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UNIVERSIDAD DE CUENCA

Facultad de ciencias Agropecuarias


Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia

RESUMEN
TTULO: PREVALENCIA DE BRUCELOSIS BOVINA
EN LA PARROQUIA INGAPIRCA, CANTN
CAAR, PROVINCIA DE CAAR.
El trabajo de investigacin fue realizado en la provincia
de Caar, en las comunidades de la parroquia Ingapirca,
se trabaj con 140 bovinos en edades reproductivas, 6
hembras y 1 macho por cada comunidad, en un total de
20 comunidades, a cada uno de ellos se les extrajo 1
muestra de sangre de la vena coccgea, las mismas que
fueron transportadas hacia la Universidad de Cuenca, al
LABORATORIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS
AGROPECUARIAS en termos de refrigeracin para
posteriormente realizar la centrifugacin y extraer el
suero sanguneo que sera enviado a los laboratorios de
Agrocalidad en la ciudad de Quito para su anlisis
mediante las pruebas de Rosa de Bengala y Elisa de
competencia.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar

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Para el anlisis estadstico se distribuy a las 20


comunidades de la parroquia Ingapirca en 4 reas, se
tom en cuenta las 4 variables en estudio: edad, sexo,
raza y sistema de reproduccin. Se encontraron 3 casos
positivos del total de las 140 muestras, considerndose
as, que la prevalencia de brucelosis bovina en la
parroquia ingapirca fue del 0,021%. Los casos
positivos se presentaron en bovinos del sexo hembra, 2
en la raza mestiza y 1 en la raza normando, todos bajo
el sistema de reproduccin monta natural.
PALABRAS CLAVES: Ingapirca, Aborto infeccioso,
Brucella abortus, Prevalencia de Brucelosis, enfermedad
de Bang.
NDICE
1. INTRODUCCIN...............................................................8
2. REVISIN DE LITERATURA.........................................12
2.1. BRUCELOSIS. ...........................................................12
2.2. SINONMIA.................................................................13
2.3. ETIOLOGA. ...............................................................14
2.4. MORFOLOGA...........................................................16
2.5. RESERVORIOS NATURALES. ...............................18
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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2.6. FACTORES DE RIESGO..........................................18


2.7. TRANSMISIN...........20
2.8. RESISTENCIA ...........................................................22
2.9. EPIDEMIOLOGA ......................................................23
2.10.PERIODO DE INCUBACIN....................................29
2.11.PATOGENIA ..............................................................30
2.12.SIGNOS CLNICOS...................................................33
2.12.1. EN ANIMALES.....................................................33
2.12.2. EN HUMANOS.....................................................36
2.13.HALLAZGOS EN LA NECROPSIA.........................38
2.14.INMUNIDAD FRENTE A BRUCELLA.....................39
2.14.1. Inmunidad Natural..............................................39
2.14.2. Macrfagos..........................................................40
2.14.3. Neutrfilos. ..........................................................40
2.14.4. Clulas Natural Killer.........................................41
2.14.5. Complemento......................................................42
2.14.6. Linfocitos T CD4+ y CD8+.................................42
2.14.7. Linfocitos T . Las clulas T .....................43
2.14.8. Linfocitos B .........................................................44
2.15.DIAGNSTICO. .........................................................45
2.16.DIAGNSTICO DIFERENCIAL ...............................45
2.17.TCNICAS DE DIAGNSTICO ...............................46
2.17.1.Aislamiento Bacteriano .......................................46
2.17.2. Pruebas serolgicas. .........................................47
2.18.TRATAMIENTO .........................................................61
2.19.PREVENCIN............................................................62
2.20.PROGRAMAS DE CONTROL Y
ERRADICACIN................................................................64
3. MATERIALES Y MTODOS..........................................68
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3.1. Materiales ..................................................................69


3.1.1. Materiales de campo..........................................69
3.1.2. Materiales de Laboratorio.................................70
3.1.3. Materiales de escritorio.....................................75
3.2. Mtodos. ....................................................................75
3.2.1. El rea de estudio...............................................75
3.2.2. De campo. ............................................................77
3.2.3. De Laboratorio....................................................77
3.3. Mtodo estadstico ..................................................88
4. RESULTADOS Y DISCUSIN.......................................89
4.1. RESULTADOS...........................................................89
4.2. DISCUSIN..............................................................113
5. CONCLUSIONES..........................................................117
6. RECOMENDACIONES.................................................119
7. RESUMEN......................................................................121
8. SUMMARY.....................................................................123
9. BIBLIOGRAFA.............................................................125
10. ANEXOS........................................................................136

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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
CARRERA: MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

PREVALENCIA DE BRUCELOSIS BOVINA EN LA


PARROQUIA INGAPIRCA, CANTN CAAR,
PROVINCIA DE CAAR

Tesis previa a la obtencin


del ttulo de Mdico
Veterinario Zootecnista.

AUTORES:
Diego Alonso Agurto Granda.
Pedro Ismael Fernndes Panjon.

DIRECTOR:
Dr. Carlos Vaca Vaca, Mg.Sc.

2013
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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1. INTRODUCCIN
La brucelosis es una enfermedad que tiene importancia
en la parte productiva y reproductiva de varias especies
zootcnicas, a ms de la relevancia sanitaria por ser una
enfermedad zoontica.

La parroquia Ingapirca es la zona de mayor produccin


de leche en la provincia del Caar, ya que ah se
producen aproximadamente 28.000 litros de leche
diarios, en comparacin a los 81.538 litros de leche
diario que se produce en toda la provincia de Caar
(23).

En la parroquia de Ingapirca an no se han realizado


investigaciones sobre la frecuencia de esta enfermedad.
Los resultados obtenidos servirn para realizar estudios
epidemiolgicos que van a ser de inters en el proceso
investigativo, y as llegar a prevenir, controlar y erradicar
la enfermedad, obteniendo mayores rditos econmicos
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a los hacendados y contribuyendo al control de esta


zoonosis.

La brucelosis es una zoonosis cuya incidencia y


prevalencia varan de un pas a otro. La infeccin
causada por la especie Brucella abortus es la que
frecuentemente afecta al ganado bovino, causando
esterilidad en machos y abortos en hembras preadas,
lo que conduce a graves prdidas econmicas en pases
en los que es endmica. En pases no desarrollados
constituye adems un problema sanitario para la
poblacin humana (30).

La Brucella es una bacteria Gram negativa, que no


forma esporas, es tan corta que frecuentemente se
confunde con los cocos, posee una envoltura celular
caracterstica: la membrana externa, la membrana
interna y un espacio periplsmico intermedio (14).

Desde el punto de vista zoontico, la brucelosis


es importante por sus repercusiones negativas en
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las condiciones de salud de los trabajadores


vinculados con el manejo de hatos ganaderos y el
faenamiento de ganado, al entrar en contacto con
animales infectados y para la poblacin que consume
productos contaminados (leche y derivados).

La brucelosis bovina en Ecuador se encuentra difundida


en grados variables de intensidad, de acuerdo con los
diferentes sistemas de produccin ganadera existentes
(4).

Para ser declaradas zonas libres de brucelosis bovina,


todos los rebaos bovinos del pas o de la zona, deben
estar bajo control veterinario oficial y debe haberse
comprobado que el ndice de infeccin brucelina no es
superior al 0.2% de los rebao de bovinos del pas o
zona considerada. La enfermedad o la sospecha de la
enfermedad deben ser de declaracin obligatoria (27).

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OBJETIVOS.

General:

Conocer la prevalencia de brucelosis bovina en la


parroquia Ingapirca.
Especficos:

Determinar la prevalencia de brucelosis bovina


segn las variables de procedencia, sexo, edad y
sistema de reproduccin.
Confirmar la presencia de la enfermedad mediante
pruebas de laboratorio, Rosa de bengala y Elisa de
competencia.

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2. REVISIN DE LITERATURA
2.1. BRUCELOSIS
Es una enfermedad infectocontagiosa de origen
bacteriano que afecta a los bovinos alterando su
reproduccin. Se caracteriza fundamentalmente
por producir abortos (8).

Desde el punto de vista zoonsico, la brucelosis es


importante por sus repercusiones negativas en las
condiciones de salud de los trabajadores
vinculados con el manejo de hatos ganaderos y
con el faenamiento de ganado, al entrar en
contacto con animales infectados y para la
poblacin que consume productos contaminados
(leche y derivados) (4).

Las prdidas econmicas en Amrica Latina y los


EEUU. Se han estimado por sus respectivos
gobiernos en aproximadamente 700 millones de
dlares anuales. La FAO (Organizacin de las
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Naciones Unidas para la Agricultura y


Alimentacin) y la OMS (Organizacin Mundial de
la Salud) han ayudado a los pases donde la
infeccin es endmica, mediante la formacin de
medidas de control, el proporcionar capacitacin y
materiales de referencia; centrado la investigacin
coordinada sobre los problemas que se plantean
en estos programas (5).

2.2. SINONMIA
Las enfermedades causadas por las Brucellas han
recibido mltiples denominaciones, de las que
anotamos algunas:

Fiebre ondulante
Fiebre de malta
Fiebre del mediterrneo
Aborto contagioso
Enfermedad de Bang
Brucelosis melitococcica o fiebre ondulante de
malta
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Brucelosis mediterrnea
Fiebre melitensis
Fiebre de traum
Fiebre caprina
Fiebre sudoralis
Fueron abandonadas los nombres de determinadas
localidades en las que eran frecuentes (fiebre de
Gibraltar, de Chipre, de Creta, De Corf, de
Barcelona, etc.)(13).

2.3. ETIOLOGA
La enfermedad del ganado vacuno es causada
exclusivamente por B. Abortus (9).

Brucella abortus es la causante de Brucelosis


Bovina, y est representada por siete biovares. En
Amrica Latina se ha verificado la existencia de los
biovares 1,2,3,4 y 6 sin embargo, el biovar 1 es el
responsable de ms del 80 % de casos de
brucelosis bovina reportados en la regin (22).
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La brucelosis es causada por especies de Brucella,


que es un intracelular facultativo Gram-negativos
patgeno bacteriano de muchas especies de
vertebrados, incluyendo al hombre. Es una de las
zoonosis bacterianas ms comunes en todo el
mundo y plantea una grave amenaza para la salud
humana, la salud animal y la produccin animal
(26).

Se han registrado infecciones por esta bacteria en


la mayor parte de especies, pero con frecuencia
slo se observan en bovinos que pueden tener
cualquier edad, pero la infeccin persiste
solamente en animales adultos se ha registrado
tambin un aborto en una oveja, en equinos se ha
encontrado con frecuencia el microorganismo en
agrandamientos bursales crnicos, donde se hallan
en calidad de invasor secundario y no de patgeno
primario (12).

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2.4. MORFOLOGA
El gnero Brucella est formado por bacterias gran
negativas, que se observan al microscopio como
cocobacilos de 0,5 a 0,7 m de dimetro y de 0,5 a
1,5 m de largo, intracelulares facultativos,
inmviles y aerobios, no formadores de esporas
(25).

Poseen membrana externa e interna que encierran


un espacio periplsmico con peptidoglicano (PG) y
otras protenas. La membrana externa de B.
abortus es altamente hidrofbica y resistente a
pptidos catinicos y detergentes. Al igual que
otras bacterias Gram negativas, tienen
lipopolisacridos (LPS) en esta envoltura.
Dependiendo de la presencia o ausencia de la
cadena O del LPS se denominan lisa (S-LPS por
smooth) o cepa rugosa (R-LPS por rough) debido a
su apariencia morfolgica. Existen especies de
Brucella naturalmente rugosas (B. canis y B. ovis) y
hay cepas mutantes rugosas de las especies lisas
(B. melitensis, B. abortus y B. suis) (29).
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Grfico 1 Esquema simplificado de la


membrana externa de la pared celular de
Brucella. El LPS-S de las formas lisas est
constituido por el lpido A, el ncleo y el
polisacrido O (PSO).

FUENTE:
http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/250
7/1/T-ESPE-IASA%20I-003803.pdf.

El gnero Brcela posee un genoma con un rango


que oscila, dependiendo de la especie de, 2.37 a
2.82 por 10E9 daltons (18).
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2.5. RESERVORIOS NATURALES


Una hembra infectada es el medio ms importante
para la diseminacin de la enfermedad, tanto para
el rebao al que pertenece como para otros
rebaos donde sea movilizado el animal (8).

