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BACTERIOLOGIA

MICROBIOLOGIA Y BACTERIOLOGA
La microbiologa es la ciencia encargada del estudio de los microorganismos, seres vivos pequeos
(de mikros "pequeo", bios, "vida" y logos, "estudio"), tambin conocidos como microbios. Es la
rama de la biologa dedicada a estudiar los organismos que son solo visibles a travs del
microscopio como las bacterias (reino monera), virus, hongos (reino fungi) y parsitos (reinos
protoctista y animalia). Dentro de estos microorganismos en el presente manual se har un estudio
de las bacterias.
1. DIVISIONES DE LA MICROBIOLOGA
Segn el campo especfico dentro del estudio de los microorganismos se puede clasificar en:
Fisiologa microbiana: estudio a nivel bioqumico del funcionamiento de las clulas
microbianas. Incluye el estudio del crecimiento, el metabolismo y de su estructura.
Gentica microbiana: estudio de la organizacin y regulacin de los genes y como stos
afectan el funcionamiento de las clulas microbianas. Est muy relacionada con la biologa
molecular.
Microbiologa mdica: estudio del papel de los microbios en las enfermedades humanas.
Incluye el estudio de la patogenia microbiana y la epidemiologa y est relacionada con el
estudio de la patologa de la enfermedad y con la inmunologa.
Microbiologa veterinaria: estudio del papel de los microorganismos en la medicina
veterinaria.
Microbiologa ambiental: estudio de la funcin y diversidad de los microorganismos en su
medio natural. Incluye la ecologa microbiana, la geomicrobiologa, la diversidad microbiana
y la biorremediacin.
Microbiologa industrial: estudia el uso o empleo de los microorganismos en procesos
industriales. Ejemplos son la fermentacin industrial y el tratamiento de aguas residuales.

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BACTERIOLOGIA
Microbiologa de los alimentos: estudio de los microorganismos presentes y que
estropean los alimentos.
2. RAMAS DE LA MICROBIOLOGA
Entre las ramas de la microbiologa podemos mencionar los siguientes:
Bacteriologa:
Virologa:
Micologa:
Parasitologa:
Ficologa:
Protozoologa:

Estudio de los procariontes (bacterias).


Estudio de los virus.
Estudio de los hongos.
Estudio de los parsitos (animal y protozoario)
Estudio de las algas y microalgas.
Estudio de los protozoos.

3. BREVE RESEA HISTRICA DE LA MICROBIOLOGA:


AO

INVESTIGADOR

1590

Hermanos Jansem

1665

Robert Hooke

IMPORTANCIA / DESCUBRIMIENTO

1676

Anton Van Leeuwenhoek

1828

Christian Gottfried Ehrenberg

1890

Ferdinand Cohn

1890

Louis Pasteur

1900

Robert Koch

Construyen el primer microscopio ptico.


Publica su obra "Micrographia", donde anoto
sus observaciones a un fino corte de corcho a
los cuales denomino celdas (en ingls cell), por
su parecido con las celdas de un panal de
abejas.
Considerado padre de la Microbiologa.
Realiza la primera observacin microbiolgica
detectando animculos (protozoarios).
Introdujo y acuo el trmino de bacteria.
Formula la primera clasificacin taxonmica de
las bacterias.
Fundador de la microbiologa mdica al igual
que R. Koch.
Refuto la teora de la generacin espontnea.
Dise mtodos para la conservacin de los
alimentos (pasteurizacin) y vacunas contra
varias enfermedades como el anthrax, el clera
aviar y la rabia.
Propone la teora de los grmenes de la
enfermedad donde a travs de unos
postulados, logr demostrar que enfermedades
especficas
estn
causadas
por
microorganismos patognicos especficos.
Obtuvo cultivos puros de bacterias, entre ellas
al Mycobacterium tuber culosis, el agente
causal de la tuberculosis.

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1925

Martinus Beijerinck

1940

Sergei Winogradsky

Descubri de los virus y el desarrollo de


tcnicas de cultivo microbiolgico.
Trabajo con el virus del mosaico del tabaco y
estableci los principios bsicos de la virologa.
Fue el primero en desarrollar el concepto de
quimiolitotrofa.
Responsable del aislamiento y descripcin por
vez primera tanto de las bacterias nitrificantes
como de las fijadoras de nitrgeno.

4. DIFERENCIAS ENTRE CLULA PROCARIONTE Y EUCARIONTE:


Clulas procariticas (pro = antes, carion = ncleo, teca = envoltura); son clulas sin envoltura
nuclear. Sus caracteristicas estructurales generales son:

Nucleoide con ADN


Un solo cromosoma
ADN: bicatenario, circular, no asociado a protenas
Ribosomas pequeos 70 S
Divisin celular directa
Metabolismo en mesosomas
Sin organelos membranosos ni citoesqueleto
Aparecieron hace 3500 millones de aos
Propia de:arqueobacterias, eubacterias y cianoftas.

Clulas eucariticas (eu = verdadero, carion = ncleo, teca = envoltura); son clulas con
verdadera envoltura nuclear. Sus caractersticas estructurales generales son:

Ncleo conteniendo ADN


Varios cromosomas
ADN: bicatenario, lineal y con protenas
Ribosomas grandes 80 S
Divisin celular indirecta
Metabolismo en mitocondrias y/o cloroplastos
Con organelos membranosos y citoesqueleto
Aparecieron hace 2000 millones de aos
Propia de: protozoos, protofitas, mohos deslizantes, hongos, vegetales y animales.
Estructura de una clula procarionte (bacilo)

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5. ENFERMEDADES BACTERIAS EN HUMANOS
Slo una pequea parte de los miles de especies de bacterias causan enfermedades humanas
conocidas. Las infecciones bacterianas se evitan destruyendo las bacterias con calor, como se hace
en las tcnicas de esterilizacin y pasteurizacin. Cuando se producen, las enfermedades
bacterianas se tratan con antibiticos. Pero el abuso de estos compuestos en los ltimos aos ha
favorecido el desarrollo de cepas de bacterias resistentes a su accin, como Mycobacterium
tuberculosis, que causa la tuberculosis.
FORMA MICROBIANA

Bacilos

Clamidia

Cocobacilos

Cocos

BACTERIAS-ENFERMEDADES
NOMBRE CIENTIFICO
ENFERMEDAD
Bacillus anthracis
Bacillus cereus
Clostridium botulinum
Clostridium perfringens
Clostridium tetani
Corynebacterium
diphtheriae
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Legionella pneumophila
Mycobacterium leprae
Mycobacterium tuberculosis
Salmonella sp.
Salmonella typhi
Salmonella typhimurium
Shigella dysenteriae
Shigella sp.
Yersinia enterocolitica
Yersinia pestis
Yersinia pseudotuberculosis
Chlamydia trachomatis

ntrax
Intoxicacin alimentaria por Bacillus cereus
Botulismo
Mionecrosis clostridial (gangrena gaseosa)
Ttanos

Bordetella pertussis
Brucella sp.
Haemophilus influenzae
Haemophilus pertussis
Neisseria gonorrhoeae
Neisseria meningitidis
Staphylococcus aureus

Tos ferina
Brucelosis
Meningitis, neumona bacteriana
Tos ferina
Gonorrea, enfermedad inflamatoria plvica
Meningitis
Neumona, sndrome de shock txico,
infecciones de la piel, meningitis
Neumona, infecciones del odo, meningitis
Infecciones de garganta, fiebre reumtica
Escarlatina, fiebre puerperal
Listeriosis, septicemia perinatal, meningitis,
encefalitis, infecciones intrauterinas
Neumona

Listeria

Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Streptococcus sp.
Listeria monocytogenes

Micoplasma

Mycoplasma pneumoniae

Difteria
Diarrea
Bronconeumona
Enfermedad del legionario
Lepra
Tuberculosis
Salmonelosis
Fiebres tifoideas
Gastroenteritis por Salmonella
Disentera bacilar
Sigelosis
Yersiniosis, gastroenteritis
Peste
Linfadenitis mesentrica
Tracoma, uretritis, cervicitis, conjuntivitis

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Rickettsia prowazekii

Rickettsias

Rickettsia rickettsii
Rickettsia typhi

Tifus epidmico, enfermedad de Brill-Zinsser


(transmitida por piojos)
Fiebre de las montaas Rocosas (transmitida
por garrapatas)
Tifus endmico (tifus murino, transmitido por
la pulga de la rata)

ACTIVIDAD
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es un micoplasma?
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Qu es una ricketsia?
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Por qu Anton Van Leeuwenhoek es considerado padre de la microbiologia?
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Qu es un microorganismo patgeno?
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Qu es un virion?
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Cul son los microorganismos ms empleados en la industria alimentaria?
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Qu es un micoplasma?
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BACTERIOLOGIA
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Qu es una enfermedad bacteriana?
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Cul es ubicacin taxonmica de las bacterias?
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Qu estudia la microbiologa clnica?
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Qu son las ETAs?
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CARACTERSTICAS GENERALES Y ESTRUCTURA


1. ESTRUCTURA BACTERIANA
Las bacterias, especialmente las patgenas presentan la siguiente estructura:

ADN: bicatenario, lineal y desnudo por no estar asociado a histonas, tiene un peso
molecular aproximado de 3 x 109, por tanto considerado como un cromosoma haploide
simple, de casi 1mm de largo en estado congelado. Como se seal, la clula procariota a
diferencia de la eucariota carece de una membrana nuclear, tampoco posee nuclolo, ni
aparato mittico, y nunca configura una masa cromosmica definida. El material gentico
est compuesto de una estructura fibrilar, constituida por un ADN circular de doble cadena,

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enrollado sobre s mismo. Si bien se asocia a protenas bsicas, estas no son verdaderas
histonas.

Citoplasma: tambin conocido como matriz citoplasmatica, de aspecto granular fino, sin
citoesqueleto y sin presencia de organelos citoplasmticos.

Nuclolo: regin citoplasmtica donde se localiza el ADN bacteriano.

Laminilla fotosinttica: presentan al pigmento bacterioclorofila, tpica de las bacterias


fotosintticas.

Mesosoma de tabique: invaginacin de la membrana citoplasmtica que fija al ADN, para


que ocurra una equitativa divisin del ADN.

Mesosoma lateral: invaginacin membranosa que atrapa enzimas y es considerado como


el responsable de muchos procesos metablicos.

Plsmidos y episomas: Algunas bacterias poseen material gentico extracromosmico,


denominados plsmidos y episomas. Los plsmidos son elementos genticos constituidos
por secuencias de ADN cortas circulares que se replican en forma autnoma. Este material
gentico posee genes que codifican factores de agresin, factores de resistencia a
antibiticos, produccin de toxinas, etc. Los episomas son elementos genticos
extracromosmicos que pueden existir en formas autnomas o incorporadas al material
gentico.

Membrana celular: Estructura delgada que rodea a la clula de 8 nm de espesor. Es una


estructura vital, si se altera, la clula pierde su vitalidad. Composicin: es similar a la mayor
parte de las membranas biolgicas. Una doble capa fosfolipdica en donde el cido graso
hidrofbico se orienta hacia el interior y el glicerol hidroflico hacia el exterior de la clula. A
diferencia de la clula eucariota no posee esteroles (excepto los micoplasmas). Algunos
antibiticos, cuyo blanco de ataque en la clula bacteriana es la membrana celular, actan
inmediatamente que la clula se pone en contacto con stos. Los antibiticos de este tipo,
son por su mecanismo de accin, txicos para los tejidos humanos y poco utilizados en
medicina clnica.
Funcin: Delimita el interior del exterior celular, es una barrera osmtica muy importante,
interponindose a la libre difusin entre el medio ambiente interno y externo. Es una
membrana con permeabilidad selectiva, a travs de la cual ingresan los nutrientes y salen
los productos de desecho. El transporte de solutos se realiza muchas veces por un sistema
de transporte activo.
En la membrana celular estn los sistemas de fosforilacin, oxidacin y transporte de
electrones (citocromos) para la produccin de energa.
Dentro de las diversas actividades enzimticas vinculadas a las protenas de la membrana
citoplasmtica, podemos sealar su participacin en la biosntesis del ADN, de los
constituyentes de la pared, etc.

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Los mesosomas que son organelos que se asocian a la membrana. Se observan al ME
como sacos citoplasmticos que contienen estructuras verticiladas, laminares, tubulares o
vesiculares, y a menudo se asocian con tabiques de septacin. Se ha demostrado que los
mesosomas fijan el ADN cromosmico a la membrana citoplasmtica.

Pared celular: Estructura rgida presente como ya se dijo en la mayora de las bacterias, se
sita por fuera de la membrana citoplasmtica. Es una estructura vital para las bacterias
que las poseen. Si sta se destruye o se impide su formacin, la clula pierde su viabilidad.
El peptidoglicano, principal constituyente de la pared, es un polmero constituido por
unidades repetidas del monmero formado por: dos derivados de carbohidratos, N-acetil
Glucosamina y N-acetil Murmico (N-Ac.G, N Ac. M), unidas por enlaces beta 1-4 y
asociados a cortas cadenas peptdicas a travs del N-acetil Murmico.
El espesor de la pared en los diferentes microorganismos, oscila entre 0,150 m y 0,500 m
de (m=micra). Podemos imaginar entonces la pared celular, como una macromolcula
gigante constituida por peptidoglicano, que en forma de bolsa rodea toda la clula,
representando del 10 al 40 % del peso de la bacteria. Unido al N-acetil murmico se
encuentra un tetrapptido como se aprecia en la figura 4. Los tetrapptidos de una cadena
de peptidoglicano se unen con los de la otra a travs de puentes peptdicos. Los
aminocidos que forman los tetrapptidos son los siguientes: L-Alanina, Acido DGlutmico,
Acido mesodiaminopimlico (o L-Lisina) y D Alanina.
La Penicilina y sus derivados, los antibiticos ms usados en Medicina, actan
precisamente inhibiendo la sntesis de la pared celular, llevando a la lisis de la bacteria. La
unin de los puentes peptdicos se pueden hacer como ocurre en la mayora de las
bacterias por uniones directas transpetdicas entre la D-Alanina de un puente peptdico y el
cido diaminopimlico (DAP) de otro tetrapptido adyacente.
Existen diferencias en el espesor de esta estructura bsica, el peptidoglicano de las
bacterias Gram positivas tienen una capa gruesa de 0,02 a 0,06 m en forma de multicapas,
mientras que las bacterias Gram negativas y las bacterias alcohol cido resistentes la tienen
ms fina, de 0,01 m. Al peptidoglicano se le unen otros componentes que son, por lo tanto,
tambin integrantes de la pared. Son diferentes en las bacterias Gram positivas, negativas y
cido alcohol resistentes. Revisaremos algunos aspectos de la composicin de los tres tipos
de paredes.
Estructura de las envolturas de Bacterias Gram (+) y Gram (-)

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Pared de bacterias Gram negativas: Si observamos la pared de las bacterias Gram


negativas al microscopio electrnico podemos observar 3 zonas:
1.
2.
3.
4.

La membrana citoplasmtica.
El espacio periplasmtico, ubicado entre la membrana citoplasmtica y el peptidoglicano.
Una fina capa de peptidoglicano.
Membrana externa que contiene fosfolpidos, el lipopolisacrido (LPS) caracterstico de
estas bacterias y protenas (protenas de membrana externa). Esta capa est
estrechamente unida al peptidoglicano y se la considera un componente de la pared
celular de las bacterias Gram negativas.

En el lipopolisacrido se pueden distinguir 3 componentes diferentes bioqumicamente. La


porcin lipdica, el lpido A, est inmersa en el centro de la membrana externa. En su sector
externo la porcin polisacardica, el denominado polisacrido O, o antgeno O, est ubicado
en la cara externa. Entre estos dos componentes est el core del LPS, que es tambin
polisacardico. El antgeno O es muy variable en su composicin entre las diferentes
familias y especies de bacterias Gram negativas, en cambio, el polisacrido del core es
constante en las diferentes bacterias Gram negativas. El polisacrido O por su variabilidad
es utilizado frecuentemente para la clasificacin serolgica de familias bacterianas de
inters mdico.
Al lipipopolisacrido (LPS) se le denomina endotoxina, siendo el lpido A su la porcin
txica. Como el lpido A est inmerso en el centro de la membrana slo ejerce sus efectos
txicos cuando la clula es lisada, ya sea por ataque del complemento y fagocitosis, o por
lisis celular como consecuencia de la accin de antibiticos. Si se inyecta a un animal de
experimentacin endotoxina, ocurren una serie de eventos fisiolgicos, el primero es la
fiebre. La endotoxina estimula a las clulas del husped a liberar protenas denominadas
pirgenos y stos modifican el centro termorregulador del encfalo. Pero el animal tambin
puede sufrir otras alteraciones como disminucin de leucocitos y plaquetas en sangre,
sufriendo finalmente un estado inflamatorio generalizado que lo puede llevar a la muerte

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(fenmeno de Shwartzman-Sanarelli). Efectos similares ocurren cuando por destruccin
bacteriana hay endotoxinas en sangre. La gravedad del cuadro clnico se sabe hoy que
depende en parte de la cantidad de endotoxinas circulantes, pudiendo determinar desde un
simple cuadro infeccioso con fiebre, a sepsis, shock sptico o la muerte.
La toxicidad del lpido A radica primariamente en su habilidad para activar el complemento y
estimular la liberacin de citoquinas por parte de las clulas del husped (leucocitos,
macrfagos, etc.). El complemento y las citoquinas en condiciones normales son parte de
los mecanismos de defensa del husped, pero si estn en altas concentraciones
desencadenan un proceso perjudicial. Desencadenan localmente un proceso inflamatorio y
una respuesta sistemtica que constituye el shock sptico. Entendemos por shock la serie
de eventos que determinan el colapso del sistema circulatorio que lleva a la falla de
mltiples rganos vitales y, finalmente a la muerte (multiple organ sistem faillure, MOSF).
An hoy no es posible decir exactamente como se desencadena este fenmeno.

Pared de las bacterias Gram positivas: Lo primero a sealar es la gruesa capa de


peptidoglicano en forma de mltiples capas. Unidos a l se encuentran los cidos teicoicos
(del griego techos, pared). Son polisacridos que se unen al cido N-acetil murmico del
peptidoglicano. Algunos cidos teicoicos tienen unido un lpido (cidos lipoteicoicos). Los
cidos lipoteicoicos estn embebidos en la membrana citoplasmtica por su porcin lipdica.
Los cidos teicoicos tienen por funcin estabilizar la pared.
La superficie externa del peptidoglicano de las bacterias Gram positivas est usualmente
cubierta de protenas. Los diferentes grupos de bacterias Gram positivas y las diferentes
especies, difieren en la composicin de sus protenas y cidos teicoicos, siendo esto til
para la clasificacin serolgica y la identificacin. En la pared de las bacterias Gram
positivas no existe una endotoxina, sin embargo, la presencia de estas bacterias en los
tejidos y en la sangre determina sntomas similares al shock sptico que ocurre ante la
presencia de endotoxinas. Las mismas citoquinas que se liberan ante la presencia de los
LPS, se sabe que son liberadas ante presencia de la pared de las bacterias Gram positivas
con sus mismos efectos.
A la luz de las investigaciones actuales, al aparecer fragmentos de peptidoglicano, cido
teicoicos o una combinacin de los dos, juegan un papel semejante al LPS. Si se inyectan a
animales tienen efectos similares que los LPS. Al peptidoglicano de la pared de las
bacterias Gram positivas, se pueden unir protenas como la protena M de Streptococcus
pyogenes (o Streptococcus grupo A) que se vincula con la virulencia, y tambin se pueden
asociar polisacridos como el polisacrido C que permite la clasificacin en serotipos del
gnero Streptococcus (A, B, C, D, E, F, etc.).

