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ORTIZ.

A-ORTEGA-ORTIZ

ANLISIS MICROBIOLGICO DE LOS


ALIMENTOS

PRCTICA No.6:HONGOS.
Mauricio Ortiz Aragn 1330114
Juan David Ortega 1329842
Brayan Stevens Ortiz 1324444
Universidad del Valle
Facultad De Ingeniera, Escuela De Ingeniera De Alimentos.
Santiago de Cali, Noviembre 26 del 2014.

C= 4,5

RESUMEN

En el laboratorio se observaron diversos hongos pertenecientes al gnero Saccharomyces,


Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Rhizopus y Tricoderma tanto en su estado macroscpico
como microscpico. Las imgenes de cada hongo con sus estructuras y su respectiva
descripcin de acuerdo a la presencia de estructuras, y coloracin se muestran en las diversas
figuras desarrolladas en el presente informe. Dentro de los Saccharomyces se observan la
levadura Candidaa albicans hongo unicelular , en Aspergillus niger y Penicilliumsp se
identifica la presencia de esporas en su superficie. Microscpicamente este hongo presenta un
conidiforo con Filides y Conidiosporas. En Fusarium Spse busc identificar los
macroconidios Curvados . Se observ Rhizopussp, en el cual se logr ver los esporangios
esfricos de color negro. Con Tricoderma se apreci los conidiforos erectos y ramificados .
1

INTRODUCCIN

Los hongos son organismos hetertrofos que se alimentan por medio de la absorcin de nutrientes
solubles y aunque algunos hongos son capaces de metabolizar materiales complejos insolubles, como
la lignocelulosa, estos materiales tienen que ser degradados fuera de la pared celular por medio de la
secrecin de enzimas apropiadas. Algunos hongos son parsitos de los animales, de las plantas y de
otros y algunas de estas asociaciones parasitarias han llegado a ser muy complejas e incluso
obligadas. Sin embargo, lo realmente preocupa es la capacidad de algunos hongos para producir
metabolitos txicos, conocidos como micotoxinas, en los alimentos y su asociacin con una serie de
enfermedades humanas, desde enfermedad gastroentericas hasta el cncer.
Los hongos filamentosos crecen en la superficie y en el espesor de su sustrato por procesos de
alargamiento, de ramificacin y de anastomosis del extremo de las hifas que conducen a la produccin
de un micelio extenso. Algunas especies han sido especialmente favorecidas para crecer a valores
majos de actividad de agua que les permite colonizar productos, como los cereales, que de otro modo
estaran excesivamente secos para el crecimiento de microorganismos.
Frecuentemente cuando los mohos atacan los alimentos no causan el tipo de destruccin putrefactiva
relacionada con algunas bacterias por lo que los alimentos pueden ser consumidos a pasar de estar
enmohecidos y tal vez contaminados por micotoxinas. En realidad, algunos cambios llevados a cabo
por el crecimiento de determinados hongos en la superficie de un alimento pueden ser deseables desde
el punto de vista organolptico rigiendo la fabricacin de productos tales como quesos madurados por
hongos y los embutidos madurados por mohos. ( ADAMS, 1997)

OBJETIVOS

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Conocer la morfologa de las estructuras somticas y reproductoras de las levaduras y de


los hongos filamentosos ms importantes que atacan lo alimentos.

Identificar las caractersticas macroscpicas de colonias de hongos filamentosos y


levaduras

MATERIALES Y METODOS
3.1. APARATOS, INSTRUMENTOS Y MATERIALES

Microscopio compuesto
Estereoscopio
Cultivos de mohos
Cultivos de levadura
Portaobjetos y cubreobjetos
Lugol, azul de metileno, lactofenol.
Cinta adhesiva
Aceite de inmersin y papel lente.
3.2 MTODOS

Parte 1.
se coloc una gota de agua destilada en el portaobjetos, con el alza tomar un poco del cultivo
Candidaalbicans y aadir una gota de lugol, colocar el cubreobjeto y observar en el
microscopio con los diferentes objetivos.
Parte 2.
Pasar cinta adhesiva sobre el cultivo de Aspergillus, Penicillium, fusarium sp, Rhizopus y
Trichoderma. hasta que el durex quede impregnado con el micelio, luego adicionar una gota
de lactofenol sobre un portaobjetos, adherir la cinta durex a la lmina portaobjetos y se
observ en el microscopio con diferentes objetivos.
RESULTADOS

Caracterizacin morfolgica de Levadura.


