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Biologa General Manual de Practicas de Laboratorio

Manual de prcticas de laboratorio

Biologa General

Roger O. Poccohuanca Aguilar


Pertenece al estudiante:
Juliaca Puno Per

2016

E.P INGENIERIA AMBIENTAL Y FORESTAL

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Biologa General Manual de Practicas de Laboratorio

CONTENIDO
INTRODUCCION .................................................................................................................................2
LINEAMIENTOS PARA LA ESTANCIA EN EL LABORATORIO .................................................................3
RECOMENDACIONES PARA LA ESTANCIA EN EL LABORATORIO ........................................................4
PRCTICA 1: EL MTODO CIENTFICO ...............................................................................................5
PRCTICA 2: MICROSCOPIA .........................................................................................................10
PRCTICA 3: OBSERVACION DE CELULAS VEGETALES .............................................................16
PRCTICA 4: OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES ...............................................................22
PRCTICA 5: LA MEMBRANA Y EL TRANSPORTE CELULAR .....................................................26
PRCTICA 6: OBSERVACION DE LA MITOSIS EN LA RAIZ DE LA CEBOLLA .............................32
PRCTICA 7: SIMULACION DE PROCESOS DE REPLICACION DEL ADN Y SINTESIS DE
PROTEINAS ....................................................................................................................................36

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INTRODUCCION
Las

actividades

Biologa,

pues

experimentales
permiten

que

son

los

fundamentales

conocimientos

en

tericos

asimilados por los estudiantes puedan consolidarse.


El presente manual consta de 08 prcticas. En cada una de
ellas
ayudan

se
al

inicia

fundamentndose

educando

relacionar

cuestiones

tericas

interrogantes

aclarar

que

durante el proceso de la observacin.

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LINEAMIENTOS PARA LA ESTANCIA EN EL LABORATORIO


1. Los estudiantes antes de entrar al laboratorio, debern haber
ledo la gua de prctica correspondiente. Las instrucciones
deben seguirse en forma inteligente, observndose todas las
precauciones.
2. Para cada prctica, los estudiantes registran su asistencia en
el ingreso al laboratorio.
3. Es obligatorio el uso de bata, que cubra hasta las rodillas y
de mangas largas. La bata debe permanecer debidamente abotonada
durante su estancia en laboratorio.
4. Est prohibido comer, ingerir bebidas, fumar, maquillarse,
masticar chicles y golosinas dentro del laboratorio.
5. No se permite juegos o bromas. Las conversaciones dentro del
laboratorio deben mantenerse en un tono de voz apropiado.
6. Cada equipo de trabajo debe asignar un responsable, quien debe
solicitar los materiales a utilizar en las prcticas. El
material utilizado deber ser devuelto en perfecto estado y
limpio.
7. Cualquier accidente que ocasione merma del equipo debe ser
notificado inmediatamente al docente y/o al laboratorista; el
responsable y/o el equipo firmaran un recibo a fin de
comprometerse a reponerlo lo antes posible.
8. No estn permitidas experimentos no establecidos en la gua de
prcticas.
9. Los estudiantes deben mantener su mesa de trabajo y los
espacios de trabajo ordenados y limpios. La gua de prctica,
los equipos y/o materiales en uso son los nicos que debern
permanecer sobre la mesa de trabajo. Cada persona o grupo de
personas son responsables de la zona de trabajo, los materiales
y equipos asignados.
10. El reporte de cada prctica ser visada, en los primeros 5
minutos de la siguiente prctica.
11. Cualquier infraccin a las reglas que se establecen ser
sancionado en la calificacin de la prctica.

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RECOMENDACIONES PARA LA ESTANCIA EN EL LABORATORIO


1. La asistencia a prcticas es obligatoria y de acuerdo al
horario establecido, con una tolerancia de 10 minutos. No estn
permitidas las visitas dentro del laboratorio.
2. No asista al laboratorio con prendas o joyas (cadenas,
pulseras, aretes largos, etc.). deber presentarse con las uas
debidamente recortadas. Las damas deben asistir con el cabello
recogido.
3. Los estudiantes debern guardar respeto y disciplina en el
laboratorio.
El/la estudiante/a: ..........................................,
ha ledo minuciosamente los lineamientos y las recomendaciones
para la permanencia en el laboratorio y se compromete
cumplirlas.

..................................
Nombre:
Cdigo de matrcula:

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PRCTICA 1: EL MTODO CIENTFICO


I.

INTRODUCCION
El mtodo cientfico, es un instrumento de la ciencia
adecuado que nos permite estructurar conocimientos. Es la
herramienta que usan los cientficos para encontrar las
respuestas a sus interrogantes.
El mtodo cientfico es el modo ordenado de proceder para
el conocimiento de la verdad, en el mbito de determinada
disciplina cientfica.
En biologa, la observacin, la experimentacin y la
comparacin son pasos indispensables del mtodo de trabajo
para estudiar a todos los seres vivos (Santillana 2002).
El mtodo cientfico comprende los siguientes pasos:
1. Observacin. Es la parte inicial del trabajo cientfico
y su finalidad es obtener datos del fenmeno en
estudio. La observacin est presente a lo largo de
todo el mtodo cientfico.
Este paso consiste en hacer el anlisis minucioso de un
fenmeno por medio de los sentidos, y con la ayuda de
algunos
instrumentos
y
aparatos
que
amplan
la
capacidad de los rganos de los sentidos. Los ms
utilizados en biologa son la lupa, el microscopio, la
balanza, la regla y el termmetro.
La observacin va acompaada de un registro ordenado
de la informacin, generalmente llamado recoleccin de
datos
2. Planteamiento del problema. Una vez que se ejecuta la
observacin (la recoleccin de datos), la revisin
bibliogrfica (antecedentes de observaciones) surgen
una o ms preguntas generadas por la curiosidad del
observador.
Liberan oxigeno las plantas en ausencia de luz?
Qu macrfito produce ms oxigeno?

