7

Absorcin cle Sales Minerales

En captulos anteriores se explic cmo se desplaza el agua hacia dentro y fuera
de los vegetales, as como en su interior, y de qu manera la osmosis es fundamental
para el movimiento del agua. Vimos que en general conviene pasar por alto el
movimiento de solutos a travs de membranas, debido a que es mucho ms lento;
ste es un enfoque que permite elaborar explicaciones simples de lo que es la
osmosis. Y en efecto, la osmosis no podra ocurrir si el movimiento del agua no fuera
mucho ms rpido que el de solutos.
Empero, los solutos se mueven de clula a clula y de un organelo celular a
otro, movimiento que es esencial para la vida. Las molculas de H20 y de los gases
atmosfricos CO y 02 aportan carbono, oxgeno e hidrgeno, pero los otros 14
elementos que son esenciales para los vegetales se absorben del suelo como iones,
en un proceso correctamente llamado extraccin de solutos. As como las hojas
deben absorber carbono del C02 que se encuentra en la atmsfera a bajas concentraciones, tambin las races tienen que absorber sales minerales esenciales que
se encuentran a bajas concentraciones en la solucin del suelo. En este captulo se
estudian las propiedades anatmicas y morfolgicas de las races que les permiten
absorber dichas sales minerales de manera eficaz. Tambin se describen las
propiedades de las membranas que controlan la velocidad de absorcin. Por ltimo,
se analizan algunas teoras e hiptesis acerca del movimiento de solutos a travs de
las membranas.

7.1 Las Races como Superficies Absorbentes

Los vegetales resuelven el problema de la absorcin de ; agua y elementos minerales
que a menudo son escasos del suelo produciendo grandes sistemas radicales. Si
bien en muchas plantas las races slo representan del 20 al 50% de su peso total, en
algunos casos (sobre todo cuando las plantas se hallan estresadas por insuficiencia
de agua o nitrgeno mineral) hasta un 90% de la biomasa vegetal total se encuentra
en las races (Fig. 7-1). Por otra parte, cuando las plantas de trigo se cultivan por
mtodos hidropnicos y con un aporte adecuado de agua y mucho nitrgeno, slo
del 3 al 5% de la biomasa vegeta) se halla en las races (Bugbee y Salisbury, 1988).
La forma general de los sistemas radicales es controlada principalmente por
mecanismos genticos, ms que ambientales. As, los pastos tienen races muy ramificadas y fibrosas que crecen cerca de la superficie del suelo, aunque las races de
pastos perennes alcanzan una mayor profundidad que las de especies anuales
relacionadas. Muchas dicotiledneas herbceas perennes (no leosas) poseen una
raz primaria dominante que puede alcanzar varios metros de profundidad (la alfalfa,
por ejemplo), aunque la raz primaria dominante en la mayora de las especies es
ms corta (zanahoria, remolacha, diente de len y cardo canadiense, por ejemplo).
Otras dicotiledneas herbceas comunes como la soya y el tomate tienen sistemas
radicales con una raz primaria que es difcil de diferenciar de races ramificadas. Lo
mismo ocurre con muchos rboles y arbustos, tanto gimnospermas como angiospermas, si bien la morfologa de la raz en ciertos rboles puede ser muy compleja, en
especial en pinos (Kramer y Kozlowski, 1979). Las races por lo comn se extienden
mucho ms lejos del tronco que las ramificaciones que crecen por encima del nivel
del suelo.

Figura 7-2 Proliferacin de races de cebada en zonas limitadas de arena fertilizada

con fosfato, potasio o nitrato. Las porciones delimitadas por barras de los sistemas
radicales se cultivaron durante 21 das en compartimientos de arena separados con
cera, a travs de la cual las races pueden crecer pero la solucin no fluye. Las
distintas capas se fertilizaron con una solucin de nutrimentos que contena niveles
altos (A) o bajos (B) del elemento en cuestin. Los controles (AAA) recibieron niveles
elevados de los elementos en las tres capas. Las plantas expuestas a niveles variantes
de potasio mostraron escasa proliferacin en la capa central, bien fertilizada, pero se
encontr que la arena lavada por cido aportaba K f . (Tomado de Drew, 1975.)

Figura 7-1 Porcentaie de biomasa en sistemas radicales de plantas perennes en

diversos ecosistemas. En el bosque deciduo domin Liriodendron tulipifera (tulipero);

en la planta cin de pino, Pinus SYlvestris (pino escocs), y en el matorral (desierto

templado), Atriplex confertifolia. Los da tos para la tundra rtica provienen de Alaska, y
para la sabana de pastos cortos, de las Praderas Pauni (Pawnee Grassland),
localizadas en el noroeste del estado norteamericano de Colorado. (Modificado de
Caldwell, 1987.)

Aun cuando la morfologa de la raz es controlada genticamente, tambin

influye el entorno edfico (Klepper, 1987). Por ejemplo, cuando los suelos son secos,
muchas especies destinan relativamente ms bio- masa a las races, por lo que la
proporcin raz-parte area es mayor que cuando el suelo est hmedo. Adems, los
patrones de ramificacin de las races son ms variados que los de la parte area. Si
un suelo superficial es slo una capa delgada que cubre una base slida de arcilla o
roca, las races no pueden crecer a mucha profundidad, por lo que se extienden de
manera lateral cerca de la superficie. En esencia, las races crecen donde pueden,
por lo que tambin son factores importantes impedancia mecnica, temperatura,
aireacin y disponibilidad de agua y sales minerales. En regiones hmedas y frtiles,
las races proliferan de manera extensiva (Fig. 7-2) hasta que se agotan el agua o los
nutrimentos (Drew, 1975, 1987; Granato y Raper, 1989). Despus de que agua y
nutrientes se agotan, las races crecen hacia nuevas regiones del suelo mediante la
formacin de ramificaciones adicionales o races alimen- tadoras. Si el agua est ms
disponible a mayor profundidad en el suelo, las races por lo general crecen muy por
debajo de la superficie. De cualquier forma, los vegetales que se encuentran
adaptados a regiones secas no necesariamente cuentan con races profundas, ya que
pueden resultar ms convenientes los sistemas radicales superficiales para
aprovechar las breves lluvias intermitentes. De hecho, los sistemas radicales de
algunas especies proliferan tanto cerca de la superficie del suelo como a
profundidades considerables, con unas pocas conexiones largas y casi sin minificar
entre estos dos tipos; es probable que estos sistemas representen adaptaciones a
climas variables.
Poco se sabe de las propiedades de las races en los suelos, debido a que su
observacin es difcil. Estudios cuidadosos muestran que las races ramificadas de
cultivos anuales se elongan slo durante unos pocos das, y que las de especies
perennes viven un ao o ms antes de desintegrarse. Algunos arbustos del desierto
reemplazan hasta un cuarto de su sistema radical cada ao, absorbiendo agua y sales
minerales de nuevos sitios por medio de races nuevas. La prdida anual de la raz en
los pastos perennes ocurre a menor velocidad que en los arbustos perennes, y la
retencin de races viejas durante varios aos contribuye a la notable capacidad de
los pastos de impedir la erosin del suelo. No se sabe mucho acerca de Ja muerte y
el reempla-

