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UNIDAD V

CITOESQUELETO
5.1. Generalidades y principales funciones del citoesqueleto
5.2. Estudio del citoesqueleto
5.2.1 El uso de la microscopia con fluorescencia en clulas vivas
5.2.2 El uso de pruebas de molculas individuales in vivo e in vitro
5.2.3 Uso de tcnicas de imgenes con fluorescencia para vigilar la dinmica del citoesqueleto
5.3. Microtbulos
5.3.1 Protenas relacionadas con los microtbulos
5.3.2 Microtbulos como soportes y organizadores estructurales
5.3.3 Microtubulos como agentes de movilidad intracelular
5.3.4 Proteinas motoras que cruzan el citoesqueleto microtubular
5.3.5 Centros organizadores de microtubulos
5.3.6 Propiedades dinmicas de los microtubulos
5.3.7 Cilios y flagelos: estructura y funcin
5.4 Filamentos intermedios
5.4.1 Ensamble y desensamble de filamentos intermedios
5.4.2 Tipos y funciones de los filamentos intermedios
5.5 Microfilamentos
5.5.1 Ensamble y desensamble de microfilamentos
5.5.2 Miosina: el motor molecular de los filamentos de actina
5.6 Contractilidad muscular
5.7 Motilidad extramuscular

Microfilamentos

7 nm

10 nm

Filamentos intermedios

25nm

25m

25nm

25 nm

Microtbulos

25nm

25m

25m

ESTRUCTURA Y ORGANIZACION DE LOS


MICROFILAMENTOS
-

Ensamblado y desensamblado de los microfilamentos: Los microfilamentos


se forman por polimerizacin (cabeza-cola) de actina G formando una hlice
de doble cadena. Diversas protenas que interaccionan con la actina regulan el
ensamblado y desensamblado de microfilamentos en la clula.
- Organizacin de los microfilamentos: En las clulas, los filamentos de actina
son entrecruzados por protenas de unin a actina formando haces o redes
3D.
- Asociacin de microfilamentos los con la membrana plasmtica: Esta
membrana esta recubierta en su parte interna por una red de filamentos de
actina y otras protenas del citoesqueleto que determinan la forma de la clula.
Los haces de actina se unen a la membrana en regiones de contacto
intercelular o de adhesin a sustratos.
- Protuberancias de la membrana plasmtica: Los microfilamentos soportan
las protuberancias permanentes (ej. microvilli) o transitorias (ej., en
fagocitosis, gemacin, locomocin).

Microfilamentos: Estructura
-

Microfilamentos: Recambio molecular in vitro

Microfilamentos: Recambio molecular in vitro

Treadmilling

CMO SE INICIA IN VIVO LA FORMACION DE LOS


MICROFILAMENTOS?

Microfilamentos: Recambio molecular in vivo

Microfilamentos: Recambio molecular in vivo

ADF/Cofilina
(C)

Microfilamentos: Recambio molecular in vivo

Microfilamentos: Recambio molecular in vivo

Microfilamentos: Recambio molecular in vivo

Cell crawling

Microfilamentos: Haces y redes de actina

Haces contrctiles

Redes

Haces paralelos

Haces y redes de actina


Filamina (280 kd)

14 nm

Fimbrina (68 kd)

40 nm

-actinina (102 kd)

Redes de actina: Unin a la membrana plasmtica

Dominio de unin a actina


Cadena b

Dominio de unin a Ca2+

Cadena a

Espectrina (240kd y 220 kd)

Haces de actina: Unin a la membrana plasmtica

Microfilamentos

Cateninas

Cadherina

Membrana
plasmtica

Haces de actina: Unin a la membrana plasmtica

MICROVELLOSIDADES

ACTINA, miosina y movimiento celular


- CONTRACCION MUSCULAR: En las clulas musculares, la Miosina II es una
protena motora que utiliza ATP para generar fuerzas mecnicas y movimiento.
La contraccin muscular resulta del deslizamiento en direcciones opuestas de
los microfilamentos y filamentos de miosina.
- ENSAMBLADOS CONTRACTILES DE ACTINA Y MIOSINA II EN CELULAS NO
MUSCULARES: Son responsables de diversos movimientos celulares (ej,
citocinesis).
- MIOSINAS NO CONVENCIONALES: No actan en procesos de contraccin.
Sirven para transportar vesculas de membrana u orgnulos a lo largo de
microfilamentos y generar corrientes citoplasmticas (ej., miosina I, miosina V).
- "GATEO CELULAR" (cell crawling): Proceso complejo en el que se forman
extensiones de la membrana plasmtica mediante polimerizacin de
microfilamentos en el borde de avance de la clula. Estas extensiones se unen
despus al sustrato y el borde posterior se retrae sobre el cuerpo celular. En
ambos procesos parecen estar implicados motores tipo miosina.