Varias especies de Brucella han sido aisladas de


una gran variedad de animales tales como bovinos,
caprinos, ovinos, suinos, camlidos, perros,
roedores y recientemente en mamferos marinos
como los cetceos y pinnpedos. Entre estas la
Brucella abortus, el agente causal de la brucelosis
bovina, es una de las especies de mayor
distribucin mundial y junto con la B., mellitensis y
B. suis, las que mayor riesgo representan para la
salud humana (18).

2.6. FACTORES DE RIESGO

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La prevalencia de esta enfermedad se ve


influenciada por las condiciones socioeconmicas
de cada pas, regin o localidad. En pases en vas
de desarrollo, en los cuales se utiliza un sistema
tradicional de manejo de los animales y los
sistemas sanitarios son deficientes o inexistentes,
esta enfermedad afecta a la poblacin en general,
en tanto que en pases desarrollados, esta
enfermedad tiene un carcter profesional

Entre las profesiones que poseen alto riesgo de


contaminacin, estn las relacionadas con el
campo o agro, mdicos veterinarios, ingenieros
agrnomos, trabajadores agrcolas, trabajadores de
camales o mataderos, as como el personal de
laboratorio (29).

La infeccin se produce a cualquier edad y persiste


solo en animales sexualmente maduros, una
pequea proporcin de infecciones intrauterinas
persiste en terneras inmunes pasivamente, estos
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animales no deben utilizarse como reproductores.


Cuando ms avanzada sea la gestacin en el
momento de la exposicin, mayor es el riesgo de
infeccin (16).

2.7. TRANSMISIN
La fuente primaria de infeccin est representada
por las hembras grvidas que, al abortar o parir,
expulsan grandes cantidades de esta bacteria con
el feto, el lquido amnitico y las membranas
fetales. La va de penetracin ms importante es la
oral, debido a la ingestin de agua, pastos, forrajes
y contaminados (20).

La enfermedad se transmite por la ingestin,


penetracin por la conjuntiva, a travs de la piel o
por contaminacin de la ubre durante el ordeo.
El pastoreo en reas contaminadas, el consumo de
agua contaminada con secreciones, membranas
fetales infectadas y el contacto con fetos abortados
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o neonatos, se consideran las formas ms


frecuentes de propagacin. Existe una transmisin
congnita provocada por la infeccin dentro del
tero, y si el feto no muere, puede permanecer
latente toda su vida en la ternera; esto se explica
por el fenmeno de tolerancia inmunolgica: el
animal da pruebas serolgicas negativas en su
primer parto, momento en el cual comienza
a desechar el microorganismo. La transmisin
horizontal suele presentarse por la contaminacin
directa y la infeccin por moscas, perros, ratas,
garrapatas, calzado, ropa y otros objetos
infectados; esto no se considera de importancia,
comparado con el nmero de microorganismos
desechados en abortos membranas y lquidos
fetales (16).

El trasplante de embriones no tratados en forma


adecuada, tambin puede constituir una fuente de
infeccin (4).

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2.8. RESISTENCIA
En cuanto a la resistencia las especies del genero
Brucella son bastante sensibles a los
desinfectantes comunes, a la luz y a la desecacin,
en cadveres o tejidos contaminados enterrados,
pueden resistir vivos por unos dos meses en clima
fro, mas mueren en 24 horas en verano o regiones
calientes. La pasteurizacin las mata y por tanto,
tambin la ebullicin (18).

CUADRO 1 Supervivencia de Brucella en el


medio ambiente.

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FUENTE:
http://www.youblisher.com/p/452241BRUCELOSIS-UNA-REVISION-PRACTICA/.

2.9. EPIDEMIOLOGA
Esta enfermedad es de gran importancia en salud
humana, por tratarse de una zoonosis. En
humanos, la infeccin ocurre por consumo de leche
sin pasteurizar, adems de que es de tipo
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ocupacional, ya que se observa en granjeros,


veterinarios y carniceros que manejan animales o
productos contaminados con la bacteria. La
infeccin afecta en todas las edades, pero persiste
mayormente en animales sexualmente maduros,
en los que las prdidas de productividad pueden
ser de gran importancia, principalmente por el
descenso de la produccin lctea. La infertilidad
como secuela aumenta el periodo entre lactancias
y el promedio entre partos, que puede prolongarse
durante varios meses. En vacadas destinadas a la
produccin de carne tiene gran importancia
econmica, ya que los becerros representan la
nica fuente de ingresos. Lo mismo ocurre por
desecho de vacas, tanto en hatos lecheros como
en productores de carne y en los casos de muertes
por metritis aguda seguida de retencin
placentaria.

Se observa la concentracin ms elevada de


Brucella en el contenido del tero gestante, en el
feto y en las membranas fetales; estructuras que
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deben considerarse como fuentes importantes de


la infeccin (16).

La brucelosis del ganado bovino en Ecuador se


encuentra ampliamente difundida, en grados
variables de intensidad, de acuerdo con los
diferentes sistemas de produccin ganadera
existentes (4).

CUADRO N 2 Diagnostico de Brucelosis


Bovina en el Ecuador.

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FUENTE:
http://www.agrocalidad.gob.ec/agrocalidad/images/
Agrocalidad/Contenido/SanidadAnimal/docs/progra
ma_nacional_brucelosis_bovina.pdf.

Grfico 2
Regiones epidemiolgicas de
brucelosis bovina en Ecuador.

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FUENTE:
http://www.agrocalidad.gob.ec/agrocalidad/images/
Agrocalidad/Contenido/SanidadAnimal/docs/progra
ma_nacional_brucelosis_bovina.pdf.

Regin Uno de Alta Prevalencia.

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Localizada en las provincias del norte de la sierra


ecuatoriana, es decir la cuenca lechera nacional,
integrada por: Carchi, Imbabura, Pichincha,
Cotopaxi, Tungurahua y Chimborazo, con una
prevalencia del 1.97 al 10.62%.

Regin Dos de Alta Prevalencia.


Conformada por las provincias del Litoral:
Esmeraldas, Manab, Santa Elena, Guayas, Los
Ros, El Oro y Santo Domingo de los Tschilas,
con una prevalencia entre 4.2% y 10.62%.
Regin Tres de Baja Prevalencia.
Conformada por las provincias de Bolvar, Caar,
Azuay y Loja, con una prevalencia de 1.3 al 2.6%.

Regin Cuatro de Baja Prevalencia.


No se dispone de informacin sobre las provincias
amaznicas, pero se estima que dados los
sistemas de produccin existentes, los niveles de
ocurrencia deben ser igualmente bajos.
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Regin Cinco Indemne.


En 1997 se realiz una encuesta serolgica por
muestreo en 114 propiedades de las islas Santa
Cruz, Isabela, San Cristbal y Floreana, resultando
507 muestras negativas a la prueba de rosa de
bengala, con cuya base se considera a las Islas
Galpagos como indemne a Brucelosis Bovina
(13).

2.10.

PERIODO DE INCUBACIN

El periodo de incubacin es de 30 a 60 das; sin


embargo, la infeccin en el ganado se
caracterizada por adoptar una forma crnica. Entre
los factores que favorecen su presentacin se
considera la edad, sexo, la etapa de gestacin, la
va de infeccin, la resistencia del hospedador y la
persistencia de la infeccin. Una vez infectados, los
animales excretan las bacterias durante los
procesos de aborto o parto, llegndose a encontrar
en cantidades de hasta 10 millones de Brucellas/g
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en rganos del feto abortado, placenta, exudado


vaginal, calostro y leche (19).
2.11.

PATOGENIA

Entre la tercera y la quinta semana se produce la


bacteremia, la cual puede durar de 1 da hasta 4
semanas, por lo general son slo 2. Luego las
bacterias se localizan en el tracto reproductivo en
tero y placenta (si hay preez) y los ganglios
adyacentes a estos rganos. Si el animal no est
preado la bacteria se ubica en ubre y sus ganglios
adyacentes (7).

Brucella abortus es una bacteria intracelular


facultativa, que puede crecer y sobrevivir en los
macrfagos y clulas epiteliales, tambin se ha
observado que en cepas virulentas tienen una capa
proteica protectora en su exterior, que les permite
vivir dentro de las clulas y producir infecciones
generalizadas crnicas. La B. abortus penetra en
clulas epiteliales del corion y se reproduce
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causando placentitis, tambin produce endometritis


con ulceraciones en la capa epitelial que reviste al
tero. Este microorganismo induce una respuesta
inflamatoria en las membranas, este proceso
obstruye la circulacin fetal y provoca cierto grado
de necrosis en los cotiledones; estos eventos
explican el aborto. Las lesiones en el feto incluyen
congestin
pulmonar,
acompaadas
de
hemorragias en el epicardio y cpsula esplnica,
pudindose aislar del feto cultivos puros del tubo
digestivo y de los pulmones. El aborto puede
producirse en los tres ltimos meses de gestacin.
Posterior al parto o al aborto, el microorganismo
no persiste mucho tiempo, permaneciendo algunos
das hasta que desaparece (16).

El microorganismo sobrevive en el sistema retculo


endotelial de la ubre, por lo cual secreta a travs de
la leche de ah la importancia de la deteccin de
animales infectados, ya que en salud publica esta
enfermedad es considerada una de la principales
zoonosis. Tambin se puede encontrar a la
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bacteria en higromas de las articulaciones, as


como en sinovitis, sangre (fase bacteriemia) del
epiddimo y del testculo en los cuales causa
severa inflamacin as como en la vescula
seminal, provocando esterilidad cuando afecta a
ambos testculo.
Los hatos susceptibles llegan a etapas crticas
cuando la mayora de las vacas se infectan y
abortan. Esta etapa se puede prolongar por un ao
o ms hasta llegar a una resistencia parcial y
abortan. Dicha resistencia depende de la
inmunidad celular, sustentada en la transferencia
pasiva de inmunoglobulinas que no confiere
inmunidad; los linfocitos T especficos responden a
los antgenos de B. Abortus y producen linfocitos
que, a su vez, activan a los macrfagos hasta el
punto de eliminar a la bacteria instalada
intracelularmente, de los que deduce que este no
es un proceso inmediato, sino que puede tardar
cierto tiempo, por lo que algunas vacas pueden
abortar dos o tres veces. A medida que la tasa de

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abortos disminuye, sta se limita a primerizas y a


los animales nuevos en el rebao (16).

2.12.

SIGNOS CLNICOS

2.12.1.

EN ANIMALES

HEMBRAS GESTANTES.
La B. abortus penetra en las clulas epiteliales del
corion y se reproduce, causando placentitis,
produce endometritis con ulceracin de la capa
epitelial que reviste al tero. Causa lesiones
placentarias caractersticas macroscpicamente
hay inflamacin que lleva a la necrosis
cotilednaria y proliferacin de tejido conectivo de
granulacin, con fibrosis y adherencias de los
cotiledones a la carncula materna. En el corion
nter cotiledneo hay edema con progresivo
agrandamiento placentario, con exudado de lquido
viscoso y adherente de color acastaada.
Microscpicamente se encuentran en el tero focos
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inflamatorios granulo matosos con clulas


epiteliales con el alrededor de un halo
linfoplasmocitario (18).

ANIMALES MACHOS.
El proceso de virilizacin que ocurre en el macho
es un fenmeno que da las condiciones propicias
para la infeccin de Brucella, ya que los
andrgenos y la vitamina D y progestgenos
constituyen sustancias orgnicas de accin
conjunta en el l orden de virilizacin, la
combinacin de todas esta hormonas en el macho
ofrecen las mismas caracterstica que la
progesterona en la hembra gestante.
La Brucella tiene cierto tropismo a situarse en el
aparato genital masculino (testculo, epiddimo
principalmente. La razn de este fenmeno est
basada en los mismos hechos que deciden el
tropismo Brucelar hacia la placenta, como apoyo a
tal afirmacin la riqueza en carbnico del epiddimo
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y tejido testicular , as como el metabolismo


hidrocarbonado de la glndula testicular y riqueza
en vitamina C (18).
Fotografa 1Aborto (izquierda) y placentitis por
brucelosis (derecha)

FUENTE:
http://sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_tec/inia_d
ivulga/id19/id19_navas.pdf.