Figura 7-3 Pelos radicales presenteSjen (a) cardo ruso, (b) tomatojjlc) lechuga, (d)
trigo, (e) zanahoria y ausentes en cebo'la (f). (Tomado de S. Itoh y S. A. Barber,
Agronomy Journal, 1983, con permiso de la American^S.Ocety of Agronomy.)

zo de las races en los rboles, pero informes.resumidos por Sutton (1980) indican
que un pino escoces (Pimis sylvestris) de 100 aos de edad tiene cinco millones de
puntas de raz y que un roble ro'j'b (Quercus rubruni) tiene 500 millones de puntas
vivas, ldcual revela la vastedad de estos sistemas radical;.
La forma cilindrica y filamentosa de las races tiene una importancia inusitada
para la absorcin de agua y sulutos del suelo. Un cilindro posee mayor resistencia
por unidad de rea transversal que otras formas; esta configuracin (junto con una
caliptra protectora) ayuda a las races en crecimiento a hacer a un lado partculas de
suelo sin que la raz se rompa. La forma filamentosa de las racgs les posibilita
explorar un volumen de suelo mucho mayor por unidad de volumen radical que si
fuesen esfricas o discoidales (Wiebe, 1978). La exploracin de grandes volmenes
de suelo importante cuando la$ races tienen que crecer hada donde hay iones y
agua. Cuando los suelos son hmedos (ms o menos a su capacidad de campo), la
difusin hacia las races es razonablemente rpida, pero cuando los suelos se secan
hasta alcanzar un potencial hdrico cercano a 1.5 MPa (un punto de marchitez
Comn), la difusin de agua y iones disueltos puede disminuir en un factor de 1 000
(vase la Secc. 5.4). As, los vegetales experimentan dificultad de obtener agua y
iones minerales por dos razones: exploracin limitadla del suelo por las races y
difusin limitada de ione? y agua hacia la raz.
Adems de las races filamentosas, los pelos radicales contribuyen a la
absorcin de agua y iones. Cada pelo radical es una clula epidrmica modificada
con una prolongacin filamentosa de hasta 1.5 mm de longitud (Dittmer, 19(42).
os pelos radicales'cncen justo detrs de la breve regin derelongaaon cercana a la
punta de la ra?; la regin que lo^ontien con frecuencia mide menos de I cm de
longitud. En ausencia de .suelo pero bajo condiciones adecuad;!^ de humedad y
aireacin, algunas plantas.rforman un sistema de pelos radicales de extn^jrdinaria
extensin. No obstant^el grado de formacin de pelos radicales en los suelos
depende dla especie y con frecuencia es minimizado por micro- bieg-y
determinadas caractersticas del suelo. En la Fig. 7-3 se ilustran pelo?radicales de
diversas angibspermas cultivadafen suelo^En general, los pelos radicales son ms
frecuentes y abarcan una mayor superficie de la raz cuando el suelo es
moderadamente seco que cuando est hmedo, pero si el suelo es demasiado seco,
los pelos radit-alesfse dosocan y mueren. En el^artculo de^visin de Sutton

(1980)#eseala que, si bien algunas ^inferas poseen pelos radicales, otras probablemente tienen pcos o ninguno. La presencia de micorrizas, en especial
ectomicorrizas, minimiza la formacin de estos peloren coniferas y otras especies.
Enseguida se describen las micorrizas.

7.2

Micorrizas

Es comn estudiar las estructuras radicales en plantas cultivadas en invernadefo.

Pero las races jvenes de la mayora de lf^especies sil\,estrgs (quiz el 97%) son
algo diferentes debidoia que hongos presentes^en loe; suelosHnativos las infectan
^forman micorrizas. Una mi- corriza (raz mictica) es una 'asociacin simbitica
(estrecha) y mutualista (mutuamente benfica) entre un hongo no patgeno, o poco
patgeno,y clula& vivas de la raz,^obre todo clulas corticale^y epidrmicas. Los
hongos reciben nutrimento 9rgnics de la planta a la vez? que mejoran la
absorcin de agua y minerales por la raz?-Generalmente los hongos slo infectan
races juveniles tiernas. La produccin de pelos radicales disminuye o pesa con la
infeccin, por lo que las micorrizas con frecuencia tienen pocos de dichos pelos.
Esto reducira mucho la,superfioie de absorcin de no ser porque el volumen
demuelo que,;Sfi penetra es incrementado en gran medida por las delgadas hifas micticas que se extienden desde la micorriza. Las hifas asumen las funciones
absorbentes.de los^pelos radicales.
Se reconocen dos grandes grupos de micorrizas: Las ectomicorrizas y las
endomicorrizas, aunque en ocasiones s puede encontrar un grupo poco comn con
propiedades intermedias, las micorrizas ectendotrficas. En las ectomicorrizas, las
hifas micticas forman un manto tanto fuera como dentro de la raz, en los espacios
intercelulares de epidermis y corteza. No hay penetracin intracelular hacia las
clulasiepidrmicas o de la corteza, pero s se forma entre stas clulas una extensa
red

Figura 7-4 Ectomicoiriza formada entre Pinus taeda y el hongo Thelephora terrestris.
Ntense el manto externo (1) y la red de Harting (2) entre las clulas. (Cortesa de C. P.
P. Reid.)

