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Procedimiento Experimental

CARBOHIDRATOS:
1.- PRUEBA DE MOLISH
- En un tubo de ensayo coloque, 1 ml aproximadamente de fructosa o almidn
- Aada 2 gotas de reactivo do Molisch y mezcle bien
- Incline el tubo y agregue cuidadosamente (por las paredes del tubo) 1,5 ml de
H2SO4(cc)

Obs: Se forma un anillo de color violeta que indicaba la presencia de un


carbohidrato. Dicho anillo se forma en la interfase.
* El reactivo de la prueba deshidrata pentosas para formar furfural
(reaccin en la parte superior) y deshidrata hexosas para formar 5hidroximetil furfural (reaccin en la parte inferior). El furfurales ms
reaccionan presente con-naftol en el reactivo de prueba para producir
un producto de color prpura (reaccin no se muestra).

2.- PRUEBA DE LUGOL


- En un tubo de ensayo coloque, 1 ml aproximadamente de almidn.
- Agregue 1 o 2 gotas aproximadamente de HCl(cc),
- Aada 1 o 2 notas de la solucin de lugol

Obs: Se observa la coloracin de un azul intenso lo que evidenciaba la


presencia de un almidn.
*. El almidn en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de
yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico.

PROTENAS:
1.- Reaccin de Biuret
- En un tubo de ensayo colocar 2 ml de solucin de albmina (muestra problema)
- Agregar 3 ml de NaOH al 10%
- Agregar gota a gota la solucin de CuSO4 al 05% hasta obtener un color prpura
violeta.

Obs: Se forma un complejo color violeta para que demuestre que la Rx es


positiva e identifica la existencia de protenas.
*El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solucin acuosa alcalina (gracias a la
presencia de NaOH o KOH). La reaccin se basa en la formacin de un compuesto de
color violeta, debido a la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones
Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los
enlaces peptdicos.
La reaccin debe su nombre al biuret, una molcula formada a partir de dos de urea
(H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la ms sencilla que da positiva esta reaccin, comn a
todos los compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos consecutivos en sus
molculas.

2.- Reacciones de Desnaturalizacin de protenas


-En tubos de ensayo se colocan 2 ml de de ovoalbmina luego se verificara

la desnaturalizacin de la protena por efecto de:


-Adicin de 1 ml de acido concentrado
-Calentamiento durante un minuto, antese la temperatura de coagulacin.
-Adicionar 1 ml de algn solvente organico:alcohol, acetona, cloroformo.
-Adicionar 0.5 ml de solucin de CuSO4 al 5%

albmina + H2SO4(cc)

albmina + alcohol(c)

albmina + CuSO4 al 5%

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