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CONFERENCIA 3

Dra. Sonia Noem Gonzlez Bentez


Especialista de 1er Grado en Microbiologa
Master en Enfermedades Infecciosas

Unidad II. Clula bacteriana.


Sumario:- Fisiologa microbiana.
- Metabolismo(estudio independiente)
-Crecimiento. Requerimientos.
-Factores ambientales que afectan el
crecimiento.
-Nutricin. Factores nutricionales.
-Curva de crecimiento. Fases.
-Cultivo de microorganismos
-Medios de cultivo. Clasificacin.
-Mtodos de cultivo. Caractersticas
culturales macroscpicas.

Objetivos
Diferenciar los procesos metablicos que
ocurren en la clula procariota y su
aplicacin en el cultivo y aislamiento
bacteriano.
Analizar los principales factores que
influyen en el crecimiento microbiano.

Bibliografa

Brooks, G.F.(2011) Microbiologa Mdica.


Mxico, DF.: McGraw-Hill. Capitulo 5.
Cultivo de microorganismos. Pgs. 65-73

CRECIMIENTO
Es el aumento
ordenado en la
suma de todos
los componentes
qumicos de un
microorganismo

CRECIMIENTO

CICLO CELULAR

AUMENTO EN NUMERO DE INDIVIDUOS

POBLACIN MICROBIANA

Requerimientos

Materia
Orgnica

Carbono
Hidrgeno
Nitrgeno
Oxigeno
Fsforo
Azufre

Potasio
Sodio
Hierro
Magnesio
Calcio
Cloruro

Iones
Anabolismo
Catlisis

Fuente
de
Energa

Fuentes de
Carbono

Fuentes de energa
Sntesis de elementos celulares
Sntesis de enzimas , protenas
y cidos nucleicos.

Fuentes de
Nitrgeno
Fuentes de
Azufre y
Fsforo

Elementos
Trazas

Vitaminas

Elaboracin de protenas
y coenzimas
Sntesis de ATP, fosfolpidos
y cidos nucleicos

Activar ciertas enzimas( K, Zn,bMg)


Sntesis Vit B12 ( Co)
Sntesis de ciertas enzimas(Fe)

Inositol, cido flico,


Vit B12, Vit K

FACTORES AMBIENTALES
AFECTAN EL CRECIMIENTO

QUE

I-Factores fsicos:
-La temperatura
-Concentracin de iones de hidrogeno(pH)
-Aireacin
-Presin hidrosttica
-Presin osmtica
-Humedad

II-Factores nutricionales

Curva de crecimiento bacteriano

Tiempo

Fases de la curva de crecimiento

Metabolismo microbiano.
Todas las transformaciones qumicas que ocurren
en una clula, encaminadas a la formacin de
estructuras bioqumicas complejas a partir de
elementos preformados o sintetizados por la
propia clula, requiriendo una fuente de energa.
Se divide en:
Catabolismo. Reacciones de
energa.

generacin

de

Anabolismo. Reacciones de sntesis que requieren


de energa.

Enzimas en el proceso de regulacin


metablico.
Son catalizadores biolgicos de naturaleza proteca.
De accionar esencial en el metabolismo bacteriano.
Actan de manera especfica a travs de un sitio activo,
produciendo un efecto cataltico sobre las molculas del
sustrato, convirtindolas en un producto especfico.
Funcionan de manera secuencial: sistema multienzimtico.

CULTIVO
proceso de proliferacin
de microorganismos al
proporcionarles
un
entorno con condiciones
apropiadas.

MTODOS DE CULTIVO

Deben considerarse dos problemas:

-eleccin del medio de cultivo apropiado

- aislamiento de un microorganismo
bacteriano.

ELECCIN DE UN MEDIO DE
CULTIVO ADECUADO.

Elementos a considerar:

-Diagnstico clnico
-Regin anatmica a estudiar.
-Existencia de flora normal o residente.
-Microorganismos patgenos a diagnosticar.
-Tipo de muestra a tomar

Medios de cultivo
Son preparados estriles que
contienen sustancias necesarias para
el
desarrollo
de
los
microorganismos.

AISLAMIENTO
DE MICROORGANISMOS

-Sembrado o aislamiento en placa

-Diluciones seriadas en medios lquidos.

Diluciones seriadas en medios lquidos y siembra profunda.

