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Colecta y Preservacin de

macroalgas marinas

Cindy FernndezFernndez Brian Wysor

Pasos
1- Colecta
2-Transporte de muestras
3- Identificacin
4- Preservacin de organismos
A- Muestras hmedas
A
B- Silica gel
C- Secas
C
Secas- Colecciones de herbario

Antes de salir al campo


Se requieren de permisos de colecta e investigacin para
la colecta de cualquier organismo marino, que se
obtienen
bti
en los
l
Mi i t i
Ministerios
d Ambiente
de
A bi t de
d cada
d pas:

ANAM (Panama), MINAE (Costa Rica), MAERN (El


Salvador), MARENA (Nicaragua)
La exportacin de organismos requiere un permiso aparte
La colecta debe tomar en cuenta dejar duplicados en los
herbarios locales para incrementar el conocimiento.

1- COLECTA

Materiales

Valde
B l
Bolsas
previamente
i
t numeradas
d
Cmara
Cincel
Martillo
Cuchillo
Tabla acrlica
Lpiz
GPS

Colecta de Muestras
A la hora de colectar algas hay que tomar en cuenta
diferentes factores ambientales.
Una buena coleccin debe buscar amplia combinacin
de sitios:
1 Sustrato: Fondos rocosos,
1rocosos arenosos,
arenosos coralino
coralino, races
de mangles, madera, flotando
2- Profundidad: Zona intermareal, Submareal

Colecta de Muestras: Tips


No sobrecolectar ! : Gasto
de tiempo + algas olorosas

Colectar suficiente material


para preservar apropiadamente

Muestrear
uest ea a varias
a as
profundidades y diferentes
sustratos

2- TRANSPORTE
Transportar las algas con suficiente agua de mar
Evitar exposicin al sol
Mantener muestras con aireacin si se procesan despus

Si el laboratorio esta largo fijar las muestras en formalina al


4% en agua de mar con un buffer (bicarbonato de calcio
8
cda/litro)
Nota: El material en formalina no sirve para anlisis genticos

3-IDENTIFICACIN
Obtener guas
de identificacin
segn el sitio de
estudio

Materiales
Cmara
Computadora
C
t d
para
ingresar datos-Libreta
Pinzas
Tijeras
Bandejas
PortaobjetosCubreobjetos
Microscopio
(micromtrico)
Regla
g
Lpiz

10

En el laboratorio
Separar muestras por especie
Tomar en cuenta los
duplicados por espcimen:
- 1 formalina,
- 1 silica g
gel ((Si hayy inters en anlisis molecular))
- 2-4 secas

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La identificacin requiere de mltiples


estrategias:
g
- Tinciones
- Cortes: longitudinales
y transversales

Azul de anilina

- Descalcificacin con
HCl al 10%
- Hidratacin: muestras
secas
-

Corte transversal

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Examinacin bajo
microscopio
Descalcificacin

Corte longitudinal

Identificacin
Examinar el material fresco
siempre es lo mejor, sin
embargo una buena
preservacin en formalina
funciona

Base de Datos

Elaborar una base de datos


Elegir un cdigo para cada
muestra
Colocar nmeros consecutivo
a los especimenes
Fotografiar !

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4- PRESERVACIN

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A-Hmedas
Formalina 4%

Alcohol 90%

- Se ven mejor los tejidos


- Conservan color
- Txico

- Se pueden utilizar para


anlisis moleculares
- Disuelve pigmentos: algas
quedan blancas
q
- No txico

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Materiales

Frascos-Viales
Etiquetas
Lapiz
Formalina 4%
Alcohol 90%
Guantes

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B- Silica gel
Trabajo Molecular:
- La extraccin de ADN es mejor si se utiliza material
fresco
- La integridad del ADN se conserva al secar
rpidamente la muestra
- El silica gel promueve un secado rpido
- Especmenes fijados en fomalina no pueden ser
utilizados para este tipo de anlisis

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Materiales
Silica gel
Marcador
M
d negro
indeleble
Bolsas pequeas
Papel toalla
Etiqueta

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Pasos para preservacin en silica gel


1- Tomar un trozo del alga
2 Secarlo en papel toalla
23- Envolverlo en papel toalla seco
4- Colocarlo dentro de una bolsa
(Colocar cdigo)
5- Agregarle el silica gel

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C- Muestras Secas
Requisitos: Paciencia y Estilo

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Materiales
Cmara
Computadora para ingresar
datos-Libreta
Pinzas
Tijeras
Portaobjetos-Cubreobjetos
Microscopio (micromtrico)
Regla

Lpiz
Bandejas
Papel fabriano
Cartn
Prensa Herbario

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Montaje de muestras
Hay varias tcnicas para
colocar un alga sobre el papel.
Un t
U
tcnica
i es colocar
l
ell alga
l en
una bandeja con agua de mar y
con un pincel o aguja ir
extendiendo el talo.
Desventaja:
D
t j El secado
d ell muy
lento

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Otra tcnica
Colocar el alga en el papel,
agregar unas gotas de agua
Extender el alga con un
pincel o aguja
p
g j
Eliminar el exceso de agua
con un gotero.

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Montaje de las muestras


Montaje bsico para secar las
muestras incluye:
cartn

peridico

muestra

peridico

cartn

1- Colocar muestra en papel


fabriano
2- Colocar papel encerado
(para que no se pegue la
muestra
3- Capa de papel peridico a
ambos lados
4 Capa
4C
d
de C
Cartn
t a ambos
b
lados
* Nota: Se pueden colocar otras
capas de papel o telas secantes

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Prensado
Apilar varias muestras
seguidas
Prensar
La Prensa se puede
colocar cerca de una
fuente de calor o de aire
para un secado ms rpido

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Etiqueta
Debe Contener:
- Nombre Especie con
Autor
- Localidad de colecta
(Nombre, coordenadas)
- Hbito del alga: sustrato,
profundidad, epfita
- Nombre
N b d
de quien
i colecta
l t
- Nombre de quien
identifica la especie
- Fecha de colecta
- Nombre del Herbario
- Nmero del Herbario
- Preservacin:
P
i ffresca,
formalina, alcohol

Etiqueta de herbario

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Ejemplos

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Metas de una Coleccin


Referencia de los especmenes
Historia de la investigacin
Poner a disposicin de la comunidad cientfica la
informacin para comparaciones morfolgicasgenticas futuras
Cuantificacin de la biodiversidad
Informacin de la distribucin y ecolgia de las
especies
El rastreo de la informacin de los especmenes debe
ser gil.

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Al Final
Base de Datos

Muestras Gentica

Fotografas: Campo-Morfologa

Coleccin de referencia (hmeda-seca) para futuro

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Agradecimientos
Fotografas de:
Tropical Phycology Course 2008:
http://striweb.si.edu/taxonomy_training/past_courses/
2008/2008_phycology.html
Cindy
Cind Fernnde
Fernndez G
G.
Lennert Tyberghein
Juan Jos Alvarado

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