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RESULTADOS

Para la realizacin de la prctica de extraccin de esencias se llevaron a cabo


tres montajes, una extraccin con soxhlet con ptalos de rosa, otra de arrastre
de vapor con cscaras de limn y naranja y se realiz una destilacin simple
para extraer la esencia de pino (previamente preparada). Se prepar fuera del
laboratorio un enflorado con aceite mineral para extraer la esencia de
eucalipto.
Se realiz la extraccin de pigmentos con solventes, acetona y etanol, para
una muestra de espinaca y otra para la zanahoria. A partir de esto se realiza
una cromatografa de capa fina para cuantificar las clorofilas (tipo a y b) y
carotenoides (xantofilas y carotenos) en las dos muestras.
Por ltimo se realiz una cuantificacin de clorofila a partir de las muestras
extradas con solventes mediante el uso del espectrofotmetro a distintas
longitudes de onda.
Los resultados se resumen en la siguiente tabla:
Tabla 1. Datos y resultados
Materia
Prima

Rosas

Naranja
s/
Limone
s
Pino

Zanaho
ria
Espinac
a
Espinac
a

Component
e qumico
que le da el
aroma
Alcohol
feniletlicoCitronelol Geraniol
Geranial
(Citral A)

Mtodo
Extraccin

de

Comentarios

Con soxhlet

A pesar de realizarse con


rosas, se siente un leve olor
ctrico.

Arrastre de vapor

Se
aprecia
en
mayor
proporcin el aroma a limn,
ms que el de la naranja a
pesar de que la cantidad de
limn usada fue menor.
Se realiza despus de dejar el
pino en alcohol etlico por 8
das.
Amarillo (xantofila) , Naranja
(Caroteno)
Verde oliva
(Clorofila B),
Naranja (Caroteno)
EXTRACCIN CON ACETONA
Clorofila (mg/L)= 16,0303
Clorofila total(g/ml o mg/l)=
30,9944
EXTRACCIN CON ETANOL
Clorofila (mg/L)= 20,8269
Clorofila total(g/ml o mg/l)=

Pineno

Destilacin simple

----------------------------------------------------------------------------------------

Cromatografa
Cromatografa
Extraccin con
solventes
Anlisis con
Espectrofotometra

41,9815

Los clculos de la Tabla 1 se resumen a continuacin:


EXTRACCIN CON ACETONA

Clorofila a

( mgL )= A

Clorofila a

( mgL )= (1,220 )13,14=16,0308

13,14

680

Clorofila total

( mLg )=20,2A

Clorofila total

( mLg )=20,21,050+8,021,220=30,9944

570

+ 8,02A680

EXTRACCIN CON ETANOL

Clorofila a

Clorofila

( mgL )= A

13,14

680

( mgL )=( 1,585 )13,14=20,8269

Clorofila total a

Clorofila total

( mLg )=20,2A

570

+ 8,02A 680

( mLg )=20,21,449+8,021,585=41,9815
Tabla 2. Datos de cromatografa

Materia Prima
Zanahoria

Agente
Solvente
Xantofila
(Amarillo)
Caroteno
(Naranja)

Distancia (cm)
5
2,7

Rf
No aplica
0,54

Rf (%)
No aplica
54

0,8

80

Espinaca

Solvente
Clorofila B
(Verde Oliva)
Caroteno
(Naranja)

4,7
3,5

No aplica
0,745

No aplica
74,5

3,6

0,766

76,6

Los clculos del Rf se muestran a continuacin:

Rf =

Distancia Agente
Distancia Solvente

ZANAHORIA

Rf Xantofila=

2,7 cm
=0,54
5 cm

Rf Caroteno=

4 cm
=0,8
5 cm

ESPINACA

Rf Clorofila B=

Rf Caroteno=

3,5 cm
=0,745
4,7 cm

3,6 cm
=0,766
4,7 cm

Tabla 3. Comparacin de protocolos de extraccin

Clorofila a
Clorofila total
Clorofila a
Clorofila total

Unidad de
Medida
mg/L
g/ml
g/g de hoja
g/g de hoja

Extraccin con
Acetona
16,0303
30,9944
320,606
619,88

Extraccin con
Etanol
20,8269
41,9815
416,538
839,63

ACETONA

( mgL )1 L 1000 g
g
Clorofila a
=Clorofila
g

( )

1000 mL
10 ml
1 mg
0,5 g de hoja

g
10 ml
g
mL
g
Clorofila a
=16,0303
=320,606
g
0,5 g de hoja
g

( )

g
10 ml
(
mL )
g
Clorofila total ( )=Clorofila total
g
0,5 g de hoja
g
10 ml
g
mL
g
Clorofila total
=30,9944
=619,888
g
0,5 g de hoja
g

( )

ETANOL

( mgL )1 L 1000 g

1000 mL
10 ml
g
1 mg
Clorofila a
=Clorofila
g
0,5 g de hoja

( )

g
10 ml
g
mL
g
Clorofila a
=20,8269
=416,538
g
0,5 g de hoja
g

( )

g
10 ml
(
mL )
g
Clorofila total ( )=Clorofila total
g
0,5 g de hoja
g
10 ml
g
mL
g
Clorofila total
=41,9815
=839,63
g
0,5 g de hoja
g

( )

