ADHESIN Y COMUNICACIN CELULAR

clula

ligando
extracelular

La adhesin celular involucra la unin de protenas de transmembrana o receptores

(en verde) a un ligando extracelular inmobilizado (en azul) y al citoesqueleto (en rojo)
Alberts et al MBC 2002

Los receptores de adhesin median interacciones de diferentes tipos

Las molculas de adhesin de una clula pueden unirse directamente a molculas del mismo
tipo (unin homoflica) o a molculas diferentes (unin heteroflica) en una clula adyacente.

uniones homoflicas
Ej. caderinas, N-CAM

uniones heteroflicas
Ej. integrinas, selectinas,
I-CAMs

uniones a travs de una

molcula extracelular puente.
Ej. integrinas, proteoglicanos

Alberts et al MBC 2002

Los receptores de adhesin se agrupan en cuatro familias principales

Lodish et al MBC 2004

La delecin de genes involucrados en la adhesin provoca letalidad o

severos defectos
el funcionamiento
de los tejidos
KNOCKen
OUT
INTEGRINSy&estructura
CADHERINS

die at time of
implantation
E-cad

E10, neurulation/somito
N-cad genesis defects, heart
does not form

Los receptores de adhesin se anclan al citoesqueleto mediante

protenas adaptadoras y de scaffold

Lodish et al MBC 2004

Los receptores de adhesin activan vas de sealizacin intracelulares

Las integrinas activan vas de sealizacin que sinergizan con vas activadas por factores de crecimiento.
Esta sealizacin regula procesos citoplasmticos (ej. polimerizacin de la actina) y nucleares (transcripcin).
receptor de
factor de
crecimiento

proliferacin

integrinas

Parsons, JCS 2003

Los receptores de adhesin transmiten informacin en los dos sentidos:

extracelular intracelular e intracelular extracelular

estructura de la matriz

La unin de talina al dominio citoslico de la -integrina

aumenta la afinidad del dominio extracelular por el ligando
(ECM). Este es un ejemplo de sealizacin inside-out.La
competencia de talina para unirse a la integrinia es regulada
por proteasas como las calpainas, y por la unin a PIP2.
integrina
activa
integrina
inactiva

receptores de
adhesin

se
sealizaci
alizacin

integrina
activa

membrana
plasmtica

anclaje

citoesqueleto

funcionamiento
y estructura
celular

adaptado de Calderwood, JCS 2004

Las adhesiones son esenciales para la integridad y funcin de los epitelios

O C C L U D IN G J U N C T IO N S (UNIONES OCLUYENTES O DE BARRERA)

1.

(uniones sellantes) tig h t ju n c tio n s ( v e r te b r a te s o n ly )

2.

s e p ta te ju n c tio n s ( in v e r te b r a te s m a in ly )

A N C H O R IN G J U N C T IO N S (UNIONES DE ANCLAJE)

A c tin fila m e n t a tta c h m e n t s ite s

1.
2.

(uniones adherentes) c e ll- c e ll ju n c tio n s ( a d h e r e n s ju n c tio n s )

(adhesiones focales) c e ll- m a tr ix ju n c tio n s ( fo c a l a d h e s io n s )

In te r m e d ia te fila m e n t a tta c h m e n t s ite s

1.

c e ll- c e ll ju n c tio n s ( d e s m o s o m e s )

2.

c e ll- m a tr ix ju n c tio n s ( h e m id e s m o s o m e s )

C O M M U N IC A T IN G J U N C T IO N S (UNIONES DE COMUNICACION)

1.

(uniones en hendidura) g a p ju n c tio n s

2.

c h e m ic a l s y n a p s e s

3.

p la s m o d e s m a ta ( p la n ts o n ly )

Las uniones intercelulares de los epitelios cumplen distintas funciones

Las clulas epiteliales maduras se polarizan formando un dominio apical (= luminal) y uno basolateral.
cara apical

Uniones estrechas: Constituyen una barrera al pasaje de

molculas entre la cara apical y basolateral.
Uniones adherentes: Asocian los citoesqueletos
contrctiles y son esenciales durante la morfognesis.
Desmosomas: Asocian los citoesqueletos no contrctiles
y son esenciales para mantener la estructura del epitelio.
Hemidesmosomas: Asocian las clulas, mediante un
citoesqueleto no contrctil, a la membrana basal que limita
con el tejido subyacente.
Adhesiones focales: Asocian las clulas, mediante un
citoesqueleto contrctil, a la membrana basal.
Uniones en hendidura: Permiten el pasaje de iones,
segundos mensajeros, y otras molculas pequeas.
Contribuyen a la coordinacin funcional del epitelio.
cara basolateral

