http://www.bluestar-forensic.com/es/bluestar.

php
BLUESTAR FORENSIC
Reactivo para sangre latente

Esta nueva frmula qumica basada en el luminol sobrepasa a las dems en funcionamiento y
supera sus inconvenientes para un uso fcil y fiable.

Funcionamiento Extremo

La extrema sensibilidad de BLUESTAR

FORENSIC permite ver a simple vista manchas de
sangre diluidas a un grado de 1:10.000, como
rastros
Ms sobre el desempeo...

lavadas

unalumi
que no
ser
buena
y

Desempeo tcnico

Videos

Testimonios

Reporte de validacin de
Aycock

Luminol vs. BLUESTAR

diminutos o gotas que han sido

con o sin detergente.
BLUESTAR FORENSIC tiene
niscencia mas fuerte y duradera
requiere oscuridad absoluta para
visible. Se pueden obtener fotos de
calidad con cmara y pelcula comn
corriente.

Con un

BLUESTAR FORENSIC no altera el ADN y permite anlisis subsecuentes de ADN y

de ABO.

BLUESTAR FORENSIC trabaja tan bien en sangre fresca como en manchas de

sangre muy antiguas o alteradas, puras o diluidas.

poco de prctica, BLUESTAR

FORENSIC hace que sea imposible
confundir sangre y falsos positivos ya que la luminiscencia difiere en color, intensidad
y duracin.

Ms fcil de usar

BLUESTAR FORENSIC es ms fcil y seguro de preparar gracias a las tabletas preformuladas que evitan tener que pesar los ingredientes. No hay ni polvos ni lquidos para
mezclar, solamente tabletas de disolucin rpida. No contiene perborato tetrahdrico de
sodio. Se recicla fcilmente. No deja residuos despus de secar. Vea nuestras Fichas
Tcnicas de Seguridad (MSDS) en la seccin de descargas.

Ms acerca del uso de

BLUESTAR...

BLUESTAR FORENSIC se puede rociar una y otra

vez sobre las mismas manchas de sangre para lograr
cada vez la misma luminiscencia resultante.

Gua y video de
procedimiento

Casos
reales resueltos gracias a
BLUESTAR FORENSIC

Antes de su uso, BLUESTAR FORENSIC

tiene una vida til larga y no requiere de
condiciones especiales de almacenamiento.

Una vez mezclado, BLUESTAR FORENSIC es estable y funciona durante horas, o

incluso varios das.

http://www.revistasbolivianas.org.bo/scielo.php?pid=S231002652014000100010&script=sci_arttext

Resumen
La investigacin de manchas de sangre en la escena del crimen, se constituye en
uno de los vestigios biolgicos ms importantes para esclarecer un hecho delictivo.
Mediante la prueba de Luminol, se analizaron varios soportes con manchas de
sangre sometidas a diversas condiciones de tiempo, ambiente, limpieza, diluciones
y manchas antiguas para determinar su sensibilidad y eficacia en el Laboratorio de
Biologa Forense del Instituto de Investigaciones Forenses de La Paz. Las
condiciones de tiempo y ambiente sobre los soportes con manchas de sangre no
afectan a la prueba, en cambio varios lavados con detergentes qumicos pueden
afectar la deteccin de sangre. La sensibilidad del luminol alcanz hasta una
dilucin 1:100.000. La prueba de luminol fue muy til para la deteccin de manchas
de sangre en investigacin de diversos soportes sometidas a adversas condiciones.
PALABRAS CLAVE
Luminol, Manchas de sangre, Quimioluminiscencia, Hemoglobina

Abstract
Investigation blood stains at the scene of the crime have become an essential biological elementwhen solving legal investi-gations. In our study we examined the
Luminol test to establish their sensibility and efficiency with different degree of
interfer-ence, different support, time, storage con-ditions and old stains in the
Forensic Biol-ogy Laboratory from Forensic Investigations Institute, La Paz. In
general terms the Luminol testwas notaffected in the different temperature, time
and storage conditions we used. Samples which had been sub-ject to washings with
chemical detergents conditions could be affected the blood detection. The sensibility
we found was high 1:100.000 dilution. Luminol testwas fundamental to blood stains
detection and their investigation about different difficult conditions.
KEY WORDS