Composicin de la pared de las bacterias cido alcohol resistentes (BAAR): Nos


referiremos como bacteria modelo de este grupo al gnero Mycobacterium. Adems del
peptidoglicano, la pared celular de las micobacterias contiene una gran cantidad de
glicolpidos como el complejo lipdico arabinogalactano y los cidos miclicos, stos ltimos
son slo encontrados en Mycobacterium y Corynebacterium Spp. Esta gran cantidad de
lpidos hace que las bacterias AAR no se coloreen o se coloreen mal con la coloracin de
Gram.
Para colorearlas, se somete a las bacterias a una coloracin con Fucsina (colorante rojo)
con ayuda de calentamiento y luego que son teidas as, resisten la decoloracin con una

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mezcla de alcohol cido. Esta gran cantidad de lpidos de la pared, 10% del total del peso
de la clula de micobacterias, protege a la bacteria de la accin deletrea de los
componentes del fagolisosoma y, probablemente, sea esta la razn por la que las
micobacterias pueden sobrevivir dentro de los macrfagos. Los componentes de la pared
de las micobacterias tambin tienen la capacidad de estimular al sistema inmune, tanto es
as que se utiliza para aumentar la produccin de anticuerpos cuando se inyecta antgenos
proteicos, o sea, se utiliza como adyuvante. El adyuvante de Freund tiene como
componente bsico, la pared micobacteriana.
Despus de analizar las diferencias entre la composicin de las paredes de las bacterias Gram
positivas, negativas y cido alcohol resistentes se puede ir comprendiendo la importancia que esto
tiene en el momento de estudiar mecanismos de agresin, sensibilidad a antibiticos, taxonoma,
clasificacin bacteriana, identificacin, etc. Tambin es necesario sealar que el tipo de pared
celular podra determinar el hecho de que unas bacterias se tian con la coloracin de Gram y otras
no, y por qu las que no lo hacen sean Gram positivas y otras negativas.
Recientemente se ha demostrado que en las bacterias Gram positivas es la gruesa capa de
peptidoglicano con numerosos cidos teicoicos unidos a ella, la que determina que estas bacterias
retengan al colorante cristal violeta utilizado en el primer paso de la coloracin, y resistan la
decoloracin con alcohol acetona. Por el contrario, las que lo pierden al ser descoloradas, las Gram
negativas, tienen una fina capa de peptidoglicano y la membrana externa rica en lpidos, que
podran ser solubilizados con alcohol acetona y facilitar as la prdida del cristal violeta, quedando
finalmente coloreadas de rojo con safranina, colorante de contraste usado al final de la tcnica.
Podramos decir que la pared bacteriana es un gran mosaico de antgenos que son utilizados en la
clasificacin bacteriana y en la identificacin, como en el caso del antgeno O en enterobacterias, el
polisacrido C para la serotipificacin de estreptococos, etc. Tambin antgenos de la pared han
sido ensayados como inmungenos en la produccin de vacunas, como protenas de membrana
externa en la vacuna antimeningocccica para el grupo B. La porcin central del LPS, que es
invariable entre las diferentes bacterias y no es txica, se ha ensayado tambin como inmungeno.
Tambin es importante sealar la funcin que cumple la pared celular como barrera osmtica.

Cpsula: Es una envoltura externa, ubicada por fuera de la pared celular, mucosa, que
forma un gel que se adhiere a la clula. No es una estructura vital para la clula, su prdida
no se relaciona con la prdida de viabilidad de la clula, pero s se relaciona con cambios
en la morfologa colonial y en la prdida de la virulencia bacteriana.
La virulencia de algunos patgenos se correlaciona con la presencia de cpsula, como por
ejemplo: Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae tipo b. La cpsula
protege a la bacteria de la fagocitosis, principal mecanismo de defensa que pone en juego
el husped ante la presencia de bacterias capsuladas. Una respuesta efectiva para
defenderse de este tipo de bacterias implica la produccin de anticuerpos que se unan
especficamente a la cpsula facilitando as la opsonizacin y la fagocitosis. De su
capacidad antignica se desprende el uso de la cpsula para la produccin de diferentes
vacunas que estimulan la formacin de anticuerpos especficos, y han demostrado ser
efectivas (vacuna anti-neumocccica, anti-Haemophilus influenzae tipo b, antimeningocccica A y C, etc).
Las bacterias que producen cpsula forman en los medios slidos colonias acuosas,
mucoides (M) o lisas (S), en cambio, las cepas rugosas (R) no producen cpsula. La
prdida de la capacidad de formar cpsula por mutacin S a R se correlaciona con la

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BACTERIOLOGIA
prdida de la virulencia y aumento de la facilidad de destruccin por los fagocitos, pero no
afecta la viabilidad.
Los antgenos capsulares son muy tiles en la clasificacin e identificacin de diferentes
bacterias; Streptococcus sp. ,S. pneumoniae, Haemophilus sp. , Neisseria
meningitidis sp, etc.

Frimbias o pilis: Las fimbrias son estructuras filamentosas proteicas similares a los flagelos
en su composicin y morfologa, pero no participan en la motilidad y son menos abundantes
y ms cortas.
Es una estructura variable que la poseen algunas bacterias. Las fimbrias o pilis comunes se
relacionan con la adherencia de las bacterias a superficies inertes o vivas. De gran
importancia en este sentido es la adherencia especfica que presentan muchas bacterias a
determinados epitelios, jugando un papel fundamental en la colonizacin. Esto se debe a
que las fimbrias encuentran en las clulas epiteliales receptores especficos para ellas.
A modo de ejemplo, las cepas de Neisseria gonorrohoeae patgenas son
aquellas que poseen fimbrias que se adhieren especficamente al epitelio
uretral del hombre o al crvix uterino en la mujer.
Las cepas de E. coli capaces de causar infeccin urinaria tienen fimbrias que

les permiten una adhesin especfica al epitelio del aparato urinario.


Tambin E. coli enteropatgena clsica (EPEC) tiene fimbrias que le permiten

adherirse especficamente al epitelio intestinal para luego producir los cambios


a ese nivel que determinarn la instalacin de la diarrea.
Existen otros pilis llamados sexuales que son ms largos y se presentan en nmero de dos
o tres por clula. Estos pilis sexuales intervienen en el intercambio gentico entre bacterias,
de all su nombre. El apareamiento de dos bacterias y la transferencia de ADN a travs del
pili sexual se conoce como conjugacin. Se transfiere material gentico de una clula
donadora a una receptora y se transfiere slo pequeos sectores de ADN, en general un
plsmido o una porcin de cromosoma movilizada por un plsmido.

Flagelos: los flagelos son filamentos largos, delgados, helicoidales, de longitud y dimetro
uniforme. Son responsables de la motilidad de las bacterias. Presentan flagelos
fundamentalmente: bacilos Gram positivos y Gram negativos. El flagelo est compuesto de
3 partes, el filamento, el gancho y el cuerpo basal.
El filamento es externo con respecto a la clula y se une al gancho en la superficie celular.
El gancho est fijado al cuerpo basal, que a su vez est anclado en la membrana
plasmtica. El cuerpo basal est compuesto de un cilindro y dos o ms juegos de anillos
contiguos a la membrana plasmtica, el peptidoglicano y, en el caso de las bacterias Gram
negativas, a la membrana externa.
Los flagelos pueden variar en nmero desde uno, unos pocos o varios cientos como en
algunas cepas de E. coli. Segn el nmero de flagelos y su topografa en la clula podemos
hablar de monotricas cuando tienen un flagelo nico, lofotricas cuando presentan un
penacho de varios flagelos polares, anfitricas si los flagelos se encuentran en ambos polos
y peritricas cuando los flagelos estn distribuidos sobre toda la superficie celular.

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BACTERIOLOGIA
Anfitrico

Monotrico

Peritrico

Lofotrico

Esporas: algunas bacterias


producen en su interior
esporas o endosporas. Estas
estructuras
son
muy
resistentes al calor, la
desecacin, la radiacin, los
cidos, y los desinfectantes
qumicos. Los producen
algunas familias de bacilos
Gram positivos. El esporo se
forma en la clula vegetativa
en ciertas condiciones como
son la escasez de nutrientes.
En lugar de dividirse la
clula, sufre una compleja
serie de fenmenos que dan
lugar a la formacin de la
espora.

Formacin de una Endospora en un Bacilo


Gram Positivo

Una
espora
puede
permanecer en ese estado
durante muchos aos pero
puede convertirse de nuevo
en una clula vegetativa y
volver
a
multiplicarse,
fenmeno
denominado
germinacin de la espora. El
conocimiento de que existen estas formas altamente termoresistentes fue esencial para el
desarrollo de mtodos adecuados de esterilizacin de medicamentos, alimentos, medios de
cultivo microbiolgicos, etc.
Las esporas son ricas en cido dipicolnico e iones calcio y hay evidencias que esta
asociacin cumple una funcin importante para conferir la excepcional resistencia al calor
de los esporos.

Inclusiones y productos de almacenamiento: dentro de algunas bacterias se pueden


observar grnulos y otras inclusiones. Casi siempre su funcin es el almacenamiento de
compuestos energticos como el cido poli hidroxibutrico que se utiliza como fuente de
carbono y energa. En otros grnulos se almacena glucgeno. Con frecuencia las
inclusiones pueden verse directamente con el microscopio de luz sin tinciones especiales.

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BACTERIOLOGIA

Ribosomas: La clula bacteriana presenta ribosomas libres en el citoplasma con


coeficiente de sedimentacin de 70S a diferencia de la clula eucariota que es de 80S. Se
presentan tambin como polirribosomas que son cadenas de ribosomas asociados a ARN
mensajero y en parte en relacin con el ADN cromosmico. Contienen todos los
componentes que permiten la sntesis proteica. Las clulas poseen ms ribosomas si estn
creciendo en medios ricos. El alto contenido de ARN determina gran afinidad por los
colorantes bsicos.

TAMAO, FORMAS Y AGRUPAMIENTO BACTERIANO


TAMAO
Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaos y formas. La mayora presentan un
tamao diez veces menor que el de las clulas eucariotas, es decir, entre 0,5 y 5 m. Sin embargo,

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BACTERIOLOGIA
algunas especies pueden llegar a alcanzar los 0,5 mm, lo cual las hace visibles al ojo humano. En el
otro extremo se encuentran las bacterias ms pequeas pertenecientes al gnero Mycoplasma, las
cuales llegan a medir solo 0,3 m, similares a los virus ms grandes.
FORMAS y AGRUPAMIENTO
La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos
morfolgicos, lo que se conoce como pleomorfismo. De todas formas, podemos distinguir tres tipos
fundamentales de bacterias:
a) Coco (del griego kkkos, grano): de forma esfrica.
- Diplococo: cocos en grupos de dos.
- Tetracoco: cocos en grupos de cuatro.
- Estreptococo: cocos en cadenas.
- Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en
racimo.
b) Bacilo (del latn baculus, varilla): en forma de
bastoncillo.
Formas helicoidales:
c) Vibrio: ligeramente curvados y en forma de coma,
juda o cacahuete.
d) Espirilo: en forma helicoidal rgida o en forma de
tirabuzn.
e) Espiroqueta: en forma de tirabuzn (helicoidal
flexible).
El agrupamiento celular en las bacterias se debe a la unin temporal despus de la divisin, dando
lugar a ciertos grupos caractersticos. Dependiendo al plano de divisin y cantidad de divisiones a
travs de de las cuales las clulas permanecen fijas, puede producirse lo representado en la figura
anterior.

ACTIVIDAD
1. Responda las siguientes interrogantes:
Cules son las funciones de la membrana plasmtica en las bacterias?
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Cul es la funcin de la pared celular en bacterias?
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BACTERIOLOGIA
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Cul es la funcin de los plsmidos?
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Qu colorantes bacterianos conoce usted?
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Cul es la diferencia entre fimbrias y flagelo?
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Qu es una bacteria BAAR?
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Cul es la diferencia entre un estafilococo y un estreptococo?
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FISIOLOGA Y CLASIFICACIN BACTERIANA


FISIOLOGA BACTERIANA.

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BACTERIOLOGIA
Las bacterias se pueden clasificar desde el punto de vista nutricional:
Segn la fuente de obtencin de energa.

Fototrofas. A partir de la luz solar.


Quimiotrofas. A partir de reacciones qumicas.
Paratrofas. A partir del husped que parasitan.

Segn su capacidad de sntesis.

Auttrofas. Tienen una elevada dotacin enzimtica. Aprovechan el carbono y nitrgeno


obtenido a partir de compuestos inorgnicos.
Hetertrofas. Menor capacidad de sntesis. Slo aprovechan carbono y nitrgeno de
compuestos orgnicos.
Hipotrofas. Casi nula dotacin enzimtica. Viven a expensas de la clula husped.

Segn su relacin con el oxgeno.

Bacterias aerobias. Slo se multiplican en presencia de O2. Si se colocan en un medio de


cultivo con poca superficie expuesta al aire (tubo) crecen en la superficie.
Bacterias anaerobias. Slo crecen en ausencia de O2. En el ejemplo anterior creceran en
el fondo del tubo. Suelen estar presentes en abscesos y en infecciones del tracto
genitourinario, colon y cavidad oral (MIR 01-02, 125).
Bacterias aerobias y anaerobias facultativas. Crecen bien en ambos medios.
Bacterias microaerfilas. Slo crecen a bajas tensiones de O2. En el ejemplo del tubo
creceran debajo de la superficie.

Gentica bacteriana.
El intercambio gentico entre clulas procariotas es generalizado y conforma una de las principales
caractersticas de diversidad gentica de las bacterias. Los mecanismos mejor conocidos son:
Transformacin. Captacin directa de ADN procedente de la bacteria donante (muerta).
Conjugacin. La bacteria donante construye una porcin de ADN (plsmido) que cede a una
bacteria receptora por medio de pilis.
Transduccin. Transferencia de ADN de una clula donante a una receptora por medio de
un bacterifago.
CLASIFICACIN BACTERIANA:
Atendiendo a la estructura de su pared bacteriana se clasifican en:

Bacterias Gram positivas: se tien con la tincin Gram debido a la complejidad de su


pared que retiene los colorantes.

Bacterias Gram negativas: no se tien con esta tincin pues su pared es menos compleja
y no retiene los colorantes.

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BACTERIOLOGIA
Es complicado establecer una relacin jerrquica al uso tradicional que refleje relaciones evolutivas.
De manera general se establecen dos grandes grupos:

Arqueobacterias, primitivas, semejantes a las primeras que aparecieron en la Tierra, viven


en ambientes muy extremos: bacterias metangenas (en zonas pantanosas, producen
metano), bacterias halfilas extremas (en ambientes salobres, con altas concentraciones
salinas) y bacterias termoacidfilas (en aguas termales de hasta 90C. Incluso se las ha
detectado en dorsales ocenicas).

Eubacterias o bacterias verdaderas.

Hoy da, gracias a nuevas tcnicas de investigacin, se piensa que las arqueobacterias son
organismos bastante ms evolucionados de lo que se crea.
A la hora de clasificar a las bacterias verdaderas o Eubacterias es complicado establecer una
relacin jerrquica al uso tradicional que refleje relaciones evolutivas. El Bergey`s Manual of
Determinative Bacteriology (que es el catecismo de los microbilogos) las agrupa en 19 grupos
en funcin de criterios fcilmente reconocibles, tanto morfolgicos como fisiolgicos, entre los que
podramos destacar los siguientes:

Espiroquetas. Unicelulares, delgados, encorvados y enrrollados en espiral. Treponema


pallidum (sfilis). Gn. Spirochaeta. Algunas viven en el agua y ambientes marinos, otras
son parsitos.

Bacilos y cocos aerobios gramnegativos. Incluye gran nmero de grupos taxonmicos,


con diferente morfologa, fisiologa y metabolismo. Gn. Azotobacter (fam.
Azotobacteriaceas) y Rhizobium (fam. Rizobiaceas) ambos fijadores de N2 atmosfrico,
esta ltima simbitica de leguminosas), Escherichia coli (fam. Enterobacteriaceas, presente
en el intestino de mamferos), Salmonella, (salmonelosis), Vibrio cholerae (clera),
Pseudomonas (fam. Pseudomonadaceas), Methylomonas (fam. Metilomonadaceas).

Bacterias quimiolitotrficas gramnegativas. Muy importantes en la naturaleza pues


obtienen la energa oxidando compuestos del nitrgeno (ciclo del nitrgeno), azufre o hierro.
A la familia Nitrobacteriaceas o bacterias nitrificantes pertenece Nitrobacter, que oxida
nitritos a nitratos, y Nitrosomonas, que oxida amonio a nitrito. El poder reductor para sus
procesos anablicos lo obtienen haciendo funcionar la cadena de transporte electrnico al
revs.
Otras formas
bacterianas

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BACTERIOLOGIA

Cocos
grampositivos.
Son
quimioorganotrofos, muy abundantes en
la naturaleza. Dependiendo de la especie
se presentan aislados, en pares,
cadenas, racimos o paquetes. Algunas
son patgenas, otras saprfitas. Gen.
Streptococcus,
Lactobacillus
(fermentacin lctica), Staphylococcus,
Micrococcus...

Bacilos y cocos formadores de


endosporas. Quimioorganotrofos, se
encuentran en toda la naturaleza, agua,
suelo e intestino de animales. Anaerobios
y
aerobios
facultativos,
algunos
microaerfilos. Gn. Bacillus, Clostridium
(fermentacin butrica, actica y
alcohlica).

Actinomicetos
y
organismos
relacionados. Es un grupo heterogneo
que incluye a los actinomicetes,
propionibacterias
(fermentacin
propinica),
artrobacterias
y
corinebacterias. Algunas actinobacterias
forman
actinosporas
como
Mycobacterium o Streptomyces, de la
que se obtiene la streptomicina y otros
antibiticos.

Rickettsias y Clamydias. Las primeras son parsitos intracelulares obligados de


artrpodos (garrapatas, piojos) y, con frecuencia producen enfermedades en el hombre
utilizando aquellos como vectores, como el tifus (Rickettsia prowazekii y R. typhi)). Tienen
forma bacilar o redondeada y otras formas pleomorficas. Las clamydias se incluyen en el
mismo grupo y se trata de parsitos obligados de la clula huesped para obtener energa.
Producen enfermedades como la ornitosis, tracoma o conjuntivitis. Ambas tienen
caractersticas intermedias entre bacterias y virus, pero se parecen ms a las primeras y as
se las considera.

Micoplasmas (Mollicutes). Sus colonias tienen forma de huevo frito, aunque las clulas de
micoplasma son muy pleomrficas (bacilar, bulbosas, filamentosas). Son estructuralmente
muy sencillas, apenas una membrana, ribosomas y nucleoide, por lo que se trata de las
formas de vida ms sencillas capaces de desarrollar un metabolismo independiente.
Mycoplasma pneumoniae produce la pleuroneumona del ganado.

Esta clasificacin ha sido revisada hace unos aos, por lo que ha cambiado a la luz de los nuevos
descubrimientos en gentica molecular.
Clasificacin de microorganismos por tincin de Gram.

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BACTERIOLOGIA
COCOS GRAMPOSITIVOS.
Aerobios o Facultativos:
Catalasa +: estafilococos.
Coagulasa +:
S. aureus.
Coagulasa -:
Manitol +: S. saprophyticus.
Manitol -: S. epidermidis.
Catalasa : estreptococos.
Alfa-hemolticos.
Sensible a optoquina: neumococo.
Resistente a optoquina: S. viridans.
Beta-hemolticos.
Sensible a bacitracina, PYR+: S. pyogenes.
Resistente a bacitracina, hipurato+, CAMP+: S. agalactiae.
Gamma-hemolticos.
Resiste bilis, crece en medio con ClNa: enterococo.
Resiste bilis, no crece en medio con ClNa: no enterococo.
Anaerobios:
PEPTOCOCCUS.
PEPTOSTREPTOCOCCUS.
BACILOS GRAMPOSITIVOS.
Aerobios o facultativos:
CORYNEBACTERIUM.
LISTERIA MONOCYTOGENES (MIR 02-03, 155).
BACILLUS.
ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIAE.
Anaerobios:
CLOSTRIDIUM.
PROPIONIBACTERIUM.
LACTOBACILLUS.

COCOS GRAMNEGATIVOS.
Aerobios o facultativos:

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BACTERIOLOGIA
NEISSERIACEAE.
NEISSERIA.
MORAXELLA.
ACINETOBACTER.
KINGELLA.
Anaerobios:
VEILLONELLA.
BACILOS GRAMNEGATIVOS.
Aerobios o facultativos:
ENTEROBACTERIACEAE: E. coli, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Proteus,
Morganella, Providencia, Salmonella, Shigella, Yersinia.
PSEUDOMONAS.
BRUCELLA.
LEGIONELLA.
BORDETELLA.
FRANCISELLA.
ACINETOBACTER.
VIBRIO.
HAEMOPHILUS.
GRUPO HACEK.
PASTEURELLA.
HELICOBACTER.
BARTONELLA, CAPNOCYTOPHAGA.
Anaerobios:
BACTEROIDES.
PREVOTELLA.
PORPHYROMONAS.