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La brucelosis causa reduccin en la produccin de


leche entre 20 a 25%; 20 % a abortos 30% de
mortalidad de terneros (0 a 12 meses) de 20 a
25%; esterilidad 10% y el peso de 20% de prdida
de 10 a 15%. Como la brucelosis no se transmite
por lo general de una profilaxis ser humano a otro
(21).
2.12.2.

EN HUMANOS.

Los sntomas ms caractersticos son fiebre,


prdida de peso, escalofros, sudores, cefaleas,
anorexia, fatiga, astenia, mialgias y artralgias.
Aunque a veces la enfermedad puede cursar en
forma subclnica. Los sntomas se presentan
generalmente a las 2-3 semanas posteriores a la
infeccin pero en algunos casos pueden aparecer
ms tarde. Ocasionalmente, predominan los
sntomas comprometidos con un rgano en
particular y en ese caso la enfermedad se
considera localizada o con complicaciones. Las
complicaciones osteoarticulares, ocurren en el 30-

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40 % de los casos e incluyen artritis, sacroiletis,


bursitis y espondilitis (17).
Fotografa 2 Orquitis en Humanos, provocada
por una infeccin con Brucella.

FUENTE:
http://sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_tec/inia_d
ivulga/id19/id19_navas.pdf.

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2.13.

HALLAZGOS EN LA NECROPSIA

En vacas gestantes se encuentra placentitis


necrosante y endometritis ulcerativa, reacciones
inflamatorias en tejidos fetales abortados, en rara
ocasin se realiza la necropsia en animales
adultos. Los hallazgos en fetos incluyen: presencia
de lquido serohemorrgico en cavidades y
subepidermis, as como bronconeumona
acompaada de congestin, exudado fibrinoso e
infiltracin celular. En machos las vesculas
seminales y el epiddimo pueden estar engrosados
con reas de inflamacin intersticial crnica y
necrosis del epitelio tubular de las vesculas. El
epiddimo presenta granulomas con infiltracin de
clulas linfoides, plasmticas y epitelios que rodean
a las clulas gigantes, algunos granulomas se
calcifican. Las membranas basales de muchos
tbulos quedan engrosadas con la evidencia
ocasional de la supresin de espermatognesis. En
varios rganos fetales se observan lesiones
granulomatosas y necrosis focal, as como
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leptomeningitis granulomatosa.
presenta edema.

La

placenta

Histolgicamente la enfermedad se caracteriza por


infiltracin leucocitaria, y en glndula mamaria
observamos mastitis intersticial difusa leve con
acumulacin de linfocitos y clulas plasmticas
(10).

2.14.

INMUNIDAD FRENTE A BRUCELLA

2.14.1.

Inmunidad Natural

El ingreso de Brucella en el organismo induce la


activacin de los mecanismos de la respuesta
innata para reducir el nmero inicial de bacterias
promoviendo una respuesta Th1 en el hospedador.
Los macrfagos, los neutrfilos, las clulas
asesinas naturales (NK) y el complemento juegan
un rol clave en esta fase temprana de la respuesta
a la invasin frente a este microorganismo. Los
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receptores tipo Toll (TLR) tambin desempean un


papel importante en el inicio de la respuesta
inmune innata. Estos receptores presentes en las
clulas fagocticas profesionales reconocen
productos microbianos unindose directamente a
ellos e inducen seales intracelulares que activan
factores de transcripcin (como NF-kB) que
modulan la produccin de citoquinas(9).
2.14.2.

Macrfagos

Estas clulas juegan un rol central en la respuesta


inmune frente a Brucella, ya que actan como
clulas fagocticas profesionales y como clulas
presentadoras de antgenos. Procesan antgenos
en sus compartimentos intracelulares y los
presentan en 50 el contexto del Complejo Mayor de
Histocompatibilidad, a linfocitos T (35).
2.14.3.

Neutrfilos

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Los neutrfilos estn implicados en el desarrollo de


una defensa temprana frente a una infeccin por
Brucella mediantes la fagocitosis y posterior
destruccin del microorganismo. En primer lugar,
los neutrfilos son atrados al sitio de infeccin por
estmulos qumicos originados o derivados del
organismo para posteriormente fagocitar la
bacteria.
Una vez que el patgenos es fagocitado, se
desarrolla una serie de mecanismos destructivos
en el neutrfilos, con el fin de eliminar la bacteria,
mediante el aumento del consumo de oxigeno que
lleva a la aparicin del radical superxido perxido
de hidrgeno y otros radicales derivados del
oxgeno, junto con la activacin de la
mieloperoxidasa(30).
2.14.4.

Clulas Natural Killer

Forman parte de la primera lnea de defensa contra


Brucella, y una vez que son activadas pueden
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eliminar clulas infectadas, ya que la bacteria


puede impulsar la actividad ltica de las clulas
asesinas, estimulando la produccin de
interleuquina 12 (IL 12) por parte de las clulas
presentadoras de antgenos (35).
2.14.5.

Complemento.

El complemento tiene un papel muy importante en


la defensa contra Brucella cuando sta se
encuentra en el compartimiento extracelular y en
bajo nmero. Despus de la entrada de Brucella al
organismo, se activa el complemento por la va
alterna. Sin embargo, se ha demostrado que esta
va es incapaz de eliminar la cepa virulenta de
Brucella abortus. Por otro lado, la activacin de la
va clsica se inicia con la presencia de bajas
concentraciones de anticuerpos IgM e IgG antiLPS, y la va de las lectinas, mediada por la
protena fijadora de manosa, tambin se puede
activar, logrndose de esta forma la lisis bacteriana
(9).
2.14.6.

Linfocitos T CD4+ y CD8+

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Despus de la activacin de los macrfagos, las


clulas T inmaduras (Th0) se diferencian de clulas
efectoras y de memoria, que estn programadas
para secretar distintos patrones de citoquinas (13).

2.14.7.

Linfocitos T . Las clulas T

Representan una pequea poblacin de linfocitos,


con un patrn nico de reconocimiento de
antgenos. En humanos, las clulas T controlan
el aumento en el nmero de microorganismos ya
que secretan TNF- e IFN-, despus de ser
activadas por antgenos no peptdicos, en su
mayora fosfoantgenos, los cuales no son
presentados en el contexto del MHC. Mediante la
secrecin de estas citoquinas, activan la funcin
bactericida de los macrfagos y, adems, son
capaces de lisar clulas infectadas por citotoxicidad
directa in vitro. El rol de estas clulas in vivo, an
no ha sido determinado. Aunque se cree que son
parte de la inmunidad innata. En bovinos menores
de un ao, la poblacin celular predominante es la
de clulas T y no la de clulas T , lo que
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sugiere que el rol de este tipo celular es ms


significativo en la infeccin del ganado con
brucelosis. De todas maneras, en bovinos, la
produccin de IFN- por estas clulas es menor
que la producida por las clulas CD4+ (13).
2.14.8.

Linfocitos B

Los primeros anticuerpos que se generan en el


curso de una infeccin son de clase IgM, seguidos
de IgG e IgA. Se ha comprobado que tanto IgM
como IgG, en bajas concentraciones, son capaces
de promover la lisis de Brucella a travs de la va
clsica del complemento. Tambin se han
encontrado ttulos elevados de IgG anti-SOD Cu-Zn
en animales infectados. Pueden aparecer, dentro
de la clase IgG, anticuerpos bloqueantes o no
aglutinantes, tambin llamados asimtricos, en
especial en infecciones crnicas, donde suelen
alcanzar ttulos elevados. Estos anticuerpos se
diferencian de los anticuerpos completos en ciertas
propiedades tanto in vitro como in vivo, por
ejemplo, la incapacidad de activar complemento
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por cualquiera de las vas o dar adecuadas


reacciones de aglutinacin (9).
2.15.

DIAGNSTICO

El diagnstico de la brucelosis animal se basa en el


uso de pruebas de laboratorio directas para el
aislamiento bacteriolgico o pruebas indirectas
para la demostracin de respuestas serolgicas o
celulares especficas. Sin embargo, slo las
pruebas directas confirman la presencia de la
infeccin ya que en el resto de los test la presencia
de Ac o la existencia de una respuesta celular en
un determinado animal no significa necesariamente
que ste sufra una infeccin activa por Brucella
spp., pero la normativa que regula los programas
de erradicacin determina que todos los animales
positivos a alguna prueba diagnstica oficial, al
igual que todos los que tuvieron contacto directo o
indirecto con ste, deben ser considerados
sospechosos (36).
2.16.

DIAGNSTICO DIFERENCIAL

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Se debe considerar las siguientes enfermedades


abortivas:
Leptospirosis.
Rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR).
Tricomoniasis.
Campilobacteriosis.
Listeriosis.
Aborto epizotico (espiroquetosis).
Vibriosis (16).
2.17.

TCNICAS DE DIAGNSTICO

2.17.1.

Aislamiento Bacteriano

El diagnostico inequvoco de la brucelosis es el


directo, por cultivo a partir de leche o tejidos del
animal e identificacin de la bacteria. Las brucellas
son bacilos cortos, Gram negativos de 0.5 x 0.5
hasta 1.5 mm de largo. Al emplear la tincin de
Zielh-Neelsen modificada, las brucellas se tien de
color rojo y se observa la misma morfologa.

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El aislamiento de B. abortus puede llevarse a cabo


en medios selectivos y enriquecidos, aunque B.
abortus crece bien en Agar sangre, los
contaminantes presentes en el medio pueden
crecer ms rpidamente y enmascarar la presencia
de aquella. El medio de eleccin utilizado es agarTriptosa Suero (TSA) con adiccin de antibiticos.
La bacteria es de lento crecimiento y normalmente
las colonias caractersticas se ven despus de 3-5
das de inoculacin enmicroaerofilia (10 % de
CO2) (37).
2.17.2.

Pruebas serolgicas

Ninguna prueba serolgica aislada es adecuada en


cualquiera de las situaciones epidemiolgicas,
presentando limitaciones en el diagnstico de
animales individuales. Se deben considerar todos
los factores que influyen en la relevancia del
mtodo de prueba y de sus resultados para una
aplicacin o interpretacin diagnstica especfica.

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Debe resaltarse que la prueba de la


seroaglutinacin lenta en tubo (SAT) se considera
inadecuada a efectos del comercio internacional.
La prueba de la fijacin del complemento (FC) es
ms especfica que la SAT para el diagnstico y
adems posee un sistema estandarizado de
unidades. Las caractersticas diagnsticas de
algunos enzimoinmuno ensayos (ELISA) y la
prueba de la polarizacin de fluorescencia (FPA)
son similares o superiores a la FC y, como son ms
fciles de realizar tcnicamente y ms
consistentes, es preferible su utilizacin. Se ha
comparado el rendimiento de algunas de estas
pruebas. Para el control de la brucelosis en un pas
o regin, son adecuadas para el anlisis las
pruebas con antgeno tamponado de Brucella es
decir, la prueba con rosa de bengala (RBT) y la
prueba de aglutinacin tamponada en placa
(BPAT), as como ELISA y FPA. Las reacciones
positivas deben volverse a comprobar utilizando
una estrategia confirmativa adecuada (28).

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2.17.2.1. Prueba Rosa de Bengala.


Esta prueba es una prueba sencilla de aglutinacin
puntual que utiliza antgeno coloreado con rosa de
bengala y tamponado a pH bajo, normalmente 3,65
+ 0,05 (28).
Fotografa 3 Prueba Rosa de Bengala.

FUENTE:
http://www.agrocalidad.gob.ec/agrocalidad/images/
Agrocalidad/Contenido/SanidadAnimal/docs/progra
ma_nacional_brucelosis_bovina.pdf.

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2.17.2.2. Prueba fijacin de complemento.