Figura 7-5 (a) Micrografa electrnica de barrido de races dicotrriicas y pelos radicales
de Pinus contorta. Ntese la ausencia de un manto mictico. (b) Micrografa
electrnica de barrido de ectomicorrizas de Pinus contorta inoculadas con
Cenococcum graniforme. (Cortesa de John G. Mexal, Edwin L. Burke y C. P. P. Reid.)

llamada red de Hartig (Fig. 7-4). Las ectomicorrizas son comunes en los rboles,
incluyendo miembros de las familias Pinaceae (pino, abeto, alerce, tsuga), Fagaceac
(roble, haya, castao), Betulaceae (abedul, aliso) Salica- ceae (sauce, lamo) y otras
pocas. En la Fig. 7-5 se muestran micrografas electrnicas de barrido de dos races
de Pinus contorta, una sin infectar, con pelos radicales, y la otra infectada por un
hongo ectomicorrcico.
Las endomicorrizas forman tres subgrupos, pero con mucho el ms comn de
stos es el de las micorrizas vesiculares arbusculares (VAM, por sus siglas en ingls).
Los hongos presentes en las VAM son miembros de la familia Endogonacae y
producen una red interna de hi- fas entre las clulas corticales que se extiende hasta
el suelo, de donde las hifas absorben agua y sales minerales (revisado en Safir, 1987;
Hadley, 1988; y Smith y Gianinazzi-Pearson, 1988). Aunque los hongos VAM parecen
penetrar de manera directa en el citosol de las clulas corticales (donde forman
estructuras denominadas vesculas y arbsculos, de donde toman su nombre), las
hifas se encuentran rodeadas por una membrana plasmtica invaginada de las
clulas corticales. Las VAM se presentan en la mayora de las especies de
angiospermas herbceas, sean monocotile- dneas o dicotiledneas, cultivos
anuales o perennes, o especies nativas o introducidas; tambin se presentan en los
gneros de gimnospermas Ctipres- sus, Thuja, Taxodium, Juniperus y Sequoia, as
como en helechos, licopodios y briofitas.
La parte mictica de ambos tipos de micorriza recibe azcares de la planta
hospedante, mientras que las plantas que crecen en la sombra y tienen deficiencia
de azcares presentan, como es de esperar, un escaso desarrollo de micorrizas.
Adems, las plantas que crecen en suelos frtiles a menudo tienen micorrizas menos
desarrolladas que las de plantas silvestres que crecen en suelos infrtiles. La mayor
parte de la ventaja bien documentada que proporcionan las mico- rrizas

consiste en una mejor absorcin de fosfato, aunque con frecuencia tambin se ve

incrementada la absorcin de otros nutrimentos. Tal vez el mayor beneficio que
proporcionan las micorrizas es el incremento en la absorcin de iones que
normalmente se difunden con lentitud hacia el interior de las races o que son muy
requeridos, en especial fosfato, NIV, K + y N03~. Las micorrizas confieren grandes
beneficios a rboles que crecen en suelos infrtiles (Fig. 7-6). I De hecho, sin las
propiedades de absorcin de nutri-I mentos de las micorrizas, muchas comunidades
der-l boles no existiran. Por ejemplo, algunos pinos! europeos introducidos en
Estados Unidos crecieron pal co hasta que fueron inoculados con hongos micorrci-|
eos tomados del suelo nativo de dichos pinos. Existe! un potencial considerable para
poblar ciertas reas del desechos minerales, rellenos sanitarios, orillas de carre-l
teras y otros suelos infrtiles mediante la introduccin! de plantas inoculadas con
hongos capaces de formatl micorrizas (Marx y Schenk, 1983). Vendrn mayor
Figura 7-6 Promocin del crecimiento de junperos (Junperas osteosperma) de seis

meses de edad por formacin de micorri- zas. Las plantas se cultivaron en condiciones
idnticas en una cmara de cultivo. Slo las tres plantas de la derecha tenan micorrizas. (Cortesa de F. B. Reeves.)

contribuciones de las micorrizas a la agricultura y silvicultura a medida que

aprendamos ms acerca de estas asociaciones; en la actualidad este campo de
conocimiento est en rpido desarrollo.

| 7.3 Transporte de Iones a la Raz

las sales minerales que estn disponibles con mayor facilidad para las races son
las que se encuentran disuel- ; tas en la solucin del suelo, si bien su
concentracin suele ser baja. Como se mencion en el Cap. 6, en un ttudio con
ms de 100 suelos agrcolas a su capacidad decampo o cerca de ella, ms de la
mitad tenan concentraciones de NO^- disuelto menores de 2 mM, de | fosfato
menores de 0.001 mM, de K+ menores de 1.2 mM y de SC>42~ menores de 0.5 mM
(Reisenauer, 11966). Los suelos agrcolas son ms frtiles que cual- quier clase de
suelo de bosque. Aun as, las concentra- :dones de los nutrimentos anteriores en
plantas ^Cultivadas pueden llegar a ser de 10 a 1 000 veces su concentracin en el
suelo. Dichos nutrimentos llegan l ias races de tres maneras: difundindose a
travs de absolucin del suelo, por acarreo pasivo junto con el Sagua que entra en
las races por movimiento en masa,
O por crecimiento de las races hacia ellos.
[ Las sales minerales pueden ser absorbidas y trans- KpQftadas a partir de regiones
de la raz que contienen F^dos radicales y de regiones mucho ms antiguas que jjt
encuentran a varios centmetros de la punta de la raz PQarkson y Hanson, 1980;
Drew, 1987). Las micorri- rafcnose han investigado tanto como las races no miKttfrcicas, pero absorben nutrimentos con rapidez en Rfecercanas de las puntas
donde se concentran las hi- pjsmicticas, y un poco menos rpido en regiones ms
Bllguas. Los pices radicales con frecuencia se encuen- Pn expuestos a
concentraciones superiores de sales K&nerales disueltas que las regiones ms