ANLISIS DE RESULTADOS

A partir de las extracciones con soxhlet y arrastre de vapor se pudo obtener


ciertas esencias, como la de rosas y naranja-limn, sin embargo para la
obtencin del aceite esencial el rendimiento fue mnimo para el caso del pino.
(Vase Figura 2, anexos).
En la cromatografa realizada a partir de la extraccin de la zanahoria se
apreciaron dos pigmentos, uno color amarillo identificado como xantofila y otro
naranja del caroteno. Se calcul la movilidad relativa (Rf) para cada
componente y se determin que la muestra de zanahoria presenta 0,54 de
movilidad para la xantofila y 0,8 para el caroteno. Para el caso de la espinaca,
la movilidad de la clorofila B fue de 0,745 y para el caroteno de 0,766. A partir
de estos valores se comprueba que tan polares son los compuestos, entre
menor sea la polaridad relativa mayor es su polaridad. Experimentalmente se
observa que para el caso de la zanahoria el ms polar es la xantofila y luego el
caroteno; para la espinaca el ms polar es la clorofila B y luego el caroteno.
Ambos casos son acordes con las polaridades tericas. Aun as, mltiples
factores pueden afectar los resultados de esta movilidad relativa, un ejemplo
es el tipo de solvente utilizado, dependiendo de la interaccin que tenga con
cada uno de los compuestos podr transportarlos con mayor o menor facilidad,
otro factor es la temperatura del solvente, pues entre mayor sea sta ms
capacidad de disolver tendr. Otro factor, es el humano en caso de que haya
una manipulacin inadecuada de las muestras.
A partir de los datos de la extraccin de solventes se determina que la
extraccin con etanol presenta un porcentaje mayor de clorofila a y clorofila
total que la realizada con acetona. Posiblemente se deba a la polaridad del
disolvente, sumado al proceso de calentamiento que se realiza con el etanol.
Por lo que se puede determinar que es ms adecuado realizar la extraccin con
etanol. Durante la prctica, se observ que los parmetros de absorcin de la
frmula de Marker no correspondan con la mxima absorbancia de las
muestras por lo que se realizaron las mediciones a longitudes de onda
diferentes. Para la clorofila tipo a se utiliz una longitud de onda de 665 nm y
para la clorofila tipo b, se us una longitud de onda de 570 nm. Comparando
estos valores con los tericos como se observa en la imagen, se detalla que a
665nm hay un mximo para la clorofila a, sin embargo a 570nm no hay
mximos. Esto se puede deber a errores con el equipo, o contaminantes en la
muestra.
Figura 1. Espectro de Absorbancia de la Clorofila A y B (Obtenida de
http://www.ledgrowlightshq.co.uk/chlorophyll-plant-pigments/)

Si se observa la proporcin de clorofila a respecto a la clorofila total, se observa


que para ambas extracciones corresponde a un 50% aproximadamente de
esta. Por lo que se puede concluir que la espinaca presenta una proporcin
homognea de clorofilas tipo A y B. Aun as, en la cromatografa no se observ
la presencia de la clorofila A (color verde azulado), pero s de carotenos en la
hoja de espinaca. Por cromatografa la movilidad de la clorofila B dio un
aproximado del 74%, comparando con la clorofila total por el mismo mtodo de
extraccin se observa que es 839,63

g
g , correspondiente a un 83%

aproximado en concentracin por gramo de hoja. Son valores relativamente


cercanos, por lo que se puede decir que la coloracin de la clorofila A no se
identific en la muestra posiblemente por un error humano, de lectura de la
tira cromatogrfica. Cabe destacar que la cantidad de clorofila en las hojas
puede cambiar como respuesta a factores de estrs, capacidad fotosinttica o
el estado de desarrollo de la planta.
Teniendo en cuenta que la frmula de Marler tiene la absobancia como trmino,
y teniendo en cuenta la ley de Lambert- beer es:

A=a .b . c
Donde A es la absorbancia de la muestra, a es la absortividad de la sustancia,
b la longitud de la cenda y c es la concentracin. Despejando la concentracin
se obtiene:

c=

A
a.b

13,14=

1
a. b

c=13,14A

Se puede inferir que el 13,14 es un factor relacionado con la absortividad de la


clorofila, la longitud de la celda y algn factor de conversin en caso de ser
necesario.
Debido a que cada sustancia o elemento qumico tiene su propia absortividad
(o absortividad molar) por ser una propiedad, la presencia de otros pigmentos
en la muestra no generar una desviacin importante ya que el
espectrofotmetro se grada a la longitud de onda de la sustancia a
determinar, en este caso de la clorofila.

CONCLUSIONES
Se obtuvieron las esencias de pino, eucalipto, rosas y naranja por medio de los
mtodos de destilacin simple (preparacin previa con alcohol etlico),
enflorado (preparado previamente), extraccin con soxhlet y arrastre por vapor
respectivamente; identificando los componentes qumicos que Se obtienen
esencias fuertes, pero no aceites esenciales en una proporcin comercial.

Mediante la cromatografa de capa fina se identific caroteno y xantofilas en


una muestra de zanahoria cuyos pigmentos se extrajeron con acetona y se
calcul la movilidad relativa para cada uno (0,8 y 0,54 respectivamente). Se
realiz el mismo procedimiento para una muestra de espinaca y se identific
clorofila b y caroteno con una movilidad relativa de 0,745 y 0,766
respectivamente.
El procedimiento de extraccin de pigmentos con el uso de solventes dio un
mejor resultado con el uso del etanol (y calentamiento) que el de la acetona, se
calcul que la proporcin de clorofila por gramo de hoja de espinaca es de
839,63

ANEXOS

g
g , con una proporcin de clorofilas a y b homognea.

Figura
2. A la
izquierda, montaje de extraccin con soxhlet, a la derecha, cantidad
de aceite esencial de pino extrado.

Figura 3. Montaje de Arrastre de Vapor.