3. Formulacin de una hiptesis. Una hiptesis es una


respuesta posible para el problema planteado. Entonces,
el observador trata de dar una o ms respuestas lgicas
a las preguntas. Cada respuesta es una introduccin
tentativa que puede servir como una gua para el resto
de la investigacin.
La hiptesis es una declaracin que puede ser falsa o
verdadera, y que debe ser sometida a comprobacin

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(experimentacin). Los resultados de la experimentacin


determinaran el carcter final (falso o verdadero) de
la hiptesis.
Las plantas no producen oxgeno en ausencia de luz
La Elodea produce ms oxigeno que el Miriophyllum

4. Experimentacin. La hiptesis se prueba por medio de la


experimentacin.
Durante
la
experimentacin
se
reproduce un fenmeno cuantas veces sea necesario para
una
mejor
observacin;
tambin
se
cambian
las
condiciones que lo originan para ver las variaciones
que se producen y as descubrir sus causas.
El proceso experimental se inicia con la formulacin de
objetivos especficos que, sumados, permitan, a travs
de un experimento, confirmar o refutar la hiptesis.
5. Anlisis de resultados y conclusiones. Es el proceso de
comparar
los
resultados
del
experimento
con
la
hiptesis para verificar si hay coherencia entre ellos.
Si la hiptesis se confirma, entonces se incluye en el
cuerpo de conocimientos disponibles; si se refuta, es
necesario formularla de nuevo y volver a compararla.
A
partir
de
los
resultados,
se
pueden
sacar
conclusiones.
Un aspecto importante de la actividad cientfica es
comunicar
y
divulgar
al
resto
de
la
comunidad
cientfica las conclusiones, de modo que sirvan como
punto de partida para otros descubrimientos. Para ello
se utilizan los medios de comunicacin cientficos
(revistas, congresos, conferencias, etctera).
6. Generalizacin.
En
algunos
casos,
la
hiptesis
comprobada en la experimentacin pasa a la categora de
teora o leyes. La teora es una declaracin parcial o
totalmente verdadera, verificada por medio de la
experimentacin o de las evidencias y que slo es
vlida para un tiempo y un lugar determinados. Si la
teora se verificara como verdadera en todo tiempo y
lugar, entonces es considerada como Ley.
Una teora est sujeta a cambios, una ley es permanente
e immutable. Una ley es comprobable en cualquier
tiempo. Sin embargo, una teora es verdadera slo para
un lugar y un tiempo.
II.
III.

OBJETIVOS
Reconocer los pasos del mtodo cientfico
MATERIALES Y METODOLOGIA
a. Materiales
Plastilina
Elodea

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Miriophyllum
Soporte universal
Pinzas de nueces
2 tapones con apertura
2 tubos de vidrio
2 pipetas graduadas
2 matraces
Tijera
Papel peridico
Mangueras

b. Metodologa
1. Echen agua en dos matraces hasta la mitad y coloquen
dentro la Elodea o Miriophyllum.
2. Tapen
cada
matraz
con
un
tapn
atravesado
previamente
con
una
manguera
de
plstico,
permitiendo que el tubo de plstico ingrese en el
agua. el otro extremo de la manguera conecten al
extremo
inferior de una pipeta. La manguera debe
tener 25 cm de longitud.
3. Coloquen las pipetas conectados en el soporte
universal.
Sellen las uniones entre
pipeta
y
manguerilla y aadan en cada pipeta 10 ml de agua.
4. Sellen hermticamente con plastilina los bordes de
los matraces junto con los tapones y manguerillas.
5. Expongan un matraz al sol y el otro matraz
mantnganlo en un espacio oscuro.
6. Observen el nivel del agua en las pipetas cada 50
minutos y anoten.
7. Realicen el mismo experimento, ahora utilizando dos
macrfitos diferentes: Elodea y Miriophyllum

Fig. 01: Preparacin (Cortesa de Santillana 2002).

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IV.

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RESULTADOS
Anoten los resultados en la siguiente tabla:
OBSERVACIONES

NIVEL DE AGUA CON LUZ

NIVEL DE AGUA SIN LUZ

Inicio
Ej. 8.40hr
10.20hr

Grafiquen sus resultados.


Volumen de agua

Volumen de agua

10 mL

10 mL

Planta con
presencia
de luz

Planta en
ausencia de
luz

0
Tiempo

9:30

8:40

9:30

8:40

V.

Tiempo

DISCUSIONES
Qu sucede con el agua que hay dentro de la pipeta en el
experimento con luz?
..........................................................
..........................................................
..........................................................
Por qu varia el nivel del agua en la pipeta?
..........................................................
..........................................................
..........................................................
A qu se debe la diferencia entre la cantidad de oxigeno
liberado en presencia de luz y en ausencia de ella?

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..........................................................
..........................................................
..........................................................
Sera recomendable colocar una planta en tu dormitorio?
Por qu? Investiguen.
..........................................................
..........................................................
..........................................................
..........................................................
VI.

CONCLUSIONES
Revisen la hiptesis planteada, contrstenla con las
observaciones y redacten sus conclusiones.
..........................................................
..........................................................
..........................................................
..........................................................

VII.

BIBLIOGRAFIA
Santillana S.A. 2011. Biologa.
Santillana S.A. 2002. Biologa.

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PRCTICA 2: MICROSCOPIA
I.

INTRODUCCION
El microscopio es un aparato que aumenta considerablemente
las imgenes de los objetos observados a travs de l. Por
medio del mismo ha sido posible estudiar la estructura
intima de los seres vivos y advertir en ellos una
organizacin microscpica que les es comn.
Un microscopio es un sistema de lentes que produce una
imagen virtual aumentada de un pequeo objeto. El
microscopio ms simple es una lente convergente, la lupa.
LENTES CONVERGENTES: Son aquellas cuyo espesor va disminuyendo del
centro hacia los bordes. En este tipo de lentes, todo rayo que pase
paralelamente al eje principal, al refractarse se junta en su foco.
LENTES DIVERGENTES: Las lentes divergentes son ms delgadas en el centro que

en los bordes.