antiguas, ya que restas ltimas se hallan en partes del suelo que ya han Hno
exploradas por puntas de races en crecimiento.
En la Secc. 5.3 se examin la ruta del movimiento del agua en regiones juveniles
de races no micorrci- cas, en relacin con rutas apoplsticas y simplsticas. En
esencia, la ruta del apoplasto implica difusin y flujo masivo de agua, de clula a
clula, a travs de los espacios que hay entre los polisacridos de la pared celular. En
esta agua se transportan sales minerales esenciales y no esenciales. Alguna vez se
pens que la ruta del apoplasto siempre abarcaba desde los pelos radicales u otras
clulas epidrmicas hasta la endodermis, en donde la banda de Caspary de la
endodermis, impermeable al agua, forzaba la entrada de sustancias a las clulas
endodrmicas, a travs de sus membranas plasmticas. Esta teora implicaba que las
membranas plasmticas de las clulas endodrmicas representaban un ltimo punto
en donde la raz ya no controlaba la entrada de soluto disuelto alguno. Esta teora
an parece correcta para muchas especies (quiz todas), en el sentido de control
final. En la Fig. 7-7 se muestra esa ruta del apoplasto hacia la endodermis, as como
una ruta del simplasto desde una clula de pelo radical hasta la endodermis y a
travs de sta hasta clulas muertas del xilema, sin membrana plasmtica alguna. Sin
embargo, como se mencion en la Secc. 5.3, las races de muchas angiospermas
tienen otra banda de Caspary en la hipodermis (la cual se revisa en Peterson, 1988;
Shish- koff, 1987). Peterson (1988) define como exodermis una hipodermis que
posee una banda de Caspary. Esta banda se desarrolla y madura a una mayor
distancia de la punta de la raz (hasta 12 cm) que la banda de la endodermis, por lo
que puede existir en regiones medianamente antiguas de races primarias que an
no pierden sus clulas externas. Esta exodermis restringe el movimiento de
colorantes y iones sulfato hacia la corteza, por lo que cuando se presenta debe
constituir un punto de control importante que fuerza a que solutos del exterior sean
absorbidos por la selectiva membrana plasmtica de las clulas exodrmicas. Una
vez dentro del citosol de la exodermis, los iones pueden desplazarse de una clula a
otra hasta el xilema, va una ruta simplstica.

Figura 7-7 Aspectos anatmicos de las rutas simplstica y apo- plstica para la
absorcin de iones en la regin de los pelos radicales. La ruta simplstica implica
transporte a travs del cito- sol (contorno punteado) de las clulas que se hallan
camino al xilema no vivo. En la ruta apo- plstica el movimiento se da a travs de la red
de paredes celulares hasta la banda de Caspary, a partir de donde se toma la va del
simplasto. La banda de Caspary de la endodermis se muestra slo como aparecera en
los lmites de las paredes (las paredes por encima o debajo del plano del corte).
(Redibujado de K. Esau, 1977.)

Cuando una clula epidrmica absorbe un ion y este se mueve hacia el xilema
por la va del simplasto, dicho ion primero debe atravesar la epidermis, en seguida tal
vez una exodermis, varias clulas corticales, la endodermis y, por ltimo, el periciclo.
Cualquier movimiento de este tipo, de una clula viva a otra, puede implicar un
transporte directo a travs de cada una de las dos paredes primarias, la lmina media
compartida y las membranas plasmticas de clulas adyacentes. De manera
alternativa, el ion puede pasar a travs de plas- modesmos, estructuras tubulares
que atraviesan paredes celulares adyacentes y la lmina media de casi toda clula
vegetal viviente (revisado en Robareis, 1975; Gunning y Overall, 1983; Robards y
Lucas, 1990; vase tambin la Secc. 1.4). Es comn que la densidad de plasmodesmos sea mayor de un milln por milmetro cuadrado. En la Fig. 7-8 se
muestran tres micrografas electrnicas de plasmodesmos.
En su parte externa cada plasmodesmo consiste en un tubo formado por
membrana plasmtica que se contina entre las dos clulas adyacentes. En el
interior de este tubo de membrana plasmtica se encuentra otro tubo denominado
desmotbulo, que es una porcin comprimida del retculo endoplsmico que
atraviesa de una clula a otra. As, hay un tubo de membrana inserto en otro tubo.
Algunas investigaciones indican que el desmotbulo central se halla obstruido, por
lo que los solutos no pueden pasar de manera directa a travs de l, sino slo entre l
y la membrana plasmtica; esto es, los solutos se desplazan en el espacio que hay
entre un tubo y otro. Aun cuando es probable que los plasmodesmos contribuyan al
movimiento de solutos entre las clulas, tambin hay movimiento directo a travs de
otras regiones de la membrana; ms adelante regresaremos al movimiento directo a
travs de las membranas.
Cualquiera que sea la ruta a travs de la raz del suelo al xilema, los iones que se
transportan hacia la parte area de alguna manera deben entrar a las clulas muertas
de conduccin en el xilema, sobre todo elementos de vaso y traqueidas. Esto implica
una transferencia, ya sea desde las clulas vivas del periciclo o desde las clulas del
xilema an vivas, hacia las clulas muertas mencionadas. La evidencia que se ha
obtenido con ayuda de inhibidores de la respiracin (en especial los que bloquean la
formacin de ATP) indica que esta transferencia hacia el xilema conductor requiere
de energa metablica y formacin de ATP. Al parecer esto significa que las clulas
vivas del xilema o del periciclo pueden absorber iones de otras clulas vivas, por un
lado, y secretarlos en las clulas muertas del xilema, por el otro.
En la mayora de los estudios sobre las rutas de absorcin de las races se han
utilizado races jvenes y no micorrcicas, pero nuestro conocimiento de las rutas
apoplstica y simplstica para dichas races deben modificarse para races ms
antiguas y para micorrizas. Para races ms antiguas y para no micorrcicas, cada vez
hay ms informacin que seala la importancia de ambas rutas (Clarkson, 1985;
Drew, 1987).
En fechas recientes se ha prestado atencin tanto a la manera en que las hifas
de los hongos micorrcicos transportan iones a las races micorrcicas, como a la
manera en que estas hifas obtienen solutos orgnicos de la planta. Para averiguar
cmo es que los solutos del suelo penetran en las clulas de la raz, Ashford et al.
(1989) estudiaron ectomicorrizas de Eucalyptus pilu- laris, en las que existe una
ntida red de Hartig. Concluyeron que un soluto primero entra al citoplasma del
hongo y viaja a travs de l hacia la raz por una ruta | simplstica. Luego, como no
hay plasmodesmos u otras conexiones citoplsmicas entre las hifas micticas de
Figura 7-8 Estructura de los plasmodesmos. (a) Cientos de plasmodesmos (puntos
negros pequeos) en una regin co municante primaria en la pared de una clula
endodrmica juvenil de cebada, (b) Dos de estos plasmodesmos a gran aumento,
donde se aprecia su naturaleza tubular, (c) Vista longitudinal de los plasmodesmos a
travs de dos clulas endodrmicas juveniles adyacentes. PM, membranas plasmticas; DT, desmotbulo. (Cortesa de A. W. Robards.)