Colonias aisladas

Caractersticas culturales macroscpicas.


Tamao
Pequeas
Medianas
Grandes

Color

Blancas
Amarillas
Grises
Rosadas
Verdes
Pigmento

Consistencia
Mucoide
Seca

Caractersticas culturales macroscpicas.


Forma

Circular
Puntiforme
Irregular
Rizoide

Bordes

Entero
Ondulado
Lobado
Filamentoso
Ondeado

Superficie

Aplanada
Elevada
Cncava
Convexa
Cupuliforme
Umbilicada

ORIENTACIONES

Estudio Independiente.
Metabolismo. Concepto. Vas biosintticas.
Vas o rutas catablicas comunes en el
metabolismo fermentativo y respiratorio.
Mecanismos de regulacin.

Prctica N 3: Preparacin de medios de


cultivo.

CONFERENCIA

Dra. Sonia Noem Gonzlez Bentez


Especialista de 1er Grado en Microbiologa
Master en Enfermedades Infecciosas

Conferencia
Unidad II. Clula bacteriana.
Tema: Fisiologa microbiana. Crecimiento,
nutricin y metabolismo microbiano. Cultivo de
microorganismos
-Factores necesarios para la nutricin .
-Factores ambientales que afectan el crecimiento.
-Metabolismo

Bibliografa
-Brooks,G.F.(2011) Microbiologa Mdica.
Mxico,DF.: McGraw-Hill. Captulos 4,5 y 6

OBJETIVOS
-Analizar los principales factores que influyen
en el crecimiento microbiano.
-Diferenciar los procesos metablicos que
ocurren en la clula procariota y su aplicacin
en el cultivo y aislamiento bacteriano.

CRECIMIENTO
Es el aumento ordenado en la suma de todos
los componentes de un microorganismo.

CICLO CELULAR

CRECIMIENTO DE UN NICO MICROORGANISMO

CICLO CELULAR
-la replicacin del material de la bacteria
-la sntesis de sus componentes celulares
-el crecimiento para alcanzar un tamao doble
del inicial y su divisin por biparticin para dar
lugar a dos clulas hijas.

CRECIMIENTO MICROBIANO
Aumento del nmero de microorganismos
a lo largo del tiempo.

Demogrfico de una poblacin bacteriana.

CURVA DE CRECIMIENTO

FASES O ETAPAS
Fase 1: etapa latente .
Adaptacin a un nuevo medio ambiente, de clulas con un arsenal
metablico empobrecido, carentes de sustratos, como resultados de
condiciones desfavorables al final del cultivo.
Existe un cese parcial de las funciones metablicas.
Formacin de enzimas y metabolitos , necesarios para la reanudacin del
crecimiento
Fase 2: etapa exponencial
Proceso de catlisis que conlleva al aumento en forma exponencial de la
masa bacteriana.
-Se agoten nutrientes.
-Se acumulen sustancias txicas.
-Se pongan de manifiesto las propiedades mas importantes de la clula.

FASES O ETAPAS
Fase 3: etapa estacionaria mxima.
-Cese completo del crecimiento por agotamiento
de nutrientes y acumulo de sustancias toxicas.
-Prdida lenta por muerte compensada debido a la formacin de clulas
nuevas mediante su divisin.
Fase 4: fase o etapa de declinacin o muerte.
-Aumento de la tasa de mortalidad hasta un nivel sostenido.
-persiste un pequeo numero de sobrevivientes, a expensas de los
nutrientes de las que mueren.
-La clula pierde toda la capacidad de para los procesos degradativos.

MEDICIN DEL CRECIMIENTO


1.Densidad de la biomasa:
a) directamente, al determinar el peso seco de
un cultivo microbiano(correlaciona al peso seco
con la turbidez)
b) indirectamente, midiendo un componente
celular importante como las protenas o el
volumen ocupado por las clulas que se han
asentado
en
una
suspensin,
por
espectrofotometra o con un nefelmetro.

MEDICIN DEL CRECIMIENTO


2-Midiendo el nmero de clulas:
a)En
cmaras
de
recuento
mediante
microscopa.
b)Mediante contadores electrnicos.
c)Por recuento en placa: diluciones de una
poblacin bacteriana son sembradas en medios
convenientes, contndose el # de colonias
crecidas
despus
de
la
incubacin,
multiplicndose las mismas por el factor de
dilucin, recuento viable

Auttrofos:nutrientes inorgnicos
FUENTES DE CARBONO
Hetertrofos: nutrientes orgnicos

FUENTES
FUENTES DE
DE NITRGENO
NITRGENO

QU NECESITA UN
MICROORGANISMO
PARA CRECER?

