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Introduccin

A travs de las distintas rutas catablicas analizadas hasta este punto,


se ha ido produciendo una liberacin de energa neta, en forma de ATP,
y un segundo tipo de energa denominado poder reductor, en forma de
coenzimas reducidas. Los principales coenzimas, que han participado en
reacciones de xido-reduccin tanto en el citoplasma como en la
mitocondria, son NADH y FADH2; los cuales iniciarn ahora, una ruta
metablica, la cadena de transporte electrnico o cadena respiratoria,
que permitir, por un lado, la recuperacin de los coenzimas en su forma
oxidada, y por otro, que los electrones sean conducidos a travs de una
serie de etapas sucesivas hasta el O2, para formar agua. En este
proceso de transferencia electrnica es donde se producir un fuerte
desprendimiento energtico aprovechado para la formacin de enlaces
de alta energa en forma de ATP. La fosforilacin oxidativa se define
como la formacin de ATP generada por la transferencia de electrones.
Todas las rutas catablicas, en los organismos aerobios, convergen para
permitir el flujo de electrones hasta el oxgeno, produciendo energa
para la generacin de ATP constitu- yendo la etapa final del catabolismo
de todas las biomolculas.

FOSFORILACION OXIDATIVA
La fosforilacin oxidativa se define como la formacin de ATP generada
por la transferencia de electrones. Todas las rutas catablicas, en los
organismos aerobios, convergen para permitir el flujo de electrones
hasta el oxgeno, produciendo energa para la generacin de ATP
constituyendo la etapa final del catabolismo de todas las biomolculas.
La energa libre disponible como consecuencia de la transferencia de 2
electrones desde el NADH y el succinato al oxigeno molecular es de 57
a 36 kcal/mol, respectivamente. La fosforilacin oxidativa atrapa la
energa en la forma de ATP de alta energa. Para que la fosforilacin
oxidativa contine, se deben reunir dos condiciones principales.
Primero, la membrana mitocondrial interna debe estar fsicamente
intacta de tal manera que los protones solamente puedan re-ingresar a
la mitocondria por el proceso que esta acoplado a la sntesis de ATP. En
segundo lugar, un gradiente de protones debe ser desarrollado a travs
de la membrana mitocondrial interna.
La energa del gradiente de protones se conoce con el nombre de
potencial quimio osmtico, o fuerza motil de protones (PMF). Este
potencial es la suma de las diferencias de concentracin de protones a
travs de la membrana y de la diferencia en la carga elctrica a travs
de la membrana. Los dos electrones del NADH generan un gradiente de
6 protones. As, la oxidacin de un mol de NADH lleva a una
disponibilidad de PMF con una energa libre de aproximadamente 31,2
kcal (6 x 5,2 kcal). La energa del gradiente se utiliza para la sntesis
de ATP cuando los protones se transportan siguiendo su gradiente
termodinmico dentro de la mitocondria.
Los protones regresan a la matriz mitocondrial a travs de la protena
de membrana denominada ATP sintasa (o complejo V). La sintasa de
ATP es complejo proteico compuesto de mltiples subunidades que se
une al ADP y al fosfato inorgnico en su sitio cataltico, y que requiere
un gradiente de protones para su actividad. La ATP sintasa est
compuesta de 3 fragmentos: F0, que se localiza en la membrana; F1,
que protruye desde la membrana mitocondrial interna hacia la matriz
mitocondrial; y la protena que le confiere sensibilidad a la oligomicina
(OCSP), que conecta los fragmentos F 0 y F1. Cuando la membrana
mitocondrial est daada, es permeable a los protones, la reaccin de
la ATP sintasa es activa pero en la direccin reversa y acta como una
hidrolasa de ATP o ATPasa.

Transportadores de electrones en la mitocondria:


1. Donadores de electrones a la cadena de transporte, actuando como:
NADH y NADH (este ltimo mucho menos frecuente).
2. Nucletidos de flavina, FAD y FMN (junto con sus formas reducidas
FMNH2 y FADH2), como componentes del centro activo de diferentes
protenas, tanto monomericas como formando parte de complejos
supramoleculares. El potencial redox depende de la protena en la
que se encuentre la coenzima.
3. Coenzima Q u Ubiquinona. Otras molculas anlogas son la
Plastoquinona y la Menaquinona. Son transportadores liposolubles
que se mueven dentro de la membrana, actuando, generalmente al
igual que el NADH, como sustrato:

4. Hierro. La reaccin redox es la siguiente: Fe2+ eEl tomo de hierro no se va a encontrar nunca libre, sino formado
parte de protenas de dos tipos completamente distintos:
1) Citocromos en los que el hierro se encuentra unido a un grupo
hemo.
2) Ferrosulfoproteinas, en las que el hierro se encuentra formando
los denominados centro ferrosulfurados o hierro-azufre.

