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PRACTICAS
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Microbiologa Oral. Curso 2012-2013
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3. Gentica bacteriana.
Tema 3. GENTICA BACTERIANA:
INTRODUCCIN:
Cualquier organismo est determinado por su material gentico y su interaccin con el medio ambiente
que selecciona,activa, reprime o cambia el material gentico.
Las bacterias poseen un genotipo que transmiten por herencia y un fenotipo que depende de las
circustancias que les rodean.Las bacterias sufren variaciones en sus caracteres y son de dos tipos ;
fenotpicas o adaptaciones y genotpicas ( mutaciones,fenmenos de transferencia, elementos
transponibles, integrones).
El estudio de la gentica bacteriana, atendiendo a los dos aspectos anteriores, permite entender mejor
las funciones esenciales de su material gentico y las caratersticas que rigen su comportamiento, su
capacidad de adaptacin al medio ambiente, la expresin de mecanismos de virulencia que les permite
colonizar, invadir, y daar clulas eucariotas, y como consecuencia, el desarrollo de un gran espectro de
enfermedades clnicas.
VARIACIONES FENOTPICAS O ADAPTACIONES;
Concepto;
Se producen por la presin ambiental sobre las bacterias, pero no afecta al genoma.
Son de alta frecuencia. Afectan a toda la poblacin bacteriana sometida a la modificacin
ambietal.
Son reversibles ; cuando cesa la causa,retornan al estado primitivo.
No son hereditarias, porque no se modifica el ADN.
Tipos
Morfolgicas ; Bacilos cortos y mviles se convierten en bacilos largos e inmviles debido al
agotamiento de nutrientes).
Cromgenas.
Enzimticas ; algunas bacterias producen enzimas en presencia de determinados sustratos, por
ejmplo, penicinilasa en presencia de penicilina.
Patognicas; Bacterias que producen toxinas segn el ambiente en el que crecen.as
Corynebacterium slo lo hace si dispone de hierro en el medio..
Sensibilidad a antibiticos; hay bacterias que son sensibles en determinadas condiciones pero no
lo sern en otras.
GENOTIPO BACTERIANO. VARIACIONES GENTICAS
Elementos Genticos Esenciales;
El material gentico bacteriano est formado por ADN, una molcula compuesta por unidas
repetitivas de nucletidos.
Este ADN conforma el genoma bacteriano, pero tambin posee elementos extracromosmicos
como plsmidos, transposones e integrones.
Las dos funciones del material gentico son replicacin( duplicar su material gentico para
posterior herencia a su progenie) y expresin ( determina las carctersticas observables, el
fenotipo).
Poseen ARN de tranferencia y ribosomal tambin.
Caractersticas del genoma bacteriano:
El tamao del genoma bacteriano es variable de una bacteria a otra.
La mayoria de las bacterias tienen un solo cromosoma circular con ADN de doble cadena.
Aunque hay bacterias con ADN lineal( Borrelia, Streptomices) y bacterias con ADN lineal y
circular ( Agrobacterium).
Elementos extracromosmicos:
Plsmidos
Son unidades de informacin gentica extra cromosmicos que codifican informacin no
esencial para la viabilidad de la bacteria y que se replica de forma independiente del
cromosoma.
Son DNA de doble cadena, circular, superenrollado.
Existen unos plsmidos conjugativos que estn relacionados con los mecanismos de
transferencia entre diferentes bacterias.
Los plsmidos se caracterizan por; su replicacin autonoma, aportar genes para el
metabolismo,virulencia, resistencia a antibitico.
Algunos pueden incluirse en el genoma bacteriano ( episoma).
Muchas cualidades portadas por plsmidos tienen inters clnico;
La resistencia a antibiticos,la produccin de toxinas,la sintesis de estructuras necesarias para la
adhesin
o colonizacin.
Algunos plsmidos determinan resistencia antibitica, se len deniminado"plsmidos R".
Bacterifagos.
Son elementos que pueden invadir bacterias y llevar material gentico exatrcromosmico.
Son agentes infecciosos que se replican como parsitos intracelulares obligados dentro de las
bacterias.
El genoma del fago codifica para funciones necesarias para su replicacin intracelular, pero
tambin codifican para la sntesis de las proteinas necesarias para el ensamblaje del fago.
