UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE

Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2003

Resumen: V-042

Evaluacin de diferentes Protocolos de Superovulacin

en Bfalos en el NEA Argentino.
Pellerano, Gabriela S. - Maldonado Vargas, Pablo - Rodrguez, Sebastin N.
Arzeno, Mximo T. - Crudeli, Gustavo A.
Ctedra de Fisiopatologa de la Reproduccin y Obstetricia.
Departamento de Produccin Animal - Facultad de Cs. Veterinarias - UNNE.
Sargento Cabral 2139 - (3400) Corrientes - Argentina.
Tel./Fax: +54 (03783) 425753 / 420854 int. 131
E-mail: gcrudeli@vet.unne.edu.ar
ANTECEDENTES

El empleo de la inseminacin artificial (IA) y Transferencia Embrionaria (TE) en bovinos ha sido ampliamente
estudiado y utilizado con xito en establecimientos rurales de todo el mundo, permitiendo que la mejora gentica de
los rodeos sea ms rpida y eficiente. En tanto, en bubalinos estas biotcnicas han merecido una menor cantidad de
estudios y han sido menos empleada por los criadores debido a ciertas dificultades en la identificacin de las
manifestaciones del estro y del momento apropiado para realizar la IA. En comparacin con los resultados encontrados
en bovinos, los bubalinos presentan problemas especficos ligados a la detecin de celos, identificacin de estructuras
ovricas por los examenes ginecolgicos, estandarizacin de esquema de superovulacin, determinacin del momento
ideal para la inseminacin artificial y baja tasa de recuperacin de embriones (Misrah, 1993; Drost, 1996; Baruselli,
1997).
El objetivo de la superovulacin y de la transferencia embrionaria es obtener grandes nmeros de
embriones con elevado potencial de preez. En funcin de ello se realizaron estudios ultra-sonogrficos de las estruturas
ovaricas durante el tratamiento superovulatrio a fin de evaluar la respuesta folicular en la espcie bovina y, en base a
esos resultados, fue posible orientar mejor los procedimientos de superovulacin y colecta de embriones (Pierson
Ginther, 1987c; Mapletoft et al., 1994). No obstante, en la literatura existen escasas informaciones sobre la
foliculognesis y las inter-relaciones de las estruturas ovricas durante el proceso de superovulacin en la espcie
bubalina. Para analizar el potencial superovulatrio de esta espcie, son necesrias evaluaciones precisas de la respuesta
folicular, de la tasa de ovulacin, de la formacin de cuerpos lteos y de la tasa de recuperacin de embriones. Tales
evaluaciones son relevantes ya que en los bubalinos, el desarrollo embrionrio ocurre mas rapidamente, lo que implica
la recuperacin de embriones entre el 5 y el 6 dia pst-estro, cuando los cuerpos lteos son pequeos y presentan
consistencia blanda (Singla et al., 1996). Asimismo, la ultrasonografia presenta mayor importancia en la evaluacin de
las estructuras ovricas, cuando se la correlaciona con la palpacin rectal (Pierson Ginther, 1987c), y principalmente en
animales superovulados, en los cuales es comn estimar erroneamente la cantidad de estructuras ovaricas por palpacin
rectal (Purwantara et al., 1994b).
Varios trabajos publicados demostraron la existencia de baja tasa ovulatria en bovinos cuando el
tratamiento superovulatrio se inicia con la presencia de un folculo de gran tamao, esto es, de un folculo dominante
(Grasso et al., 1989; Guilbault et al., 1991; Huhtinen et al., 1992), an durante la fase de seleccin de crecimiento de
este folculo dominante (Adams et al., 1992b). Examenes ultrasonogrficos dirios demuestran que existe una reduccin
de la respuesta superovulatria en los animales tratados en presencia de un folculo dominante, cuando comparamos con
animales sin el folculo dominante al incio del tratamiento superovulatrio (Bungartz Niemann, 1994).
En otros trabajos (Baruselli et al., 1997 e Baruselli et al., 1998), en los que utilizaron diferentes hormonas
disponbles en el mercado para la superovulacin en bovinos, los examenes ultrasonogrficos de los ovrios mostraron
que las hembras bubalinas presentan buena respuesta folicular al tratamiento superovulatrio. Los animales presentaron
desarrollo de un pool de folculos que alcanzaron diametros 0,8 cm en el estro con tratamiento superovulatorio. No
obstante, el nmero de folculos 0,8 cm en el dia del estro fue inferior a los resultados de la literatura para bovinos
(Boland et al., 1991; Shaw et al., 1995; Bo et al., 1996). El menor nmero de folculos en bfalas superovuladas puede
estar relacionado al menor nmero de folculos reclutados por onda de crecimiento folicular y, consecuentemente, al
menor nmero de folculos en los ovrios (Danell, 1987; Le Van Ty et al., 1989).
Las tasas de recuperacin de embriones, en relacin a las ovulaciones (27,4%) y a los cuerpos lteos
(32,1%), son mas bajas en las bfalas superovuladas (Baruselli, 2000). Estas tasas fueron inferiores a las descriptas en
la literatura para bovinos por (Boland et al., 1991; Vos et al., 1994; Shaw et al., 1995). Shaw et al. (1995), en las que
relatan que la tasa de recuperacin es proporcional al nmero de ovulaciones observadas por la ultra-sonografia en
bovinos
Una caracterstica reproductiva que debe ser considerada en los bubalinos es la baja incidencia del
comportamiento homosexual durante el celo. Al contrario de los bovinos, es raro observar esta sintomatologa en los

