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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE NICARAGUA MANAGUA

UNAN-MANAGUA
RECINTO UNIVERSITARIO RUBEN DARIO
INSTITUTO POLITECNICO DE LA SALUD LUIS FELIPE MONCADA
DEPARTAMENTO DE BIOANAISIS CLINICO Y MICROBIOLOGIA

Carrera:
Licenciatura en Microbiologa
Asignatura:
Bacteriologa II
Tema:
Prevalencia de Listeria monocytogenes en alimentos analizados en el Centro Nacional de
Diagnstico y Referencia en el periodo comprendido desde el ao 2010 hasta el ao 2015.

Autores:
Br. Garca Guevara Daniel Jos
Br. Huete Cordero Lorena Elizabeth
Br. Obando Brizuela lvaro Josu
Br. Sequeira Arostegui Ecker Luis
Tutor:
Lic. Oscar Arbiz Medina. Msc.

Managua, 02 de Abril del 2016

Prevalencia de Listeria monocytogenes en alimentos analizados en el Centro Nacional de


Diagnstico y Referencia en el periodo comprendido desde el ao 2010 hasta el ao 2015.

ndice
Resumen
. .4
I.
Introduccin.

..5
II.
Antecedentes..

..6
III.
Justificacin..

..7
IV.
Objetivos..

.8
A.Objetivo general...

..8
B.
Objetivos especficos...
...8
V.
Planteamiento del problema...
..9
VI.
Preguntas directrices...
.10
VII.
Marco terico...

.11
A.Caractersticas generales.....
.11
1. Morfologa..

.11
2.
Taxonoma.

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Garca, Huete, Obando, Sequeira

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Diagnstico y Referencia en el periodo comprendido desde el ao 2010 hasta el ao 2015.
3.
Ciclo Biolgico...

.12
4.
Patogenia e inmunidad (Factores de Virulencia)
..14

...

5.
Epidemiologa...

.16
B.
Infeccin causada por Listeria monocytogenes en Alimentos...
.17
1.
Patologa...

.17
2.
Vas de transmisin...
.1
8
3.
Manifestaciones clnicas...
.18
4.
Tipos de alimentos....
.21
5.
Diagnstico de laboratorio...
22
6.
Tratamiento...

.27

7.
Prevencin y control...
..29
VIII. Diseo Metodolgico...
.31
A.Tipo de estudio
...

.31

Garca, Huete, Obando, Sequeira

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Diagnstico y Referencia en el periodo comprendido desde el ao 2010 hasta el ao 2015.
B.
Procesamiento de la informacin...
.31
IX.
Conclusin...

.32
X.
Recomendaciones...

33
XI.
Bibliografa...

...34
XII.
Anexos
...

...36
XIII. GLOSARIO...

.45

Garca, Huete, Obando, Sequeira

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Prevalencia de Listeria monocytogenes en alimentos analizados en el Centro Nacional de


Diagnstico y Referencia en el periodo comprendido desde el ao 2010 hasta el ao 2015.

Resumen.
La listeriosis es una enfermedad de origen alimentario de carcter grave, pero de baja
frecuencia que causa la muerte hasta en un 30% de los casos. La bacteria responsable,
Listeria monocytogenes se encuentra ampliamente distribuida en la naturaleza donde puede
sobrevivir por largos periodos de tiempo. El mayor peligro como fuente de contagio para el
hombre son los alimentos listos para el consumo, especialmente los que se conservan
refrigerados por periodos prolongados. En la industria alimentaria el patgeno sobrevive a
los procesos de limpieza e higienizacin por su capacidad de formar biofilm sobre
superficies de trabajo y equipos, contaminando los alimentos que all se procesan.
Investigadores del laboratorio se interesaron en este microorganismo cuando se reconoci
el riesgo que representaba para la salud pblica y la seguridad en la industria de alimentos.
Este trabajo es una contribucin paraentregar antecedentes sobre el patgeno, describir
algunas caractersticas morfolgicas y taxonmicas de Listeria monocytogenes,los
mecanismos empleados para interactuar con la clula hospedera,los mecanismos para
escapar de los procesos de muerte celular y pasar de una clula infectada a otra, los factores
de virulencia, las poblaciones de riesgo, manifestaciones clnicas de listeriosis humana, el
tratamiento as como su perfil de resistencia y medidas para su control en la industria
procesadora de alimentos tambin en la vida diaria.
La informacin recopilada resulta de gran importancia para el personal de salud, industria,
consumidores y poblacin de riesgo; razn por la cual Listeria monocytogenes es un
patgeno que representa una amenaza para la salud pblica mundial.

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I.

Introduccin.

Listeriaes un gnero bacteriano que comprende seis especies, esta lleva su nombre en honor
a Joseph Lister. La especie Listeriamonocytogenes son bacilos Gram positivos, es una
bacteria de amplia distribucin en la naturaleza y muy resistente a las condiciones adversas
del ambiente. Su presencia en los alimentos est determinada por su extensa distribucin en
el ambiente tierra, aguas servidas, materia fecal, vegetacin, ensilados y entorno de la
produccin de alimentos lo que confiere una importante oportunidad para contaminarlos.
Este microorganismo es un patgeno emergente y poco frecuente en la poblacin general,
puede causar enfermedad tanto en forma espordica como en brotes. La exposicin a la
bacteria no siempre resulta en enfermedad. Los procesos que originan estas bacterias
pueden ser muy graves, en fetos, neonatos, nios y ancianos, en los que pueden ocasionar
secuelas que perduran toda la vida del paciente e incluso la muerte. En la mayor parte de
los casos la bacteria se adquiere por consumo de alimentos contaminados.
La contaminacin porListeria monocytogenes preocupa tanto a profesionales de la salud
como a industrias y gobiernos, por la elevada tasa de mortalidad de la enfermedad.

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II.

Antecedentes.

Segn Daz, en el ao 2004un estudio realizado en la Universidad Austral de Chile se


determin la presencia de la bacteria en un 40 % de 25 muestras de congrio fresco y en un 4
% de 25 muestras de bacalao. (Diaz, 2004)
En Lima, Peren el ao 2004 se realiz un estudio donde se analizaron 100 muestras, de
las cuales 50 fueron muestras de carne de pollo fresco y las otras 50 muestras fueron
diversas verduras frescas (esprrago, col, apio, espinaca y lechuga). El anlisis
microbiolgico se realiz de acuerdo a la metodologa recomendada en el Bacteriological
Analytical Manual de la FDA y la NF ISO 11290- 1. Se logr aislar L. monocytogenes de
una muestra de pollo (2%) y de una muestra de verdura (2%), correspondiendo esta ltima
a esprragos. Las cepas fueron aisladas empleando agar Oxford y agar Palcam como
medios selectivos e identificados mediante pruebas bioqumicas.(Centurion & Takajara,
2004)
En un estudio realizado en el 2013 en la provincia de Trujillo-Per se evaluaron 60
muestras de leche fresca y 60 muestras de queso fresco, recolectadas de los diversos lugares
de expendio de estos alimentos, segn la Norma Tcnica Peruana NTP ISO 2859-1:2009.
El procesamiento, aislamiento e identificacin de L. monocytogenes se realiz de acuerdo a
la metodologa descrita por el Bacteriological Analytical Manual de la Food and Drug
Administration (FDA). No se encontr L. monocytogenes en leche fresca. Sin embargo, en
queso fresco su presencia fue de 3,34 %.(Daz, Chvez, & Sauceda, 2013)
En el 2013 en un estudio realizadoen las principales cadenas de supermercados de la
gran rea metropolitana (GAM) de San Jos, Costa Rica se analizaron un total de 60
muestras, de pulpa de la fruta de guanbana, mango y maracuy de las cuales salieron 3
muestras positivas para L. monocytogenes.(Von Breymann, Chaves, Arias, & Laura, 2013)
En el 2014 en un estudio realizado por unos estudiantes del Polisal, UNAN-Managua en
queso fresco artesanal expendido en el mercado Ivn Montenegro de Ciudad de Managua,
se analizaron 100 muestras y estas resultaron ser negativas el 100% para L. monocytogenes.
(Alemn, Daz, & Fonseca, 2015)
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III.