Luminol, Blood stains, Chemiluminescence, Haemoglobin

INTRODUCCIN
La sangre es uno de los fluidos biolgicos ms frecuentes e importantes como
evidencia fsica en investigaciones de hechos violentos. Hallar manchas de sangre
en una escena de crimen aporta informacin muy valiosa que puede ser decisiva en
la resolucin de un crimen. (Zweidinger,1973, Shiro, 2002 y Neufeld, 1965).
Hoy en da la Prueba de Luminol y el BLUESTAR FORENSIC son las tcnicas
bioqumicas forenses ms utilizadas en la investigacin forense para detectar trazas
de sangre en una escena del crimen. La Quimioluminiscencia de color azul del
Luminol es catalizada por la Hemoglobina de la sangre. El reactivo Luminol (5amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione) reacciona con la Hemoglobina de la
sangre. Esta reaccin es ampliamente utilizada en la investigacin por la
Comunidad Cientfica Forense como una prueba orientativa para la bsqueda de
manchas de sangre. La emisin de luz es casi instantnea, cuando el Luminol es
rociado sobre la sangre. El Luminol puede ser utilizado para detectar la presencia
de sangre en cantidades tan bajas o diluidas como 1:106. Inclusive las manchas de
sangre de una antigedad mayor a seis aos, pueden ser localizadas en superficies
lavadas, en ambientes amplios y sobre diferentes soportes. La prueba de Luminol
es una prueba preliminar previa a la determinacin serolgica y por ADN. (Shiro,
2002 y Neufeld, 1965).
En el presente estudio, se ha realizado la evaluacin de la sensibilidad de la tcnica
de Luminol, la accin de factores ambientales como el tiempo, soporte, lavados,
detergentes, para el estudio de manchas de sangre en casos de hechos violentos
donde se deja como evidencia sangre. La comunidad cientfica forense, recomienda
utilizar este mtodo para realizar la deteccin de manchas de sangre en indicios de
inters forense (Specht, 1937, Grodsky, Wrighty Kirk, 1951 y Proescher, 1939).

MATERIAL Y MTODOS
Muestras
Se analiz manchas de sangre sobre diferentes soportes absorbentes (tela de
algodn, prendas, calzados, madera, cartn, papel) y soportes no absorbentes
(madera tratada, vidrio, lavamanos, mosaico, pintura de auto, cuchillos, sierras),
sometindose a diferentes intervalos de tiempo, se realiz diluciones de la sangre
para evaluar la sensibilidad del mtodo, utilizando sangre humana del Grupo ORh +
con anticoagulante EDTA al 5%
Preparacin de Luminol
La tcnica de luminol se la realiz segn el mtodo descrito por Weber et. al.
(Grodsky, Wright y Kirk, 1951, Proescher, 1939 y Yeshion, 1991).

1. Pesar 8 g de Hidrxido de Sodio y disolverlo completamente en 0.5 L de agua

deionizada. (Sol. I)
2. Medir 10 mL de Agua Oxigenada al 30%, aadir 0.49 L de agua deionizada.
(Sol.II).
3. Pesar 0.354 g Luminol, disolverlo en 0.625 L de la Sol. I y enrasar a 0.5 L (Sol.
III)
4. Conservarlos a 4C, y proteger de la luz. (Solucin de trabajo).
5. Prepare la Solucin de Prueba mezclando 10 mL cada uno de las soluciones a
70 mL de agua deionizada para obtener 100 mL de solucin de trabajo.
6.

Llevar esta solucin en un atomizador y est listo para usar.

Prueba de Sensibilidad de Luminol

Se realiz una serie de diluciones de sangre humana con solucin fisiolgica.
(Diluciones: 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10.000, 1: 100.000). Las manchas fueron
realizadas sobre diferentes soportes y analizadas en intervalos de tiempos de una
semana, cuatro semanas, cuatro meses, utilizndose una esponja para realizar las
manchas.

Aplicacin del luminol sobre los soportes

El reactivo Luminol fue preparado 12 horas antes de su aplicacin, el rociado se

realiz con un spray atomizador a una distancia de 50 cm del objetivo, las
fotografas con la cmara en modo Fluorescente fueron tomadas entre los 15
segundos a 1 minuto en ambiente oscuro (Quickenden, 2001).

RESULTADOS
La prueba de Luminol permiti localizar y detectar manchas de sangre en diversos
soportes sometidos a diferentes condiciones, descritos en las siguientes tablas:
1. Prueba de los factores externos sobre Soporte Absorbente:

2. Prueba de los factores externos sobre soporte no absorbente:

3. Prueba de la accin de agentes qumicos y tratamiento de lavados:

4. Prueba de la sensibilidad del Luminol mediante dilucin de las muestras:

Fotografas experimentales propias de los soportes analizados

con Luminol.
La preparacin forense del Luminol fue aplicado sobre diferentes muestras de
cartn, prendas de algodn, madera y otros.

DISCUSION
La prueba de Luminol resulta una magnifica prueba forense presuntiva y orientativa
en diversos soportes y condiciones ambientales (Ver anexo A).
La Prueba de los factores externos sobre Soportes Absorbentes como pared y
madera bajo la exposicin a la intemperie pueden dar resultados negativos al
Luminol, probablemente por la accin de los factores externos sobre la muestra
biolgica.
Los resultados sobre los factores externos sobre soportes no absorbentes fueron
negativas en objetos como el lavamanos, pintura de coches, vidrio, esto debido a
que la muestra es ms fcilmente eliminada o desprendida en aquellos soportes
lisos por factores ambientales (la lluvia, el viento, el sol) o la accin de la utilizacin
de estos objetos no absorbentes. Las manchas de sangre sobre los soportes no
absorbentes como vidrio, mosaico, pintura de autos pierden ms rpidamente su
poder de reaccin del Luminol a medida que transcurre el tiempo, a partir de las
cuatro semanas y hasta el cuarto mes.
Las muestras que fueron tratadas con detergentes qumicos deben ser
interpretadas con cuidado. En soportes sometidos a lavados con agua el Luminol
posee bastante sensibilidad. En cambio cuando fueron sometidas a varios lavados
con detergentes qumicos no tienen la misma sensibilidad. La accin del agua con la
prueba del luminol persiste inclusive hasta 5 lavados, en cambio bajo la accin de
detergentes en polvo o jabn todava persiste hasta el segundo lavado. La accin
de la lavandina o cloro resulto ms eficaz para poder desprender las manchas de
sangre.