El genoma del fago puede codificar para caractersticas bacterianas no relacionadas a su
replicacin, fenmeno conocido como CONVERSIN,el cual es responsable de algunas
caractersticas de virulencia bacteriana como la produccin de toxinas.
Transposones
Son secuencias de ADN que llevan informacin para una transposasa y en los extremos
secuencias repetidas conocidas como de Insercin, y en medio de esta secuencia puede
encontrarse la insercin de genes de virulencia ,como toxinas o genes de resistencia a
antibiticos.
stos se pueden integrar en el cromosoma de las bacterias o insertarse en fagos.
Integrones
Son elementos de ADN mviles que pueden capturar genes de resistencia o virulencia , los
cuales estn en "casates" y como acarrean una integrasa, pueden introducirse en el cormosoma,
los transposones y los plsmidos de bacterias; de esta manera , pueden replicarse y expresar la
informacin que llevan.
Intercambio y variabilidad gentica:
La variabilidad gentica es interesante desde el punto de vista de que muchas de estos cambios
genticos aportan resistencia a estas bacterias a ciertos medios, antibiticos.
Mutacin ;cambio transmisible en el genoma bacteriano, que estransmisible.Estas mutaciones pueden
ser puntuales y suficientes para dar lugar,por ejemplo, a una resistencia por el cambio en la
transduccin de un proteina.
Pueden ser mutaciones de segmentos del DNA, sustituciones de nucletidos, y microinserciones, o por
el contrario provocar alteraciones en regiones ms grandes( inserciones y delecciones).
Recordar que un slo cambio de en un nucletido lleva a la fabricacin de un proteina totalmente
distinta, con lo que cambios leves pueden conllevar importantes consecuencias.
Transferencia de genes
Movimiento de material gentico entre bacterias.
Transmisin vertical; Una bacteria transmite sus informacin gentica a traves de la divisin celular.
Transmisin horizontal;Transmisin de material gentico de una bacteria a otra.
Mecanismos de transmisin horizontal; transformacin, conjugacin, y transduccin.
TRANSFORMACIN;
Las bacterias se transmiten material gentico atravs de DNA libre en el medio,elementos
episomiales.
La bacteria receptora tiene mecanismos para captar el DNA a travs de sus envolturas externas e
introducirlo en su cromosoma.
Los genes intracrosomales se recombinan dando lugar a genes mosaico.
CONJUGACIN;
Se produce cuando dos bacterias tienen contacto entre ellas para intercambiar material gentico.
As se transmiten plsmidos, y otros elementos.
Durante la conjugacin las bacterias donadoras poseen una estructura, conocida como '' pili'' en
gram negativos, lo cual hace contacto con la clula receptora.
Pasa una cadena de los plsmidos a la bacteria receptora quedando una en la bacteria donadora.
Los plsmidos pueden adquirir genes de resistencia por conjugacin ( transposones e
integrones).
TRANSDUCCIN
Resistencia a antibiticos:
Las mutaciones espontneas y mecanismos de intercambio gentico (conjugacin y transduccin) son
responsables de la multirresistencia a los antibioticos entre otros.
Cepa bacteriana: bacterias que poseen caractersticas comunes a las de su especie (cepa tipo) o
bien caractersticas diferenciales (mutacin, genes adquiridos por transferencia). Ej cepa
resistente a penicilina
-MECANISMO de resistencia a antibiticos:
1.- Inactivacin enzimtica: enzimas que modifican la molcula de antibitico. Codificadas por
elementos genticos extracromosmicos. Ejemplo: Las beta-lactamasas son capaces de romper los
enlaces qumicos de los beta-lactmicos generando resistencia contra esta familia de antibiticos. La
asociacin de beta-lactmicos (amoxicilina,ampicilina o piperacilina) con inhibidores de la betalactamasa (cido clavulnico, sulbactam o tazobactam) sirvieron para acabar con este mecanismo de
resistencia a antibiticos.
Otros enzimas producidos por ciertas cepas son capaces de modificar qumicamente a los antibiticos
impidiendo que stos reconozcan su diana. Es el caso del ciprofloxacino, muy til en infecciones de va
urinaria.
2.- Impermeabilidad de las membranas o de la pared celular: modificacin de los elementos de la
membrana (ej. porinas) que impide el transporte de antibiticos. La prdida de porinas es una forma de
resistencia a los carbapenems.