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bubalinos, o sea solamente el 3.44 % (Barurelli, 1994 ), lo que indica que, con mayor frecuencia, el macho realiza la
monta en el perodo de celo. Este comportamiento disminuye la visualizacin externa del celo y demuestra que es
indispensable la utilizacin de retajos para deteccin de celo en esta especie. La sincronizacin de la ovulacin por
mtodos hormonales en bovinos ha presentado resultados animadores para el empleo de la I.A. a tiempo fijo (I.A.T.F.).
Los protocolos de sincronizacin existentes permiten realizar la IA a tiempo fijo (en horario predeterminado), sin la
necesidad de observar el estro, facilitando el manejo del rodeo y optimizando el empleo de esta biotecnologa a campo.
Estudiando la dinmica folicular durante el tratamiento Ovsynch se verifico que despus de la aplicacin de GnRH.
ocurre la ovulacin entre 24 a 32 horas; esos resultados demuestran una gran eficiencia del mtodo Ovsynch en la
sincronizacin de ovulacin en bovinos. (Pursley et al, 1995). El presente trabajo tuvo por finalidad estudiar la
respuesta superovulatoria de los bubalinos con protocolos hormonales que utilizan Hormona Folculo estimulante
porcina (FSH-p) y Gonadotrofina Corinica Equina (PMSG) a celo detectado versus un esquema con FSH-p y GnRH
para IA a tiempo fijo.
MATERIALES Y METODOS

El trabajo se llevo a cabo en un establecimiento localizado a 7 Km. Al norte de la localidad de Itat, provincia
de Corrientes. A los efectos, se realiz una seleccin al azar de las hembras utilizadas, de un grupo original de 65
bfalas. .Se formaron tres grupos cada uno con 2 hembras adultas, las cuales eran de raza Murrah, Mediterrnea o cruza
de ambas. En el Grupo 1 (G1), se prob un protocolo que utiliza FSH-p (Folltropin, Vetrepharm, Canada), mas un
implante auricular de Norgestomet, (Crestar, Intervet, Argentina) el cual se coloc el da 0 junto con una dosis de
Benzoato de Estradiol (Estradiol, Over, Argentina) y Progesterona (Progesterona, Ro de Janeiro, Argentina). El da
4 se comenz con la primer dosis de 4 ml. de FSH-p y se continu por 4 das consecutivos cada 12 hs en dosis
decrecientes de 3, 2 y 1 ml. para los dias 5, 6 y sptimo respectivamente. El da 6, al medioda, se le aplic una dosis
de prostaglandina F2 (Prostal, Over, Argentina) y el da 7 se retiro el implante y el da 8, se coloc una dosis de
GnRH. (Gestar, Over, Argentina) y a las 16 hs posteriores se inseminaron a las hembras a tiempo fijo.
En el Grupo 2 (G2) se utiliz un protocolo similar al anterior, pero sin la dosis de GnRH. el da 8 y luego de
colocada la PGF2 se detecto celo e insemin, para ello se utilizaron dos retajos marcadores con dispositivo Chin-ball,
con pintura blanca. En el momento en que las hembras no aceptaban mas la monta, las hembras se retiraban y se
inseminaban inmediatamente.
En tanto que en el Grupo 3 (G3) se utiliz similar protocolo, variando la droga utilizada para la superovulacin,
usndose PMSG (Novormon, Syntex, Argentina) el da 4, en una dosis nica, y luego de la PGF2, el da 6, se
procedi de igual manera que el G2, detectando celo e inseminando.
Para evaluar la respuesta superovulatoria en los distintos tratamiento se realiz una ultrasonografa ovrica
utilizando un equipo PIE MEDICAL 485 Anser Vet. con transductor lineal transrectal de 8 Mhz, en los que se
contabilizaron folculos 8 mm de dimetro el da 8 en el G1 , y en el da del celo para los G2 y G3, mientras que para
evaluar la eficiencia de la ovulacin, se realizo una ecografa de los ovarios 7 das posteriores a la IA, y se contabiliz el
numero y dimetro de los cuerpos lteos. Tambin, conjuntamente se evaluaron de la condicin corporal, medida en la
escala de 1 (emaciada) a 5 (obesa) y se realizaron ecografas diarias para determinar la evolucin del crecimiento
folicular.
Para evaluar los datos se utilizo el programa Statistix para windows versin 1.0, 1999, en el cual se
realizaron las pruebas de supuestos de normalidad, y luego el anlisis de la varianza (ANOVA).
RESULTADOS Y DISCUSION