La sensibilidad del luminol se mostr bastante buena hasta en diluciones de

1:100.000 cuando la mancha se produjo en soportes absorbentes (prendas,
calzados de tela), en cambio en soportes de madera tratada (vinilo), cuero, vidrio
se obtuvo una sensibilidad ms baja 1:10.000.

CONCLUSION
El Luminol permiti realizar la localizacin e identificacin presuntiva de manchas
no visibles de sangre en diversos soportes a partir de vestigios biolgicos, mediante
la observacin de la reaccin de Quimioluminiscencia del Luminol con la
Hemoglobina de la sangre (figura 1).
La prueba de luminol es una tcnica bioqumica forense muy til y la mas apropiada
para la deteccin de manchas de sangre, cuando se va a realizar el estudio de
manchas de sangre escondidas a simple vista, manchas de data antigua dejadas en
ambientes abiertos y cerrados, soportes sometidos a diferentes procedimientos de
limpieza o lavado, manchas de sangre diluida, todas son tiles para el anlisis
forense.

http://supocondori.blogspot.com.ar/2010/09/en-empleo-del-luminol-suefectividad-y.html

EN EMPLEO DEL LUMINOL, SU EFECTIVIDAD Y

VALIDEZ EN EL REVELADO DE MANCHAS DE
SANGRE INVISIBLES
EN EMPLEO DEL LUMINOL, SU EFECTIVIDAD Y VALIDEZ EN EL REVELADO DE
MANCHAS DE SANGRE INVISIBLES.
INTRODUCCIN:
Como bien sabemos que la investigacin de manchas de sangre (hematologa
forense) sigue ocupando un lugar preferente en Criminalstica, toda vez que, con
frecuencia, las ropas manchadas de sangre durante un acto violento son lavadas para
tratar de eliminar los vestigios. Por otro lado, el espectacular avance de la tecnologa
de investigacin sobre el anlisis del ADN mediante PCR ha dotado a la criminalstica
de la posibilidad de estudiar indicios mnimos que, con otros mtodos, sera imposible
analizar. Este tipo de muestra plantea una mayor dificultad en la deteccin de la
mancha. En el presente artculo analizaremos la sensibilidad del luminol para
encontrar manchas de sangre invisibles; asimismo sobre estas manchas que se
intenta extraer y amplificar DNA, los resultados indican que el luminol es muy eficaz
para detectar indicios invisibles. Adems, es necesario sealar que no se produce
interferencia del reactivo en la posterior extraccin y amplificacin del DNA.
Antes de entrar en el tema de estudio es necesario conocer y tener en cuenta
lo siguiente:

CMO NACI EL PROYECTO LA PRUEBA DEL LUMINOL?

El proyecto de la Prueba del Luminol, naci como idea en EE. UU., en los
primeros das del mes de octubre del ao de 1997; cuando al observar un vdeo sobre
esta prueba, que proyect el Discovery Chanel, (Televisin por cable ), se pudo
observar como la Polica del Estado de Arkansas, E.E.U.U., pudo resolver el Homicidio
de una mujer, que primeramente fue denunciada como desaparecida, pero la astucia
de los investigadores los llev a sospechar del esposo de esta mujer, que tena un
rcord policial extenso. Estas sospechas llevan a la Polica a aplicar la Prueba de
Luminol en la casa de este matrimonio. Logrando determinar que en el cuarto
principal, haba ocurrido la muerte de la mujer. Al inspeccionar y reactivar con Luminol
toda la vivienda, se pudo interpretar que el sospechoso mat a la mujer en la
habitacin, posteriormente laenvolvi en una alfombra y la arrastro hasta sacarla de la
vivienda, llevando el cuerpo hasta un predio a varios kilmetros de su casa.
Al analizar este caso de homicidio el cual fue resuelto bajo las tcnicas dela
Qumica Forense, se pens de inmediato en varios casos de homicidio, en
circunstancias parecidas, que haban ocurrido en dicho pas en los ltimos aos y que
todava se encontraban en el misterio. Homicidios como los de las seorasKATTIA
SEVILLA y MARLEN ALFARO QUESADA, como algunos otros.
De inmediato se procedi a comentar dicha situacin con variosinvestigadores,
donde de algunos se cont con apoyo para dicho proyecto, de otros sin embargo, slo
desconfianza. Pero al final de esta primera etapa se demostr que los investigadores
tenan la razn.
A pesar de que se tena la idea, la disponibilidad de realizarlo porque no
contaban con lo principal, que son los reactivos qumicos para llevarlo a cabo.Para el
mes de octubre del ao 1997, coincidi la idea del proyecto con la visita de
funcionarios de la Polica de Metro Dale de Miami, Estados Unidos, a los cuales se les
inform sobre el proyecto que se tena entre manos. Desde el primer momento se
cont con todo el apoyo de estos funcionarios, los cuales donaron al Organismo
de Investigacin Judicial, Seccin de Homicidios, un litro de este reactivo qumico.
De inmediato se procedi a realizar la segunda etapa del proyecto:conseguir
toda la literatura referente al tema disponible en el pas. Sin embargo, no se logr
encontrar ningn tipo de informacin o trabajo de investigacin sobre el tpico,
buscando incluso en las Universidades privadas y estatales. La nica informacin que
se logr levantar, fue la encontrada a travs de la lnea Internet, la cual llev muchos
das de estudio y discusin por parte de todos los involucrados con el proyecto.
Para los primeros das del mes de diciembre de 1997, ya se contaba con un litro
del Luminol, razn por la cual se inici la coordinacin con los laboratorios forenses;
propiamente con los Doctores MARCO MADRIGAL QUESADA y CARLOS TRABADO,
de la Seccin de Bioqumica, como as con el Dr. LUIS DEL VALLE CARAZO, Jefe
de la Seccin de Patologa. Por ltimo se coordino con la Seccin de Audio y Vdeo,
con la seorita ROSARIO MURILLO SOTO.