En ambos casos la reaccin es siempre la misma: se transfiere


exclusivamente un electrn.
Los citocromos son hemoprotenas que se distinguen por sus
espectros de absorcin. En la cadena respiratoria hay citocromos b
(3diferentes: b560, b562 y b566), c, c1, a y a3. b, c y c1 contienen el
mismo hemo que la hemoglobina y mioglobina (porfirina IX +

hierro), unido covalentemente a la protena en el caso de c y c 1. a y


a3 contiene hemo A.
Los grupos hemo son transportadores de un nico electrn. Su
potencial redox depende del tipo de grupo hemo del cual se trate. V
de la protena a la cual se encuentra unido.
El segundo tipo de transportadores en los que se encuentra el hierro
son las protenas con centros hierro azufre. En estas, uno, dos o
cuatro tomos de hierro se encuentran unidos a la protena a travs
de enlaces de coordinacin con tomos de azufre de Cys (o, las
ferrusulproteinas de Rieske, nitrodenos de His). Pueden encontrarse
tambin tomos de azufre inorgnico, en forma de Sulfuro S. Hay
varios tipos de estos centros, que se diferencian en el nmero de
tomos de hierro y azufre inorgnico que las forman. Los ms
importantes son los Fe2-S2, pero hay tambin Fe-S y Fe4-S4.

El potencial redox de estos centros es variable, en funcin del


entorno concreto en el cual se encuentren. Independientemente del
nmero de tomos de hierro que se encuentren presentes, estos
centros son transportadores de un nico electrn. Pueden
encontrarse en protenas independientes (por ejemplo, la
ferredoxina), o unidos a polipeptidos que a su vez forman complejos
macromoleculares de gran tamao, como los centros I, II y III de la
cadena de transporte electrnico mitocondrial.

Desacopladores e inhibidores.
El uso de inhibidores de la cadena ha permitido trazar el paso de los
electrones a travs de la cadena y determinar el punto de entrada de
diversos sustratos. La velocidad a la cual el oxgeno es consumido por
una suspensin de mitocondrias es una medida del funcionamiento de la

cadena de transporte de electrones. La velocidad puede ser medida


mediante un electrodo de oxgeno.
Gran parte del conocimiento de la funcin mitocondrial ha resultado de
estudios con compuestos txicos. Inhibidores especficos se han usado
para distinguir el sistema de transporte de electrones del sistema de
fosforilacin oxidativa, y ha ayudado a definir la secuencia de los
transportadores redox en la cadena. Si la cadena se bloquea en un
punto, todos los transportadores anteriores quedan ms reducidos, y los
posteriores ms oxidados.
Hay seis tipos de venenos que afectan la funcin mitocondrial:
1. Inhibidores de la cadena que bloquean la cadena
respiratoria.
La rotenona, toxina de una planta, utilizada por indios amaznicos
como veneno, tambin ha sido usada como insecticida.

Acta a inhibiendo el complejo I. Inhibe la reoxidacin del NADH, no


afecta la del FADH2. Inhibe la oxidacin del malato, que es
dependiente del NAD+, no as la del succinato. El succinato entra en
el segundo punto de entrada a la cadena, posterior al del NAD+.
El amital (barbitrico) inhibe al complejo I, afecta las oxidaciones
dependientes del NAD+.
La antimicina A (Antibitico): Acta a inhibiendo el complejo III.
Inhibe la reoxidacin del NADH y del FADH2.
El cianuro bloquea el paso de electrones del citocromo a3 al oxgeno.
Estos inhibidores detienen el paso de electrones de modo que no