Esta tcnica fue aplicada al diagnstico de la
brucelosis tanto humano como animal en tiempos
remostos, sin embargo recientemente se ha
extendido su uso en especial para diferenciar las
reacciones dudosas. En la actualidad para detectar
animales infectados se considera esta prueba ms
sensible que las otras pruebas de aglutinacin por
que dan menos reacciones inespecficas y por las
introducciones que se vienen dando en modificar la
tcnica en general, siendo una de las
modificaciones de Sapulin y Robinson (1951) que
es una modificacin de la tcnica de Colmes
basada en la fijacin al frio y 100% de hemolisis.
As como el uso de tcnicas cuantitativas basadas
en el 50 % de hemolisis que se estn extendiendo
cada da ms. Se ha demostrado que la
correlacin entre la infeccin y la reaccin positiva
es ms estrecha y coincidente en esta prueba que
en la seroaglutinacin. Adems que los anticuerpos
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heretoespecificos producen menos problemas que


en la aglutinacin
(1).
2.17.2.3. Elisa
ELISA indirecto (ELISA-I)
Permite detectar la presencia de anticuerpos contra
Brucella abortus en animales domsticos y
salvajes. La tcnica consiste en la absorcin del
antgeno lipopolisacaridos liso (LPS) sobre una
matriz solida (Microplaca de 96 pocillos), a
continuacin se aade la dilucin de los sueros a
analizar y contrales y se incuban durante treinta
minutos. Despus del periodo de incubacin, la
microplaca se lava y a seguir se aade el
anticuerpo monoclonal de ratn anti IgG1 bovina
conjugado con enzima peroxidasa de rebao
rustico. Se incuba nuevamente la placa treinta
minutos. El paso final de la prueba es la adicin de
la solucin substrato/cromgeno. Despus de un
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periodo de tiempo, la reaccin se frena y se mide


fotomtricamente.
Si el suero problema contiene anticuerpos anti
Brucella (suero positivo), estos se adhieren al
antgeno LPS, y al conjugado a la IgG, por lo tanto
al agregar la solucin Substrato/Cromgeno se
produce un cambio de color cuya intensidad est
directamente relacionada con la concentracin de
anticuerpos presente en la muestra (34).
ELISA competitivo (ELISA C)
El ELISA-c utilizado (SVANOVIR Brucella
abortus, SvanovaBiotech, Suecia) fue diseado
para
detectar
anticuerpos
especficos
contra Brucella abortus, pudiendo distinguir entre
animales infectados y animales vacunados con
cepa 19, El procedimiento de la prueba se ajust a
lo sealado por el fabricante. La densidad ptica
fue medida en un fotmetro Elx 800 (Bio-Tek
Instruments, EUA) a 450 nm. Tras el anlisis, se
calcularon los valores de densidad ptica (DO) para
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los controles y las muestras, que conllevaron al


porcentaje de inhibicin (PI) para las muestras y
para los controles de la siguiente manera: PI= 100
(DO del control o muestra X 100 / DO del Control
del Conjugado) (32).
2.17.2.4. Prueba
de
fluorescencia.

polarizacin

de

La tcnica de FPA permite medir anticuerpos


infecciosos contra Brucella abortus en bovinos.
Tambin ha sido desarrollada y validada para
porcinos, ovinos, caprinos, bisontes y ciervos.
Esta prueba posee varias ventajas sobre otras
tcnicas serolgicas, incluyendo la relacin costoefectividad, velocidad, simplicidad y adaptacin de
su uso a campo. Su especificidad, sensibilidad y
repetibilidad es igual o mayor a las dems pruebas
serolgicas.
Esto significa que el FPA raramente clasifica
animales no infectados como positivos (alto grado
de especificidad) y que raramente clasifica
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animales infectados como negativos (alto grado de


sensibilidad) (3).
2.17.2.5. Otras pruebas
Prueba cutnea de la brucelosis

Procedimiento de la prueba. Se inyectar por va


intradrmica un volumen de 0,1 ml de alrgeno de
la brucelosis en el pliegue caudal, en la piel de la
ijada o en un lado del cuello. La prueba se leer
una vez transcurridas entre 48 y 72 horas. Antes de
la inyeccin y en el momento de la lectura, se
medir con un pie de rey el grosor de la piel en el
lugar de la inyeccin.
Interpretacin de los resultados: Las reacciones
fuertes se reconocen fcilmente por la inflamacin
y la induracin locales. Se considerar que la
reaccin a la prueba cutnea de la brucelosis es
positiva si se produce un aumento del grosor de la
piel de entre 1,5 y 2 mm (24).
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I-ELISA en leche
Las muestras de leche colectadas para anlisis
mediante ELISA-i requirieron ser previamente
descremadas (centrifugacin a 1500 g por 10
minutos). Para garantizar su preservacin se utiliz
cida sdica al 0,2%, previo a su congelamiento.
La tcnica se realiz siguiendo las indicaciones del
fabricante, utilizando microplacas previamente
sensibilizadas con el antgeno inactivado,
monofsico de Brucella abortus (cepa 19)
inmovilizado sobre policubetas de poliestireno de
96 pocillos. Se depositaron 200 L de las muestras
de leche en cada uno de los pocillos por duplicado.
Subsiguientemente, fueron incubados por 90
minutos a temperatura ambiente en cmara
hmeda. Luego de la fase de lavado, se
depositaron 200 L de conjugado monoclonal AntiIgGperoxidasa bovino diluido 1:200 en cada uno de
los pocillos e incubado por 1 hora a temperatura
ambiente.
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Posterior al segundo lavado, se agregaron 200 L


del cromgeno proporcionado por el fabricante.
Como controles positivos y negativos se utilizaron
los proporcionados por el kit. Los resultados fueron
ledos en un espectrofotmetro Elx 800 a 405 nm.
Las densidades pticas (DO) de las muestras
problemas en duplicado fueron promediadas y
corregidas por sustraccin de la DO del control
negativo, estas fueron divididas por las DO de los
controles positivos por 100. Se consideraron
positivas (POS) aquellas sobre 100%, positivas
dbiles o dudosas, entre 70% y 100% y negativas
(NEG), bajo 70% (32).
Prueba de Rivanol
Esta prueba diagnstica tiene el mismo principio de
la prueba de tarjeta, solo que se le adiciona una
sustancia (lactato ) rivanol para que se precipite los
anticuerpos IgM y el sobrenadante de esto
contendr los anticuerpos IgG que sern
aglutinados con los antgenos en la prueba,
reaccionando solo aquellos sueros con anticuerpos
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de infeccin. Pero como la vacunacin en un


animal utilizando cepa 19 genera al principio
anticuerpos de los dos tipos y los tipos IgG
perduran aproximadamente 12 18 meses, en este
animal estar dando reacciones positivas por este
periodo en la prueba de tarjeta y a rivanol, pero
segn el ttulo de anticuerpos y la fecha de
muestreo con fecha de vacunacin se dar el
dictamen. Es aqu donde la prueba de rivanol es
importante para detecte animales con anticuerpos
de vacunacin y no de infeccin. Cabe mencionar
que esto ocurre solo si el animal fue vacunado con
la cepa 19, pero si un animal fue vacunado con
RB51 la prueba rivanol no diferencia estos
anticuerpos por no tener especificidad contra esta
cepa y solo detectara animales con infeccin al
igual que tarjeta (15).
Prueba del Anillo de Leche
La prueba del anillo en leche (PAL) pertenece al
grupo de pruebas indirectas empleadas en el
Diagnstico Presuntivo de la brucelosis bovina,
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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dado que evidencia o detecta anticuerpos


aglutinantes anti-brucella frente a la fraccin O de
la cadena de lipopolisacridos de la membrana
externa del agente etiolgico. La prueba del anillo
en leche se emplea frecuentemente en reas libres
y de control de la enfermedad, ayuda a descubrir
establos y/o hatos infectados, incluso es usada
ampliamente en Vigilancia Epidemiolgica porque
permite controlar peridicamente la brucelosis en
los establos, adems contribuye a descubrir si la
infeccin se ha reinstalado en el establecimiento
lechero. La prueba del anillo en leche que es til en
ganado bovino, pero resulta ineficaz en los
pequeos rumiantes (2).
Las muestras deben ser mantenidas en
refrigeracin a una temperatura de 4 a 6C, hasta
72 horas de su procesamiento. Una hora antes de
la prueba, las muestras se llevaron a temperatura
ambiente, tanto las de leche como del antgeno,
luego se agitaron invirtiendo varias veces el tubo de
50 mL. Posteriormente, se coloc un mL de la
muestra en un tubo 12 x 75 mm, se agreg una
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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gota (0,03 mL) de antgeno a cada tubo, se agit


nuevamente y se incub a 37C durante una hora.
Al concluir este tiempo se realiz la lectura de la
muestra, catalogndose de la siguiente manera:
Negativo: Anillo de crema blanco, columna de
leche azul.
+ Anillo de crema y columna del mismo color.
++ Anillo de crema de color ms pronunciado que
la columna de leche
+++ Anillo de crema, azul oscuro y columna de
leche y la columna de leche, con un poco de color
azul.
++++ Anillo de crema, azul oscuro y columna de
leche blanca (25).
Fotografa 4 Reaccin de la Prueba del Anillo de

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Leche.

FUENTE:
http://www.veterinariargentina.com/revista/2011/02/
prueba-del-anillo-en-leche-para-la-vigilanciaepidemiologica-de-brucelosis-bovina-lima-peru/.
CUADRO 3
Pruebas de diagnstico para
Brucella abortus.

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FUENTE:
http://sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_tec/cenia
phoy/articulos/n4/texto/ncandelo.htm.
2.18.
TRATAMIENTO
No existe tratamiento curativo para este
padecimiento en animales.
Tratamiento en Humanos

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La cronicidad puede ser debida a que la Brucella


es un organismo hbil para sobrevivir y
multiplicarse dentro de las clulas del sistema de
defensa del cuerpo. Esto explica la tendencia de
esta enfermedad a tener un curso clnico
prolongado con recadas que van del 4 al 41%.
En pediatra se necesita la administracin
prolongada de antiomicrobianos para obtener la
curacin. Las recidivas por lo comn no
dependen de la generacin de resistencia por
parte de Brucella, sino ms bien de la
interrupcin prematura del tratamiento (24).
2.19.

PREVENCIN

La Vacuna Cepa-19
Esta vacuna, que ha servido de base en todos los
programas de erradicacin de la brucelosis bovina
en varios pases es un cultivo vivo de Brucellas,
cada dosis contiene entre 10-60 x 109 CFU, se
presenta comercialmente en forma liofilizada. . La
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presencia de LPS con una cadena O en la vacuna


CEPA 19 explica la aparicin y persistencia de
anticuerpos en suero, despus de la
administracin de esta vacuna. Se recomienda
aplicar en terneras de 3-6 meses de edad en dosis
de 2 ml (10-60 x 109), va subcutnea en la tabla
del cuello.
Las ventajas que presenta el uso de este biolgico
es que requiere inoculacin nica en toda la vida
del animal, alcanza una respuesta inmunitaria
rpida y no presenta reacciones locales. Entre las
desventajas, presenta una reaccin aglutino
gnica, una infeccin patognica ocasional
persistente y requiere para su conservacin una
cadena de fro rigurosa (4).
La vacuna RB-51
Es una vacuna viva, atenuada, liofilizada,
genticamente estable. Carece de la Cadena O
de lipopolisacridos de la superficie bacteriana,
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que es la que determina la aparicin de los


anticuerpos detectables en las pruebas
serolgicas tradicionales y que interfieren en el
diagnstico de la enfermedad.
La RB51 es segura a toda edad, pudindose
aplicar en terneras desde los cuatro meses.
Admite una revacunacin en adultos,
obtenindose as una inmunidad ms slida y
duradera, a diferencia de la Cepa 19. Al permitir
la revacunacin, se reduce la posibilidad de tener
animales mal inmunizados por fallas en la primera
vacunacin. La RB51 es similar a la Cepa 19, pero
tiene la caracterstica de no dar anticuerpos que
interfieren en el diagnstico de la enfermedad
(19).
2.20.
PROGRAMAS
ERRADICACIN

DE

CONTROL

El control y la erradicacin de la brucelosis


requieren el poner en ejecucin en forma
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coordinada por lo menos las siguientes cuatro


medidas:
Vacunacin,
Diagnstico,
Eliminacin de reactores.
Vigilancia epidemiolgica.
Si una de estas acciones falla o solo se cumple
parcialmente, la enfermedad permanece como
problemtica
constante
o
emergente.
Actualmente, se dispone de herramientas que
permiten cumplir la primera accin mediante la
aplicacin reglamentaria de una vacuna, cepa 19
o cepa RB51 (8).
Estrategia Nacional
El xito del Programa se basa en la ejecucin de
estrategias diferenciales, para cada una de las
regiones epidemiolgicas sealadas, las que sin