El aparato ms utilizado es el microscopio compuesto u


ptico, ste consta de dos sistemas de lentes, uno de
ellos ampla la imagen del objeto observado, que es
captada y nuevamente ampliada por el segundo sistema,
consiguiendo con esto un mayor poder de resolucin.
El poder de resolucin es la capacidad para distinguir dos
puntos muy prximos, de modo que puedan verse separados.
El microscopio ptico consta de tres sistemas: el
mecnico, el ptico y el de iluminacin, cada uno de los
cuales presentan una funcin y cuidados especficos.
Al ser el microscopio un aparato de precisin, requiere
que se maneje y cuide de manera muy especial y rigurosa.

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El
aumento
de
los
microscopios se refiere a la
capacidad de sus lentes para
incrementar el tamao de la
imagen del objeto observado.
El
aumento
mximo
de
un
microscopio ptico
es de
1000 veces.
La
resolucin
de
un
microscopio, en cambio, se
refiere a su capacidad de
mostrar
claramente
los
detalles
del
objeto.
La
resolucin
mxima
del
microscopio
es
de
0,2
micrmetros (0,0002mm).
PARTES DE UN MICROSCOPIO COMPUESTO: OCULARES (A), REVOLVER (B), OBJETIVOS
(C),
PLATINA (D),
Tornillos para desplazar la preparacin sobre la
platina en sentido longitudinal y transversal (E), CONDENSADOR (F),
Tornillo MACROMTRICO (G), Tornillo MICROMTRICO (H), DIAFRAGMA IRIS (I),
Tornillo para regular la altura del condensador (J), INTERRUPTOR (K),
Regulador de la Intensidad de Luz (L), PINZAS para ajustar la preparacin
sobre la platina (M), PIE O BASE DEL MICROSCOPIO (N).
http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/BiologiaCCAA/Guiones/Practi
ca3.htm

El aumento total se calcula con solo multiplicar


aumento del objetivo (100X) por el ocular (10X).
II.

III.

IV.

el

OBJETIVOS
Identificar las partes y funcionamiento del microscopio
ptico compuesto.
MATERIALES
a. Materiales
Microscopio compuesto
Laminillas portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
Preparacin fija
Muestra de agua estancada
PROCEDIMIENTO:
a. Reconocimiento del microscopio:
1. Sistema de soporte
Pie o Base del Microscopio: es un dispositivo
metlico pesado en forma cuadrada o circular, la
funcin es dar estabilidad al microscopio y soporte
a las dems partes que lo integran.
Platina: Superficie plana de posicin horizontal,
con un orificio circular en el centro por donde
pasa la luz. En la platina se apoya la preparacin

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(lamina portaobjetos que contiene a la muestra que


se va a examinar) que se sujeta a la platina
mediante pinzas o con un carrito que, mediante
mandos especiales facilita el movimiento de la
preparacin de derecha a izquierda y de adelante
hacia atrs.
Brazo: es el soporte que va desde la base hasta el
sistema ptico. Permite la sujecin y traslado del
microscopio y adems soporta al sistema ptico, a
la platina y el revolver.
2. Sistema ptico
Oculares: Son lentes que se encuentran en el
cabezal del microscopio. La denominacin de ocular
se debe a que el ojo del observador se coloca en
este lente.
Generalmente, los oculares estn constituidos por
dos lentes convergentes (planos convexos).
Objetivos: Los objetivos estn conformados por
varias lentes (convergentes y divergentes); que se
encuentran en la parte baja del cabezal, sujetos a
un carrusel o revolver que permite el cambio de un
objetivo a otro. Un objetivo amplia la imagen:
secos dbiles: 5X y 10X, seco fuerte 40X e
inmersin 100X, este ltimo solo se usa con aceite
de inmersin y se le reconoce por llevar una banda
o lnea negra cerca al borde inferior. A estos
lentes se les denomina objetivos porque se ubican
cerca del objeto a observar.
3. Sistema de iluminacin
Fuente luminosa: es la luz proporcionada por un
foco ubicado en la base del microscopio, dirige la
luz hacia el condensador y esta ltima concentra la
luz hacia el orificio circular de la platina
proporcionando iluminacin a la muestra.
Condensador: Es un sistema de lentes con gran
abertura, que se encuentra entre la platina y la
fuente de iluminacin. Su funcin es concentrar y
regular los rayos luminosos que provienen de la
fuente luminosa y los orienta hacia la abertura
central de la platina.
4. Sistema de ajuste
Tornillo
macromtrico
o
de
enfoque
rpido:
Generalmente estn situados en la parte inferior
del brazo o columna. Pueden estar separados (en los
microscopios antiguos) o el tornillo micromtrico

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est incorporado en la circunferencia del tornillo


macromtrico
(microscopios
actuales).
Ambos
tornillos permiten el desplazamiento de la platina
hacia arriba y hacia abajo con la finalidad de
acercar o alejar la preparacin hacia los objetivos
y as conseguir un enfoque ptimo de la imagen.
INDIQUE LAS PARTES
A:.....................
B:.....................
C:.....................
D:.....................
E:.....................
F:.....................
G:.....................
H:.....................
I:.....................
J:.....................
K:.....................
L:.....................

Tornillo micromtrico o
de ajuste fino:
Su
desplazamiento es mucho mas lento y permite enfocar
claramente la imagen observada. Sirve para efectuar
un enfoque fino y definitivo de la imagen
Tornillo de carro mvil: Se utiliza para desplazar
la lmina portaobjetos sobre la platina hacia los
lados, hacia atrs y hacia delante.
b. Preparacin de lminas:
1. En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota de
agua estancada, cubre con el cubreobjetos y observa
al microscopio, retira el exceso de agua con el
papel filtro.
2. Observa primero con el objetivo seco dbil (4X
10X) y por ultimo con el seco fuerte (40X).
Para observar correctamente, debes tener la muestra
a una distancia de aproximadamente de 1 cm. 1.5
cm. del objetivo, enciende la fuente de luz del
microscopio procurando que la muestra quede centrada
en el rayo de luz que pasa por la platina.
Posteriormente acerque lentamente la platina hacia
el objetivo con el tornillo macromtrico, siempre
observando a travs de los oculares hasta que la
imagen sea clara, y finalmente con el tornillo
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micromtrico enfoque mas finamente y aclarando mejor


la imagen observado. En caso de no poder enfocar
pida la ayuda de su maestro.
.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
Aumento ......X

3. Repite las operaciones con la muestra fija, cuando


realices el cambio de objetivo no cambies la
iluminacin en forma inmediata, hasta que primero
observes con la iluminacin inicial.
4. Para utilizar el objetivo 100X, debers tener ya
identificado
un campo de inters,
realiza
el
procedimiento de enfoque para el objetivo 40X, gira
el revolver para usar el objetivo 4X, sobre la
preparacin coloca una gota de aceite de inmersin
gire el revolver para enfocar con el objetivo 100X
y enfoca con el tornillo micromtrico. Siempre ten
cuidado de no ejercer mucha presin del ocular sobre
la preparacin para evitar romperla.
..........................
..........................
..........................
..........................
..........................
Aumento ......X

V.