Los resultados obtenidos fueron de 5, 11 y 11,5 folculos 8 mm, para los G1, G2 y G3 respectivamente. En
tanto que la respuesta ovulatoria fue de 3, 5 y 4,5 cuerpos lteos para los G1, G2 y G3 respectivamente. Cuando se
evaluaron los porcentajes obtenidos para esos tres grupos, la relacin de cantidad folculos / cantidad de Cuerpos lteos,
(R: F/CL) fueron de 60, 45,5 y 39,1 % para los G1, G2 y G3, respectivamente, no encontrndose diferencias estadsticas
significativas (P>0,05). Cuando se evalu la respuesta en funcin de la condicin corporal, se encontr con una Bfala
del G1, que perdi estado durante la experiencia, produciendo una baja respuesta superovulatoria, no obstante su baja
produccin, la R: F/CL: fue buena y similar a las dems. Los resultados son similares a los encontrados en bubalinos
en el centro del Brasil, por Baruselli, 2000, quien obtuvo una media de 8,7 folculos 8 mm el da del celo y 6,3
cuerpos lteos, siendo la tasa de ovulacin de 71,8 %, sin embargo son levemente inferiores a los encontrados por
Manik, et al, 1994 en bfalas lecheras de la India, quien obtuvo un total de 26 folculos de 10-14 mm el da del estro y
un total de 17 cuerpos lteos, siendo la tasa de ovulacin de 65 %, pero superior a los resultados obtenidos por Bed, et
al, 1996 quien obtuvo un total de 3 cuerpos luteos utilizando similar protocolo de superovulacin. Mientras que si
comparamos con los resultados obtenidos en bovinos por Boland et al,1991 estos fueron superiores a los resultados
obtenidos en bfalos. Los valores logrados si bien se pueden considerar razonables, son pasibles de ser mejorados. Se
hacen necesarios nuevos trabajos con el objeto experimentos en esta rea.

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Los resultados se pueden observar en el Grfico N 1.

60%
60%
50%
40%
% de
30%
ovulacin
20%
10%
0%

45,50%

Grupo 1

Grupo 2

39,10%

Grupo 3

CONCLUSIONES

Los datos obtenidos demuestran que es posible en bfalos la utilizacin de protocolos de superovulacin, en
especial, aquellas que hacen posible la Transferencia Embrionaria y la IATF, con el auxilio de la ultrasonografia,
acortando el excesivo tiempo que demanda la deteccin de celo. Tambin se puede destacar, que en el G1 y a pesar de
no existir diferencias significativas, presento una mayor tasa ovulatoria, debido probablemente a la dosis de GnRH, que
aumenta la ovulacin, en relacin a los otros grupos. Se considera necesario la realizacin de nuevos trabajos con un
mayor nmero de animales a los efectos de poder concluir con mayor certeza.
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