hay bombeo de protones. Sin gradiente de protones, no hay sntesis


de ATP.
2. Inhibidores de la fosforilacin oxidativa, venenos que inhiben
la ATP-sintasa.
La oligomicina, un antibitico producido por Streptomyces, inhibe a
la ATPasa al unirse a la subunidad Fo e interferir en el transporte de
H+ a travs de Fo, inhibe por lo tanto la sntesis de ATP.
Diciclohexilcarbodiimida (DCCD), un reactivo soluble en lpidos,
tambin inhibe el transporte de protones por Fo al reaccionar con un
residuo de glutmico en una de las subunidades de Fo de mamferos.
En estas condiciones el gradiente de protones que se produce es
mayor que lo normal, sin embargo la energa potencial de ste no
puede ser utilizada para producir ATP.
3. Venenos que hacen permeable la membrana mitocondrial
interna a los protones. Estos agentes eliminan la relacin obligada
entre la cadena respiratoria y la fosforilacin oxidativa que se
observa en mitocondria intacto.
Estos venenos, como el 2,4 dinitrofenol (DNP), el carbonilcianuro-ptrifluorometoxi-hidrazona (FCCP) y el carbonilcianuro-mclorofenilhidrazona (CCCP)
desacoplan
la fosforilacin oxidativa de la
cadena
respiratoria, se conocen
como agent
es desacopladores.

Son compuestos liposolubles y cidos dbiles. Las formas disociadas


presentan carga negativa altamente deslocalizada, de modo que el
campo elctrico de los aniones es muy dbil, ello permite que
difundan libremente a travs de un medio no polar como las

membranas fosfolipdicas. Este comportamiento no es usual, la gran


mayora de iones con carga son excluidos de un ambiente no polar.
La forma protonada, sin carga elctrica de estos compuestos, pasa a
travs de la membrana interna mitocondrial intacta, descargando as
el gradiente de pH. En la matriz, a pH ms bajo, el cido dbil se
disocia, la forma disociada pasa la membrana interna, destruyendo el
potencial de membrana. Este proceso se puede repetir, de modo que
una pequea cantidad del agente desacoplante puede catalizar el
paso de una cantidad enorme de protones y hacer un corto circuito
en la cadena respiratoria.
En resumen, permitiendo el paso de protones a travs de la
membrana, se disipa el gradiente de protones, no hay bombeo de
protones a travs de la ATP-sintasa con produccin de ATP.
Los agentes desacoplantes son todos sintticos, sin embargo en el
mitocondria del tejido adiposo pardo una protena desacopladora
(termogenina) participa en el delicado control de la termognesis.
4. Inhibidores de transporte (atractalsido) que previenen ya
sea la salida del ATP o la entrada de material combustible a
travs de la membrana mitocondrial interna.

5.
5.
Ionsforos (valinomici
travs
compuestos que normalmente

na, nigericina) que


permiten el paso a
de la membrana a
estn impedidos.

6. Inhibidores del ciclo de


Krebs (arsenito) que
bloquean una o ms enzimas del ciclo de Krebs.
La produccin de ATP aerbica es ms eficiente que la
produccin anaerbica.
En 1861, Louis Pasteur observ que en levadura expuesta a condiciones
aerbicas, el consumo de glucosa y la produccin de etanol decae
precipitadamente (Efecto Pasteur).
Gliclisis anaerbica:

C6H12O6 + 2ADP + 2Pi 2 lactato + 2H+ + 2ATP


Metabolismo aerbico de la glucosa:
C6H12O6 + 38ADP + 38Pi 6 O2 6 CO2 + 44H20 + 38ATP
El metabolismo aerbico es ms eficiente que la gliclisis anaerbica en
lo que se refiere a produccin de ATP.
Sin embargo, como la concentracin de enzimas de la gliclisis es alta,
de modo que si no estn inhibidas, el ATP puede producirse ms rpido
que a travs de la fosforilacin oxidativa.
Por otra parte, el clculo tradicional de 36 ATP o de 38 ATP, segn
funcione la lanzadera del glicerofosfato o del malato respectivamente,
es obsoleto. Mediciones recientes estiman 30 ATP por glucosa
totalmente metabolizada.

ATP sintasa F0F1-rendimiento energtico


El complejo ATP sintasa o complejo V o FoF1-ATP sintasa (F = factor de
acoplamiento, en ingls coupling factor) es una enzima transmembranal
que cataliza la sntesis de ATP a partir de ADP, un grupo fosfato y la
energa suministrada por un flujo de protones (H+). Durante la
respiracin celular, la sntesis de ATP se denomina fosforilacin oxidativa
y el flujo de protones tiene lugar entre el espacio intermembrnico y la
matriz mitocondrial. En el caso de la fotosntesis, se habla de
fotofosforilacin y la enzima acta en el lumen y el estroma de los
cloroplastos.
ATP Sintetasa. Complejo enzimtico de la membrana interna de la
mitocondria y de la membrana tilacoide del cloroplasto, a travs del cual
fluyen los protones a favor del gradiente establecido en la primera etapa
del acoplamiento quimiosmtico; el sitio de formacin de ATP a partir de
ADP y fosfato inorgnico durante la fosforilacin oxidativa y la
fotofosforilacin.
El complejo ATP sintetasa es una enzima encargada de sintetizar
Adenosina Trifosfato (ATP) a partir de ADP y un grupo fosfato, merced a
la energa suministrada por un flujo de protones, de acuerdo con la
hiptesis quimiosmtica de Mitchell. La ATP sintetasa se puede imaginar
como un motor molecular que produce una gran cantidad de ATP cuando
los protones fluyen a travs de ella. La tasa de sntesis es grande, el