CITOCINESIS

LA MIOSINA II EN LA CONTRACCION MUSCULAR

Miosinas no convencionales
Miosina V
Miosina I

MICROTUBULOS
- ESTRUCTURA, ENSAMBLADO E INESTABILIDAD DINAMICA: Se
forman por polimerizacin reversible de dmeros de tubulina ().
Pueden sufrir continuos ciclos de ensamblado y desensamblado
como resultado de la hidrlisis de GTP tras la polimerizacin
(inestabilidad dinmica).
Los MT,s se extienden desde el centro organizador de microtbulos
(centrosoma), situado en el centro de la clula. En clulas animales
ste contiene un par de centriolos rodeados de material
pericentriolar, en el que se inicia el crecimiento de los microtubulos
(extremo -).
Durante la mitosis, los microtubulos se reorganizan y forman el
huso mittico, responsable de la separacin de los cromosomas.
- Estabilizacin de los microtubulos y POLARIDAD CELULAR: Los
microtubulos se pueden estabilizar selectivamente por union a
protenas, lo cual determina la forma y polaridad de la clula (ej.
axones).

Estructura de los microtubulos

Inestabilidad Dinamica de los


microtubulos

Organizacin y recambio de los


microtubulos in vivo

Organizacin y recambio de los


microtubulos in vivo

Organizacin y recambio de los


microtubulos in vivo

MBoC
Alberts 3rd Edition

Organizacin y recambio de los


microtubulos in vivo

Estructura de los centriolos

Reorganizacion de los microtubulos en la


division celular
INTERFASE
Duplicacin del
centrosoma

Separacin de los
centrosomas
Condensacin de la
cromatina

PROFASE

METAFASE
Microtbulos polares
Rotura de la
envuelta nuclear
Formacin de huso
mittico

Microtbulos astrales
THE CELL. G.M. Cooper, 3rd Edition

Microtbulos del
cinetocoro

Caracteristicas comunes a
microfilamentos y microtubulos
1) Tanto los microfilamentos como los microtbulos estn constituidos por
protenas globulares con actividad NTPasa (ATPasa y GTPasa,
respectivamente).
2) En ambos casos, ~ 50% de la protena constituyente se encuentra en
forma soluble y el 50% en forma de filamentos.
3) Forman estructuras MUY DINAMICAS, con un intercambio rpido de
subunidades entre el "pool" soluble y el insoluble (filamentoso).
4) Tanto los microfilamentos como los microtbulos son estructuras
"polarizadas (extremos distintos).
5) Las estructuras formadas por microtbulos y/ microfilamentos, poseen
las capacidades de transportar y generar fuerzas, por lo que es justo
referirse a ellos como "Citomusculatura".

Proteinas motoras de microtubulos:


dineinas y kinesinas

Proteinas motoras de microtubulos:


estructura de dineinas y kinesinas

PROTEINAS MOTORAS DE
MICROTUBULOS EN LA DIVISION CELULAR
ANAFASE

Proteinas motoras de microtubulos en la


division celular
ANAFASE

Microfilamentos, microtbulos y la
distribucin de orgnulos
Azul: Microtbulos
Rojo: Mitocondrias
Verde: Ncleo

Verde:Microfilamentos
Rojo: Mitocondrias
Azul: Ncleo

Estructura de cilios y flagelos

Movimiento de cilios y flagelos

http://images.google.com/imgres?imgurl=http://genomasur.com/lectu
ras/06-11G.gif&imgrefurl=http://genomasur.com/lecturas/Guia06.htm&h=287&
w=350&sz=19&hl=es&start=12&um=1&tbnid=XevHhNAJaVoiPM:&t
bnh=98&tbnw=120&prev=/images%3Fq%3Dmovimiento%2Bciliar%
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Protenas motoras de microtbulos


- Dos familias principales. Las KINESINAS, que se mueven
hacia el extremo +, y las DINEINAS, hacia el extremo -.
Intervienen en el transporte vesicular, de orgnulos y en la
separacin de cromosomas en la anafase.
- CILIOS Y FLAGELOS: Son extensiones permamentes de la
membrana plasmtica edificadas a partir de microtbulos. Su
movimiento resulta de el deslizamiento de microtbulos
adyacentes, impulsado por la accin de dinenas.

