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Gentica dirigida

La gentica dirigida es la prctica de estimular


una herencia predispuesta o sesgada de genes particulares para alterar poblaciones enteras.[1] Las alteraciones posibles incluyen aadir, interrumpir, o modicar genes, incluyendo aquellos que reducen la capacidad reproductiva y puede causar una quiebra de
poblacin.[2][3] Notablemente, la gentica dirigida funciona slo en especies que se reproducen sexualmente, as
que no se pueden utilizar para desarrollar poblaciones de
virus o bacterias. Algunos alelos han evolucionado mecanismos moleculares que les conere una posibilidad de
transmisin ms grande que el normal de 50%, lo que
les conere propiedades de gentica dirigida. Mdulos
genticos sintticos con propiedades similares han sido
desarrollados como potentes tcnicas para la edicin del
genoma de poblaciones de laboratorio. Tambin ha sido
propuesto como tcnica para cambiar las poblaciones salvajes, por ejemplo en el caso para combatir insectos que
transmiten enfermedades (en particular mosquitos en los
casos de malaria, dengue y zika), para controlar especies
invasoras, o para eliminar la resistencia a los herbicidas
o pesticidas.[1][2][4] Varios mecanismos moleculares pueden mediar la gentica dirigida.[5] Este apunte se enfoca
en la gentica dirigida basada en la endonucleasa, la mas
verstil y activamente desarrollada sistema interno molecular para la gentica dirigida. Se nota que el termino gentica se reere a ambos el principio de predisponer una
herencia de alelo y a los elementos genticos que presentan una herencia predispuesta (ej. una pieza de ADN).

De este modo predisponiendo la herencia de genes alterados particulares, gentica dirigida sinttica podran ser
usado para propagar alteraciones a travs de poblaciones
salvajes.[2][3]

1.1 Mecanismos moleculares


exogeneous insertion

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

step 1: site-specic DNA cleavage


H2

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

H2

chromosome
with drive allele

plasmid

chromosome with native allele

chromosome with native allele

step 2: Homology Directed Repair (HDR)

step 2: Homology Directed Repair (HDR)

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

H2

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

H2

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

H2

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

H2

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

H2

H1

Cas9

gRNA

payload
gene

H2

Mecanismo molecular de la gentica dirigida.

En el nivel molecular, el gen de la endonucleasa trabaja cortando cromosomas que no codican la direccin en
un sitio concreto, induciendo a la clula a reparar el dao
copiando la secuencia dirigida en el cromosoma averiado. Esto es derivado de tcnicas de edicin de genoma y
que similarmente se basa en el hecho de que las roturas
de doble cadena son ms frecuentemente reparados por
recombinacin homloga si una plantilla esta presente,
y menos a menudo por recombinacin no homloga. La
clula entonces tiene dos copias de la secuencia dirigida.
Para conseguir este comportamiento, la gentica dirigida
de endonucleasa consisten en dos elementos anidados:

Porque es una manera a articialmente sesgar o predisponer una herencia de genes, la gentica dirigida constituye
un cambio importante en la biotecnologa. El impacto potencialmente enorme de liberar la gentica dirigida en la
naturaleza levanta importantes preocupaciones bioticas
con respecto a su desarrollo y administracin.

propagation after sexual reproduction

step 1: site-specic DNA cleavage

O un buscador de objetivos de endonucleasa o un


ARN-guiado de endonucleasa (por ej. Cas9 o Cpf1)
y su ARN gua, que corta la secuencia objetivo en
clulas recipientes

Mecanismo

Una secuencia de plantilla utilizada por la maquinaria de reparacin del ADN despus de la secuencia
de objetivo est cortada. Para conseguir el self propagando naturaleza de paseos de gen, esta plantilla
de reparacin contiene al menos el endonuclease secuencia. Porque la plantilla tiene que soler reparar
una rotura de hebra doble en el sitio tajante, sus lados son homlogos a las secuencias que es adyacente al sitio tajante en el genoma antrin. Por apuntar el paseo de gen a una secuencia de codicacin