Al analizar los diferentes casos de Homicidio que se tena sin resolver, y al

contar con informacin nueva sobre el Homicidio de MARLEN ALFARO QUESADA, se
decidi aplicar la prueba del Luminol en la vivienda donde ella conviva con su esposo.
Para el da 23 de diciembre de 1997, al ser las 18:00 horas con treinta minutos,
se procedi aplicar la prueba en dicho lugar. Logrando obtener resultados muy
positivos. Incluso recolectar manchas de sangre para anlisis de marcadores
genticos.
De esa primera vez, hasta noviembre del ao de 1998, se ha estado realizando
varios trabajos con la prueba del Luminol, donde se ha venido perfeccionado la tcnica
y la interpretacin del lugar del suceso.
QU ES LA FLUORESCENCIA?
Es el fenmeno por el cual una sustancia emite luz visible, al ser irradiada con
luz, de menor longitud de onda que la absorbida.
QU ES LA FOSFORESCENCIA?
Es el mismo fenmeno que la fluorescencia, pero la emisin de luz se produce
lentamente.
QU ES EL LUMINOL?
Es una sustancia que al oxidarse en medio bsico, emite luz. El oxidante puede
ser H2O2, ClNa, perborato y otros.
Luminol es un producto qumico que brilla intensamente con una luz azulada
cuando entra en contacto con sangre. Incluso reacciona con los rastros de varios aos
de la sangre. Un producto qumico ultra-sensible, puede detectar sangre en una
porcin por milln. En trminos simples, esto significa que si hay incluso una gota de la
sangre en 999.999 gotas del agua, brillar intensamente el luminol.
El Luminol es un reactivo muy sensible que permite la bsqueda y localizacin
de manchas de sangre. Debido al mtodo de aplicacin, es muy til cuando se deben
estudiar zonas amplias. Adems, ya se comprobado que su aplicacin sobre manchas
de sangre (visibles), no impide el anlisis de DNA por PCR.
CMO LA AYUDA DE LUMINOL SOLUCIONA CRMENES?
Las vctimas de crmenes sangrientos, violentos no pueden desaparecer sin un
rastro que es la asuncin bsica en la cual los investigadores de la escena de crimen
funcionan. No importa cmo el asesino intenta difcilmente limpiar encima de la sangre
y disponer del cuerpo, seguir habiendo algunos rastros indicadores de la sangre. Las
partculas minsculas de la sangre pueden aferrarse en la mayora de las superficies
por aos en extremo, sin siempre ser considerado.
El Luminol es eficaz en revelar estos rastros. Hay una reaccin qumica entre
varios productos qumicos y la hemoglobina (una protena en la sangre que lleva el
oxgeno), de que produce la luz. Hay una interrupcin de las molculas, que entonces