la red de Hartig y las clulas de la raz, el hongo debe liberar el soluto en el espacio
apoplstico, de donde las clulas radicales lo pueden absorber. Se piensa que las
capas de suberina que hay sobre las clulas exodrmi- cas de la raz fuerzan el inicio
de la entrada del soluto al citoplasma de aquellas clulas, con poca o ninguna
penetracin del soluto a travs de las paredes celulares de la corteza hacia la
endodermis de la raz. As, primero hay absorcin al simplasto del hongo, luego
liberacin hacia un espacio apoplstico, despus absorcin al simplasto de la raz y,
por ltimo, transporte simpls- tico a travs de las clulas de la corteza de la raz
hasta el xilema. Ashford et al. (1989) tambin concluyeron que los solutos (tales
como sacarosa) que se transfieren de la raz a la parte mictica deben penetrar en el
mismo restringido espacio apoplstico, que est virtualmente sellado para otros
organismos. Esta disposicin impide que otros microorganismos del suelo absorban
ya sea iones minerales que estn siendo transferidos del hongo a la raz, o
compuestos orgnicos transferidos de la raz al hongo.

Aunque pueden variar las rutas de transporte de iones en la raz, estos iones
siempre deben penetrar la membrana plasmtica de las clulas vivas de la raz, aun
cuando sean absorbidos primero por una hifa del hongo. Por consiguiente, la
membrana plasmtica representa una barrera importante para la absorcin de iones.
De hecho, la funcin ms importante que realiza una membrana al delimitar
cualquier clula u organelo celular es controlar la composicin de su interior, de modo tal que los procesos propios de la vida puedan ocurrir normalmente, incluso
cuando se dan cambios en sus alrededores. Para entender este control es necesario
entender las membranas.

7.4 La Naturaleza de las Membranas

Como se hizo notar en el Cap. 1, las micrografas electrnicas muestran que la

mayora de las membranas biolgicas son similares, sin importar el tipo de clula u
organelo que estn rodeando (vase la Secc. 1.6). Por lo general tienen de 7.5 a ms
de 10 nm de espesor, y en las micrografas electrnicas de transmisin de alta
resolucin en seccin transversal suelen observarse como dos lneas oscuras
(electrodensas) separadas por una capa ms clara (semitransparente a electrones).
En

Figura 7-9 Aspecto trilaminar del tonoplasto (T) y el plasmalema (PM) en dos clulas de

la punta de la raz de una papa. Tambin se aprecian pared celular (W), citosol (CY) y
parte de la vacuola (V). (Cortesa de Paul Grun.)

la Fig. 7-9 se ilustra esta apariencia triestratificada de la membrana plasmtica y el

tonoplasto en dos clulas apicales de raz de papa.

Figura 7-10 Micrografia electrnica de barrido en la que se aprecia parte de la

membrana plasmtica de una clula radical de chcharo vista en su superficie. La

seccin de raz se congel con rapidez y se seccion mediante una tcnica de
criofractura que rompe la membrana separando la bica- pa. Como resultado, la mitad
de la bicapa que da hacia el citosol est ausente, y slo es visible la porcin adyacente
a la pared celular. Las pequeas protuberancias en la semimembrana plasmtica
corresponden.a molculas de prote na (p). En la parte superior de la figura se aprecian
microfibrillas de celulosa (c) de la pared primaria. (Cortesa de Dan Hess.)

Toda membrana consta en su mayor parte de protenas y lpidos. Casi siempre

las protenas representan de la mitad a dos terceras partes del peso seco de las
membranas. En la Fig. 7-10 se muestra una micrografa electrnica de barrido de una
membrana de clula de raz de chcharo, en una vista superficial. Cuando se seccion el tejido para el microscopio electrnico, la navaja desgarr y separ parte de
la membrana y expuso con claridad las microfibrillas de celulosa de la pared contigua
(dos tercios superiores de la Fig. 7-10). Las pequeas protuberancias en la
membrana (tercio inferior de la Fig. 7-10) representan molculas de protena que

sobresalen de la membrana, proyectndose hacia la lmina media y la pared de la

clula adyacente.
Exisien algunas diferencias en cuanto a contenido de lpidos y protenas entre
plasmalema, tonoplasto, retculo endoplsmico y las membranas de dictiosomas,
cloroplastos, ncleos, mitocondrias y microcuerpos (peroxisomas y glioxisomas). La
composicin de las membranas tambin depende de la especie y el medio. No
obstante, los lpidos principales de todas las membranas vegetales son fosfolpidos,
glicolpidos (unin lpido-azcar) y esterles.
Existen cuatro fosfolpidos abundantes: fosfatidil colina, fosfatidil etanolamina.
fosfatidil glicerol y fosfatidil inositol. Respecto a los glicolpidos, cios son los que
abundan: monogalaclosildiglicrido, con un az car galactosa, y
digalactosildiglicrido, con dos galactosas (Fig. 7-11). (Los glicolpidos se encuentran
sobre todo en membranas del cloroplasto, en las cuales los fosfolpidos son mucho
menos abundantes.) Las estructuras de todos estos lpidos tienen algunas
caractersticas en comn, que son importantes para la estructura de la membrana.
La primera de estas caractersticas es que dichos l- pidos tienen un esqueleto
de glicerol (a la izquierda de cada estructura en la Fig. 7-1 1) al cual se esterifican dos
cidos grasos de cadena larga (por lo comn con 16 o 18 tomos de carbono). La
mayora de estos cidos grasos tienen uno, dos o tres dobles enlaces, casi siempre
en la configuracin cis. El punto de fusin de los cidos grasos se incrementa un
poco con la longitud de la cadena, pero disminuye de manera sustancial con el
nmero de dobles enlaces presentes; as, las membranas con cidos grasos que
contienen dos o tres dobles enlaces son mucho ms fluidas que las que tienen uno
o ningn doble enlace. En el Cap. 26 se describen las implicaciones ecolgicas de
esta caracterstica.
Todos los cidos; grasos son hidrfobos (repelen al agua), mientras que el
esqueleto de glicerol (con sus tomos de oxgeno) es ms hidrfilo (afn al agua)
porque los oxgenos pueden formar puentes de hidrgeno con el agua. La porcin
final de estos lpidos (en la parte inferior de cada estructura en la Fig. 7-11) tambin
es hidrfila. Este carcter hidrfilo se debe a que dicha porcin est cargada
elctricamente o tiene uno o ms oxgenos que son atrados hacia el agua por
puentes de hidrgeno. Las molculas que poseen regiones hidrfobas e hidrfilas
diferentes se denominan molculas antipticas.