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embargo tienen aspectos comunes de accin, que


se indican a continuacin:
La vacunacin con vacuna Cepa 19 se aplicar
en terneras nacidas en la propiedad, una sola
vez a la edad de 3-6 meses.
La vigilancia epidemiolgica se basar en el
diagnstico de predios y animales mediante las
pruebas de Ring-Test en leche y de aglutinacin
en suero sanguneo (Rosa de Bengala) y como
pruebas confirmatorias el ELISA Competitivo (cELISA) y otras pruebas autorizadas por la OIE.
La eliminacin de vacas positivas guardar
flexibilidad en atencin a los perodos de
lactancia o gestacin, para luego ser destinadas
a sacrificio sanitario en camales autorizados
para el efecto.
La compra de hembras con fines de reemplazo
se har solo de predios libres y con resultados
negativos a pruebas serolgicas. Vacas en
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produccin infectadas se separarn del resto de


bovinos sanos en la propia finca hasta terminar
la lactancia, momento en el que se destinar a
sacrificio en camal sanitario.
La compra de hembras con fines de reemplazo, se
har solo cuando estas hayan sido vacunadas a la
edad de terneras (3 a 6 meses) y presenten
resultados
negativos
a
la
serologa
complementaria, 30 das previos al ingreso de la
finca (4).
En el ao 2000, el MAG SESA, propuso las
siguientes estrategias para prevenir, controlar y
erradicar la Brucelosis de los hatos bovinos:
Vacunar obligatoriamente a todas las terneras
hembras entre los 4 y 8 meses de edad, con
vacuna Brucella abortus.
En reas de mediana y alta prevalencia
debern revacunar a los 15 meses a todas las
hembras utilizando la misma cepa.
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Realizar los muestreos sanguneos en


animales adultos sin vacunar en las fechas
preestablecidas, segn el esquema y situacin
sanitaria establecida de cada fin
Los animales positivos a las pruebas
serolgicas, debern identificarse mediante
marca de fuego con la letra B en la cara
(cachete) de lado izquierdo y aislarse de
inmediato del resto del rejo, hasta que sean
eliminados de la finca con destino al camal.
Las hembras que aborten debern aislarse del
resto del hato, informando al Mdico
Veterinario responsable, para que en un
transcurso de 10 das despus del aborto,
tome las muestras pertinentes, para laboratorio,
con el fin de realizar el diagnstico definitivo.
Si el diagnstico arroja un resultado positivo a
Brucelosis, las vacas debern continuar aisladas
hasta su sacrificio. Los fetos abortados debern
enviarse de inmediato al laboratorio de diagnstico
para su estudio (35).
3. MATERIALES Y MTODOS
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3.1.

Materiales

3.1.1. Materiales de campo


3.1.1.1. Materiales fsicos:
Overol
Botas
Guantes
Tubos vacutainer 10 ml
Tubos estriles 5ml
Agujas vacutainer
Capsulas vacutainer
Jeringas 10ml
Termo refrigerante
Algodn
Gradilla
Gel refrigerante
Etiquetas
Equipo para sujecin de animales (sogas,
nariguera)
Cmara fotogrfica
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Termo refrigerante.
Tubos eppendorf
GPS
3.1.1.2. Materiales qumicos
Alcohol
3.1.1.3. Materiales biolgicos
Suero bovino
3.1.2. Materiales de Laboratorio
Materiales fsicos:
Para Rosa de Bengala
Micropipetas monocanal de precisin a volumen
fijo o variable adecuadas para dispensar 30, 10100 ul
Placas de vidrio cuadriculada (consta de 60
cuadrculas de 3.5 cm2).
Aglutinoscopio con fondo obscuro y luz blanca
Refrigeradora de 0 C a 4 C
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Congelador de -20 C
Agitador de tubos (vrtex)
Micropipetamonocanal ajustable de 5 l a 50 l.
Centrifuga para 25 tubos de 10 a 15 cc.
Termoregistradores tipo Rogget con conexin
USB
Termoregistradores de ambiente
Cronmetro de laboratorio (Timer).
Punteras de pipetas desechables para
micropipetas volumen 10-100 ul.
Racks para punteras
Fundas de auclavado volumen variable
Basureros con identificacin de basura comn y
de riesgo biolgico.
El gotero incluido proporciona una gota de 30-40
ul.
Palillos de madera (mondadientes).
Crioviales
Para Elisa de competencia

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Micropipetas monocanal de precisin a volumen


fijo o variable adecuadas para dispensar 1, 10,
100 y 200 ul
Micropipetas multicanal de precisin a volumen
fijo o variable adecuadas para dispensar 10, 100
y 300 ul
Agitador de placas con temperatura y
cronmetro regulable.
Centrifuga para 25 tubos de 10 a 15 cc.
Lector de ELISA Multicanal equipado de filtros
de 450 y 650 nm.
Lavador de placas automtico, semiautomtico
o manual.
Canaletas plsticas para dispensar soluciones.
Balanza Analtica calibrada
Refrigeradora de 0 C a 4 C
Congelador de -20 C
Agitador de tubos (vrtex).
Termoregistradores tipo Rogget con conexin
USB
Termoregistradores de ambiente

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


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Planchas de calentamiento con sistema de


agitacin.
Cronmetro de laboratorio (Timer).
Punteras de pipetas desechables para
micropipetas y e volumen variable.
Racks para punteras
Probeta graduada de 500 ml para la preparacin
de la solucin de lavado.
Pipeta volumtrica de 10 ml
Pipeta graduada de 25 ml
Pipetas graduada de 10 ml sin clase
Erlenmeyer de 300 500 ml
Tubos o placas plsticas para dilucin de las
muestras con volumen de hasta 500 ul.
Fundas de auclavado volumen variable
Basureros con identificacin de basura comn y
de riesgo biolgico
Vasos de precipitacin de 50, 100 ml
Magnetos para agitacin de diluciones.
Crioviales

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Materiales qumicos:
Para Rosa de Bengala
Reactivo de Rosa de Bengala
Suero de referencia o Control Positivo
Suero de referencia o Control Negativo
Para Elisa de competencia
Microplacas tapizadas con el Lipopolisacrido
liso (LPS) de Brucellaabortus.
Solucin mAb (Anticuerpos monoclonales de
ratn) liofilizada, para reconstituir.
Conjugado HRP Listo para usar. (HRP
Conjugate)
Solucin de lavado concentrada (PBS
Tweensolution 20 X.)
Solucin Sustrato (Substratesolution)
Solucin Buffer para dilucin (Sampledilution
Buffer)
Solucin de parada. (STOP solution)
Control POSITIVO (Positive control serum)
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Control Negativo (Negative control serum)


Control dbil POSITIVO (Weak Positive control
serum)
Materiales biolgicos
Suero bovino
3.1.3. Materiales de escritorio:
hojas de campo
papel
esferos
computadora
calculadora
USB
Cuadernos
3.2.

Mtodos

3.2.1. El rea de estudio:

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Esta tesis se realizar en la parroquia de Ingapirca


de la provincia de Caar.

Ubicacin Geogrfica:

Provincia:
Parroquia:
Altitud:

Caar
Ingapirca
3120msnm

Superficie:
Clima:
Temperatura:

240km
templado
11.8 C

Coordenadas:

2330N - 78520 E

FUENTE:
Municipio
(http://www.canar.gob.ec/).

de

Caar

3.2.1.1. Factor de Estudio


Prevalencia de brucelosisbovina en la parroquia
Ingapirca para lo cual se tomaron muestras
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serolgicas, que se estudiaron mediante 4


variables: sexo, edad, procedencia y sistema de
reproduccin.
3.2.2. De campo
Las muestras serolgicas se obtuvieron de la vena
caudal de la base de la cola de los especmenes o
de la vena yugular, directamente a travs de tubos
vacutainer, que fueron etiquetados y almacenados
inmediatamente en los termos refrigerantes, para su
transporte. Estas muestras fueron previamente
centrifugadas en el laboratorio clnico de la Facultad
de Ciencias Agropecuarias, y as se obtuvo 1 cc de
suero sanguneo que fue enviado a los laboratorios
de Agrocalidad de la ciudad de Quito para su
procesamiento.

3.2.3. De Laboratorio
3.2.3.1. Rosa de Bengala:
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Preparacin de reactivos:
1. El antgeno de RB (Rosa de Bengala) debe
mantenerse en refrigeracin a una temperatura
de 4C a 8C. Se debe evitar la congelacin del
RB, porque queda inutilizado para la prueba.
2. Tanto el antgeno como el suero deben
mantenerse a temperatura ambiente por lo
menos una hora antes de realizar la prueba.
3. Los goteros deben lavarse con agua destilada al
terminar la jornada de trabajo.
4. Las muestras que reaccionen despus del tiempo
establecido de lectura no se toman en cuenta.
5. El Reactivo de RB: debe sacarse de la
refrigeradora y equilibrarse a temperatura
ambiente de 18 C a 25 C al menos una hora
antes de ser utilizado
6. Las muestras y sueros control: debe sacarse de
la refrigeradora y equilibrarse a temperatura
ambiente de 18 C a 25 C.
7. Una vez temperado el reactivo de RB se debe
agitar suavemente el frasco antes de su
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
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utilizacin para
resuspendan(33).

que

las

bacterias

se

Realizacin:

1. Reactivo de RB: debe sacarse de la refrigeradora y


equilibrarse a temperatura ambiente de 18 C a 25
C al menos una hora antes de ser utilizado
2. Muestras y sueros control: debe sacarse de la
refrigeradora y equilibrarse a temperatura
ambiente de 18 C a 25 C.
3. Una vez temperado el reactivo de RB se debe
agitar suavemente el frasco antes de su utilizacin
para que las bacterias se resuspendan.
4. Quitar el tapn al frasco del reactivo de RB y se le
coloca el gotero calibrado.
5. Depositar sobre una placa cuadriculada de vidrio
30 l del suero a probar y tambin 30 l del
antgeno de Rosa de Bengala (1 gota). Anotar la
fecha de la ejecucin del ensayo, nmero de
protocolo y las muestras a analizar en LANASEVEPT-001-RE-001 Hoja de Trabajo para Rosa de
Bengala (RB).
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6. Mezclar cuidadosamente el suero con el antgeno


de RB utilizando un palillo de madera por muestra.
7. Agitar la placa en forma rotativa y lentamente e
incubar a temperatura ambiente de 18 C a 25 C
durante exactamente 4 minutos.
8. Realizar el mismo protocolo anteriormente descrito,
para los sueros control positivo y negativo.
9. Registrar resultados en LANASEVE-PT-001-RE001 Hoja de Trabajo para Rosa de Bengala (RB).
Tratamiento de resultados

Positivas: Cuando se forman grumos, aun siendo


finos (no confundir con aglutinaciones
inespecficas producidos por impurezas, hemlisis,
etc.). Estas muestras deben someterse a las
pruebas confirmatorias.
Negativas: Cuando la mezcla suero-antgeno es
de turbidez homognea y sin grumos. Estas
muestras se informan como negativas y no se
realizan las pruebas complementarias (33).
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3.2.3.2. Elisa de competicin:


Preparacin de reactivos:

1. Preparacin de la Solucin de Lavado: diluir la


solucin concentrada PBS-Tween 20x con agua
destilada segn la cantidad necesaria. Ejemplo:
25ml de PBS-Tween 20x en 475 ml de agua
destilada, mezclar.
2. Preparacin de la solucin mAb: reconstituir el
mAb liofilizado con 6 ml de la solucin buffer para
dilucin. Mezclarlo suavemente, NO USAR
VORTEX.
3. Dilucin de las muestras y controles directamente
en la placa.
4. Antes de utilizar los reactivos ponerlos a
temperatura
ambiente,
dos
horas
y
homogenizarlos agitando moderadamente.
5. Reservar el nmero de microplacas tapizadas
necesarias para el anlisis y establecer el plan de
distribucin de las muestras con ayuda del
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formulario LX/FOR/039 Template ELISA Como se


detalla a continuacin:
1 2 3
4 5 6 7 8 9 1 1 1
0 1 2
A C M M9
P 1
B C M M
P 2 10
C C M .
N 3
D C M .
N 4
E dP M .
5
F dP M .
6
G Cc M .
7
H Cc M .
8

