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Documentos de Cultura
Bacteriologa
Unidad Temtica I
PLAN 2010
Segundo ao
2015-2016
FACULTAD DE MEDICINA
Director
Secretario General
Coordinadora de Enseanza
Coordinadora de Evaluacin
Coordinador de Investigacin
Colaboradora de la Coordinacin
Colaborador de la Coordinacin
Visin
La Facultad de Medicina ejercer el liderazgo intelectual y tecnolgico en las ciencias de la salud en
el mbito nacional e internacional, mediante la educacin innovadora y la investigacin creativa
aplicadas al bienestar del ser humano.
Tipo de asignatura
Coordinacin de Enseanza,
Departamento de Microbiologa y
Parasitologa
Terica Prctica (40-60%)
Ubicacin
2 ao
Duracin
Anual
Nmero de horas
Crditos
Carcter
Obligatorio
Clave
1231
Requisitos acadmicos
Bacteriologa
Inicio:
Trmino:
EXMENES ORDINARIOS
Lunes 3 de agosto
Viernes 9 de octubre
Primero:
Lunes 9 de mayo
De: 08:00 a 12:30 h
Sede: Unidad Tlatelolco
Lunes 16 de mayo
De: 12:00 a 16:30 h
Sede: Unidad Tlatelolco
Virologa
Inicio:
Trmino:
Lunes 12 de octubre
Viernes 20 de noviembre
Segundo:
Micologa
Inicio:
Trmino:
Lunes 23 de noviembre
Viernes 22 de enero
Parasitologa
Inicio:
Trmino:
EXAMEN EXTRAORDINARIO
Mircoles 8 de junio
De: 09:00 a 11:00 h
Sede: Unidad Tlatelolco
Lunes 25 de enero
Viernes 15 de abril
VACACIONES
Del 14 de diciembre de 2015 al 04 de enero de
2016.
EXMENES PARCIALES
Semana Santa del 21 al 25 de marzo de 2016
Primero: viernes16 de octubre
Bacteriologa
8:00 a 15:00 h
Sede: Unidad Tlatelolco
martes 2 de febrero
Micologa
8:00 a 15:00 h
Sede: Unidad Tlatelolco
Cuarto:
Mircoles 20 de abril
Parasitologa
8:00 a 15:00 h
6. Establecer
diagnsticos
etiolgicos
diferenciales
enfermedad infecciosa.
clnicos
y
en
una
4. Sealar
el
tratamiento
antimicrobiano
especfico
para
las
enfermedades
bacterianas ms frecuentes, el mecanismo de
accin de los mismos.
1. Microscopios
2. Proyectores
3. Epidiascopios
4. Transparencias
5. Preparaciones para la observacin al
microscopio
6. Audiovisuales
7. Pelculas
8. Micoteca.
9. Equipo y material de laboratorio
DEL ALUMNO
OBRAS DE CONSULTA
1. Preparacin del tema
2. Revisin bibliogrfica
3. Desarrollo de habilidades y destrezas
4. Participacin en las clases tericas y prcticas
PERFIL DEL DOCENTE
1. Tener una licenciatura en medicina o reas
afines
2. Demostrar aptitud para la docencia
3. Tener preparacin en el rea docente por
impartir
4. Enriquecer sus conocimientos en la materia
que imparta.
5. Contar con solvencia moral, tica y profesional
6. Realizar trabajo en equipo
7. Capacidad para conducir grupos de alumnos
MATERIAL DE APOYO A LA DOCENCIA
Fsicos
1. Laboratorio
2. Proyectores
CALENDARIO DE ACTIVIDADES:
CALENDARIO SUGERIDO PARA CUBRIR LAS ACTIVIDADES DE LA PRIMERA UNIDAD
TEMTICA (Bacteriologa)
EL CALENDARIO SE ENCUENTRA EN LA PAGINA WEB DEL DEPARTAMENTO COMO ARCHIVO
INDEPENDIENTE
PRESENTACIN
EL
PROPSITO
FUNDAMENTAL
DEL
Aunque
resulte
reiterativo,
es
importante
considerado
parte la bacteriologa.
inmune.
de
referencias
travs
los
de
la
diversos
respuesta
agentes
bacterianos
terminal,
de
ya
Internet
que
que
tanto
el
contienen
su
diagnstico
etiolgico
medidas
de
prevencin y tratamiento.
NDICE
Pg.
Directorio .. 2
Misin y Visin de la Facultad.. 3
Calendario escolar 2015-2016 .. 5
Objetivos de rea . 6
Actividades del proceso enseanzaaprendizaje . 7
GUIONES TERICOS
1. Introduccin a la Relacin hospederoparsito . 11
2. Introduccin a la Bacteriologa ....... 12
3. Bacterias causantes de Infecciones del
tracto respiratorio ...... 13
4. Bacterias causantes de Infecciones de
tejidos superficiales y profundos .. 17
5. Bacterias causantes de Infecciones del
tracto gastrointestinal .... 19
6. Bacterias causantes de Infecciones
Sistmicas . 22
7. Bacterias causantes de Infecciones
del tracto urinario ..... 25
8. Bacterias causantes de Infecciones
de transmisin sexual .. 27
9. Bacterias causantes de Infecciones
del sistema nervioso central ... 31
10. Agentes Bacterianos productores de
neurotoxinas .33
11. Respuesta inmune hacia las bacterias 35
GUIONES PRCTICOS
Introduccin a las prcticas de
Laboratorio de Microbiologa y
Parasitologa . 37
Prctica No. 1 Bioseguridad . 38
Prctica No. 2 Manejo y cuidado del
microscopio . 41
Prctica No. 3 Introduccin a la Bacteriologa.. 43
Prctica No. 4 Cultivo de flora bacteriana de
Piel 45
Prctica No. 5 Infecciones en vas respiratorias
.47
Prctica No. 6 Infecciones del tracto
gastrointestinal 49
Prctica No. 7 Infecciones de vas urinarias .... 52
Prctica No. 8 Infecciones de transmisin
sexual ...56
Anexo: Determinacin de sensibilidad a
antimicrobianos .... 67
10
de
las
enfermedades
11
2. INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
Las bacterias son clulas procariotas y
pequeas que solo se pueden observar con la
ayuda del microscopio, presentan diferentes
formas, carecen de ncleo y de organelos
celulares. Tienen estructuras nicas como la pared
celular que contiene peptidoglicano con o sin
lipopolisacridos. Tpicamente, el cromosoma
bacteriano es solo uno y es una molcula circular
de ADN de doble cadena que contiene
aproximadamente 5 millones de pares de bases.
Las bacterias tienen ribosomas 70S que son
diferentes a los de las clulas eucariotas pero que
realizan la misma funcin. Aunque las bacterias se
dividen por fisin binaria, han desarrollado
mecanismos
para
intercambiar
informacin
gentica, lo que les ha permitido adaptarse mejor al
medio ambiente. Las bacterias pueden sobrevivir
en medios hostiles como en los que la presin
osmtica es muy baja o en temperaturas extremas
y pueden usar diversas fuentes de energa para su
metabolismo. Es indudable que el conocimiento de
las bacterias, desde el punto de vista gentico,
metablico y estructural, constituye un elemento
fundamental para poder realizar una clasificacin
til en la prctica mdica, as como comprender la
participacin de la expresin de los factores de
patogenicidad en la relacin husped bacteria.
2.1 Antecedentes histricos de la Bacteriologa
2.2 Formas bacterianas
2.2.1 Cocos, bacilos y espirilos
12
3.1.4 Patognesis
3.1.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
3.1.4.2 Faringitis.
3.1.4.3 Enfermedades producidas por
toxinas
(Escarlatina
y
Sndrome de Choque txico
estreptoccico).