3.- Expulsin por mecanismos activos. Ej: El aumento de la concentracin de bombas de extrusin de
antibiticos, unas protenas transmembrana que permiten la exportacin de antibiticos como
quinolonas o cloranfenicol fuera de la clula con gasto energtico.
4.- Modificacin del sitio de accin (diana molecular). Reduccin de la afinidad por el antibitico.
Ejemplo: Mutaciones en la diana hacen que el antibitico no sea capaz de reconocerla. Las dianas de
las quinolonas son las enzimas encargadas de mantener el correcto plegamiento de la molcula de DNA
(la girasa y la topoisomerasa). Mutaciones a este nivel otorgan a la clula resistencia frente a esta
familia de antibiticos.
Mutaciones de los ribosomas. Los ribosomas son las dianas de ciertas familias de antibiticos entre las
que se encuentran las tetraciclinas por lo que mutaciones a este nivel harn a las clulas resistentes
frente a ellas.
Mutaciones en la estructura del lipopolisacrido (LPS) otorgarn a la clula resistencia frente a
antibiticos como la polimixina.
5.- Desvos alternativos: Hay antibiticos que actan sobre enzimas d ela clula inactivndolas, como
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Las Bacterias
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bacterias no permite identificarlas, ya que existen pocos tipos morfolgicos, cocos (esfricos), bacilos
(bastn), espirilos (espiras) y es necesario por lo tanto recurrir a tcnicas que se detallarn ms
adelante. El estudio mediante la microscopia ptica y electrnica de las bacterias revela la estructura de
stas.
Estructura y fisiologa de las bacterias.
Estructura de superficie y de cubierta.
La cpsula no es constante. Es una capa gelatinomucosa de tamao y composicin variables que juega
un papel importante en las bacterias patgenas.
Los cilios, o flagelos, no existen ms que en ciertas especies. Filamentosos y de longitud variable,
constituyen los rganos de locomocin. Segn las especies, pueden estar implantados en uno o en los
dos polos de la bacteria o en todo su entorno. Constituyen el soporte de los antgenos "H". En algunos
bacilos gramnegativos se encuentran pili, que son apndices ms pequeos que los cilios y que tienen
un papel fundamental en gentica bacteriana.
La pared que poseen la mayora de las bacterias explica la constancia de su forma. En efecto, es
rgida, dctil y elstica. Su originalidad reside en la naturaleza qumica del compuesto macromolecular
que le confiere su rigidez. Este compuesto, un mucopptido, est formado por cadenas de
acetilglucosamina y de cido murmico sobre las que se fijan tetrapptidos de composicin variable.
Las cadenas estn unidas por puentes peptdicos. Adems, existen constituyentes propios de las
diferentes especies de la superficie.
La diferencia de composicin bioqumica de las paredes de dos grupos de bacterias es responsable de
su diferente comportamiento frente a un colorante formado por violeta de genciana y una solucin
yodurada (coloracin Gram). Se distinguen las bacterias grampositivas (que tienen el Gram despus de
lavarlas con alcohol) y las gramnegativas (que pierden su coloracin).
Se conocen actualmente los mecanismos de la sntesis de la pared. Ciertos antibiticos pueden
bloquearla. La destruccin de la pared provoca una fragilidad en la bacteria que toma una forma
esfrica (protoplasto) y estalla en medio hipertnico (solucin salina con una concentracin de 7 g. de
NaCI por litro).
La membrana citoplasmtica, situada debajo de la pared, tiene permeabilidad selectiva frente a las
sustancias que entran y salen de la bacteria. Es soporte de numerosas enzimas, en particular las
respiratorias. Por ltimo, tiene un papel fundamental en la divisin del ncleo bacteriano. Los
mesosomas, repliegues de la membrana, tienen una gran importancia en esta etapa de la vida
bacteriana.
Estructuras internas.
El ncleo lleva el material gentico de la bacteria; est formado por un nico filamento de cido
desoxirribonucleico (ADN) apelotonado y que mide cerca de 1 mm de longitud (1000 veces el tamao
de la bacteria).
Los ribosomas son elementos granulosos que se hallan contenidos en el citoplasma bacteriano;
esencialmente compuestos por cido ribonucleico, desempean un papel principal en la sntesis
proteica.