AZUFRE Y FSFORO

NH4+
NO3NO2-Sales
inorgnicas
de sulfato
-AA
-PO4-

ELEMENTOS TRAZAS

VITAMINAS

Vitamina B12
Vitamina K
Acido flico

NA
CL
K
Zinc
Manganeso

FACTORES AMBIENTALES
QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO
I-Factores fsicos:
-La temperatura
-Concentracion de iones de hidrogeno(pH)
-Aireacin
-Presin hidrosttica
-Presin osmtica
-Humedad
II-Factores nutricionales

TEMPERATURA
temperatura

hipertermfilos

50 a 60C

30 a 37C

15 a 20C

psicrfilos

mesfilos

termfilos

CONCENTRACIN
DE IONES HIDRGENO

AIREACIN
AEROBIOS. Microorganismos que viven en ambientes con tensiones
normales de oxgeno( 21 % de O2)
MICROAEROFLICOS. Microorganismos que se desarrollan mejor
presencia de niveles de oxgeno bajos( <21 % de O2)

en

AEROBIOS OBLIGADOS. Necesitan oxgeno como aceptor de hidrgeno.

ANAEROBIOS. No utilizan oxgeno como aceptor de hidrgeno.


ANAEROBIOS FACULTATIVOS. Tienen la capacidad de vivir de forma
aerobia o anaerobia.
ANAEROBIOS
OBLIGADOS. Requieren una sustancia diferente al
oxgeno como aceptor hidrgeno

PRESIN OSMTICA

HUMEDAD

METABOLISMO
El metabolismo se refiere a la suma de
reacciones bioqumicas requeridas para la
generacin de energa y el uso de la energa
para sintetizar material celular a partir de
molculas del medio ambiente.
El metabolismo se divide en:
Catabolismo. Reacciones de generacin de
energa.
Anabolismo. Reacciones de sntesis que
requieren de energa.

PROCESOS
CATABLICOS Y ANABLICOS

Cultivo
Proceso de propagar
los
microorganismos,
proporcionndoles
las
condiciones ambientales
adecuadas

MTODOS DE CULTIVO
Deben considerarse dos problemas:

-eleccin del medio de cultivo apropiado


- aislamiento de un microorganismo bacteriano.

ELECCIN DE UN MEDIO DE
CULTIVO ADECUADO.
Elementos a considerar:
-Diagnstico clnico
-Regin anatmica a estudiar.

-Existencia de flora normal o residente.


-Microorganismos patgenos a diagnosticar.
-Tipo de muestra a tomar

CLASIFICACIN

AISLAMIENTO
DE MICROORGANISMOS
-Sembrado o aislamiento en placa

-Diluciones seriadas en medios lquidos.

ORIENTACIONES
Practica No 3.Preparacin de medios de
cultivos.

Conferencia
Unidad IV . Bacteriologa
Sumario: Bacilos Gram positivos esporulados
(Bacillus, Clostridium) y no esporulados
(Corynebacterium)
-Caractersticas generales.
-Estructura antignica.
-Patogenia.
-Mtodos de diagnostico.
-Epidemiologia. Tratamiento.

Bibliografa
-Brooks,G.F.(2010) Microbiologa Mdica. Mxico,DF.:
McGraw-Hill. Capitulo 11. Bacilos grampositivos
formadores de esporas: especies de Bacillus y
Clostridium y 12. Bacilos grampositivos aerobios no
esporulantes

Objetivos
Conocer
caractersticas
generales,
patogenicidad, cuadro clnico, diagnstico y
tratamiento de bacilos Gram positivos
esporulados y no esporulados aerobios y
anaerobios

Microorganismos G (+)
formadores de esporas
1-Bacillus
2-Clostridium.