3.1.4.4 Otitis media, adenitis cervical
supurativa, angina de Ludwig,
sinusitis aguda.
3.1.4.5 Otras
enfermedades
asociadas a estreptococos
(infecciones
de
tejidos
blandos).
3.1.4.6 Complicaciones: secuelas
posestreptoccicas (fiebre
reumtica aguda y
glomerulonefritis aguda),
sndrome de choque
estreptocccico.
3.1.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones.
3.1.6 Diagnstico de laboratorio
3.1.6.1 Cultivo en agar sangre
3.1.6.2 Aglutinacin con anticuerpos
contra el antgeno del grupo A
3.1.6.3 Pruebas
serolgicas
(deteccin de anticuerpos
anti-estreptolisina
O,
anti
DNasas y anti hialuronidasa)
3.1.7 Diagnstico diferencial
3.1.7.1 Faringitis de origen viral y
bacteriano
3.1.7.2 Escarlatina
con
otras
enfermedades exantemticas
3.1.7.3 Fiebre reumtica aguda con
enfermedades autoinmunes
3.1.8 Estrategias de Tratamiento
3.1.8.1 Antimicrobiano
3.1.8.2 Tratamientos
de
fiebre
reumtica y glomerulonefritis.
3.1.9 Prevencin y Control
3.1.9.1 Identificacin de portadores y
erradicacin del estado de
portador
3.1.9.2 Quimioprofilaxis en personas
que han padecido fiebre
reumtica.
13
14
3.4.8 Tratamiento
3.4.8.1 Antimicrobianos
3.4.9 Prevencin y control
3.4.9.1 Vacuna
7-valente
para
lactantes y nios. Vacuna 23valente para personas con
riesgo
de
desarrollar
enfermedad neumoccica.
3.4.10 Otras enfermedades producidas por S.
pneumoniae
15
3.6.3 Epidemiologa
3.6.3.1 Morbilidad y mortalidad
3.6.3.2 Incidencia nacional y mundial
3.6.3.3 Infeccin emergente (husped
inmunocomprometidos)
3.6.3.4 Transmisin
3.6.4 Patognesis
3.6.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
3.6.4.2 Formas clnicas y
complicaciones
3.6.4.3 Primo infeccin
3.6.4.4 Tuberculosis primaria
3.6.4.5 Tuberculosis secundaria
3.6.4.6 Meningoencefalitis
tuberculosa
3.6.4.7 Tuberculosis diseminada
3.6.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la infeccin
3.6.6 Diagnstico diferencial
3.6.6.1 Otras micobacterias: M. bovis,
M.
avium.
Destacar
la
importancia
de
estas
micobacterias no tuberculosas
en
pacientes
inmunodeprimidos por SIDA o
drogas inmunosupresoras.
3.6.6.2 Cncer pulmonar
3.6.7 Diagnstico de laboratorio y de
gabinete
3.6.7.1 Baciloscopa
3.6.7.2 Cultivo
3.6.7.3 Mtodos moleculares
3.6.7.4 Valoracin del PPD
3.6.7.5 Radiografa de trax
3.6.7.6 Otras tcnicas de gabinete
3.6.8 Estrategia de tratamiento
3.6.8.1 Esquema
de
tratamiento
antifmico
(Norma
Oficial
Mexicana)
3.6.9 Control y prevencin
3.6.9.1 Vacuna BCG
3.6.9.2 Otras medidas de prevencin
16
Staphylococcus aureus
4.1.1 Caractersticas del microorganismo
4.1.2 Factores de virulencia
4.1.2.1 Protena A
4.1.2.2 Pptidoglicano
y
cido
teicoico
4.1.2.3 Cpsula
4.1.2.4 Protena
fijadora
de
fibronectina
4.1.2.5 Factor de agregacin
4.1.2.6 Toxinas: exfoliativa, toxina de
sndrome de choque txico,
enterotoxinas
4.1.2.7 Citotoxinas:
hemolisinas,
leucocidina
4.1.2.8 Enzimas: coagulasa, catalasa,
colagenasa,
hialuronidasa,
DNasas,
fibrinolisina,
penicilinasas, nucleasas
4.1.3 Epidemiologa
4.1.3.1 Importancia del estado de
portador
4.1.4 Patognesis
4.1.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
4.1.4.2 Factores predisponentes para
adquirir
la
infeccin
y
desarrollar la enfermedad:
Sndrome de piel escaldada,
foliculitis, fornculos, ntrax,
carbunco y acn.
4.1.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de estas infecciones
4.1.6 Diagnstico diferencial Streptococcus
pyogenes, Clostridium perfringens
17
4.4.3.5
a
y
4.5
18
19
5.2.3
5.2.4
5.2.5
5.2.6
5.2.7
5.2.2.3 Escherichia
coli
enteropatgena
- Plsmido EAF que codifica
para una adhesina Bfp (pili) al
parecer media la interaccin
bacteria-bacteria.
- Intimina codificada por el gen
eae que favorece la unin
ntima entre la bacteria y la
clula. Produce el fenmeno
llamado unin y esfacelacin
de las microvellosidades.
-isla de patogenicidad LEE.
5.2.2.4 Escherichia coli enteroinvasiva
- Caractersticas genticas que
le confieren el fenotipo de
invasin.
- Mecanismo de invasin las
clulas del coln.
- Distribucin lateralmente a
clulas adyacentes.
5.2.2.5 Escherichia coli
enterohemorrgica
Serotipo
representativo
importante
- Intimina
- Toxina Shiga-like (SLT)
Epidemiologa
5.2.3.1 Va de transmisin
5.2.3.2 Poblacin susceptible
5.2.3.3 Distribucin mundial
5.2.3.4 Grupos de edad afectados
Participacin de la respuesta inmune
en el control de estas infecciones
Patognesis
5.2.5.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
5.2.5.2 Diarrea del viajero y diarrea
infantil
5.2.5.3 Diarrea acuosa persistente
Complicaciones
5.2.5.1 Deshidratacin
5.2.5.2 Desnutricin
5.2.5.3 Muerte
Diagnstico de laboratorio
5.2.7.1 Aislamiento
del
microorganismo a partir de
heces en medios de cultivos
selectivos.
5.2.7.2 Pruebas
bioqumicas
y
serolgicas
20
5.4.2.4
5.4.3
5.4.4
5.4.5
5.4.6
5.4.7
Clostridium difficile
- Citotoxina
- Enterotoxina
Epidemiologa
5.4.3.1 Enfermedades frecuentes en
pases no industrializados
5.4.3.2 Vas de transmisin
5.4.3.3 Reservorios animales
Patognesis
5.4.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
5.4.4.2 Gastroenteritis
5.4.4.3 Disentera
5.4.4.4 Colitis ulcerosa
5.4.4.5 Complicaciones: Sndrome
urmico hemoltico (SUH),
colitis
psuedomembranosa,
Sndrome de Guillain-Barr,
artritis reactiva.
Participacin de la respuesta
inmune en el control de estas
infecciones.
Diagnstico de laboratorio
5.4.6.1 Coprocultivo
5.4.6.2 Pruebas bioqumicas
5.4.6.3 Pruebas serolgicas
Estrategia de Tratamiento
5.4.7.1 Antimicrobiano de eleccin
5.4.7.2 Prevencin y Control
OTRAS
BACTERIAS
PRODUCTORAS
DE
DIARREA POR INTOXICACIN ALIMENTICIA
5.5 Microorganismos Gram positivos
5.5.1 No productores de esporas
5.5.1.1 Staphylococcus aureus
5.5.2 Productores de esporas
5.5.2.1 Bacillus cereus
21
6.1.1.4
22
6.2 Brucella
6.2.1 Caractersticas generales
6.2.1.1 Morfologa
6.2.1.2 Antgenos A y M.
6.2.1.3 Diferentes
especies
de
Brucella y especificidad de
husped.
