UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARING

ESPECIALIZAO EM BIOTECNOLOGIA
TURMA 5 2014
MARCADORES MOLECULARES E GENMICA

ATIVIDADE DE MARCADORES MOLECULARES E GENMICA

DIEGO IGOR ALVES FERNANDES DE ARAJO

MAT. PG 69769

JOO PESSOA - PB
JULHO / 2015

1. O resultado da anlise de isoenzimas uma subestimativa da real

diversidade gentica da amostra. Discuta esta informao.
Sim, de modo geral, o estudo com isoenzimas contribuiu para
avanos expressivos na gentica, principalmente na rea da gentica de
populaes, revelando uma quantidade significativa de variao nos mais
diferentes organismos.
A leitura dos fentipos eletroforticos permitem avaliar a estrutura
gentica com base nas estimativas das freqncias allicas e genotpicas,
levando a concluses sobre a magnitude e a distribuio da variabilidade
entre e dentro das populaes. Alm disso, os marcadores so robustos
e codominantes, o processo bastante reprodutvel, prtico e mais
acessvel que o RPFL, por exemplo.
Alguns

estudos

demonstram

uso

de

aloenzimas

em

investigaes mais especficas da estrutura populacional, tais como fluxo

gnico, deriva gentica e taxas de cruzamento. Os padres enzimticos
podem demonstrar as interaes entre os sistemas biolgicos e o meio
ambiente.
2. Quando avaliamos os marcadores isoenzimticos e os
marcadores de DNA codominantes e dominantes eles apresentam o
mesmo potencial informativo? Discuta.
Marcadores isoenzimticos so utilizados com sucesso em vrias
linhas de pesquisa, visto que so capazes de detectar, indiretamente,
polimorfismo em sequncias de DNA e na carga eltrica de protenas com
funo enzimtica, gerado por mutaes na sequncia gnica.
A natureza co-dominante das bandas e o custo relativamente baixo
da tcnica tornaram a anlise de isoenzimas atraente e til na pesquisa.
So especialmente utilizadas para a comparao de diversos txons,
acessos ou indivduos. Alm disso, constituem a maneira mais direta e
rpida de avaliar genotipicamente muitos loci num grande nmero de
indivduos.
Com o objetivo de aumentar a eficincia na seleo e
caracterizao de germoplasma e a maximizao dos ganhos genticos,
novas tcnicas como a dos marcadores de DNA ou moleculares, vem

sendo cada vez mais utilizados em programas de melhoramento,

permitindo o acesso e a seleo da variabilidade em nvel de DNA.
Os marcadores moleculares, tambm chamados de marcadores
genmicos ou genotpicos, detectam o polimorfismo diretamente ao nvel
do DNA, no sofrendo qualquer tipo de influncia ambiental ou gnica.
Teoricamente qualquer fragmento de DNA pode ser utilizado como um
marcador molecular, desde que ele revele polimorfismo entre indivduos.
Quando comparados aos marcadores fenotpicos, apresentam um
nmero maior de alelos por locus a posio de um gene ou um
marcador gentico no cromossomo. Seguindo-se critrios genticos eles
podem ser classificados em dois tipos principais: a) marcadores
moleculares locus-especficos codominantes; b) marcadores locus-no
especficos dominantes. Embora esta classificao seja simplificada, ela
corresponde aos dois principais tipos de marcadores utilizados.
H inmeros tipos de marcadores moleculares, diferenciando-se
quanto habilidade em detectar diferenas entre indivduos, custo,
facilidade de uso, consistncia e repetibilidade. Entre os mais utilizados
esto o RAPD (Polimorfismo de DNA Amplificado ao Acaso), RFLP
(Polimorfismo no Comprimento de Fragmentos de Restrio), AFLP
(Polimorfismo de Comprimentos de Fragmentos Amplificados) e
Microssatlites.

3- Como elencar o uso de um marcador molecular nas atividades de

pesquisa em nosso laboratrio?
Existem cinco principais consideraes para a escolha de
marcadores moleculares nas atividades de pesquisa, so elas:
confiabilidade, quantidade e qualidade do DNA necessrio para a
realizao dos ensaios, procedimento tcnico para o ensaio de marcador,
nvel de polimorfismo e custo.
Confiabilidade: os marcadores devem ser firmemente ligados aos
loci alvo. O uso de marcadores que flanqueiam ou marcadores
intragnicos

aumentam

singnificativamente

marcadores para predizer fentipo.

confiabilidade

dos

Quantidade e qualidade de DNA:

Algumas tcnicas de

marcadores requerem grandes quantidades e alta qualidade de DNA, o

que pode ser difcil de se obter na prtica. Alm disso, maior quantidade
e qualidade do material promovem um aumento no custo do
procedimento.
Procedimento tcnico:

o nvel de simplicidade e o tempo

necessrio para a tcnica so consideraes importantes. Mtodos

simples e rpidos so altamente desejveis.
Nvel de polimorfismo: de modo ideal, o marcador deve ser
altamente polimrfico em material de reproduo (ou seja, deve
discriminar entre diferentes gentipos).
Custo: o ensaio do marcador deve ser custo-efetivo para que
seja vivel.
Candidatos a marcadores que apresentarem a capacidade de
fornecer resoluo adequada, o maior raio de abrangncia possvel e no
necessitarem de informaes prvias sobre o genoma do organismo em
estudo, despontam como favoritos.