Justificacin

Las enfermedades transmitidas por alimentos constituyen un problema de salud pblica.


Es as como la Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y Alimentacin
(Food and Agriculture Organization, FAO) y la Organizacin Mundial de la Salud (OMS)
estn preocupadas por el aumento en la incidencia de estas enfermedades en las ltimas
dcadas (FAO/OMS, 2008). La listeriosis, cuyo agente etiolgico es L. monocytogenes, se
sita entre las enfermedades transmitidas por alimentos de mayor relevancia en la salud
pblica, debido al impacto social y econmico que tiene por la gravedad de su cuadro
clnico.
L. monocytogenes,tiene como hbitat principal el suelo y la materia vegetal en
descomposicin en el cual sobrevive y crece como saprofito. Debido a su amplia
distribucin, este microorganismo tiene muchas oportunidades de contaminar alimentos,
siento esta la va ms frecuente por la que el ser humano adquiere la infeccin (Muoz AI,
1998).
Debido a la importancia clnica y por la falta de informacin y de registro de casos en
los diferentes hospitales y unidades de salud sobre este microorganismo, nos proponemos
realizar este estudio para dar a conocer la prevalencia de L. monocytogenes en alimentos
analizados en Centro Nacional de Diagnstico y Referencia (CNDR).
Con el presente estudio pretendemos brindar informacin veraz y objetiva sobre la
contaminacin de alimentos por L. monocytogenes, que ser de gran utilidad, a personas en
general; estudiantes de la salud, comunidad Mdica, Analistas clnicos y Microbilogos de
a nivel nacional. Asmismo concientizar a la poblacin nicaragense a tomar medidas de
prevencin para evitar la contaminacin de los alimentos con el microorganismo en
estudio.

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IV.

Objetivos

Objetivo general
Conocer la prevalencia de Listeria monocytogenes en alimentos analizados en el Centro
Nacional de Diagnstico y Referencia en el periodo comprendido desde el ao 2010 hasta
el ao 2015.
Objetivos especficos:

Mencionar las caractersticas generales deListeria monocytogenes.

Mencionar la patologa y las manifestaciones clnicas causadas por Listeria


monocytogenes.

Detallarlos tipos de alimentos en los que se encuentra L. monocytogenes con mayor


frecuencia.

Mencionar la clasificacin y el origen o procedencia de los alimentos analizados en


el Centro Nacional de Diagnstico y Referencia CNDR.

Enumerar los mtodos utilizados en el Centro Nacional de Diagnstico y Referencia


CNDR para el diagnstico de L. monocytogenes en alimentos.

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V.

Planteamiento del problema

Cul es la prevalencia de Listeria monocytogenes en alimentos analizados en el


Centro nacional de Diagnstico y Referencia (CNDR) en el periodo
comprendido desde el ao 2010 al ao 2015?

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VI.

Preguntas directrices

1- Cules son las caractersticas de Listeria monocytogenes?


2- Cules son las patologas y las manifestaciones clnicas de este microorganismo?
3- Cules son los tipos de alimentos que se analizan en el CNDR?
4- Cmo clasifican los alimentos que analizan en busca de Listeria monocytogenes?
5- Cul es el origen o procedencia de los alimentos analizados en el CNDR?
6- En cul de los alimentos analizados en el CNDR encuentra Listeria
monocytogenes con mayor frecuencia?
7- Cules son los mtodos diagnsticos utilizados en el CNDR para el aislamiento e
identificacin de Listeria monocytogenes?

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VII.

A.

Marco terico

Caractersticas Generales.

Listeria monocytogenes
El gnero Listeria est formado por seis especies, de las que Listeria monocytogenes y
Listeria ivanovii son los nicos patgenos reconocidos. L. monocytogenes representa un
destacado patgeno del ser humano, mientras que L. ivanovii constituye en esencia un
patgeno animal.
Estos bacilos cortos aparecen de forma aislada, en parejas o en cadenas cortas y se
pueden confundir con Streptococcus pneumoniae o Enterococcus, lo cual reviste
importancia debido a que tanto S. pneumoniae como L. monocytogenes pueden producir
meningitis. Aunque las bacterias se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza, la
enfermedad humana es infrecuente y est limitada a varias poblaciones bien definidas,
como los neonatos, los ancianos, las mujeres embarazadas y los pacientes con deficiencias
de la inmunidad celular. (Murray, Rosenthal, & Pfaer, 2007)

1. Morfologa
L. monocytogenes es un bacilo gram positivo pequeo (0,4 a 0,5 x 0,5 a 2 m) no
ramificado y anaerobio facultativo capaz de proliferar dentro de un amplio abanico de
temperaturas (1 C a 45 C), es catalasa positivo, crece bien en un amplio rango de pH
entre 4,3 y 9,1 y una elevada concentracin de sal. Estos microorganismos son mviles a
temperatura ambiente, pero no a 37 C, y muestran una movilidad caracterstica por viraje
cuando se examina una gota del caldo de cultivo en el microscopio.

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L. monocytogenes muestra una dbil -hemlisis al crecer en placas de agar sangre de


carnero. Estos rasgos diferenciales (morfologa en la tincin de Gram, motilidad,
-hemlisis) son tiles para la identificacin preliminar de Listeria. (Schobitz, Marin,
Horzella, & Carrasco, 2001)

2. Taxonoma
Dominio: Bacteria
Filo: Firmicutes
Clase: Bacilli
Orden: Bacillales
Familia: Listeriaceae
Gnero: Listeria
Especie: Listeria monocytogenes

3. Ciclo Biolgico.
Listeria monocytogenes arriba al tracto gastrointestinal previa ingestin de alimentos
contaminados y una vez en el intestino, sta crece eficazmente dentro de los enterocitos y
mononucleares, lo cual permite que parte de su poblacin alcance la circulacin sangunea.
El ciclo infectivo de L. monocytogenes inicia con su internalizacin a la clula
hospedera, ya sea por fagocitosis (en el caso de los macrfagos) o por fagocitosis inducida
(invasin) en los fagocitos no profesionales. En todo caso, es el propio microorganismo el
que promueve su ingreso, asegura su libertad en el citosol de la clula eucarionte, prolifera
eficazmente y se desplaza hacia el exterior, para inducir su ingreso a las adyacentes, sin que

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ellas

representen

su

exposicin

defensiva

de

anticuerpos,

complementos

polimorfonucleares (PMNs). (Alemn, Daz, & Fonseca, 2015)


Los eventos implicados en el proceso infectivo global son:
a.
b.
c.
d.

Entrada a las clulas del hospedero.


Escape de fagosoma y desarrollo intracelular.
Desplazamiento intracitoplsmico.
Diseminacin clula a clula.

a. Entrada al hospedero
Listeria monocytogenes se adhiere a la mucosa intestinal, posteriormente el bacilo es
englobado por macrfagos residentes dentro de los cuales puede sobrevivir y proliferar
antes de diseminarse por la va linftica o sangunea.
b. Escape del fagosoma y desarrollo intracelular
Una vez que L. monocytogenes ha ingresado a la clula hospedera, esta lleva a cabo la
lisis de la membrana vascular debido a la accin de una potente toxina formadora de poros
llamada listeriolisina O (LlO), la cual promueve el escape del microorganismo del
fagosoma. Adicionalmente, L. monocytogenes produce catalasa y superxido dismutasa,
dos enzimas que la protegen de la oxidacin fagolisosmica. Como consecuencia de la lisis
del fagosoma el microorganismo se libera al citosol en donde se multiplica en un tiempo de
generacin de 50 minutos.
c. Desplazamiento intracitoplsmico
En trminos prcticos se refiere a la forma de locomocin del microorganismo dentro
del citoplasma de la clula hospedera. La movilidad del microorganismo se sustenta en el
proceso de internalizacin a la clula hospedera ya que la superficie bacteriana absorbe
varios filamentos cortos de actina presentes en la clula del husped, esto como
consecuencia de la afinidad que esta tiene por la protena listeriana ActA.