6.2.2 Factores de virulencia.
6.2.3 Epidemiologa de la brucelosis
6.2.3.1 Mecanismos de transmisin.
6.2.3.2 Reservorios animales
6.2.3.3 Distribucin mundial y estado
actual en Mxico.
6.2.4 Patognesis
6.2.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
6.2.4.2 Brucelosis: manifestaciones
clnicas agudas, subagudas y
crnicas.
6.2.4.3 Complicaciones: artritis,
osteomielitis,
meningitis,
cistitis,
nefritis,
orquiepididimitis, endocarditis
e hiperesplenismo.
6.2.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la infeccin
6.2.6 Diagnstico diferencial
6.2.6.1 Fiebre Tifoidea
6.2.6.2 Tifo
6.2.7 Diagnstico de laboratorio
6.2.7.1 Cultivo de sangre, medula
sea o tejidos infectados.
6.2.7.2 Serologa:
Prueba
de
aglutinacin con rosa de
Bengala,
Prueba
de
Huddleson, ELISA (deteccin
de anticuerpos IgM e IgG).
6.2.8 Estrategias de Tratamiento
6.2.9 Prevencin y control
6.3 Rickettsia prowasekii
6.3.1 Caractersticas del microorganismo
6.3.1.1 Estructura
6.3.1.2 Parsito intracelular
6.3.2 Factores de virulencia
6.3.3 Epidemiologa
6.3.3.1 Enfermedad re-emergente.
6.3.3.2 Distribucin geogrfica a nivel
mundial y en Mxico
6.3.3.3 Estacin del ao
6.3.3.4 Condiciones favorables para
su transmisin
6.3.3.5 Reservorio y vector
6.3.3.6 Poblacin susceptible
6.3.3.7 Vas de transmisin
6.3.3.8 Vas de entrada
6.3.4 Patognesis
6.3.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
6.3.4.2 Ciclo de vida
6.3.4.3 Tifo epidmico y Enfermedad
de Brill-Zinsser
6.3.4.4 Complicaciones
6.3.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la enfermedad.
6.3.6 Diagnstico diferencial
6.3.6.1 Brucelosis
6.3.6.2 Fiebre tifoidea
6.3.7 Diagnstico de laboratorio
6.3.7.1 Cultivo
6.3.7.2 Pruebas serolgicas
6.3.7.3 Pruebas moleculares
6.3.8 Estrategias de tratamiento
6.3.9 Prevencin y control
6.4 Leptospira interrogans
6.4.1 Caractersticas del microorganismo
6.4.1.1 Estructura
6.4.1.2 Antgenos
6.4.1.3 Serovares
de
Leptospira
interrogans.
6.4.2 Factores de virulencia
6.4.3 Epidemiologa
6.4.4 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la enfermedad.
6.4.5 Patognesis
6.4.5.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
6.4.5.2 Leptospirosis anictrica e
icterica.
6.4.6 Diagnstico diferencial.
6.4.6.1 Hepatitis, fiebre amarilla y
dengue
6.4.7 Diagnstico de laboratorio
6.4.7.1 Microscopa.
Tincin
con
Giemsa o Wright
6.4.7.2 Cultivo
6.4.7.3 Serologa.
6.4.7.4 Prueba de ELISA (deteccin
de antgeno) y Western blot
(prueba confirmatoria).
6.4.7.5 Microscopia de campo oscuro
6.4.8 Estrategias de Tratamiento
6.4.9 Prevencin y control
23
24
Diagnstico de laboratorio
7.6.1 Toma adecuada de muestra clnica:
Chorro medio, aspiracin suprapbica,
empleo de sonda, uso de bolsa
recolectora.
7.6.2
Urocultivo
7.6.3 Interpretacin del urocultivo: Criterios de
Kass.
25
26
8.1.3
8.1.4
8.1.5
8.1.6
8.1.7
8.1.8
8.1.9
Epidemiologa
8.1.3.1 Gonorrea como problema de salud
pblica.
8.1.3.2 El
hombre como hospedero
natural.
8.1.3.3 Factores de riesgo
Patognesis
8.1.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de signos y
sntomas.
8.1.4.2 Infecciones localizadas
En
la
mujer:
Endometritis,
salpingitis, cervicitis, vulvovaginitis,
enfermedad plvica
inflamatoria,
gonorrea ano-rectal.
En el hombre: uretritis, epididimitis
y gonorrea ano-rectal.
Conjuntivitis purulenta en el recin
nacido.
8.1.4.3 Infecciones sistmicas:
Meningitis, endocarditis, artritis
sptica, dermatitis
8.1.4.4 Otras enfermedades:
Infeccin
de
vas
urinarias,
faringoamigdalitis.
8.1.4.5 Complicaciones: Esterilidad y
embarazo
ectpico,
artritis,
perihepatitis, dermatitis en mujeres;
estrechamiento
uretral,
rectal, abscesos y fstulas perirectales en hombres.
Participacin de la respuesta inmune en el
control de las infecciones por gonococos.
Diagnstico de laboratorio
8.1.6.1 Tincin y microscopa
8.1.6.2 Cultivo e identificacin
bioqumica
8.1.6.3 Deteccin antignica
8.1.6.4 Pruebas moleculares
Diagnstico diferencial
8.1.7.1 Uretritis no gonoccica
Estrategias de Tratamiento
8.1.7.1 Antimicrobiano de eleccin
Prevencin y Control
8.1.9.1 Uso de condn en personas con
vida sexual activa, sexo seguro.
8.1.9.2 Terapia preventiva con
antimicrobianos.
27
8.3
8.3.4.2
8.3.5
8.3.6
8.3.7
8.3.8
8.3.9
Infeccin asintomtica y
serotipos asociados
8.3.4.3 Cervicitis, salpingitis, uretritis y
enfermedad
inflamatoria
plvica en mujeres.
8.3.4.4 Uretritis no gonoccica y
ocasionalmente, epididimitis
en hombres Linfogranuloma
venreo.
8.3.4.5 Otras enfermedades
asociadas
a
clamidias:
Tracoma,
conjuntivitis
de
inclusin y
neumona en neonato.
8.3.4.6 Complicaciones: esterilidad,
embarazo
ectpico
y
enfermedad
inflamatoria
plvica
en
mujeres;
estrechamiento uretral, rectal,
abscesos
y
fstulas
perirectales y Sndrome de
Reiter en hombres.
Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones
Diagnstico de laboratorio
8.3.6.1 Citologa
8.3.6.2 Cultivo en lneas celulares,
HeLa, McCoy, HEp-2 y otras
8.3.6.3 Deteccin antignica
8.3.6.4 Pruebas moleculares
8.3.6.5 Pruebas serolgicas
Diagnstico diferencial
8.3.7.1 Uretritis gonoccica
8.3.7.2 Uretritis no gonoccica
8.3.7.3 Ulceras genitales por T
pallidum,
H
ducreyi,
Calymmatobacterium
granulomatis
y
por
virus de herpes simple 1 y 2.
Estrategias de Tratamiento
Prevencin y Control
8.3.9.1 Terapia preventiva con
Antimicrobianos.