..........................

CUESTIONARIO
Por qu es importante el uso del microscopio?
..........................................................

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..........................................................
..........................................................
Cules son los sistemas que conforman a un microscopio?
..........................................................
..........................................................
..........................................................
Explique
sistema

la

funcin

de

cada

parte

que

conforma

cada

..........................................................
..........................................................
..........................................................
..........................................................
..........................................................
Cmo se determina el nmero de veces que se aumenta una
imagen del objeto que observamos?
..........................................................
..........................................................
Resuma los cuidados fundamentales que se deben tener al
manejar un microscopio
..........................................................
..........................................................
VI.

BIBLIOGRAFIA
Benis, M. 1998. Atlas de Microscopia. Segunda Edicin.
Mxico D.F.
Choquehuanca P., D, D. Alave V. y J. Velarde C. 2013. Gua
de Trabajos prcticos de Biologa Celular y Molecular.
Universidad Nacional del Altiplano Facultad de Ciencias
Biolgicas. Puno, Per. 84 pp.
Pedraza F., E. y E. Velasco T. ..... Manual de prcticas
- Biologa.

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PRCTICA 3: OBSERVACION DE CELULAS VEGETALES


I.

INTRODUCCION
La clula vegetal, adems, de poseer casi los mismos
organelos
que
la
clula
animal,
presenta
dos
componentes esenciales (Constantino et al. 2012): a)
una capa externa resistente, formada por celulosa,
localizada por fuera de la membrana plasmtica y se
llama pared celular; esta capa tiene la funcin de dar
resistencia y proteccin a la clula vegetal. b) los
cloroplastos, que son organelos membranosos; estos
contienen clorofila y llevan a cabo la funcin de la
fotosntesis. Las clulas vegetales tambin presentan
otros tipos de plastos, los cromoplastos contienen
diferentes tipos de pigmentos que dan color a las
hojas, flores y frutos.

Fuente: http://www.simbiotica.org/imagens/celulavegetal.jpg

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II.

III.

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OBJETIVOS
Observar la morfologa tpica de las clulas
vegetales
Identificar las principales estructuras celulares
y funcin dentro de la clula vegetal
MATERIALES Y METODOLOGIA
a. Materiales
Microscopio compuesto
3 Portaobjetos
3 Cubreobjetos
1 Gotero con chupn de jebe
1 palillo mondadiente
1 hoja de afeitar
1 estuche de diseccin
Cebolla
Hojas de Elodea y Spirogira
Jitomate fresco
Papa
b. Reactivos
50ml de agua
5ml de lugol
5ml de azul de metileno
5 ml de glicerina
5 ml de verde de metilo actico
c. Metodologa
i. Observacin de la epidermis de la cebolla (lugol)
Con la ayuda del bistur u hoja de afeitar
corte un fragmento de cebolla y desprenda la
epidermis,
que
es
la
tela
delgada
y
transparente de la superficie.
Coloque una gota de lugol sobre el portaobjetos
y sobre ella extienda la epidermis con ayuda
del palillo mondadientes. Cubra la muestra y
obsrvala al microscopio con el objetivo de 10X
o 40X.
ii. Observacin de la epidermis de la cebolla (verde
de metilo actico)
Coloque en un portaobjetos, la epidermis
desprendida de la cebolla y vierte unas gotas
de verde de metilo actico y dejar actuar el
colorante-fijador durante cinco minutos. No

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debe
secarse
la
epidermis
por
falta
de
colorante o por evaporacin del mismo.
Con el cuentagotas bae la epidermis con agua
abundante hasta que no suelte colorante.
Agregue
unas
gotas
de
glicerina
a
la
preparacin, coloque el cubre y observe al
microscopio con el objetivo de 10X y 40X.
La membrana celular celulsica se destaca muy clara
teida por el colorante. Los ncleos son grandes y muy
visibles, en el interior de los mismos se puede llegar
a percibir granulaciones, son los nuclolos.
El citoplasma tiene aspecto bastante claro, en l se
distinguen
algunas
vacuolas
grandes
dbilmente
coloreadas. En algunas ocasiones se observa que la
preparacin tiene a manera de mosaico otros estratos de
clulas, estas proceden de las capas ms internas de
las hojas que fcilmente han podido ser arrancadas al
desprender la epidermis.
iii. Observacin de cloroplastos
Seleccione una hoja joven de Elodea, colcala
sobre
una
gota
de
agua
en
una
lmina
portaobjetos.
Cbrela
con
una
laminilla
y
observe
al
microscopio con objetivo de menor y mayor
aumento.
Coja un filamento de Spirogira y coloque en un
portaobjetos, en la que previamente se ha
colocado una gota de agua.
Cbrela con una laminilla cubreobjetos. Examine
e identifique los cloroplastos en la muestra.
iv. Observacin de la epidermis del jitomate
Corte un pequeo fragmento de jitomate y
desprenda una porcin delgada de epidermis.
Coloque sobre otro portaobjetos; aade una gota
de agua y cbrela.
Observa al microscopio con el objeto 10X o 40X.