UNIONES OCLUYENTES O ESTRECHAS

(TIGHT/OCCLUDING JUNCTIONS)

Las uniones estrechas restringen la libre difusin de molculas a travs del epitelio

transporte
vectorial de
glucosa

Microscopa electrnica que ilustra la barrera

formada por las uniones estrechas. En este
experimento se incub un epitelio con
hidrxido de lantanio (opaco a los electrones).
Note que el lantanio no pasa las uniones estrechas

lantanio

lantanio

Al microscopio electrnico las uniones estrechas se visualizan

como una costura en la porcin apical de las clulas epiteliales

Visualizacin de uniones estrechas por microscopa

electrnica. Tcnica de congelacin y fractura

Alberts et al MBC 2002

Claudinas, ocludinas y JAMs son las principales protenas

de transmembrana de las uniones estrechas
Claudinas, ocludinas y JAMs (Junction Adhesion Molecules) son mmiembros de la superfamilia de las IgG.

actin
ZO
PAR
Las protenas de scaffold ZO poseen dominios
PDZ que se unen al terminal carboxilo de las
ocludinas, claudinas y JAMs.
clula 1

clula 2

Los dominios extracelulares de claudinas, ocludinas y JAMs median interacciones homoflicas

independientes de calcio. Los dominios intracelulares se anclan al citoesqueleto de actina a travs
de protenas adaptadoras denominadas ZO ("Zonula Occludens"). Las JAMs tambin
interaccionan con protenas PAR requeridas para establecer la polaridad de las clulas.

UNIONES EN HENDIDURA (GAP JUNCTIONS)

La mayora de las clulas poseen uniones en hendidura. Al microscopio electrnico las membranas
conectadas por uniones en hendidura se separan unos 2-4 nm (panel de la izquierda). En una vista frontal
las uniones en hendidura se ven como agregados de estructuras cilndricas (panel de la derecha).

Lodish et al MBC 2004

Las conexinas son las protenas de transmembrana

que forman las uniones en hendidura

microscopa
electrnica

La asociacin lateral de seis conexinas forman un canal o conexon que se acopla a otro idntico en una
clula adyacente. Los conexones permiten el pasaje de iones y otras molculas pequeas (ej. segundos
mensajeros, aminocidos, Ca++); facilitando el acoplamiento metablico y elctrico de las clulas.

La apertura de los conexones es regulada por calcio y

otras molculas de sealizacin
Las uniones en hendidura son requeridas para
el desarrollo normal de los folculos ovricos.
Las clulas granulosas se acoplan entre si
y con el oocito a travs de diferentes conexones

La inyeccin de un trazador fluorescente

que pasa por las uniones en hendidura
permite visualizar la conectividad funcional
entre neuronas de la retina

La descarga del neurotransmisor

dopamina disminuye la permeabilidad
de las uniones en hendidura.

UNIONES DE ANCLAJE (ANCHORING JUNCTIONS)

En las uniones de anclaje protenas de transmembrana interaccionan en trans a travs

de sus ectodominios, y se acoplan al citoesqueleto mediante sus dominios citoslicos.

Alberts et al MBC 2002

UNIONES ADHERENTES

(ADHERENS JUNCTIONS)

Las uniones adherentes forman bandas adhesivas cerca del extremo apical de las clulas epiteliales.
Las protenas de transmembrana de las uniones adherentes son las caderinas. Los dominios
extracelulares de las caderinas de clulas adyacentes interaccionan entre si en presencia de calcio.
Los dominios intracelulares de las caderinas se anclan a los filamentos de actina.

~ 20 nm

Alberts et al MBC 2002

Diversos eventos morfogenticos dependen de la contraccin de los

anillos apicales de actina anclados a las uniones adherentes

Alberts et al MBC 2002

La contraccin de los anillos contrctiles en el neuroectodermo

contribuye a la formacin del tubo neural

Alberts et al MBC 2002

ADHESIONES FOCALES

(FOCAL ADHESIONS)

inmunofluorescencia de
fibroblastos que muestran
las integrinas (verde) ancladas
a las fibras de actina (rojo)

Las adhesiones focales anclan el citoesqueleto de actina a la matriz extracelular. Las

protenas de transmembrana de las adhesiones focales son las integrinas. Las integrinas
se unen a molculas de la matriz extracelular y a los filamentos de actina.