se cambian para formar diversas molculas. En la reaccin qumica del luminol, las
molculas originales (reactivo) tienen ms energa que las molculas nuevas
(productos). La luz adicional es desechada por las molculas bajo la forma de fotones
ligeros. Este fenmeno se conoce como quimioluminescencia.
El luminol ayuda a proporcionar pistas en cuanto a cmo los acontecimientos
pudieron haber revelado o la clase de arma haber utilizado. Por ejemplo, los patrones
de la salpicadura de la sangre de un objeto embotado contra los de un cuchillo agudo
sern diferentes. A veces, las impresiones sangrientas del zapato dan muchos de
pistas sobre los movimientos del asaltador despus del ataque. Luminol puede
tambin conducir a investigadores a descubrir nueva evidencia. Por ejemplo, si hay
una reaccin positiva al luminol rociado en una alfombra, despus quitar la manta
puede revelar entarimados sangre-empapados.
Debido a estas caractersticas, se puede pensar que el luminol sea el reactivo
adecuado para la deteccin de indicios invisibles. Sobre los indicios que sean
localizados se debe estudiar si es posible la extraccin y anlisis de DNA mediante
PCR.
LA INTENSIDAD DE BRILLO Y SU DURACIN EN LA EMISIN DELLUMINOL
La temperatura, el pH, el catalizador y la misma concentracin del luminol
influirn en que la luz que se obtenga sea ms menos brillante y en la duracin de la
emisin.
Aunque existen varios mtodos para detectar las manchas de sangre, la
aplicacin del luminol es interesante porque es una prueba muy sensible, lo que
permite utilizarla en la deteccin de manchas que han sido previamente lavadas. La
reaccin ser catalizada por la hemoglobina que contiene la sangre.
MODO DE APLICACIN Y EFECTOS DEL LUMINOL:
Una aplicacin de esta oxidacin del luminol es utilizada por los especialistas
para buscar pistas en casos de homicidios, para descubrir una eventual presencia de
manchas de sangre humana en el escenario de un crimen, producindose
luminiscencia al ser aplicado en los lugares donde hubo sangre, an si esta ha sido
lavada o si el lugar donde se encontraba se ha vuelto a pintar. La luminiscencia es
producida por la aplicacin de la luz ultravioleta sobre el rea que se sospecha se
encontraba cubierta de sangre.
Luminol se utiliza tpicamente en una escena de crimen donde la matanza se
sospecha para haber sucedido pero no hay rastros de la sangre visibles al ojo
desnudo. Se obscurece el cuarto y entonces este producto qumico se pulveriza o
roca sobre un rea grande o zona sospechosa. Si se revelan rastros de sangre,
aparecer luminiscencia azul, entonces los investigadores aplican videocinta o
fotografa en la escena de crimen.
El luminol es oxidado para formar un diann, el cual posee enlaces de amida
que dan el anin de cido 3-aminoftlico en su triple estado excitado. Los electrones
excitados pasan al estado de singular y por ltimo al estado basal. En este punto es

que se produce una luz verde-azul. El luminol emite luz a una longitud de onda de
485nm en un medio aprtico y a 425nm en un medio prtico.
Cuando una molcula absorbe luz ultravioleta o visible, se promueve un
electrn de estado basal a un estado de excitado singular, lo que significa un estado
en el cual los electrones estn apareados. Inmediatamente despus de la promocin
electrnica (en un lapso de 10 a 11 segundos), el electrn desciende al estado de
excitado singular de menor energa. Una de las formas en que una molcula excitada
con sus electrones en este particular estado de menor energa, puede regresar al
estado basal, es por prdida de su energa en forma de luz. Este proceso tambin es
rpido. La energa emitida en forma de luz es ligeramente menor que la inicialmente
absorbida (la diferencia da lugar a un aumento en los movimientos moleculares) y por
consiguiente, la longitud de onda emitida es algo mayor que la absorbida.
EXTRACCIN DEL ADN DE MANCHAS DE SANGRE MEDIANTE PCR
Se ha comprobado que la aplicacin del luminol sobre manchas de sangre
(visibles), no impide el anlisis de DNA por PCR. Debido a estas caractersticas, se
puede pensar que el luminol sea el reactivo adecuado para la deteccin de indicios
invisibles. Sobre los indicios que sean localizados se debe estudiar si es posible la
extraccin y el anlisis del DNA mediante PCR.
En recientes e interesantes trabajos se ha utilizado el luminol para
individualizar la sangre y realizar sobre la muestra la determinacin del ADN, lo que en
muchos casos evita con mucha frecuencia que las personas implicadas en una accin
criminal intenten hacer desaparecer cualquier indicio que pueda ser utilizado como
prueba de su participacin en dicho crimen. Afortunadamente, el anlisis del DNA
mediante PCR ha proporcionado a la criminalstica la posibilidad de estudiar indicios
mnimos que de otra forma sera imposible de analizar. Estudios sobre el cual se han
publicado muchos trabajos de investigacin en los que se consigue extraer y analizar
DNA de manchas de sangre que se han intentado eliminar mediante lavado. Sin
embargo, en este tipo de muestra se plantea la importante dificultad de la deteccin de
la mancha. Por esta razn se hace imprescindible disponer de mtodos de bsqueda
cada vez ms sensibles, capaces de detectar indicios no visibles. Adems es
necesario que estos mtodos no tengan un efecto adverso sobre el posterior anlisis
del DNA.
PRUEBAS DE IDENTIFICACIN DE MANCHAS DE SANGRE
Respecto a las pruebas de identificacin de manchas de sangre,
tradicionalmente, se ha venido realizando sistemas de investigacin que incluyen la
realizacin de los siguientes diagnsticos:
1.- Pruebas de Orientacin.
2.- Pruebas de Certeza.
3.- Pruebas de Especie.
4.- Prueba Individual (grupos, ADN, sexo).
5.- Otros (antigedad, lugar de procedencia, etc.).