Gnero Bacillus
Microorganismos G (+) esporulados
aerobios

Especies:

-B. anthracis
-Bacillus cereus
-Bacillus subtilis

Caractersticas Generales
Genero Bacillus
-Bacterias en forma de bacilos grandes
-Gram positivos
-Crecimiento en forma de cadenas
-Aerobios
-Inmviles
-Esporulados (con espora de localizacin central)
-Se destruyen por ebullicin durante 10 minutos y en calor
seco a 140 C durante 3 horas
-Son resistentes a los cambios ambientales
-Soportan el calor seco
-Soportan la accin de desinfectantes qumicos
-Persisten durante varios aos en la tierra seca.

BACILLUS ANTHRACIS
1-Antigenos somticos:
-polisacrido de la pared celular
-polisacrido capsular
La
capsula
ejerce
un
efecto
antifagocitico
y
protege
al
microorganismo de la lisis mediada por
anticuerpos

BACILLUS ANTHRACIS
2-Toxina, consta de tres protenas:
-antgeno protector (PA)
-factor de edema (EF)
-factor mortal (LF)
El LF con el PA forman la toxina mortal, que
constituye el principal factor de virulencia y
provoca la muerte de los animales y seres
humanos infectados.

Patologa
ntrax o carbunco es una patologa bsicamente
de animales herbvoros:
Cabras
Ovejas
Caballos
Ganado vacuno

El ser humano se infecta al tener contacto con los


animales o sus productos infectados

Patologa
En las personas la infeccin casi siempre se
adquiere cuando las esporas penetran:
-a travs de la piel lesionada (carbunco
cutneo)
-por inhalacin de las esporas (carbunco
pulmonar)
-por las mucosas (carbunco digestivo)

Patologa
Las esporas germinan en el tejido en el sitio de
entrada
y
la
proliferacin
de
los
microorganismos vegetativos tiene como
resultado la formacin de un edema gelatinoso
y congestin.

Los bacilos se extienden a travs de los vasos


linfticos hasta la circulacin sangunea y se
multiplican libremente en la sangre y los tejidos

Cuadro clnico
Formas clnicas de presentacin

Carbunco cutneo: 95% de los casos


Carbunco respiratorio:5%
Carbunco digestivo: raro; slo se ha descrito en
frica, Asia y Estados Unidos cuando las
personas han consumido carne de animales
infectados

Cuadro clinico
Carbunco cutneo: por lo general aparece en
superficies expuestas de los brazos o manos,
seguidos por orden de frecuencia por la cara y
el cuello.
Entre 1 y 7 das despus de la penetracin de
los microorganismos o esporas a travs de un
rasguo, aparece una ppula pruriginosa. Al
principio es similar a la mordedura de un
insecto. Sin embargo, la ppula se transforma
rpidamente en vescula o un anillo pequeo de
vesculas que se unen formando una lcera

Cuadro clnico
Las lesiones miden entre 1 y 3 cm de dimetro
y poseen una escara negra central
caracterstica.
Se acompaan de edema pronunciado. Algunas
veces tambin existe linfangitis y linfadenopata
y signos y sntomas generales como:
fiebre
malestar general
cefalea.

Cuadro clnico
Despus de siete a 10 das, la escara alcanza
su mximo desarrollo.
Finalmente se seca, se debilita y se desprende.
La cicatrizacin se lleva a cabo por granulacin
y deja una cicatriz.
Algunas veces la lesin tarda varias semanas
en cicatrizar y el edema en desaparecer.

Cuadro clnico
Complicaciones:

Hasta en 20% de los pacientes el carbunco


cutneo genera
-septicemia
-meningitis
- muerte.

Cuadro clnico
Carbunco respiratorio: periodo de incubacin de
hasta de seis semanas.
Las primeras manifestaciones clnicas son las
de necrosis hemorrgica pronunciada y edema
mediastnico.
En algunos pacientes el dolor retroesternal es
intenso y en la radiografa de trax se observa
ensanchamiento pronunciado del mediastino.

Cuadro clnico
Una vez que se extiende a la pleura, aparecen
derrames pleurales hemorrgicos; la tos es
secundaria a sus efectos sobre la trquea.

El siguiente paso es la sepsis y el


microorganismo
se
disemina
por
va
hematgena hacia el aparato digestivo
provocando lceras intestinales o hacia las
meninges causando

Cuadro clnico
Una vez que se extiende a la pleura, aparecen
derrames pleurales hemorrgicos
Tos, secundaria a los efectos sobre la trquea.
Sepsis, el microorganismo se disemina por va
hematgena hacia el aparato digestivo
provocando lceras intestinales o hacia las
meninges causando meningitis hemorrgica.
Tasa de mortalidad mas alta.

