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QMC 200 L
Facultad de Ingeniera
PROYECTO
EXTRACCIN DE COLAS Y GELATINAS A PARTIR DE
FUENTES ANIMALES
Alumnos :
Docente :
Auxiliar
Materia
Fecha
30 / 05 / 05
La Paz Bolivia
I / 2005
1
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
INDICE
I.
OBJETIVOS
..4
II.
FUNDAMENTO
TEORICO..4
COLGENO...4
ESTRUCTURA DEL COLAGENO.6
REVISION DE LOS DISTINTOS TIPOS DE COLAGENO8
COLAGENO TIPO I.8
COLAGENO TIPO II.......9
COLAGENO TIPO III......9
COLAGENO TIPO IV y V 10
PROPIEDADES GENERALES.10
GELATINA...10
MATERIAS PRIMAS..12
FABRICACION DE LA GELATINA..13
PROCEDIMIENTO ALCALINO (GELATINA TIPO B)..13
PRECURSOR ACIDO (GELATINA TIPO A).18
PROPIEDADES FSICAS DE LA GELATINA....21
VISCOSIDAD..21
RIGIDEZ DE LAS GELES21
LA FUSION DE LOS GELES Y SOLIDIFICACION DE LAS
SOLUCIONES23
PUNTO DE FUSION.23
FORMACION DE GELES. AGREGACION MOLECULAR..24
PROPIEDADES QUIMICAS DE LA GELATINA25
COLAS.25
PRESERVACION DE LA CALIDAD DE LA COLA...25
III.
MATERIALES
REACTIVOS.27
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
IV.
PROCEDIMIENTO
.28
V.
DATOS
EXPERIMENTALES...31
VI.
CALCULOS
RESULTADOS33
VII.
GRAFICOS
..35
VIII.
COMPARACION
CON
DATOS
BIBLIOGRAFICOS36
IX.
OBSERVACIONES.
39
X.
CONCLUSIONES
40
XI.
BIBLIOGRAFIA..
.42
XII.
ANEXOS.
..
..43
ESTUDIO
DE
LA ESTABILIDAD TERMICA DE
LA RED
DEL
COLAGENO..43
USO COSMETICO DEL COLAGENO..43
USO MEDICO DEL COLAGENO..44
ASPECTOS BASICOS SOBRE ASHESIVOS.45
CONDICIONES GENERALES PARA UNA BUENA ADHESION.45
PEGAMENTOS EN GENERAL..47
OBTENCION
DE
GELATINA COMESTIBLE
SECUENCIA DE
PROCESOS..48
PROCEDIMIENTO...50
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
I.
OBJETIVOS
II.
FUNDAMENTO TEORICO
COLAGENO
El trmino colgeno (del griero kola, que significa cola, y egonomen, equivalente
a producir).
El colgeno es un material extracelular fabricado por los fibroblastos y es una
protena fibrosa que resulta relativamente insoluble en agua, en contraposicin a
otras familias de llamadas globulares,
que s son solubles en agua.
La base molecular del colgeno est
constituida por cadenas de polipptidos
y cada uno de stos es un polmero de
aminocidos. Es decir, son cadenas
Colas y gelatinas
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Colas y gelatinas
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Estructura del colgeno.El peso molecular del tropocolgeno ha sido estimado entre 300.000 y 325.000.
Cada molcula de tropocolgeno esta constituida por tres cadenas de
polipptidos en cada una de las cuales hay alrededor de 1000 aminocidos. La
estructura de la triple hlice del tropocolgeno es fundamental y es caracterstica
de esta protena fibrilar. Cuando existen defectos (incluso se conocen ciertos
Colas y gelatinas
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defectos genticos) por los cuales existen dficit en algunos aminocidos que
constituyen la cadena de polipptidos del colgeno, entonces la triple hlice no
se puede formar y en esos casos la molcula de tropocolgeno es defectuosa e
incapaz de reconstituir la fibrilla de colgeno (o sea, no existe o no se forma el
colgeno). Eso se ve en algunas enfermedades, algunas de origen hereditario y
otras producidas por sustancias qumicas, drogas, etc. Cuando se analiza ya la
composicin qumica de estas cadenas de polipptidos que constituyen el
colgeno, se ve que los aminocidos que conforman el colgeno tienen una
distribucin bastante regular, que es lo que caracteriza a las protenas.