8.3.9.2 Control de personas infectadas
28
8.4.2.4
8.4.3
8.4.4
8.4.5
8.4.6
8.4.7
8.4.8
8.4.9
Estimulacin de la respuesta
inflamatoria
Epidemiologa
8.4.3.1 La sfilis como problema de
salud pblica
8.4.3.2 Frecuencia en la ltima
dcada
8.4.3.3 El hombre como nico
hospedero natural
8.4.3.4 Va de transmisin
8.4.3.5 Factores de riesgo
Patognesis
8.4.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
8.4.4.2 Cuadro clnico:
Sfilis primaria
Sfilis secundaria
Sfilis terciaria o tarda
Sfilis congnita.
8.4.4.3 Complicaciones: neurosfilis,
glomerulonefritis y sndrome
nefrtico.
Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones
Diagnstico de laboratorio
8.4.6.1 Microscopa de campo
oscuro
8.4.6.2 Pruebas serolgicas
inespecficas: VDRL
(Venereal Disease Research
Laboratory)
RPR (Prueba rpida de la
reagina en plasma).
8.4.6.3 Pruebas
serolgicas
especficas:
FAT-ABS
(Prueba
de
absorcin de anticuerpos
treponmicos fluorescentes)
MHA-TP:
(Prueba
de
microaglutinacin para T.
pallidum)
TPI:
(Prueba
de
inmovilizacin
de
T.
pallidum).
8.4.6.4 Pruebas moleculares
Diagnstico diferencial
8.4.7.1 Chancroide
8.4.7.2 Linfogranuloma venreo
8.4.7.3 Herpes simple 1 y 2
Estrategias de Tratamiento
Prevencin y Control
8.4.9.1 Control de personas con vida
sexual activa
8.4.9.2 Terapia preventiva con
antimicrobianos
29
8.6.3 Epidemiologa
8.6.3.1 Prevalencia y distribucin.
8.6.3.2 Poblacin en riesgo
8.6.3.3 Factores predisponentes para
adquirir la infeccin
8.6.4 Patognesis
8.6.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
8.6.4.2 Vaginosis bacteriana
8.6.4.3 Infeccin de vas urinarias
8.6.5 Participacin de la respuesta inmune en
el control de las infecciones
8.6.6 Diagnstico de laboratorio
8.6.6.1 Cultivo e identificacin bioqumica
8.6.6.2 Citologa; clulas clave
8.6.6.3 Criterios de Amsel
8.6.7 Diagnstico diferencial
8.6.7.1 Candidiasis
8.6.7.2 Tricomoniasis
8.6.7.3 Vaginitis atrfica
8.6.8 Estrategias de tratamiento
8.6.9 Prevencin y control
30
9.1.3 Epidemiologa
9.1.3.1 Incidencia
9.1.3.2 Morbilidad y mortalidad
9.1.3.3 Poblacin en riesgo
9.1.3.4 Portador asintomtico
9.1.3.5 Mecanismo de transmisin
9.1.4 Patognesis
9.1.4.1 Iniciacin del proceso
Infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
9.1.4.2 Meningoencefalitis
9.1.4.3 Otras infecciones asociadas al
microorganismo: sepsis y
epiglotitis.
9.1.4.4 Haemophilus influenzae no
capsulados; sinusitis, otitis
media y neumona.
9.1.4.5 Complicaciones: edema
cerebral, alteraciones en la
excitabilidad neuronal,
secuelas neurolgicas graves
como hidrocefalia, sordera y
retraso mental y prpura
trombocitopnica.
9.1.5 Participacin de la inmunidad en el
control de la infeccin
9.1.6 Diagnstico diferencial
9.1.6.1 Neisseria meningitidis
9.1.6.2 Streptococcus pneumoniae
9.1.7 Diagnstico de laboratorio
9.1.7.1 Frote y tincin de Gram
9.1.7.2 Cultivo de LCR
9.1.7.3 Anlisis citoqumico de LCR
9.1.7.4 Pruebas serolgicas
9.1.7.5 Pruebas moleculares
9.1.8 Estrategias de tratamiento
9.1.9 Prevencin y control
9.1.9.1 Vacuna
9.1.10 Otras enfermedades causadas por
H. influenzae.
9.1.10.1 Conjuntivitis, epiglotitis,
celulitis, otitis media,
sinusitis, neumona,
bronquitis y artritis.
31
9.2
Neisseria meningitidis
9.2.1 Caractersticas del microorganismo
9.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram y
Agrupacin
9.2.1.2 Caractersticas estructurales
9.2.1.3 Cultivo: factores de
crecimiento y condiciones de
incubacin
9.2.2. Factores de virulencia
9.2.2.1 Adhesinas fimbriales y no
fimbriales
9.2.2.2 Componente capsular
9.2.2.3 Endotoxina (LOS),
superantgenos
9.2.3 Epidemiologa
9.2.3.1 Incidencia
9.2.3.2 Morbilidad y mortalidad
9.2.3.3 Poblacin en riesgo
9.2.3.4 Portador asintomtico
9.2.3.5 Mecanismo de transmisin
9.2.4 Patognesis
9.2.4.1 Iniciacin del proceso
Infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
9.2.4.2 Meningitis. Mencionar las
diferencias sobresalientes que
orienten al diagnstico clnico
por este microorganismo.
9.2.4.3 Meningococcemia
9.2.4.4 Otras infecciones asociadas al
microorganismo:
artritis,
uretritis y neumona.
9.2.4.5 Complicaciones: edema
cerebral, alteraciones en la
excitabilidad neuronal,
secuelas neurolgicas graves:
hidrocefalia, sordera, retraso
mental y prpura
trobocitopnica
9.2.5 Participacin de la inmunidad en el
control de la infeccin
9.2.6 Diagnstico diferencial
9.2.6.1 Haemophilus influenzae
9.2.6.2 Streptococcus pneumoniae
9.2.7 Diagnstico de laboratorio
9.2.7.1 Frote y tincin de Gram
9.2.7.2 Cultivo de LCR
9.2.7.3 Anlisis citoqumico de LCR
9.2.7.4 Deteccin de antgenos
9.2.7.5 Pruebas moleculares
9.2.8
9.2.9
Estrategias de tratamiento
Prevencin y control
32
33
10.2
Clostridium botulinum
10.2.1 Caractersticas del microorganismo
10.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram
10.2.1.2 Esporas
10.2.1.3 Cultivo: factores de
crecimiento y condiciones
de incubacin.
10.2.2 Factores de virulencia
10.2.2.1 Neurotoxina (tipos A-G)
mecanismo de accin y
propiedades fenotpicas.
10.2.3 Epidemiologa
10.2.3.1 Poblacin en riesgo
10.2.3.2 Mecanismo de infeccin o
transmisin
10.2.3.3 Diseminacin
10.2.3.4 Morbilidad y mortalidad
10.2.4 Patognesis
10.2.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
10.2.4.2 Botulismo clsico
10.2.4.3 Botulismo del lactante
10.2.4.4 Botulismo de heridas
10.2.4.5 Botulismo por inhalacin
10.2.4.6 Complicaciones: parlisis
Respiratoria
10.2.5 Participacin de la inmunidad en el
control de la infeccin
10.2.6 Diagnstico clnico
10.2.6.1 Criterios clnicos que
permiten diagnosticar
botulismo.
10.2.6.2 Diagnstico diferencial:
Myasthenia gravis,
Sndrome de Guillain Barr
y poliomielitis.