Al respecto, debemos de enfatizar que, desde que se introdujo la investigacin

del ADN en Criminalstica hasta el momento actual, la tcnica ha ido precisando su
sensibilidad; al respecto es necesario precisar que la prueba de quimioluminiscencia,
tal como lo es el luminol, pertenezca a las pruebas de orientacin, debido a que slo
proporcionan una orientacin general de la naturaleza de la mancha. Es as que el uso
del luminol al ser una actividad peroxidasa tiene desventajas distintas porque est
presente en muchas sustancias tales como metales, jugos de fruta, detergentes,
productos de limpieza en general (el blanqueo de la casa) y la contaminacin de la
escena del crmen; por lo que, es posible tambin que estas sustancias hagan luminol
y reacciones inespecficas, obtenindose falsos resultados tanto positivos como
negativos, debido. Por lo tanto, un resplandor revela simplemente a los investigadores
la posibilidad de sangre en el rea. Un investigador experimentado, observando la
velocidad de la reaccin qumica puede juzgar si la sustancia era sangre o algo ms.
Pero para ser absolutamente seguras que era sangre, otras pruebas necesitan ser
funcionadas.
CONCLUSIN:
La posibilidad de obtener DNA de muestras mnimas tiene como consecuencia
que los mtodos de bsqueda de indicios adquieran especial relieve.
El uso de luminol como reactivo de bsqueda tanto en la escena del crimen
como en el laboratorio puede resultar muy til por su capacidad de localizar manchas
no visibles y su no interferencia en el anlisis de DNA.

http://bitacoradelcentinela.blogspot.com.ar/2009/12/heroes-en-la-escenadel-crimen-el-uso.html

LOS HROES DE LA ESCENA: EL LUMINOL, LA FLUORESCENA Y EL

BLUESTAR
3.1.EL LUMINOL
3.1.1. CUESTIONES GENERALES
La sabia naturaleza muestra algunos casos curiosos de manifestacin qumica
lumnica: las lucirnagas, y en el mar, los seres marinos luminiscentes que alumbran
la penumbra marina de los fondos ocenicos. Frente a esta situacin, cientficos de
todos los tiempos NICOLS MONARDES, analiz un trozo de madera que emita
una peculiar fosforescencia azulada; estos experimentos fueron tambin de
conocimiento de BOYLE, NEWTON y otros cientficos, quienes no pudieron dar
con la clave de tan interesante espectculo de la natural[8] se hicieron un
importante cuestionamiento: qu es lo que les hace ser tan especialmente curiosos y
brillantes?
Hacia mediados del siglo XIX, SIR GEORGE GABRIEL STOCKES utilizo por vez
primera el trmino "fluorescencia" para designar los fenmenos de luminiscencia.
En esa misma lnea de investigacin, EILHARDT WIEDEMANN, taxonomiz los
fenmenos luminosos segn su origen trmico en: "incandescencia" y

"luminiscencia", siendo el primero el efecto de emisin de luz producido por el

dramtico aumento de temperatura; y el segundo la "luz fra".
Los avances tecnolgicos y el aumento del conocimiento en ciencias como la
Qumica y la Medicina, hacia 1937, hicieron posible la utilizacin de reactivos como
el Luminol. WALTER SPECH importante cientfico y catedrtico de la
Universidad de Medicina Legal y Criminalstica de Jena (Alemania) en el mismo
ao fue uno de los pioneros en el uso del Luminol en pruebas de deteccin de sangre
sobre distintas superficies: pavimentos, ladrillos, paredes, etc. encontrando gran
efectividad en el uso del reactivo al detectar sangre en la mayora de estas pruebas, e
incluso en aquellas superficies en las que previamente se haban limpiado
concienzudamente hasta 5 veces. La iniciativa de SPECH vino dada por la escasa
obtencin de indicios y evidencias sanguneas en escenas de crmenes en las que el
criminal manipulaba eliminando este tipo de restos biolgicos[9].
Merced a estos descubrimientos, es que ya desde 1951, el uso del Luminol comienza
a tomar fuerza, perfilndose como un importante aporte pragmtico en la
investigacin criminal. Actualmente, existen dos variantes de obtencin de Luminol
aplicables a la investigacin: por un lado la forma casera mediante la frmula de
WEBER; por otro la forma comercial mediante los distintos preparados y
presentaciones.
La empresa ms conocida actualmente es BLUESTAR FORENSICS, conocida
principalmente por haber eliminado parte del retardo en la reaccin y por la
facilitacin del manejo del producto en comprimidos y lquidos en envases idneos
para su uso y almacenamiento. La formula mejorada de Bluestar se debe al estudio
de Loic Blum, profesor de Bioqumica de la Universidad Claude Bernard-Lyon, el
cual financi el director de la empresa Bluestar, Jean-Marc Lefebvre-Despeaux.[10]
3.1.2. COMPOSICIN QUMICA Y APLICACIONES
El Luminol (C8H7N3O2) tiene una capacidad mas que considerable para la
deteccin de sangre, ya sea esta fresca o seca pues se ha podido comprobar su
efectividad en casos en los cuales se han encontrado pruebas mediante este
compuesto 7 aos despus de la comisin del crimen, adems, su poder de
quimioluminiscencia es superior en presencia de sangre seca con lo que se
revaloriza esta potente herramienta con poder como para detectar 1L (1 L = 10
6 L = 1 mm3) de sangre en 1L de solucin[11].
Su preparacin debe realizarse una vez se decida aplicarse, a cuanto menor tiempo
pase desde su preparacin a su aplicacin mejores resultados dar el producto ya que
una vez hidratado el Luminol[12], propiamente dicho , comenzar a degradarse
hasta el punto de que sea inservible. La culminacin de la fase de Inspeccin
Tcnico-Ocular por parte de los forenses ser el punto de partida para la recin
aplicacin del reactivo, teniendo cuidado de no contaminar las dems evidencias que
aun no han sido recabadas de la escena. La aplicacin del Luminol obedece a
situaciones en las cuales se tenga presuncin suficiente debido a la desaparicin
sospechosa de personas de asesinato u homicidio, en lugares con marcado indicio
de ser el escenario principal de un acontecimiento de estas caractersticas, lugares
tales como vehculos, recipientes, bolsas, arcones, bales, objetos sospechosos de
ser utilizados para atentar de forma directa contra la integridad fsica de otra
persona, puntos de eliminacin de pruebas como desages, wteres, cubos de