Se pudo observar las caractersticas morfolgicas del cultivo de Levadura (Candidaalbicans)
Figura 1. (A) muestra las colonias formadas por la levadura de textura glabra, topografa lisa
y color Blanco brillante. (B)muestra tomada del cultivo, observada con microscopio. Se
lograron identificar clulas uninucleadas con forma ovoide, con algunos ncleos
diferenciados y adems se ve que en algunos casos se est originando el proceso de gemacin
(reproduccin asexual) .

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Figura 1. Identificacin morfolgica de la levadura Candidaalbicans, observada


directamente desde el cultivo en caja Petri (A) y al microscopio a (100X) (B).
CARACTERIZACIN MORFOLGICA EN CULTIVO DE HONGOS.
Aspergillus niger.
Se pudo apreciar por medio de la Figura 2. (A) muestra hongo de textura polvosa, con
micelio bajo, areo y delgado. Posee una topografa lisa ya que no tena irregularidades en la
superficie. Posea una coloracin blanca con esporas de color negro en el anverso. El reverso
era de color blanco, se alcanzaron a observar las esporas agrupadas en la superficie. (B)
Microscpicamente, Aspergillus nigerposee hifas, hialinas y delgadas. Se observaron
conidias de color azul. Adems Aspergillus niger posea conidiforo con filides en sus
extremos de color azul, las cuales sostienen las conidias o microconidias que luego son
expulsadas.

Figura 2. Identificacin morfolgica de Aspergillus niger, observada directamente desde el


cultivo en caja Petri (A) y al microscopio a (40X) (B).
PenicilliumSp.
Mediante la Figura 3. (A) muestra hongo de textura polvosa, con micelio, conjunto de
filamentos tubulares (hifas). Posee una topografa rugosa ya que tiene irregularidades en la
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superficie. Posea una coloracin verde y color crema al reverso. (B) Microscpicamente se
observ la presencia de hifas septadas gruesas y de azul traslcida, producto del colorante
azul de lactofenol. Adems se observan las estructuras como el conidiforo que posee unas
branquias de las cuales se ramifican las Filides que finalmente producen las Conidiosporas
de coloracin translcida.

Figura 3. Identificacin morfolgica de PenicilliumSp, observada directamente desde el


cultivo en caja Petri (A) y al microscopio a (40X) (B).
Fusarium Sp.
En base a la Figura 4.(A) muestra Colonias algodonosas de color morado, tena presencia
de gran cantidad de hifas. El reverso era de color morado ms intenso. (B)
Microscpicamente, Fusarium sp posee hifas delgadas. Se observaron Filides y
macroconidias acumuladas en la punta de la filide formando falsas cabezas, en la muestra
los macroconidios estn muy juntos entre s dificultando la observacin.

Figura 4. Identificacin morfolgica de Fusarium Sp, observada directamente desde el


cultivo en caja Petri (A), macroscopio (C) y microscopio a (40X) (B).
Rhizopus Sp.
Con la Figura 5. (A) muestra hongo de textura vellosa, con micelio areo y delgado. Posea
una tonalidad gris, con esporangios esfricos negros al anverso. El reverso era de color
crema, se alcanzaron a observar las esporas agrupadas en la superficie. (B) Posea
conidiforos de color marrn los cuales sostenan en su extremo a los esporangios. En estos
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esporangios se observaban las Conidiosporas. Las hifas de Rhizopus sp. no son septadas y
con paredes gruesas.

