de telurito se correlacionan bien


con la presencia de coagulasa y, por lo tanto,
pueden utilizarse como ndices de la misma.

Triptona (10 g).


Extracto de carne (5 g).
Extracto de levadura (1 g).
Glicina (12 g).
Piruvato de sodio (10 g).
Cloruro de litio (5 g).
Telurito de potasio 1% (10 mL)
Agar (20 g).
Agua (1000 ml)
Ajustra pH a 7 0,2

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