10.2.7 Diagnstico de laboratorio
10.2.7.1 Cultivo de heces y
alimento contaminado
10.2.7.2 Deteccin de la toxina
en suero
10.2.7.3 Demostracin de
actividad de la toxina
(bioensayo en ratn)
10.2.8 Estrategias de tratamiento
10.2.7.1 Tratamiento de soporte
10.2.7.2 Lavado gstrico
10.2.7.3 Antimicrobianos
10.2.7.4 Antitoxina botulnica
trivalente
10.2.9
Prevencin y control
10.2.9.1 Vacunacin con toroide
Tetnico
10.2.9.2 Medidas preventivas.
10.2.10 Otras patologas causadas
por C. botulimun
10.2.10.1 Diarreas
34
11.1
11.2
11.3
11.4
35
GUIONES PRCTICOS
36
37
PRCTICA No. 1
BIOSEGURIDAD
Objetivos generales
Establecer las medidas de bioseguridad que se
emplean en los laboratorios de Microbiologa y
Parasitologa.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
3.
4.
38
6.
2.
3.
4.
5.
Desarrollo de la prctica
Sesin I
1.
El profesor definir el concepto de
bioseguridad.
2.
Los alumnos, en grupos pequeos, revisarn
las normas a seguir en el laboratorio.
3.
El profesor dirigir la discusin sobre:
a) Manipulacin de agujas y material de
vidrio.
b) Manejo de muestras y derrames
c) Manipulacin
de
material
infectocontagioso.
NOTA: Recuerde que las medidas de seguridad
estn dirigidas al manejo adecuado de
productos Corrosivo, Reactivos. Explosivos,
Txico, Inflamables, Biolgicos-infecciosos
(CRETIB) y Radioactivos con el fin de
evitar riesgos.
39
40
PRCTICA No. 2
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO
Objetivos generales
Mencionar
las
partes
fundamentales
microscopio y sus funciones.
del
41
Resumen de la prctica
El profesor, junto con los alumnos, elaborar las
conclusiones del tema.
Desarrollo de la prctica
Material
1. Microscopios compuestos.
2. Preparaciones fijas de bacterias, protozoos,
hongos y artrpodos de importancia
mdica.
3. Tubo con cultivo de paja
4. Portaobjetos
5. Cubreobjetos
6. Aceite de inmersin
7. Papel seda
8. Disco
9. Pipetas Pasteur, bulbo
Mtodo
1. El profesor explicar la diferencia entre una
preparacin en fresco y una fija.
2. Observar preparaciones en fresco con los
objetivos de 10X y 40X
3. Observar preparaciones fijas con los
objetivos de 10X, 40X y 100X
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Cul es la utilidad del microscopio en el
estudio de la Microbiologa y Parasitologa?
2. Cul es el poder de resolucin del
microscopio ptico al emplear el objetivo de
inmersin?
3. Mencione tres tipos de microscopios y su
utilidad.
Preguntas
orientadas
para
evaluar
el
conocimiento adquirido
1. Qu objetivo se utiliza para observar una
preparacin en fresco?
2. Mencione tres medidas para mantener
limpio el microscopio compuesto.
3. Con qu se deben limpiar los objetivos de
inmersin despus de la observacin?
4. Qu cuidados se deben tener con el
microscopio al terminar la observacin?
42
PRCTICA No. 3
INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia en el estudio de la
Bacteriologa clnica.
Revisar los recursos con que cuenta el laboratorio de
bacteriologa para la realizacin de tinciones y
cultivos
bacteriolgicos,
empleados
en
la
identificacin de una bacteria.
Explicar la importancia que tiene el laboratorio de
bacteriologa clnica, en la determinacin del
diagnstico etiolgico correcto para establecer la
terapia antimicrobiana especfica.
Antecedentes
El cuerpo humano se encuentra formado por 1014
clulas. De las que solo, aproximadamente, el 10%
son humanas. El resto son microorganismos
asociados. Desde el momento de su nacimiento, el
individuo
establece
una
relacin
con
microorganismos del ambiente que formarn la
microbiota. Dependiendo del sitio del cuerpo ser el
tipo de microorganismo que lo colonice. La microbiota
es benfica para el humano, salvo en el momento en
que se presente algn factor de oportunismo que
favorezca
el
crecimiento
inusual
de
los
microorganismos y produzca dao. Por lo tanto, en la
mayora de los casos, esta interaccin es benfica.
El conocimiento de la microbiota permite diferenciar
los microorganismos patgenos de los no patgenos.
Por otro lado, debido a que se han incrementado los
factores de oportunismo que favorecen las patologas
por estos microorganismos, las infecciones que
producen representan, en la actualidad, un problema
de diagnstico.
En el estudio bacteriolgico de un caso clnico, se
sigue la secuencia siguiente:
A).
B).
43
D).
Identificacin bacteriolgica.
Procedimiento que se efectuar con base en la
fisiologa bacteriana para reconocer los
productos
del
metabolismo
de
sta;
produccin de cido y gas a partir del empleo
de carbohidratos; glucosa, lactosa o sacarosa.
Presencia de productos liberados por la
presencia de enzimas que desdoblan
aminocidos (triptfano, cistina, metionina,
ornitina, arginina y lisina) como sera la
produccin de indol, H2S, etc. de protenas
(gelatina, caseina). As como hemolisinas que
lisan glbulos rojos (produciendo hemlisis y
) o ausencia de hemlisis ().
Tcnicas de Tincin
La falta de contraste entre la bacteria y el
medio que la rodea hace necesario de la
coloracin de stas, con el fin de aumentar el
contraste y poder observarlas con el
microscopio ptico, lo que permite distinguir
los diferentes tipos celulares.
La mayora de los colorantes son compuestos
orgnicos, cargados positivamente (cationes),
como azul de metileno, cristal violeta y
safranina, que se combinan con constituyentes
celulares cargados negativamente (aniones).
Las tinciones pueden ser simples cuando se
emplea un solo colorante y compuestas
cuando
se
utilizan varios
colorantes
combinados, ejemplo de stas son la tincin
de Gram y la de Ziehl-Neelsen.
Desarrollo de la prctica
Sesin 1
1.
Resumen de la prctica:
2.
3.
Material:
1. Tubo problema
2. Medio de transporte demostrativo.
3. Placas de Eosina azul de metileno (EMB) y
tubos con caldo nutritivo
44
PRCTICA No. 4
CULTIVO DE FLORA BACTERIANA DE PIEL
Objetivos generales
Mencionar la microbiota normal de la piel y
mucosas.
Identificar los principales agentes causantes de
infecciones oportunistas.
Revisar los recursos de laboratorio para el
diagnstico de las infecciones por microorganismos
oportunistas.
Antecedentes
Vivimos inmersos en un mundo de bacterias, las
que se encuentran por todos lados y nosotros no
somos la excepcin.
Desde las pocas horas despus del nacimiento
somos colonizados por bacterias que vivirn con
nosotros durante toda la vida, las cuales colonizan
la piel, tracto digestivo, vas respiratorias altas,
odos y algunos otros tejidos constituyndose en la
llamada flora normal o habitual. Su permanencia en
estos sitios, hacen que el husped se vea
beneficiado por los nutrientes que algunas de ellas
fabrican, por la inhibicin del desarrollo de
microorganismos patgenos, porque estimulan el
desarrollo del sistema inmune y por otras funciones
benficas que realizan. Sin embargo, sabemos que
algunas de estas bacterias pueden representar un
riesgo para nuestra salud, principalmente en las
siguientes situaciones; al multiplicarse de forma
anormalmente alta, al encontrarse en un sitio
diferente al que les corresponde y cuando existen
bacterias en un sitio normalmente estril.