Encontramos una estructura que se llama repetitiva en la secuencia de
aminocidos que se simboliza de esta manera:
Gli x y Gli x y Gli x- y - Gli
0 sea, a lo largo de los 1000 aminocidos
que
constituyen
cada
polipptido,
despus
encontramos
dos
Colas y gelatinas
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0 sea, una molcula que tiene 300 m de longitud y que adems est polarizada
con dos extremidades diferentes. En un primer sentido, las molculas de
tropocolgeno se ordenan a lo largo unas de otras, pero en la segunda hilera de
molculas, en el colgeno nativo, hay una hilera que vendr ms de atrs y as
sucesivamente se colocan desfasadas.
Colas y gelatinas
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aparece con
mucha frecuencia
vinculado
al msculo
liso
y es
que
vimos
que
constituan
parte
de
esa
estructura.
Colas y gelatinas
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denominadas alfa 1 (III). O sea, tiene tres cadenas iguales, con una disposicin
de aminocidos propia, donde predomina la hidroxiprolina y donde adems
aparece un aminocido que no es muy comn en otros colgenos, que es la
cistina.
Colgeno tipos IV y V
Aparecen especficamente localizados en las membranas basales, o sea, en
aquellas estructuras que separan generalmente los epitelios de los tejidos
conjuntivos. El colgeno IV es muy frecuente en todas las membranas basales.
El
placenta (rgano muy especial, transitorio), que citamos solo para dar un ejemplo
de cmo esta protena se adapta a distintas funciones biolgicas que van
apareciendo a lo largo do la evolucin de las especies.
Propiedades generales
El colgeno nativo posee propiedades muy particulares que no se encuentran en
los productos de degradacin, es decir, en la gelatina.
La reactividad bioqumica del colgeno nativo proviene, sustancialmente, de los
telopptidos de las extremidades de la cadena polipeptdica, ello de una parte y,
de otra, de su propia estructura.
Las pelculas preparadas a partir de soluciones de colgeno nativo son muy
resistentes.
Las soluciones de gelatina por evaporacin, tienden, en general, a la
pulverizacin y algunas veces proporcionan pelculas muy frgiles.
Las pelculas de colgeno nativo se adhieren fuertemente a las capas
queratinizadas de la epidermis humana y poseen un
importante poder de retencin de agua.
El colgeno nativo extendido sobre la piel posee un
aspecto de alisamiento sobre las pieles secas,
disminuyendo el aspecto arrugado y exfoliado de las
pieles ancianas.
GELATINA
10
Colas y gelatinas
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Colas y gelatinas
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12
Colas y gelatinas
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Fabricacin de gelatina
El objetivo en la elaboracin de gelatina es controlar la hidrlisis del colgeno (de
diversas procedencias) y convertir el producto resultante en un material soluble
con las propiedades fsicas y qumicas deseables, entre las que estn la
resistencia de los geles, adherencia, color, consistencia y transparencia.
Esencialmente, el proceso consiste en tres etapas fundamentales:
1.
2.
3.