basura etc. as como cualquier otro objeto y/o lugar sospechoso de haber entrado
en contacto con la sangre de una persona ya fuere este contacto directo o indirecto
e "invisible", a una primera o segunda concienzuda inspeccin ocular.[13]
La solucin de Luminol se combina con hidrxido de sodio o hidrxido de potasio
como agentes alcalinos, los cuales se diluyen en una solucin oxidativa de agua
destilada y H2O2 (agua oxigenada), el proceso de reaccin qumica se realizara
una vez entre en contacto con el catalizador, que en el caso que nos ocupa ser en
hierro (Fe) que se encuentra en el heme de la globulina, el cual es un pigmento
compuesto de hierro que da el color rojo caracterstico a la sangre y en el que a su
vez se fija el oxigeno o el dixido de carbono al glbulo rojo o hemate para
transportarlo mediante el sistema circulatorio a las clulas que as lo necesiten. La
reaccin del Luminol con los grupos heme de la hemoglobina (o
desoxihemoglobina) donde se encuentra el hierro viene dada por la mezcla del
Luminol y el medio alcalino al que se le somete con el peroxido de hidrogeno
(H2O2), de esta forma se reemplazan y liberan los dos tomos de nitrgeno,
llevndola a un estado de excitacin en el cual, al entrar en contacto con el
catalizador desprender energa en forma de luz (fotones) producindose una luz
azul tenue a la vez que brillante que nos indicara la presencia de metales en esa
zona en la que se ha aplicado, pues aunque lo que se busca realmente el hierro que
contiene la sangre, la mezcla de Luminol reacciona con los denominados metales de
transicin como el cloro, el cobre, potasio, cobalto, etc. lo que podra llevar a falsos
positivos.[14]
La experimentacin puede hacer posible la distincin entre falsos positivos y los
verdaderos indicios que apuntan a que en ese determinado lugar ha habido sangre.
Comnmente, los productos de limpieza que contienen metales de transicin,
alcalinos...(en su gran mayora los clorados), son los mas utilizados en la limpieza
del hogar as como los que mas a mano estn con intencin de eliminar pruebas. La
presencia de estos productos pueden reaccionar con el Luminol dando una reaccin
inmediata e intensa, mostrando un brillo caractersticos, no ocurre as lo mismo con
la sangre, ya que suele tardar un poco mas, entre 20 segundos y un minuto, adems,
la intensidad de la luz suele tardar unos minutos en desvanecerse, no de forma casi
repentina como el caso de los productos clorados. En el caso de la reaccin con
sangre, el Luminol produce mas intensidad en brillo que otros elementos como lo
puede ser el sulfato de cobre (II) y el hexacianoferrato de potasio (III), sus
reacciones son muy parecidas a las de los productos clorados, si bien su duracin
de brillo e intensidad son unos pocos segundos por encima de estos ltimos, no
sucede lo mismo con el nitrato de cobalto (II), el cual puede permanecer en
reaccin durante aproximadamente unos 20 minutos, tiempo muy por encima de lo
que ocurre con el hierro de la sangre.[15]
3.2. EL BLUESTAR: REACTIVO REVELADOR PARA MANCHAS DE
SANGRE OCULTA
Uno de los reactivos de mayor aceptacin por parte de los peritos forenses es, sin
lugar a dudas, el Bluestar. Este novsimo reactivo tiene la particularidad derevelar
manchas de sangre que han sido lavadas, limpiadas son invisibles a simple vista.
[16]