El citoplasma, por ltimo, contiene inclusiones de reserva.
La divisin celular bacteriana.
La sntesis de la pared, el crecimiento bacteriano y la duplicacin del ADN regulan la divisin celular.
La bacteria da lugar a dos clulas hijas. La divisin empieza en el centro de la bacteria por una
Gentica bacterian a.
Por la rapidez en su multiplicacin, se eligen las bacterias como material para los estudios genticos.
En un pequeo volumen forman enormes poblaciones cuyo estudio evidencia la aparicin de
individuos que tienen propiedades nuevas. Se explica este fenmeno gracias a dos procesos comunes a
todos los s o, traducidas por la aparicin brusca eres vivos: las variaciones del genotipo de un carcter
transmisible a la descendencia, y las variaciones fenotpicas, debidas al medio, no transmisibles y de
las que no es apropiado hablar en gentica. Las variaciones del genotipo pueden provenir de
mutaciones, de transferencias genticas y de modificaciones extracromosmicas.
Las mutaciones.
Todos los caracteres de las bacterias pueden ser objeto de mutaciones y ser modificados de varias
maneras.
Las mutaciones son raras: la tasa de mutacin oscila entre 10 y 100. Las mutaciones aparecen en una
sola vez, de golpe. Las mutaciones son estables: un carcter adquirido no puede ser perdido salvo en
caso de mutacin reversible cuya frecuencia no es siempre idntica a las de las mutaciones primitivas.
Las mutaciones son espontneas:no son inducidas, sino simplemente reveladas por el agente selectivo
que evidencia los mutantes. Los mutantes, por ltimo, son especficos: la mutacin de un carcter no
afecta a la de otro.
El estudio de las mutaciones tiene un inters fundamental. En efecto, tiene un inters especial de cara a
la aplicacin de dichos estudios a los problemas de resistencia bacteriana a los antibiticos.
Anlogamente tiene una gran importancia en los estudios de fisiologa bacteriana.
Transferencias genticas.
Estos procesos son realizados mediante la transmisin de caracteres hereditarios de una bacteria dadora
a una receptora. Existen varios mecanismos de transferencia gentica.
A lo largo de la transformacin, la bacteria receptora adquiere una serie de caracteres genticos en
forma de fragmento de ADN. Esta adquisicin es hereditaria. Este fenmeno fue descubierto en los
pneumecocos en 1928.
En la conjugacin, el intercambio de material gentico necesita de un contacto entre la bacteria dadora
y la bacteria receptora. La cualidad de dador est unida a un factor de fertilidad (F) que puede ser
perdido. La transferencia cromosmica se realiza generalmente con baja frecuencia. No obstante, en las
poblaciones F+, existen mutantes capaces de transferir los genes cromosmicos a muy alta frecuencia.
La duracin del contacto entre bacteria dadora y bacteria receptora condiciona la importancia del
fragmento cromosmico transmitido. El estudio de la conjugacin ha permitido establecer los mapas
cromosmicos de ciertas bacterias. Ciertamente, la conjugacin juega un papel en la aparicin en las
bacterias de resistencia a los antibiticos.
La transduccin es una transferencia gentica obtenida mediante introduccin en una bacteria receptora
de genes bacterianos inyectados por un bacterifago. Se trata de un virus que infecta ciertas bacterias
sin destruirlas y cuyo ADN se integra en el cromosoma bacteriano. La partcula fgica transducida a
menudo ha perdido una parte de su genoma que es sustituida por un fragmento de gene de la bacteria
husped, parte que es as inyectada a la bacteria receptora. Segn el tipo de transduccin, todo gen
podr ser transferido o, por el contrario, lo sern un grupo de genes determinados.
Variaciones extracromosmicas.
Adems de por mutaciones y transferencias genticas, la herencia bacteriana pude ser modificada por
las variaciones que afectan ciertos elementos extracromosmicos que se dividen con la clula y son
responsables de caracteres transmisibles: son los plasmidios y episomas entre los cuales el factor de
transferencia de residencia mltiple juega un papel principal en la resistencia a los antibiticos.
Clasificacin de las bacterias.