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6. Colocar 45 ul de solucin buffer para dilucin en


cada uno de los pocillos que van a ser usados
tanto para controles como para muestras.
7. Los controles que se van a procesar son: Control
POSITIVO, dbil POSITIVO,
8. Negativo y control de conjugado.
9. Adherir 5 ul de suero control POSITIVO (CP), dbil
POSITIVO (dP) y Negativo (CN) en cada uno de
los respectivos pocillos antes mencionados con la
pipeta de volumen variable segn los lineamientos
del proceso operativo LX/POE/034 Utilizacin de
pipeta automtica de volumen variable. Correr los
controles por duplicado.
10. Adherir 5 ul de la solucin buffer para dilucin en
los dos pocillos designados para el control de
conjugado (Cc) con la pipeta de volumen variable
segn los lineamientos del proceso operativo
LX/POE/034 Utilizacin de pipeta automtica de
volumen variable.
11. Adherir 5 ul de las muestras (M1, M2 ) de suero
a analizar en cada uno de los pocillos designados
con la pipeta de volumen variable segn los
lineamientos del proceso operativo LVX/POE/034
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Utilizacin de pipeta automtica de volumen


variable.
Realizacin:
1. Para cada uno de los pasos en que haya que
aadir un reactivo se debe utilizar la pipeta
automtica multicanal segn el POE LVX/POE/028
(Utilizacin de pipeta automtica multicanal).
2. Adherir 50 ul de la solucin mAb en cada uno de
los pocillos usados tanto en controles como en
muestras de suero.
3. El tiempo de diferencia entre controles/muestras y
la adicin de la solucin mAb no debe exceder los
10 minutos.
4. Tapar la placa y llevarla al lector de ELISA, en la
opcin de mezcla durante 5 minutos.
5. Incubar a temperatura ambiente (18 - 25 C)
durante 30 minutos.
6. Pasado el tiempo de incubacin lavar la placa con
solucin de lavado (numeral 4.5) cuatro veces,
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secndola con golpes fuertes sobre papel toalla


para absorber finalmente todo su contenido.
7. Adherir 100 ul de Conjugado HRP en cada uno de
los pocillos. Tapar la placa e
incubar a
temperatura ambiente (18 - 25 C) durante 30
minutos.
8. Pasado este tiempo de incubacin repetir el lavado
como se indica en el numeral
9. Adherir 100 ul de solucin sustrato en cada pocillo
e incubar durante 10 minutos a temperatura
ambiente (18 - 25 C). Activar el tiempo del
cronmetro desde que se aade el sustrato en el
primer pocillo.
10. Finalmente aadir 50 ul de la solucin de
interrupcin en cada uno de los pocillos en el
mismo orden en que se coloc la solucin sustrato
y mezclar suavemente.
11. Medir las densidades pticas (DO) en Lector para
ELISA a 450 nm siguiendo los lineamientos del
POE LVX/POE/025 (Lector de Elisa Multicanal).
Tener la precaucin de leer la placa durante los
primeros 15 minutos despus de haber aadido la
solucin de interrupcin.
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
85

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12. Calcular los resultados en la hoja de clculo


diseada especficamente para la prueba de
Brucella por la tcnica Elisa Competitivo, en
EXCEL en el archivo LIVEX 2008, clculos, que se
encuentra en la PC de LIFEX, o a su vez de forma
manual.
Tratamiento de Resultados
El test es vlido si los controles se encuentran en los
siguientes lmites:
Controles
OD
Control
Conjugado

del 0,752,0

PI Control Positivo

90-110

PI Control Positivo Dbil

35- 65

PI Control Negativo

-10- 15

Si el test segn alguno de los parmetros


anteriores resultara invlido, se debe repetir el
ensayo.
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
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Muestras
Para clasificar una muestra como positiva o
negativa seguir el siguiente parmetro:

PI

ESTATUS

<
%

30 NEGATIV
A

>= 30 POSITIVA
%
Tanto el valor de densidad ptica del control de
conjugado como el PI de los controles POSITIVOS
y Negativos pueden variar segn el nmero de lote,
por lo que se recomienda verificar estos valores en
el inserto que viene con el kit.

Calcular el porcentaje de inhibicin (PI), tanto de


los controles POSITIVOS, como Negativo, usando
la siguiente frmula:
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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PI = 100 (Promedio D.O muestras/controles x 100)


Promedio D.O Control de conjugado Cc

Informe de Resultados
Los resultados obtenidos se reportan en el
formulario LVX/FOR/006 Resultados de anlisis
por la tcnica de ELISA el cual est diseado para
dicha prueba.
Por medio de la tcnica ELISA COMPETITIVO
para Brucella abortus , valores de PI = a 30 se
consideran POSITIVOS a anticuerpos contra
Brucella abortus indicando que el animal est
infectado (33).
3.3. Mtodo estadstico
El tipo de muestreo se hizo por reas o
conglomerados y al azar.
Para obtener la muestra se utiliz una formula
estadstica. Ver anexo 4.
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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88

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4. RESULTADOS Y DISCUSIN
4.1. RESULTADOS.
La prevalencia de brucelosis Bovina fue del
0,021%,en la parroquia de Ingapirca, se procedi a
realizar pruebas de frecuencias relativas y grficos.
Los anlisis estadsticos por su baja prevalencia no
se pueden efectuar.
Las variables a evaluarse en la presente investigacin
fueron:

Sexo: 1 macho y 6 hembras de cada finca.


Edad: machos y hembras > 12 meses.
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Procedencia: lugar del rea o conglomerado


(comunidad).
Sistema de reproduccin (para hembras): natural,
artificial, mixta
Los cuadros que se presentan se tabularon con los
datos que se obtuvieron en la investigacin.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

C U A D R O 4 .- F re c u e n c ia s re la tiv a s p o r e d a d d e l n m e ro y p o rc e n ta je d e lo s c a s o s
p o s itiv o s y n e g a tiv o s d e B ru c e lo s is b o v in a e n la s 4 re a s e s tu d ia d a s d e la
p a rro q u ia In g a p irc a , A g o s to O c tu b re 2 0 1 2 .

C lase

C om unidade s

E da d/a os

re a 1

re a 2

SU B T O T AL
re a 3

re a 4

T O T AL

Fre c ue nc ia s R e la tiva s

P%

N%

P%

N%

P%

N%

P%

N%

P+ N

2-3

0,00

18

36,73

0,00

16,33

0,00

11

22,45

0,00

12

24,49

0,00

49

100,00

49

4-5

0,00

17,31

0,00

17

32,69

3,85

10

19,23

0,00

14

26,92

3,85

50

96,15

52

6-7

0,00

20,00

0,00

28,00

0,00

36,00

0,00

16,00

0,00

25

100,00

25

>8

0,00

21,43

7,14

14,29

0,00

21,43

0,00

35,71

7,14

13

92,86

14

0,00

35

25,00

0,71

34

24,29

1,43

33

23,57

0,00

35

25,00

2,14

137

97,86

140

C a s o s o b te n id o s p o r re a s y c o m u n id a d e s .

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

91

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

. E n e l re a 1 e xiste u n p ro m e d io d e 0 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 5 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 2 e xiste u n p ro m e d io d e 0 .7 1 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 4 .2 9 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 3 e xiste u n p ro m e d io d e 1 .4 3 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 3 .5 7 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 4 e xiste u n p ro m e d io d e 0 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 5 % d e ca so s
n e g a tivo s.

C a s o s o b te n id o s p o r e d a d e n a o s .
. E n la e d a d d e 2 -3 a o s e l 0 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l 1 0 0 % d e ca so s so n n e g a tivo s.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

92

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. E n la e d a d d e 4 -5 a o s e l 3 .8 5 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l 9 6 .1 5 % d e ca so s so n
n e g a tivo s.
. E n la e d a d d e 6 -7 a o s e l 0 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l 1 0 0 % d e ca so s so n n e g a tivo s.
. E n la e d a d d e

> 8 a o s e l 7 .1 4 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l 9 2 .8 6 % d e ca so s so n

n e g a tivo s.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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40
35

% de casos

30

Edad
2-3

25

4-5
20

6-7
>8

15
10

5
0

P%

rea 1

N%

P%

N%

rea 2

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 3 .- Fre cu e n cia s re la tiva s se g n la e d a d , d e lo s d a to s d e l cu a d ro 4 .


E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

30
25,00

casos
casos
dede
%%

25,00

24,29

25

23,57

20

15
rea s %
10

1,43

0,71

0,00

0,00

0
P%

N%

rea 1

P%

N%

rea 2

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 4 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r re a s y co m u n id a d e s, d e lo s d a to s d e l cu a d ro 4 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

95

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

100,00

100,00

96,15

92,86

100
90

% de casos

80
70

60

Po rcen ta je d e c aso s p ositivos

50

Po rcen ta je d e c aso s n egativos

40
30
20
10

0,00

7,14

3,85

0,00

2-3

4-5

6-7

>8

Eda d
G R FICO 5 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r e d a d e n a o s, d e lo s d a to s d e l cu a d ro 4 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

C U A D R O 5 .- F re c u e n c ia s re la tiv o s p o r s e x o d e l n m e ro y p o rc e n ta je d e lo s c a s o s
p o s itiv o s y n e g a tiv o s d e B ru c e lo s is b o v in a e n la s 4 re a s e s tu d ia d a s d e la
p a rro q u ia In g a p irc a , A g o s to O c tu b re 2 0 1 2 .
C la se

C om unida de s

Se xo

re a 1

re a 2

SU B T O T AL
re a 3

re a 4

T O T AL

Fre c ue nc ia s R e la tiva s

P%

N%

P%

N%

P%

N%

P%

N%

P+ N

H e m bra

0,00

30

25,00

0,83

29

24,17

1,67

28

23,33

0,00

30

25,00

2,50

117

97,50

120

M a c ho

0,00

25,00

0,00

25,00

0,00

25,00

0,00

25,00

0,00

20

100.00

20

0,00

35

25,00

0,71

34

24,29

1,43

33

23,57

0,00

35

25,00

2,14

137

97,86

140

C a s o s o b te n id o s p o r re a s y c o m u n id a d e s .
. E n e l re a 1 e xiste u n p ro m e d io d e 0 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 5 % d e ca so s
n e g a tivo s.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

. E n e l re a 2 e xiste u n p ro m e d io d e 0 .7 1 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 4 .2 9 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 3 e xiste u n p ro m e d io d e 1 .4 3 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 3 .5 7 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 4 e xiste u n p ro m e d io d e 0 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 5 % d e ca so s
n e g a tivo s.

C a s o s o b te n id o s p o r s e x o .
. E n e l se xo h e m b ra s e l 2 .5 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l 9 7 .5 0 % d e ca so s so n
n e g a tivo s.
. E n e l se xo m a ch o s e l 0 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l 1 0 0 % d e ca so s so n n e g a tivo s.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

30

25

% de casos

20

Sexo
15

Hem b ra

M a ch o
10

0
P

P%

N%

rea 1

P%

N%

rea 2

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 6 .- Fre cu e n cia s re la tiva s se g n e l se xo , d e lo s d a to s d e l cu a d ro 5 .


E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G ra n d a .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

99

U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

25,00

25,00

24,29

23,57

25

% de casos

20

15

10
rea s %
5
1,43

0,71

0,00

0,00

0
P%

N%

rea 1

P%

N%

rea 2

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 7 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r re a s y co m u n id a d e s, d e lo s d a to s d e l cu a d ro 5 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G ra n d a .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

100

U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

100,00

97,50
100
90
80

% de casos

70
60
50

Frec uen cia de ca sos p ositivo s

40

Frec uen cia de ca sos n ega tivo s

30
20

2,50

0,00

10
0
Hem b ra

M a ch o

Sexo
G R FICO 8 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r se xo , d e lo s d a to s d e l cu a d ro 5 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G ra n d a .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

101

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C U A D R O 6 .- F re c u e n c ia s re la tiv a s p o r ra za s ,d e l n m e ro y p o rc e n ta je d e lo s c a s o s
p o s itiv o s y n e g a tiv o s d e B ru c e lo s is b o v in a e n la s 4 re a s e s tu d ia d a s d e la
p a rro q u ia In g a p irc a , A g o s to O c tu b re 2 0 1 2 .
C la se

C om unida de s

R a za s

re a 1

SU B T O T AL

re a 2

re a 3

P
P%

N%

re a 4

P
P%

N%

Fre c ue nc ia s R e la tiva s

P
P%

N%

T O T AL

P
P%

N%

P+ N

M e stiza

0,00

28

27,18

0,00

15

14,56

1,94

29

28,16

0,00

29

28,16

1,94

101

98,06

103

H olste in

0,00

25,93

0,00

13

48,15

0,00

3,70

0,00

22,22

0,00

27

100,00

27

Je rse y

0,00

0,00

0,00

50,00

0,00

50,00

0,00

0,00

0,00

100,00

B row n Sw iss

0,00

0,00

0,00

100,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

100,00

N orm a ndo

0,00

0,00

50,00

50,00

0,00

0,00

0,00

0,00

50,00

50,00

0,00

35

25,00

0,71

34

24,29

1,43

33

23,57

0,00

35

25,00

2,14

137

97,86

140

Casos obtenidos por reas y com unidades.


Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

102

U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

. E n el rea 1 existe u n p ro m ed io d e 0% d e ca so s p o sitiv o s, y u n 25% d e ca sos n ega tiv os.


. E n el rea 2 existe u n p ro m ed io d e 0.71% d e ca so s p o sitiv o s, y u n 24.29% d e ca sos n ega tiv os.
. E n el rea 3 existe u n p ro m ed io d e 1.43% d e ca so s p o sitiv o s, y u n 23.57% d e ca sos n ega tiv os.
. E n el rea 4 existe u n p ro m ed io d e 0% d e ca so s p o sitiv o s, y u n 25% d e ca sos n ega tiv os.
Casos obtenidos por razas.
. E n la ra za M estiza el 1.94% d e ca so s so n p o sitiv o s, y el 98.06% , d e ca sos son n ega tiv os.
. E n la ra za H olstein el 0% d e ca so s so n p o sitiv o s, y el 100% , d e ca sos son n ega tiv os.
. E n la ra za Jersey el 0% d e ca so s so n p o sitiv o s, y el 100% d e ca sos son n ega t iv os.
. E n la ra za B row n Sw iss el 0% d e ca so s so n p o sitiv o s, y el 100% d e ca sos son n ega tiv os.
. E n la ra za N orm a n d o el 50% d e ca so s so n p o sitiv o s, y el 50% d e ca sos son n ega tiv os.
Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

103

U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

100
90
80

70

% de casos

Raza
60

M estiza
Ho lstein

50

Jersey

40

Brow n Sw iss

30

N orm a n do

20

10
0

P%

rea 1

N%

P%

N%

rea 2

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 9 .- Fre cu e n cia s re la tiva s se g n la ra z a , d e lo s d a to s d e l cu a d ro 6 .


E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

104

U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

25,00

25,00

24,29

23,57

25

% de casos

20

15
rea s %

10

1,43

0,71

0,00

0,00

0
P%

rea 1

N%

P%

rea 2

N%

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 1 0 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r re a s y co m u n id a d e s, d e lo s d a to s d e l cu a d ro 6 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

105

U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

100,00

100,00

98,06

100,00

100
90

% de casos

80
70

50,00 50,00

60
50

Frec uen cia de ca sos p ositivo s


40
Frec uen cia de ca sos n ega tivo s

30
20
10

1,94

0,00

0,00

0,00

0
M estiza

Ho lstein

Jersey

B row n Sw iss

N orm a n do

Raza s
G R FICO 1 1 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r ra z a s, d e lo s d a to s d e l cu a d ro 6 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

106

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

CU A D R O 7.- Frecuencias relativas por sistem as de reproduccin, del n m ero y porcentaje de los
casos positivos y negativos de B rucelosis bovina en las 4 reas estudiadas de la parroquia
Ingapirca, A gosto O ctubre 2012.
C la se

C om unida de s

Siste m a de R e produc c in

re a 1

re a 2

re a 3

P
P%

N%

0,00

Inse m ina c in a rtific ia l

0,00

M ixta

0,00

0,00

N%

0,90

100,00

0,00

0,00

0,00

25,00

0,83

N%

P
P%

2
26,13

1,80

0,00

0,00

0,00

0,00

24,17

1,67

2
9

N%

P+ N

3
23,42

0,00

0,00

0,00

100,00

0,00

23,33

0,00

2
8

T O T AL

Fre c ue nc ia s R e la tiva s

P
P%

2
20,72

re a 4

P
P%

2
M onta na tura l

SU B T O T AL

27,03

2,70

108

97,30

111

0,00

0,00

100,00

0,00

0,00

100,00

25,00

2,50

117

97,50

120

3
0

C a s o s o b te n id o s p o r re a s y c o m u n id a d e s .

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

. E n e l re a 1 e xiste u n p ro m e d io d e 0 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 5 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 2 e xiste u n p ro m e d io d e 0 .8 3 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 4 .1 7 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 3 e xiste u n p ro m e d io d e 1 .6 7 % d e ca so s p o sitivo s, y u n 2 3 .3 3 % d e ca so s
n e g a tivo s.
. E n e l re a 4 e xiste u n p ro m e d io d e 0 % d e ca so s p o sitivo s, y u n

2 5 % d e ca so s

n e g a tivo s.

C a s o s o b te n id o s p o r s is te m a d e re p ro d u c c i n .
. E n e l siste m a d e re p ro d u cci n M o n ta n a tu ra l e l 2 .7 0 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l
9 7 .3 0 % d e ca so s so n n e g a tivo s.
Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
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. E n e l siste m a d e re p ro d u cci n In se m in a ci n a rtificia l e l 0 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l


1 0 0 % d e ca so s so n n e g a tivo s.
. E n e l siste m a d e re p ro d u cci n M ixta e l 0 % d e ca so s so n p o sitivo s, y e l 1 0 0 % d e ca so s
so n n e g a tivo s.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

100
90
80

Siste m a de

% de casos

70

Repro d u cci n

60

M o nta na tura l

50

In sem ina cio n artif ic ia l

M ixta

40
30
20
10

0
P

P%

rea 1

N%

P%

rea 2

N%

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 1 2 .- Fre cu e n cia s re la tiva s s e g n e l siste m a d e re p ro d u cci n , d e lo s d a to s d e l cu a d ro 7 .


E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

25,00

25,00

24,17

23,33

25

% de casos

20

15
rea s %
10

1,67

0,83

0,00

0,00

P%

rea 1

N%

P%

rea 2

N%

P%

N%

rea 3

P%

N%

rea 4

G R FICO 1 3 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r re a s y co m u n id a d e s, d e lo s d a to s d e l cu a d ro 7 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

100,00

100,00

97,30
100

90
80

% de casos

70
60
50

Frec uen cia de ca sos p ositivo s

40

Frec uen cias de c a so s n ega tivo s

30
20

2,70

0,00

10

0,00

M o nta na tura l

In sem ina cio n artif ic ia l

M ixta

Sistem a de Rep ro du cci n


G R FICO 1 4 .- Po rce n ta je d e l p ro m e d io d e ca so s p o r siste m a d e re p ro d u cci n , d e lo s d a to s d e l cu a d ro 7 .
E LA B O R A D O PO R : D ie go A . A gu rto G .
Pe d ro I. Fe rn n d e s P.
Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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4.2. DISCUSIN
En el Ecuador tenemos los siguientes resultados de
diferentes investigaciones sobre la prevalencia de
brucelosis bovina en diferentes zonas del pas.
En el ao 1979 la prevalencia de brucelosis bovina a
nivel nacional fue del 6.00%
En el ao 2004 la prevalencia de brucelosis bovina a
nivel nacional fue del 5.20%
En el ao 2005 la prevalencia de brucelosis bovina a
nivel nacional fue del 5.89%
En el ao 2006 la prevalencia de brucelosis bovina a
nivel nacional fue del 2.75%
En el ao 2007 la prevalencia de brucelosis bovina a
nivel nacional fue del 2.35%
En el ao 2008 la prevalencia de brucelosis bovina a
nivel nacional fue del 1.54%
En el ao 2009 la prevalencia de brucelosis bovina a
nivel nacional fue del 1.00% (4).
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
113

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En la presente investigacin de acuerdo a los


resultados obtenidos en la parroquia Ingapirca tenemos
una prevalencia del 0,021%, a diferencia de los
resultados a nivel nacional del 6% en el ao 1979, y del
1% en el ao 2009;esto nos indica que el programa
nacional de control de brucelosis bovina est dando
buenos resultados, de igual manera la preocupacin de
los ganaderos es muy evidente, al estar colaborando
para que sus predios obtengan la certificacin de libres
a brucelosis.

Regin Uno de Alta Prevalencia


Localizada en las provincias del norte de la sierra
ecuatoriana, es decir la cuenca lechera nacional,
integrada por: Carchi, Imbabura, Pichincha, Cotopaxi,
Tungurahua y Chimborazo, con una prevalencia del
1.97 al 10.62%, ao 2009.
Regin Dos de Alta Prevalencia
Conformada por las provincias del Litoral: Esmeraldas,
Manab, Santa Elena, Guayas, Los Ros, El Oro y
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
114

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Santo Domingo de los Tschilas, con una prevalencia


entre 4.2% y 10.62%, ao 2009.
Regin Tres de Baja Prevalencia
Conformada por las provincias de Bolvar, Caar,
Azuay y Loja, con una prevalencia de 1.3 al 2.6%, ao
2009.
Regin Cuatro de Baja Prevalencia
No se dispone de informacin sobre las provincias
amaznicas, pero se estima que dados los sistemas de
produccin existentes, los niveles de ocurrencia deben
ser igualmente bajos, ao 2009.
Regin Cinco Indemne
En el ao de 1997 se realiz una encuesta serolgica
por muestreo en 114 propiedades de las islas Santa
Cruz, Isabela, San Cristbal y Floreana, resultando 507
muestras negativas a la prueba de rosa de bengala,
con cuya base se considera a las Islas Galpagos
como indemne a Brucelosis bovina, ao 2009 (4).

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
115

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En el ao 1985, en los cantones Azogues, Biblin


y Caar, se determin la no existencia la de la
enfermedad en dichas zonas (11).
En el mismo ao en las parroquias de Tarqui y
Victoria del Portete, se determinque la
prevalencia de brucelosis en dichas zonas es del
1.2% (38).
Entre los aos 2009 2010 en el cantn
Gualaquiza la prevalencia de brucelosis bovina
fue del 2.2% (13).

De todas estas investigaciones podemos sealar que


la prevalencia de Brucelosis bovina en la parroquia de
Ingapirca es menor en comparacin a las diferentes
regiones del Ecuador, coincidiendo con la clasificacin
de AGROCALIDAD, regin 3 de baja prevalencia

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
116

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5. CONCLUSIONES
De acuerdo a los objetivos planeados y de los
resultados obtenidos se llega a las siguientes
conclusiones:

La prevalencia de brucelosis bovina en la parroquia


Ingapirca, cantn Caar, provincia de Caar es de
0,021%.

Las reas en las cuales existe la presencia de la


enfermedad son las reas 2 y 3 de la correspondiente
clasificacin por comunidades. Ver anexo 2, pg. 85.

De los casos positivos, 1 se present en el rea 2, y 2


casos positivos en el rea 3.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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117

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En el intervalo de edad de 4-5 aos se encontraron 2


casos positivos, el otro caso positivo corresponde al
intervalo de edad >8.

Los 3 casos positivos encontrados corresponden a


bovinos del sexo hembra, no encontrndose ningn
caso positivo en machos.

De los 3 casos positivos, 2 de ellos se encontraron en


bovinos de la raza mestiza y 1 en la raza normando.

Los 3 casos positivos pertenecen a bovinos que se


manejaron bajo el sistema de reproduccin monta
natural.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
118

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6. RECOMENDACIONES

1.- Repetir las pruebas de laboratorio a los animales


con sntomas sospechosos de brucelosis o cualquier
animal que haya sido incorporado en el hato ganadero
sin el certificado que lo excluya de dicha enfermedad.

2.- Comprar animales cuyas pruebas de laboratorio


sean negativas a brucelosis.

3.- Concientizar al ganadero para que vacune a su


ganado contra brucelosis, ya que con un certificado
que indique que su hato est libre de dicha
enfermedad, aumentara el valor econmico por litro de
leche.

4.- Reportar la presencia de casos sospechosos de


brucelosis a las autoridades competentes
(AGROCALIDAD).
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
Provincia de Caar
119

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5.- Realizar pruebas serolgicas y continuas.

6.- Al tratarse de una enfermedad zoontica, es


necesario emprender actividades de capacitacin para
prevenir la difusin de la brucelosis.

7.- Se deben exponer charlas en vinculacin con la


comunidad por parte de las instituciones
gubernamentales encargadas del caso, como tambin
por las Instituciones de Educacin Superior (IES) como
parte de la formacin acadmica del estudiante.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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120

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7. RESUMEN
La presente investigacion intitulada "Prevalencia de
Brucelosis bovina en la parroquia Ingapirca, Canton
Caar, provincia de Caar". Estudio Preliminar., se realiz
en la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Escuela de
Medicina Veterinaria y Zootecnia de la universidad de
Cuenca.