ACTIVIDAD
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es y en qu consiste la prueba de la coagulasa?
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Qu es y en qu consiste la prueba de la catalasa?
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BACTERIOLOGIA
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Cules son las caractersticas de la hemolisis?
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Qu es y en qu consiste la prueba del manitol?
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Qu es y en qu consiste la prueba de PYR?
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Qu es y en qu consiste la prueba de CAMP?
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Qu es una enterobacteria? Cite ejemplos
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Cul es la diferencia entre bacterias Gram (+) y Gram (-)?
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BACTERIOLOGIA

PATOGENIA DE LAS INFECCIONES BACTERIANAS


PATOGENICIDAD Y VIRULENCIA
Las enfermedades infecciosas tienen una gran variedad de agentes causales: virus, bacterias,
hongos, protozoos o helmintos; los principios bsicos que rigen sus mecanismos de transmisin son
los mismos, y su objetivo fundamental es la multiplicacin.
Patogenicidad y virulencia son trminos que se relacionan con la capacidad de un organismo para
causar dao a un hospedero susceptible. La patogenicidad se refiere a los mecanismos
bioqumicos de infeccin y desarrollo de la enfermedad y la virulencia es la medida (grado) de
patogenicidad.
Un microorganismo patgeno es aqul que tiene la capacidad de producir enfermedad. No todos los
organismos tienen la misma probabilidad de causar infeccin y subsecuentemente la enfermedad,
entendindose por infeccin la persistencia o la multiplicacin exitosa del patgeno sobre o dentro
del hospedero, mientras que el termino de enfermedad se utiliza para describir una infeccin que
causa dao significativo en el hospedero. En contraste, la persistencia de bacterias que no causan
enfermedad en el organismo se le conoce como colonizacin. Si las defensas del hospedero son
adecuadas, una persona puede ser infectada por una bacteria que cause enfermedad y si por un
periodo de tiempo prolongado no se presentan signos y sntomas esto se conoce como portador
asintomtico. Este binomio infeccin-enfermedad depende pues, tanto del patgeno como del
hospedero
Los factores o determinantes de virulencia son caractersticas genticas, bioqumicas, estructurales
de las bacterias que interactan con factores del hospedero y causan dao. Cualquier bacteria
puede ser patgena. Existen bacterias patgenas primarias (microorganismo que causa infeccin y
enfermedad cuando entra a un husped no inmune) y organismos oportunistas (microorganismos
que raramente causan enfermedad en humanos sanos, pero en un organismo cuyo sistema de
defensas esta alterado, causan enfermedad a menudo fatal), entre ellos algunos componentes de la
microbiota normal.
La infeccin es la entrada, establecimiento y propagacin de un agente causal en otro organismo.
No todos los organismos que colonizan una superficie corporal son capaces de invadir y daar los
tejidos del hospedero. El proceso infeccioso, comprende, habitualmente, varios pasos:

Entrada del microorganismo al hospedero, por diversas vas de entrada

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BACTERIOLOGIA

Adhesin a clulas, lo que dificulta que los patgenos sean eliminados


Propagacin en el hospedero, facilitada por factores de invasividad
Adquisicin de nutrientes
Lesin, mediada por factores del microorganismo o por la respuesta del hospedero
Tambin contempla las estrategias que emplean las bacterias para evadir la respuesta
inmune, como el cambio de fase y la variacin antignica.

Vas de ingreso o entrada al hospedero:

Ingestin
Inhalacin
Traumatismo
Venopuncin
Picadura de artrpodos
Transmisin sexual

Mecanismos y barreras de defensa naturales

Piel
Epitelio ciliado
Mucosidad
Secreciones

FACTORES DE VIRULENCIA:
Los mecanismos por los cuales las bacterias producen enfermedad se pueden dividir en dos
categoras en dos categoras:
a) Factores que promueven la colonizacin e invasin al hospedero:

Fimbrias
Pili
Adhesinas no fimbriales
Unin internalizacin a la clula M
Movilidad y quimiotaxis
sIgA proteasa
Sideroforos
Capsula
Variacin en antgeno de superficie

b) Factores que causan dao al hospedero:

Exotoxinas
Endotoxinas
Componentes txicos de la pared celular
Enzimas hidroliticas
Productos bacterianos que provocan respuesta inmune

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BACTERIOLOGIA
Factores que promueven la colonizacin e invasin al hospedero:
a) Pilis o fimbrias
Las fimbrias son apndices que consisten en subunidades de protenas que estn anclados ya sea
en la membrana externa de las bacterias Gram negativas, o en la membrana citoplasmtica, o en la
pared celular de las bacterias Gram positivas. Las fimbrias pueden ser rgidas o flexibles. Las
fimbrias no flexibles miden de 6 a 10 nm y portan adhesinas en su punta y en algunos casos
tambin en sus partes laterales. Las fimbrias flexibles son delgadas de 5 nm de dimetro y
generalmente portan adhesinas a lo largo de su longitud. La distincin principal de los pilis y
adhesinas es la adherencia, la cual puede ser adherencia especfica es decir, la unin
estereoqumica medible entre la bacteria y el substrato y por tanto se requiere energa para separar
a ambos. Adherencia no especfica es la asociacin entre una bacteria y su substrato sin unin
estereoqumica. La adherencia est determinada por adhesinas (o ligandos) que se definen como
molculas de superficie bacteriana capaces de unirse a un receptor en la superficie celular o a un
substrato. La mayora de las espacies expresan ms de un tipo de adhesina. La adhesina es la
molcula que interacta en unin estreo-especifica con su receptor. En algunos casos, la fimbria
posee dos o ms adhesinas distintas para dos o ms receptores diferentes.
b) Adhesinas no fimbriales (o afimbrial)
Las adhesinas afimbriales son protenas de superficie que median la adherencia de la bacteria a la
clula husped pero no estn organizadas en estructuras piliares y permiten la adherencia posterior
por fimbrias. Algunas de las adhesinas afimbriales reconocen tanto protenas como carbohidratos;
por ejemplo protenas de membrana externa de las bacterias Gram-negativas, cidos lipoproteicos
de bacterias Gram positivos, glucocalix.; protenas F y M de Streptococcus, y tienen como funcin
unirse en forma estrecha a la clula husped.
c) Unin a internalizacin en clulas M
Las clulas M son la puerta de entrada a los tejidos profundos y estn localizadas en el epitelio
intestinal intercaladas con los enterocitos, justo por arriba de los ndulos linfticos. Las clulas M
son endocticas por naturaleza, de modo que las bacterias que se unan a ellas son internalizadas y
transportadas al tejido linfoide. Algunas bacterias utilizan a las clulas M como puerta de entrada
para llegar a los tejidos profundos. Invasin se define como el proceso por medio del cual un
microorganismo penetra al citoplasma de clulas no fagocticas (clulas epiteliales o endoteliales),
se replica dentro de estas, se propaga a clulas adyacentes y finalmente destruye a las clulas. Un
patgeno intracelular es aquel microorganismo que se internaliza y se replica dentro de clulas
fagocticas (neutrofilos y macrfagos).
d) Movilidad y quimiotaxis
Movilidad bacteriana es la capacidad que tiene la bacteria de desplazarse de un lugar a otro por
medio del flagelo, en un sentido definido. Quimiotaxis se define come la capacidad que tienen las
bacterias de moverse hacia una fuente de nutrientes. Las superficies mucosas estn protegidas de
la colonizacin bacteriana debido a que son baadas constantemente con lquido y movimiento
rpido. En tales casos, la bacteria mvil se dirige hacia la membrana mucosa, teniendo mayor
posibilidad de contactar la superficie mucosa, a diferencia de las bacterias inmviles que carecen de
esta capacidad; apoyando esta idea se tiene que muchas de las bacterias que colonizan el intestino

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BACTERIOLOGIA
delgado y la vejiga son mviles. La movilidad es importante para el traslado a travs de la capa de
mucina. La capa de mucina no es una capa homognea, sino es un rea que consiste en zonas de
alta y baja viscosidad. El movimiento de reas de baja viscosidad es benfico para la bacteria que
busca la superficie mucosa. Tambin, la bacteria es atrada por la capa de mucina que sirve come
una fuente de nutrientes.
e) Proteasa anti IgA secretoria
La bacteria que intenta colonizar la superficie mucosa tiene mecanismos que le permiten no quedar
atrapada en la capas de mucina. La viscosidad de la mucina es causada en parte por las molecular
de inmunoglobulina secretoria A (sIgA) que se unen simultneamente a antgenos bacterianos, va
sus sitios de unin al antgeno y la interaccin con la mucina por medio de sus porciones Fc. Una
estrategia bacteriana que es designada para evitar ser atrapada en la capa de mucina es la
produccin de una enzima extracelular que rompe la IgA humana en bisagra. La importancia de que
ciertos gneros bacterianos produzcan esta proteasa de sIgA, radica, en que dichas bacterias
puedan colonizar las superficies mucosas con mayor facilidad que aquellas qua no producen la
proteasa de sIgA.
f) Mecanismos de captacin de hierro
El hierro es esencial pare el desarrollo bacteriano, pero la concentracin de hierro en la naturaleza
es muy baja. La concentracin de hierro libre en el cuerpo humano es particularmente baja debido a
qua la transferrina, lactoferrina, ferritina y hemina se unen la mayora del hierro disponible. Para
sobrevivir en el cuerpo humano, la bacteria debe de tener algunos mecanismos pare captar hierro.
El mejor mecanismo por medio del cual las bacterias captan hierro es el sideroforo. Los sideroforos
son compuestos de bajo peso molecular que quelan hierro con alta afinidad. Existen dos tipos
principales de sideroforos, catecoles e hidroxamatos, los dos tienen la misma propiedad, esto es,
forman compuestos quelantes con hierro. Los sideroforos son producidos por la bacteria y
excretados al medio en el cual se unen al hierro y el complejo sideroforo-hierro se une a receptores
para sidereforo en la superficie bacteriana, una vez que se ha internalizado el complejo sideroferohierro, este es roto para que libere el hierro en el interior de la bacteria. Algunas bacterias no solo
producen sus propios sideroforos sino tambin producen receptores capaces de unir sidesoforos
producidlos por otras bacterias.
g) Capsula
La capsula es una red de polmeros que cubre la superficie de una bacteria. La mayora de las
capsulas estn compuestas de polisacridos pero tambin se han descrito capsulas compuestas de
protenas o mezclas de protenas-carbohidratos. Si el polisacrido forma una capa homognea
uniforme alrededor del cuerpo bacteriano, se le llama capsula y si solo forma una red de trabeculas
a una malla alrededor de la bacteria, se le llama glucocalix. El papel de la capsula bacteriana es
proteger a la bacteria de la respuesta inflamatoria del husped, esto es la activacin del
complemento y muerte mediada per fagocitosis. La capsula por si misma es menos probable que
sea opsonizada por C3b y la bacteria puede no ser ingerida por los fagocitos. Menos formacin de
C3bBb significa que se producir menos C5b y por lo tanto menos probabilidad de que se forme el
complejo de ataque a la membrana (CAM) sobre la superficie de la bacteria, este fenmeno es muy
importante en bacterias Gram-negativas.
Una respuesta efectiva contra bacterias encapsuladas es la produccin de anticuerpos que se unen
a las capsulas, con la subsecuente opsonizacion de la bacteria. Las vacunas formadas con material
capsular han mostrado una alta efectividad en la prevencin de infecciones causadas per bacterias

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BACTERIOLOGIA
encapsuladas. Algunas bacterias evaden este tipo de proteccin del husped porque tienen
polisacridos que se parecen a los polisacridos del husped. Por ejemple existen capsulas las que
consisten en acido hialurnico (un polmero de matriz extracelular) come el de Streptococcus
pyogenes, o de Acido silico (un componente comn de las glicoprotenas de las clulas husped),
se encuentran en algunas cepas de Neisseria meningitidis. Este tipo de capsulas no son
immunogenicas y el husped no produce anticuerpos que opsonicen la superficie capsular.
h) Variacin de los antgenos de superficie
Una forma de evadir la accin de los anticuerpos del hospedero es cambiar de un tipo de fimbria a
otra, y as los anticuerpos preformados no se unen a la nueva fimbria formada. La bacteria tambin
cambia de protenas de superficie que puede servir como blanco para los anticuerpos. Algunas
bacterias capsuladas estn compuestas de polisacridos que no desencadenan la formacin de
anticuerpos porque dichos polisacridos se parecen mucho a los carbohidratos que son ubicuos en
los tejidos del husped (Acido silico y acido hialurnico). La bacteria tambin puede cubrirse por s
misma con protenas del husped, tales como fibronectina
Factores que causan dao al hospedero
a) Exotoxinas
Las exotoxinas son protenas bacterianas txicas. Muchas exotoxinas bacterianas se excretan al
medio donde se desarrolla la bacteria. Hay que diferenciar entre exotoxina (toxinas excretadas) de
endotoxinas (lipopolisacrido) que esta embebido en la membrana externa de las bacterias Gramnegativas. Las exotoxinas varan considerablemente en sus actividades y el tipo de clulas husped
que afectan. Los nombres dados a las diferentes exotoxinas refleja su diversidad y el nombre de
algunas toxinas indica el tipo de clulas que daan. Las exotoxinas que daan una gran variedad de
tipos celulares se llaman citotoxinas, mientras las exotoxinas que daan un tipo especifico de
clulas se designan de acuerdo al tipo de clula u rgano afectado, por ejemplo neurotoxina,
leucotoxina, hepatotoxina y cardiotoxina.
Tambin se les da nombre a las exotoxinas de acuerdo a las especies que las producen o a la
enfermedad que estn asociadas. Per ejemplo la toxina colrica producida por Vibrio cholerae. Una
confusin comn es el trmino "enteretoxina. Este es termino que denota toxinas de origen proteico
que causan diarrea o vomito (sntomas entricos).
Las exotoxinas se han dividido en tres grupos de acuerdo a su estructura y funcin. Un tipo son las
toxinas A-B (toxina diftrica, colrica, tetnica, etc.) que se les da el nombre porque la porcin B de
la toxina se une a su receptor en la clula husped y se separa de la porcin A, que media la
actividad enzimtica responsable de la toxicidad. El segundo tipo de exotoxinas no tienen las
proporciones separables A-B y actan por desorganizacin de la membrana de las clulas husped;
ejemplos de este tipo de toxinas son las hemolisinas y las fosfolipasas. El tercer tipo de toxina
denominado superantigeno que tambin carece de la estructura A-B y acta por estimulacin de las
clulas B para liberar citocinas por ejemplo la toxina del choque toxico producida por
Staphylococcus aureus.
b) Endotoxinas
La endotoxina es un Iipopolicarido (LPS) que es componente de la membrana externa de las
bacterias Gram-negativas la porcin lipdica (lpido A) esta embebido en la membrana externa con el
core, las porciones del antgeno O se extienden hacia afuera de la superficie de la bacteria. El

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BACTERIOLOGIA
lpido A es la porcin toxica de la molcula, debido a que esta embebida en la membrana externa de
la bacteria intacta, ejerce su efecto solamente cuando la bacteria se lisa. La lisis ocurre como
resultado del efecto del complejo de ataque a membrana o por el complemento, ingestin y
destruccin de fagocitos o la muerte por ciertos tipos de antibiticos. La toxicidad del lpido A reside
en la capacidad de activar el complemento y estimular la liberacin de las protenas bioactivas tales
como citocinas.
c) Otros componentes txicos de la pared
Las bacterias Gram-positivas no tienen endotoxinas, pero la presencia de esas bacterias en el tejido
provoca una respuesta inflamatoria que es idntica a la desencadenada por el lipopolisacarido de
las bacterias Gram-negativas. Aqu se sugiere que el pptido glucan y los cidos teicoicos son
responsables de esos efectos.
d) Enzimas hidroliticas
Muchas bacterias patgenas producen enzirnas hidroliticas, tales como hialuronidasa, que degrada
componentes de la matriz extracelular y de esta forma lesiona la estructura de los tejidos del
hospedero. Otras enzimas tales como DNAsa reduce la viscosidad de los residuos de clulas
muertas del hospedero (pus) y por lo tanto ayuda a la propagacin de la bacteria a un rea ms
extensa de dao en el hospedero. Las enzimas hidroliticas tambin proveen a la bacteria de fuentes
de carbono y energa rompiendo los polmeros del hospedero en azucares y aminocidos de bajo
peso molecular. Frecuentemente es difcil diferenciar entre el dao causado por las enzimas
hidroliticas de bacterias y el dao causado por los fagocitos, debido a que los fagocitos producen
algunos de los mismos tipos de enzimas hidroliticas.
La virulencia de algunos microorganismos es debida en parte a la produccin de enzimas u otros
factores metablicos. Entre las principales enzimas metabolicas relacionadas con la virulencia de
las bacterias se pueden mencionar:

Colagenasa: enzima que desintegra el colgeno del musculo hueso y cartlago,


favoreciendo la diseminacin, ejemplo: Clostridium perfringens y otras bacterias.

Coagulasa: enzima capaz de coagular el plasma facilitando el depsito de fibrina,


impidiendo una coagulacin adecuada, se relaciona con la formacin de trombos en la
sangre y es propio de cepas virulentas de Staphylococcus.

Hialuronidasa: conocido tambin como factor de diseminacin, hidroliza el acido


hialurnico facilitando la diseminacin del microorganismo en el hospedero. Es producida
por especies del genero Clostridium y algunos cocos.

Leucocidinas: sustancia producida por los gneros Staphylococcus y Streptococcus y son


capaces de lisar a leucocitos polimorfonucleares.

Hemolisinas: sustancias responsables de lisar eritrocitos, se les relaciona con la virulencia


debido a que las cepas hemolticas de un patgeno en general son ms virulentas que las
no hemolticas. Aqu podemos mencionar a las estreptolisinas O y S de Streptococcus y
la tetanolisina producida por Clostridium tetani.

Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA

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BACTERIOLOGIA

Lecitinas: conocidas tambin con el nombre de alfatoxina, destruye varios tipos celulares
en particular eritrocitos. Es conocida por Clostridium perfringens.

Fibrinolisinas: disuelve la fibrina humana pero no la de otras especies animales. Aqu se


pueden citar la estreptocinasa producida por los grupos A, B, y C de Streptococcus beta
hemoltico.

e) Productos bacterianos que producen una respuesta autoinmune


El sistema inmune humano est diseado para atacar y eliminar invasores extraos, pero siempre
existe el peligro de que esas defensas acten en contra de las propias clulas del hospedero y
entonces las clulas del sistema inmune reconocen algunas molculas del hospedero como
extraas. Este ataque se denomina respuesta autoinmune. Un nivel importante de proteccin contra
el desarrollo de una respuesta autoinmune ocurre a nivel las interacciones de clulas T
presentadoras de antgeno (APC-T); en la fiebre reumtica se produce una respuesta de este tipo,
los anticuerpos y las clulas T estimulados por un antgeno proteico de Streptococcus pyogenes
reacciona en forma cruzada con el tejido cardiaco y provoca una respuesta inflamatoria que daa a
corazn.
Las protenas del choque trmico han sido identificadas como posibles fuentes de dao causado por
reaccin cruzada de anticuerpos y clulas T.las protenas de choque trmico se producen cuando la
bacteria se encuentra en varios tipos de estrs, incluyendo estrs oxidativo, estrs por pH y por
calor. La produccin de protenas de choque trmico ocurre durante la infeccin, especialmente
cuando las bacterias estn dentro de los fagocitos. Las protenas de choque trmico se detectan se
detectan en pacientes que han montado una respuesta inmune hacia el patgeno. Las clulas de
los humanos tambin producen protenas de choque trmico, que al igual que las protenas
bacterianas, son desencadenadas por una variedad de tipos de estrs, incluyendo por infeccin de
virus y bacterias.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es una toxina bacteriana?
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Cules son las diferencias entre endotoxinas y exotoxinas?
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Cul es la diferencia entre los pilis y flagelos?
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BACTERIOLOGIA
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Qu es la mucina y en que fluidos se encuentran?
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Qu es una quimiotaxia?
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Cul es la diferencia entre infeccin y enfermedad?
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Cul es la funcin de las fimbrias y adhesinas?
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Qu es un quelante?
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Cul es el la diferencia entre capsula bacteriana y el glucocalix?
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Cul es la funcin de la proteasa sIgA?
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Cul es la diferencia de las bacterias Gram +/-, en relacin a las toxinas?
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Qu provoca un dao causado por clulas fagociticas?
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BACTERIOLOGIA

QUIMIOTERAPIA BACTERIANA
Los antibiticos son sustancias qumicas producidas por diferentes especies de microorganismos
(bacterias, hongos, actinomicetos) o sintetizados por mtodos de laboratorio, suprimen el
crecimiento de otros microorganismos y pueden eventualmente destruirlos. Estos compuestos
difieren marcadamente en sus propiedades fsicas, qumicas y farmacolgicas, as como en su
mecanismo de accin y espectro antimicrobiano.
Con frecuencia se han utilizado de manera indistinta los trminos antibitico, antimicrobiano y
quimioterpico para designar sustancias qumicas definidas con actividad contra microorganismos
especficos, como ya sealamos, el antibitico es una sustancia producida en la naturaleza por
microorganismos vivos o sintetizada en el laboratorio, por lo que se considera un producto de la
evolucin y puede conferir una ventaja selectiva a quienes los producen en un ecosistema
especfico.
Desde el punto de vista tcnico, los antibiticos difieren de los quimioterpicos en que estos ltimos
son productos de sntesis qumica, aunque algunos como las sulfonamidas tienen actividad
antibacteriana, por lo que se ha propuesto el trmino antimicrobiano para describir a todas las
sustancias con esta actividad, ya sean naturales o de origen sinttico.
CLASIFICACIN Y MECANISMO DE ACCIN
En la prctica diaria, las clasificaciones que ms se utilizan son las que se basan en la accin del
antibitico sobre la bacteria, las que los clasifica segn su mecanismo de accin, y al tener en
cuenta la coloracin de Gram y las que los agrupa segn su estructura qumica.
Clasificacin de los antibiticos segn su efecto bacteriano
a. Bacteriostticos: aqullos que inhiben la multiplicacin bacteriana, la cual se reanuda una
vez que se suspende el tratamiento.
b. Bactericidas: poseen la propiedad de destruir la bacteria, su accin es teraputica
irreversible.