En especies que se reproducen sexualmente, la mayora


de los genes estn presentes en dos copias (que pueden ser
alelos diferentes o no), cada cual tiene 50% de posibilidad
de ser heredado. Para que un alelo se extienda a travs de
una poblacin grande, se requiere que aumente la forma
fsica de cada individuo. Algunos alelos han evolucionado
mecanismos moleculares que les conere una posibilidad
de transmisin ms grande que el normal de 50%. Esto
les permite extenderse a travs de una poblacin incluso
si se reduce la forma fsica de cada organismo individual.
1

3
del gen, este gen ser inactivated; las secuencias adicionales pueden ser introducidas en el paseo de gen
para codicar funciones nuevas.

Como resultado, la insercin de paseo del gen en el genoma re-ocurrir en cada organismo que hereda uno copia
de la modicacin y uno copian del gen de tipo salvaje.
Si el paseo de gen es ya presente en la clula de huevo (p.
ej. cundo recibido de un padre), todos los gametos del
@individual llevarn el paseo de gen (en vez de 50% en
el caso de un gen normal).

1.2

Extendiendo en la poblacin

Desde entonces pueda nunca ms de doble en frecuencia


con cada generacin, un paseo de gen introducido en un
individuo solo tpicamente requiere docenas de generaciones para afectar una fraccin sustancial de una poblacin (NB: suponiendo errorless conversin de alelo, extiende en una fraccin de la poblacin entera en generaciones). 1 1/2n n Alternativamente, liberando organismos que contienen paseo en los nmeros sucientes pueden afectar el resto dentro de un par de generaciones; para
caso, por introducir l en cada milsimo @individual, toma slo 12-15 generaciones para ser presentes en todos
los @individual.[6] Si un paseo de gen nalmente devendr jado en una poblacin y en qu velocidad depende
de su efecto en forma fsica de @individual, en el ndice
de conversin de alelo, y en la estructura de poblacin. En
una poblacin bien mixta y con frecuencias de conversin
de alelo realistas (90%), gentica de poblacin pronostica que paseos de gen consiguen jados para coeciente
de seleccin ms pequeo que 0.3; en otras palabras,, paseos de gen pueden ser utilizados no slo para extender
modicaciones genticas beneciosas, pero tambin detrimental unos tan mucho tiempo el xito reproductivo no
es reducido por ms de 30%.[6] Esto es un contraste grande con genes normales cules pueden slo extendidos en
poblaciones grandes si son beneciosos.

Aplicaciones y limitaciones tcnicas

2.1

Aplicaciones

La gentica dirigida tienen dos clases principales de aplicaciones, el cual, a pesar de que esta basado en la misma
tecnologa, tiene implicaciones de importancia diferente:

CUESTIONES

usada para conseguir mucho ms fcilmente una tarea que es factible con otras tcnicas. Requiere connamiento reforzado de las poblaciones de laboratorio para impedir una liberacin accidental del paseo
de gen al salvaje.
Introducir una modicacin gentica en poblaciones
salvajes. En contraste con el anterior, paseos de gen
aqu constituyen un desarrollo importante y abrir la
puerta a cambios anteriormente inalcanzables. Esto
levanta importantes asuntos ticos.
Debido al potencial sin precedentes de la gentica dirigida, mecanismos salvaguardas han sido propuestos y
probados.[7]

2.2 Limitaciones tcnicas


Porque la gentica dirigida se propaga reemplazando
otros alelos que contiene un sitio de corte y las homologas correspondientes, su aplicacin est limitada a especies que se reproducen sexualmente (porque son diploides y los alelos se mezclan en cada generacin). Como
efecto secundario, la endogamia en principio podra ser
seleccionada como un mecanismo de escape, pero la extensin de que esto puede pasar en la prctica es difcil
de evaluar.[8]
Debido al nmero de generaciones requirida para que una
gentica dirigida se extendienda en una poblacin entera,
tal vez pueda requerir menos de un ao para algunos invertebrados, pero siglos para organismos con intervalos
de aos-entre el nacimiento y la madurez sexual, como
los humanos.[9] Por ello esta tecnologa es mas practica
en especies que se reproducen rpidamente.