DESMOSOMAS Y HEMIDESMOSOMAS

Los desmosomas y hemidesmosomas son uniones de

anclaje especializadas de las clulas epiteliales. En estas
estructuras las protenas de transmembrana se anclan a
los filamentos intermedios. Los desmosomas anclan
clulas epiteliales adyacentes. Los hemidesmosomas
anclan la cara basal de las clulas epiteliales a la lmina
basal.

Alberts et al MBC 2002

Visualizacin de desmosomas al microscopio electrnico

filamentos
de queratina

Alberts et al MBC 2002

Componentes moleculares de los desmosomas

protenas de
transmembrana

protenas de
anclaje

Las protenas de transmembrana de los desmosomas son las

desmoglenas y desmocolinas, protenas que pertenecen a la
superfamilia de las caderinas. Los dominios extracelulares de
desmoglenas y desmocolinas de clulas adyacentes interaccionan
entre s en una manera dependiente de calcio. Sus dominios
intracelulares se unen a placoglobulinas y desmoplaquinas,
protenas que anclan los receptores al citoesqueleto de filamentos
intermedios.

Las uniones de anclaje y estrechas son esenciales para la

polarizacin de las clulas epiteliales
Las clulas MDCK se polarizan cuando se cultivan confluentes sobre soportes porosos cubiertos con una
lmina basal sinttica. Microscopa de fluorescencia y electrnica revelan que las clulas adquieren una
forma columnar, y diferencian un dominio apical con microvellosidades, y un dominio basolateral.

Lodish et al MBC 2004

Cohen et al., JCB 2004

Las caderinas constituyen una superfamilia numerosa y diversa

de molculas de adhesin
Las caderinas clsicas son protenas de membrana tipo I. El dominio extracelular se caracteriza
por la presencia de cinco motivos repetidos de ~110 aminocidos (cadherin repeats). El dominio
citoplasmtico interacciona con protenas citoslicas denominadas cateninas. A esta clase
pertenecen las caderinas tipo E, P y N.

Molecule

Predominant Cellular Distribution

E-cadherin
P-cadherin
N-cadherin

Preimplantation embryos, non-neural epithelial tissue

Trophoblast
Nervous system, lens, cardiac and skeletal muscle

Las caderinas median interacciones homoflicas dependientes de Ca2+

cadherin
repeat

interaccin
en trans

Los dominios denominados "cadherin repeats (CR) son homlogos a los motivos de inmunoglobulinas,
Entre CR adyacentes se encuentran residuos que unen Ca2+. La unin del Ca2+ estabiliza la conformacin
extendida del dominio extracelular lo cual es esencial para la interaccin de los dmeros en trans.

Las uniones de caderinas son reguladas por diversos mecanismos

La unin en trans de los dominios extracelulares de las caderinas requiere de calcio. La incubacin de una
monocapa de clulas confluentes con un quelante de calcio (EGTA) inhibe reversiblemente la adhesin (panel
A). La unin de los dominios citoslicos de las caderinas al citoesqueleto es regulado por fosforilacin. La
incubacin de las clulas con in inhibidor de fosfatasas (PAO) provoca la prdida de la adhesin (panel B).

clulas unidas

separadas

unidas

unidas

separadas

Balzac et al., JCS 2005

Las caderinas clsicas se unen al citoesqueleto de

actina a travs de protenas denominadas cateninas

Las caderinas clsicas E, P y N poseen

un dominio citoslico conservado que se
asocia al citoesqueleto de actina a travs
de protenas denominadas cateninas.

La -catenina y la p120 se unen directamente

a la caderina. La -catenina ancla el receptor
al citoesqueleto de actina mediante
interacciones con -catenina y otras protenas
(vinculina, -actinina). La unin de -catenina
y p120 estabilizan la expresin de las
caderinas en la superficie celular.