Bactericidas
Penicilinas
Cefalosporinas

Bacteriostticos
Tetraciclinas
Eritromicina

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BACTERIOLOGIA

Aminoglucsidos
Rifampicina
Quinolonas
Monobactmicos
Polimixinas

Sulfonamida
Novobiocina
Cloranfenicol

Estas designaciones de bacteriosttico o bactericida pueden variar segn el tipo de


microorganismo: la penicilina G suele ser bactericida para cocos grampositivos, pero slo es
bacteriosttico contra enterococos (Strep tococus faecalis), en tanto que el cloranfenicol suele ser
bacteriosttico, incluso a concentraciones muy altas, pero puede ser bactericida contra Hemophilus
Influenzae.
Clasificacin segn la tincin de gram de las bacterias
Segn la actividad que tienen los antibiticos frente a las bacterias grampositivas y gramnegativas,
stos pueden clasificarse en:
Tipo
Antibiticos contra Gram +:
Antibiticos contra Gram-:
Antibiticos de amplio espectro:

Antibitico
penicilinas, glicopptidos, lincosamida, rifampicinas
aminoglucsidos, monobactmicos, aminociclitoles,
polipptidos
cefalosporinas, carbapenmicos, amfenicoles,
macrlidos, quinolonas, tetraciclinas.

Clasificacin segn el efecto de su accin


La clasificacin que se basa en el mecanismo de accin de los antibiticos, resulta de gran utilidad,
sobre todo si hay que utilizar simultneamente varios agentes.
Clasificacin de los antibiticos segn su mecanismo de accin sobre la estructura bacteriana
Sitio de Accin

I. Inhibicin de la sntesis de la pared celular

II. Lesin en la permeabilidad de la


membrana celular

III. Inhibicin de la sntesis proteica

Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA

Antibitico
Penicilinas
Cefalosporinas
Vancomicina
Fosfomicina
Tercoplanina
Bacitracina
Poliomixinas
Colistinas
Nistatina
Anfotericn B

Cloranfenicol
Tetraciclina
Aminoglucsidos
Lincomicinas
Eritromicina
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BACTERIOLOGIA

IV. Inhibicin de la sntesis de cidos


nucleicos

Quinolonas
Sulfonamidas
Rifampicina
Trimetropn

1. Antibiticos que inhiben la sntesis de la pared celular.


Las bacterias son microorganismos hiperosmolares con respecto a los tejidos y al lquido intersticial
de los mamferos, por tanto, para mantener su integridad cuando infectan al hombre, necesitan una
pared celular rgida.
La inhibicin de la sntesis de la pared bacteriana tiene habitualmente un efecto bactericida. La
estructura de la pared celular es un polmero denominado peptidoglicano, cuya sntesis se divide en
3 etapas principales, cada una de stas es inhibida por un grupo de antibiticos diferentes.
En la primera etapa se forma el UDP-N-acetil-munamil-pentapptido en el citoplasma bacteriano. En
la segunda etapa, se polimerizan el UDP-N-acetil-muramil-pentepptido y la N-acetilglucosamina
que son transportados a travs de la membrana citoplasmtica y se unen al punto de crecimiento de
la pared bacteriana. Esta fase es inhibida por antibiticos como la vancomicina y la bacitracina. Por
ltimo, las cadenas de peptidoglicano, una vez fuera de la clula, quedan entrelazadas
transversalmente y dan lugar a la formacin de un polmero tridimensional, esta etapa, tambin
conocida como reaccin de transpeptidacin es inhibida por las penicilinas y las cefalosporinas.
2. Antibiticos que ejercen su accin a travs de la membrana celular y afectan su
permeabilidad.
La membrana citoplasmtica es fundamental para la regulacin del medio intracelular de la bacteria.
Esta membrana tiene estructura diferente para las bacterias y los hongos y puede lesionarse por
algunos productos, de esta forma se obtiene una actividad antimicrobiana selectiva; antibiticos
como polimixina, pristanamicina y anfotericn B poseen esta accin. Las polimixinas, tienen una
afinidad especial para los receptores de polifosfatos situados en la membrana celular de las
bacterias, producen toxinas, que si bien es letal para la bacteria, no es txico para el hombre.
3. Frmacos que inhiben la sntesis proteica (inhibicin de la traduccin y transcripcin del
material gentico).
Algunos antibiticos (cloranfenicol, lincomicina, aminoglucsidos y las tetraciclinas) son capaces de
inhibir la sntesis de las protenas en las bacterias.
El ribosoma bacteriano ms pequeo que el de los mamferos, consta de 2 subunidades
denominadas 50s y 30s; el antibitico se une a los ribosomas bacterianos y bloquean la accin del
RNA mensajero, este bloqueo en ocasiones es reversible. En el caso de los aminoglucsidos, stos
se unen a la subunidad ribosomal 30s y producen la acumulacin de complejos iniciales de la
sntesis proteica, lectura errnea del cdigo RNAm y produccin de poli pptidos anormales que se
comportan como bactericidas.
4. Inhibicin de la sntesis de los cidos nucleicos.

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BACTERIOLOGIA
Las fluoroquinolonas, sulfonamidas, rifampicn, novobiocn y los nitroimidazoles actan por este
mecanismo al inhibir de forma selectiva, la enzima RNA polimerasa dependiente del DNA, lo cual
cataliza la transcripcin de la informacin gentica contenida en el RNA mensajero y se convierte
as en un potente bactericida.
INTERACCIONES DE LOS ANTIBITICOS
Las interacciones de los antibiticos sobre los grmenes pueden producir: sinergismo, adicin,
competencia, antagonismo y el llamado efecto posantibitico.

Sinergismo: Cuando la accin bacteriana y/o bacteriosttica de 2 o ms antibiticos es


mayor, que la que se obtiene con cada una de las drogas utilizadas individualmente. 18 Son
sinrgicas las combinaciones que actan a diferentes niveles de la estructura bacteriana,
por ejemplo penicilinas y aminoglucsidos, las primeras inhiben la sntesis de la pared
celular mientras que los aminoglucsidos, inhiben la sntesis proteica.

Adicin: Cuando el efecto de una combinacin de medicamentos es igual al que se


produce con cada uno de los medicamentos utilizados individualmente; un efecto aditivo
eficaz puede lograrse combinando 2 betalactmicos (carbenicilln y cefalotn).

Competencia: La competencia se establece cuando se utilizan 2 antibiticos y uno de ellos


es ms eficaz que los 2 juntos, constituye un ejemplo clsico, la asociacin de penicilina y
cloranfenicol.

Antagonismo: Este fenmeno se produce cuando el efecto de una droga contrarresta el de


la otra. El ejemplo de antagonismo ms frecuente entre 2 antibiticos se refiere a la
combinacin de un bactericida activo en la pared celular (penicilina) con un bacterosttico
potente que inhiba la sntesis proteica (tetraciclina), porque para que los medicamentos tipo
penicilinas ejerzan su efecto mortal, es necesario que las clulas estn en crecimiento.

Efecto Posantibitico: El seguimiento de la cintica de crecimiento de microorganismos


expuestos a la accin de antimicrobianos permite comprobar la persistencia en la inhibicin
del crecimiento bacteriano de los supervivientes en un medio libre de antibiticos. Este
efecto posantibitico es variable en su duracin en dependencia, adems, del
microorganismo de que se trate.
Prcticamente, todos los antibiticos desarrollan esta condicin frente a los grampositivos,
as por ejemplo, las quinolonas y los aminoglucsidos inducen un efecto posantibitico,
tanto para los grampositivos como para los gramnegativos.

El efecto posantibitico significa que aun cuando no se erradiquen los grmenes, stos no
proliferan nuevamente durante varias horas despus de exponerlos a una concentracin por
encima de la concentracin mnima inhibidora. Se ha demostrado adems que en la fase de
exposicin posantibitica, los microorganismos son ms sensibles a la destruccin por los
leucocitos.
MECANISMO DE RESISTENCIA A LOS ANTIBITICOS
La resistencia de las bacterias a los antibiticos es un problema que se ha ido complicando, sobre
todo en las ltimas dcadas, porque a medida que se han ido sintetizando nuevos antimicrobianos,
han ido surgiendo cepas resistentes a los mismos.

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BACTERIOLOGIA
Se entiende por resistencia, el mecanismo a travs del cual, la bacteria puede disminuir o inactivar
la accin de los agentes antimicrobianos.
Debe tenerse en cuenta que si bien la resistencia microbiana y resistencia clnica (fracaso
teraputico) estn ntimamente relacionados, no son la misma cosa: la primera se refiere a la
respuesta que desarrollan los patgenos susceptibles a las diferentes concentraciones de
antibiticos mientras que la segunda, se refiere a la ineficiencia teraputica, aun cuando las
concentraciones del antimicrobiano sean correctas: las mismas dependen de factores
extrabacterianos (seleccin inadecuada del antibitico) o del husped (neutropenia, cuerpos
extraos, etc.). La resistencia bacteriana puede ser:
a. Natural: cuando es una propiedad especfica de algunas bacterias.
b. Adquirida: cuando se produce una mutacin cromo smica o la bacteria adquiere un
plsmido de resistencia, es decir, un fragmento estracromosmico de DNA portador de
genes que modifican la resistencia al antibitico. La informacin gentica presente en
algunos plsmidos, es un factor importante en la patogenicidad o la invasividad de las
bacterias, en la velocidad de aparicin de cepas patgenas o invasivas resistentes a las
drogas antimicrobianas y en la evolucin del cuadro clnico.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es un antibitico?
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Qu tipos de antibiticos conoce?
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Cul es la diferencia entre las generaciones de los farmacos?
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Cul es el mecanismo de accin de los frmacos que evitan la sntesis de protenas?
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BACTERIOLOGIA
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Cul es el mecanismo de accin de los frmacos que evitan la sntesis de cidos nucleicos?
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Cul es el mecanismo de accin de los frmacos que evitan la sntesis de la pared celular?
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Qu es una bacteria drogo resistente?
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Qu es una bacteria multidrogo resistente?
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Cules son los mecanismos de la resistencia a los frmacos por parte de las bacterias?
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Qu es un elemento bacteriosttico?
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Cules son las interacciones de los frmacos?
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BACTERIOLOGIA

FLORA BACTERIANA NORMAL


El cuerpo humano presenta una gran superficie cutnea y mucosa por la que entra en contacto con
el medio ambiente. En esta superficie existen diversos sectores, donde residen microorganismos
con diferentes caractersticas de humedad, temperatura, pH y disponibilidad de nutrientes.
La flora humana normal es el conjunto de grmenes que conviven con el husped en estado
normal, sin causarle enfermedad. Su composicin es caracterstica para la especie humana, tanto
en los grmenes que la componen como en su nmero y distribucin en el organismo.
Sitios colonizados y sitios estriles:
La flora normal coloniza las superficies cutneomucosas. Por otro lado, en el organismo existen
sectores que son estriles en condiciones normales: por ejemplo, pleura, meninges, cavidad
peritoneal, pericardio, etc. Esto debe ser tenido en cuenta al realizar un estudio microbiolgico. Las
tcnicas empleadas para obtener una muestra de un sitio con flora son diferentes a las de los
sectores que no la tienen. Tambin son diferentes los medios de cultivo que se emplearn para
sembrar esas muestras (que requerirn a menudo de medios que inhiban la flora normal) y la
interpretacin de los cultivos.
Por ejemplo, el aislar un germen del lquido cefalorraqudeo es siempre patolgico si se tomaron las
precauciones para no contaminar la muestra; en cambio, en un exudado farngeo se aislarn
diversos grmenes y se deber valorar en forma cuidadosa cuales son habitantes normales de ese
sector y cules no.
Flora basal y flora transitoria:
La flora basal es la caracterstica de cada sector del organismo y est constituida por grmenes que
siempre estn presentes en ese sector. Por ejemplo: Staphylococcus epidermidis en la piel o E. coli
en el intestino.
En cambio, la flora transitoria es variable de un ser humano a otro y est compuesta por grmenes
que colonizan en forma intermitente un determinado sector. Esta flora transitoria puede incluir
bacterias potencialmente patgenas para el propio individuo u otras personas que entran en
contacto con l.
Importancia de la flora normal:

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BACTERIOLOGIA
La flora humana normal desde diversos puntos de vista representa un importante
mecanismo de defensa del husped.
Contribuye al desarrollo de la respuesta inmunolgica, como ha sido demostrado en
modelos animales que nacen y son criados en condiciones de esterilidad (individuos
axnicos). Estos animales presentan un pobre desarrollo de los diversos componentes de
su sistema inmunitario.
La flora adems ayuda a evitar la colonizacin de la piel o las mucosas por bacterias que
pueden ser patgenas.
Los grmenes para iniciar la infeccin deben, en general, comenzar por colonizar los
epitelios. All seguramente compiten con los integrantes de la flora por factores tales como
receptores celulares y nutrientes.
IMPORTANCIA DE LA FLORA NORMAL
Efectos directos

Produccin de bacteriocinas
Produccin de metabolitos txicos
Reduccin del potencial redox
Consumo de nutrientes esenciales
Competencia por receptores

Efectos indirectos

Aumento de la produccin de anticuerpos.


Estmulo de la fagocitosis
Aumento de la produccin de interfern.
Deconjugacin de cidos biliares.

FLORA NORMAL DE LA CAVIDAD BUCAL


Existen diversos nichos dentro de la cavidad oral y pueden reconocerse diferencias si se estudia la
flora de dientes, lengua, mucosa yugal o surco periodontal. La flora oral es de tipo mixto, con
asociacin de grmenes aerobios y anaerobios.
Las bacterias que se adhieren a la superficie dental en forma permanente y a travs de diferentes
polmeros de origen bacteriano como dextranos y levanos. El contenido de grmenes anaerobios es
mximo a nivel del surco gingival. Los dientes presentan superficies de adherencia que tienen la
particularidad de no renovarse en forma peridica, como lo hacen los epitelios.
Composicin: Predominan diferentes especies de Streptococcus alfa hemolticos. Streptococcus
mutans y Streptococcus sanguis se hallan a nivel de la placa dentaria. Streptococcus mitis se
adhiere tanto a los dientes como a las mucosas; S. salivarius predomina en la mucosa lingual.
Entre los grmenes anaerobios Gram positivos pueden hallarse Actinomyces sp. a nivel de
la placa, y algunas especies de Lactobacillus, en menor cantidad.
La mayora de los Gram negativos son anaerobios como Bacteroides del grupo
melaninogenicus y especies del gnero Fusobacterium.
Tambin pueden encontrarse espiroquetas del gnero Treponema distintas de T. pallidum.

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BACTERIOLOGIA
Los cocos Gram positivos anaerobios pertenecen a los gneros Peptococcus,
Peptostreptococcus, Ruminococcus entre otros.
Pueden adems aislarse especies de Mycoplasma y levaduras del gnero Cndida.
Dado que se trata de un complejo ecosistema, existen tambin complejas interrelaciones entre los
distintos integrantes. A nivel de la placa dentaria, las bacterias se hallan en grandes
concentraciones, formando micro colonias y disponindose en estratos. La flora de la cavidad oral
est involucrada en la patogenia de enfermedades como la caries y periodontitis.
En el desarrollo da la caries dental intervienen no slo las bacterias sino tambin factores como el
pH cido resultante de la descomposicin de hidratos de carbono de la dieta, etc.
FLORA NORMAL DEL APARATO DIGESTIVO
El tubo digestivo alberga un gran nmero de bacterias. Tambin a este nivel se pueden reconocer
distintos nichos ecolgicos. La flora normal intestinal contribuye a la sntesis de vitaminas K y
vitaminas del complejo B y colabora con procesos digestivos. Adems compite con los
microorganismos patgenos por nutrientes y receptores y elabora bacteriocinas.
Estmago: En condiciones fisiolgicas y sin alimentos, el pH gstrico es extremadamente cido,
alrededor de 2; este pH aumenta aproximndose a la normalidad al ingerir alimentos. La densidad
de bacterias es relativamente baja y se compone de grmenes de la flora oro farngea que han sido
deglutidos como Streptococcus hemolticos, Lactobacillus sp., cocos anaerobios, Candida sp. Y
otros grmenes capaces de resistir el medio cido.
Intestino delgado: En el duodeno se mantiene el pH que limita el crecimiento de grmenes. El
peristaltismo representa un mecanismo importante que mantiene un nmero bajo de bacterias. La
bilis tiene propiedades antimicrobianas e inhibe de muchos grmenes. Otras sustancias, como la
lisozima e IgA secretoria, tambin contribuyen a mantener un nmero relativamente bajo de
microorganismos. El nmero de bacterias aumenta gradualmente hacia el leon. A nivel del leon
terminal se alcanzan concentraciones de 106 a 108 bacterias por ml de contenido intestinal, con
predominio de los anaerobios.
Intestino grueso: Las bacterias representan aproximadamente el 40% del peso seco de las
materias fecales. El aumento del contenido bacteriano probablemente se explica por:
Disminucin del peristaltismo,
Aumento del pH; cercano al fisiolgico,
Disminucin del contenido de agua.
Pasando la vlvula ileocecal los grmenes de la flora alcanzan concentraciones de 107 a 109
bacterias por ml, llegando al mximo en el recto con 10 11 bacterias por ml. Es, sin duda, el mayor y
ms complejo ecosistema microbiano del organismo y se estima que a nivel colnico conviven ms
de 500 especies diferentes de bacterias, con un predominio notorio de grmenes anaerobios. Estos
corresponden en su mayora a microorganismos de los gneros Bacteroides, y Fusobacterium,
entre los bacilos Gram negativos, y especies de Peptostreptococcus, Sarcina y Veillonella entre los
cocos.
Los bacilos Gram positivos estn representados por especies de Bifidobacterium, Actinomyces,
Bacillus, Lactobacillus y Clostridium. Entre los anaerobios facultativos predominan las

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BACTERIOLOGIA
enterobacterias, siendo E.coli la ms numerosa, seguida de especies de Klebsiella, Proteus,
Enterobacter y Citrobacter.
De los cocos Gram positivos pueden hallarse especies de Enterococcus, Streptococcus y
Staphylococcus.
La adquisicin de la flora normal se inicia en el momento del nacimiento; en el recin nacido los
grmenes que inicialmente colonizan el tubo digestivo provienen del perineo y de la vagina de la
madre. En general se trata de E.coli, Klebsiella spp. y especies de Enterococcus; ms raramente
especies de Clostridium.
Importancia de la flora digestiva
La presencia de la flora determina un correcto desarrollo de la mucosa intestinal.
Interviene en el metabolismo de sustancias como el cido flico, biotina, vitaminas B12, K y
E.
Favorece la produccin de IgA y contribuye a la inmunotolerancia. Es un importante
estmulo antignico.
Interviene en el ciclo enteroheptico de drogas como el Cloranfenicol.
Tiene efecto de barrera, al ocupar nichos ecolgicos, impide el establecimiento de otras
bacterias, potencialmente patgenas. Este fenmeno se conoce como interferencia
bacteriana.
Segrega bacteriocinas, sustancias que son txicas para bacterias de otros gneros.
La flora normal del tubo digestivo interviene en infecciones oportunistas o endgenas en
circunstancias tales como obstrucciones mecnicas, o perforacin del tubo digestivo. En
este caso, los grmenes pasan al peritoneo, causando una enfermedad grave.
FLORA NORMAL VAGINAL
El estmulo hormonal determina la proliferacin de las clulas epiteliales que aumentan su contenido
de glucgeno. Este es utilizado por Lactobacillus spp., siendo el cido lctico el producto final del
metabolismo que ocasiona un descenso importante del pH. La acidez resultante inhibe en muchas
bacterias. En la mujer en edad genital activa predominan distintas especies de Lactobacillus, otros
bacilos Gram positivos y menor nmero de cocos Gram positivos (Streptococcus spp.,
Enterococcus spp., etc.). Tambin pueden encontrarse en bajo nmero Actinomyces, bacilos Gram
negativos anaerobios como Bacteroides y distintas especies enterobacterias. Streptococcus
agalactiae (grupo B) se asla en un porcentaje variable a esta edad. Si bien no suele producir
enfermedad en la mujer, su presencia implica riesgo para el recin nacido, en el cual puede causar
enfermedad severa.
Durante la gestacin, a medida que el embarazo progresa, aumenta la densidad de LactoBacillus y
disminuyen los bacilos Gram negativos anaerobios y facultativos, el resultado es un mecanismo que
reduce el riesgo de bacteriemia grave durante el parto.
Tambin puede aumentar la cantidad de levaduras y, eventualmente, pueden causar sntomas. En la
etapa prepuberal predominan grmenes de origen cutneo y perineal: S. epidermidis,
Propionibacterium spp., pueden aislarse levaduras en escaso nmero, al igual que enterobacterias y
algunos bacilos Gram negativos anaerobios.
En la mujer postmenopusica, al cesar el estmulo hormonal, la flora retorna al patrn de la infancia.
A la flora vaginal se le reconocen importantes funciones:

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BACTERIOLOGIA
Proteger frente a la infeccin vaginal, en especial en el embarazo,
Suministrar la flora al recin nacido,
Disminuir los riesgos de la madre y del recin nacido en la fase bacterimica del parto.