Este estudio se llevo a cab en 20 comunidades de la


parroquia de Ingapirca, provincia de Caar, clasificadas
en 4 reas, muestreando 140 bovinos seleccionados al
azar, en cada comunidad se tomaron 7 muestras de
sangre, 6 de hembras y 1 de machos, comprendidos
entre las edades de 2 aos en adelante.

El procesamiento de las muestras se realiz en los


laboratorios de la Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento
de la Calidad del Agro (AGROCALIDAD) en la ciudad de
Quito, utilizandose las pruebas de Rosa de Bengala como
Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes
Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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121

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prueba tamiz y Elisa de competencia como prueba


confirmatoria.

En la presente investigacin de acuerdo a los resultados


obtenidos en la parroquia Ingapirca tenemos una
prevalencia del 0,021%, a diferencia de los resultados
obtenidos a nivel nacional del 6% en el ao 1979, y del 1%
en el ao 2009; esto nos indica que el programa nacional
de control de brucelosis bovina est dando buenos
resultados, de igual manera la preocupacin de los
ganaderos es muy evidente, al estar colaborando para que
sus predios obtengan la certificacin de libres a brucelosis.

Las reas implicadas con la presencia de la enfermedad


fueron el rea 2 con 1 caso positivo y el rea 3, con 2
casos positivos.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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8. SUMMARY
This study entitled "Prevalence of bovine brucellosis in
the parish Ingapirca, Canton Caar, Caar Province".
Preliminary Study, Was held at the Faculty of Agricultural
Sciences, School of Veterinary Medicine of the University
of Cuenca.

This study was conducted in 20 communities in the parish


of Ingapirca, Caar Province, classified into 4 strata,
sampling 140 cattle randomly selected in each community
were taken seven blood samples, 6 females and 1 male,
including between ages 2 and older.

The processing of the samples was performed in the


laboratories of the Ecuadorian Agency for Quality
Assurance Agro (AGROCALIDAD) in the city of Quito,
utilizing the Rose Bengal test as a screening test and
Eliza competition as a confirmatory test.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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In the present investigation, according to the results


obtained in the parish have a prevalence Ingapirca
0.021%, unlike the results obtained nationally from 6% in
1979 and 1% in 2009, this indicates that the national
brucellosis control is working well, just as the concern of
farmers is very evident, to be working to get their farms
certified free of brucellosis.

The strata involved in the presence of the disease were


the strata 2 with 1 positive case and strata 3, with 2
positive cases.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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9. BIBLIOGRAFA

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(s.f.). Pruebas Diagnosticas en Brucelosis Bovina.
Recuperado el 04 de Enero de 2013, de
http://www.senasa.gob.pe/RepositorioAPS/0/4/JER/IN
FOINTER/Pruebas%20diagnosticas%20en%20Brucel
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2. ACOSTA, A., & M.M., O. (Febrero de 2011). Prueba
del Anillo en Leche para la Vigilancia Epidemiologica
de Brucelosis Bovina, Lima,Peru. (Revista Veterinaria
Argentina) Recuperado el 04 de Enero de 2013, de
http://www.veterinariargentina.com/revista/2011/02/pru
eba-del-anillo-en-leche-para-la-vigilanciaepidemiologica-de-brucelosis-bovina-lima-peru/
3. ACUA, F. (Septiembre de 2011). Brucelosis: Tecnica
de Polarizacion de la Luz Fluorescente. (Centro
Diagnostico Veterinario S.A) Recuperado el 04 de
Enero
de
2013,
de
http://www.cdvsa.com.ar/pdf/boletin-electronico5.pdf

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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125

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4. AGENCIA ECUATORIANA DE ASEGURAMIENTO


DE LA CALIDAD DEL AGRO. (Febrero de 2009).
Programa Nacional deControl de Brucelosis Bovina.
(Agrocalidad) Recuperado el 16 de 12 de 2012,de
http://www.agrocalidad.gob.ec/agrocalidad/images/Agr
ocalidad/Contenido/SanidadAnimal/docs/programa_na
cional_brucelosis_bovina.pdf
5. AGUILAR BALLESTEROS, G. (21 de Octubre de
2010). Seroprevalencia y Factores de riesgo
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10. ANEXOS

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ANEXO 1:
FOTOGRAFAS DE CAMPO
Las fotografas fueron tomadas por los autores de la
presente investigacin.

Foto 5. Formulario para certificacin de predios libres.

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Foto 6. Encuesta realizada por parte de Matas Mainato, funcionario de Agrocalidad

Foto 7. Extraccin de sangre de la vena coccgea por parte de Diego Agurto;


Tesista.

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Foto 8. Extraccin de sangre de la vena coccgea por parte de Pedro Fernndes;


Tesista.

Foto 9. Trabajo conjunto con los miembros de Agrocalidad, tesistas y hacendado

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Foto 10. Recipiente trmico donde fueron transportadas y conservadas las muestras
inmediatamente luego de su extraccin.

FOTOGRAFAS DE LABORATORIO

Foto 11. Muestras llevada al laboratorio de la Facultad de Ciencias Agropecuarias


para su centrifugacin.
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Foto 12. Muestras debidamente rotuladas segn el cdigo de la hoja de campo.

Foto 13. Centrifugacin de las muestras a 5000 revoluciones por 15 minutos.


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Foto 14. Obtencin del suero sanguneo luego del proceso de centrifugacin.

Foto 15. Extraccin del suero sanguneo de los tubos vacutainer.


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Foto 16. Puesta del suero en los Tubos eppendorf.

Foto 17. Tubos eppendorf debidamente rotuladas con codificacin.

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Foto 18. Tubos eppendorf rotulados listos para su envi.

Foto 19. Laboratorista de Agrocalidad de la ciudad de Quito; Margoth Barrionuevo,


Diego Agurto y Pedro Fernndes; tesistas.

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Foto 20. Prueba de Rosa de Bengala.

Foto 21. Determinacin de los casos sospechosos y positivos a Rosa de Bengala.

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Foto 22. Prueba de Eliza de competencia, para los casos positivos y sospechosos a Rosa
de Bengala.

Foto 23. Interpretacin de resultados.

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Provincia de Caar

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Foto 24. Redaccin del informe final.

Foto 25. Laboratoristas de Agrocalidad de la ciudad de Quito junto a los tesistas.

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


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Provincia de Caar

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Provincia de Caar

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U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

A nex o 2
H O JA S D E C A M P O

U N IV E R S ID A D D E C U E N C A

F A C U L T A D D E C IE N C IA S A G R O P E C U A R I A S
E S C U E L A D E M E D IC IN A V E T E R IN A R I A Y Z O O T C N IA
D IA G N S T IC O D E B R U C E L O S IS B O V IN A E N L A P A R R O Q U IA D E IN G A P IR C A
H O JA D E CA M PO

P R O P IE T A R I O :

N o . D E A N IM A L E S :

F ECHA:

P A R R O Q U IA :
SECT O R:
P R E D IO (F IN C A ):

No. TUBO

ID E N T IF IC A C IO N

RAZA

EDAD
(M E S E S )

SEXO

S IS T E M A
R E P R O D U C C IO N

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

DE

VACUNADO

EDAD
V A C U N A C I N

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U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia
M ACHO

O B S E R V A C IO N E S :

HEM BRA

M .N .

I.A .

M IX T A

SI

NO

F IR M A :

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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U N IV ER S ID A D D E C U EN C A
Facultad de cie ncias Agrope cuarias
E scue la de M e dicina Ve te rinaria y Zoote cnia

D istrib u ci n d e co m u n id a d e s e n re a s.

REA 1

REA 2

REA 3

REA 4

C O M U N ID A D E S
1 .- L la c ta h u a y c o

6 .- V e n d e le c h e

1 1 .- R u m ilo m a

1 6 .- S ila n te B a jo

2 .- C h u g u in G ra n d e

7 .- L irio p a m b a

1 2 .- S is id

1 7 .- P u c a ra

3 .- C h u g u in C h ic o

8 .- A m a n ta B o y a p u n g o

1 3 .- H a to la V irg e n

1 8 .- C h o rro lo m a

4 .- C e b a d a s

9 .- S a n J o s e d e M a z a n q u i

1 4 .- S is id C h u ru h u a y c o

1 9 .- E l C o le g io

5 .- C a jo n T a m b o

1 0 .- A m a n ta J e s u s d e l G ra n
Poder

1 5 .- E l C is n e

2 0 .- S ila n te A lto

L a s 2 0 co m u n id a d e s se d istrib u ye ro n e n 4 re a s e sp e cfica s p a ra su a n lisis.

Au tore s: D ie g o Ag u rto/ Pe d ro F e rn n d e s
T e m a : Pre v a le n c ia d e B ru c e losis B ov in a e n la Pa rroq u ia in g a p irc a , C a n t n C a a r, Pr ov in c ia d e C a a r

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Propietarios de los animales muestreados y comunidades


donde se realiz el trabajo de investigacin.
PROPIETARIO

COMUNIDAD

Pedro TenelemaYaury

LLactahuayco

Vicente Romero Sarmiento

Chuguin Grande

Mara Naranjo Espinoza

Chuguin Chico

Luis Bolvar Montero Calle

Cebadas

Franklin Homero Montero

Cajon Tambo

Segundo Reinaldo Neira Encalada

Vende Leche

Mara Anglica Gonzales Tacuri

Liriopamba

Manuel Mara Yupa Calva

Amanta Boyapungo

Mara Victoria TenelemaTamay

San Jose de Mazanqui

Jorge AngamarcaSiguencia

Amanta Jess del Gran Poder

Manuel Calixto Siguencia

Rumiloma

Flor Quito

Sisid

Esteban TenezacaYupa

Hato La Virgen

Zoila Beatriz Acero

SisidChuruhuayco

ngel Tenezaca Sarmiento

El Cisne

Eduardo Siguencia

Silante Bajo

Medardo Vascones

Pucara

Vctor Hugo Vsquez

Chorroloma

Olmedo Euclides Calle Tenezaca

El Colegio

Elsa Alvarez Serrano

Silante Alto

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Croquis de la parroquia de Ingapirca

Fuente: http://www.juntaparroquialingapirca.gob.ec

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ANEXO 3
RESULTADOS DE LABORATORIO

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Facultad de Ciencias Agropecuarias

Autores: Diego Agurto/Pedro Fernndes


Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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Tema: Prevalencia de Brucelosis Bovina en la Parroquia ingapirca, Cantn Caar,
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ANEXO 4
FRMULA DE LA MUESTRA.

Para el clculo de la muestra de esta investigacin se


utiliz la siguiente formula:

+

n:
?
Tamao de la
muestra
N:
14478Total de la poblacin en estudio
Z:
95%Nivel de confianza
p:
10%Probabilidad de casos positivos
q:
90%Probabilidad de sanos
e:
5%Error de estimacin
(
(

) ( )(
)( ) (

)(
)(

)
)(

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(
(

)(
)(
(

)(
)

)(
(

)(

)
)(

(
)(

)
)

La muestra fue de 137 animales


De las 4 reas seleccionadas y de cada comunidad
ganadera, se tomaron muestras de sangre de 7
animales: 1 macho y 6 hembras, por las siguientes
razones:

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Para obtener el nmero de comunidades que


contaban con hatos ganaderos se tomaron muestras
de 7 animales de la siguiente manera:

137/7=19.57, redondearemos a 20 comunidades a


muestrear
En las comunidades muestreadas al azar, de los
bovinos seleccionados se tomaron
muestras
sanguneas.
Las muestras se tomaron durante 3 meses hasta
completar el total.
El nmero de comunidades a muestrear fueron 20 y
en cada comunidad se tom en cuenta 7 animales (6
hembras y 1 macho), al ser estas variables discretas
se redondearon las muestras a 140 animales.

Prevalencia.

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La prevalencia es igual al resultado del nmero de casos


encontrados dividido para el total de animales que estn
presentes en la zona estudiada.

Casos encontrados: 3.
Poblacin: 14478.
P= 3/14478.
P= 0.00021.
P= 0,00021 x 100= 0,021%.

La prevalencia de Brucelosis bovina encontrada en la


parroquia Ingapirca es de 0,021%.

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