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v. Observacin de leucoplastos
Sobre una lmina portaobjetos coloque una gota
de lugol.
Corta en dos una papa y raspa suavemente con el
bistur la superficie cortada. Depostala en el
portaobjetos
el
material
del
raspado
y
extindelo con cuidado sobre el lugol.
Cbrela con un cubreobjetos y observe al
microscopio.
Observe los leucoplastos teidos de color muy
oscuro o morado. Elabore un esquema de las
estructuras observadas.
IV.

RESULTADOS
Esquematice sus observaciones sealando las partes
celulares.
i. Observacin de la epidermis de la cebolla (lugol)
..........................
..........................
..........................
Observaciones: las clulas de
la
epidermis
de
las
hojas
internas del bulbo de cebolla
son
de
forma
alargada
y
bastante grande.
Aumento ......X

ii. Observacin de la epidermis de la cebolla (verde


de metilo actico)
.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
Aumento ......X

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.........................

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iii. Observacin de cloroplastos


.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
Aumento ......X
iv. Observacin de la epidermis del jitomate
.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
Aumento ......X
v. Observacin de leucoplastos
.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
Aumento ......X

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V. CUESTIONARIO
Qu son plastidios
........................................................
........................................................
........................................................
Cmo se clasifican los plastidios?
........................................................
........................................................
........................................................
Qu

partes

de

la

clula

has

ubicado

en

la

elodea?

nmbralas
........................................................
........................................................
........................................................
VI.

BIBLIOGRAFIA
Constantino C., E.R., M. Santiago R., A. D. Mesa M.,
V.H. Albores G. y A. Estrada S. 2012. Manual de
prcticas de Biologa I. Colegio de Estudios y
Cientficos y Tecnolgicos del Estado de Chiapas.
Mxico.

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PRCTICA 4: OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES


I.

INTRODUCCION
Una clula animal es un tipo de clula eucaritica de la
que se componen muchos tejidos en los animales. La clula
animal se diferencia de las clulas vegetales, en que
carecen de pared celular y plastos. Debido a la ausencia
de una pared celular rgida, las clulas animales pueden
adoptar una gran variedad de formas.

La estructura de las clulas animales puede ser dividida


en: la envoltura celular, constituida por la membrana
celular o membrana plasmtica; el citoplasma, en el que se
hallan los orgnulos celulares y el ncleo celular.
II.

III.

OBJETIVOS
Distinguir
animales.

las

principales

partes

en

clulas

MATERIALES Y METODOLOGIA
a. Materiales
Microscopio compuesto
2 Portaobjetos

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2 Cubreobjetos
1 Gotero con chupn de jebe
1 palillo de madera
Mechero bunsen
Algodn con alcohol
1 estuche de diseccin
1 lanceta
1 puente de tincin
Sangre humana
Muestra de semen

b.

Reactivos
50ml de azul de metileno
Agua destilada
5ml de solucin salina
Colorante Wright

c.

Metodologa
i. Observacin de clulas del epitelio bucal
Coloque una gota de agua destilada sobre la
lmina portaobjetos.
Realice un raspaje la cara interior de la boca
Con palillo de madera
Aplique una gota de colorante azul de metileno
sobre la muestra, espere 3 minutos y retire el
colorante en exceso no fijado a las clulas con
gotas de agua destilada.
Cubra
la
preparacin
con
la
laminilla
cubreobjetos y observe con objetivo de 10X y 40X
aumentos.
Observe, dibuje e identifique las partes en el
dibujo
ii.

Observacin de clulas sanguneas


Desinfectando la zona con gasa y alcohol, pinche
con la lanceta el lateral del dedo medio.
Obtenga una gota de sangre. Debe desechar la
primera gota.
Depostala a 1cm del extremo de un porta objetos
totalmente limpio y desengrasado (imagen A).
Coloque otro portaobjetos formando un ngulo de
45 con el portaobjetos que contiene la muestra y
se sita horizontalmente.
Acercando el portaobjeto a la gota de sangre y al
haberse extendido en toda la superficie del
lateral (imagen B)

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Arrastre sobre la superficie del portaobjetos


dispuesta en forma horizontal con decisin
(imagen C).
Deje secar a temperatura ambiente
Tia el frotis con colorante Wright durante 10
minutos.
Agregue agua destilada hasta formar una capa
tornasolada.
Lave, examine con el objetivo de inmersin.

iii.

Observacin de espermatozoides
Obtenga una muestra de semen.
Coloque en un portaobjetos una gota de semen y
extindela sobre la laminilla.
Fije la muestra y observe al microscopio con el
objetivo de 10X y 40X

IV.

RESULTADOS
Esquematice
celulares.

sus

observaciones

sealando

las

partes

i. Observacin de clulas del epitelio bucal


..........................
..........................
..........................
..........................
..........................
..........................
Aumento ......X

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..........................

24

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ii. Observacin de los eritrocitos


..........................
..........................
..........................
..........................
..........................
..........................
Aumento ......X

..........................

iii. Observacin de espermatozoides


.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
.........................
Aumento ......X
V.

CUESTIONARIO
Qu funcin tiene el ncleo en las clulas?
........................................................
........................................................
........................................................

VI.

BIBLIOGRAFIA
Constantino C., E.R., M. Santiago R., A. D. Mesa M., V.H.
Albores G. y A. Estrada S. 2012. Manual de prcticas de
Biologa
I.
Colegio
de
Estudios
y
Cientficos
y
Tecnolgicos del Estado de Chiapas. Mxico.

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PRCTICA 5: LA MEMBRANA Y EL TRANSPORTE CELULAR


VII.

INTRODUCCION
Las membranas celulares son barreras selectivas que
separan las clulas del medio externo. Su funcin mas
importante es:
Regular el transporte de molculas que entran o
salen de la clula o del organelo
La membrana celular est formada por una capa doble de
fosfolpidos. En ella insertadas se encuentran las
protenas, a ellas y los anteriores estn asociadas
molculas de carbohidratos. Los fosfolpidos crean una
barrera hidrofbica entre los compartimientos acuosos
de la clula. Las protenas permiten el paso de
molculas hidroflicas a travs de la membrana.