La identificacin de las bacterias es tanto ms precisa cuanto mayor es el nmero de criterios
utilizados. Esta identificacin se realiza a base de modelos, agrupados en familias y especies en la
clasificacin bacteriolgica. Las bacterias se renen en 11 rdenes:
- Las eubacteriales, esfricas o bacilares, que comprenden casi todas las bacterias patgenas y las
formas fottrofas.
- Las pseudomonadales, orden dividido en 10 familias entre las que cabe citar las Pseudomonae y las
Spirillacae.
- Las espiroquetales (treponemas, leptospiras).
- Las actinomicetales (micobacterias, actinomicetes).
- Las rickettsiales.
- Las micoplasmales.
- Las clamidobacteriales.
- Las hifomicrobiales.
- Las beggiatoales.
- Las cariofanales.
- Las mixobacteriales.
Relaciones entre la bacteria y su husped.
Ciertas bacterias viven independientes e otros seres vivos. Otras son parsitas. Pueden vivir en
simbiosis con su husped ayudndose mutuamente o como comensales (sin beneficio). Pueden ser
patgenas, es decir, vivir de su husped.
La virulencia es la aptitud de un microorganismo para multiplicarse en los tejidos de su husped
(creando en ellos alteraciones). Esta virulencia puede estar atenuada (base del principio de la
vacunacin) o exaltada (paso de un sujeto a otro). La virulencia puede ser fijada por liofilizacin.
Parece ser funcin del husped (terreno) y del entorno (condiciones climticas). La puerta de entrada de
la infeccin tiene igualmente un papel considerable en la virulencia del germen.
El poder patgeno es la capacidad de un germen de implantarse en un husped y de crear en l
trastornos. Est ligada a dos causas:
- La produccin de lesiones en los tejidos mediante constituyentes de la bacteria, como pueden ser
enzimas que ella excreta y que atacan tejidos vecinos o productos txicos provenientes del
metabolismo bacteriano.
- La produccin de toxinas. Se puede tratar de toxinas proteicas (exotoxinas excretadas por la bacteria,
transportadas a travs de la sangre y que actan a distancia sobre rganos sensibles) o de toxinas
glucoproteicas (endotoxinas), estas ltimas actuando nicamente en el momento de la destruccin de la
bacteria y pudiendo ser responsables de choques infecciosos en el curso de septicemias provocadas por
grmenes gramnegativos en el momento en que la toxina es brutalmente liberada.
A estas agresiones microbianas, el organismo opone reacciones defensivas ligadas a procesos de
inmunidad, mientras que el conflicto husped-bacteria se traduce por manifestaciones clnicas y
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Pgina
Descripcin de la imagen
La transformacin gentica de bacterias es un procedimiento de laboratorio por el cual se introduce
material gentico a una bacteria. Existen otros procesos de insercin del material gentico, que
dependiendo del organismo receptor y el mecanismo, algunos reciben nombres como transfeccin o
transduccin. Generalmente, el material gentico insertado es conocido como plsmido (DNA circular),
pero pueden insertarse otras formas de material gentico, como DNA o RNA. Los plsmidos utilizados
para la transformacin de bacterias contienen en general, uno o varios genes de inters, un gen
reportero (que permite visualizar la transcripcin del plsmido), y un gen de resistencia a un
antibitico, que permite seleccionar a la bacteria transformada de otras, por su capacidad de crecer en
medio que contiene el antibitico de resistencia.
Las transformacin tienen muchas aplicaciones, como la produccin de protenas, la produccin de los
mismos plsmidos, la produccin de bacterias que consumen petrleo, entre otros. Sin embargo, deben
manejarse de forma especial, tanto en el laboratorio, como el manejo de desechos, para evitar la
diseminacin o liberacin al ambiente de microorganismos genticamente modificados.
Transduccin (gentica)
ndice
1 Ciclos ltico y lisognico
2 La transduccin como un mtodo de transferencia gentica
3 Vase tambin
4 Referencias
5 Enlaces externos
2.