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Como resultado de esta interaccin, se logra la polimerizacin de la actina la cual


modifica la morfologa del microorganismo presentando estructuras semejantes a la cola de
un cometa que aporta la fuerza locomotora a la bacteria dentro del ambiente intracelular.
Por lo tanto de la polimerizacin de la actina depende la fuerza y rapidez del
desplazamiento bacteriano.

d. Diseminacin de clula a clula


Este proceso es una consecuencia de la habilidad de adquirir movilidad de Listeria
monocytogenes dentro del citoplasma del fagosoma asociada a la manipulacin de
filamentos actnicos; lo que hace posible invadir a otras clulas del hospedero. Dichos
filamentos actnicos producen prolongaciones alargadas dentro de la clula que ejercen
presin, las cuales salen de la clula y terminan siendo fagocitadas por la clula adyacente
con la cual la bacteria repetir los eventos antes mencionados.(Alemn, Daz, & Fonseca,
2015)

4. Patogenia e inmunidad (Factores de Virulencia)


L. monocytogenes es un patgeno facultativo intracelular que puede crecer en los
macrfagos, las clulas epiteliales y los fibroblastos en cultivo. Los estudios con modelos
animales han puesto de manifiesto que esta infeccin se inicia en los enterocitos o en las
clulas M de las placas de Peyer. Su entrada en las clulas no fagocticas est mediada por
seis o ms protenas ricas en leucina, las internalinas (p. ej., InlA, InlB, InlC), que
interaccionan con los receptores glucoproteicos de la superficie de las clulas del
organismo anfitrin.

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Despus de penetrar en las clulas, el pH cido del fagolisosoma que rodea a las
bacterias activa una toxina bacteriana (Listeriolisina O) y dos enzimas diferentes de
fosfolipasa C, lo que conlleva la liberacin de las bacterias en el citosol de la clula. Las
bacterias se replican y posteriormente se mueven a travs de la clula hasta la membrana
celular.
Este movimiento est mediado por una protena bacteriana, ActA, la cual se localiza en
la superficie celular en un extremo de la bacteria y coordina el ensamblaje de la actina. Los
extremos distales de la parte final de la actina permanecen fijos mientras el ensamblaje
ocurre en la zona adyacente al extremo de la bacteria. Por tanto, la bacteria es empujada
hacia la membrana celular, donde se forma una protrusin (filpodo) que obliga a la
bacteria a pasar a la clula adyacente. Una vez que la bacteria es ingerida por la clula
adyacente, se repite el proceso de lisis fagolisosmica, replicacin bacteriana y movimiento
direccional. La entrada en los macrfagos despus haber atravesado las clulas que
recubren el intestino, conduce a las bacterias hasta el hgado y el bazo, lo que produce la
diseminacin de la enfermedad.
La inmunidad humoral es relativamente poco importante en el desarrollo de las
infecciones por L. monocytogenes. Estas bacterias se pueden replicar en los macrfagos y
moverse en el interior de las clulas, evitando as la eliminacin mediada por anticuerpos.
Por este motivo, los pacientes con deficiencias de la inmunidad celular, pero no de la
humoral, son especialmente susceptibles a las infecciones graves. (Murray, Rosenthal, &
Pfaer, 2007)

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Factores de virulencia
Factor regulador de protena
(PrfA)
Internalina (InIA)
Internalina (InIB)
Protena de invasin virulenta
(Vip)
Protena de adhesin Listeria
(LAP)
Amidasa autolisina
Listeriolisina O (LLO)
Protena de polimerizacin de
actina (ActA)
Hidrolasa de sales biliares (BSH)
Fosfolipasa
Metaloproteasa
(Ray & Bhunia, 2010)

Funcin
Regulacin de la expresin de la protena de virulencia.
Responsable de la invasin de las clulas epiteliales del
intestino y placenta durante el embarazo.
Entrar en los hepatocitos, y la fase heptica de la
infeccin.
Invasin de clulas epiteliales.
Adhesin a las clulas epiteliales del intestino.
Adhesin a las clulas husped.
Una hemolisina responsable de la lisis de los eritrocitos.
Tambin ayuda al escape de las bacterias de las vacuolas
dentro de las clulas.
Nucleacin de la cola de actina por el movimiento
bacteriano dentro del citoplasma.
Supervivencia en el intestino.
Lisis de la membrana de la vacuola.
Ayuda a la sntesis de PLC.

5. Epidemiologa
L. monocytogenes se asla de diversas fuentes ambientales y de las heces de mamferos,
aves, peces, insectos y otros animales. Se cree que el microorganismo procede del suelo y
de la materia vegetal en descomposicin. Se estima que una proporcin comprendida entre
el 1% y el 5% de los individuos sanos son portadores fecales. Debido a que estos
microorganismos son ubicuos, es probable que la exposicin y la colonizacin transitoria
ocurran en la mayora de individuos. Se ha calculado que cada ao se producen alrededor
de 2,500 infecciones, no obstante, muchas infecciones de carcter leve no se registran. Se
han documentado algunos brotes extensos asociados al consumo de productos alimentarios
contaminados.

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Por ejemplo, un brote registrado en el ao 1999 oblig a retirar 30 millones de libras de


carne contaminada, por lo tanto, muchas poblaciones estuvieron expuestas a la bacteria
antes de que se llevase a cabo la retirada. La incidencia de la enfermedad es tambin
desproporcionada en las poblaciones de alto riesgo como los neonatos, los ancianos, las
mujeres embarazadas y los pacientes con deficiencias graves de la inmunidad celular (como
receptores de trasplantes, aquejados de linfomas o del sndrome de inmunodeficiencia
adquirida [SIDA]).

B.

Infeccin causada por Listeria monocytogenes en Alimentos

1. Patologa
La listeriosis humana es una enfermedad espordica que se ve durante todo el ao,
aunque su incidencia mxima ocurre en los meses ms clidos. Las epidemias focales y los
casos espordicos de listeriosis se han asociado al consumo de leche contaminada, quesos
poco curados, carne poco hecha (p. ej., salchichas de pavo, carnes fras), vegetales crudos
mal lavados y repollo. Debido a que Listeria puede crecer en un amplio intervalo de pH, as
como a temperaturas fras, los alimentos con un pequeo nmero de microorganismos
pueden presentar una notable contaminacin tras un perodo prolongado de refrigeracin.
Si la comida no est cocinada o lo ha sido de manera inadecuada (p. ej., preparacin en
el microondas de una carne de vaca o salchichas de pavo) antes de ser consumida, puede
aparecer la enfermedad. La tasa de mortalidad de las infecciones sintomticas por Listeria
(20%-30%) es ms alta que la de casi todas las restantes toxinfecciones alimentarias.
(Murray, Rosenthal, & Pfaer, 2007)

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2. Vas de transmisin
A travs del consumo de alimentos contaminados con dicha bacteria es fcil su
contaminacin. Actualmente se reconoce que la mayora de los casos de listeriosis humana
son de transmisin alimentaria (99%) por falta de higiene, contaminacin cruzada,
inadecuado procesamiento de los alimentos, tanto en su transformacin en la industria
como la preparacin y cocinado en el hogar.
-Vertical: De madre embarazada al feto. Los bebs pueden nacer con L. monocytogenes
si sus madres comen alimentos contaminados durante el embarazo. Aunque las personas
saludables pueden consumir alimentos contaminados sin llegar a enfermar, en ellos el
riesgo de infeccin es mayor y pueden contraer Listeriaprobablemente despus de volver a
comer alimentos contaminados con incluso una pequea cantidad. Las personas en riesgo
pueden prevenir la infeccin con L. monocytogenes evitando ciertos alimentos de alto
riesgo y manipulando los alimentos apropiadamente.
-Zoontico: Por contacto con animales enfermos lo cual es poco frecuente, como son los
casos de veterinarios y ganaderos despus del parto de un animal infectado sin proteccin.
-Nosocomial (adquisicin hospitalaria): En obstetricia y ginecologa es muy poco
frecuente. (Alemn, Daz, & Fonseca, 2015)
3. Manifestaciones clnicas
L. monocytogenes es un patgeno oportunista y parsito intracelular, facultativo, est
ampliamente distribuida en el medio ambiente y afecta al hombre, mamfero y ave.
La forma clnica ms caractersticas de infecciones producidas por Listeria, son:

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Meningoencefalitis:

Se trata de la presencia ms frecuente de listeriosis en humanos adultos,


inmunocomprometidos y sobretodo en neonatos. Corresponde a una patologa supurativa
aguda, en la cual los linfocitos del LCR y los signos clnicos llegan a sugerir una meningitis
tuberculosa. La enfermedad, con frecuencia cursa como meningoencefalitis y rara vez
como encefalitis.
La meningoencefalitis se caracteriza por fiebre, cefalea y alteraciones de la conciencia;
la aparicin de los sntomas suele ser abrupta y la rigidez de nuca est ausente en casi la
mitad de los pacientes, particularmente cuando se trata de personas muy ancianas o
inmunocomprometidas. Con frecuencia se observan convulsiones y otros signos tales como
ataxia, hemiparesias y parlisis de los pares craneales, manifestaciones que reflejan una
tromboencefalitis; sta corresponde a la afectacin del tronco cerebral y suele coexistir con
la inflamacin menngea.

Septicemia

La Septicemia afecta a neonatos y adultos inmunodeprimidos, quienes evidencian


notables episodio de escalofros y fiebre.En adultos, la mayora de casos se relaciona con
personas inmunodeprimidas, en quienes a menudo cursa en forma fulminante, sin embargo,
los neonatos empiezan a manifestar despus de los 3 das de edad con un cuadro
inespecfico, por lo cual corre un riesgo de tratarla empricamente sin eficacia teraputica
alguna.

Presentaciones locales

Se han descrito multitud de presentaciones localizadas con infecciones circunscritas a un


determinado rgano como mastitis, endocarditis, enteritis, queratoconjuntivitis, miocarditis
e iritis. Las infecciones cutneas parecen relacionarse ms frecuentemente con
granulomatosis infantil. Las lesiones ulcerativas no se distinguen de los otros orgenes, por
lo cual es necesario el cultivo de las muestras para establecer el diagnstico.
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Granulomatosis Infantisptica.

En la granulomatosis infantisptica

el infante presenta abscesos diseminados y

granuloma en mltiples rganos internos incluyendo hgado, bazo, pulmones, rin y


cerebro; adems, el nio nace en estado de muerte aparente, con rinitis purulenta, erupcin
cutnea y hasta ndulos farngeos. Este tipo de infeccin se presenta durante los primeros
cuatro das de vida, suele asociarse a meningitis y su pronstico es malo, con tasa de
mortalidad cercana al 100%.
En los neonatos, es causa de sepsis en 2 modalidades clnicas:
-Primera modalidad:
Con un perodo de incubacin de 1-5 das, se origina en el tero y se traduce en abortos,
alumbramiento de productos muertos o partos prematuros asociados a neonatos que
padecen de granulomatosis infantisptica, grave afeccin ocasionada exclusivamente por L.
monocytogenes.
-Segunda modalidad
Se presenta despus de la primer semana de vida, casi siempre como una meningitis sin
caractersticas clnicas especficas; es decir; se adquiere a partir de la madre; durante o
despus del nacimiento (no intrauterino)

Infecciones durante el embarazo

Estas se adquieren ms frecuentemente en el tercer trimestre (coincidiendo con la mayor


declinacin de la inmunidad celular) y, en general, las pacientes presentan sntomas
transitorios, inespecficos, leves a moderados, que incluyen fiebre, cefalea, dorsalgia y
trastorno gastrointestinales tales como nuseas, vmitos, dolor abdominal y diarrea. En tal
sentido, es comn que la enfermedad no acuda a consultas mdicas.

Garca, Huete, Obando, Sequeira

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Cuando las infecciones tiene lugar al inicio del embarazo, el aborto ocurre durante el
quinto y sexto mes; sin embargo, tambin existen las posibilidad de que la gestacin llegue
a su trmino, a pesar de que son ms frecuentes los nacimientos prematuros.(Alemn, Daz,
& Fonseca, 2015)
4. Tipos de alimentos.
Los alimentos en los que la contaminacin por L. monocytogenesse encuentra presente,
puede suponer un riesgo para el consumidor muy diverso. Los productos alimenticios en los
que se pueden encontrar Listeria son los productos crnicos, productos de la pesca, lcteos,
frutas, verduras y la combinacin de cualquiera de estos componentes (p. ej. en forma de
platos preparados) (FAO/OMS, 2008).
Por otro lado, los alimentos considerados de alto riesgo para contraer listeriosis son los
listos para el consumo y los que no van a tener ningn proceso de coccin antes de su
consumo, o que aparentemente son aptos para el consumo sin coccin, y varan de unos
pases a otros en relacin con los hbitos alimentarios, la disponibilidad de la cadena de fro
y la temperatura mxima en el punto de venta (Drug U. F., 2008).
En la gua para el cumplimiento de polticas sobre la vigilancia de L. monocytogenes en
Estados Unidos, las agencias responsables son la Food and Drug Administration (FDA), el
Food Safety and Inspection Service (FSIS) del United States Department of Agriculture
(USDA) y los CDC, clasifican a los alimentos segn estudios de riesgo de listeriosis
realizados, en dos categoras (Yoon Y, 2009):
La primera categora corresponde a alimentos listos para el consumo que tienen un alto
riesgo de asociarse con listeriosis debido a que facilitan el crecimiento de L.
monocytogenes: leches, derivados lcteos con gran contenido de grasas, como quesos

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frescos, mantequillas, cremas, crustceos cocidos, productos de mar crudos y ahumados,


vegetales, frutas cidas y otros.
El FSIS agrupa en crnicos y aves, los alimentos como salchichas, ensaladas, pats,
perros calientes, salamis, peperonis, jamones cocidos, jamones curados, rollos de carne,
carnes en tajadas, carnes para untar, carnes cortadas en porciones, carnes molidas,
hamburguesas, presas de pollo, nuggets de pollo, tajadas de jamn de carne de pollo y de
pavo, pizzas, rollos de huevo, sndwiches, ensaladas y otros (Kagkli DM, 2009).
En la segunda categora, encontramos los alimentos listos para el consumo que tienen
poco riesgo de asociarse con listeriosis, debido a que no facilitan el crecimiento de L.
monocytogenes; entre ellos se encuentran los alimentos que tienen factores intrnsecos,
como pH de 4,4 o menos, actividad de agua de 0,92 o menor, humedad relativa menor de
39 %, y factores extrnsecos, como los ambientales relacionados con temperaturas de
conservacin; alimentos como helados o productos de congelacin; alimentos con proceso
de marinado, encurtidos o deshidratados; alimentos con conservantes como cido ctrico,
benzoatos; vegetales como la zanahoria; leches fermentadas como el yogur; quesos duros; y
ensaladas procesadas con cido srbico o benzoico con pH de 4,4 o menos (Division of
Foodborne, 2009).
5. Diagnstico de laboratorio
En la actualidad existen varios mtodos convencionales y rpidos, disponibles para la
deteccin e identificacin de Listeria monocytogenes en muestras de alimentos y en
muestras procedentes de Listeriosis animal.
Los mtodos convencionales para el aislamiento de Listeria a partir de alimentos que
han ganado aceptacin con propsitos reglamentarios internacional son el mtodo de la
administracin de droga y alimentos de los EEUU (FDA), el mtodo oficial de la
asociacin oficial de qumicos analistas (AOAC), los estndares ISO 11290, el mtodo de
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servicio de inspeccin y seguridad alimentaria (FSIS) del departamento de agricultura de


los EEUU (USDA) y los estndares franceses.
Los mtodos de la FDA y la AOAC pueden utilizarse para el anlisis de la leche y los
productos lcteos.
a) Metodo internacional estndar segn FDA-BAM
Medio de enriquecimiento
Principio de Buffer Listeria de enriquecimiento (BLEB)
Digerido enzimtico de casena, digerido enzimtico de harina de soja y extracto
levadura que proporciona nitrgeno, vitaminas y minerales en buffer de Listeriacaldo de
enriquecimiento base. La dextrosa es la fuente de carbohidratos. El cloruro disdico
mantiene el equilibrio osmtico del medio. Fosfato mono potsico, fosfato, dipotsico,
fosfato disodico, son los agentes de tampn. Pivurato de sodio se aade aspticamente
como un eliminador de oxgeno. El cido nalidixico, acriflavina y cicloheximida se agregan
agentes selectivos despus de una de cuatro horas de pre enriquecimiento inicial. cido
nalidixico inhibe el crecimiento de organismos Gram negativos. Acriflavina inhibe las
bacterias Gram positivas. La sicloheximida se utiliza para inhibir el crecimiento de hongos
saprofitos. El uso de estos agentes tiene por objetos facilitar la reanimacin la reproduccin
y crecimiento del microorganismoListeriamonocytogenes.