FLORA NORMAL DE LA PIEL


La piel del ser humano es un extenso y heterogneo territorio con grandes variaciones en cuanto a
estructura y condiciones ambientales, lo que determina diferencias en la densidad y composicin de
la flora, segn el rea considerada. La mayor parte de los grmenes colonizan el estrato crneo, el
cual es relativamente impermeable.
Los mecanismos de defensa a nivel de la piel estn representados por:
El continuo recambio celular de las capas superficiales del epitelio,
pH bajo debido a metabolitos de las glndulas sebceas,
Macrfagos de la piel.
La composicin de la flora, tanto en sus aspectos cualitativos como cuantitativos, puede estar
influida por factores tales como clima, condiciones de higiene, etc.
En el personal hospitalario la flora transitoria puede estar integrada por grmenes que
potencialmente pueden causar enfermedad a los pacientes. El lavado de manos es la medida
profilctica ms importante.
Composicin: Predominan los grmenes Gram positivos. La flora basal se compone de
Staphylococcus spp. En general S. epidermidis, Micrococcus spp. y Corynebacterium spp.
Propionibacterium acnes es un bacilo Gram positivo anaerobio que se encuentra colonizando
glndulas sebceas. Esta bacteria posee lipasas que degradan los lpidos secretados por esas
bacterias. Los metabolitos resultantes son principalmente cidos grasos insaturados que tienen
actividad antimicrobiana.
La flora transitoria est integrada por S. aureus y menor cantidad de bacilos Gram negativos
(Enterobacterias, Acinetobacter) en regiones como axilas, ingle y perineo.
La flora cutnea se ve involucrada en infecciones cuando la piel presenta soluciones de continuidad.
Otras infecciones ocasionadas por grmenes de la flora son las que se producen al colocar
catteres percutneos u otros dispositivos que impliquen ruptura de la barrera cutnea.
FLORA DEL APARATO URINARIO
Salvo la uretra anterior, el aparato urinario es estril. La orina contribuye a mantener la va urinaria
libre de grmenes, debido al arrastre, al pH cido y a su elevada osmolaridad.
El sector anterior de la uretra se coloniza con grmenes que provienen del perineo. Esas bacterias
son eliminadas al comenzar la miccin, lo que se utiliza para obtener la muestra para urocultivo por
chorro medio, evitando as la presencia de contaminantes.
En la mujer, la menor longitud de la uretra, as como la proximidad del ano explican, al menos en
parte, la mayor incidencia de infeccin urinaria. La infeccin del aparato urinario en general es
causada por grmenes que colonizan primero la zona circundante y que por va ascendente llegan a
la vejiga o hasta el rin. Las causas que favorecen esta enfermedad, son todas las que alteran los

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BACTERIOLOGIA
mecanismos de defensa: obstruccin a la circulacin de la orina (clculos, hipertrofia prosttica)
malformaciones de la va excretora, sondas vesicales, etc.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu es la microflora normal del cuerpo humano?
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Qu ventajas nos dan las bacterias que forman la flora microbiana normal del cuerpo?

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BACTERIOLOGIA
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Qu y cules son las caractersticas de la flora microbiana residente?
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Qu y cules son las caractersticas de la flora microbiana transitoria?
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Cul es la flora microbiana normal de la piel?
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Cul es la flora microbiana normal de la boca?
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Cul es la flora microbiana normal de la vagina?
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Cul es la flora microbiana normal de los intestinos?
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Cul es la flora microbiana normal de la nariz?
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Cules son las desventajas de la flora microbiana normal del cuerpo?
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BACTERIOLOGIA

BACILOS GRAM (+) FORMADORAS DE ESPORAS: Bacillus y


Clostridium
BACILLUS
Caractersticas generales
Este gnero pertenece a la familia Bacillaceae. Son bacilos Gram (+) grandes y esporulados, no
exigentes y en general mviles. Incluye bacterias aerobias y anaerobias facultativas. Estn
ampliamente distribuidos en la naturaleza; algunos forman parte de la flora normal y suelen ser
contaminantes del laboratorio.
El manual Bergeys de sistemtica bacteriana describe 34 especies, pero Bacillus anthracis es el
ms importante en microbiologa mdica y veterinaria. Existe una gran diversidad de contenido G+C
en su genoma, 32-62 mol % dentro del gnero, lo que refleja su gran heterogeneidad.
Ciertos miembros del gnero tienen implicancias mdicas por la produccin de antibiticos como
polimixina y bacitracina, adems de uso industrial en la produccin de solventes, enzimas,
vitaminas, etc.
Especies del gnero Bacillus:

Bacillus cereus: es agente de toxiinfeccin alimentaria, es capaz de producir una


enterotoxina termoestable que produce vmitos y una termolbil responsable del sndrome
diarreico. El arroz y otros vegetales son los principales vehculos de transmisin.
Relacionados a enfermedad transmitida por alimentos (ETA). Morfolgicamente es similar a
B. anthracis pero se diferencia por ser mvil y resistente a la penicilina. Produce una lactamasa y es tambin resistente al sulfametoxazol- trimetoprim. Es agente tambin de
infecciones oculares.

Bacillus stearothermophilus: se utiliza como control biolgico en la autoclave.

Bacillus subtilis: presente en el aire y polvo, es un contaminante del laboratorio pero puede
producir enfermedad en inmunodeprimidos. Se utiliza como control biolgico en el horno
Pasteur.

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BACTERIOLOGIA

Bacillus thuringiensis: es utilizado como pesticida por producir una toxina letal para ciertos
insectos.

Bacillus anthracis
Es agente productor del carbunco o ntrax, que fue una de las primeras infecciones bacterianas
para las cuales se estableci definitivamente la causa. Dio lugar al desarrollo de la primera vacuna
bacteriana que fue desarrollada por Louis Pasteur. Es una enfermedad que afecta sobre todo a
animales herbvoros, en particular ovinos y bovinos. El hombre la adquiere de forma accidental: en
el contexto agrcola como una infeccin cutnea local, en el contexto industrial (manipuladores de
cuero y pelo de animal) como una neumona (poco frecuente). Es entonces, una zoonosis y una
enfermedad laboral.
Por producir endosporas altamente resistentes y ser capaz de producir infecciones respiratorias
graves, es un arma biolgica potencial.
Morfologa y fisiologa de B. anthracis

Microscopa: bacilos rectos de extremos cuadrados de 3-5 m de largo y 1-1.2 m de


ancho, aislados o en pares. Es inmvil a diferencia de la mayora de las otras especies del
gnero. Cuando desarrolla in vivo presenta cpsula, pero para demostrarla in vitro debe
cultivarse en medios especiales (por ej. medios con bicarbonato e incubacin a 6% de
CO2). La endospora es elptica, ubicada centralmente, y no modifica el soma bacteriano; no
se produce en tejidos de animales vivos, pero si en cultivos de varios das, suelos o
animales muertos.

Macroscopa: se cultivan en placas de gelosa sangre, luego de 24 horas de cultivo, las


colonias son grandes (2-3 mm de
dimetro), sobre elevadas, blancogrisceas, opacas y de bordes
irregulares, en aspecto de cabeza de
medusa. Tienen una consistencia
membranosa con dificultad para
emulsionarlas.
No
producen
hemlisis.

Caractersticas del cultivo: se


realiza en aerobiosis, crecen bien en
cualquier medio, pero se visualiza
mejor la morfologa de las colonias
en agar sangre al 5%, pH 7-7,4 y 37
C.

Resistencia: la clula vegetativa es comparable con otras bacterias no esporuladas pero,


debido a su capacidad para esporular, es sumamente resistente. Las esporas permanecen
viables durante aos en el ambiente. Pueden ser destruidas si son sometidas a
esterilizacin, siendo la estructura viva ms resistente (solo los priones son ms resistentes,
pero difcil considerarlos como estructuras vivas). En base a esto esporas de especies de
Bacillus distintas a B. anthracis, son utilizadas como controles biolgicos de esterilizacin.

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BACTERIOLOGIA
Estructura antignica
Poseen tres antgenos principales:

Polipptido capsular de gran peso molecular formado casi exclusivamente por cido
D-glutmico. Esta es la nica especie bacteriana de importancia mdica que posee cpsula
peptdica en lugar de polisacrida. Por razones no muy bien conocidas los anticuerpos
anticpsulares no son protectores. Los genes que codifican esta estructura se encuentran
en un gran plsmido.

Antgeno somtico polisacrido, es un componente de la pared celular. Los anticuerpos no


son protectores. Reacciona en forma cruzada con la sangre de tipo A y Streptococcus
pneumoniae tipo 14.

Toxinas: factor edema y toxina letal.

Determinantes de patogenicidad de B. anthracis


No todas las cepas de B. anthracis son capaces de producir carbunco. Los principales atributos de
virulencia de las cepas que producen enfermedad estn codificados en dos plsmidos y son:

Toxinas: Produce dos toxinas modelo A-B, que poseen idntica subunidad B. La subunidad
B se conoce como antgeno protector. Es la porcin de la toxina que se fija al sitio blanco y
permite el ingreso a la clula.
Toxina edema: su subunidad A es el componente enzimticamente activo; se denomina
factor edema. Es una adenilato-ciclasa calmodulina-dependiente. Es responsable del
importante edema en los sitios de infeccin, la inhibicin de la funcin de los neutrfilos
y obstaculiza la produccin de factor de necrosis tumoral (TNF) e interleuquina 6 (IL-6)
por parte de los monocitos.
Toxina letal: su porcin A, llamada factor letal, es una metaloproteasa que inhibe la
sealizacin transduccional intracelular. Estimula la liberacin de TNF e IL-1 por parte
de los macrfagos; este mecanismo parece contribuir a la muerte por bacteriemia.

Cpsula: Al igual que sucede con otras bacterias la cpsula es un importante factor de
virulencia al inhibir la fagocitosis.

Patogenia
El carbunco cutneo se produce por contacto de la piel con material infectado. Las esporas ingresan
a travs de una lesin de la piel. Al ser ingeridos por los macrfagos en el sitio de entrada, los
esporas germinan y las clulas se multiplican produciendo cpsula y toxinas.
El carbunco pulmonar ocurre cuando las esporas ingresan a la va area y se depositan en los
espacios alveolares, donde son fagocitadas por los macrfagos alveolares. En el interior de los
mismos germinan y producen las toxinas, para ser luego transportadas por la circulacin linftica a
los ganglios mediastinales. Alcanzan el torrente sanguneo pudiendo causar shock sptico. La
germinacin puede ocurrir hasta 60 das despus del ingreso de las esporas a la va respiratoria.

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BACTERIOLOGIA
Manifestaciones clnicas
La infeccin cutnea, que comprende el 95% de los casos humanos, se manifiesta por una ppula
indolora de centro color negro-azulado con un gran borde edematoso. Sin tratamiento tiene un 20%
de mortalidad.
La infeccin pulmonar es una severa infeccin respiratoria que evoluciona a la insuficiencia
respiratoria aguda y tiene una muy alta tasa de mortalidad (100% sin tratamiento).
CLOSTRIDIUM
Caractersticas generales
Son bacilos anaerobios grandes, grampositivos, mviles. Descomponedores de protenas y/o
formadores de toxinas. Son saprofitos (suelo, tracto instestinal). Algunos patgenos causan
botulismo, ttanos, gangrena gaseosa y colitis seudomembranosa. Los Clostridium producen
enfermedades importantes mediadas por toxinas tales como ttanos, gangrena gaseosa, botulismo
y colitis seudomembranosa.
Especies del gnero Clostridium:

Clostridium botulinum: Causa el botulismo. Se encuentra en el suelo y en heces de


animales.

Clostridium tetani: Causa el ttanos, se distribuye en el suelo y heces de caballos y otros


animales. Se distinguen varios tipos mediante antgenos flagelares.

Clostridium perfringens: Produce infeccin invasora (incluso mionecrosis y gangrena


gaseosa).

Morfologa e Identificacin
Microorganismos tpicos

Las esporas habitualmente son ms anchas que el dimetro del bacilo; esta puede ser
central, subterminal o terminal. La mayor parte de los clostridium son mviles y tienen
flagelos pertricos.

Cultivo: Crecen solo en condiciones anerobias. En placas de agar o tubos de cultivo a los
cuales se les ha retirado el aire y se sustituye por nitrgeno con 10% de CO 2. En medio
lquido en tubo largo en el cual contiene muestra de tejido o 0,1% de agar y agente reductor,
como tioglicolato. Crecen desde el fondo hasta 15 mm antes de la superficie.

Forma de las colonias: Algunos, colonias grandes prominentes con bordes regulares (C.
perfringens); otros colonias ms pequeas extendidas en forma de red de finos filamentos
(C. tetani). En agar sangre muchos de ellos producen hemlisis. Perfringens produce
mltiples zonas de hemlisis alrededor de sus colonias.

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BACTERIOLOGIA

Caractersticas de crecimiento: Son incapaces de utilizar oxgeno como aceptor final de


hidrgeno. No tienen citocromos y citocromo oxidasa y no pueden desdoblar perxido de
hidrgeno, no tienen catalasa y peroxidasa. En presencia de oxgeno acumulan H 2O2 hasta
niveles txicos. Tampoco tienen superxido dismutasa, acumulan un radical libre txico, el
anin superxido. Slo realizan reacciones metablicas en un ambiente fuertemente
reductor. Pueden fermentar varios azcares otros pueden digerir protenas.

Caractersticas antignicas: Comparten algunos antgenos, pero poseen antgenos


especficos solubles que permiten diferenciarlos.

Clostridium botulinum
Causa el botulismo y se encuentra en el suelo y en heces de animales. Los tipos de C. botulinum se
distinguen por el tipo antignico de la toxina producida. Sus esporas son muy resistentes, resisten
100C 3 a 5 horas.

Toxina: Durante el crecimiento y la autlisis del C. botulimun se libera toxina. Siete


variedades de toxina (A a G). A, B y E (a veces F) causan la enfermedad humana. A y B
vinculados con alimentos, E productos de pesca. C cuello blando en aves. D, botulismo en
mamferos. Son protenas neurotxicas de estructura y accin similar; formadas por
cadenas pesadas y ligeras unidas por puentes disulfuro. La cadena pesada enlaza la toxina
a la placa terminal y la cadena ligera bloquea la liberacin de acetilcolina producida por
canales de calcio. Las toxinas se destruyen al calentarlas a 100 C por 10 minutos. Un gen
viral controla la produccin de toxina. Algunas cepas de C. botulinum producen
bacterifagos para convertir otras cepas en toxgenas.

Patogenia: El botulismo es una intoxicacin por ingesta de alimentos contaminados con


C. botulinum productor de toxina. Alimentos sazonados con especies, ahumados,
empacados al vaco o enlatados en medio alcalinos ingeridos sin cocinar. As germinan las
esporas en este medio anaerbico y luego las formas vegetativas crecen y producen toxina.
La toxina impide la liberacin de acetilcolina en las sinapsis y uniones neuromusculares.
Consecuencia parlisis flcida.

Datos clnicos: Sntomas 18 a 24 horas despus de ingerir el alimento contaminado;


trastornos visuales, incapacidad para deglutir y hablar; la muerte ocurre por parlisis
respiratoria o cardaca. Sntomas gastrointestinales no son notables; no hay fiebre.
Conciencia hasta poco antes de la muerte.

Pruebas diagnsticas de
laboratorio:
Se
puede
demostrar la existencia de
antitoxina en el suero del
paciente y en residuos de
alimentos. En el botulismo del
lactante se puede demostrar la
existencia de C. botulinum y
toxina en el contenido intestinal
pero no en el suero.

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BACTERIOLOGIA

Tratamiento: Existen potentes antitoxinas a los 3 tipos de toxina botulnica. Se administran


por va intravenosa. Si es necesario, ventilacin mecnica. Se reduce la tasa de mortalidad
de 65% a 25%.

Epidemiologa, prevencin y control: Las esporas pueden contaminar desde el suelo a


los vegetales, frutas y otros materiales. Los alimentos enlatados deben calentarse o
hervirse durante unos 20 minutos antes de consumirlos para acabar con las esporas. Las
tcnicas industriales han disminuido las posibilidades de intoxicacin, pero hay que tener
cuidado con las conservas domsticas.

Clostridium tetani
Causa el ttanos, se distribuye en el suelo y heces de caballos y otros animales. Se distinguen
varios tipos mediante antgenos flagelares. Todos comparten un mismo tipo de antgeno O comn
(somtico) y todos producen el mismo tipo de neurotoxina, la tetanospasmina.

Toxina: Las clulas vegetativas producen tetanospasmina y al lisarse las liberan. Un


plsmido controla la produccin de toxina. La toxina intracelular es un polipptido que
enzimas proteolticas separan en dos fragmentos de mayor toxicidad. La tetanospasmina
inhibe la liberacin de acetilcolina. La accin ms importante es la inhibicin de neuronas
postsinpticas espinales impidiendo la liberacin de mediadores inhibitorios. Provoca
hiperreflexia y espasmo muscular, a veces generalizado.

Patogenia: El C. tetani no es invasor. La infeccin es localizada al tejido desvitalizado en el


cual se han introducido las esporas. El tejido infectado es pequeo y la enfermedad es
toxemia casi en su totalidad. La germinacin de esporas y desarrollo se favorece por: 1
tejido necrosado, 2 sales de calcio, 3 infecciones pigenas acompaantes, esto bajara el
potencial oxido reduccin. En el SNC la toxina se fija a los ganglisidos en la mdula y
tronco.

Datos clnicos: Incubacin de 4 a 5 das hasta semanas. Contracciones tnicas de los


msculos voluntarios. Se produce trismus, el paciente no puede abrir la boca. Muerte en
conciencia, dolor intenso. Deceso por falla respiratoria. Tasa de mortalidad alta.

Diagnstico: Basado en cuadro clnico y lesin. Diagnstico diferencial establecido con


envenenamiento por estricnina. El cultivo anaerobio de tejidos de heridas puede desarrollar
C. tetani, pero hay que acompaar esto con la verificacin de produccin de toxina y
neutralizacin con antitoxina para administrar la antitoxina con fines preventivos o
teraputicos.

Clostridium perfringens
Diferentes Clostridium txicos pueden producir infeccin invasora (incluso mionecrosis y gangrena
gaseosa), pero el ms comn es el C. perfringens. Una toxina del C. perfringens produce
envenenamiento alimentario.