^fidtira 7-11 Estructuras de fosfolpidos y glicolpidos abundantes en la membrana pas-

|*mt(ca. El subndice n en los cidos grasos representa un nmero variable de grupos

CH j'OQrupos qu1: contienen tomos de carbono insaturados (por lo comn 14 o 16).

odas las membranas, las porciones hidrfilas de pido se disuelven en

el agua, en uno u otro de : lados de la superficie de la membrana, pero las nes

hidrfobas de cidos grasos, que son repeli- r el agua, son forzadas hacia la'partc
interior de ibrana. En este interior hidrfobo se asocian cn- nediante fuerzas de van
der Waals. Las fuerzas la c hidrfoba en los fosfolpidos y glicolpidos que la
membrana se convierta en una bicapa, co- pone de relieve en el modelo del mosaico
fluido estructura de la membrana que se muestra en 7-12. Los esterles tambin son

anfipticos, deque poseen tanto una porcin hidrfoba larga, carbono e hidrgeno,
como una parte hidrfita ia(un grupo hidroxilo, que en la Fig. 7-12 se reta como
crculos). Las estructuras de los grandes es y cidos grasos se muestran en el Cap. 15
(Fig. Tabla 15-1), mientras que en la Fig. 7-12 se mues- anera en que,
probablemente se articulan en la ura de la membrana.
antidad de esterol en las membranas vara mu- n la especie. Por ejemplo, tomando
en conside- nada ms la membrana plasmtica, se han ado valores de 2.2 para la
proporcin de esterles a fosfolpidos en races de cebada, mientras que para hojas
de espinaca la proporcin fue de slo 0.1 (Rochester et al., 1987). Parece ser que la
funcin principal de los esterles en las membranas es la de estabilizar el interior
hidrfobo e impedir que se vuelva demasiado fluido con el aumento de la
temperatura.
Hasta donde se sabe, las protenas de las membranas son de tres tipos:
protenas catalticas, protenas que forman canales de solutos, y transportadores
protein- ceo.s. Las protenas catalticas (enzimas) utilizan energa para bombear
protones (H') a travs de las membranas; las ms abundantes de estas protenas son
enzimas que catalizan la hidrlisis de ATP rico en energa a ADP, menos energtico y
H>PO,_. Estas enzimas que hidrolizan ATP se conocen como ATPasas. Al parecer, en
cualquier organismo toda membrana tiene cuando menos una ciase de ATPasa, cuya
funcin principal en las membranas es liberar la energa del ATP para el transporte
de iones y otros solutos a travs de la membrana, contra un gradiente de energa
libre. Las protenas de las membranas que bombean iones contra este gradiente se
denominan bombas de iones.

Figura 7-12 Modelo de mosaico fluido para la estructura de la membrana. Una bicapa

de lpidos, como los que se muestran en la Fig. 7 11, proporciona estabilidad a la

membrana mediante la asociacin de las cabezas hidrfitas de los lpidos con
molculas de H20 en cualquiera de las dos superficies y la asociacin de cidos grasos
(hidrfobos) en el interior de la membrana. Los esterles tambin poseen una cabeza
hidrfita relativamente pequea (constituida por un grupo hidroxilo) y una porcin
hidrfoba ms larga. Las protenas pueden continuarse a travs de toda la membrana
o encontrarse en cualquiera de ambos lados. La mayora de las membranas contienen
muchas ms protenas de lo que sugiere esta ilustracin. Algunas protenas son
glicoprotenas con pequeos polisacridos, como se muestra en la parte superior del
modelo.

Son varias las clases de protenas que forman los canales de solutos. Cada canal
posee un orificio entre las
molculas de protena, por donde se difunden los solutos para atravesar la
membrana. Algunos canales s
lo permiten la difusin de un ion, digamos K', mientras que otros son menos
especficos y permiten que tanto malato como K+ atraviesen la membrana de manera
simultnea; otros ms son permeables a varios solutos. Una propiedad importante
de los canales de solutos es que son regulados por una compuerta, de manera que
los agujeros pueden ser abiertos o parcialmente abiertos, lo que depende de las
condiciones celulares.
Hay numerosas pruebas indirectas de la existencia de portadores proteinceos
en las membranas vegetales; probablemente funcionan combinndose primero con
un soluto especfico en un lado de la membrana, para luego rotar y liberar el soluto
en el otro lado. Hasta ahora slo se ha identificado un portador de sacarosa en
membranas vegetales (Lemoine el al., 1989), por lo que poco se puede decir respecto
al funcionamiento de los portadores proteinceos en medio acuoso en vegetales.
Como los vegetales suelen absorber solutos de manera por completo selectiva,
y cmo al parecer los por tao res aportan una selectividad mucho mayor de la que se
observa en algunos de los canales no discriminantes que se han hallado hasta la
fecha, es probable que tanto portadores como canales existan en las membranas