Procedimiento del enriquecimiento (BLEB)


Para muestras no compuestas
Pesar 25g de la muestra en una bolsa stomacher.
Agregar 225 ml del buffer Listeria enriquecimiento caldo (Oxoid).
Incubar a 30 grados centgrados por 4 horas.
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En la cuarta hora de incubacin se aaden los agentes selectivos de


inhibicin Oxoid (Acriflavina 1 mg/L; Cicloheximida 50 mg/L; Acido
nalidixico 40 mg/L).
La incubacin para el enriquecimiento selectivo se contina a 30 grados
centgrados durante un total de 48 horas.
Aislamiento
Despus de 48 horas de incubacin en el medio de enriquecimiento BLEB, resembrar en
los medios agar Listeria Chromogenic (Merck) y agar Listeria Oxford (Titn media).
Caractersticas de colonias en agar Oxford:
Colonias pequeas, negras y redondeadas de un halo negro.
Caractersticas de colonias en agar Listeria Chromogenic (Merck):
Colonias azul turquesa (positivas a PI-PLC), sin halo amarillo (negativo a la xilosa).
Se seleccionan las colonias ms caractersticas de cada placa de agar selectivo y
sembrarla en agar tripticasa soja (TSA), incubar por 24 horas a 34 grados centgrados.

Medios de cultivos diferenciales.


Despus del enriquecimiento, los cultivos se siembran en placas de agar con un medio
selectivo/diferencial para el aislamiento de las colonias presuntivas de Listeria
monocytogenes. En todos los mtodos, a excepcin del metodo de la norma ISO se utiliza
el metodo del agar Oxford una modificacin.

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b) Cultivo

Agar Oxford
El agar Oxford contiene cloruro de litio, cicloheximida, colistina, agriflavina, cefotetan y
fosfomicina como agente selectivo, y las colonias de Listeriaspp son pequeas, negras y
redonda de halo negro

Fundamento:
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial, contiene nutrientes necesarios para el
desarrollo de Listeria spp. Debido a que el producto de la hidrlisis de esculina en
presencia de iones frricos forma un compuesto fenlico de color negro. La selectividad
para Listeria spp, se obtiene por el agregado del suplemento selectivo para agar base
Oxford modificado, debido a que contiene antibiticos que inhibe total o parcialmente el
desarrollo de la flora acompaante presente en la muestra.

Agar Cromogenic Listeria


Es un medio cromognico selectivo, para la deteccin directa y enumeracin de Listeria
monocytogenes basado en el aislamiento selectivo, la deteccin cromognica de fosfolipasa
C especfica para fosfatidilnoxitol (PI-PLC) y el uso de Xilosa. Listeria monocytogenes se
desarrolla en colonias azules (positiva a la PI-PLC) sin halo amarillo, (negativo a la xilosa);
la Listeria ivanovii produce colonias verdes-azuladas (positiva la PI-PLC) con halo
amarillo (positivo a la xilosa). Otras colonias de Listeria spp son blancas (negativas a la
PI-PLC).
Las colonias tpicas de Listeria spp, una vez crecidas en el medio selectivo diferencial,
se seleccionan para la identificacin adicional de Listeria monocytogenes. (Alemn, Daz,
& Fonseca, 2015).

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c) Pruebas bioqumicas

Fermentacin de Ramnosa, Xilosa y Manitol


Fundamento:
Esta prueba sirve para determinar la capacidad de un microorganismo de fermentar los
carbohidratos (azcares), produciendo cido y gas visible. Se utiliza una base rica en
nutrientes, cuyo indicador de PH es el prpura de bromocresol. El carbohidrato requerido
se agrega, ya sean en forma de discos comerciales impregnados o adicionados al caldo, el
carbohidrato previamente esterilizado por filtracin. Es de gran utilidad para la
determinacin de Listeria monocytogenes ya que esta, fermenta Ramnosa pero no la Xilosa
ni el Manitol. (Alemn, Daz, & Fonseca, 2015)
Esta prueba consiste en determinar la capacidad que tiene L. monocytogenes de
hidrolizar la esculina a esculetina y la glucosa en presencia de sales biliares. La esculetina
generada reacciona con los iones de hierro que contiene el cloruro frrico en el medio y
genera una coloracin negra, siendo esta positiva.
L. monocytogenes presenta un metabolismo fermentativo al generar cido a partir de la
glucosa y por producir acetona, lo que conlleva a una reaccin de Voges-Proskauer positiva.
La fermentacin de estos azcares se evidencia por la tcnica de Voges-Proskauer, la cual
consiste en identificar si Listeriagenera cidos y diacetilo ya que el medio contiene
azcares fermentables. Para ver la reaccin se utilizan los reveladores alfa-naftol y KOH. Si
la suspensin se torna color rosa la prueba es positiva.

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d) La prueba Christie-Atkins-Munch-Peterson (CAMP)


La prueba de CAMP es una herramienta muy til que facilita la identificacin de la
especie Listeria spp a partir de los aislamientos. Consiste en sembrar en estra una cepa Bhemoltica de S. aureus. Formando unas nicas lneas rectas y paralelas, en una placa de
agar sangre. Las estras deben de tener la suficiente separacin para que las cepas de
Listeria de prueba y control se puedan sembrar perpendicularmente entre los dos
organismos indicadores, sin que los toquen (separacin de 1-2mm).
El resultado esperado ser que L. monocytogenes genere el factor CAMP el cual produce
un

sinergismo

con

la

beta-lisina

producida

por Staphylococcus

aureus sobre

los eritrocitos generando una lisis de estos.


6. Tratamiento
Al ser la listeriosis una enfermedad relativamente rara en humanos, no hay estudios
prospectivos y controlados que establezcan un mejor tratamiento en antibitico.
Actualmente se considera que las mejores opciones son la Penicilina o la Ampicilina, solas
o asociadas a Gentamicina. Se han descrito fallos teraputicos con estos antibiticos, pero
nunca se ha demostrado in vitroresistencia al compuesto -lactmico utilizado. El manejo
de estas infecciones es de gran importancia, el empleo de dosis altas y la duracin adecuada
del tratamiento deben individualizarse. En las enfermedades graves como la Cerebritis o la
granulomatosis infantisptica, el inicio precoz del tratamiento es fundamental para el
control de la infeccin. Estudios in vitro han demostrado sinergia de Ampicilina y
Penicilina con Aminoglucsidos. Esta asociacin debe utilizarse en casos de
granulomatosis infantisptica o de sepsis neonatal. En aquellos pacientes con
meningoencefalitis pueden asociarse Aminoglucsidos, administrados por va intratecal, al
tratamiento base de Penicilina o Ampicilina.

