Prctica 9: OBTENCION DE GLUCOGENO A PARTIR DE HIGADO DE RATA Y SU

CARACTERIZACION QUMICA
Solucin

Molish

Seliw.

INTRUDUCCIN:
HCl 1N
P
A
Los principales
polisacridos de
HCl 2N
P
A
almacenamiento son la
amilosa, la amilopectina
HCl 6N
P
A
y el glucgeno. El
Am. co.
P
A
glucgeno corresponde
a las clulas animales y
Am. 1:2 P
A
microbianas, y se
almacena en grnulos
Agua
P
A
dentro de las mismas; se Glucg. p
A
deposita en el hgado y
no hid.
tambin puede
encontrarse en el msculo. El glucgeno es un
polmero de la D-glucosa muy ramificado (cada
8 unidades), lo que le permite que cumpla la
funcin de almacenaje eficientemente. Cuando
se necesita glucosa, se separa enzimticamente
una, tres o cinco unidades de glucosa del
polisacrido, dejando la dems estructura
intacta. Este corte enzimtico se realiza sobre
los extremos no reductores del glucgeno. La
estructura del glucgeno es tal que existen
muchos extremos no reductores que pueden
engancharse simultneamente, lo que le permite
adems de tener varios puntos de corte, la
rpida movilizacin de glucosa cuando esta se
necesite.

Objetivos:
-Obtener glucgeno a partir de material crudo
-Realizar la caracterizacin del producto
mediante reacciones qumicas

Fehl.

Nin.

Yodo

Biure
t
N

Gramos de
glucgeno
obtenido: 0.231 g
por 16 g de
hgado;
%glucgeno:
1.44%

N
N

N
N

N
N

P
P

Tabla de
reacciones

Resultados:

desarrollada, las prdidas en los distintos

momentos de purificacin y el estado del animal
sacrificado.

Conclusiones:
-La hidrlisis de glucgeno se lleva a cabo
eficientemente con alfa amilasa y HCl
-El glucgeno es un polisacrido ramificado
compuesto por aldosas reductoras (unidades de
D-glucosa).

P=Positivo; N=
negativo; A= Aldosa

Discusin de resultados:
Las pruebas se realizaron sobre soluciones con
glucgeno ya preparado, por lo que no se puede
hablar de una caracterizacin del producto
obtenido del material crudo, sin embargo, las
condiciones fueron iguales para ambas
extracciones, por lo que se puede asegurar
poseer las mismas caractersticas que el
producto obtenido. Las reacciones realizadas
indican que se trata de un carbohidrato
compuesto de unidades de aldosa, que adems
poseen capacidad reductora. Tambin
observando los resultados de la prueba de yodo
se observa que los hidrolizados con cido y
amilasa en diferentes concentraciones son
efectivos para realizar la hidrlisis de glucgeno,
mientras que el agua no pudo cumplir el
cometido. Los factores que afectaron la
obtencin de glucgeno fueron: la tcnica

Alumnos:
Flores Hernndez Carlos I.
Garca Mrquez Reynaldo
3IM2

Seccin: 3

Prctica 9: OBTENCION DE GLUCOGENO A PARTIR DE HIGADO DE RATA Y SU

CARACTERIZACION QUMICA
2.- Extraer rpidamente el hgado y lavarlo
Se lava para no tener restos de sangre que
puedan afectar la obtencin de glucgeno.

Obtencin de Glucgeno:

1.- Sacrificar una rata con cloroformo

Este es un punto crtico ya que si asustamos al
animal este producir adrenalina y gastara su
glucgeno.

3.- Pesar el hgado

4.- Colocar los pedazos de hgado y macerar
con arena previamente lavada y cido
tricloroacetico (TCA) al 10% en proporcin
de 1 ml/g en un mortero hasta formar una
pasta, centrifugar a 2000 rpm por 5 minutos
decantar el sobrenadante en un vaso de
precipitados.
La arena nos sirve para poder triturar mejor el
hgado, el TCA nos sirve para poder hidrolizar
el hgado y para que se puedan precipitar los
cidos nucleicos, protenas y la arena as que lo
que nos interesa es el sobrenadante ya que este
contiene el glucgeno.
5.- Lavar el mortero con TCA 5% y con este
resuspender el precipitado anterior y
centrifugar a 2000 rpm por 5 minutos
decantar en el vaso de precipitados del paso
anterior.
El mortero se lava con TCA de menor
concentracin porque en el mortero no tenemos
ya mucho que hidrolizar.

6.-Con 2 ml de etanol por cada ml de

sobrenadante obtenido se hace precipitar el
glucgeno y se centrifuga a2000 rpm por 5
minutos se desecha el sobrenadante y se
resuspende con 5 ml de H2O y 10 ml de
etanol se vuelve a centrifugar a 2000 rpm por
5 minutos se decanta y se recibe el
glucgeno en una charola de aluminio.
Con el etanol se precipitan polisacridos y
elimina los monosacridos solubles por lo que
ahora nos interesa el precipitado
BIBLIOGRAFA:

Albert L. Lehninger Bioquimica Ediciones

Omega Octava reinmpresion 1984.

Koolman, J. ;"Bioqumica: Texto y atlas", 3

ed., Editorial Mdica Panamericana.
Madrid, Espaa 2004 Van Holde,K.E.;
Mathews, C.K.; Ahern,
K.G.; "Bioqumica"; Editorial Pearson, 3era
Edicin; Espaa 2010