vegetales. En conjunto, bombas, canales y portadores se denominan protenas de

transporte (Sussman y Harper, 1989).
Otro componente esencial de las membranas es el Ca 2 + , sin el cual aqullas
pierden su capacidad de transportar solutos hacia el interior y son incapaces de
retener los solutos que. ya contienen. La participacin del sodio an no se
comprende del todo, pero probablemente une porciones hidrfitas de fosfolpidos
entre s y a partes con carga negativa de protenas de membrana.
La disposicin de protenas, lpidos y Ca2+ en la membrana es un problema
permanente al que bilogos, fsicos y qumicos dedican gran atencin. El modelo del
mosaico fluido que se ilustra en la Fig. 7-12 ha recibido amplia aceptacin, aun
cuando es general y no intenta describir de manera precisa alguna membrana en
particular. Este modelo indica que algunas molculas protenicas se encuentran
embebidas en diversos sitios de la bicapa fluida de lpidos, de manera que las
protenas flotan en un mar de lpidos. En realidad, los lpidos son bastante fluidos;
de hecho, una molcula de fosfolpido puede desplazarse en un segundo de un
extremo de una clula bacteriana a otra si lo hace lateralmente en una mitad de la
bicapa de la membrana.
Es raro el FASO de fosfolpidos entre mitades opuestas 1 de la bicapa, aunque con
los esterles esto ocurre con ! frecuencia (Stein, 1986).
Los dos lados (caras) de las membranas son distintos, porque difieren las protenas y
lpidos que se encuentran en cada lado. Algunas protenas se extienden . ms all de
la bicapa, como se muestra en la I'ig. 7-12.
Estas protenas reciben el nombre de protenas integral leo intrnsecas. Se unen con fuerza en el interior de la J membrana, y slo se
pueden separar mediante ciertas
> Soluciones detergentes que rompen puentes de hidr- ; geno entre todos los
componentes de la membrana. Oirs, las protenas perifricas o extrnsecas, estn
unidas ms laxamente a uno u otro lado de la superficie de la *. membrana y se
puede separar con soluciones salinas |i diluidas o con detergentes. Al parecer
ninguna prote- ; na est embebida de manera parcial en la bicapa lipdi- [ fea-,
esto es, o la atraviesan o estn adheridas a su | superficie (Chabre, 1987).
Algunas de las protenas perifricas de membrana L plasmtica, tonoplasto,
retculo endoplsmico.y dictio- f $.mas contienen polisacridos cortos, con
frecuencia | Bmificados, unidos a la superficie exterior de la meni- jabfana
(LaFayette et al.; 1987; Grimcs v Breidenbach,
1 1987). Estas protenas se denominan glicoprotenas. Los K polisacridos que se
encuentran en las glicoprotenas ':- *f representan en la Fig. 7-12 como
proyecciones rafe nieadas. Estos polisacridos por lo comn consisten phexosas
unidas o azcares modificados, en especial t&Manosa, ftteosa (6-desoxigalactosa) y
glucosamina. La Bfencin principal de estos polisacridos en la membra- Bp
plasmtica es dotarla de propiedades de reconoci- femo.
tf Especficamente, los polisacridos reconocen prote- if externas y otros
polisacridos de diversas clases. lfcfejemplo, ciertos hongos y bacterias patgenos,
de- l'tn penetrar en el citoplasma de las clulas vegetales Bjua poder causar
enfermedad; antes de penetrar se Hpoximan a la membrana plasmtica del
hospedante BtSVan hacia sta sealizadores protenicos (enzimas) BrpOlisacridos
(esto es revisado en Bller, 1989; Sto- fc*. 1989; y Dixon y Lamb, 1990). Es probable
que la jwn de estos sealizadores dependa de un proceso no llave-cerradura en el
que participen polisacridos BUmembrana. Si la combinacin es la correcta para
HKgeno, ocurre la unin y sobreviene la enferme- MlEncaso contrario, la planta
ser resistente a dicha HRinedad. Otro ejemplo es la infeccin de races de
Hpsinosas por bacterias de Rhizobium que fijan ni- no(vase la Secc. 14.2). De
nuevo, al parecer hay ^conocimiento entre protenas o polisacridos en lpefficie
de la bacteria y glicoprotenas de la mem- Hftl plasmtica vegetal. Otros ejemplos
ms son la Bfetlbilidad o incompatibilidad de injertos y las in- Isiones polen-estigma

durante la polinizacin de la Hpfodgkin et al.. 1988). Por ltimo, es posible (aunBlOSc ha probado) que los polisacridos de las gli- Hbttnas representen sitios de
reconocimiento o Stores de hormonas vegetales que pasan de clula La funcin,
principal ms probable de las gli- coprotenas en tonoplasto, retculo endoplsmico
y dic- tiosomas tambin es proporcionar sitios ci reconocimiento de molculas
implicadas en la circula cin subcelular.

