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INGENIERA BIOQUMICA 6 B

CINETICA
PRACTICA 7. Crecimiento microbiano
DOCENTE: ING.Q Montado salinas Daniel
Equipo 3
CANELA CRUZ AMELLALY ZAMARA
MANZANO RODRIGUEZ ALEXIS
MARTINEZ AQUINO ALEJANDRA
MUOZ ANTONIO LILIANA

ndice

ndice1
Objetivo2
Introduccin...2
Material y equipos.3
Procedimiento3
Observaciones4
Cuestionario5
Conclusin..6
Bibliografa..7

Prctica No.6
Crecimiento microbiano.

1. Objetivo.
Determinar el crecimiento microbiano mediante conteo de clulas
obtener la curva de crecimiento

para

2. Introduccin
Entendemos por crecimiento microbiano el aumento del nmero de
microorganismos a lo largo del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento
de un nico microorganismo (ciclo celular), sino al demogrfico. El crecimiento de
una poblacin es el aumento del nmero de clulas como consecuencia de un
crecimiento individual y posterior divisin

CICLO CELULAR
Las clulas aisladas cultivadas en un volumen finito de medio de cultivo apropiado
van utilizando los nutrientes que tienen disponibles, sintetizando sus propios comp
onentes celulares y dividindose en cuanto duplican su masa y su material
gentico. El tiempo que tarda una clula en cumplir ese proceso se denomina
tiempo de generacin () y puede variar desde unos 20 minutos en condiciones
ptimas hasta varios meses en condiciones ambientales. Cada vez que transcu

rre un tiempo de generacin, el nmero de clulas se duplica, siguiendo, por tanto,


un incremento exponencial.

3. Material, Equipos y Reactivos.

Materiales
Equipos
Asa de siembra

Porta objetos

Pizeta con agua


destilada
Parrilla
Lmpara de alcohol
Cubre objetos

Microscopio
Contador
colonias

Reactivos
.
Azul
de
metileno
de
Aceite de
inmersin

4. Procedimiento.
I.

Conteo directo de bacterias al microscopio Mtodo de Breed (conteo


que incluye clulas vivas y muertas):

En un portaobjetos limpio y desengrasado, marque un rea de 2 cm2


cuadrados. Invierta la laminilla.
Deposite 0.01 ml de un cultivo y extindalos en el rea marcada del
portaobjetos y deje secar a temperatura ambiente.
Fije con calor y tia con azul de metileno de Leffler.
Lave con agua de la llave. Deje secar a temperatura ambiente.
Coloque el objetivo micromtrico en la platina del microscopio y observe a
100 X.
Mida el dimetro del campo microscpico.
Cada divisin de la escala del objetivo micromtrico mide 10 mm, es decir
0.01 mm = 0.001 cm. 8. Determine la superficie del campo microscpico
con la siguiente frmula: r2 en cm X 3. 1416 = Superficie de campo
microscpico en cm
Determine el nmero de campos microscpicos que existen en la
preparacin con la frmula: Superficie de la preparacin = nmero de
campos microscpicos Superficie del campo microscpico 10. Coloque en
la platina del microscopio la preparacin teida de las bacterias y cuente las
bacterias en 10 campos. Obtenga el valor medio de organismos por campo
microscpico.
11. Calcule el nmero de bacterias que hay en la preparacin (0.01 ml) y en
1 ml del cultivo, con la frmula: # de bacterias x # de campos = # de
bacterias x 100 = # bacterias/ml por campo microscpicos en la preparacin
de cultivo.

5. Observaciones

1.- De tom una muestra de nuestra caja Petri que


ya tena crecimiento de bacterias en ella.

2.- Despus continuamos con tomar una muestra


de y hacer un barrido de 2x2.

3.- Se tio con azul de metileno y se prosigui a observar el nmero de bacterias


que haba en ella.

4.- por ltimo se cont el nmero de bacterias y se anotaron los resultados para
despus graficarlos.

6. Resultados
tiempo
0
20
40
60

hora
03:00
03:20
03:40
04:00

37 C

#
de
colonias
16
46
284
461
3E+09
2.5E+09

Chart Title

2E+09
1.5E+09
1E+09
5000 00
000

# de colonias

7. CONCLUSION

El crecimiento microbiano es de gran importancia no solo para entender el


comportamiento de dicho microorganismo si no tambin puede utilizarse en la
biotecnologa.
Un dato muy importante es que se debe tomar la muestra cuando se va a observar
el crecimiento bacteriano es usar un cultivo fresco, con cepas recin activadas.
En nuestros datos se puede observar que conforme pasa el tiempo hay una gran
proliferacin de ellas y se pueden observar ms al microscopio, si se llegara a dar
unos resultados conforme pasaran las 24 horas estas bacterias empezaran a
morir y nuestra curva disminuira hasta quedar en un punto muerto.

8. Referencias bibliogrficas.
Produccin biolgica de hidrgeno: una aproximacin al estado del arte - Bedoya Andrea,
Castrilln Juan, Ramrez Juan, Vsquez Juan, Zabala Mario - Dyna, Ao 75, Nro. 154, pp.
137-157. Medelln, Marzo de 2008. ISSN 0012-7353
Role of different Escherichia coli hydrogenases in H+ efflux and F1Fo-ATPase activity during
glycerol fermentation at different pH values - Blbulyan Syuzanna, Avagyan Arev, Poladyan
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10.1042/BSR20100053 Volume 31 (3) / Pages 179185
Journal of bacteriology/American Society for Microbiology - A.P. Singh, P.D. Bragg - Printed in
U.S.A. July 1974, p. 129 - 137 Vol. 119, No. 1
Production of biohydrogen by recombinant expression of [NiFe]-hydrogenase 1 in Escherichia
coli - Jaoon YH Kim, Byung Hoon Jo, Hyung Joon Cha - Kim et al. Microbial Cell Factories
2010, 9:54 - http://www.microbialcellfactories.com/content/9/1/54
Biologa de los microorganismos Michael T. Madigan, John Martinko, Jack Parker Editorial
Pearson