Figura 5. Identificacin morfolgica de Rhizopus Sp, observada directamente desde el


cultivo en caja Petri (A), macroscopio (C) y microscopio a (40X) (B).
Tricoderma.
Mediante la Figura 6.(A)muestra hongo de textura pulverulenta, rugosa ya que tiene
irregularidades en la superficie. Posea una coloracin verde y color crema al reverso. (B)
Microscpicamente se observ la presencia de hifas septadas. Adems se vieron las
estructuras como el conidiforo erecto altamente ramificado, conidiassubglobosas y la
presencia de Clamidiosporas.

Figura 6. Identificacin morfolgica de TrichodermaSp, observada directamente desde el


cultivo en caja Petri (A), y microscopio a (40X) (B).
DISCUSION
La estructura somtica (vegetativa) de los hongo, llamados micelos, est constituida por filamentos
llamados hifas, las cuales pueden ser septadas (divididas por tabiques) o cenocticas. La pared celular
de las hifas est compuesta generalmente de celulosa o quitina. Las hifas permiten a los hongos
absorber el alimento del medio. En algunos honogsfitoparasitarios las hifas producen estructuras

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llamadas hausotorios, los cuales absorben sustancias desde la celula de la planta sin daar la
membrana celulcar. Las hifas tambin pueden agregarse de distintas maneras para formas estructuras
resistentes a las condiciones ambientales, las cuales le permiten al ojos vivir por un largo periodo de
tiempo. Bajo condiciones de ambientales favorables las hifas pueden crecer indefinidamente. Grupos
de hifas provenientes de un mismo lugar se denominan colonias. La fragmentacin del micelio es un
mtodo comn, y e s muy utilizados para propagar hongos en forma de laboratorio. (ARAUZ, 1898)
Asi de forma general lo ms notorio entre una especie de hongos y otras son sus
caractersticasgmorfologias, pues es apreciables en forma macroscpica, por lo forma sus principales
diferencias son de suma importancia para poder hacer una diferenciacin entre cada uno. Por esta
razon se hace necesario realizar un cuadro comparativo entre las 5 clases analizadas en el laboratorio:
Levaduras, Aspergillus Sp, PenicillumSp, Fusarium Sp, Rizhopus y Tricoderma.
Levaduras: las levaduras son hongos unicelulares, no filamentosos, con una morfologa caracterstica
esfrica u ovalada. Al igual que los mohos, las levaduras se hallan ampliamente distribuidas en la
naturaleza; se encuentran frecuentemente en forma de polvillo blanco que recubren los frutos y las
hojas. Como la mayora de las levaduras forman colonias de organismos unicelulares no se
reproducen como una unidad; en su lugar la colonia crece a medida que aumenta el nmero de
levaduras. Este aumento suele ocurrir por gemacin. En la gemacin la clula parental forma una
protuberancia (yema) sobre su superficie externa. Cuando la yema se alarga el ncleo de la clula
parental se divide y uno de los ncleos emigra a la yema. El material de la pared celular se deposita
entre la yema y la clula parental y la yema acaba finalmente por separarse. (Figura 1).(TORTORA et
al, 2007)
Aspergillus Sp:Las colonias de las especies de este gnero se desarrollan en general de forma rpida y
presentan diversas tonalidades: blanquecinas, amarillentas, Marron-amarrillentas, negruzcas, marronnegruzcas o verdosas (Figura 2). Estan formadas por densas agrupaciones de conidiforos sobre los
que se encuentran las clulas conidiogenas que son las que originan las esporas asexuales o conidios.
El conidiforo caracterstico de Aspergillusposee tres partes bien diferenciadas: vescula (extremo
apical hinchado), estipe (seccin cilidrica situada debajo de la vescula) y clula pie (seccin final,
que une el conidiforo con el micelio). Sobre la vesicula se disponen las clulas conidiogenas,
denominadas habitualmente fialides. En muchas especies, entre la vesicula y las fialides se encuentran
otras clulas denominadas metulas. Las vescula, las metulas (si ten presentes), las fialides y los
conidios constituyen la cabeza uniseriadas, y si se presentan fialides y metulas, biseriadas. Los
conidios pueden formar columnas compactas ( cabeza conidial columnar) o divergente (cabeza
conidial radial),actualmente se conocen ms de 180 especies en el gnero Aspergillus.
(SORIANO, 2007)
Penicillum Sp: Estas especies forman colonias que crecen generalmente de manera rpida, estn
formadas por densas agrupaciones de conidiforos y la mayora presentan coloraciones verdosas
(Figura 3),la textura de la colonia tambin es una caracterstica importante ( por ejemplo, velutina o
aterciopelada, lanosa, funiculosa, fasciulada o sinematosa) y dependen de la disposicin de los
conidiforos. La estructura de reproduccin asexual caracterstica de Penicillumes un conidiforo
formado por una estipe diferenciada que finaliza en un penilicio o pincel. Este pincel puede estar
formado por diversas estructuras que reciben nombres distintos segn su localizacin y complejidad
( metulas, ramas) y que sustentan en la parte ms apical un conjunto de filides.(SORIANO, 2007)
Fusarium Sp: El gnero Fusarium comprende muchas especies y un gran nmero de ellas, por no
decir casi la totalidad, son capaces de producir metabolitos txicos. La principal caracterstica del
gnero es la presencia de conidios hialinos, curvados, fusiformes y septados denominados
macroconidios(Figura4). Esto macroconidios se forman a partir de unas estructuras denominadas
esporodoquios o bien pionotes. Algunas especies pueden producir conidios mas pequeos uni o
bicelulares denominados microconidios.(SORIANO, 2007)