El reconocimiento homoflico de las caderinas permite

la separacin de grupos o poblaciones celulares
clulas sin
caderinas

clulas transfectadas con

caderinas e incubadas en
presencia y en ausencia de Ca2+

clulas transfectadas
con E-caderinas (azul)
y N-caderinas (naranja)

mezcla de clulas que

expresan diferentes niveles
del mismo tipo de caderina

estado
inicial
incubacin
con agitacin

+Ca2+

estado
final
resultado:
no adhesin

resultado:
adhesin

resultado:
no adhesin

conclusin: la adhesin
requiere de caderinas
y calcio.

resultado: las clulas

que expresan las mismas
caderinas se segregan.
conclusin: la adhesin es
homotpica.

resultado: clulas que

expresan diferentes
niveles del mismo tipo
de caderina se segregan.
conclusin: diferencias
cuantitativas en la
expresin de caderinas
juegan un rol en la
organizacin de los tejidos

La expresin diferencial de caderinas permite la diferenciacin de

estructuras durante el desarrollo del sistema nervioso

El neuroectodermo expresa E-caderinas. Durante

la formacin del tubo neural el neuroepitelio cambia
la expresin de E-caderinas por N-caderinas.

E-cad

ectodermo

N-cad

tubo
neural

Expresin de diferentes caderinas en

el cerebro de un embrin de ratn
Cada caderina se expresa en
segmentos o reas especificas

Las integrinas son una familia de molculas de adhesin que

median interacciones heteroflicas dependientes de Mn2+ y Mg2+
Las integrinas son receptores de molculas de la matriz extracelular. El receptor es un heterodmero
formado por una subunidad y una de una familia de subunidades y .

collagen receptors
(+ I domain)
1

(+ I domain)

10
11

Hynes. Cell 2002

Las subunidades alfa de los heterodmeros determinan en parte

la especificidad de unin por el ligando

Modelo de activacin de las integrinas

Las integrinas existen en dos conformaciones alostricas: inactiva (= baja afinidad por el ligando) y activa
(= alta afinidad por el ligando). La conformacin inactiva es estabilizada por interacciones citoplasmticas
entre las cadenas y , adyacentes al dominio de transmembrana. La unin de la protena talina al dominio
citoplasmtico de la beta integrina, induce un cambio conformacional que se propaga a lo largo de la
estructura y favorece la forma activa de alta afinidad.

low affinity

high affinity

microscopa electrnica

Giancotti, DevCell 2003

Las integrinas estimuladas se agregan y forman

complejos de adhesin focales
Las agregacin de las integrinas incrementa la avidez por el ligando extracelular. La agregacin es facilitada
por la unin al citoesqueleto de actina a travs de protenas tales como talina (ta), alfa actinina () y
tensina (te). Algunas protenas asociadas a los complejos tienen una funcin reguladora, ej. FAK (F)
Marcacin fluorescente de 1-integrina
y actina: complejos de adhesin

Representacin esquemtica de un complejo de adhesin

Zamir & Geiger, 2001

Las CAMs pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas

y median adhesin homoflica independiente de Ca2+
N-CAM140
N-CAM180
N-CAM120

motivo homlogo al
de las inmunoglobulinas

Las N-CAMs fueron las primeras CAMs

(Cell Adhesion Molecules) caracterizadas.
Existen ~ 20 isoformas de N-CAM
generadas por corte y empalme del RNA
de un nico gen. Todas las CAMs
comparten motivos homlogos a los
encontrados en inmunoglobulinas .

puentes
disulfuro
motivos de FN III

Alberts et al MBC 2002

El agregado post-traduccin de cido silico en algunas

isoformas de N-CAM modula su funcin adhesiva

Las selectinas median interacciones heteroflicas

dependientes de Ca2+

extravasacin de leucocitos

Las selectinas poseen un dominio de lectina en el extremo distal de la regin extracelular. Este dominio se
une a oligosacridos especficos en glicolpidos y glicoprotenas en un modo dependiente de calcio. El
dominio intracelular se asocia al citoesqueleto de actina. Las selectinas median adhesiones de baja afinidad
entre leucocitos y las clulas endoteliales en etapas tempranas de la extravasacin de leucocitos.

Funcin coordinada de selectinas, integrinas y caderinas

durante la extravasacin de leucocitos

(inactiva)
(activa)

expresin de
selectina P y PAF

unin de
L 2 y ICAM-1/2

(VE-caderins, PECAM)

Estmulos inflamatorios inducen la expresin de selectinas P y el lpido PAF (Platelet- Activating Factor) en la
superficie de las clulas endoteliales (2). Las selectinas P se unen con baja afinidad a ligandos (P-Selectin
Glycoprotein Ligand o PSGL) expresados en la membrana de leucocitos provocando su detencin (3). PAF
estimula a un receptor de los leucocitos que induce la activacin de la integrina L2 (3). Interacciones de
L2 con ICAM-1/2 (4) y la inactivacin de VE-caderinas y PECAM (Platelet Endothelial Cell Adhesion
Molecule) facilitan el pasaje trans-endotelial (5).

