1. Describa la reaccin de la ninhidrina con cido asprtico, lisina y
glutamina. R= Todas pruebas son positivas, porque es especfica para detectar aminocidos que contienen un grupo amino libre. Al reaccionar forman CO2, amoniaco y un aldehdo que contiene un tomo de carbono menos que el compuesto original. Reacciona con todos los aminocidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloracin que vara de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado purpura de Ruhermann) se estabiliza por resonancia, la coloracin producida por la ninhidrina es independiente de la coloracin original del aminocido.
2. Se tienen 4 frascos sin rotular que se sabe que contiene soluciones
de los siguientes aminocidos: glicina, arginina y tirosina y otros con el tripptido gli-Arg-Gli. Como los identificara. R= A cada tubo se le realiza una prueba diferente para identificar con ms facilidad cada uno.
Prueba Xantoproteca: para identificar a la tirosina, por su grupo
aromtico. Prueba de Biuret: para identificar al tripeptido, por la presencia de grupo carbamido. Prueba con ninhidrina: para identificar la glicina de todos los dems. Prueba de Sakaguchi: Es una prueba para identificar arginina y se usa para identificar protenas, ya que casi todas las protenas poseen ese aminocido. El desarrollo de un color rojo marca la reaccin positiva y se debe a la presencia del grupo guanidina, que caracteriza la arginina.
3. Enumere cuatro agentes fsicos y agentes qumicos que pueden
desnaturalizar las protenas. R= Agentes temperatura.
fsicos:
Altas
presiones,
radiacin,
sacudidas
violentas
Agentes qumicos: Sustancias con actividad detergente, disolventes orgnicos,
pH y fuerza inica. 4. Investigue como afecta la fuerza inica del medio la solubilidad de las protenas.
R= La fuerza inico, I, de una disolucin es una funcin de la concentracin de
todos los iones presentes en ella. Un aumento de ella, provoca una disminucin en el grado de hidratacin de los grupos inicos superficiales de la protena, ya que estos solutos compiten por el agua y rompen los puentes de hidrgenos o las interacciones electroestticas, de forma que las molculas proteicas se agregan y precipitan. En muchos casos, la precipitacin provocada por el aumento de la fuerza inica es reversible. Mediante una simple dilisis se puede eliminar el exceso de soluto y recuperar tanto la estructura como la funcin original. A veces es una disminucin en la fuerza inica l que provoca la precipitacin. As, las protenas que se disuelven en medios salinos pueden desnaturalizarse al dializarlos frente a agua destilada, y se re naturalizacin cuando se restaura la fuerza inica original. OBJETIVOS
Distinguir mediante pruebas cualitativas los grupos qumicos de las
distintas protenas y aminocidos facilitados en el laboratorio. Desnaturalizar protenas mediante variaciones de pH, temperatura, metales pesados por utilizacin de pruebas cualitativas. Comprender el funcionamiento de las pruebas cualitativas de reconocimiento y diferenciacin de protenas y aminocidos en el laboratorio.
CONCLUSIONES
Debido a las variaciones de naturaleza y composicin de los aminocidos
de las protenas, observamos diferentes colores y niveles de intensidad para una misma reaccin; asi iniciamos por la prueba de Biureth, positiva en ambas protenas debido a la presencia de dos grupos carbamidas (-CONH-). La desnaturalizacin de protenas consiste en la perdida de la estructura terciaria, por romperse los puentes que forman dicha estructura, pasando a ser muy abierta y tener una interaccin mxima como disolvente, por lo que pudimos ver que protenas solubles en agua como la casena y la albumina se hicieron insolubles en agua y precipita. Esta desnaturalizacin se produjo por el pH y la temperatura, y la reaccin con acetato de plomo; esta ltima se dio al neutralizar la carga de las protenas. El grupo amino libres de los aminocidos utilizados, todos con resultado positivo, en la prueba de ninhidirina, debido a la presencia de los alfaaminocidos, de los pptidos y protenas, con una coloracin azul oscuro. La reaccin xantoproteica, el triptfano y la tirosina, dando positivo debido a su anillo aromtico con la observacin de un color mbar y verde limn en el medio alcalino. La reaccin del cido gioxilico, solo reacciona el triptfano por su grupo indolico, formando un anillo amarillo.
La reaccin de la Cistena, el grupo caracterstico de la misma, el grupo
tiolico, reacciona para formar sulfuros, dando positiva y observando un precipitado negro de sulfuro de plomo.