Organizacion de los microtubulos en


neuronas

Organizacion de los microtubulos en


neuronas

Verde: tau
Rojo: MAP2

Filamentos intermedios
- COMPOSICION: Son polmeros de ms de 50 protenas diferentes y
caractersticos de tipos celulares. Parecen proporcionar soporte mecnico a
clulas y tejidos y no estn implicados en el movimiento celular.

- ENSAMBLADO: Los filamentos intermedios se forman a partir de dmeros


de 2 polipptidos que forman un helicoide enrollado. Estos se agrupan a su
vez en tetrmeros antiparalelos y en protofilamentos. La agrupacin de 8
protofilamentos forma un filamento intermedio de 10 nm, con una estructura
similar a la de una cuerda.

- ORGANIZACION INTRACELULAR: Con cierta frecuencia (aunque no


siempre) tienen una distribucin coincidente con la de los microtbulos.
Forman una red que se extiende desde la zona nuclear hasta la membrana
plasmtica. En celulas epiteliales, se unen a la membrana en regiones
especializadas de contacto (desmosomas y hemidesmosomas). Juegan
tambien papeles especializados en celulas nerviosas y musculares. Las
lminas nucleares estn tambin formadas por filamentos intermedios.

Los filamentos intermedios se clasifican de acuerdo a la protena


que los compone. Algunos de los tipos conocidos son:

Queratinas
Vimentina
Desmina
Protena cida fibrilar glial (GFAP)
Neurofilamentos
Lminas nucleares.
Nestina

http://www.goldmanlab.northwestern.edu/images/lamins1.gif

FILAMENTOS INTERMEDIOS

MBoC
Alberts 3rd
Edition

Estructura de las proteinas de los


filamentos intermedios
(310-350 aa)

MBoC
Alberts 3rd Edition

Los filamentos intermedios en las


interacciones celula-celula y clula-matriz
extracelular

Enfermedades
asociadas
alteraciones del citoesqueleto:
Cardiovasculares.
Neurodegenerativas.
Miopatias congnitas.
Oncolgicas (invasin).
Cirrosis heptica.
Fibrosis pulmonar
Enfermedades de la piel.

con

Funciones del citoesqueleto:


Motilidad.
Proliferacin celular.
Control y mantenimiento de la morfologa y
estabilidad celular.
Comunicacin celular y traduccin de seales
intracelulares.

...

El rol de la unin membrana-citoesqueleto en la contraccin


muscular fue descubierto en estudios de Distrofia muscular
de Duchenne, un enfermedad gentica degenerativa,cuyo gen
est ubicado en el cromosoma X (ligado al sexo).
Las personas tienen un defecto en el gen que codifica la
distrofina, una protena que constituye un 5% de las clulas
musculares de la unin membrana citoesqueleto.

Membrana plasmtica

citoesqueleto

Distrofia Muscular
Son desrdenes genticos que se caracterizan por el
deterioro y debilidad progresivos de los msculos, que
inician con cambios microscpicos en los msculos.

Datos poblaciones
Afecta a 1 de 3500 hombres. Se trata de una
enfermedad gentica de transmisin recesiva
ligada al cromosoma X. Slo afecta a los
varones, mientras que las mujeres son
transmisoras.

Distrofia muscular de duchenne


Esta enfermedad se la trasmite por herencia
monogentica recesiva ligada al cromosoma X
Esta enfermedad es mucho mas incidente en los hombres,
ya que los genes del cromosoma Y no van a entrecruzarse
con los genes del X.
Los genes recesivos ligados al X se expresan en las
mujeres nicamente si existen dos copias del gen (una en
cada cromosoma X)

Patrn de herencia

En los varones
slo tiene que
haber una
copia de un
gen recesivo
ligado al X
para que la
enfermedad
se exprese.

Distrofia Muscular de Duchenne


La distrofia muscular de duchenne (DMD) es una
enfermedad degenerativa de los msculos los cuales
se debilitan poco a poco.
Es un trastorno hereditario que se caracteriza por la
debilidad muscular progresiva que afecta primero a
las piernas y la pelvis
Afecta a varones, en una proporcin de 1 entre cada
3500 varones nacidos, con una duracin de vida
aproximadamente alrededor de 20 aos.