La funcin de linfocitos
es orquestada por una
diversidad de molculas
de adhesin

2/1

4/1

PECAM y VCAM-1
pertenecen a la superfamilia
de las inmunoglobulinas.

6/1
4/1

Sixt et al COCB2006

La transicin epitelio-mesnquima (TEM)

involucra cambios coordinados de la adhesin
TEM consiste en el cambio de fenotipo epitelial a uno mesenquimtico. Las clulas epiteliales
polarizadas se convierten en clulas fibroblastoides, ltamente migratorias. Este proceso requiere
de la inhibicin de la expresin de las caderinas-E, la expresin de caderina-N y de una variedad
de integrinas involucradas en migracin, por ejemplo, v6, 51, etc.
transicin epitelio-mesnquima en clulas de carcinoma

En proceso de TEM clulas neoplsicas degradan la membrana basal

e invaden el estroma
normal

carcinoma

epitelio

membrana
basal
tejido
conectivo

La flecha en (F) indica clulas invasivas que han atravesado la membrana basal y se diseminan por el tejido subyacente

Durante el desarrollo embrionario TEM permite la formacin

de estructuras nuevas a partir de los epitelios
Las clulas de la cresta neural se originan por una transicin epitelio-mesnquima
Inmunofluorescencia doble que muestra la expresin
de caderina-7 en las clulas de la cresta neural
desprendidas del tubo neural (C, flechas). Estas
clulas no expresan caderinas-N (A, flechas).

N-caderina
caderina-7
integrinas

N-caderina

N-caderina

Nakagawa &Takeichi, 1998

La expresin de genes involucrados enTEM son regulados

por seales externas

cytokines

La activacin/expresin de factores de
transcripcin como Twist, Snail y SIP1
reprimen la expresin de E-caderina y
cateninas y estimulan la expresin de
protenas involucradas en motilidad.

Kang & Masagu, Cell 2004

Las VE caderinas del endotelio se desacoplan del

citoesqueleto durante la extravasacin de leucocitos
Visualizacin de la transmigracin de leucocitos por time lapse. Clulas endoteliales cultivadas fueron
transfectadas con VE caderina-GFP y activadas con TNF. Leucocitos polimorfonucleares marcados
con Cell Tracker orange (rojo) se sembraron sobre la monocapa y se filmaron. Note el pasaje de los
leucocitos entre dos clulas endoteliales adyacentes (flecha en 3:00).
0
0:45
3:00
3:15
3:30

3:45

4:00

4:15

4:30

9:15

video disponible

Shaw et al, J. Immunol. 2001

SEALIZACIN MEDIADA
POR LA ADHESIN

La mayora de las clulas dependen del anclaje a la matriz

extracelular para su crecimiento, proliferacin y supervivencia
La estimulacin y agregacin de integrinas y caderinas
activan vas de sealizacin que regulan el crecimiento,
la proliferacin y la supervivencia de las clulas.
sobrevivencia,
crecimiento y
proliferacin

sobrevivencia
y crecimiento

La extensin de la clula sobre el

substrato es un factor crtico para el
crecimiento y la supervivencia.

caderinas
Growth
= rea total
de fibronectina

integrinas

apoptosis

diferenciacin

....

....

....

....

Las clulas epiteliales requieren del contacto con la

matriz para su diferenciacin. Durante la involucin
de la glndula mamaria y de la prstata, la lmina
basal se degrada y las clulas mueren por apoptosis.

fibronectina
extendida

extendida

Chen et al., Science 1997

La unin de las integrinas a la matriz extracelular (ME) y su agregacin

forma complejos de adhesin que reclutan y activan tirosn kinasas
Fibroblastos adheridos sobre fibronectina activan la fosforilacin de numerosas protenas en los
complejos de adhesin. Esto puede apreciarse por inmunofluorescencia con un anticuerpo
anti-fosfotirosina. Las flechas sealan los focos de adhesin teidos con el anticuerpo.

