Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Instituto Politcnico Nacional

CINETICA ENZIMATICA: CURVA TIPO DE AZUCARES
REDUCTORES
Grupo: 3FV01
Alumnos:
Miranda Araoz Adrian y
Introduccin:
La cintica enzimtica estudia la
velocidad de las reacciones
catalizadas por enzimas y las
condiciones que las modifican, as
como sus mecanismos de reaccin.
La enzima es un catalizador de las
reacciones biolgicas, aumentan la
velocidad en la que se alcanzara el
equilibrio sin afectar el equilibrio final
de la reaccin. Proporcionan una ruta
con menor energa libre de activacin
para transformar el sustrato a un
producto. Estas son de alta
especialidad (muy especficas), y su
actividad puede verse modificada por
factores como: temperatura, el pH,
concentracin de enzima,
concentracin de sustrato, entre
otros
Como ejemplo de enzima tenemos a
las Sacarasa (-fructofuranosidasa o
invertasa), que es capaz de hidrolizar
diferentes sustratos y su mxima
actividad la presenta con el
disacrido Sacarosa. La velocidad de
la reaccin con la sacarosa puede ser
medida observando el cambio de
rotacin ptica, o valorando el poder
reductor de los productos en un
determinado tiempo.

Seccin: 02
Crisstomo Gallegos Jess

Objetivo:
Obtener una curva de calibracin,
mediante cual se puedan transformar
las lecturas de absorbencia obtenidas a
lo largo de las experiencias en cintica
enzimtica; para poder obtener as la
actividad de la enzima invertasa en
unidades internacionales (UI).

Resultados y Discusin:

Tubo No.

Blan
co
T

Problemas
1

Glucosa 0.0005 M
Fructosa 0.005M
(mL)

0.1

0.2

0.4

0.8

1.0

Sacarosa
0.35M (mL)

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

Regulador de
acetatos 0.05M, pH
4.7 (mL)

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.9

0.8

0.6

0.2

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

Agua (mL)
3,5 DNS
(mL)
Desarrollo de
color

Dilucin

0.5
0.5
0
0.5

5 minutos a 92C 8en bao mara)

Colocar en bao con hielo y diluir con 4mL de
agua destilada

Leer en espectrofotmetro a 540 nm.

Absorbenci
a

0.092

0.302

0.440

0.752

1.393
.

Azcar
reductor
(moles)/3.
5mL

12

de cmo productos a la Glucosa y

a la Fructosa.

Clculos:
Azcar reductor:
1: (0.1mL)x(0.01M) / 1000mL =
(0.000001mol)x(1000000mol) = 1mol
2: (0.2mL)x(0.01M) / 1000mL =
(0.000002mol)x(1000000mol) = 2mol
3: (0.4mL)x(0.01M) / 1000mL =
(0.000004mol)x(1000000mol) = 4mol
4: (0.8mL)x(0.01M) / 1000mL =
(0.000008mol)x(1000000mol) = 8mol
5: (1.0mL)x(0.01M) / 1000mL =
(0.000012mol)x(1000000mol) = 10mol

Discusin:
La sacarosa es un azcar no reductor,
disacrido; y puede dar lugar a dos
azcares reductores, como lo son la
Glucosa y la Fructosa, mediante la
intervencin de la enzima Sacarasa (fructofuranosidasa o invertasa).
Nosotros hemos simulado tal reaccin, y
puesto ya los productos de la reaccin
(los productos que deberan darnos),
para as obtener una grfica estndar o
tipo que nos guie y para poder comparar
en ella los distintos experimentos que se
realizaran; leyendo la absorcin de estos
experimentos y as compararla con la
absorcin de nuestras curva tipo y saber
cunta concentracin de azcar reductor
tenemos en realidad.

Conclusiones:

La enzima Sacarasa (fructofuranosidasa o invertasa),

cataliza a la sacarosa y hace que

En la reaccin entre la invertasa y

la Sacarosa, se obtiene
grficamente una recta, as que:
A mayor concentracin de azcar
reductor, mayor ser la
absorbencia.

Grafica de absorbencia contra

concentracin de azcar
reductor (anexa).

Bibliografa:
Lehninger, Albert., Nelson, David L.,
Cox, Michael M.,(1993) Principios de
Bioqumica. Segunda Edicin,
Ediciones Omega, Barcelona, Espaa

Rawn, J. D. (1989) Bioquimica. Vol.

II. Mc Graw Hill. Interamericana.
Madrid.
Bohinski, R.R, Grffiths J.M., Wilkinson
M.L., (1984) basic Boichemical
Methods. Editorial John Wiley &
Sons. Inc. 10 Ed.