En el ao 2000, Jean-Marc Lefebvre-Despeaux, presidente de BlueStar, encargo a

LOIC BLUM profesor de Bio-qumica en la Universidad Claude Bernard-Lyon y
director de Enzimtica E Ingeniera Biomolecular del laboratorio encontrar una
nueva frmula que sera a base de Luminol y eliminara todos los numerosos
inconvenientes. Como resultado de ello, BLUM descubri esta nueva frmula que
fue posteriormente llamada Bluestar.
La formulacin de Bluestar est basada en la quimioluminiscencia, utiliza los
principios de Luminol pero llevados a otro nivel de desarrollo. Un sector grande del
mbito forense tiene en muy balta consideracin a este reactivo, llegando a
calificarlo como el revelador ms efectivo de sangre humana disponible en el
mercado, tanto para la escena de un crimen como para los departamentos de
criminalstica.[17]
Estudios realizados afirman que la composicin del Bluestar no altera la
identificacin del ADN de la sangre revelada en la escena del crimen, esto facilita
enormemente los anlisis del genotipo sanguneo.
3.2.1. COMPOSICIN QUMICA Y REACCIONES
El Bluestar obedece a los mismos principios qumicos de reaccin del clsico
Luminol. La constitucin del Bluestar ha hecho posible eliminar los inconvenientes
de los elementos asociados al Luminol.[18] El Luminol (3-Aminophthalhydrazide)
fue sintetizado por primera vez en 1853. Su propiedad para producir una reaccin
quimio-luminiscente en una solucin bsica en presencia de un agente oxidante en
contacto con la sangre fue observada por primera vez por ALBRECHT en 1928.[19]
Los principales componentes capaces de catalizar esta reaccin de emisin de luz
son los metales de transicin y hem peroxidasa. Hem es una estructura bioqumica
que forma parte integrante de la peroxidasa. Esta estructura esta igualmente presente
en la hemoglobina.
De esta manera, la presencia de hemoglobina por lo tanto, de la sangre puede ser
revelada por el aprovechamiento de la capacidad de haem/hem para catalizar la
propiedad quimio-luminiscentes del Luminol. En otras palabras, una mezcla de
luminol + agente oxidante + agente alcalino, cuando se pongan en contacto con la
sangre, se emiten luz.
3.2.2. APLICACIN EN LA ESCENA DE UN CRIMEN
La aplicacin del reactivo se cie al cuidado en la preparacin de la escena a ser
rociada, teniendo en cuenta las consideraciones siguientes:
a) Es necesario oscurecer el rea para el tratamiento con Bluestar.
b) El Tcnico tiene que utilizar una vestimenta especial, que evite la contaminacin.
c) Se realiza la preparacin del Bluestar.
d) La mezcla de trabajo se prepara aadiendo simplemente TRES tabletas de
catalizador en la botella de solucin lquida suministrada en el estuche.
e) Unos minutos ms tarde, el tcnico tiene que comprobar la efectividad del
producto preparado, mediante una muestra de sangre cmo control positivo.

f) A partir de este instante, el tcnico puede utilizar el Bluestar para detectar

superficies, incluso despus de haber sido lavadas con posterioridad a la exposicin
de sangre. El efecto de la luminiscencia es inmediato, sin embargo este desaparece
en promedio al minuto y es necesaria una nueva rociada del producto.
3.2.3. EFECTO DEL BLUESTAR EN LAS PRUEBAS DE ADN
Los estudios han demostrado que Bluestar no interfiere con las pruebas de
tipificacin de ADN. Adems de todo esto, se puede utilizar sobre muchas
superficies, que hayan sido tratadas con detergentes, lo cual no las afecta en lo ms
mnimo.
El Bluestar fue utilizado en la escena de muchos crmenes, y las reas azuladas,
fueron enviadas a varios departamentos de Criminalstica. Estos departamentos de
Biologa Molecular fueron capaces de lograr un perfil del ADN en todas las pistas
tratadas con Bluestar. El departamento de criminalstica de la Gendarmera
Francesa (IRCGN) ha estado usando este procedimiento desde principios del ao
2001.[20]
A MANERA DE CONCLUSIN
De todo lo desarrollado en lneas anteriores podemos sealar que el Luminol es un
reactivo altamente sensible que facilita enormemente la localizacin de manchas de
sangre invisibles. Asimismo es importante anotar que su aplicacin sobre manchas
de sangre visibles no impide el anlisis de ADN por PCR. Sin embargo, las pruebas
en manchas de sangre imperceptibles respecto al anlisis del ADN por PCR
obtenidas mediante la ayuda del Luminol an no son del todo concluyentes.
Por otro lado, el Bluestar formulacin que utiliza los mismos principios reactivos
de luminiscencia en fluidos sanguneos- ha demostrado ser un producto que emite su
clsica luminiscencia azulada durante ms tiempo, con ms intensidad, permitiendo,
as, tomar fotografas del tratamiento de forma ms fcil y precisa. Aunque tiene un
ligero efecto corrosivo, el Bluestar no es nocivo, lo cual significa, que un tcnico de
criminalstica puede utilizarlo con facilidad. Finalmente, los estudios han
demostrado que el uso del Bluestar en la escena del crimen no dificulta el anlisis de
ADN en las manchas de sangre detectadas, incluyendo las imperceptibles o
borradas.