Toxinas: Producen gran cantidad de toxinas y enzimas que propician la propagacin de la


enfermedad. Estas tienen propiedades mortales, necrosantes y hemolticas. La toxina alfa
del C. perfringens tipo A es una lecitinosa, esta desdobla leticina de las membranas

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BACTERIOLOGIA
celulares, transformndola en forforilcolina y diglicridos. La toxina theta es hemoltica y
necrosante, pero no es lecitinasa, es colagenasa de tejido subcutneo y msculo.
Algunas cepas de C. perfringens producen enterotoxina. Produce hipersecrecin del yeyuno
e leon, con diarrea y prdida de lquido y electrolitos (se cree por estimulacin de
adenilciclasa o guanilciclasa). Al ingerir los organismos, estos esporulan en el intestino y
forman enterotoxina, que es una protena idntica a un componente de la capa de la
espora. Produce diarrea intensa en 6 a 18 horas. Esta enfermedad es autolimitada.

Patogenia: Esporas alcanzan los tejidos por contaminacin de las zonas traumatizadas o
desde el intestino. Las clulas vegetativas fermentan carbohidratos y producen gas.
Distensin tisular e interferencia del riego sanguneo junto con la toxina necrosante y
hialuronidasa favorecen la propagacin de la infeccin. Necrosis se extiende, aumentan los
microorganismos, se produce anemia hemoltica y finalmente la muerte por toxemia grave.
La gangrena gaseosa (micronecrosis por Clostridium) es una enfermedad mixta, se pueden
observar tambin cocos y microorganismos gramnegativos. El C. perfringens de tipo C
producira enteritis necrosante. La inmunizacin con este toxoide parece tener valor
preventivo.

Pruebas diagnsticas de laboratorio:


Muestras, Material de heridas, pus, tejido.
Frotis: Presencia de bacilos grandes grampositivos formadores de esporas en frotis

de gram sugiere gangrena gaseosa por Clostridium, regularmente no se encuentran


esporas.
Cultivo: Se inocula en medio con carne picada y glucosa y en medio con

tioglicolato, sobre placas agar sangre en condiciones anaerobias. Estas se pueden


trasladar a medios con leche; al obtenerse un cogulo disgregado por gas se
sugiere C. perfringens. Se pueden identificar por reacciones con azcares con
tioglicolato, leche, hemlisis y formacin de colonias. La actividad lecitinasa se
evala en precipitado formado en yema de huevo. En agar no hacen esporas.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Cules son las especies ms representativas del genero Bacillus?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Bacillus anthracis?
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BACTERIOLOGIA
Cul es la estructura antignica del Bacillus anthracis?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Bacillus anthracis?
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Cules son las especies ms representativas del genero Clostridium?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Clostridium botulinum?
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Cul es la estructura antignica del Clostridium botulinum?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Clostridium botulinum?
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Cules son las caractersticas de una infeccin por Clostridium tetani?
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Cules son las caractersticas de una infeccin por Clostridium perfringens?
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Cules son las diferencias entre el gnero Bacillus y Clostridium?
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BACTERIOLOGIA
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BACILOS GRAM (+) NO FORMADORAS DE ESPORAS:


Corynebacterium y Listeria
LISTERIA
Gnero de cocobacilos cortos ubicuos en la naturaleza. El ms importante en microbiologa mdica
es L. monocytogenes, ya que es el principal patgeno humano. Excepcionalmente se han reportado
infecciones por L. ivanovii (en animales es responsable de abortos). Las mujeres embarazadas son
especialmente susceptibles a las infecciones por Listeria, tambin afecta a otros individuos con
alteraciones del sistema inmune, en especial de la inmunidad celular: personas de la tercera edad,
recin nacidos, cirrticos, trasplantados, personas afectas de cncer, las que reciben terapia
inmunosupresora, etc.
Listeria monocytogenes
Morfologa y fisiologa

Microscopa: cocobacilos, Gram positivos, de 0,5 - 2 m por 0,5 m, que se presentan


aislados o agrupados en cadenas cortas; mviles por presentar de 1 a 5 flagelos a 28C.

Macroscopa: colonias pequeas (0,5 1,5 cm.), translcidas. En agar sangre produce
colonias similares a Streptococcus spp. Las cepas patgenas producen un halo muy
estrecho de -hemlisis; frecuentemente es necesario remover las colonias para visualizar
la hemlisis.

Fisiologa y caractersticas bioqumicas: son aerobios facultativos, pero su crecimiento es


estimulado con la disminucin en la tensin de O 2 y CO2 al 5-10%. Su crecimiento ptimo es a 3037C pero puede proliferar a 4C en unos das; esta caracterstica fisiolgica es til para su
aislamiento selectivo, ya que otras bacterias de inters mdico no son capaces de desarrollar a tan
bajas temperaturas (tcnica de enriquecimiento en fro). Por otra parte, le confiere a la bacteria una
ventaja ya que es capaz de desarrollar en alimentos refrigerados y as dar origen a infecciones a
partir del consumo de los mismos. No son exigentes nutricionalmente.

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BACTERIOLOGIA
Son catalasa positivos (a diferencia de los Streptococcus spp), fermentan azcares como la
glucosa, manosa y ramnosa, pero no el manitol (a diferencia de otras especies no patgenas);
tambin hidrolizan la esculina. Tienen cuatro flagelos, los que se pierden cuando ingresan al ser
humano. Cuando se siembran en medios semislidos en tubo y se incuban a 25C, muestran una
movilidad caracterstica en aspecto de sombrilla, la cual no se observa cuando se incuba a 37C.
Estructura antignica: Los determinantes antignicos ms caracterizados son el antgeno O
(somtico) y antgeno H (flagelar) que permiten la clasificacin en diferentes serotipos. Hasta la
fecha se han descrito 13 serotipos. La mayora de las infecciones humanas son producidas por un
serotipo en particular (4b), mientras que en alimentos predominan otros serotipos diferentes. La
serotipificacin es til en estudios epidemiolgicos.
Determinantes de patogenicidad: Explicaran en parte la capacidad de L. monocytogenes de
proliferar dentro de las clulas ya que es un microorganismo intracelular facultativo (principalmente
en macrfagos y clulas epiteliales).

Productos solubles excretados: listerolisina O (LLO), es una hemolisina. Su prototipo es


la estreptolisina O y la pneumolisina, de los estreptococos. Rompe la membrana del
fagosoma y permite la reproduccin de la bacteria en un medio menos hostil, el citoplasma
de la clula husped. Adems, inhibe el procesamiento del antgeno mediado por
macrfagos. Recientemente se ha demostrado que genera un influjo de calcio extracelular
que estimula el ingreso de la bacteria en las clulas epiteliales. Codificada por el gen hly.

Internalinas: se conocen dos protenas, A y B, que estn involucradas en el ingreso a las


clulas.

Siderforos: componentes bacterianos que captan hierro, mineral indispensable para la


supervivencia bacteriana.

Otros: fosfolipasas, etc.

Epidemiologa: De distribucin mundial, ubicuo en la naturaleza se encuentra en diferentes


animales, suelos, plantas y agua. Al parecer su hbitat primario es el suelo y la materia vegetal en
descomposicin. Adems se halla en el intestino del 5 al 10% del hombre, sin causar enfermedad.
Es un importante patgeno veterinario y se transmite al hombre por el consumo de alimentos
contaminados de origen animal. Es por lo tanto, otro ejemplo de zoonosis y ETA. Tiene una tasa de
mortalidad mayor a la de otras bacterias de transmisin alimentaria.
Patogenia: Es importante recordar que la inmunidad del husped es en general efectiva contra
Listeria y que se desarrolla enfermedad dependiendo de la dosis infectante (se requiere altas dosis,
mayor a 109), de los determinantes de virulencia, y de la inmunidad celular del husped. Ingresan
por va digestiva e inducen la fagocitosis por parte del enterocito, siendo incluidas en un fagosoma
(antes de formarse el fagolisosoma), del cual escapan rpidamente para multiplicarse en el
citoplasma de la clula husped. Una de las protenas responsables de esto es la LLO. En el interior
del citoplasma celular son capaces de polimerizar los filamentos de actina en uno de los polos
bacterianos. De esta forma es impulsada hacia la periferia, a la membrana citoplamtica, formando
all protrusiones o pseudpodos lo que le permite luego penetrar en otra clula adyacente. As, es
capaz de moverse clula a clula sin estar expuesta a los anticuerpos, el complemento o los
polimorfonucleares. Por ello es ms importante la inmunidad celular que la humoral. Finalmente

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BACTERIOLOGIA
alcanzan el torrente circulatorio y de all alcanzan otros rganos, teniendo predileccin por el
sistema nervioso central y la placenta.
La infeccin connatal se trasmite de diferente manera. Las mujeres embarazadas infectadas pueden
transmitir la infeccin al feto por va transplacentaria. No se ha demostrado claramente la
transmisin en el canal de parto.
CORYNEBACTERIUM
Es un gnero con numerosas especies (ms de 46), algunas de ellas forman parte de la flora normal
de mucosas y piel del ser humano; excepcionalmente algunas de ellas causan enfermedad en
pacientes inmunodeprimidos. La especie patgena por excelencia es C. diphtheriae, responsable de
la enfermedad denominada como difteria.
Son bacilos pleomrficos, no esporulados y no cido-alcohol resistente. La mayora fermentan la
glucosa y son catalasa positivos. Su genoma contiene de 51 a 68 mol % de G + C, y mediante el
estudio del 16s rARN se lo encontr estrechamente relacionado con Mycobacterium, Nocardia y
Rhodococcus.

Es por excelencia la especie ms importante del gnero. Se describen cuatro biotipos: gravis, mitis,
belfanti e intermedius; su importancia es epidemiolgica.
Morfologa y fisiologa

Microscopa: bacilo delgado en forma de clava, mide 1,5-5 m de ancho y 0,5-1 m de


largo; es Gram positivo, no esporulado e inmvil. Aparecen agrupados formando estructuras
que semejan letras chinas. Con azul de metileno se observan grnulos metacrmaticos
caractersticos que los diferencian de otras especies de Corynebacterium.

Macroscopa: las colonias tpicas son pequeas, blanco grisceas brillantes. En medios
selectivos con telurito se ven grisceas a negras. La presencia y el tipo de hemlisis son
variables. Es un microorganismo anaerobio facultativo, pero crece mejor en medios
aerobios. Es exigente desde el punto de vista nutricional. Su pared celular est compuesta
por cido mesodiaminopimlicos (no L-lisina), polmeros de arabino galactano y cidos
miclicos de cadena corta (por ello su posicin taxonmica y su relacionamiento con
Nocardia, Mycobacterium y Rhodococcus).

Resistencia: dentro de las bacilos no esporulados C. diphtheriae es uno de los ms


resistentes a la luz, desecacin y congelamiento. Pero son susceptibles a los desinfectantes
de uso habitual.

Estructura antignica
Los ms caracterizados son:

Antgeno K: son protenas termolbiles localizadas sobre la superficie, son uno de los
principales factores de virulencia. Responsables de la especificidad de tipo.

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BACTERIOLOGIA

Antgeno O: es un polisacrido que contiene arabinogalactanos y es el antgeno


responsable de la reactividad cruzada con Mycobacterium y Nocardia.

Factor de cordn: glicolpido un muy importante factor de virulencia.

Toxina

Determinantes de patogenicidad
Los ms importantes son:

Factor de cordn: contiene los cidos miclicos propios de C. diphtheriae, tiene actividad
similar al de Mycobacterium spp; en las clulas del ratn provoca rotura de las mitocondrias,
disminucin de la respiracin y la muerte.

Antgeno K: antes mencionado, responsable de inmunidad antibacteriana, hipersensibilidad


e inmunidad antitxica. Provee invasividad junto al factor de cordn.

Neuraminidasa y N-acetilneuraminato liasa.

Exotoxina: es el principal determinante de patogenicidad y explica casi todos los sntomas


sistmicos de la enfermedad.

Dicha toxina es producida por las cepas de C. diphtheriae infectadas por un bacterifago temperado
que transporta el gen estructural para la toxina; en general es un fago tox+. La expresin del gen
tox est sumamente regulada por factores genticos y fisiolgicos. La toxina slo se produce a
niveles mximos cuando declina el crecimiento bacteriano, cuando las concentraciones de hierro en
el medio disminuyen. Esto parece estar regulado de forma que cuando hay hierro en el medio se
forma un complejo represor-hierro que se une especficamente al operador tox del fago . En
condiciones de baja concentracin de hierro en el medio, el complejo se disocia y el gen tox, se
desreprime y se sintetiza la toxina. La toxina se sintetiza a nivel de los polisomas de la membrana
de C. diphtheriae y es secretada co-traduccionalmente como una cadena polipeptdica no txica.
Adquiere su toxicidad al actuar la tripsina que pone al descubierto sus sitios enzimticos activos. Es
un modelo A-B de toxina: la subunidad B (sitio de unin a la clula eucariota) unida a la subunidad A
(sitio enzimtico activo) por un puente disulfuro. Accin: la toxina ingresa a la clula y al llegar al
citoplasma altera la sntesis proteica. La subunidad A produce una ADP-ribosilacin del factor de
elongacin EF-2 de los ribosomas celulares, lo que produce su inhibicin. Los ribosomas al poseer
un solo EF-2 quedan inhibidos por una sola subunidad A. Se produce as la inhibicin de la sntesis
proteica lo que lleva rpidamente a la lisis celular, produciendo necrosis e inflamacin local de la
mucosa. Adems, esta toxina es la responsable de los efectos sistmicos de la enfermedad ya que
produce toxicidad cardaca, del sistema nervioso central y perifrico, y dao renal.
Patogenia: Se trata de una enfermedad toxignica. La bacteria no tiene gran capacidad de invasin
y en general persiste en la superficie de las mucosas y la piel, desde donde produce la toxina con
actividad sistmica.
La infeccin respiratoria se trasmite principalmente por las gotitas de reflujo y las lesiones cutneas
altamente infectantes son fuente de enfermedad farngea y cutnea. Dicha transmisin se ve
favorecida por el hacinamiento y el fro. Los microorganismos se establecen en la orofaringe y

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BACTERIOLOGIA
amgdalas y se reproducen con rapidez. Luego comienzan a secretar la exotoxina que produce
necrosis local y gran respuesta inflamatoria con la produccin de exudados fibrinosos, que se van
organizando y forman una seudomembrana gruesa y muy adherente. Dicha pseudomembrana junto
con el edema y las importantes adenomegalias locales producen obstruccin respiratoria alta (crup).
Las manifestaciones sistmicas de la enfermedad se deben a la toxicidad cardaca y del sistema
nervioso perifrico que produce la toxina.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Listeria monocitogenes?
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Cul es la estructura antignica del Listeria monocitogenes?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Listeria monocitogenes?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Corinebacterium diphtheriae?
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Cul es la estructura antignica del Corinebacterium diphtheriae?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Corinebacterium diphtheriae?
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Cules son las diferencias entre el gnero Listeria y Corinebacterium?
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BACTERIOLOGIA
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Vibrios
VIBRIONACEAE
La Familia Vibrionaceae agrupa diferentes gneros de bacilos Gram negativos con un hbitat
primario acutico. Se los encuentra en el mar en aguas continentales y en relacin con animales
acuticos. Diversas especies son patgenas para el hombre, peces, as como otros vertebrados e
invertebrados.
Aunque la Familia fue definida inicialmente en un intento de agrupar especies oxidasa positivas y
mviles por flagelos polares para diferenciarlas de los integrantes de la Familia Enterobacteriaceae,
se vio que todos estos microorganismos comparten atributos distintivos que sugieren un origen
evolutivo comn.
Microscopia: Son bacilos Gram negativos, rectos o curvos. Mviles por flagelos polares. No forman
esporos. Quimioorganotrofos, desarrollan en medios simples, son anaerobios facultativos, capaces
de tener un metabolismo fermentativo o respiratorio. La mayora oxidasas positivo. La mayora de
las especies requiere 2-3% de ClNa o agua marina para desarrollar. El % G + C del ADN va de 38 a
63%.
Los gneros que forman esta familia son:

Vibrio
Photobacterium
Aeromonas
Plesiomonas

Teniendo importancia mdica especies de los gneros Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas.

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BACTERIOLOGIA
Por muchos aos la nica especie que interes a los microbilogos fue V. cholerae, agente del
Clera epidmico. Otras especies tales como V. parahemolyticus pueden causar toxiinfecciones
alimentarias en el hombre luego de la ingestin de productos del mar, es la primera causa de diarrea
en el Japn, donde se consume pescado crudo. Otras especies de Vibrio y Plesiomonas
shigelloides tambin estn relacionadas con gastroenteritis. Por otra parte, Aeromonas hydrophila
es responsable de infecciones de heridas que han sido expuestas a aguas contaminadas, y
ocasionalmente, puede provocar infecciones sistmicas en enfermos inmunodeprimidos.
Vibrio cholerae
V. cholerae es un bacilo Gram negativo, curvo, con forma de coma. Desarrolla bien en medios
simples. Aunque su desarrollo est estimulado por la presencia de Na+, esta especie a diferencia de
las otras especies del gnero, desarrolla en medios sin el agregado de ClNa. V. cholerae tolera
condiciones de alcalinidad y es capaz de desarrollar a pH 10. Estas propiedades se utilizan para
aislar el germen de las muestras clnicas, de alimentos o del agua. Las cepas epidmicas de V.
cholerae se dividen en 2 biotipos: clsico y eltor.
Es el agente del Clera. Es una enfermedad epidmica grave que ha matado millones de personas
y contina siendo un importante problema de Salud en todo el mundo. La historia moderna del
Clera comienza en 1817 con la primera de las 7 pandemias. En 1950 slo haba Clera en Asia.
En 1961 V. cholerae O:1 biotipo El Tor se disemin fuera de Indonesia, primero a otros pases
asiticos y Medio Oriente luego en la dcada del 70 a Africa, Sureste europeo e islas del Pacfico.
En enero de 1991 se notificaron los primeros casos de Clera en Per. En unas semanas se
disemin rpidamente en el pas. La enfermedad afect todas las edades con una muy alta
incidencia y al principio alta mortalidad. El comportamiento es de oscilacin estacionaria,
apareciendo en los meses clidos el mayor nmero de casos. Luego de la diseminacin epidmica
inicial, es posible que el Clera persista en algunas reas por aos en un estado de endemia. Es
indiscutible que la mejor forma de controlar el Clera en las poblaciones es el poseer agua potable y
un adecuado saneamiento que junto a la educacin son los pilares fundamentales del control de
estas epidemias y adems contribuyen al desarrollo de estas poblaciones.
Estructura antignica
Se puede dividir en base a sus antgenos somticos. Se describen al menos 139 serogrupos
diferentes. Todos comparten un mismo antgeno flagelar. Las cepas pertenecientes al serogrupo O:1
hasta 1992 fueron las nicas asociadas con Clera epidmico. Desde 1992 un nuevo serogrupo
O:139 ha sido relacionado con Clera epidmico en India y Bangladesh. Los biotipos son aplicables
solamente a V. cholerae O:1. Las cepas pertenecientes a los otros serogrupos se asocian a casos
de diarrea ocasional o enfermedades extraintestinales. Las cepas del serogrupo O:1 se dividen
clsicamente en 3 serotipos: Ogawa, Inaba e Hirojima. Las cepas aisladas pueden sufrir
conversiones de Inaba a Ogawa, por lo que los serotipos son de escaso inters epidemiolgico.
Patogenia
V. cholerae causa enfermedad en el
hombre porque es capaz de colonizar el
intestino delgado luego de ingerido. Se
adhiere a la superficie mucosa y produce
una enterotoxina, la toxina colrica que

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BACTERIOLOGIA
acta en las clulas mucosas intestinales. Esta accin est dirigida a alterar el balance
hidroelectroltico de estas clulas, disminuyendo la entrada de Sodio y aumentando la salida de
Cloro y agua hacia la luz intestinal, resultando en diarrea importante y disbalance electroltico, que
puede llevar al paciente a la muerte por shock hipovolmico. Con un buen soporte de lquido y
electrolitos el paciente sobrevive.
Factores de virulencia.
Hasta hace 5 aos se crea entender muy bien los mecanismos patognicos de V. cholerae. Estos
se explicaban por tres factores: flagelo, que permita a la bacteria nadar hasta la mucosa intestinal;
pili que mediaba la adherencia a las clulas de la mucosa, y la toxina colrica que produca diarrea
severa.
Colonizacin de la mucosa del intestino delgado. Adems de las evidencias descritas de que la
motilidad flagelar puede ayudar a V. cholerae a alcanzar la mucosa intestinal, la mayora de las
investigaciones han sido dirigidas a ver lo que sucede cuando V. cholerae alcanza la mucosa. Una
contribucin importante a la colonizacin es la presencia de largos filamentos formando un
agrupamiento en la superficie de la bacteria. Cepas que carecen de estos pili son avirulentas. Se los
ha llamado Tcp pili (pili coregulado con la toxina). A diferencia de lo que sucede en otras bacterias
estos pili estn localizados solamente en una porcin de la superficie celular.
La relevancia de esta toxina como factor de virulencia, que acta por ADPribosilacin tipo A-B.
Posee una subunidad A (enzimtica), y 5 idnticas subunidades B (unin). La subunidad A debe ser
clivada para ser enzimticamente activa en A1 y A2. La variedad de efectos que se producen
incluye la alteracin de las actividades de los transportadores de Sodio y Cloro. Esto lleva a un
disbalance inico que causa la prdida de agua asociada al clera. En clulas polarizadas como las
de la mucosa intestinal la adenil cyclasa se localiza en la membrana basolateral por lo que la toxina
unida a la superficie apical debe actuar al otro lado de la clula.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Cules son los gneros representativos de la familia Vibronaceae?
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Qu y cules son las caractersticas de una infeccin por Vibrio cholerae?
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Cul es la estructura antignica del Vibrio cholerae?
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Cules son los determinantes de la patogenia de Vibrio cholerae?
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BACTERIOLOGIA
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COCOS GRAM (+): Estreptococos

