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COLONIAS MICROBIANAS.

GENERALIDADES: Una colonia es una agrupacin de bacterias formada a partir


de la reproduccin de una Unidad Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio
slido; aunque vara de tamao generalmente es visible a simple vista. Una UFC
puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de microorganismos de una
misma especie como en el caso de bacterias que tienen tendencia a permanecer
unidas como los estafilococos o los estreptococos. Las colonias bacterianas tienen
una medida, forma, textura y en algunos casos color caractersticos, que aunque
puede variar de acuerdo al medio en que se encuentren, es constante bajo
condiciones controladas y depende de la especie bacteriana que la forme. Debido
a que las caractersticas de las colonias ocurren en varios grados y combinaciones
dependiendo de las bacterias y son a menudo muy uniformes, sirven para
identificar bacterias en cultivos mezclados. Sin embargo, adems de stas
caractersticas se requiere tambin estudiar la fisiologa y propiedades
inmunolgicas de las bacterias para poder realizar una identificacin completa.
La morfologa colonial es comparable a una estadstica ya que se deriva de una
clula individual pero es la caracterstica de la masa celular. As pues, por ejemplo,
la pigmentacin es aparente en la colonia, pero no en la clula individual, en el
caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de la sustancia
capsular en aquellas bacterias con cpsula muy grande. Medida de las colonias.
sta caracterstica es bastante constante dentro de las especies y puede ir desde
colonias muy diminutas hasta un dimetro de varios milmetros.
Forma. Est determinada por su borde y su espesor.
Consistencia y textura. La consistencia de las colonias puede variar desde una
colonia seca que puede moverse sobre el agar con el asa, hasta una colonia
viscosa que se pega al asa y forma filamentos o hilos mucosos cuando se trata de
separarla del agar. La superficie puede ser uniformemente brillante y suave o
puede ser estriada con muescas concntricas o quebradas. Al examinar la colonia
con luz transmitida puede aparecer con textura granular o amorfa.
Pigmentacin. Esta caracterstica es muy comn en las bacteria saprfitas en las
que las colonias aparecen rojas, anaranjadas, amarillas, etc. De los
microorganismos patgenos uno de los pigmentados ms importantes es
Staphylococcus aureus que tiene un color amarillo dorado. El pigmento no se
aprecia en las clulas individuales a que se debe a grnulos intracelulares muy
pequeos para verse con luz transmitida.

Recuente bacteriano .
recuento microscopico: Es una tcnica comn, rpida y barata que utiliza un
equipamiento fcilmente disponible en un laboratorio de microbiologa. Para estos
recuentos se utilizan generalmente cmaras de recuentos, aunque tambin

pueden realizarse a partir de muestras filtradas en membranas


transparentizadas o teidas con colorantes fluorescentes (Naranja de acridina).

La mayor dificultad del recuento en cmara es obtener reproductibilidad en el


llenado de la cmara con lquido. Otra dificultad es la adsorcin de las clulas en
las superficies del vidrio, incluyendo pipetas. Esta adsorcin es crtica en el
proceso de dilucin de la muestra y se minimiza al realizar las diluciones en
medios de alta fuerza inica (solucin fisiolgica o medios mnimos sin fuente de
carbono).
Las cmaras ms utilizadas son las de Hawksley y la de Petroff-Hausser. La
primera tiene la ventaja que puede ser utilizada con objetivos de inmersin,
aunque la mayora de los recuentos se realizan con objetivos secos. Una de las
mayores ventajas del recuento microscpico es brindar informacin adicional
sobre el tamao y la morfologa de los objetos contados.

Camara de recuento de Petroff-Hausser

Tipo de cuadro

Area
[cm2]

Volumen
[ml]

Factor
[1/Volumen]

Cuadrado total

1.00 x 10-2

2.00 x 10-5

5.00 x 104

Cuadrado grande

4.00 x 10-4

8.00 x 10-7

1.25 x 106

Cuadrado pequeo

2.50 x 10-5

5.00 x 10-8

2.00 x 107

1/Dilucin: Inversa de la dilucin utilizada para llenar la cmara de


recuento.

Nmero de cuadrados contados: Cantidad de cuadrados de la cmara


que se utilizaron para contar un el nmero de bacterias.

Volumen del cuadrado: Volumen de cada cuadrado de la cmara.


Depende del tipo de cuadrado en donde se realiz el recuento. Por ejemplo,
cada cuadrado pequeo tiene un volumen de 5 x 10-8 ml (50 m x 50 m x
20 m = 5 x 104 m3 = 5 x 10-8 ml).