Causas
La enfermedad de la distrofia muscular de Duchenne se
encuentra en un gen recesivo ligado al cromosoma X.
El defecto de este gen, es la falta de produccin de la
distrofina, que es la protena que se encarga de la
regeneracin y elasticidad de las clulas musculares

Distrofina

El gen de la distrofina,
localizado en el
cromosoma X,
especficamente en Xp21,
est formado por 2,4
millones de pares de
bases, lo que lo convierte
en el gen ms grande que
se ha encontrado en
humanos, ya que
representa el 1,5% del
cromosoma X.

Sntomas
Debilidad muscular
rpidamente progresiva
cadas frecuentes
dificultad con habilidades motoras (correr, bailar, saltar)
Dificultad al caminar progresiva
la capacidad de caminar se puede perder hacia los 12 aos de
edad
Fatiga
Posible retardo mental
Deformidades esquelticas
pecho y espalda (escoliosis)
Malformaciones musculares
contracturas de los talones, piernas
seudohipertrofia de los msculos de la pantorrilla.

Sntomas
y

Un sntoma muy
importante de la distrofia
muscular de Duchenne es
la llamada maniobra de
Gowers. Que a los nios
les resulta muy difcil
levantarse cuando estn
sentados o acostados en
el suelo

Tratamiento
No existe algn
tratamiento o
medicamento que
cure la distrofia
muscular de
Duchenne, ya que no
se han encontrado la
forma de reparar o
producir una protena
que sustituya a la
distrofina.

Aunque se puede controlar


parcialmente con:
1.Fisioterapia
2.Soportes posturales (para ayudar
al nio a sentarse, acostarse o
estar de pie).
3.Frulas y aparatos ortopdicos
(para evitar las deformidades y
para servir como apoyo o como
proteccin).
4.Medicamentos
5.Consejo diettico.
6.Ayuda psicolgica

Tratamiento

La CARDIOMIOPATIA DILATADA CANINA

es una
enfermedad del msculo cardiaco que se caracteriza por prdida de su
funcin contrctil y por una progresiva dilatacin ventricular, en
ausencia de enfermedades cardiacas vasculares y valvulares. La
enfermedad se describi por primera vez en 1970 y desde entonces su
incidencia ha ido en aumento.

Etiologia desconocida
Animales de mas de 20 kg
Mayor incidencia en
machos
Edad media (5-7 aos)
Doberman, boxer, ovejero
aleman, cocker spaniel

CMD: Variable Edad


60

50

CASOS

40

30

20

10

0
1

EDAD

10

11

12

13

14

15

16

17

N= 331

Problema 1:Pacientes con sndrome de cilia


inmvil tienen defectuosa _______.

A.
B.
C.
D.

miosina
tubulina
dineina
actina

Problema 2: Un Motor singular


Explique como una protena motora de clase nica
puede causar el movimiento de una amplia variedad
de sustancias, incluyendo vesculas, cromosomas,
protenas, etc.
A.

La naturaleza ha desarrollado diferentes


mecanismos o protenas motores, no relacionados
unos con otros y con mecanismos
independientes/incluyendo vesculas, cromosomas,
protenas, etc.

B.

Familias con mltiples genes para protenas motores


tienen el mecanismo para moverse a lo largo de
microtubulos en comn y tienen la otra parte de la
misma protena alterada para permitir la ligadura a
una variedad de sustancias.

Problema 3: Cilias y Flagelos


Qu mecanismo es responsable por los
movimientos de cilias y flagelos?
A.
B.
C.
D.

Kinesina moviendose sobre microfilamentos


Dineina moviendose sobre microfilamentos
Dineina moviendose sobre microtubulos
Miosina moviendose sobre microfilamentos

Problema 4: Citochalasinas
Las citochalasinas son drogas que interfieren con
la polimerizacin de la actina dentro de los
microfilamentos. Si usted agrega citochalacina a
un cultivo de clulas de mamfero que justo han
comenzado la mitosis qu es lo ms probable
que ocurra?
A.

Las clulas se detendrn en metafase mitotica.

B.

Las clulas cesaran el metabolismo y morirn.

C.

Las clulas completarn la mitosis y se detendrn


en citocinesis.

D.

Las clulas se detendrn en anafase mitotica.

Problema 5: Movimiento de Cromosomas


Cul de las siguientes observaciones
experimentales sugiere que los cromosomas se
mueven por polimerizacin de subunidades de
tubulina?
A.

Se gasta energa en el proceso de movimiento de


cromosomas.

B.

Substancias qumicas que bloquean la interaccin de


subunidades de tubulina tambin bloquean el
movimiento de cromosomas.

C.

Los cromosomas se mueven deslizandose uno sobre


otro.

D.

Los cromosomas estn individualmente adheridos a


microtubulos.