3 Cuestiones
Cuestiones que los investigadores han destacado
incluyen:[10]
Mutaciones es posible que una mutacin podra
pasar en el medio del camino, lo cual tiene el potencial de dejar rasgos indeseados que persistan a
continuacin a medida que se extiende la gentica
dirigida.
EscapeEl cruzamiento de razas o el ujo del gen
puede potencialmente dejar que una gentica dirigida se vaya ms all su poblacin de objetivo.
Impactos ecolgicosIncluso cundo los impactos
directos de los nuevos rasgos en un objetivo son entendidos, la gentica dirigida puede tener efectos secundarios en el entorno.

Introducir una modicacin gentica en poblaciones


de laboratorio; una vez una cepa o una lnea que lleva
la gentica dirigida ha sido producida, la direccin
puede ser pasada a cualquier otra lnea sencillamen- Hay preocupaciones bioticas tambin, ya que la gentica
te mediante el apareo. Aqu la gentica dirigida es dirigida es una herramienta muy potente.[11]

3
En diciembre 2015, los cientcos de importantes academias mundiales pidieron una moratoria en ediciones heredables del genoma humano que seran transmitido en
embarazos, incluyendo aquellos relacionados a las tecnologas CRISPR-Cas9. Pero apoyaban la continuada investigacin bsica y la edicin gentica que que no afectara generaciones futuras.[12][13]