13
Colas y gelatinas
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alcalino o
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Colas y gelatinas
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Colas y gelatinas
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Las cortezas bien recortadas (si hay un exceso de grasa el producto final es
turbio) se descongelan, se lavan en agua fra y se remojan en una solucin
diluida (alrededor del 5%; 1N en el caso de las sinovias) de un cido inorgnico
como el clorhdrico, sulfuroso (dixido de azufre en agua), fosfrico o sulfrico, de
forma que el valor del pH sea alrededor de 4. Los cidos sulfrico y sulfuroso se
utilizan con una normalidad de 1 1.5, requiriendo periodos ms prolongados de
remojo. A este pH cido el colgeno se hincha y se produce una considerable
solubilizacin. El remojo en cido se mantiene de 10 72 horas (24 48 horas
en el caso de las sinovias, 48 72 horas para los cartlagos de las escpulas),
renovando el cido a las 24 36 horas. Si el periodo de remojo en cido se
prolonga, aumenta el rendimiento de colgeno extrado, pero se reduce la
resistencia de los geles y la viscosidad. Finalmente, se quita el cido y se
procede a un lavado para elevar el pH de la materia prima a 4.5. A veces se hace
un enjuague con hidrxido sdico al 5 8 % para elevar el pH a 6 6.5. El
lavado se contina para eliminar las sales formadas. Si se emplean los cidos
sulfrico o sulfuroso, las sales formadas son menos solubles y es necesario
prolongar los lavados. La mayora de las protenas que acompaan al colgeno
en la materia prima tienen un punto isoelctrico de 4 5 y en consecuencia son
menos solubles y se coagulan rpidamente durante la extraccin. A este valor del
pH el colgeno nativo se encuentra hinchado. El proceso cido da una gelatina
con un punto isoelctrico de 8.9 (margen 8.5 9.4). El proceso cido parece que
solo produce una reorganizacin fsica de las estructuras del colgeno, con un
mnimo de cambios hidrolticos. En consecuencia hay solo un incremento ligero
de los grupos amino-primarios y de los grupos carboxilo libres. El peso molecular
medio de los productos obtenidos en el proceso cido es de 70.000 90.000,
excepto en el caso de las vejigas natatorias del esturin, en que se han dado
pesos moleculares del orden de 250.000.
Despus del tratamiento cido, el colgeno se extrae siguiendo el mismo
procedimiento que el proceso alcalino, excepto que las cortezas de cerdo se
pueden extraer empezando a menor temperatura que las pieles de vaca. La
filtracin tambin es ms fcil. La desecacin de los extractos tambin se
completa igual que en el proceso alcalino.
19
Colas y gelatinas
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La gelatina obtenida a partir de las cortezas de cerdo tiene una mayor resistencia
de los geles y ms transparencia y mejor color que la obtenida de las pieles de
vacuno en el proceso alcalino. De las sinovias se consigue tambin un buen
producto y usualmente se hacen mltiples extracciones. La decantacin y
clarificacin de las sinovias se hace a 50 60C y se consigue un extracto
bastante claro. Si se utilizan cido sulfrico o sulfuroso los extractos estn ms
turbios y puede que sea necesario someterlos a filtracin o floculacin. La
desecacin de los extractos de sinovias se puede hacer en secadores de tambor
aunque se consigue un producto de mayor calidad desecndolos por el
procedimiento del tnel de enfriamiento y desecacin.
El isinglas se extrae en agua a 55 60C durante 4 6 horas. Las materias
primas antiguas pueden requerir una segunda extraccin. Los extractos se filtran,
se concentran por centrifugacin en flujo continuo y se evaporan a vaco.
Despus se desecan en tambor o se enfran (5 10 C) y se desecan en tneles
(60 70 C) hasta un 8 10 % de humedad.
Parece que la gelatina obtenida en el proceso cido mantiene muchos de los
enlaces cruzados del colgeno y se ha sugerido que este tipo de producto reciba
el nombre de colgeno fundido soluble. Con el pre-tratamiento cido se consigue
una gelatina con un punto isoelctrico de 8.9 ya que se considera que el proceso
cido solo consigue provocar reorganizacin fsica de la estructura del colgeno
con un mnimo de cambios hidrolticos y en consecuencia solo hay un pequeo
incremento de grupos amino primarios y escasos grupos carboxlicos libres.