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Rhizopus: La clave para la identificacin de las especies de Rhizopus es la produccin de rizoides


caracteristicos, similares a races. Los rizoides que de modo tpico se origina en la hifa
inmediatamente adyacente al esporiogioforo se denomina nodal (Figura 5). Los esporangioforos que
miden 1000 micrometros terminan en una columna cncava que se extiende al interior del esporangio
sacular. El colapso en forma de paraguas del esporangio posmaduro se observa a menudo como un
rasgo secundario en los cultivos ms viejos, particularmente til para identificacin preliminar cuando
los rizoides estn desarrollados de manera insuficiente. (KONEMAN, 2008)
Trichoderma: de este hongo se obtiene poca informacin pero de forma general la mayora de las
especies tienen ascocarpos de brillantes colores; los estromas, si estn presentes, usualmente tambin
son de colores brillantes(figura 6) . Los tejidos de los peritecios y estromas son carnosos. Las ascas
son persistentes y tiene varios tipos de estructuras apicales, forman sus peritecios embebidos en
estromas, mostrando al exterior solamente los ostiolos. Las ascosporas con bicelulares, con una
marcada constriccin en el septo. Frecuntenme al madurar las dos clulas de la espora se separan.
(ULLUOA y HANLIN, 1978)
De este modo es posible ver que dependiendo el tipo de hongo, la clase y sus subdivisin se puede
tener caractersticas determinadas para cada uno que permiten su identificacin morfolgicas y
adems una diferenciacin con mayor precisin.
CONCLUSIONES

Las diferentes estructuras (macro y microscpicas) presentes en un hongo son un carcter


importante en taxonoma de los diferentes grupos, pues estn permiten una identificacin
preterminada para cada tipo de hongo.

Los diferentes mecanismos nutricionales son variables entre los grupos y as mismo
existen grandes diferencias morfolgicas, resultado de
un proceso adaptativo y
evolutivo.

PREGUNTAS
7.1 Menciona las estructuras de reproduccin asexual y sexual que se observaron.
Qu hongos crees que presentan mayor grado de organizacin estructural en sus cuerpos
fructferos?
R/
El hongo de la especiesde Rhizopus pues producen esporas asexuales y sexuales.
Las esporangiosporas asexuales se producen dentro de una estructura aguzada, el esporangium,
y son genticamente idnticas a su padre. EnRhizopus, el esporangio es soportado por una gran
columelaapofisada, y el esporangiforo asoma entre rizpodes distintivos. Zigosporas negras se
producen despus de dos fusiones compatibles de miceliosdurante la reproduccin sexual. Y
hacen colonias que pueden ser genticamente diferentes de sus padres. ( MIER, T.et al 2002)
ESPORAS ASEXUALES: Las esporas asexuales son siempre INMVILES y se producen en
esporangios redondos o piriformes portados en Esporangiforos sencillos o ramificados.
Algunos gneros carecen de esporangios y la reproduccin asexual tiene lugar mediante
Conidios. Son esporas que se producen dentro de los ESPORANGIOS. Al romperse el
esporangio las esporas salen y al caer en el sustrato adecuado dan origen a nuevas hifas. En
este tipo de reproduccin el ncleo de la clula madre se divide en varios ncleos, cada uno
toma una parte del citoplasma de la clula madre que luego se rodea de una membrana celular,
la clula madre se rompe y se liberan varias clulas hijas. Ejemplo: en Mucor o en Rhizopussp