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La combinacin de Trimetoprim y Sulfametoxazol se ha utilizado con xito en pacientes


alrgicos a penicilinas, considerndose en la actualidad la terapia alternativa en esta
circunstancia.
La duracin apropiada del tratamiento tampoco est clara. Tras dos semanas de terapia
se han descrito recurrencias en pacientes inmunodeprimidos. Parece conveniente, por tanto,
prolongar la terapia entre tres y seis meses en estos casos. En general dos semanas parecen
ser suficientes en bacteriemias mientras que en meningitis se deberan utilizar ciclos ms
largos.(Oteo & Als)
a) Perfil de resistencia
El patrn de sensibilidad a los antibiticos de L. monocytogenes ha permanecido
relativamente estable con el paso de los aos.
Generalmente, este microorganismo es sensible a una amplia gama de antibiticos como
Penicilina,

Ampicilina,

Gentamicina,

Eritromicina,

Tetraciclinas,

Rifampicina,

Cotrimoxazol y Vancomicina. Presentan una pobre actividad las Fluoroquinolonas actuales


y una resistencia natural a las cefalosporinas. Casi todas las cepas son resistentes a
fosfomicina.
Se han descrito resistencias a Macrolido y a Tetraciclinas en algunos aislamientos;
suelen estar codificadas por plsmidos, aunque tambin hay casos de resistencia a
Tetraciclinas.La resistencia a las Tetraciclinas se observ por primera vez en 1988 y parece
ir en aumento debido, en parte, al uso de antibiticos en el ganado. Tambin se ha descrito
resistencia a Aminoglucsidos. Se han identificado algunos genes que codifican la
resistencia a Tetraciclinas y Aminoglucsidos en los plsmidos conjugados y en los
tramposones procedentes de Enterococcos.

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La Rifampicina tiene muy buena actividad in vitro, pero se seleccionan cepas resistentes
durante el tratamiento con mucha facilidad. Existe un caso de resistencia a trimetoprim en
una cepa de L. monocytogenes, por un mecanismo desconocido hasta ahora. Aunque se han
descrito fracasos clnicos en tratamientos con Penicilina o Ampicilina, no se ha encontrado
ninguna cepa resistente a estos antibiticos.
La mayor parte de los antibiticos se muestran bacteriostticos frente a L.
monocytogenes. En particular los B-lactmico tienen un gran intervalo entre la CMI y la
CMB. Slo se ha observado actividad bactericida en los Aminoglucsidos, Glucopptidos y
Cotrimoxazol (principalmente asociada al trimetoprim). El aumento de la resistencia a
antibiticos es un motivo de preocupacin y se debe seguir estrechamente. (Oteo & Als)

7. Prevencin

Debido a que Listeria es ubicua y a que la mayora de las infecciones son espordicas, la
prevencin y el control son difciles. Las personas con riesgo alto de infeccin deben evitar
comer alimentos crudos o parcialmente cocinados de origen animal, quesos no curados y
vegetales crudos sin lavar. No se dispone de vacuna y no se ha estudiado la profilaxis
antibitica en pacientes de alto riesgo. (Murray, Rosenthal, & Pfaer, 2007)
Para prevenir la contaminacin por L. monocytogenes, se deben seguir unas normas
sencillas.
Extremar las medidas de higiene.
Tener especial cuidado con el consumo de carnes poco hechas o crudas de cerdo,
vaca o aves de corral.
Lavar los vegetales crudos.

Separar bien los alimentos crudos y los cocinados para evitar la contaminacin
cruzada.
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Evitar el consumo de leche no pasteurizada.


Calentar o recalentar de manera adecuada los alimentos precocinados.
Mantener los alimentos crudos siempre en refrigeracin.
Tener en cuenta la fecha de caducidad de los alimentos.
Lavar y desinfectar las superficies de manipulacin de alimentos y utensilios

despus de haber manipulado alimentos crudos.


Lavar y desinfectar el frigorfico.
Lavarse las manos con agua y jabn antes y despus de manipular alimentos.

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VIII. Diseo Metodolgico

Tipo de estudio
El presente estudio es de tipo documental ya que se basa de estudios e investigaciones
realizadas en periodos pasados as como tambin de libros que contienen informacin sobre
el microorganismo en estudio.
Procesamiento de la informacin
Para la redaccin de la informacin se utilizarn los programas siguientes: Microsoft Office
Word 2013 y para la elaboracin de presentaciones en nuestra defensa se usar Microsoft
Office Power Point 2013.

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IX.

Conclusin

Listeria monocytogenes, es una bacteria Gram positiva que produce una de las
enfermedades de trasmisin alimentaria de mayor importancia, por el impacto social
y la gravedad de las manifestaciones clnicas.

Listeria monocytogenes, al ser un microorganismo saprofito de amplia distribucin,


es capaz de contaminar muchos alimentos, siendo sta, la va ms frecuente por la
cual las personas adquieren la infeccin.

El diagnostico de Listeria monocytogenes, esun reto para los laboratorios y analistas


clnicos del pas ya que, las tcnicas usadas no estn disponibles en la mayora de
los laboratorios de las diferentes unidades de salud y reas de investigacin,
ocasionando barreras en el estudio del microorganismo y por ende un subregistro de
los casos o brotes que se dan en pas.

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X.

Recomendaciones

-Realizar el Control de Calidad en todos los centros de comercio (Mercados,


Supermercados) a nivel nacional en el rea de alimentos para el control y diagnstico de L.
monocytogenes.
-Tomar muestreo desde la produccin hasta el comercio final de los alimentos
-Emplear nuevas tcnicas para la deteccin rpida y segura para el diagnstico de Listeria.
-Capacitar a agricultores,comerciantes y consumidores de alimentos sobre la importancia
del conocimiento de Listeria monocytogenes.
-Mantener las medidas de higienes necesarias mientras se transporta, almacena y procesan
y se consumen los alimentos para evitar la infeccin deL. monocytogenes.

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XI.

Bibliografa

Alemn, S., Daz, R., & Fonseca, J. (2015). Aislamiento y deteccion de Listeria
monocytogenes en queso fresco artesanal que se expende en el mercado Ivn
Montenegro de la ciudad de Managua Noviembre-Diciembre 2014. Managua.

Centurion, M., & Takajara, E. (2004). Determinacion de la incidencia de Listeria


monocytogenes en pollos frescos y verduras frescas obtenidos en mercados y
abastecimientos de Lima Metropolitana. Lima- Peru.

Diaz, A. (2004). Presencia de bacterias saprofitas y patogenas en la piel y


branquias de pescado fresco. Chile: Valdivia.

Daz, M., Chvez, M., & Sauceda, E. (2013). Listeria monocytogenes en leche y
queso fresco como vehculo transmisor de listeriosis humana en la Provincia de
Trujillo, Per. Provincia de Trujillo, Peru.

Division of Foodborne, B. a. (2009). Listeriosis. USA: Atlanta: CDC.

Drug, U. F. (2008). Listeria monocytogenes. Washington D.C: Draft guidance.

FAO/OMS. (2008). Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la


Alimentacin. Organizacin Mundial de la Salud. Roma.

Kagkli DM, I. V. (2009). Differential Listeria monocytogenes strain survival and


growth in katiti, a traditional Greek soft cheese, at different storage
temperaturas.U.S.A: ppl Environ Microbiol.

Muoz AI, D. G. (1998). Listeriosis. Santaf de Bogota: INVIMA-INS.

Murray, P., Rosenthal, K., & Pfaer, M. (2007). Microbiologia Medica. Madrid:
Elsevier Espaa.

Oteo, J., & Als, J. I. (s.f.). Listeria y listeriosis. Madrid.

Ray, B., & Bhunia, A. (2010). Fundamentos de la microbiologia de los alimentos.


Mexico: McGraw-Hill Interamericana.

Schobitz, R., Marin, M., Horzella, M., & Carrasco, E. (2001). Presencia de Listeria
monocytogenes en leche cruda y quesos frescos artesanales. Agro Sur.

Garca, Huete, Obando, Sequeira

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Von Breymann, J., Chaves, C., Arias, & Laura, M. (2013). Anlisis de la calidad
microbiolgica y potencial presencia de Listeria monocytogenes en pulpas de
guanbana, mango y maracuya costarricenses .San Jose, Costa Rica.