Cuadro clnico
Carbunco digestivo: se caracteriza por
-dolor abdominal
-vmito
-diarrea hemorrgica.

DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
1-Muestras:
Liquido de lesiones locales(ppulas o vesculas)
-Pus
-Sangre
-Esputo

2-Examen directo: cadenas de grandes bacilos G(+) con


espora central.

DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
3-Cultivo:

-Medios de enriquecimiento, con suero y


bicarbonato.
-Agar sangre, colonias no hemolticas de color
gris o blanco con una textura rugosa y aspecto
de vidrio esmerilado. Producen prolongaciones
con forma de coma (cabeza de medusa) en la
colonia.

DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
-B. anthracis (inmvil)
-Bacillus cereus (mvil)
-Bacillus subtilis (mvil)

4- Identificacin: Sistema comercial API, incluye


diferenciacin de cepas virulentas o no.
Precauciones de bioseguridad.

Diagnstico serolgico
Inmunofluorescencia
para
diferenciar
especies

-B. anthracis
-Bacillus cereus

En muestras de suero de
enfermos y convalescientes

Hemaglutinacin indirecta en gel


Fijacin del complemento

Epidemiologa
La tierra se contamina con esporas de
carbunco provenientes de los cuerpos de
animales muertos.
Permanecen viables durante varias dcadas.
Germinan en la tierra a un pH de 6.5 cuando la
temperatura es adecuada.

Epidemiologa
-Los animales que pastan y que se infectan a
travs de las mucosas lesionadas sirven para
perpetuar la cadena de la infeccin.
-El contacto con los animales infectados o con
su piel, pelo y cerdas, constituye el origen de la
infeccin en el ser humano.

Medidas de control
1) eliminacin de los cadveres de animales
por cremacin o enterrarlos en pozos de cal
profundos.
2) descontaminacin (casi siempre por medio
de autoclave) de los productos animales.
3) uso de ropa protectora y guantes al
manipular
materiales
potencialmente
infectados.
4) inmunizacin de animales domsticos con
vacunas de bacilos vivos atenuados. Las
personas con un riesgo laboral elevado deben

Tratamiento
-Ciprofloxacina
-Caso de contacto potencial con B. anthracis
como arma biolgica: profilaxis con ciprofloxacina
o doxiciclina se prolonga durante cuatro semanas
mientras se administran tres dosis de vacunas, o
durante ocho semanas si no se administra
vacuna.

Bacillus cereus
Produce intoxicacin alimentaria con 2 formas
de presentacin:
-la variedad emtica, desencadenada por
ingerir arroz frito.
Empieza entre 1 y 5 h despus de ingerir arroz
y algunas veces platillos a base de pasta.
Se caracteriza por nusea, vmito, clicos
abdominales y en ocasiones diarrea y remite
espontneamente con una recuperacin dentro
de las primeras 24 h.

Bacillus cereus
-la variedad diarreica, por ingerir platillos con
carne y salsas.
El periodo de incubacin de la variedad
diarreica es de 1 a 24 h y se manifiesta por
diarrea abundante con dolor y clicos
abdominales; rara vez se acompaa de fiebre y
vmito.
La enterotoxina viene preformada en el
alimento o bien se produce en el intestino.

Otras enfermedades
I-Infecciones oculares
2-Endocarditis
3-Meningitis
4-Osteomielitis
5-Neumona

Tratamiento
-Infecciones
transmitidas
por
alimentos:
doxiciclina, eritromicina o ciprofloxacina.

-Infecciones graves que no se transmiten por


los alimentos: vancomicina o clindamicina con o
sin algn aminoglucsido.

Seminario
Genero Clostridium:
-Clostridium botulinum
-Clostridium tetani
-Clostridium perfringes
-Clostridium difficile
.Diferenciar segn localizacin de esporas.

Capitulo 11.Bibliografia bsica

Bacilos Gram positivos


no esporulados aerobios
CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE

Coryne: palo o garrote


Dipthera: piel o membrana

Caractersticas generales
-Bacilos G(+)
-Forma en palillo de tambor", dentro del bacilo (a
menudo cerca de los polos) se encuentran
dilataciones irregulares, les dan apariencia de
maza.