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BACTERIOLOGIA

BACILOS GRAM (-): Enterobacterias


ENTEROBACTERIACEAE
Esta familia comprende un nmero muy variado de gneros y especies bacterianos cuyo hbitat
natural es el tubo digestivo del hombre y los animales. No todos los bacilos Gram negativos que
tienen este hbitat forman parte de la familia Enterobacteriaceae. Se los encuentra en el suelo,
agua, frutas, vegetales y otras plantas y en los animales desde los insectos al hombre. La familia
est definida por un conjunto de caractersticas fenotpicas (bioqumicas, fisiolgicas e
inmunolgicas) a las que se han agregado posteriormente otros elementos establecidos por
tcnicas de hibridizacin de cidos nucleicos que miden distancias evolutivas y han definido mejor
la interrelacin de todos los microorganismos integrantes de la familia.
Caractersticas generales
Microscopa: Son bacilos Gram negativos rectos, con un dimetro de 0.3 a 1.5 micras. Si son
mviles, presentan flagelos pertricos. No forman esporas. Desarrollan en presencia o en ausencia
de Oxgeno (aerobios-anaerobios facultativos). Desarrollan rpidamente en medios simples, no
siendo exigentes desde el punto de vista nutricional. Algunos desarrollan en glucosa como nica
fuente de carbono, mientras otros requieren el agregado de vitaminas y/o minerales en el medio de
cultivo. Son quimioorganotrofos, poseen metabolismo fermentativo y respiratorio. Son catalasa
positivos y oxidasa negativos; reducen los nitratos a nitritos.
Macroscopa: En los medios de cultivo forman colonias lisas, convexas y circulares de bordes
definidos. Algunas especies desarrollan colonias ms mucoides que otras (por ejemplo Klebsiella).
El contenido de Guanina + Citosina del DNA total es de 38 a 60 moles %.
Caracteres bioqumicos
Los bacilos Gram negativos que integran esta Familia pueden identificarse por medio de la
expresin fenotpica de algunos caracteres genticos. Los mtodos utilizados tienen como principio:

La investigacin de la fermentacin de azucares o alcoholes en un medio peptonado con el


agregado de un indicador de pH para detectar la produccin de metabolitos cidos.

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BACTERIOLOGIA

La investigacin de la utilizacin de un substrato como nica fuente de C.


La investigacin de produccin de ciertas enzimas sobre substratos generadores de color.
La investigacin de la produccin de un metabolito, producto final caracterstico de una va
metablica.
La investigacin de la aptitud de desarrollar en presencia de un inhibidor.

Caracteres antignicos
Los microorganismos pertenecientes a la Familia Enterobacteriaceae poseen una estructura
antignica compleja.
Los antgenos O, antgenos somticos. Son la parte ms externa del LPS y estn formados por
unidades polisacardicas repetidas. Algunos contienen un nico azcar. Son termoestables y
alcoholestables detectndose por aglutinacin simple.
La naturaleza de los grupos terminales y el orden en que estos azucares estn dispuestos en las
unidades repetitivas determina la especificidad de los numerosos antgenos O. Un mismo
microorganismo puede poseer varios antgenos O. Cada gnero est asociado a grupos
antignicos especficos, por ejemplo la mayora de los serotipos de Shigella comparten uno o ms
antgenos O con E. coli (Shigella y E. coli pertenecen al mismo gnero). En E. coli algunos
antgenos somticos estn asociados con fenotipos virulentos especficos, por ejemplo E. coli O:111
y O:119 son frecuentemente agentes etiolgicos de diarrea aguda en los nios pequeos.
Los antgenos K son externos a los antgenos O. Algunos constituyen una verdadera cpsula
visible al microscopio como sucede con Klebsiella, mientras que en E. coli por ejemplo su estructura
no es visible al microscopio ptico y se los denomina antgenos de envoltura por comportarse como
si envolvieran la bacteria volviendo inaglutinable el antgeno O de la pared. Son de naturaleza
polisacardica. Otros antgenos de envoltura pero de naturaleza proteica se presentan como
fimbrias.
Los antgenos H, flagelares, son de naturaleza proteica. Esta protena que constituye los flagelos
es
llamada flagelina. Este antgeno es termolbil y destruido por el alcohol. El contenido de
aminocidos y el orden en que estos se encuentran en las flagelinas determina la especificidad de
los diversos antgenos. Como ya fue mencionado los flagelos bacterianos estn compuestos de un
solo tipo de protena. En Salmonella existe variacin de fase. Como resultado de ello, la protena
flagelar puede ser de dos tipos por medio de un mecanismo de regulacin gentica.
Caractersticas patognicas
Se ha asociado a cepas de Enterobacteriaceae con abscesos, neumonas, meningitis, septicemia,
infecciones de heridas, infecciones urinarias e intestinales. Son el componente mayor de la flora
normal intestinal, pero son relativamente poco frecuentes en otros sitios del organismo. Algunas
especies son importantes como causa de infecciones nosocomiales. Significan el 50% de todos los
aislamientos clnicos y el 80% de los bacilos Gram negativos. Representan el 50% de los casos de
septicemia y ms del 70% de las infecciones urinarias.
Hasta 1940 slo Salmonella y Shigella estaban relacionadas con gastroenteritis humana.
Actualmente es bien conocido algunas variantes patognicas de E. coli como causa significativa de
enfermedad diarreica y cepas invasivas de Yersinia enterocolitica como causa de diarrea y adenitis
mesentrica. Por otra parte salvo Shigella que raramente causa infecciones fuera del tracto

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BACTERIOLOGIA
gastrointestinal muchas especies de Enterobacteriaceae causan frecuentemente infecciones
extraintestinales.
Escherichia coli
Constituye la especie dominante de la flora aerobia del tubo digestivo, ms de 10 serotipos
coexisten normalmente en el mismo individuo. Son estas mismas bacterias integrantes de la flora
normal las que pueden causar en diversas circunstancias infecciones urinarias, septicemias,
meningitis etc. El poseer determinadas caractersticas antignicas, como el antgeno de envoltura
K1, muy parecido por su composicin en cido silico al antgeno capsular de Neisseria meningitidis
del grupo B, dara a este germen potencialidades invasivas. 80% de E. coli aisladas de meningitis
del recin nacido poseen este antgeno K1.
Por otra parte el poseer plsmidos que portan genes que codifican para la produccin de diferentes
adhesinas, enzimas o enterotoxinas otorga a E. coli caractersticas patognicas particulares y la
capacidad de desencadenar infecciones urinarias o gastrointestinales.
Los caracteres bioqumicos para la identificacin de esta especie se describen en la tabla
correspondiente. Desde el punto de vista antignico en E. coli se han descrito ms de 150 serotipos
O. Poseen antgenos de envoltura polisacardicos K, que como es habitual en el mundo bacteriano
permiten a la bacteria resistir ms fcilmente la fagocitosis que las bacterias no capsuladas.
Asimismo se describen ms de 56 antgenos H. De lo dicho se desprende que una tipificacin
antignica completa es resorte de laboratorios especializados y no forma parte del trabajo corriente
de los laboratorios.
Patogenia
E.coli integra la flora normal, causar diarrea, infeccin urinaria, meningitis, etc. Pero una cepa que
causa diarrea no causara infeccin urinaria ni meningitis. La versatilidad de este microorganismo
esta dado porque E.coli ha adquirido conjuntos diferentes de genes de virulencia. E.coli es un
excelente ejemplo de que el poseer un conjunto de genes en ella es lo que hace que una bacteria
sea patgena y no la designacin de gnero o especie.
Se ha propuesto para E. coli agente de diarrea una clasificacin de acuerdo a sus mecanismos de
virulencia, los llamados virotipos. Aunque arbitraria, esta clasificacin es muy til. Se describen 5
virotipos:

E. coli enterotoxigenico (ETEC)


E. coli enteroagregativo (EAggEC)
E. coli enteropatognico (EPEC)
E. coli enterohemorrgico (EHEC)
E. coli enteroinvasor (EIEC).

E. coli enterotoxignico
(ETEC) Se parece mucho a V. cholerae, adhiere a la mucosa del intestino delgado, no la invade,
elabora toxinas que causan diarrea. No hay cambios histolgicos en las clulas de la mucosa y muy
poca inflamacin. Clnicamente hay diarrea acuosa, vmitos y se puede acompaar de fiebre. Es la
llamada infeccin no inflamatoria del intestino delgado.

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BACTERIOLOGIA
E.coli enteroagregativo
(EAggEC) Son agentes de diarrea persistente en nios. Las cepas de EAggEC se parecen a ETEC
en que se unen a las clulas intestinales, no son invasivas y no causan modificaciones histolgicas
en las clulas de la mucosa. Difieren de ETEC en que no adhieren en forma uniforme sino que lo
hacen en pequeos agregados.
E.coli enteropatgeno (EPEC).
EPEC es causa de diarrea severa en nios pequeos, de gran trascendencia en pases
subdesarrollados. EPEC exhibe un patrn de adherencia en parches, pero no forma el mismo tipo
de agregados que EAggEC. A diferencia de las anteriores la adherencia de EPEC produce
alteraciones importantes en la ultraestructura de las clulas del husped. Las clulas a las que
EPEC est adherida alargan las microvellosidades donde EPEC no se encuentra y estas
desaparecen en el sitio donde la bacteria est adherida. Este fenmeno se refiere como de unin y
borramiento y es el resultado de un reordenamiento de actina en la vecindad de la bacteria
adherida. EPEC es ms invasora que las anteriores y se produce una reaccin inflamatoria.
E.coli enterohemorrgico
(EHEC). Se ha reconocido recientemente a EHEC como responsable de cuadros graves. Estas
cepas causan una enfermedad que clnicamente se parece a la disentera producida por Shigella,
aunque probablemente no invade las clulas de la mucosa. La enfermedad producida por EHEC
puede complicarse con sndrome urmico hemoltico (HUS) que puede llevar al paciente la muerte
por falla renal aguda. O157:H7 es el serotipo predominante en este grupo de EHEC.
E.coli enteroinvasor (EIEC)
EIEC produce una enfermedad indistinguible de la disentera producida por Shigella. Los pasos en
la
invasin y diseminacin clula a clula parecen ser idnticos a los de Shigella. A diferencia de
Shigella no produce toxina de Shiga. No se han descrito casos de HUS en relacin a estas cepas,
probablemente en relacin con la ausencia de toxina Shiga. Al igual que Shigella muchos de los
genes involucrados residen en un gran plsmido de virulencia.
E.coli uropatognico
Las infecciones del tracto urinario comienzan generalmente con la colonizacin de la uretra por
cepas originarias del colon previa colonizacin de la vagina. Una de las mayores defensas del
husped es la accin lavadora de la orina. Las bacterias que no se pueden adherir van a ser
lavadas ms rpidamente de la vejiga de lo que tardan en multiplicarse. Por otra parte las bacterias
que adhieren estn ms cerca de la mucosa y tienen mayores facilidades para provocar respuesta
inflamatoria. Numerosas adhesinas de E.coli uropatgeno han sido estudiadas.
Shigella
Son bacterias estrictamente humanas. Como sucede frecuentemente esta adaptacin se produce
con prdida de funciones. Shigella que por hibridacin se encuentran tan cercano a E.coli que
podran todos pertenecer a una misma especie, a diferencia de ste son auxotrofos, inmviles, poco

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BACTERIOLOGIA
glucidolticos y prcticamente no producen gas en la fermentacin de glucosa. Los caracteres
bioqumicos se describen en la tabla correspondiente.
En base a los caracteres bioqumicos y antignicos se describen 4 especies:

Shigella dysenteriae,
Shigella flexneri,
Shigella boydii
Shigella sonnei.

Estas especies se subdividen en serotipos sobre la base de un factor somtico O caracterstico.


Shigella produce una enfermedad inflamatoria aguda del colon con diarrea sanguinolenta, que en su
presentacin ms caracterstica se manifiesta como una disentera, caracterizado por deposiciones
de poco volumen con mucus, pus y sangre; clicos y tenesmo, acompaados de fiebre. Se trasmite
de persona a persona directamente por las manos contaminadas o indirectamente por alimentos o
agua contaminados con heces humanas. Se necesita una dosis infectante pequea para causar
enfermedad; frecuentemente unas pocas centenas de bacterias ingeridas son suficientes para
provocarla. En el adulto sano es una enfermedad autolimitada aunque molesta; en los nios
pequeos y de poblaciones marginadas puede ser una enfermedad grave que lleve al nio a la
muerte. Se trata de una enfermedad ms frecuente en poblaciones con mal saneamiento. Un
porcentaje de los enfermos pueden complicarse, presentando alteraciones neurolgicas o fallo renal
(HUS), esto ltimo cuando se trata de S. dysenteriae 1.
Patogenia
Shigella es un buen modelo de enfermedades en las cuales la bacteria invade las clulas del
hospedero, se replica en el citoplasma de estas clulas y se disemina de clula a clula. La mayora
de las investigaciones han utilizado cultivos celulares (clulas HeLa, macrfagos o fibroblastos de
pollo), en estudios realizados en clulas HeLa, la bacteria se adhiere en una primer etapa a las
clula del hospedero. Probablemente los receptores sean protenas llamadas integrinas. Esta
adherencia provoca reorganizacin de la actina (protena mayor del citoesqueleto de la clula del
husped), polimerizacin y formacin de filamentos no solubles cercanas a la unin bacteriana. Esto
provoca la formacin de seudpodos y de esta forma clulas normalmente no fagocticas de la
mucosa ingieren las bacterias adheridas. Esta invasin es mejor descrita como fagocitosis inducida.
Jugando el papel activo la clula del hospedero, la bacteria tiene un papel relativamente pasivo
luego de la estimulacin inicial. Luego de ingeridas, las bacterias se liberan de su vescula de
endocitosis y se multiplican en el citoplasma de las clulas. Eventualmente la bacteria puede tomar
contacto con la membrana que separa dos clulas, protruir y escapar a la clula vecina.
Por lo que otro modelo se ha propuesto para la entrada inicial de Shigella. Esta se hara en tres
etapas. En primer lugar Shigella atraviesa la mucosa travs de las clulas M de las placas de Peyer,
clulas fagocticas naturales cuyo papel principal es tomar antgenos del lumen intestinal por
fagocitosis y presentarlos al tejido linfoide subyacente de las placas de Peyer. En una segunda
etapa Shigella usa sus invasinas para invadir las clulas de la mucosa desde abajo, donde estn
ubicadas las integrinas, para en una tercer etapa diseminarse a clulas adyacentes, causando la
muerte de estas clulas e inflamacin.
La forma como se produce la muerte de las clulas no est del todo aclarada. Por un lado cuando
las bacterias estn multiplicndose en forma intracelular disminuyen los niveles de ATP de la clula

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BACTERIOLOGIA
y aumentan dramticamente los niveles de piruvato indicando una alteracin del metabolismo
energtico. Por otra parte Shigella puede inducir la muerte celular programada en los macrfagos,
un fenmeno llamada apoptosis lo que sugiere otra va de muerte celular y, por supuesto, de
inflamacin. LPS contribuira tambin al dao celular.
La toxina Shiga producida por S. dysenteriae es uno de los factores aun no del todo aclarados.
Experimentalmente acta como enterotoxina pero tambin como neurotoxina y como citotoxina
sistmica. No parece importante ni en la invasin ni en la muerte de las clulas de la mucosa. Su
papel ms importante parece estar en una de las complicaciones de las shigellosis.
Salmonella
Salmonella son bacterias que, para la mayora de los serotipos habitan el intestino del hombre y los
animales. Hay algunos serotipos que se encuentran adaptados a una sola especie animal, como por
ejemplo Salmonella typhi, responsable de la Fiebre Tifoidea que se encuentra solamente en el
hombre. Las caractersticas patognicas son tan variadas como su hbitat natural. Se pueden dividir
segn las presentaciones clnicas en:

Formas digestivas, gastroenteritis, el ms frecuente de los cuadros clnicos causados por


Salmonella. Estas son las diarreas del nio pequeo y las clsicas toxiinfecciones
alimentarias, consecutivas a la ingestin de alimentos contaminados con una cepa de
Salmonella.
Formas septicmicas, graves, prototipo de las cuales es la Fiebre Tifoidea.
Formas diversas de gravedad variable: meningitis, ostetis, etc., mucho menos frecuentes.

La clasificacin de Salmonella es compleja. Dentro del gnero Salmonella prcticamente una nica
especie tiene importancia en patologa humana y animal y una nica subespecie llamada
Salmonella entrica subespecie enterica, pero se describen aproximadamente 2000 serotipos
dentro de esta subespecie, por lo que corrientemente se los llama por el nombre del serotipo, por
ejemplo Salmonella typhi ya mencionada o Salmonella enteritidis. Salmonella son mviles. Desde el
punto de vista antignico, poseen antgenos O somticos, antgenos de envoltura y antgenos
flagelares H con dos especificidades antignicas expresadas alternativamente como ya fue descrito.
Las caractersticas bioqumicas se describen en la tabla correspondiente.
Presentaciones clnicas
Gastroenteritis. Los sntomas aparecen 6 a 24 horas luego de la ingestin del alimento o agua
contaminados y pueden durar hasta una semana o ms. Nuseas, vmitos, dolor abdominal y
diarrea, son los sntomas principales. La severidad vara de una persona a otra, pudiendo llegar a
presentar dolores que hagan pensar en apendicitis y diarreas severas inclusive con sangre.
La mayora de los casos ocurren en nios menores de 10 aos y los sntomas pueden ser ms
severos en este grupo. La infeccin puede volverse sistmica. La infeccin sistmica es ms
frecuente en lactantes o enfermos inmunocomprometidos (cncer, SIDA). En general se trata de una
enfermedad molesta pero poco peligrosa, aunque durante los grandes brotes se ven algunos
enfermos graves y pueden morir algunos pacientes. S. enteritidis y S. typhimurium son los serotipos
ms frecuentes aislados en toxiinfecciones alimentarias. Diversos alimentos estn involucrados.
Derivados crnicos y huevos son algunos de los ms frecuentes. Tcnicas modernas en la cra de
las aves, hacinamiento, dietas hiperproteicas llevan a altos niveles de portacin intestinal de
Salmonella. En los mataderos es frecuente la contaminacin de las carcasas y de las superficies de

Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA

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BACTERIOLOGIA
los huevos. Se ha demostrado tambin la transmisin transovrica de Salmonella de las gallinas a
sus huevos. La idea de que huevos de cscara sana son seguros es por lo tanto falsa. La
enfermedad resulta del consumo de alimentos contaminados mal cocidos o de contaminacin
cruzada con alimentos crudos en las cocinas.
Otra forma de propagacin de la enfermedad, no desdeable, dejando de lado las toxiinfecciones
alimentarias es la transmisin interhumana, de persona a persona por medio de las manos
contaminadas. S. typhi es el serotipo especfico que causa la Fiebre Tifoidea. El hombre la adquiere
por consumir alimentos o agua contaminados por heces humanas. La contaminacin de los
alimentos puede tambin ocurrir durante su preparacin con manipuladores de alimentos portadores
de S. typhi y que eliminan gran nmero de bacterias en sus materias fecales. Infectados
asintomticos y portadores que han padecido la enfermedad previamente son los que mantienen la
fuente de infeccin.
Es sorprendente lo limitado del conocimiento en la patogenia de las infecciones causadas por
Salmonella. S. typhi atravesara la mucosa por medio de las clulas M, se multiplicara en la
submucosa y de all se diseminara. Las bacterias se multiplican en hgado y bazo y pasaran desde
all a la circulacin general. Se han visto, en otros serotipos, bacterias dentro de las clulas
mucosas absortivas y en macrfagos asociados a la mucosa. No es claro el mecanismo por el que
se produce la diarrea. Salmonella al igual que otros patgenos digestivos, induce a las clulas del
husped a englobarlos, pero parece algo diferente a la fagocitosis inducida de otros patgenos, ya
descrita. Luego de adherida la bacteria a la superficie celular, se produce un pliegue en la clula,
que la rodea y la introduce en una vescula de endocitosis. Hay intensa polimerizacin de actina en
la vecindad y luego de introducida, sta desaparece. La bacteria no escapa de la vescula ni entra
en el citoplasma, se multiplica en este fagosoma para ser posteriormente liberadas.
Klebsiella
La principal especie de este gnero es Klebsiella pneumoniae, muy expandida en la naturaleza. Se
la asla frecuentemente de materias fecales del hombre y los animales, pero tambin de aguas,
vegetales y alimentos. Son bacilos Gram negativos inmviles, a menudo capsulados. La cpsula es
de naturaleza polisacardica. Las propiedades bioqumicas se describen en la tabla correspondiente.
Desde el punto de vista antignico, es til en epidemiologa la determinacin de los antgenos
capsulares. Existen ms de 70 tipos capsulares diferentes. Pueden existir reacciones cruzadas con
antgenos capsulares de otras especies bacterianas. El poseer cpsula otorga a estas bacterias un
aspecto colonial mucoide.
Se trata de patgenos oportunistas, pueden provocar diversos cuadros clnicos en el hombre:
infecciones urinarias, bacteriemias, neumonas, infecciones hepato-biliares, etc. Un porcentaje
elevado de aislamientos de Klebsiella, particularmente aquellos de infecciones nosocomiales,
contienen plsmidos de resistencia a los antibiticos. Puede ser resistencia a betalactmicos,
aminoglucsidos, etc.
Enterobacter Serratia
Estos dos gneros comprenden diversas especies presentes en general en el tubo digestivo del
hombre y los animales, en el suelo, vegetales y en aguas. Las caractersticas bioqumicas se
describen en la tabla correspondiente.