FAK es una tirosina-kinasa que se activa en respuesta a la adhesin a la ME

y que estimula la va de sealizacin de la MAP Kinasa
integrinas FAK Cas Crk JNK
integrinas FAK Grb2 Sos Ras Erk

(MAP kinasa)

(MAP kinasa)

expresin de ciclinas D;
proliferacin

Algunas integrinas se localizan en rafts lipdicos y activan la MAPK por

una va dependiente de caveolina y Fyn e independiente de FAK
PTK

adaptor adaptor

GEF

GTPase

MAP

integrina caveolina Fyn Shc Grb2 Sos Ras Erk

La mxima velocidad de migracin celular se alcanza a estados

de adhesin intermedios

Una adhesin al substrato dbil o extremadamente fuerte inhiben la migracin celular.

Holly et al., Exp. Cell Res. 2000

Las integrinas regulan la adhesin y la motilidad a travs de seales

dependientes de la activacin de Src y FAK
Las clulas normales producen
focos de adhesin alargados
(flechas en (A). Las clulas
deficientes en FAK (B) producen
mltiples focos pequeos.

E-cadherin

Src-FAK
B
+
Rac
maduracin de los
contactos adhesivos

(Schlaepfer, PBMB 1999)

+
polimerizacin de actina
y extensin de lamelas

Las clulas deficientes en FAK exhiben defectos en la migracin

Las clulas normales se polarizan formando una lamela de avance en la direccin de
la migracin (flechas en A). Las clulas deficientes en FAK exhiben defectos en la
polarizacin y producen mltiples lamelas (cabezas de flecha en B).

videos disponibles (Tilghman et al JCS2005)

La expresin desregulada de la tirosina kinasa Src provoca la

desorganizacin del citoesqueleto de actina y altera la adhesin
Fibroblastos transfectados con el cDNA que codifica un mutante termosensible de v-Src constitutivamente
activa. A la temperatura no permisiva v-Src no se expresa y la clula exhibe un fenotipo normal (a). A la
temperatura permisiva la kinasa mutante es funcional y la clula exhibe un fenotipo transformado (b).
adhesiones normales

adhesiones aberrantes

Frame et al., Nature MCB 2002

La estimulacin de las integrinas activa vas de sealizacin

anti-apoptticas mediadas por las kinasas PI-3K y AKT

integrina

ECM

FAK

La estimulacin de integrinas y receptores de factores de crecimiento

genera seales que estimulan la proliferacin e inhiben la apoptosis
matriz extracelular
integrinas
caveolina

factores de
crecimiento

factores de
crecimiento
RTKs

FAK/Src/
p130Cas

RTKs

Fyn/Shc

Grb2

Ras

PI-3k
Rac

Rho

Raf/MEK

Akt
JNK

Bad

Erk

caspasa 9
p53

cki
ciclina D

apoptosis
ciclo celular

activacin
sostenida

Las E-caderinas inhiben la proliferacin reteniendo -catenina en

las adhesiones y promoviendo la expresin de p27 cki
matriz extracelular
integrinas
caveolina

factores de
crecimiento

factores de
crecimiento
RTKs

FAK/Src/
p130Cas

RTKs

Fyn/Shc

Grb2

Ras

PI-3k
Rac

Rho

Raf/MEK

E-caderina

Akt
JNK

Bad

Erk

-catenina

caspasa 9
p53

cki
ciclina D

apoptosis
ciclo celular

cki

Las E-caderinas inhiben la actividad transcripcional de la beta catenina

Solo cuando las clulas se estimulan con el factor Wnt, la beta catenina es estabilizada en el
citosol y puede translocarse al ncleo para promover la transcripcin de genes pro-invasivos y
mitognicos. Esta actividad requiere de la asociacin con los factores de transcripcin TCF y LEF.
cyclin D, matrylisin,
fibronectin, myc.

Integracin de seales que regulan la proliferacin.