-Poseen grnulos que se tien profundamente con


colorantes de anilina (grnulos metacromticos)

Caractersticas generales
-Bacilo individuales: apariencia de letra china

-Aerobio obligado
-Producen acido , pero no gas de glucosa y
maltosa

Estructura antignica
Cepas de C. diphtheriae toxignico: elaboran
exotoxina (las que portan el profago beta)
Su produccin in vitro depende de:
-concentracin de hierro.
-presin osmtica
-concentracin de aminocidos
-pH
-disponibilidad de fuentes adecuadas
carbono y nitrgeno.

de

Estructura antignica
Toxina de C. diphteriae:
Acta causando dao celular por interferencia con
la sntesis proteica .
La toxina de la difteria se absorbe hacia las mucosas y
produce destruccin del epitelio y una respuesta inflamatoria
superficial.

Patologa
El epitelio necrtico queda embebido en la
fibrina exudativa y los eritrocitos y leucocitos,
de manera que se forma una seudomembrana
griscea, por lo general sobre amgdalas,
faringe o laringe.

Cualquier
tentativa
de
eliminar
seudomembrana expone y desgarra
capilares y por tanto produce hemorragia.

la
los

Patologa
sta se absorbe y da lugar a una lesin txica a
distancia,
sobre
todo
degeneracin
parenquimatosa, infiltracin adiposa y necrosis
de msculo cardiaco, hgado, riones y
suprarrenales, que a veces se acompaa de
hemorragia abundante.
La toxina tambin produce lesin nerviosa, lo
que a menudo resulta en parlisis del paladar
blando, los msculos oculares o las
extremidades.

Cuadro clnico
Difteria

-respiratoria
-cutnea (se presenta en el trpico, las formas
no toxgenas no invaden tejidos profundos ni la
sangre)

Cuadro clnico
1-Faringitis:fiebre
-postracin
-disnea
-asfixia
-trastornos del ritmo cardiaco
-dificultades visuales
-de lenguaje
-de la deglucin
-del movimiento de los brazos o las
piernas.

Complicaciones
En pacientes inmunodeprimidos:

-neumona
-endocarditis
-infecciones seas

Diagnostico
1-Muestras:
-Hisopados nasales
- Hisopados farngeos
-de otras lesiones sospechosas (por debajo de
cualquier membrana visible).

Diagnstico
2- Examen directo:

Gram: Bacilos con aspecto de rosario


dispuestos en forma de letras chinas
Azul de metileno: grnulos metacromticos.

Diagnstico
Cultivo:
-placa de agar sangre(descartar estreptococo B
hemoltico)

-cultivo inclinado de Loeffler(selectivo, impide el


crecimiento de la flora farngea)
-placa de agar cistina-telurito o medio de Tinsdale
modificado) e incubado a una temperatura de 37C.

Diagnstico
En un trmino de 12 a 18 h, el cultivo inclinado
de Loeffler puede producir microorganismos de
morfologa difteroide caracterstica (colonias
pequeas , granulares , grisceas, con bordes
irregulares)

Diagnstico
-En agar sangre las colonias de C. diphtheriae
son pequeas, granulosas y grises, con bordes
irregulares y pueden tener pequeas zonas de
hemlisis.
-En telurito de potasio que contiene agar las
colonias son de color pardo a negro con un halo
negro pardusco debido a que el telurito se
reduce dentro de la clula (puede aadirse a
agar sangre o chocolate)

Diagnostico
Pruebas de toxigenicidad:
-Prueba in vivo (administracin del microorganismo
a animales de experimentacin)

-Prueba in vitro (placa de EleK)


-Prueba en cultivo de tejido. (Se incorporan
bacterias, sobre una capa de clulas cultivadas. La
toxina difunde dentro de las mismas y las destruye)

Epidemiologa
-Aislar a los pacientes enfermos.
-Inmunizacin en la infancia y refuerzos segn
esquema de vacunacin.

Tratamiento
-Penicilina, eritromicina: inhiben el crecimiento
de los bacilos de la difteria.
Inhiben el crecimiento del bacilo, detienen la
produccin de toxina.
Tambin ayudan a eliminar estreptococos y C.
diphtheriae
concomitantes
del
sistema
respiratorio de pacientes o portadores.
-Administracin de antitoxina.