El flagelo bacteriano es un apndice movido por un motor rotatorio. El rotor puede girar a 6.00017.000 rpm, pero el apndice usualmente slo alcanza 200-1000 rpm. 1-filamento, 2-espacio
periplsmico, 3-codo, 4-juntura, 5-anillo L, 6-eje, 7-anillo P, 8-pared celular, 9-esttor, 10-anillo MS,
Reproduccin
reproduccin asexual.106 En condiciones apropiadas, una bacteria Gram-positiva puede dividirse cada
2030 minutos y una Gram-negativa cada 1520 minutos, y en alrededor de 16 horas su nmero puede
ascender a unos 5.000 millones (aproximadamente el nmero de personas que habitan la Tierra). Bajo
condiciones ptimas, algunas bacterias pueden crecer y dividirse muy rpido, tanto como cada 9,8
minutos.107 En la divisin celular se producen dos clulas hijas idnticas. Algunas bacterias, todava
reproducindose asexualmente, forman estructuras reproductivas ms complejas que facilitan la
dispersin de las clulas hijas recin formadas. Ejemplos incluyen la formacin de cuerpos fructferos
(esporangios) en las mixobacterias, la formacin de hifas en Streptomyces y la gemacin. En la
gemacin una clula forma una protuberancia que a continuacin se separa y produce una nueva clula
hija.
Por otro lado, cabe destacar un tipo de reproduccin sexual en bacterias, denominada parasexualidad
bacteriana. En este caso, las bacterias son capaces de intercambiar material gentico en un proceso
conocido como conjugacin bacteriana. Durante el proceso una bacteria donante y una bacteria
receptora llevan a cabo un contacto mediante pelos sexuales huecos o pili, a travs de los cuales se
transfiere una pequea cantidad de ADN independiente o plsmido conjugativo. El mejor conocido es
el plsmido F de E. coli, que adems puede integrarse en el cromosoma bacteriano. En este caso recibe
el nombre de episoma, y en la transferencia arrastra parte del cromosoma bacteriano. Se requiere que
exista sntesis de ADN para que se produzca la conjugacin. La replicacin se realiza al mismo tiempo
que la transferencia.
Principios de la Nutricin Bacteriana
Los alimentos bacterianos son consideradosel material para que la clula obtenga energa, pueden
abarcar compuestos desde protenas hasta compuestos ms complejos como el caucho, pero lo esencial
esta que cada microorganismo asimila un determinado alimento por ello que podemos identificar a los
microorganismos, tambin se identifica segn los compuestos que se usa y que se forman de ello. La
nutricin de los microorganismos esholoflicasalvo los virus y protozoos
Las bacterias necesitan de un aporte energtico para desarrollarse.
* Se distinguen distintos tipos nutricionales segn la fuente de energa utilizada: las bacterias que
utilizan la luz son fottrofas y las que utilizan los procesos de oxirreduccin son quimitrofas. Las
bacterias pueden utilizar un sustrato mineral (littrofas) u orgnico (Organtrofas). Lasbacterias
patgenas que viven a expensas de la materia orgnica son quimio Organtrofas.
* La energa en un sustrato orgnico es liberada en la oxidacin del mismo mediante sucesivas
deshidrogenaciones. El aceptor final del hidrgeno puede ser el oxgeno: se trata entonces de una
respiracin. Cuando el aceptor de hidrgeno es una sustancia orgnica (fermentacin) o una sustancia
inorgnica, estamosfrente a una anaerobiosis.
Fuentes de carbono y energa para el crecimiento bacteriano
Todos los organismos vivos requieren una fuente de energa.
Los organismos que utilizan energa radiante (luz) son llamados fottrofos.
Los organismos que utilizan (oxidan) una forma orgnica de carbono son llamados heterotrficos o
quimio (hetero) trficos.
Los organismos que oxidan componentesinorgnicos son llamados littrofos.
Los requerimientos de carbono de los organismos deben ser abastecidos con carbono orgnico (un
componente qumico con una unin de carbono-hidrgeno) o con CO2. Los organismos que utilizan
carbono orgnico son heterotrficos y los organismos que utilizan CO2 como nica fuente de carbono
para el crecimiento son llamados autotrficos.
As, sobre la base de las fuentes deenerga y carbono para el crecimiento se pueden definir los cuatro
principales tipos nutricionales de procariotes
Carbono
* Elemento ms abundante en las macromolculas. Constituye el 50% del peso seco de las clulas.
* Muchos procariotas son hetertrofos- necesitan algn tipo de compuesto orgnico como fuente de
carbono para hacer nuevo material celular.