Molculas de adhesin y factores de crecimiento

Wnt

El reclutamiento de
-catenina en los
complejos de caderinas
impide su rol promotor
de la proliferacin.

factores de
matriz
extracelular crecimiento

E-caderinas

integrinas

RTKs
uniones estrechas

Frizzled

retencin

fosforilacin,
inactivacin

activacin

ZO-1
retencin

estabilizacin

-catenina
cki

Zona B

Erk

El reclutamiento de
Zona B-Cdk4 en el
citoplasma impide su
rol promotor de la
proliferacin.

sntesis

ciclina D

ciclo celular

Cdk4

sntesis

ncleo

La interaccin de los epitelios con la membrana basal

es crucial para su diferenciacin

Estructura de un acino de glndula mamaria

polarizacin normal

La inhibicin del ensamble de

la lamina basal produce una
polarizacin invertida

lumen

lamina
basal

En rojo se muestra un marcador del dominio apical

OBrien et al, NCB 2001; Bissell et al, COCB 2003

MATRIZ EXTRACELULAR

proteoglicanos
colgenos
fibronectina
laminina

Los proteoglicanos consisten de uno o varios

glicosaminoglicanos (GAGs) unidos a protenas
Los GAGs consisten en repeticiones de un disacrido que contiene usualmente un cido urnico
(D-glucournico o L-idurnico) o galactosa y una N-acetil glucosamina o N-acetil galactosamina.
Uno o ambos residuos estan sulfatados.
(ej. agrina, sindecano)

Los proteoglicanos difieren en el tipo y nmero de GAGs

proteoglicanos
glicoprotena

El agrecano posee mas de 100 GAGs. Decorina es el nico PG con un solo GAG.
Los PGs poseen una mayor proporcin de carbohidratos que las glicoprotenas.

La unin de GAGs a protenas ocurre en serina, treonina, o asparagina,

dependiendo del PG.

Condroitin, dermatan, y heparan sulfatos se unen mediante un tetrasacrido a

la protena. La xilosa es adicionada a una serina en la secuencia Ser-Gly-X-Gly.
Cada residuo es agregado por una enzima distinta. La elongacin y
modificacin de los azcares de los GAGs se realiza en el Golgi.

Serina

Los keratan sulfatos se unen a la

proteina por oligosacaridos cortos
distintos al tetrasacarido de CS,
DS y HS.

Ser/Thr

GalNAc o Man

Keratan
sulfatos

Asn

GlcNAc

Funcin estructural de los PGs: Agrina es un heparan sulfato PG

esencial para organizar las sinapsis en las uniones neuromusculares
Agrina es secretado por las motoneuronas. Comparacin del desarrollo de
las sinapsis en las uniones neuromusculares de ratones controles y knockout
para agrina. En ausencia de agrina los receptores de acetilcolina en las
fibras musculares no se agregan (puntos rojos).

Terminales axonales de motoneuronas (verde) y

agregacin de receptores de acetilcolina (rojo) en
las placas terminales de las uniones neuromusculares.
(Lichtman & Sanes, 2003)

Scaffolding y sealizacin: PGs de la matriz extracelular se unen a

factores de crecimiento y modulan su actividad
Los PGs sindecano y perlecano actan como reservorios de FGF, uniendo molculas de FGF y evitando
su degradacin por proteasas extracelulares. Estos PGs adems presentan el FGF a sus receptores; en su
ausencia, las clulas no responden al FGF. Otro PG, decorina, se une al TGF- y lo presenta a sus receptores.

Algunos proteoglicanos en la superficie celular median adhesin

a componentes de la matriz extracelular

Las cadenas de heparan sulfato de sindecano se unen a diversos colgenos, fibronectina y laminina

regin que se une a

colgenos I, III, IV,
fibronectina y laminina

Los colgenos son protenas fibrosas que proveen resistencia mecnica

Las molculas de colgeno son homo o teterotrmeros formados a partir de tres subunidades o cadenas alfa.
Type

Molecule Composition

Fibrillar Collagens
I
[1(I)]2[2(I)]

II

[1(II)]3

III

[1(III)]3

[1(V)]3

Fibril-Associated Collagens
VI [1(VI)][2(VI)]

Structural Features

Representative Tissues

300-nm-long fibrils

Skin, tendon, bone,

ligaments, dentin,
interstitial tissues
300-nm-long fibrils
Cartilage, vitreous
humor
300-nm-long fibrils; often with
Skin, muscle, blood
type I
vessels
390-nm-long fibrils with globular Similar to type I; also
N-terminal domain; often with
cell cultures, fetal
type I
tissues

Lateral association with type I;

periodic globular domains
IX [1(IX)][2(IX)][3(IX)] Lateral association with type II;
N-terminal globular domain;
bound glycosaminoglycan
Sheet-Forming Collagens
Two-dimensional network
IV [1(IV)]2[2(IV)]

Most interstitial tissues

Cartilage, vitreous
humor;

All basal laminaes

SOURCE: K. Kuhn, 1987, in R. Mayne and R. Burgeson, eds., Structure and Function of
Collagen Types, Academic Press, p. 2; M. van der Rest and R. Garrone, 1991, FASEB J.
5:2814.