Fuente:
http://recursostic.educacion.es/ciencias/biosfera/web/alumno/1bachillerato/or
ganizacion_sv/contenidos5.htm

Para que la clula funcione eficientemente, debe


mantenerse
en
homeostasis.
Para
mantener
este
equilibrio
existen
mecanismos
para
el
transporte
selectivo de materiales hacia el interior o exterior de
la
clula.
Las
membranas
de
la
clula
son
selectivamente permeables, permitiendo el paso de
algunas sustancias o partculas (molculas, tomos, o
iones),
e
impidiendo
el
paso
de
otras.
Esta
selectividad se debe a la capa doble de fosfolpidos de
la membrana. La manera en que las molculas pasan por
la membrana depende en parte de la polaridad de las

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mismas. Las molculas hidrofbicas, o no polares, pasan


con relativa libertad a travs de la capa de lpidos,
mientras
que
molculas
hidroflicas,
o
polares,
incluyendo el agua, y las molculas de mayor tamao,
pasan a travs de canales formados por protenas
transportadoras. La regulacin del transporte de las
molculas, o la direccin en que se mueven depende de
su
gradiente
de
concentracin
(diferencia
en
concentracin entre dos lugares).
Las molculas se mueven constantemente debido a su
energa cintica y se esparcen uniformemente en el
espacio disponible. Este movimiento, llamado movimiento
browniano, es la fuerza motriz de la difusin.
Difusin se define como el movimiento natural de las
partculas de un rea de mayor concentracin a un rea
de menor concentracin hasta alcanzar un equilibrio
dinmico, en el cual el movimiento neto de partculas
es cero. La difusin no requiere gasto de energa por
parte de la clula y por lo tanto es un movimiento
pasivo. Cuando la clula transporta sustancias en
contra de un gradiente de concentracin (de un rea de
menor concentracin a un rea de mayor concentracin)
se requiere energa (ATP) y sucede movimiento activo.
VIII.

OBJETIVOS
Comprender los factores que afectan la velocidad
de difusin.
Entender
la
importancia
de
las
soluciones
hipotnicas, hipertnicas e isotnicas.

IX.

MATERIALES Y METODOLOGIA
a. Materiales
Botellas con soluciones de sacarosa (0.1,
0.2,..., 0.6M)
Botella con sangre de vaca (mantener en nevera)
Elodea fresca
Agua destilada
Gradilla de tubos de ensayo
6 Tubos de ensayo pequeos
Goteros
Laminillas pota y cubreobjetos
Microscopio compuesto
Lpiz de cera
Dos vasos de 150 a 200 ml
Colorante
Una papa mediana o grande
hielo
Sacabocado

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Termmetro
Navaja
Balanza y papel para pesar
04 pipetas
Pizetas

b. Metodologa
i. Difusin de molculas de agua
Aada agua a temperatura ambiente a un vaso y al
otro aada agua fra.
Deje los vasos reposar por 10 y 15 min para que
no haya movimiento del agua.
Aada cuidadosamente una gota de colorante a
cada envase y observe la dispersin de la gota.
Afect la temperatura la difusin del tinte?
Explique tu observacin.
ii. Osmosis en clulas animales
Cuando
los
eritrocitos
(clulas
rojas)
se
encuentran en un ambiente hipotnico el agua les
entra por
difusin y
sucede
hemlisis
(el
rompimiento de una clula roja). Cuando la clula
roja est en un ambiente hipertnico pierde agua,
se encoge y sucede crenacin. En este experimento
se observar el comportamiento de las clulas
rojas de la sangre en soluciones hipotnicas e
hipertnicas.
Rotule tres tubos de ensayo: 0.1, 0.3, Y 0.6M.
Aada soluciones de sacarosa de diferentes
osmolaridades:
Tubo 1: 3ml de solucin de sacarosa 0.1M
Tubo 1: 3ml de solucin de sacarosa 0.3M
Tubo 1: 3ml de solucin de sacarosa 0.6M

Aada 3ml de sangre de vaca a cada


observe la apariencia de la mezcla.
Rotule y prepare cuatro laminillas:

tubo,

Laminilla 1: Gota de sangre de vaca, coloque el cubreobjeto y observe


los eritrocitos
Laminilla 2: Gota de la mezcla de tubo 1 (0.1M), coloque el cubreobjeto
y observe bajo el microscopio y compare con la laminilla 1.
Laminilla 3: Gota de la mezcla de tubo 2 (0.3M), coloque el cubreobjeto
y observe bajo el microscopio y compare con la laminilla 1.
Laminilla 4: Gota de la mezcla de tubo 3 (0.6M), coloque el cubreobjeto
y observe bajo el microscopio y compare con la laminilla 1.

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Qu pas a las clulas al entrar en contacto


con cada una de las soluciones? por qu?
Cules
de
las
soluciones
usadas
fueron
hipotnicas, hipertnicas e isotnicas para los
eritrocitos?
En qu solucin sucedi hemlisis de los
eritrocitos y por qu?
iii. Osmosis en clulas vegetales
Rotule y prepare cuatro
indica a continuacin.
Laminilla 1: Hoja
agua de estanque.
Laminilla 2: gota
0.1M y una hoja de
Laminilla 3: gota
0.3M y una hoja de
Laminilla 4: gota
0.6M y una hoja de

laminillas

segn

se

de Elodea con una gota de

de la solucin de sacarosa
Elodea.
de la solucin de sacarosa
Elodea.
de la solucin de sacarosa
Elodea.