Yoon Y, K. P. (2009). Modeling the grow/no-growth boundaries of postprocessing


Listeria monocytogenes contamination on frankfurters and Bologna treated with
latica cid.U.S.A: ppl Environ Microbiol.

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XII.

Anexos

Morfologa

Ciclo de vida

Patogenia
mjhk

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Vas de transmisin

Alimentaria

Vertical
Manifestacin clnica

Septicemia
Meningoencefalitis

Diagnstico de laboratorio

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Zoontico

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Agar CromogenicListeria

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BOSQUEJO

Tema general
Tema delimitado

I.

Introduccin

II.

Antecedentes

III.

Justificacin

IV.

Objetivos

V.

Planteamiento del problema

VI.

Preguntas directrices

VII.

Marco terico
A.

Caractersticas Generales
1.

Morfologa

2.

Taxonoma.

3.

Ciclo biolgico

4.

Patogenia e inmunidad (factor de virulencia)

5.

Epidemiologia

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B.

Infeccin causada por Listeria monocytogenes en Alimentos


1.

Patologa

2.

Vas de transmisin

3.

Manifestaciones clnicas

4.

Tipo de Alimentos

5.

Mtodos de Diagnstico

6.

a)

Cultivo

b)

Pruebas bioqumicas

c)

Prueba Christie-Atkins-Munch-Peterson (CAMP)

Tratamiento
a)

7.

Perfil de resistencia bacteriano

Prevencin

VIII. Diseo metodolgico


IX.

Conclusiones

X.

Recomendaciones

XI.

Bibliografa

XII.

Anexos

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Diseo Metodolgico
Tipo de estudio
El estudio es de tipo descriptivo porque el propsito principal es obtener informacin
acerca del estado actual de los fenmenos.
Retrospectivo por que se revisaran acciones pasadas, con el objetivo de llegar a
conclusiones veraces y entender el porqu de algunas situaciones. Se trata de una
recopilacin de datos que nos permiten una solucin.
De corte transversal ya que esta investigacin se realizar en un periodo de tiempo
determinado del ao 2010 al ao 2015, estudiando lo que es de inters en el presente es
decir en el momento que se va a realizar la investigacin.

rea de Estudio
Centro Nacional de Diagnstico y Referencia (CNDR)

Universo
Casos sospechosos reportados entre los aos 2010-2015

Muestra
Todos los productos alimenticios analizados

Tipo de Muestra
Casos positivos, sospechosos y negativos de productos alimenticios analizados en el CNDR
recibidos de diferentes empresas: Carnes, productos lcteos, frutas, verduras, embutidos,
etc.

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Criterio de Inclusin
Alimentos analizados en el CNDR
Tipos de alimentos con sospecha de Listeria monocytogenes
Alimentos que cumplen requisitos de transporte del CNDR.

Criterios de Exclusin
Alimentos no analizados en el CNDR
Tipos de alimentos sin sospecha de Listeria monocytogenes.
Alimentos que no cumplen requisitos de transporte del CNDR

Recoleccin de la informacin
Encuestas
Expedientes del laboratorio

Procesamiento de la informacin
Para la redaccin de la informacin se utilizarn los programas siguientes: Microsoft Office
Word 2013, para la elaboracin de presentaciones en nuestra defensa se usar Microsoft
Office Power Point 2013 y para elaboracin de grficos y tablas se utilizar Microsoft
Excel.

Aspectos ticos de la investigacin


El diseo del estudio no implica riesgo alguno para el centro de estudio incluido en la
investigacin y la formacin se recopilar de los expedientes del laboratorio de alimentos.
Se garantiza la privacidad de la informacin ya que se utilizar nicamente con fines
acadmicos.

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE NICARAGUA-MANAGUA


UNAN-MANAGUA
INSTITUTO POLITECNICO DE LA SALUD- LUIS FELIPE MONCADA
DEPARTAMENTO DE BIONALISIS CLINICO Y MICROBIOLOGIA
LICENCIATURA EN MICROBIOLOGIA

TEMA: LISTERIA MONOCYTOGENES


ENTREVISTA
Nombre:_________________________ Fecha :______________________

1- Cules son los tipos de alimentos que se analizan en el CNDR?


2- Cmo clasifican los alimentos que analizan en busca de listeria monocytogenes?
3- En cul de los alimentos analizados en el CNDR encuentra Listeria
monocytogenes con mayor frecuencia?
4- Cul es el origen o procedencia de los alimentos analizados en el CNDR?
5- Cmo realizan la extraccin o recoleccin de las muestras para el aislamiento de
listeria monocytogenes?
6- Conque objetivo el CNDR realiza la deteccin de listeria monocytogenes en
alimentos?
7- Cules son los mtodos diagnsticos utilizados en el CNDR para el aislamiento e
identificacin de listeria monocytogenes?
8- Existe un registro o control epidemiolgico de los casos positivos de listeria
monocytogenes en alimentos?
9- Cul es la prevalencia de listeria monocytogenesen alimentos analizados en el
CNDR?
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE NICARAGUA-MANAGUA
UNAN-MANAGUA
Garca, Huete, Obando, Sequeira

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Diagnstico y Referencia en el periodo comprendido desde el ao 2010 hasta el ao 2015.

INSTITUTO POLITECNICO DE LA SALUD- LUIS FELIPE MONCADA


DEPARTAMENTO DE BIONALISIS CLINICO Y MICROBIOLOGIA
LICENCIATURA EN MICROBIOLOGIA
TEMA: LISTERIA MONOCYTOGENES
ENCUESTA
1)- Realizan el aislamiento e identificacin de listeria monocytogenes en alimento,
justifique.
a) Si_______

b) No________

2)- Con qu frecuencia realizan el aislamiento e identificacin de Listeria M


a) Diario _____ b) Semanal______ c) Mensual_____ Otros______
3)- En que grupos de alimentos aslan con mayor frecuencia listeria monocytogenes
a)

Lcteos____

d) Carnes______

b)

Frutas____

e) Embutidos ___

c)

Hortalizas______

f) otros ________

4)- Cual es el metodo diagnstico ms utilizado en el aislamiento e identificacin de


listeria monocytogenes en alimentos.
a) Tincin de gram ____b) PCR_____ c) Cultivos ______ d) Pruebas Bioqumicas ______
e) CAMP test _____ f) Todos____ g) Otros ____
5)- Para el control epidemiolgico y registro de casos, que tipo de herramientas utilizan
a) Sistema de redes_____ b) Base de datos _____ c) Actas ______ d) otros______

GLOSARIO

-hemlisis:Desarrollo de una zona clara alrededor del crecimiento de una colonia


bacteriana en agar sangre, caracterstico de ciertas bacterias patgenas

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-lactmico: na -lactama o anillo -lactmico, es una lactama de cuatro miembros. Se


nombra como tal, debido a que el tomo de nitrgeno est unido al carbono en relacin
con el carbonilo. Tambin llamado penam es una estructura lactmica con un anillo
heterocclico que consiste en tres tomos de carbono y un tomo de nitrgeno.
Actnicos: Accin qumica de las radiaciones electromagnticas, en especial las luminosas.
Trmino que se aplica en, general a cualquier forma de la energa radiante capaz de
provocar transformaciones qumicas (v. Fotoqumica), pero ms especialmente a la
Radiacin ultravioleta invisible y a las porciones azul y violeta del Espectro visible. La
exposicin a esta clase de rayos, procedentes del Sol o de las lmparas de
rayos ultravioleta, puede producir efectos perjudiciales o beneficiosos, segn los casos.
Vase Bao de sol; Eritema solar; Rayos Ultravioleta.
Anticuerpos: Tambin conocidos como inmunoglobulinas, (Ig), son glicoprotenas del tipo
gamma globulina. Pueden encontrarse de forma soluble en la sangre u otros fluidos
corporales de los vertebrados, disponiendo de una forma idntica que acta como receptor
de los linfocitos B y son empleados por el sistema inmunitario para identificar y neutralizar
elementos extraos tales como bacterias, virus o parsitos.
Cerebritis: Es una infeccin cerebral localizada, que evoluciona a lo largo de 10 o 12 das,
ocurriendo luego la formacin de un absceso (Cerebritis encapsulada), que
caractersticamente aparece brillante en difusin y con cada del ADC (coeficiente aparente
de difusin) por restriccin en el movimiento del agua intralesional.
Citosol: o matriz citoplasmtica es el lquido que se localiza dentro de las clulas.
Constituye la mayora del fluido intracelular (por sus siglas en ingls ICF). Est separado
por membranas en distintos compartimientos. Por ejemplo, la matriz mitocondrial separa la
mitocondria en varios apartados.
Cloruro frrico: Es un lquido de color mbar, ligeramente viscoso, que se produce
mediante
la
reaccin
del
fierro
con
cido
clorhdrico
y
cloro.
Usado por su alta eficiencia en remocin de orgnicos y de metales pesados; usado tambin
como agente de grabado en litografas, fotografa, placas de circuitos electrnicos,
catalizador, mordiente, agente oxidante, etc.