Como es de suponer, el cuerpo es un delicado
ecosistema en donde viven simbiticamente un
gran nmero de bacterias y el husped humano
mantienen una relacin en donde estas bacterias
representan un riesgo potencial cuando el equilibrio
se rompe. El nmero y el tipo de bacteria pueden
ser modificados por diferentes factores como son
la temperatura, la humedad, el pH y la presencia de
determinados
nutrientes
o
de
sustancias
inhibitorias. Algunos ejemplos de cuando se rompe
este equilibrio pueden ser la presencia de diversos
tipos de infecciones; caries, acn, etc.
Material
1. Hisopo estril
2. Placa de agar nutritivo
3. Tubo con agua destilada o solucin salina
isotnica (SSI)
4. Asa para siembra
5. Mechero
6. Equipo para tincin de Gram
7. Portaobjetos
8. Aceite de inmersin
9. Microscopio
10. Papel seda
Mtodo
Sesin I
Manos sin lavar
1. Humedecer el hisopo estril con el agua o
SSI estril.
2. Con el hisopo humedecido, tomar la
muestra bacteriolgica de los pliegues
interdigitales, dorso y palmas.
3. Sembrar con el hisopo en un extremo de la
placa con agar nutritivo
4. Realizar el sembrado para obtener colonias
aisladas.
5. Rotular la caja de Petri
6. Incubar a 35-36 C, durante 24-48 horas.
Manos lavadas
1. Realizar el aseo de manos con agua y
jabn de manera tradicional
2. Frotar las manos enjabonadas durante 30
segundos
3. Humedecer el hisopo estril con el agua o
SSI estril.
4. Con el hisopo humedecido, tomar la
muestra bacteriolgica de los pliegues
interdigitales, dorso y palmas.
5. Sembrar en la placa con agar nutritivo para
aislamiento de colonias.
6. Rotular la caja de petri
7. Incubar a 35-37 C, durante 48 horas.
Desarrollo de la prctica
Sesin I:
El profesor de laboratorio conjuntamente con los
alumnos revisar el tema.
45
Sesin II
1. Cuantificar el nmero de Unidades
Formadoras de colonias.
2. Dibujar en los crculos los resultados
3. Realizar tincin de Gram.
4. Observar al microscopio
5. Realizar el reporte de la prctica
2.
Interpretacin de Resultados
3.
Sin lavar
46
PRACTICA No.5
INFECCIONES DE VAS RESPIRATORIAS
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de las infecciones bacterianas de vas respiratorias.
Identificar los principales agentes etiolgicos que
producen infecciones de vas respiratorias.
Revisar los recursos de laboratorio para el
diagnstico de las infecciones bacterianas de vas
respiratorias.
Antecedentes
Entre los microorganismos involucrados en
procesos infecciosos de vas respiratorias, se
encuentra; Streptococcus pyogenes tambin
llamado Estreptococo beta hemoltico del grupo A
de Lancefield. As como estreptococos del grupo C,
D, Streptococcus pneumoniae, Arcanobacterium
haemolyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria
gonorrhoeae,
Corynebacterium
diphtheriae,
Haemophilus influenzae tipo b, Bordetella pertussis,
Borrelia
vincenti,
Fusobacterium
sp
y
Mycobacterium
tuberculosis.
Es
importante
mencionar
que
en
caso
de
pacientes
inmunocomprometidos pueden participar Klebsiella
pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa.
Entre los virus tenemos una alta participacin de
Adenovirus, Epstein-Barr, Coxsackie A, Herpes
simple 1 y 2, Virus de la Influenza A y B,
Parainfluenza, Coronavirus y Citomegalovirus.
Las muestras que se emplean en infecciones de
vas respiratorias incluyen, exudado farngeo,
exudado nasal, exudado nasofarngeo, lavado
nasal, aspirado sinusal y esputo entre otras.
En el caso del exudado farngeo, su indicacin se
encuentra dada con el fin de realizar la deteccin
del microorganismo involucrado en el proceso
infeccioso de la regin. Sin embargo, debemos
considerar que siendo una regin altamente
colonizada por microorganismos que forman parte
de la flora habitual, la realizacin de la toma de
muestras debe ser la adecuada para la
recuperacin y cultivo de los microorganismos
involucrados en el proceso infeccioso.
Desarrollo de la prctica
Sesin I:
El profesor de laboratorio conjuntamente con los
alumnos revisar un caso clnico de infeccin de
vas respiratorias e identificarn:
a) Datos relevantes del caso.
b) Posibles diagnsticos clnicos.
c) Productos biolgicos empleados para el
diagnstico de laboratorio.
Material
1. Placa de gelosa sangre
2. Placa de gelosa sal manitol
3. Placa Biggy
4. Hisopos estriles
5. Abatelenguas estriles
6. Asas bacteriolgicas
7. Mecheros
8. Equipo de Tincin de Gram
9. Papel seda
10. Caso clnico
Mtodo
1. Para realizar el aislamiento de las bacterias del
exudado farngeo, se marcan las zonas de
inoculacin en cada medio de cultivo.
2. Toma de muestra: se le pide al paciente que abra
bien la boca, se hace descender suavemente la
lengua con el abatelenguas y se introduce un
hisopo estril hacia la faringe posterior. Pasar
suave y rpidamente el hisopo con movimientos
hacia arriba y abajo por detrs de la vula y entre
los pilares tonsilares.
3. Rotar el hisopo en la zona nmero uno de la
placa de gelosa sangre y agar sal manitol.
Adems frotarlo en la superficie del medio de
Biggy y finalmente hacer un frote en una
laminilla.
4. Continuar con la distribucin de la muestra
empleando el asa bacteriolgica previamente
esterilizada con el fin de lograr el aislamiento
deseado.
5. Incubar los cultivos a 37 C. durante 24 a 48
horas
6. Fijar y teir el frote con el mtodo de Gram
7. Observar al microscopio
Sesin II:
(Identificacin macroscpica y microscpica)
1. Cultivos demostrativos
2. Cultivos de la prctica anterior
3. Equipo de tincin de Gram
4. Laminillas
5. Cubreobjetos
6. Asas bacteriolgicas
7. Mecheros
8. Microscopio
9. Aceite de inmersin
10. Papel para la limpieza del microscopio
47
Determinacin de hemlisis
Prueba de CAMP
Bacitracina
Optoquina
Realizar determinacin serolgica en caso
de probable Streptococcus pyogenes
48
PRCTICA No.6
INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de
infecciones
bacterianas
del
tracto
gastrointestinal.
4.
5.
6.
7.
49
Desarrollo de la prctica
Sesin I
1.
El profesor de laboratorio conjuntamente con
los alumnos revisarn un caso clnico de
gastroenteritis bacteriana e identificarn:
a) Datos relevantes del caso.
b) Posibles diagnsticos clnicos.
c) Productos biolgicos a utilizar para el
diagnstico de laboratorio.
d) Exmenes de laboratorio tiles para
confirmar el diagnstico clnico.
2.
Realizarn un coprocultivo.
Material
1.
Placas Eosina Azul de Metileno (EMB),
Salmonella-Shigella (SS).
2.
Tubos de citrato de Simmons, Agar hierro
triple azcar (TSI), Agar hierro lisina (LIA),
Agar Movilidad Indol Ornitina (MIO)
3.
Asas bacteriolgicas
4.
Problema
Mtodo
1.
Obtener una muestra de materia fecal en un
frasco estril y de aqu tomar una pequea
porcin con un hisopo estril, de preferencia
de los sitios con moco y sangre.
2.
Con el hisopo, inocular las siguientes medios:
EMB y SS, seguir el procedimiento por estras
en placa para el aislamiento de colonias
3.
Incubar a 37 C durante 24 horas
4.