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BACTERIOLOGIA
Son patgenos oportunistas. Al igual que Klebsiella los aislamientos hospitalarios generalmente
presentan resistencias a mltiples antibiticos.
Proteus - Morganella Providencia
Estos tres gneros forman un grupo caracterizado por poseer la capacidad de desaminar
oxidativamente los aminocidos formando cidos cetnicos. Habitan el tubo digestivo del hombre y
los animales, encontrndose tambin en el suelo, vegetales y aguas.
Las especies ms frecuentemente aisladas en cada gnero son Proteus mirabilis, Morganella
morgagnii, Providencia rettgeri. Son bacilos Gram negativos muy polimorfos, mviles, Proteus spp.
poseen una movilidad extrema que les permite invadir los medios slidos.
Las propiedades bioqumicas se describen en la tabla correspondiente.
Desde el punto de vista patognico, son agentes de infecciones urinarias, pudiendo causar
infecciones sistmicas en huspedes inmunocomprometidos. P. mirabilis ha sido ms estudiado,
encontrndose factores de virulencia para el aparato urinario, tales como adhesinas y una
hemolisina; se ha sostenido por aos el papel de la ureasa producida por Proteus y Morganella en
la patogenia de pielonefritis.
Yersinia
Este gnero comprende varias especies entre ellas Y. pestis, agente de la peste o plaga bubnica o
neumnica, comnmente llamada la muerte negra, enfermedad de los roedores, trasmitida
ocasionalmente al hombre por las pulgas, con pandemias histricas desde el siglo VI. Y. pestis es
endmica en algunas regiones tales como Irn y el oeste de Estados Unidos.
Otra especie Y. enterocolitica es muy ubiquitaria, se ingiere con agua o alimentos contaminados.
Algunos biotipos estn relacionados con enterocolitis en el hombre. Raramente presenta infecciones
sistmicas. Sin embargo, las bacterias atraviesan con frecuencia la mucosa y se multiplican en los
ndulos linfticos mesentricos. Debido a los intensos dolores abdominales el cuadro puede
confundirse con apendicitis.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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BACTERIOLOGIA
Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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BACTERIOLOGIA
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Pseudomonas
BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES
Este gran grupo de bacilos Gram negativos incluye grmenes pertenecientes a diferentes familias y
otros gneros de incierta clasificacin. Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes, Acinetobacter,
son algunos de ellos, en general desprovistos de grandes atributos de virulencia demostrables, no
producen enfermedad en el individuo sano pero pueden comportarse como oportunistas en
enfermos inmunodeprimidos.
Pseudomonas
De las numerosas especies de Pseudomonas descritas slo unas pocas tienen importancia en
patologa humana. Pseudomonas mallei y P. pseudomallei causan enfermedad severa en el hombre
pero se aslan raramente en el Hemisferio Occidental. Por otra parte P. cepacia es un oportunista
poco frecuentemente asociado con enfermedad en el hombre.
La especie Pseudomonas aeruginosa por su frecuencia en patologa humana es mejor estudiada
que otros. Es un microorganismo verstil, ampliamente distribuido en el suelo, agua, plantas e
intestino de animales. Puede causar enfermedad en el hombre, ciertos animales, plantas e insectos.
El agua contaminada puede ser una fuente de infeccin para el hombre. Es susceptible a la
desecacin, pero sus habilidades metablicas le permiten sobrevivir y multiplicarse en lquidos y
ambientes hmedos de los hospitales. Sus requerimientos nutricionales son variados, se ha aislado
P. aeruginosa de aguas termales, e incluso de soluciones desinfectantes en el hospital.
Las infecciones humanas estn la mayora restringidas a los pacientes hospitalizados que
adquieren el microorganismo de fuentes ambientales (infeccin exgena) por contacto con vectores
humanos o inanimados. P. aeruginosa desarrolla bien en medios simples, utilizndose para su
aislamiento los medios de cultivo de uso corriente en el laboratorio clnico.
La morfologa colonial y el olor frutado de aminoacetofenona son elementos de una identificacin
sencilla, y aunque existen caracteres de identificacin confirmatorios, son de uso poco corriente.

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BACTERIOLOGIA
La identificacin de cepas de P. aeruginosa tpicamente productoras de pigmento no es difcil, pero
las cepas no pigmentadas pueden presentar un problema. La mayora se identifican por la
produccin de un pigmento, pyocyanina, soluble en agua, azul, no fluorescente. P. aeruginosa
produce adems otro pigmento, pyoverdina, soluble en agua, verdeamarillento, fluorescente; otras
especies del gnero Pseudomonas tambin producen pyoverdina. Otros pigmentos, menos
frecuentes pueden ser producidos por P. aeruginosa.
Son bacilos Gram negativos, rectos o ligeramente curvos, mviles, con un solo flagelo polar.
Oxidasa y catalasa positivos, aerobios estrictos, no fermentan glucosa, utilizan diversos azcares
oxidativamente con produccin de cido. Uno de los caracteres ms constantes es su capacidad de
desarrollar a 42C. Producen varias enzimas, proteasas, lipasas, lecitinasas.
Patogenia
Las defensas inespecficas del husped son en general suficientes para prevenir la infeccin por P.
aeruginosa, pero brechas en esta barrera permiten a P. aeruginosa invadir y causar infecciones de
diversa gravedad. Producen el 10% de las infecciones nosocomiales, infectan heridas y
quemaduras y causan infecciones pulmonares, sobre todo neumona nosocomial e infecciones
respiratorias en pacientes con fibrosis qustica. La fibrosis qustica es una enfermedad gentica
asociada a un defecto en la secrecin de Cloro, caracterizada por la produccin de mucina con una
alteracin de su composicin inica, inusualmente espesa. Esto lleva a una menor eficiencia de la
mucina para limpiar las bacterias del pulmn y las vas areas y puede impedir el movimiento de las
clulas fagocticas.
Estos hechos explican la susceptibilidad de los pacientes con fibrosis qustica a la colonizacin con
P. aeruginosa. Si los enfermos son tratados los sntomas pueden desaparecer pero las bacterias
permanecen, presentando infecciones recurrentes. Las condiciones del paciente se ven agravadas
con la infeccin a P. aeruginosa por las dificultades teraputicas que se plantean debido a su alta
resistencia a los antimicrobianos.
Factores de virulencia
P. aeruginosa posee los mismos tipos de factores de virulencia que otras bacterias capaces de
causar enfermedad en el hombre inmunocompetente. Pero algo interesante es por qu P.
aeruginosa no es un patgeno propiamente dicho y es slo capaz de producir infecciones
oportunistas?. Es probable que P. aeruginosa sea ineficiente en su habilidad para llevar a cabo los
primeros pasos de la infeccin; puede colonizar pero no invadir piel y mucosas sanas y tampoco dar
infecciones persistentes con produccin concomitante de factores txicos que daen los tejidos del
husped.
Adhesinas. Produce dos tipos de adhesinas proteicas, pili y adhesinas no pili. P. aeruginosa
produce una neuraminidasa que saca los residuos de cido silico de GM1, creando sitios de unin
para la pilina. Por otra parte, P. aeruginosa es capaz de unirse a la mucina y lo hace por medio de
las adhesinas no pili.
Exoenzima S. Es una enzima excretada que puede actuar como exotoxina. Tiene actividad de
ADPribosilacin como otras toxinas, pero aplicada en forma exgena no daa las clulas del
husped. Al igual que la toxina colrica intervienen protenas de las clulas del husped en la
activacin de la toxina para lograr su mxima actividad. Se sostiene que actuara dificultando la

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BACTERIOLOGIA
accin de los fagocitos lo que facilitara la sobrevida de P. aeruginosa en el torrente sanguneo y
rganos. En el pulmn actuara inhibiendo la muerte intrafagoctica de las bacterias y promoviendo
la infiltracin fagoctica en el rea. Tambin puede presentar efecto txico directo en los pulmones.
Exotoxina A. Esta exotoxina tiene el mismo mecanismo que la toxina diftrica. Es una toxina A-B con
tres unidades funcionales:
Dominio R (regin de unin al receptor celular),
Dominio T (regin que media la translocacin de la porcin enzimtica al interior de la
clula),
Dominio C (regin cataltica).
Los dominios R y T se localizan en la cadena B y el dominio C en la cadena A. La cadena A es
enzimticamente activa por ADPribosilacin del factor de elongacin su receptor es una
glicoprotena de las clulas del hospedero. La mayora de los aislamientos clnicos la producen, y
actuara produciendo dao en los tejidos y disminuyendo la actividad de los fagocitos.
Elastasas. Elastina es el 30% de las protenas del tejido pulmonar. Est tambin presente en la
pared de los vasos sanguneos. Es responsable de las propiedades elsticas de estos rganos que
se expanden y contraen. P. aeruginosa tiene actividad elastoltica.
Otras enzimas extracelulares. Produce varias enzimas adems de las mencionadas. Una lipasa
alcalina y dos fosfolipasas, no bien estudiadas.
Un atributo de virulencia muy interesante es la produccin de alginato. Es un polmero de cido
mannurnico y gulurnico que forma un gel viscoso alrededor de la bacteria. Las colonias que lo
producen tienen aspecto mucoide. Para las bacterias marinas esto es un atributo importante para su
supervivencia. P. aeruginosa ha adaptado esto a su supervivencia en el pulmn. En medios de
cultivo ricos pierde esta propiedad. Esta capa que rodea a la bacteria y a las colonias de bacterias
en el pulmn puede actuar como adhesina y probablemente previene la ingestin fagoctica de la
bacteria.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?

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BACTERIOLOGIA
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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BACTERIOLOGIA

COCOS GRAM (+): Estafilococos


VIBRIONACEAE
La Familia Vibrionaceae agrupa diferentes gneros de bacilos Gram negativos con un hbitat
primario acutico. Se los encuentra en el mar en aguas continentales y en relacin con animales
acuticos. Diversas especies son patgenas para el hombre, peces, as como otros vertebrados e
invertebrados.
Aunque la Familia fue definida inicialmente en un intento de agrupar especies oxidasa positivas y
mviles por flagelos polares para diferenciarlas de los integrantes de la Familia Enterobacteriaceae,
se vio que todos estos microorganismos comparten atributos distintivos que sugieren un origen
evolutivo comn.
Microscopia: Son bacilos Gram negativos, rectos o curvos. Mviles por flagelos polares. No forman
esporos. Quimioorganotrofos, desarrollan en medios simples, son anaerobios facultativos, capaces
de tener un metabolismo fermentativo o respiratorio. La mayora oxidasas positivo. La mayora de
las especies requiere 2-3% de ClNa o agua marina para desarrollar. El % G + C del ADN va de 38 a
63%.
Los gneros que forman esta familia son:

Vibrio
Photobacterium
Aeromonas
Plesiomonas

Teniendo importancia mdica especies de los gneros Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas.


Las propiedades bioqumicas se describen en la tabla correspondiente.
Por muchos aos la nica especie que interes a los microbilogos fue V. cholerae, agente del
Clera epidmico. Otras especies tales como V. parahemolyticus pueden causar toxiinfecciones

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BACTERIOLOGIA
alimentarias en el hombre luego de la ingestin de productos del mar, es la primera causa de diarrea
en el Japn, donde se consume pescado crudo. Otras especies de Vibrio y Plesiomonas
shigelloides tambin estn relacionadas con gastroenteritis. Por otra parte, Aeromonas hydrophila
es responsable de infecciones de heridas que han sido expuestas a aguas contaminadas, y
ocasionalmente, puede provocar infecciones sistmicas en enfermos inmunodeprimidos.
Vibrio cholerae
V. cholerae es un bacilo Gram negativo, curvo, con forma de coma. Desarrolla bien en medios
simples. Aunque su desarrollo est estimulado por la presencia de Na+, esta especie a diferencia de
las otras especies del gnero, desarrolla en medios sin el agregado de ClNa. V. cholerae tolera
condiciones de alcalinidad y es capaz de desarrollar a pH 10. Estas propiedades se utilizan para
aislar el germen de las muestras clnicas, de alimentos o del agua. Las cepas epidmicas de V.
cholerae se dividen en 2 biotipos: clsico y eltor.
Es el agente del Clera. Es una enfermedad epidmica grave que ha matado millones de personas
y
contina siendo un importante problema de Salud en todo el mundo. La historia moderna del Clera
comienza en 1817 con la primera de las 7 pandemias. En 1950 slo haba Clera en Asia. En 1961
V. cholerae O:1 biotipo El Tor se disemin fuera de Indonesia, primero a otros pases asiticos y
Medio Oriente luego en la dcada del 70 a Africa, Sureste europeo e islas del Pacfico.
En enero de 1991 se notificaron los primeros casos de Clera en Per. En unas semanas se
disemin rpidamente en el pas. La enfermedad afect todas las edades con una muy alta
incidencia y al principio alta mortalidad. El comportamiento es de oscilacin estacionaria,
apareciendo en los meses clidos el mayor nmero de casos. Luego de la diseminacin epidmica
inicial, es posible que el Clera persista en algunas reas por aos en un estado de endemia. Es
indiscutible que la mejor forma de controlar el Clera en las poblaciones es el poseer agua potable y
un adecuado saneamiento que junto a la educacin son los pilares fundamentales del control de
estas epidemias y adems contribuyen al desarrollo de estas poblaciones.
Estructura antignica
Se puede dividir en base a sus antgenos somticos. Se describen al menos 139 serogrupos
diferentes. Todos comparten un mismo antgeno flagelar. Las cepas pertenecientes al serogrupo O:1
hasta 1992 fueron las nicas asociadas con Clera epidmico. Desde 1992 un nuevo serogrupo
O:139 ha sido relacionado con Clera epidmico en India y Bangladesh. Los biotipos son aplicables
solamente a V. cholerae O:1. Las cepas pertenecientes a los otros serogrupos se asocian a casos
de diarrea ocasional o enfermedades extraintestinales. Las cepas del serogrupo O:1 se dividen
clsicamente en 3 serotipos: Ogawa, Inaba e Hirojima. Las cepas aisladas pueden sufrir
conversiones de Inaba a Ogawa, por lo que los serotipos son de escaso inters epidemiolgico.
Patogenia
V. cholerae causa enfermedad en el hombre porque es capaz de colonizar el intestino delgado luego
de ingerido. Se adhiere a la superficie mucosa y produce una enterotoxina, la toxina colrica que
acta en las clulas mucosas intestinales. Esta accin est dirigida a alterar el balance
hidroelectroltico de estas clulas, disminuyendo la entrada de Sodio y aumentando la salida de
Cloro y agua hacia la luz intestinal, resultando en diarrea importante y disbalance electroltico, que

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BACTERIOLOGIA
puede llevar al paciente a la muerte por shock hipovolmico. Con un buen soporte de lquido y
electrolitos el paciente sobrevive.
Factores de virulencia.
Hasta hace 5 aos se crea entender muy bien los mecanismos patognicos de V. cholerae. Estos
se explicaban por tres factores: flagelo, que permita a la bacteria nadar hasta la mucosa intestinal;
pili que mediaba la adherencia a las clulas de la mucosa, y la toxina colrica que produca diarrea
severa.
Investigaciones recientes demuestran una mayor complejidad en este modelo. Primero la regulacin
de los factores de virulencia ha demostrado ser mucho ms compleja de lo esperado, con muchos
cambios adaptativos al husped humano. Segundo, muchas cepas producen otras toxinas adems
de toxina colrica, aunque esta es indiscutiblemente la causa ms importante de los sntomas en el
clera. Tercero, las clulas del husped no son slo blancos pasivos de la accin de la toxina.
Colonizacin de la mucosa del intestino delgado. Adems de las evidencias descritas de que la
motilidad flagelar puede ayudar a V. cholerae a alcanzar la mucosa intestinal, la mayora de las
investigaciones han sido dirigidas a ver lo que sucede cuando V. cholerae alcanza la mucosa. Una
contribucin importante a la colonizacin es la presencia de largos filamentos formando un
agrupamiento en la superficie de la bacteria. Cepas que carecen de estos pili son avirulentas. Se los
ha llamado Tcp pili (pili coregulado con la toxina). A diferencia de lo que sucede en otras bacterias
estos pili estn localizados solamente en una porcin de la superficie celular.
Por otra parte, V. cholerae produce una hemaglutinina que podra contribuir a la adherencia adems
de otra posible adhesina codificada por unos genes llamados factores de colonizacin accesorios
(acf).
La relevancia de esta toxina como factor de virulencia, que acta por ADPribosilacin tipo A-B.
Posee una subunidad A (enzimtica), y 5 idnticas subunidades B (unin). La subunidad A debe ser
clivada para ser enzimticamente activa en A1 y A2. La variedad de efectos que se producen
incluye la alteracin de las actividades de los transportadores de Sodio y Cloro. Esto lleva a un
disbalance inico que causa la prdida de agua asociada al clera. En clulas polarizadas como las
de la mucosa intestinal la adenil cyclasa se localiza en la membrana basolateral por lo que la toxina
unida a la superficie apical debe actuar al otro lado de la clula.

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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BACTERIOLOGIA
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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BACTERIOLOGIA
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Micobacterias

BACTERIOLOGA DEL AGUA

BACTERIOLOGA DEL SUELO Y AIRE

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BACTERIOLOGIA

BACTERIOLOGA DE LOS ALIMENTOS

ACTIVIDADES
1. Responda las siguientes interrogantes:
Qu sntomas presenta una uretritis gonoccica?
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Qu tipos de especulo existen, mencione sus usos?
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Cul es procedimiento para obtener muestras vaginales a mujeres vrgenes?
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BACTERIOLOGIA
Qu medios de trasporte microbiolgico conoce?
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Cul es el medio microbiolgico para el cultivo de N. gonorrhoeae?
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Cul es la diferencia entre secrecin vaginal y cervical?
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DESCRIPCIN DE COLONIAS
Las colonias de microorganismos se pueden describir teniendo en cuenta el tamao, color,
superficie, etc.
Tamao:

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BACTERIOLOGIA
Grande
Mediana
Pequea

dimetro mayor a 1 mm
dimetro aproximadamente igual a 1 mm
dimetro menor a 1 mm

Color
Blanco, Crema, Amarillo limn, Negro, etc
Superficie
Brillante, Lisa, Granular, Rugosa
Consistencia
Viscosa, Mantecosa, Friable (se disgrega al tocarla)
Densidad (con luz a travs de la colonia)
Opaca, Transparente, Traslcida
Forma

Puntiforme

Circular

Filamentosa

Irregular

Rizoide

Lanceolada

Elevacin

Chata

Elevada

Convexa

Cpula

Umbonada

Umbilicada

Margen

Entero

Ondulado

Lobado

Ondeado

Filamentoso

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BACTERIOLOGIA

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