con guiar RNAs dirigindolo a una secuencia particular


para ser editada. Cundo Cas9 cortes la secuencia de objetivo, la clula a menudo repara el dao por reemplazar la secuencia original con ADN homlogo. Por introducir una plantilla adicional con homologas apropiadas,
Cas9 puede soler eliminar, aade, o modicar genes en
un unprecedentedly manera sencilla. Tan de 2014[actuaprobado en clulas de
En febrero 2016, cientcos britnicos recibieron permiso lizacin], exitosamente haya sido [2]
20 especies, incluyendo humanos. En muchos de esta
por parte de los reguladores para modicar genticamente
embriones humanos utilizando CRISPR-Cas9 y tcnicas especie, el edita modicado su germline, dejndoles para
ser heredado.
relacionadas bajo la condicin de que los embriones sean
[14][15]
destruidos en siete das.
Esvelt Y coworkers primero sugerido en 2014 que
CRISPR/Cas9 podra soler complexin endonuclease
paseos de gen.[2] En 2015 investigadores publicaron
ingeniera exitosa de CRISPR-paseos de gen basado
4 Historia
en Saccharomyces[7] , Drosophila[21] y mosquitoes.[22][23]
Todo cuatro estudios demostraron extremadamente disAustin Burt, un geneticista evolutivo en el Colegio Imtorsin de herencia ecaz sobre generaciones sucesivas,
perial de Londres, primeramente esbozo la posibilidad
con uno estudia demostrar el @spread de un paseo de gen
de construir la gentica dirigida basado en genes natua poblaciones de laboratorio ingenuo.[23] Paseo-los alelos
rales egostas de endonucleasa buscadora de objetivos
resistentes estn esperados para surgir para cada de los
en 2003.[3] Los investigadores ya haban demostrado que
paseos de gen descritos, aun as esto puede ser retrasado
estos genes egostas podran extenderse rpidamente a
o impedido por apuntar altamente conserv los sitios en
travs de generaciones sucesivas. Burt sugiri que la gequ resistencia est esperado para tener un coste de forma
ntica dirigida podran ser utilizada para impedir que una
fsica severo.
poblacin de mosquito pueda transmitir el parsito de la
malaria o provocar un quiebre en la poblacin de mos- Debido a CRISPR/Cas9 est apuntando exibilidad, los
quitos. Gentica dirigida basaron en homing endonuclea- paseos de gen derivados tericamente podran soler inses ha sido demostrado en el laboratorio en poblaciones geniero casi muy trait. A diferencia de diseos ante#transgnico de mosquitoes y moscas de fruta.[16][17][18] riores, podran ser tailored para bloquear la evolucin
Aun as, homing endonucleases es secuencia-concreto. de resistencia de paseo en la poblacin de objetivo por
Desde entonces alterando su especicidad para apuntar apuntar secuencias mltiples dentro de genes apropiaotras secuencias de inters queda un reto importante, las dos.CRISPR/Cas9 tambin podra permitir una varieaplicaciones posibles de paseo de gen quedaron limitadas dad de arquitecturas de paseo del gen pretendi conhasta el descubrimiento de CRISPR y el ARN asociado- trolar ms que poblaciones de accidente. Sensiblemenguiado endonucleases como Cas9 y Cpf1.[5] tigadores ya te, ARN-paseos de gen guiado podran ser diseados con
haban mostrado que estos genes egostas podran ex- otro ARN-guiado endonuclease como CRISPR/Cpf1.
tender rpidamente a travs de generaciones sucesivas.
Burt Sugiri que paseos de gen podran soler impedir una
poblacin de mosquito de transmitir el parsito de malaria o chocar una poblacin de mosquito. Paseos de gen ba6 Aplicaciones a poblaciones silvessaron en homing endonucleases ha sido demostrado en el
laboratorio en poblaciones #transgnico de mosquitoes y
tres
moscas de fruta.[16][17][18] Aun as, homing endonucleases
es secuencia-concreto. Desde entonces alterando su esUna aplicacin posible es modicar genticamente los
pecicidad para apuntar otras secuencias de inters quemosquitos y otros vectores de enfermedad para que no
da un reto importante, las aplicaciones posibles de papuedan transmitir enfermedades como la malaria, zika y
seo de gen quedaron limitadas hasta el descubrimiento de
el dengue. En junio 2014, la Organizacin Mundial de
CRISPR y el ARN asociado-guiado endonucleases como
la Salud (OMS) para el Programa Especial para Bsque[5]
Cas9 y Cpf1.
da y Entrenamiento en Enfermedades Tropicales emitieron directrices para evaluar mosquitos genticamente modicados.[24][25] En 2013 la Autoridad de Euro5 CRISPR/Cas9
pea de Seguridad Alimentaria emiti un protocolo para
valoraciones medioambientales de todos los organismos
CRISPR/Cas9 es un ADN mtodo tajante aquello ha he- genticamente modicados .[26] Los investigadores creen
cho la ingeniera gentica ms rpida, ms fcil, y ms que la aplicacin de la nueva tcnica a slo el 1% de la poecaz desde entonces 2013.[19][20] La aproximacin im- blacin silvestre de mosquitos puede erradicar la malaria
plica expresar el ARN-guiado Cas9 endonuclease junto en un ao. [27]

Ver tambin
La edicin del genoma
Cas9
CRISPR/Cpf1
Mquinas biolgicas
Biologa sinttica
Control de poblacin

Referencias

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REFERENCIAS

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Jennifer Kahn

Enlaces externos
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10 ORIGEN DEL TEXTO Y LAS IMGENES, COLABORADORES Y LICENCIAS

10
10.1

Origen del texto y las imgenes, colaboradores y licencias


Texto

Gentica dirigida Fuente: https://es.wikipedia.org/wiki/Gen%C3%A9tica_dirigida?oldid=91527179 Colaboradores: Quantanew

10.2

Imgenes

Archivo:Molecular_mechanism_of_gene_drive.svg
Fuente:
https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/a/ae/Molecular_
mechanism_of_gene_drive.svg Licencia: CC BY-SA 4.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: Thomas Julou

10.3

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