Sembrar en los tubos de citrato, TSI, LIA y
MIO, la bacteria problema, como lo indique el
profesor, incubar a 37 C durante 24 horas.
5.
Identificar al o los microorganismos con las
pruebas bioqumicas.
Sesin II
Material
1.
Cultivos demostrativos y de la prctica
anterior.
2.
Pruebas bioqumicas demostrativas y de la
prctica anterior.
3.
Reactivo de Kovac
4.
Equipo para Gram
5.
Portaobjetos
6.
Papel seda
2.
3.
Interpretacin de bioqumicas
Agar citrato de Simmons: Prueba empleada para
diferenciar aquellas bacterias que usan el citrato
como nica fuente de carbono y energa.
Tiene como indicador, al colorante azul de
bromotimol, que se alcaliniza al emplear las sales
de amonio, que hace que el medio vire a un color
azul, cuando es positivo.
TSI (Agar triple azcar-hierro).Prueba que
permite observar la fermentacin de glucosa,
lactosa y sacarosa as como la produccin de gas y
cido sulfhdrico.
La fermentacin acidifica el medio, haciendo que el
indicador (rojo de fenol) vire a amarillo. En tanto
que el tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de
hidrgeno que reacciona con sales de hierro,
proporcionando sulfuro de hierro de color negro.
LIA (Agar hierro lisina). Prueba basada en la
descarboxilacin y desaminacin de lisina, as
como en la produccin de cido sulfhdrico.
Descarboxilacin de la lisina positiva; Pico
violeta/fondo violeta. Prueba negativa: Pico violeta/
fondo amarillo.
Desaminacin de la lisina; Pico rojizo/fondo
amarillo, se presenta en Proteus, Providencia y
Morganella sp
Produccin de cido sulfhdrico: Ennegrecimiento
del medio (especialmente en el lmite entre el pico y
el fondo.
Metodologa
Los alumnos:
1.
Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn colonias
lactosa positivas de las negativas.
50
51
PRCTICA No. 7
INFECCIONES DE VAS URINARIAS
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de infecciones bacterianas de vas urinarias.
Identificar las bacterias causantes de infecciones de
vas urinarias.
Revisar los recursos para el diagnstico de
infecciones de vas urinarias.
Antecedentes
Las infecciones urinarias son de las ms
importantes en el ser humano, afectan ms a las
mujeres, se adquieren con mayor frecuencia por va
ascendente exgena que por endgena. Se
asocian a la falta de higiene, malformaciones,
uropata obstructiva, alteraciones neurognicas de
vejiga, cateterismo uretral, diabetes mellitus,
embarazo,
hipertensin
arterial,
neoplasias,
alteraciones de los mecanismos de defensa
especficos e inespecficos. Uno de los riesgos ms
serios de las infecciones urinarias radica en que,
cualquiera de las zonas afectadas del tracto,
constituye un importante foco a partir del cual los
microorganismos responsables pueden diseminarse
hasta el rin e inclusive migrar de ste hacia la
sangre, comprometiendo en ambos casos, la vida
del enfermo.
En la mujer, la uretrocistitis es la entidad clnica
ms frecuente y generalmente cursa en forma
aguda. En el hombre, tambin se presenta
prostatitis. Estas infecciones son de difcil curacin
y causan frecuentes recadas. La pielonefritis
representa en ambos sexos la entidad de mayor
gravedad y se debe en un 10 % de los casos a ms
de una especie bacteriana, sobre todo cuando se
trata de pacientes sometidos a cateterismo
permanente o quienes presentan lesiones
obstructivas en el tracto urinario.
Los principales agentes etiolgicos de infecciones
del tracto urinario estn limitados a unos cuantos
microorganismos
de
crecimiento
rpido.
Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Klebsiella
pneumoniae,
Enterobacter sp, Proteus sp,
Pseudomonas
sp.,
estafilococos
coagulasa
negativa, S. saprophyticus, y ocasionalmente
Candida albicans, as como otros microorganismos
oportunistas, tanto en pacientes hospitalizados
como externos.
Las muestras de orina son remitidas para urocultivo
a partir de pacientes sintomticos con infecciones
52
Interpretacin:
1. Reportar el nmero de microorganismos: la
presencia de uno o ms microorganismos por
campo se correlaciona con una cuenta 105
UFC/ml.
2. La presencia de muchas clulas epiteliales
escamosas y diferentes morfotipos microbianos
indica contaminacin y requiere repetir la
muestra.
Mtodos de cultivo
1. Mtodo de estriado en superficie con asa
calibrada.
Las asas calibradas presentan caractersticas
especficas que las habilitan para recoger, si
solo se introduce a la muestra la parte circular,
un volumen conocido de orina. La siembra se
realiza descargando su contenido en toda la
superficie del medio seleccionado.
Cabe sealar que la eleccin de los medios es
importante. No debe faltar una gelosa sangre u
otro medio en el que pueda desarrollar el
agente etiolgico, aunque este sea exigente en
cuanto a sus requerimientos nutricionales, y
algunos otros medios con caractersticas
diferenciales y/o selectivas, que permitan el
desarrollo de los patgenos, inhibiendo a los
contaminantes.
Las placas sembradas se incuban a 35 C en
aerobiosis, durante 24 a 48 horas. Transcurrido
el tiempo, se analizan las caractersticas
macroscpicas obtenidas, poniendo especial
cuidado en detectar si estn presentes uno o
ms microorganismos diferentes y en realizar el
recuento correspondiente.
Como las asas comerciales ms utilizadas son
las que recogen un volumen de 0.001 ml de
orina, el nmero de colonias de cada caja
deber multiplicarse por 1000 para conocer la
cantidad de microorganismos o de UFC que la
muestra contiene por mililitro.
Adicionalmente, deben someterse a pruebas de
identificacin, tomando en cuenta que las
infecciones urinarias son causadas, en el 85 a
90 % de los casos, por una sola especie
bacteriana.
53
INTERPRETACIN
Infeccin activa
Dudosa*
Contaminacin de la
muestra
*Debe analizarse otra muestra del paciente.
Considerar
Los falsos negativos pueden obtenerse cuando
a) El paciente se encuentra bajo tratamiento
antimicrobiano poco antes o durante la
recoleccin de la muestra:
b) El microorganismo causante del cuadro es
incapaz de desarrollarse en los medios
utilizados o bajo las condiciones de incubacin
que se seleccionaron
c) La muestra analizada no fue la primera de la
maana
d) El depsito en el que se recoge el espcimen
contiene restos de detergente o desinfectante
e) El enfermo se encontraba recibiendo lquidos
intravenosos
f) La calidad y/o la preparacin de los medios no
es la adecuada
g) El asa calibrada recoge volmenes menores a
los esperados
h) La muestra no se homogeniz antes
de introducir el asa
i) La alcuota descargada en la superficie del
medio no se distribuy adecuadamente.
Los falsos positivos pueden ocurrir cuando
a) El paciente no efecta la limpieza previa en
forma adecuada
b) El espcimen se siembra despus de haber
permanecido dos horas o ms a temperatura
ambiente
c) El depsito en el que se recoge la muestra se
encuentra contaminado
d) El asa calibrada recoge mayores cantidades
que las esperadas
54
Sesin II
Material
1. Cultivos demostrativos y de la prctica anterior
2. Equipo para tincin de Gram
3. Portaobjetos
4. Papel seda
5. Asas bacteriolgicas
6. Reactivo de Kovac
Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn las
colonias.