organismo humano en fase de reposo puede formar unas 1021


molculas de ATP por segundo.
La ATP es un compuesto de alto contenido energtico utilizado en casi
todos los procesos bioqumicos del cuerpo humano. La ATP sintetasa se
nos muestra como un fascinante y minsculo motor rotatorio que trabaja
con una relacin de eficiencia cercana al 100% y cuya funcin resulta
esencial para cualquier proceso biolgico, por lo que su presencia
imprescindible y su indudable complejidad irreducible lo convierten en
un elemento que ha despertado desde su conocimiento detallado,
profundas sospechas de haber sido diseado.
Estructura
La ATP sintasa tiene un dimetro de 10 nm, y
es el complejo ms pequeo identificado
hasta ahora. Trabaja con un grado de
efectividad cerca al 100 por ciento.
Esta enzima est formada por dos principales
complejos. Una anclada a la membrana
mitocondrial interna o al tilacoide llamada F0
(CF0 en caso de los tilacoides) y otra que sobresale por la cara interna
de la estructura llamada F1 (CF1 en caso de los tilacoides).
El componente F0 es el motor impulsado por protones. Es conocida
como la fraccin sensible a la oligomicina est formada por las
subunidades a, b2 y c10-14. Las subunidades c forman el anillo c, que
rota en sentido horario en respuesta al flujo de protones por el complejo.
Las dos protenas b inmovilizan el segundo complejo F1, que est
orientada hacia la matriz mitocondrial. Por interacciones electrostticas,
se asocia a F1 a Fo.
F1 est formada por las subunidades 3, 3, , y . La parte principal
del complejo F1 est formado por tres diemeres , esta unidad tiene
forma de hexmero. La actividad cataltica de este hexmero est
localizada en las subunidades . Las subunidades y estn unidas al
anillo c, y giran con l. Cada rotacin de 120 de la subunidad induce
la aparicin de cambios de conformacin en los centros catalticos de las
unidades de los dmeros , provocando la alteracin de los centros de
fijacin de los nucletidos situado en . El hexmero 3 y 3 finalmente
libera el ATP.
La subunidad Fo consiste de once subunidades diferentes a1 y c10,
estas subunidades forman un canal de protones central y finalmente la
subunidad b2OSCP1 (Oligomycin Sensitiviy Conferring Protein) enlazan
las unidades F1 y Fo.

Inhibidores
La oligomicina se fija en el tallo de la ATP sintasa, inhibiendo el canal de
protones, por tanto previniendo el reingreso de protones en la matriz
mitocondrial. Como los gradientes de pH y elctricos no se pueden
disipar en presencia de la oligomicina, el transportador de protones se
detiene por la dificultad para el bombeo de ms protones contra los
gradiententes muy inclinados. Causa una acumulacin de protones en el
espacio intermembrana.

Conclusiones
La Fosforilacin Oxigenada es un proceso complejo pero divertido y
sobre todo bastante importante para la vida humana, ya que
representa el 42% de todo el ATP consumido en nuestro cuerpo.
La fosforilacin oxidativa atrapa la energa en la forma de ATP de alta
energa.
Para que la fosforilacin oxidativa contine, se deben reunir dos
condiciones principales.
Primero, la membrana mitocondrial interna debe estar
fsicamente intacta de tal manera que los protones solamente
puedan re-ingresar a la mitocondria por el proceso que esta
acoplado a la sntesis de ATP.

En segundo lugar, un gradiente de protones debe ser


desarrollado a travs de la membrana mitocondrial interna.

Bibliografa
http://themedicalbiochemistrypage.org/es/oxidative-phosphorylationsp.php
https://prezi.com/b304zmj9fx8k/fosforilacion-oxidativa/
http://www.ecured.cu/ATP_Sintetasa
https://es.wikipedia.org/wiki/ATP_sintasa
https://bioquibi.webs.ull.es/bioquimica
%20estructural/antonio/fosforoxidativa.pdf