Los fibroblastos del tejido conectivo secretan colgeno

y otros componentes de la matriz extracelular
Microscopa electrnica de barrido. Fibroblastos
de tejido conectivo entre fibras de colgeno

Microscopa electrnica de transmisin. Fibras de

colgeno con distintas orientaciones envuelven un
fibroblasto

microscopa electrnica

Sntesis de las fibras de colgeno

hidroxilasas

procolgeno
peptidasas

lisil
oxidasa

La fibronectina es una protena modular multiadhesiva que interacciona

con proteoglicanos y otras protenas de la matriz

microscopa electrnica

mdulo
tipo III

Los fibroblastos secretan y organizan la matriz

La secrecin de fibronectina por los bibroblasts les permite adherirse y migrar.
fibras de fibronectina

fibras de actina

(extracelular)

(intracelular)

Observe la co-distribucin de la actina (intracelular)

y las fibras de fibronectina (extracelular).

Las integrinas en la superficie de los fibroblastos ligan las fibras de matriz extracelular con el citoesqueleto
de actina. La contraccin del citoesqueleto contribuye al ensamble y organizacin de las fibras.

La laminina es una de las principales molculas

multiadhesivas de las membranas basales

microscopa electrnica

binds integrins

La molcula de laminina es un heterotrmero con forma de cruz que interacciona con diversos componentes
de la matriz extracelular y con receptores de la superficie celular (integrinas, proteoglicanos).

Laminina, colgeno IV y PGs forman una lmina basal asociada a

epitelios y otros tejidos

La lmina basal es una malla fibrosa de entre 40-120 nm de espesor, compuesta principalmente por
colgeno tipo IV, laminina, nidgeno y el proteoglicano perlecano. Cumple una funcin de soporte y
es requerida para la diferenciacin de los epitelios y otras clulas.

Microscopa electrnica de barrido de una lmina basal

clula epitelial

lmina basal

fibras de colgeno

La lmina basal cumple diferentes funciones

en los distintos tejidos

La lmina basal provee un substrato para el anclaje de los epitelios, envuelve individualmente a
las clulas musculares y adiposas y sirve de filtro en el glomrulo renal, donde las clulas
epiteliales permiten el pasaje paracelular de substancias de los capilares sanguneos.

La interaccin de los epitelios con la membrana basal

es crucial para su diferenciacin

Estructura de un acino de glndula mamaria

polarizacin normal

La inhibicin del ensamble de

la lamina basal produce una
polarizacin invertida

lumen

lamina
basal

OBrien et al, NCB 2001; Bissell et al, COCB 2003

La lmina basal es esencial para organizar las sinapsis neuromusculares

Experimentos de regeneracin demuestran que tanto los axones de las motoneuronas como las fibras musculares
detectan componentes de la lmina basal que contribuyen a su diferenciacin.

dao al msculo
y al nervio

degeneracin; la
lmina basal persiste

agrina produce la agregacin de los receptores de acetilcolina

en la membrana de la clula muscular. En ratones knockout
para agrina los AchR no se agregan.

La matriz es remodelada por la accin de

proteasas extracelulares

colagenasas instersticiales degradan colgenos fibrilares

(1) Metaloproteinasas
de la matriz (MMP)

estromelisinas degradan fibronectina, proteoglicanos, col IV

gelatinasas (colagenasas tipo IV) degradan col IV, fibronectina, elastina

su actividad depende de iones zinc

o calcio
Las tres clases de metaloproteinasas poseen inhibidores endgenos (tissue inhibitors of metalloproteinasas = TIMPs).
En condiciones normales las actividades de MMP y TIMPs estn balanceadas.

(2) Serine
proteases

Activadores del plasmingeno (PAs). Hay 2 tipos:

uPA: urokinase-plasminogen activator asociada a receptores de superficie (uPAR)

tPA: tissue-type plasminogen activator secretada
- laminina
- fibronectina
uPA o tPA plasmingeno plasmina activa
la plasmina degrada
- colgeno IV
- vitronectina
las serpinas son inhibidores de las serine proteases