2. Contarn el nmero de colonias que se
desarrollaron en las cajas
3. De acuerdo con el criterio de Kass y Stanford,
si el nmero de bacterias es 100 000 UFC/ml,
se proceder a identificar l o los
microorganismos por los mtodos usuales.
4. Realizarn tincin de Gram a partir de colonias
previamente identificadas y anotarn sus
caractersticas.
55
PRCTICA No.8
INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL
Objetivos generales:
Establecer un marco de referencia para el estudio
de las infecciones de transmisin sexual.
Identificar los principales agentes de infecciones de
transmisin sexual.
Revisar los recursos para el diagnstico de las
infecciones de transmisin sexual de etiologa
bacterianas.
Antecedentes.
Las enfermedades de transmisin sexual (ETS) son
un
conjunto
de
afecciones
clnicas
infectocontagiosas, transmitidas de persona a
persona durante el acto sexual. Sin embargo, su
transmisin tambin puede realizarse a travs del
empleo de jeringas contaminadas, por transfusin
sangunea o durante el embarazo o parto. Las ETS
son causadas principalmente por bacterias y virus,
aunque tambin pueden ser ocasionadas por
hongos y protozoarios.
En la etiologa bacteriana, se cuenta con; Neisseria
gonorrhoeae, Mycoplasma homimis, Ureaplasma
urealyticum, Chlamydia trachomatis, Treponema
pallidum,
Haemophilus
ducreyi
y
Calymmatobacterium granulomatis productoras de
uretritis y/o lesiones ulcerativas. Otro cuadro clnico,
que no necesariamente es ocasionada por
transmisin sexual es la vaginosis bacteriana, la
cual se presenta como una alteracin en la
microbiota vaginal, con sobrecrecimiento de
Gardnerella vaginalis, junto con bacterias
anaerobias y disminucin de lactobacilos.
Desarrollo de la prctica
Sesin I
1. El profesor de laboratorio conjuntamente con
los alumnos revisarn un caso clnico de ETS e
identificar:
a) Datos relevantes del caso.
b) Posibles diagnstico clnicos.
c) Productos biolgicos a utilizar para el
diagnstico de laboratorio.
d) Exmenes de laboratorio tiles para
confirmar el diagnstico clnico.
2. Realizar tincin de Gram y observacin de
material demostrativo.
Material
1. Material demostrativo con tinciones especiales
2. Lminas conteniendo datos de resultados
serolgicos e inmunolgicos
3. Equipo para tincin de Gram
Metodologa
1. Los alumnos observarn la morfologa de la
bacteria.
2. Anotarn las caractersticas y elementos
observados.
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Mencione las bacterias que se asocian a
cuadros de infecciones de transmisin sexual.
2. Indicar los recursos de laboratorio que se
utilizan para el diagnstico de infecciones de
transmisin sexual.
3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico
etiolgico de una infeccin de transmisin
sexual?
Preguntas
orientadas
conocimiento adquirido.
para
evaluar
el
56
ANEXO
DETERMINACIN DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS
Objetivos
Identificar el efecto antibacteriano de los frmacos en
un cultivo de bacterias.
Demostrar la utilidad de la prueba de sensibilidad
antimicrobiana por difusin en disco.
Identificar la utilidad de las pruebas de sensibilidad a
los antimicrobianos en la clnica.
Antecedentes
La quimioterapia antimicrobiana ha desempeado un
papel vital en el tratamiento de las enfermedades
infecciosas durante el siglo XX. Desde el
descubrimiento de la penicilina, cientos de agentes
antimicrobianos han sido obtenidos a partir de
microorganismos o por sntesis. El uso de estas
sustancias ha permitido la seleccin de variantes
resistentes a los mismos.
Existen dos mecanismos principales por los cuales los
microorganismos cambian su sensibilidad hacia los
antimicrobianos y otras drogas utilizadas en la prctica
mdica: la mutacin e intercambio gentico
(conjugacin, transformacin o transduccin). La
resistencia a los antimicrobianos se manifiesta como
decremento de la permeabilidad al medicamento,
modificacin de su receptor, inactivacin enzimtica de
la droga, alteracin del blanco del antimicrobiano,
etctera.
Las pruebas in vitro de sensibilidad antimicrobiana
estn indicadas para determinar los frmacos de
eleccin
en
infecciones
producidas
por
microorganismos cuya sensibilidad es impredecible o
en infecciones que no responden al tratamiento
inicialmente elegido, infecciones intrahospitalarias,
infecciones crnicas o cuadros clnicos de repeticin; y
para seleccionar el antimicrobiano ms adecuado en
pacientes con problemas especficos como edad,
hipersensibilidad, etc. Algunos microorganismos que
con frecuencia desarrollan resistencia a los
antimicrobianos
son:
Staphylococcus
aureus,
Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae,
Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae y
Proteus sp.
No est indicado solicitar pruebas de sensibilidad a
antimicrobianos cuando no se ha reportado resistencia
al agente de eleccin o est se ha reportado slo
raramente.
Algunas de las pruebas de sensibilidad antimicrobiana
realizadas en los laboratorios clnicos son las
siguientes:
1. Difusin en disco:
procedimiento simple que
emplea agar Meller-Hinton, medio que permite el
crecimiento de la mayora de los microorganismos
para los cuales estas pruebas son relevantes. Est
tcnica es cualitativa, reproducible, econmica, no
requiere de equipo especial y est estandarizada
para probar bacterias de crecimiento rpido.
Determina sensibilidad, sensibilidad intermedia y
resistencia empleando un disco de papel filtro
impregnado con un antimicrobiano seleccionado
que se difunde a travs del medio.
Para efectuarla se inocula una placa de agar con el
microorganismo problema, a la que se le depositan
discos secos de papel filtro que contienen los
agentes antimicrobianos. Los discos adsorben
agua del medio, la droga se disuelve y difunde
hacia el medio adyacente siguiendo las leyes
fsicas que gobiernan la difusin de las molculas
a travs de agar. El resultado es un gradiente de
concentracin de la droga alrededor del disco. Las
clulas bacterianas que no son inhibidas por el
agente antibacteriano, sern capaces de crecer en
toda la zona alrededor del disco, mientras que en
las bacterias sensibles a la droga, no se observar
crecimiento en el rea donde las concentraciones
inhibitorias de la doga estn presentes. La zona de
inhibicin es afectada por la velocidad de difusin
de las diferentes drogas a travs del agar, por lo
que las zonas observadas con una droga no
pueden ser comparadas con las de otra droga. Sin
embargo, el dimetro de la zona de inhibicin es
inversamente proporcional al MIC.
Algunas de las limitaciones de este procedimiento
son:
a) El mtodo est estandarizado slo para
microorganismos aerobios de crecimiento
rpido
incluyendo
Enterococcus
sp.,
Staphylococcus sp. Pseudomonas aeruginosa,
Acinetobacter sp., algunos Streptococcus y
Listeria monocytogenes y con algunas
modificaciones ha sido utilizado para
microorganismos
exigentes
como
Haemophilus
sp.,
Neisseria
sp.
y
Streptococcus pneumoniae.
b) Organismos de crecimiento lento, anaerobios
obligados y aquellos que requieren CO2 para
su crecimiento no dan resultados confiables al
ser probados por este mtodo por lo que se
recomiendan mtodos de dilucin.
57
2.
2.
3.
6.
5.
6.
7.
Material
1. Cajas con gelosa Meller-Hinton con 4 mm de
grosor.
2. Tubo MacFarland de 0.5.
3. Tubos con solucin salina estril cada uno con 3
ml
4. Cultivos de 18 a 24 h en caldo nutritivo.
58
Primer da
Incubar a 37 C x 24 horas
Segundo da
59