Complementos: Es uno de los componentes fundamentales de la conocida respuesta


inmunitaria defensiva ante un agente hostil (por ejemplo, microorganismos). Consta de un
conjunto de molculasplasmticas implicadas en distintas cascadas bioqumicas, cuyas
funciones son potenciar la respuesta inflamatoria, facilitar la fagocitosis y dirigir la lisis de
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clulas incluyendo la apoptosis.1 Constituyen un 15% de la fraccin de inmunoglobulina


del suero.
Cromognico: Un medio de cultivo cromognico es un medio microbiolgico adecuado
para la incubacin, diferenciacin o seleccin de muchos microorganismos usando un
sustrato cromognico que da como resultado un color. Este color ser caracterstico de cada
microorganismo siendo ms fcil y precisa la diferenciacin.
Diacetilo:(IUPAC nombre sistemtico: butanodiona o butano-2,3-diona) se trata de un
producto qumico natural procedente de la fermentacin. Se emplea como saborizante
qumico artificial en ciertos alimentos y est presente en los sabores artificiales
a mantequilla, se trata de un ingrediente comn en las margarinas, shortenings y
algunos aceites culinarios y en aerosol, se emplea frecuentemente en la la cocina comercial.
Enterocitos:son clulas columnares que forman la mayor parte del epitelio prismtico
simple de la mucosa del intestino. Son ms abundantes en el epitelio del intestino delgado
que en el del grueso, as como del apndice.
Esculetina: La esculetina, tambin conocido como esculetina, cicorigenina o con el nombre
qumico de 6,7-diidrossicumarina, es un derivado de cumarina . Qumicamente es
una lactona de origen natural derivado de la ciclacin intermolecular de un derivado de
cido cinmico .
Eucarionte: o eucarionte es un adjetivo que se utiliza en la biologa para referirse a las
clulas que presentan un ncleo diferenciado, protegido por una membrana y con
citoplasma organizado. Tambin se conoce como eucariota al organismo constituido por
este tipo de clula.
Fagocitos: son clulas presentes en la sangre y otrostejidos animales capaces de
captar microorganismos y restos celulares (en general, toda clase de partculas intiles o
nocivas para el organismo) e introducirlos en su interior con el fin de eliminarlos, en un
proceso conocido como fagocitosis. Su nombre procede del griego phagein(,
'comer'), y -cito, sufijo utilizado con el significado de 'clula', procedente del
trmino kutos (, 'cavidad, urna')

Fagocitosis : (del griego phagein, "comer" y kytos, 'clula'), es un tipo de endocitosis por el
cual
algunas clulas (fagocitos y protistas)
rodean
con
sumembranacitoplasmtica partculas slidas y las introducen al interior celular. Esto se
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produce gracias a la emisin de pseudpodos alrededor de la partcula


o microorganismo hasta englobarla completamente y formar alrededor de l unavescula,
llamada fagosoma, la cual fusionan posteriormente con lisosomas para degradar el antgeno
fagocitado.
Fagolisosmica: Adjetivo (no comparable) Perteneciente o relativo a un fagolisosoma
Fagolisosoma: cuerpo citoplsmico formado por la fusin de un fagosoma o partcula
ingerida con un lisosoma que contiene enzimas hidrolticas. Las enzimas digieren la mayor
parte del material incluido en el fagosoma.
Fagosoma: El fagosoma o vescula endoctica puede contener molculas o estructuras
demasiado grandes para cruzar la membrana por transporte activo o por difusin.
Filamentos:los filamentos intermedios; en biologa celular, componentes del citoesqueleto,
formados por agrupaciones de protenas fibrosas
Filpodo: Cualquiera de los varios crustceos branchiopod tener apndices natacin y
respiratorios que se asemejan a las hojas.
Fosfolipasa:Las fosfolipasa son una clase de enzimas que hidrolizan los enlaces ster
presentes en los fosfolpidos.
Granulomatosis:Formacin de diversos granulomas
Granuloma: es un tumor de naturaleza inflamatoria que puede aparecer en ciertas zonas
del organismo (piel, rganos o mucosas)
Hidrlisis:(del griego , hydr, agua, y , lsis, ruptura o disociacin) es
una reaccin qumica entre una molcula de agua y otra molcula, en la cual la molcula de
agua se divide y sus tomos pasan a formar parte de otra especie qumica. Esta reaccin es
importante por el gran nmero de contextos en los que el agua acta como disolvente.
In vitro:(latn: dentro del vidrio) se refiere a una tcnica para realizar un determinado
experimento en un tubo de ensayo, o generalmente en un ambiente controlado fuera de
unorganismo vivo. La fecundacin in vitro es un ejemplo ampliamente conocido.
Intracitoplsmico:Que se halla en el interior del citoplasma.

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Intratecal:Describe el espacio lleno de lquido entre las capas delgadas de tejidos que
cubren el cerebro y la mdula espinal. Se pueden inyectar medicamentos dentro del lquido
o se puede extraer una muestra del lquido para someterla a prueba.
Nosocomial: Que se contrae durante la estancia en un medio hospitalario.
Morfologa:Parte de la biologa que trata de la forma de los seres vivos y de su evolucin.
Polimorfonucleares: Tipo de clula inmunitaria que tiene grnulos (partculas pequeas)
con enzimas que se liberan durante las infecciones, las reacciones alrgicas y el asma. Los
neutrfilos, los eosinfilos y los basfilos son leucocitos polimorfonucleares. Un leucocito
polimorfonuclear es un tipo de glbulo blanco
Proliferar:Reproducirse [un organismo vivo, especialmente las clulas por divisin
celular].
Sinergismo: Interaccin de dos frmacos administrados conjuntamente que se traduce en
un efecto farmacolgico igual (sinergismo de adicin) o superior (sinergismo de
potenciacin) a la suma de sus efectos individuales.
Taxonoma:Ciencia que trata de los principios, mtodos y fines de la clasificacin,
generalmente cientfica; se aplica, en especial, dentro de la biologa para la ordenacin
jerarquizada y sistemtica de los grupos de animales y de vegetales.
Ubicuos: El trmino ubicuo (tambin existe la forma femenina ubicua) significa en todas
partes. Proviene de la forma latina ubique. Su uso en diferentes contextos matiza
ligeramente el significado de todas partes, a saber: ubicuo, omnipresente, en teologa, una
deidad que est presente a un mismo tiempo en todas partes.
Verde Bromocresol: Es un indicador orgnico para valoracin cido-base. Su intervalo de
transicin de pH es aproximadamente entre 3.85.4, virando de amarillo a azul-verdoso en
el rango especificado
Zoontico:Microorganismo cuyo reservorio es
uno
o
varios animales;
todo parsito, bacteria, virus u organismo que pueda provocar una zoonosis.
Zoonosis: Cualquier enfermedad que puede transmitirse de animales a seres humanos. La
palabra se deriva del griego zoo (animal) y nosis (enfermedad). Se trata de enfermedades
que afectan generalmente a los animales vertebrados, incluyendo al hombre.

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