El material mantenido en cido se somete a una serie de cocciones. La
extraccin inicial se hace aproximadamente a 60C y la temperatura se eleva en
5 10C en cada extraccin sucesiva. Comercialmente se realizan de 8 10
extracciones y los productos se desecan rpidamente para prevenir su
degradacin y la contaminacin microbiana. Cada extracto desecado se clasifica
de acuerdo con su resistencia de los geles y viscosidad, mezclndose diversos
productos para conseguir las propiedades deseadas.
Las gelatinas obtenidas en los procesos cido y alcalino son distintas y por lo
tanto los productos no son sustituibles sin ms el uno por el otro en una misma
aplicacin comercial.
20
Colas y gelatinas
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de la concentracin y la
21
Colas y gelatinas
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24h a 100C aumenta a aproximadamente 0.4% por hora aunque la mitad del valor
que corresponde a las 24h se alcanza en una hora. La rigidez sigue aumentando
lentamente durante un largo periodo.
La rigidez de los geles depende del ph de una manera no totalmente predecible.
Con las gelatinas de bajo punto isoelctrico, la rigidez cambia poco entre ph 5 y
ph 9, pero decrece bruscamente por debajo de ph 5. Estos efectos son mas
pronunciados con geles de poca consistencia. La rigidez depende mucho de la
temperatura, pero la relacin es compleja y varia de una concentracin a otra. As
con geles preparados a partir de dos gelatinas diferentes, uno puede tener la
rigidez mas alta a 100C y el otro a 200C. Tales efectos son mas pronunciados
cuando los puntos de fusin de los geles son muy diferentes, puesto que en
general, la velocidad de cambio de la rigidez con la temperatura aumenta cuando
se esta prximo al punto de fusin. El punto de fusin puede definirse como la
temperatura a la cual la rigidez se hace cero.
Por encima de un cierto peso molecular, la rigidez de un gel madurado a 00C es
independiente del peso molecular de la gelatina. Por debajo del valor critico del
peso molecular, la rigidez cae bruscamente a cero. Con la gelatinas normalmente
que tienen una amplia distribucin de pesos moleculares, la rigidez depende del
peso molecular solo en cuanto concierne a la proporcin de molculas
que
tienen pesos moleculares por debajo del valor critico. Este valor critico se eleva
cuando la temperatura a la cual se mide la rigidez, de modo que cuando al
temperatura se aproxima al punto de fusin de la gelatina, la rigidez se hace cada
vez mas dependiente del peso molecular. Estos efectos se muestran claramente
fraccionando una gelatina mediante precipitacin con alcohol. Todas
las
fracciones excepto las de peso molecular mas bajo, tienen la misma rigidez a
00C. Esta rigidez da una medida de las caractersticas de gelificacin intrnsecas
de la gelatina considerada. La caracterstica estructural determinante de este
factor de gelificacin no se conoce, pero puede modificarse durante la
fabricacin. En general las condiciones de degradacin durante la fabricacin son
tales que el peso molecular y el factor de gelificacin disminuyen de forma que
en las gelatinas comerciales se observa frecuentemente cierta relacin entre
rigidez y viscosidad. Esto se hace ms marcado con productos de calidad inferior,
en lo que puede haber un gran proporcin de molculas con pesos moleculares
por debajo del valor critico de formacin de gel. La degradacin en medio cido
22
Colas y gelatinas
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23
Colas y gelatinas
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24
Colas y gelatinas
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25
Colas y gelatinas
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Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
III.
MATERIALES Y REACTIVOS
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
Material
Vaso de precipitado
Vaso de precipitado
Probeta graduada
Embudo de decantacin
Varilla
Cepillo para tubo de ensayo
Pipetas
Hornilla
Secador
pHmetro
Mortero
Kitasato
Embudo Buchner
Tubo Pitot
Papel filtro
Pizeta
Termmetro
Esptula
Balanza
Olla de aluminio
Cronmetro
Regla
Esfera metlica
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Reactivo
Cal
cido clorhdrico
Hexano
Perxido de hidrgeno
cido orto fosfrico
Hidrxido de sodio
cido clorhdrico
Sulfato de cobre (II)
Formaldehdo
Cromato de potasio
Cantidad
2
4
2
1
1
1
2
2
1
1
1
1
1
1
2
1
1
1
1
1
1
1
1
Cantidad
50g
250ml
10ml
20ml
1ml
1ml
1ml
1g
1ml
0.5g
IV.