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(Ver. Figura 5). Los CONIDIOS son esporas desnudas que se forman en los extremos de las
hifas mediante gemacin. Ejemplo: en el hongo Aspergillus niver (Ver. Figura 2.)
Las levaduras se reproducen asexualmente por gemaci o brotacin y sexualmente
mediante ascosporas o basidioesporas. Durante la reproduccin asexual, una nueva yema surge
de la levadura madre cuando se dan las condiciones adecuadas, tras lo cual la yema se separa
de la madre al alcanzar un tamao adulto. En condiciones de escasez de nutrientes las
levaduras que son capaces de reproducirse sexualmente formarn ascosporas. Las levaduras
que no son capaces de recorrer el ciclo sexual completo se clasifican dentro del
gnero Candida. (Ver figura 1.)
ESPORAS SEXUALES: Las esporas asexuales se producen en los Esporangios, que nacen de
hifas especiales llamadas Esporangiforos (Ver. Figura 5). Estas hifas elevan de forma
caracterstica los esporangios por encima del micelio, de este modo, las esporas son capturadas
fcilmente y transportadas por las corrientes de aire.
Las Esporas Sexuales pueden ser de ENDGENAS, es decir, formadas dentro de un
receptculo cerrado; gametangios llamados anteridio y oogonio. O EXGENAS, es decir no
encerradas, gametangios semejantes.(GARCIA, V. 2004).
7.2 Todos los hongos observados presentan micelio? Explique.
La mayora de los hongos son organismos cenocticos y tienen una estructura vegetativa
denominada micelio. El micelio consta de una masa de citoplasma multinucleado encerrada
dentro de un sistema de tubos rgidos y ramificados que son de dimetro bastante uniforme.
Los tubos que encierran al protoplasma representan una estructura protectora homologa a la
pared celular de un organismo unicelular. Normalmente, un micelio surge de la gemacin y
posterior crecimiento de una sola clula reproductora o espora. (STANIER, R.Yet al 1992)
BIBLIOGRAFIA

1. ADAMS, M.R. (1997).Microbiologia de los alimentos. Editorial ACRIBIA.S,A.Espaa.Pag


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2. ARAUZ.L,F. (1898) Fitopatologia: Un enforque agroecologico. Editorial Universidad de
Costa Rica- Ciudad Universitaria Rodrigo Facio. Pag 108.
3. TORTORA G.J.,FUNKE B.R., CASE C.L. (2007) Introduccin a la microbiologa 9
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4. SORIAN.J,M et al.Micotoxinas en Alimentos. Editorial Diaz de Santo. Espaa (2007).pag
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5. KONEMAN, E. W. (2008). Diagnostico microbiolgico:Texto y Atlas a Color 6 edicin.
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6. ULLOA.M; HANLIN. R (1978). Atlas de MicologiaBasica. Editorial Concepto S.A.
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7. GARCIA, V. (2004). Introduccin a la Microbiologa 2 Ed. Editorial EUNED. Costa Rica.Pag
89-95

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ALIMENTOS

8. MIER, T. TORIELLO, C. ULLOA, M. (2002). Hongos microscpicos saprobios y parsitos.


Editorial UNAM. Mexico. Pag 27.
9. STANIER, R.Y. INGRAHAM, J.L. WHEELIS, M. L. PAINTER, P. R. (1992). Microbiologia
2da edicin. Editorial Revert S.A. Barcelona. Pag 574.