Qu le pas a las clulas al entrar en


contacto con cada una de las soluciones?
Cules
de
las
soluciones
usadas
fueron
hipotnicas, hipertnicas e isotnicas con
respecto a las clulas?
Por qu ocurri plasmlisis en una de las
soluciones?
Por qu no ocurre lisis (rompimiento de la
clula) en la clula vegetal?
iv. Estimar la osmolaridad en las clulas vegetales
En los siguientes ejercicios se observar cmo
soluciones con diferentes molaridades afectan el
equilibrio y el funcionamiento de las clulas
vegetales. La osmolaridad se expresa como moles de
soluto por litro de solucin; mientras ms alta es
la osmolaridad, mayor es la concentracin de
soluto.
Comparando la diferencia en el peso de las
muestras de papa se determinar si las clulas
adquieren
o pierden
agua en soluciones
de
diferentes molaridades y se determinar en qu
osmolaridad las clulas
vegetales se encuentran
en homeostasis o equilibrio.
Rotule seis vasos para solucin de sacarosa
(0.1 a 0.6M) y un vaso para agua destilada
(0.0M).
Aada 100 ml de la solucin correspondiente a
cada uno.
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29

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Con el sacabocado obtenga siete cilindros de


papa de aproximadamente 5cm de largo.
Pese los cilindros de papa, anote en la Tabla
1.2
el
peso
inicial
para
cada
uno.
y
transfiralos
inmediatamente
a
los
vasos
rotulados.
Deje los cilindros en los vasos durante 2
horas.
Saque los cilindros de los vasos y remueva el
exceso de agua con papel toalla. Asegrese de
mantener
separados
los
cilindros
correspondientes a cada vaso.
Anote si hubo cambios en textura y anote en la
Tabla 1.2 el peso final de los cilindros.
Con los datos de la Tabla 1.2, calcule el
cambio en peso para cada cilindro y prepare una
grfica sealando los cambios en peso.

Tabla 1.2: Resultados del experimento


Molaridades de la soluciones
0.0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

Peso final (g)


Peso inicial (g)
Cambio en peso (%)

Grafiquen sus resultados.


Volumen de agua
10
mL

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.0

0 o

0.1

Cambio
en peso
0
(%)

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d ad

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A qu molaridad de sacarosa se observa un


cambio en la grfica y a que molaridad no hay
cambio? Explique el porqu.
X.

XI.

RESULTADOS
Esquematice
sus
observaciones
cuestionario en hojas adicionales

conteste

el

BIBLIOGRAFIA
Constantino C., E.R., M. Santiago R., A. D. Mesa M.,
V.H. Albores G. y A. Estrada S. 2012. Manual de
prcticas de Biologa I. Colegio de Estudios y
Cientficos y Tecnolgicos del Estado de Chiapas.
Mxico.

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PRCTICA 6: OBSERVACION DE LA MITOSIS EN LA RAIZ DE LA


CEBOLLA
I.

INTRODUCCION
La mitosis es el proceso de divisin celular que permite
que surjan dos clulas hijas a partir de una clula madre
y que tienen las mismas caractersticas que sta. Mediante
este proceso la conformacin gentica de la clula madre
pasa a las clulas hijas sin modificacin.
Este proceso se presenta en organismos para reemplazar las
clulas que se destruyen
normalmente y para
el
crecimiento del organismo.
El proceso fundamental de la mitosis es la autoduplicacin
del material gentico seguida de una divisin celular. En
general, aunque existen variaciones individuales del
proceso mittico, los estadios usuales de la mitosis son
la interfase, la profase, la metafase, la anafase y la
telofase o citocinesis.

Las races de las plantas crecen alargndose por su pice,


donde existen clulas meristemticas que estn en continua
divisin. Por esta razn, la raz de la cebolla un

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32

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material excelente y fcil de conseguir para observar


clulas en mitosis. La tcnica consiste en aplastar el
extremo terminal de una raicilla con el fin de separar sus
clulas y teirlas con un colorante para, as, poder
visualizar los cromosomas al microscopio.
II.

III.

OBJETIVOS
Observar e identificar las distintas fases de la
mitosis en clulas vegetales

MATERIALES Y METODOLOGIA
a. Materiales
Un frasco de boca ancha con agua
Una cebolla
Un par de palillos (pueden ser mondadientes)
Carmn actico
Un mechero Bunsen
Una placa Petri
Una aguja de diseccin
Un microscopio
Tubo de prueba
Aguja de diseccin
Porta y cubre objetos
b.

Metodologa
i. Preparacin de la muestra
Coloca la cebolla en el frasco, de tal manera que
la parte inferior (disco) se halle en contacto
con el agua. Para ello sostenla con los palillos.
Coloca el frasco en un lugar sombreado y espera
varios das para que crezcan las races
Cuando
las
nuevas
races
tengan
2.5cm
de
longitud, corta 1cm del extremo de cada raz.
Coloca los trozos de las races en un tubo de
ensayo con 2 cm3 de carmn actico.
Calienta en el mechero hasta que se desprendan
unos vapores tenues, evitando que entre en
ebullicin. Para ello debes retirar el tubo de la
llama y apoyarlo encima del dorso de la mano. No
debes notar sensacin de quemadura.
Echa el contenido del tubo de ensayo en la placa
Petri
Coge un trozo de la raz, y colcala sobre el
porta objetos y agrega unas gotas de carmn
actico fresco.

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Con la ayuda de otro porta objetos, tritura el


extremo
de
la
raz
y
luego
coloca
el
cubreobjetos.
Observa en el microscopio, primero con el
objetivo de menor aumento y luego con el de mayor
aumento.
IV.

RESULTADOS
Esquematice, si se ven, clulas en diferentes fases de la
interfase o de la mitosis (profase, metafase, anafase y
telofase)
i. Observacin de la epidermis de la cebolla (lugol)
..........................
..........................
..........................

Aumento ......X

..........................
..........................
..........................

Aumento ......X

V.

CUESTIONARIO
Qu estructuras son las que se observan en la mitosis?
........................................................
........................................................
........................................................

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Describa cada una de las fases de la mitosis celular


........................................................
........................................................
........................................................
........................................................
........................................................
........................................................
Explica mediante esquemas
los cromosomas

la composicin estructural de

........................................................
........................................................

........................................................
........................................................
........................................................
VI.

BIBLIOGRAFIA
Constantino C., E.R., M. Santiago R., A. D. Mesa M., V.H.
Albores G. y A. Estrada S. 2012. Manual de prcticas de
Biologa
I.
Colegio
de
Estudios
y
Cientficos
y
Tecnolgicos del Estado de Chiapas. Mxico.

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PRCTICA 7: SIMULACION DE PROCESOS DE REPLICACION DEL


ADN Y SINTESIS DE PROTEINAS
I.