PROCEDIMIENTO
27
Descripcin
1000ml
100ml
50ml
250ml
Vidrio
10ml
Elctrica
Elctrico
Digital
Porcelana
Vidrio
Plstico
Plstica
-10C/110C
Metlica
Analtica
2000 ml
Digital
Metlica
Acero
Descripcin
Apagada
Diluido
Puro
Medicinal
Concentrado
Concentrado
Concentrado
Pentahidratado
Puro
Cristales
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
1.
2.
DESENCALADO:
Consiste
en
la
4.
5.
Colgeno
Gelatina
28
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
7.
8.
9.
EVAPORACION:
Se
evapor
el
11.
29
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Cal
Encalado
Agua
Desencalado
HCl diluido
Tratamiento
cido
Agua
Lavado
Colgeno
Coccin
H2O2
Blanqueado
Filtrado
Hexano
Extraccin
Evaporacin
Secado
Molido
30
Pieles
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
V.
DATOS EXPERIMENTALES
COCCIN
# hora / T(C)
1 / 88
2 / 85
3 / 86
4 / 88
5 / 88
M (g)
43.23
42.38
42.35
42.74
42.40
Primer ensayo
V (ml)
44.00
43.00
43.50
44.00
43.00
# hora / T(C)
1 / 88
2 / 88
3 / 88
4 / 88
5 / 88
6 / 88
M (g)
50.81
50.90
50.59
28.75
30.59
30.93
Segundo ensayo
V (ml)
50.00
50.00
50.00
30.00
30.00
31.00
(g/ml)
0.98
0.99
0.97
0.97
0.99
(g/ml)
1.02
1.02
1.01
0.96
1.02
1.06
pH
7.42
10.01
9.02
9.03
8.64
pH
4.33
5.40
5.92
5.84
7.23
6.93
FILTRACIN
Volumen inicial del caldo
300ml
255ml
Temperatura de filtracin
64C
EXTRACCION
Volumen de la muestra a extraer
255ml
6 ml
Nmero de extracciones
4.58g
5.93g
0.81g
SECADO
Masa de la gelatina seca
PROPIEDADES QUIMICAS
Ensayo con hidrxido de sodio: Al disolver 0.65g de hidrxido de sodio en 10
ml de agua, y agregar polvo de gelatina, no se observa ningn cambio o reaccin
aparente.
31
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
VI.
CALCULOS
OBTENIDOS
32
RESULTADOS
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
TEb
T0
88.00C
13.07C
Ql
Qs
0C
Qs mCpT
Qs 1Kg (0.425
Kcal
)(88 13.07) C
Kg C
Qs 31.84 Kcal
e 75.73% Eficiencia trmica del proces
Extraccin de la gelatina.1
me m0 (
)n
V1
1 KD
V2
KD
m
V2
( n 0 1)
V1
me
KD
255.00ml
270.30 g
(
1)
6.00ml
0.81g
K D 733.87
33
Qs = calor sensible
Ql = calor latente
m. = masa de la materia
prima
Cp = capacidad calorfica
T = variacin de
temperatura
= calor especfico
Qt = calor total requerido
para la coccin.
W = trabajo utilizado en el
procedimiento.
n.= nmero
de moles.
m.e= masa extrada
terica
cal
m.0= masa inicial
a
extraer.
R= 1.87
KD = ctte de reparto. Kmol
hexano
V1 = volumenT fdel
Temperatura final al
V2 = volumen
del
colgeno
terminar la coccin.