Tratamiento
-Inmunizacin: vacuna DPT

CONFERENCIA

Dra. Sonia Noem Gonzlez Bentez


Especialista de 1er Grado en Microbiologa
Master en Enfermedades Infecciosas

Unidad II. Clula bacteriana.


Sumario: -Quimioterapia .Conceptos
-Toxicidad selectiva
-Mecanismos de accin de los
antimicrobianos.
-Resistencia microbiana.
-Mtodos para medir la actividad
antimicrobiana in vitro.

Objetivos

Destacar las bases de la quimioterapia y su


aplicacin en la terapia anti infecciosa, los
mecanismos
de
accin
de
los
antimicrobianos as como el origen de la
resistencia antimicrobiana

Bibliografa

Brooks, G.F.(2011) Microbiologa Mdica.


Mxico, DF.: McGraw-Hill. Capitulo
28.Quimioterapia antimicrobiana. Pgs.
339-372.

Desarrollo de la Quimioterapia
Paul Ehrlich
conductor de los experimentos con los arsenicales para el tratamiento
de la sfilis.
los principios de la toxicidad selectiva
reconocimiento de las relaciones qumicas especficas entre los
parsitos y las drogas.
la funcin de la terapia combinada

Alexander Fleming
Descubrimiento de la penicilina

Gerhard Domagk
Sntesis de las sulfonamidas

Antibitico: Medicamento que se


obtiene de microorganismos.

Quimioterpico: Medicamento
obtenido por sntesis qumica.
Antimicrobiano: Medicamentos
de origen natural, semisinttico
o sinttico , tiles en el
tratamiento de enfermedades
infecciosas.

Toxicidad Selectiva
Ser nocivo para el microorganismo patgeno
sin daar al hospedador.
Es una funcin de un receptor especfico
necesario para la fijacin del frmaco o bien
depende de la inhibicin de algn
acontecimiento bioqumico indispensable para
el microorganismo patgeno pero no para el
hospedador.

CLASIFICACIN

Biolgico
Sinttico
Semisinttico

Origen
Espectro de
accin

Actividad sobre los


microorganismos
Mecanismos de
Accin

Estructura
qumica

Bajo espectro
Amplio espectro
Bacteriostticos
Bactericidas.
Bactericidas:
Inhibicin
de
sntesis de pared,
membrana celular,
protenas, cidos
nuclecos.
Beta- lactmicos
Macrlidos
Glicopptidos
Tetraciclinas.
Aminoglucsidos
Quinolonas
Sulfamidas y otros

Mecanismos de accin de antimicrobianos


1. Inhibicin de la sntesis de la pared celular.
2. Inhibicin de la funcin de la membrana celular.
3. Inhibicin de la sntesis de protenas (es decir,
inhibicin de la traduccin y transcripcin de
material gentico.

4. Inhibicin de la sntesis de cidos nucleicos.

RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS


1.-Los microorganismos producen enzimas
que destruyen al frmaco activo.
Ej: -Los estafilococos resistentes a la penicilina
G produce lactamasa que destruye al
frmaco.
-Los bacilos gramnegativos producen
otras lactamasas .
-Las bacterias gramnegativas que son
resistentes a los aminoglucsidos (gracias a
un plsmido) producen enzimas adeniladoras,
fosforiladoras o acetiladoras que destruyen al
frmaco.

RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS


2) Los microorganismos cambian su
permeabilidad al frmaco.
Ej: -Las tetraciclinas se acumulan en las
bacterias sensibles pero no en las
resistentes.
-Las polimixinas: resistencia vinculada
con un cambio en la permeabilidad a
los frmacos.

-Los estreptococos poseen una barrera


natural de permeabilidad contra los
aminoglucsidos.
-Amikacina y otros aminoglucsidos:
depende de la falta de permeabilidad a los
medicamentos, por un cambio de la
membrana externa que daa el transporte
activo hacia el interior de la clula.

RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS


3) Los microorganismos forman un sitio de
accin estructural modificado para el frmaco.
Ej: Los microorganismos resistentes a la
eritromicina tienen un receptor modificado en
la subunidad 50S del ribosoma, que es
resultado de la metilacin de un RNA
ribosmico.
La resistencia a ciertas penicilinas y
cefalosporinas puede ser funcin de la prdida
o alteracin de las PBP.
La resistencia a la penicilina en los
Streptococcus penumoniae y enterococos es
secundaria a PBP alterada.

RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS


4) Los microorganismos forman una va
metablica modificada que desva la reaccin
que es inhibida por el frmaco.

Ej: algunas bacterias resistentes a las


sulfonamidas no necesitan PABA extracelular
pero, al igual que los mamferos, pueden
utilizar cido flico preformado

RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS


5- Los microorganismos producen
una
enzima modificada que an puede llevar a
cabo su funcin metablica pero resulta
mucho menos alterada por el frmaco.

Ej: En las bacterias resistentes al


trimetoprim, la reductasa de cido
dihidroflico se inhibe con mucha menos
eficacia que en las bacterias sensibles al
trimetoprim.

ORIGEN NO GENTICO
ORIGEN DE LA
RESISTENCIA
DE LAS
BACTERIAS A
LOS
ANTIBITICOS
ORIGEN GENTICO

ORIGEN NO GENTICO

1-Resistencia fenotpica.
2-Prdida de su sitio de accin especfico para
un frmaco durante varias generaciones.
3-Localizacion en el hospedero en sitios donde
los antimicrobianos no penetran o no son
activos.

ORIGEN GENTICO

Resistencia
cromosmica

Resistencia
extracromosmica

Cuando en un locus que


controla la susceptibilidad a un
antimicrobiano se desarrolla una
mutacin espontnea.

1.Transduccin
2. Transformacin
3. Conjugacin
4. Transposicin

Actividad antimicrobiana in vitro


1)La potencia
solucin.

de

un

antimicrobiano

en

2)Su concentracin en los lquidos corporales y


tejidos.
3)La
sensibilidad
de
determinado
microorganismo a una concentracin conocida
del frmaco.

FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD


ANTIMICROBIANA IN VITRO

pH ambiental
Componentes del medio
Tamao del inculo
Estabilidad del frmaco
Intervalo de incubacin
Actividad metablica de los microorganismos

MEDICIN DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

Antibiograma
Determinacin de la susceptibilidad de
los microorganismos a una variedad de
agentes
antimicrobianos
,
bajo
condiciones de laboratorio especficas y
estandarizadas.

Mtodos para medir la actividad antimicrobiana in vitro

1.Mtodos cualitativos:
-por difusin.

2. Mtodos cuantitativos:
-dilucin en caldo.
-dilucin de Agar.
-E-test.
-Concentracin o Break points.

Difusin en agar
Mtodo tambin
llamado difusin
por disco o
Kirby-Bauer

Difusin en agar

El microorganismo es inoculado en la
superficie de una placa de agar, sobre el cual
se colocan discos impregnados con una
concentracin conocida del antibitico.Las
placas se incuban por 16-18 horas a 37 C.
Durante la incubacin, el antibitico difunde
radialmente desde el disco a travs del agar,
por lo que su concentracin va
disminuyendo a medida que se aleja del
disco.

Ventajas
-Es el mtodo mas usado.
-Es practico y sencillo de
implementar y realizar
-Es un mtodo estandarizado.
-Permite analizar un gran numero
de antibiticos.

Dilucin en caldo

Emplea tubos (macrodilucin)


o microplacas (microdilucin)
que
contienen
concentraciones crecientes de
un determinado antibitico.
El organismo en estudio es
inoculado en los diferentes
tubos o pocillos de la
microplaca y la CIM es
determinada despus de la
incubacin, de la misma forma
descrita anteriormente para el
mtodo de la dilucin en agar.

Lectura e interpretacin

E-test

Utiliza una tira de plstico que contiene


concentraciones
crecientes
de
un
determinado antibitico que van desde
0,016 ug/ml hasta 256 ug/ml/.
Esta tira se pone sobre una placa de agar
que ha sido inoculada con el organismo en
estudio.
Despus de incubar la placa por 16 a 18
horas, se forma un rea de inhibicin de
forma elptica, en la cual la concentracin
inhibitoria mnima puede ser leda
directamente

Ventajas
-Mtodo de eleccin para
hacer
estudios
de
susceptibilidad en grmenes
problemticos
o
con
requerimientos especiales,
Ej: Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes.
Haemophilus influenzae
Grmenes anaerbicos.

Mtodos Semiautomatizados y Automatizados

Estudio independiente para examen.


Revisar los mecanismos de accin
Indicaciones especificas para el
combinado de antibiticos.

uso