INTRODUCCION

Al cabo de la divisin celular las clulas hijas heredan la


misma
informacin
gentica
contenida
en
la
clula
progenitora. Como esa informacin se halla en el ADN, cada
una de las molculas de ADN debe generar otra molcula de
ADN idntica a la originaria para que ambas sean repartidas
en las dos clulas hijas. Esta duplicacin, merced a la cual
el ADN se propaga en las clulas de generacin en
generacin, se denomina replicacin.
La sntesis proteica tiene lugar en el ribosoma. En el
ribosoma, el ARNm que es una secuencia de ribonucletidos
transcritos a partir del ADN, se traduce en una protena,
para lo cual se requiere tambin la intervencin de los
ARNt. El trabajo de los ARNt consiste en tomar a los
aminocidos de citosol y conducirlos al ribosoma. La
sntesis de protena comienza con la unin entre s de dos
aminocidos
y
contina
con
el
agregado
de
nuevos
aminocidos.

Fig. 7. El codigo genetico con los 64 tripletes y los aminoacidos que especifican
Cada triplete constituye un codn; existen en total 64
codones, 61 de los cuales sirven para cifrar aminocidos y 3
para marcar el cese de la traduccin.

II.

OBJETIVOS

Descubrir el proceso de la sntesis proteica.

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36

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III.

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MATERIALES Y METODOLOGIA
a. Materiales

Material codificado
500 fichas de 5 colores
Cintas de 3 colores (4m)
Cinta maskintape

b. Procedimiento
Trabajando
en
procedimientos:

equipo,

realice

los

siguientes

i. Construyendo una molcula de ADN (en el ncleo)


Construya una secuencia de 60 bases nitrogenadas
(desoxirribonucletidos).
A
la
secuencia
de
bases
aada
la
tira
complementaria con otras 60 bases nitrogenadas.

DUPLICACION DE LA MOLECULA DE ADN


ii. Duplicacin del ADN (ocurre en el ncleo antes de
la mitosis celular)
Inicie la duplicacin del ADN, separando las
cadenas desde un extremo, y adicionando del medio
los nucletidos complementarios a cada uno de los
bases de la tira del ADN que sirve como plantilla
para la replicacin
Siga con el procedimiento hasta separar
las dos
cadenas iniciales del ADN.
Verifique si las dos tiras complementarias son
idnticas y a la original.
En una divisin celular un DNA debe destinarse para
integrar parte de una clula hija y la otra parte
de la otra clula hija.
En los siguientes ejercicios, tiene que completar las
dos cadenas que se han separado con los respectivos
nucletidos
formando dos nuevas molculas de ADN
idnticas a la original.

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37

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Etapa inicial de la replicacin del ADN

Etapa intermedia

A
C
A

G
G
T

Etapa final de la replicacin


C

T
T
A
T
A
A

SINTESIS DE PROTEINAS

iii. Transcripcin de ADN en el ncleo celular


En el ncleo celular

Recibe el nombre de transcripcin la sntesis de


molculas de ARN sobre la base de moldes de ADN

Inicien la transcripcin construyendo a partir de


un molde de ADN (de la secuencia de 60 nucletidos
construidos
al
inicio
de
la
practica)
y
ribonucletidos libres, siguiendo estos cinco
pasos:

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38

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Primero, separe una porcin de las molculas de
ADN (los 60 desoxirribonucleotidos). Utilice
fichas de colores diferentes.
Segundo, los ribonucletidos se aparearan con
desoxirribonucletidos complementarios del ADN
todos simultneamente. sustituyendo uracilo por
timina.
Tercero, cada ribonucleotido se unira con sus
dos vecinos.
Cuarto, los ribonucletidos se separan de los
desoxirribonucletidos del ADN y se liberara la
molcula de ARN.
Quinto, las dos cadenas de ADN volveran a
unirse.
A

A
C
A

ARNm
A

G
T
T

iv. La traduccin del ARN sntesis de protenas

La sntesis proteica tiene lugar en el ribosoma.


En el ribosoma, el ARNm se traduce en una
protena, para lo cual se requiere tambin la
intervencin de los ARNt. El trabajo de los ARNt
consiste en tomar a los aminocidos de citosol y
conducirlos al ribosoma. La sntesis de protena
comienza con la unin entre s de dos aminocidos
y continua con el agregado de nuevos aminocidos.
La sntesis de protenas se divide en tres etapas,
llamadas de iniciacin, de alargamiento y de
terminacin.

Inicien la traduccin del ARNm obtenido del


proceso de transcripcin en el procedimiento IV.
Hagan acoplar los tripletes de ARNt (anticodones)
a los codones del ARNm y construyan la secuencia
de
aminocidos
correspondientes
para
la
informacin gentica, utilizando para cada codn
la informacin contenida en la figura 7.
Al finalizar la lectura de cada triplete (codones)
obtendrn
la
secuencia
de
aminocidos
del
polipptido. As concluye la sntesis de protenas
en los ribosomas.

E.P INGENIERIA AMBIENTAL Y FORESTAL

39

UNAJ

IV.

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RESULTADOS

Registre la secuencia de los 60 desoxirribonucletidos, que


construy como condicin previa para el inicio de la
prctica.
.

A la secuencia de los 60 desoxirribonucletidos, aada la


tira complementaria
.

Esquematice la secuencia de ribonucletidos que obtuvo del


proceso de transcripcin (ARNm).
A

Esquematice la secuencia de
proceso de traduccin del ARNm

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aminocidos

que

obtuvo

del

40

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Protena

V.

CUESTIONARIO
Identifica la secuencia de aminocidos correspondientes
al siguiente fragmento de ADN
TATCCGATGCAAACCGAATACCCGGGGCGGAATGGCCAGATATGGTATTATCACC
CGGGGCGGAATGGCCAGATATGGTATTATC

Qu entiende por replicacin y traduccin?


.
.
.
.
VI.

BIBLIOGRAFIA
Robertis J.H. 2001. Fundamentos de Biologa Celular y
Molecular. 4ta. Edicin. Editorial el Ateneo.
Buenos Aires, Argentina. 442 pp.

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