= rendimiento
T0 = temperatura inicial a la
que empez la coccin.
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
me
V1
KD
m0 me
V2
me
K D V1 m0
V2 ( K D V )1
me
me 255.51g
VII.
GRAFICOS
34
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
VIII.
COMPARACIN
CON
DATOS
BIBLIOGRFICOS
35
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Constante
dielctrica
1.9
2.0
2.0
2.3
2.4
3.4
4.3
4.8
6.0
10.3
20.7
24.3
Densidad (g/ml)
0.66
0.78
0.88
0.86
0.87
0.90
0.79
36
Temperatura de
ebullicin (C)
89
45
81.4
81.8
110.6
36
56
56
78
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Metanol
Agua
32.6
78.0
0.79
1.00
66
88
H5C2
C2H5
Dietil ter
37
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
IX.
OBSERVACIONES
38
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
La duracin
de la coccin
El
nmero
de
extracciones
X.
CONCLUSIONES
39
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
40
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
XI.
BIBLIOGRAFIA
Editorial Acribia.
Biblioteca
Daro
CARNICOS
41
Echanda
SUBPRODUCTOS
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
XII.
ANEXOS
Estudio de la estabilidad trmica de la red del colgeno
La desnaturalizacin del colgeno, es decir su paso de estructura ordenada
helicoidal a estructura amorfa tipo gelatina se puede medir por un calormetro
diferencial programado. En efecto, esta transicin provoca una reaccin
42
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
43
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Por otra parte, el cabello tratado con colgeno nativo soluble puede elongarse en
un 6% superior a un cabello no tratado.
Actividad como vehculo
El colgeno ocupa un lugar privilegiado como biomaterial, al poseer la capacidad
de reticularse obteniendo matrices colagnicas con grado de solubilidad variable.
J. Cotte y H. Dumas, aplican la tcnica de Prilling para conseguir micro esferas
que aprisionan activos insolubles o lipfilos y que dependiendo del grado de
reticulacin pueden fundirse y romperse al aplicarlas sobre la piel cediendo
dichas sustancias. Tambin se consiguen esferas resistentes para su uso en
peelings.
USO MEDICO DEL COLAGENO
La utilizacin del colgeno en el mbito mdico se fundamenta con las
propiedades siguientes:
-Contribucin a la mejora de las propiedades mecnicas tisulares.
- Poder hemosttico: las placas y los polvos de colgeno se utilizan en ciruga
para provocar la hemostasia.
- Crecimiento celular: los soportes de colgeno se utilizan como sustrato para
desarrollar cultivos celulares. Estos cultivos pueden conducir hacia la formacin
de nuevos tejidos.
- Coadyuvante de la cicatrizacin: el colgeno bajo la forma de film, se utiliza en
el tratamiento de quemaduras y lceras. Es biocompatible y biodegradable.
Las indicaciones ms comunes para su uso son:
- Arrugas frontales profundas.
- Surcos glabelares y genolabiales acentuados.
- Arrugas peribucales.
Las placas de colgeno obtenidas por liofilizacin de un gel de colgeno nativo
se utilizan como:
- Rpido hemosttico.
- Fuerte epitelizante.
- Favorecedor de la fijacin y adhesividad de injertos y colgajos.
- Pueden usarse como implante de colgeno en bebidas, en una solucin
fisiolgica tamponada con fosfato y lidocana.
44
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
sustrato.
45
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Pegamentos en general
La mayora de los pegamentos posibilitan la unin al rellenar los huecos y fisuras
diminutos que existen normalmente en cualquier superficie, aunque sea muy lisa.
Los pegamentos son econmicos, distribuyen la tensin en el punto de unin,
46
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
47
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
48
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
PROCEDIMIEMTO
ENCALADO
49
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
DESENCALADO
COCCIN
BLANQUEADO
50
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
FILTRADO
SECADO
51
Colas y gelatinas
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
MUESTRA FINAL
52