7.5 Primeras Observaciones sobre la Absorcin de

Solutos
Uno de los objetivos principales al estudiar las membranas con microscopios
electrnicos o por mtodos qumicos es comprender cmo controlan el movimiento
de solutos a travs de s mismas. Desde mucho antes de que existieran los
microscopios electrnicos, o de que alguien supiera cmo aislar membranas para su
anlisis qumico, ya se podan estudiar las propiedades de absorcin de las
membranas. Algunas propiedades observadas proporcionaron indicios importantes
acerca de la naturaleza de las membranas. Mencionaremos cuatro de estas
observaciones acerca de la absorcin de solutos realizadas por pioneros en este
campo de estudio, pero debe tenerse presente que estas observaciones no nos dicen
nada acerca de algn mecanismo de absorcin de solutos. Ms adelante
distinguiremos entre mecanismos pasivos y activos, pero por ahora debemos
conceder que lo que se meda en ese entonces era el transporte total (la suma de
ambos mecanismos) y que, en la mayora de los casos, la absorcin era del todo o
casi del todo pasiva.
1. Cuando las clulas no estn vivas y metabolizan- do, sus membranas son
mucho ms permeables a los solutos. Si una clula muere por elevadas
temperaturas
o envenenada, o si su metabolismo es inhibido por bajas temperaturas,
temperaturas elevadas no letales o inhibidores especficos, muchos de los solutos de
la clula escapan al exterior, mientras que aquellos que se encuentran fuera se
difunden hacia el interior. Esto constituye una cuantificacin de la muerte celular y
representa slo transporte pasivo por difusin libre a favor de un gradiente de
energa libre para todos los solutos implicados.
2. Las molculas de agua y gases disueltos, como N. 2 V C02. se difunden de
manera pasiva y con rapidez a travs de todas la membranas. Nadie sabe cmo
puede el agua penetrar las membranas con mucho mayor rapidez que la mayora de
los solutos disueltos en ella, pero lo que hace es esencial para que ocurra la osmosis.
Es sorprendente que el agua se difunda tambin rpidamente a travs de
membranas artificiales constituidas slo por fosfolpidos. Esto significa quiz que el
agua normalmente se difunde por los lpidos hidrfobos de la membrana, no por los
canales protei eos. Es probable que lo mismo suceda con los gases. Quiz el
movimiento lateral continuo de cidos grasos dentro de las membranas lipdicas
forme pequeos orificios transitorios por los que pueden pasar agua y gases.
En el caso del N2, la difusin rpida parece ser de poca importancia para la
mayora de las clulas. El nitrgeno disuelto del aire simplemente entra y sale de las
clulas y sus organelos a velocidades iguales, sin que haya efecto notable alguno.
Para el 02, el movimiento rpido hacia el interior permite que ocurra la respiracin, lo
que es importante para todas las clulas aerobias, tanto en el da como durante la
noche. Para las clulas fotosintticas, el movimiento neto de salida de 02 hacia el
aire circundante constituye un proceso normal con la luz del da, cuando la
fotosntesis excede a la respiracin. En el caso del C02, el movimiento rpido al
interior de las clulas fotosintticas es crucial durante el da, en tanto que por la
noche este gas sale de todas las clulas, sean fotosintticas o no. Para todos los gases
que se mencionan, la difusin a travs de la membrana es slo un movimiento pasivo
a favor de un gradiente de energa libre.
3 Los solutos hidrfobos penetran a una rapidez que se relaciona de manera
positiva con su solubilidad en lpidos. Los solutos ms hidrfobos (o menos hidrfi-

los) se desplazan a travs de las membranas con mayor rapidez que aquellos que
poseen las propiedades opuestas. Consideremos unos pocos ejemplos. La molcula
de alcohol metlico (CH3OH) no es mucho ms pequea que la de urea (H2N-CONH2), pero el alcohol metlico es unas 30 veces ms soluble en lpidos y penetra en
las clulas gigantes del alga Chara ceratophylla como 300 veces ms rpido que la
urea. La valeramida (de cinco carbonos) es ms grande que la lactamida (de tres
carbonos), y no obstante es unas 40 veces ms soluble en lpidos y penetra en las
clulas de Chara 35 veces ms rpido que la lactamida. Se supone que las molculas
de urea, alcohol metlico, valeramida y lactamida atraviesan la membrana plasmtica
y entran en las clulas por simple difusin pasiva a travs de la bi- capa lipdica hacia
una regin de menor concentracin. Estas observaciones proporcionaron los
primeros indicios de que las membranas son ricas en lpidos, aun antes de saberse
de la existencia de una bicapa.
Un problema prctico de la solubilidad en lpidos se relaciona con la posibilidad
de que un soluto adquiera carga cuando se disuelve en el agua, ya que cualquiera de
estas cargas (sea positiva o negativa) reduce mucho esa solubilidad en lpdos, eleva
la solubilidad en agua y disminuye la permeabilidad de la clula al soluto. Un
ejemplo importante de esto concierne al C02 disucl- to, su forma hidratada H2CC)3,
la especie inica importante HCO^- y la especie an ms ionizada C032- que se forma
de manera reversible a valores de 1 mayores de 8:
CO, + H,0 = H,CO, HCO, CO,;

\ \
11

H
(7.1)
A valores depH bajos se absorbe mucho ms carbc no del C02 disuelto que a
valores elevados, a los cua les predominan el C0327 y HC03', que tienen carg negativa
y son insolubles en lpidos.
Un ejemplo relacionado tiene que ver con la absoi cin del herbicida
(eliminador de malas hierbas) 2,4-1 (icido 2,4-diclorofenoxiactico). Este herbicida
tien un grupo cido actico que libera un II+ para formal apH neutro o elevado, una
molcula de 2,4-D con ca ga negativa, mientras que a valores depH bajos hay pe ca
ionizacin, por lo que la molcula neutra de 2,4-1 sigue siendo mucho ms soluble
en lpidos que la foi ma aninica Las hojas absorben el herbicida con mi cho mayor
eficacia a p\\ 5 que a pH 8. Las carga positivas tambin son importantes. Al
contrario de comportamiento de compuestos cidos como H,C0 y 2,4-D, las bases
nitrogenadas (en las que el nitrgeno atrae un ion H+ y adquiere carga positiva a
valores d pH bajos) por lo comn se absorben con mayor rapi dez de soluciones
neutras o ligeramente bsicas en la que no existen cargas. Una vez ms, una razn
impor tante de esto es su mayor solubilidad en lpidos de 1; membrana por no tener
carga neta. (Como se explica r en la Secc. 7.7, otra razn de que los aniones se ah
sorban con lentitud es que el citosol tiene carga negativ; respecto tanto a la pared
celular como a la solucin de exterior, y esta carga repele los aniones.)
4. Las molculas y iones hidrfilos con solubilidad li ptdica similar penetran a una
velocidad inversamente proporcional a su tamao. En el caso de los iones, el tamao
importante para la velocidad de penetracin es el que alcanzan despus de que se
unen al agua de bidratacin (Clarkson, 1974). Cada ion atrae hacia s un nmero
diferente (promedio) de molculas de agu unidas con cierta fuerza, dependiendo de
la densidad de la carga neta en su superficie. Por ejemplo, el Li* (masa atmica
6.9), que slo posee una capa electrn! ca llena alrededor del ncleo, tiene
dimetro de 0.12 nm cuando est sin hidratar y se une a unas cinco mo lculas de
agua. Por otra parte, el K+ (masa atmica 39 1) posee varias capas electrnicas y
dimetro de 0.2' nm cuando no est hidratado, pero se une a slo cuatro molculas
de agua. As, el Li+ hidratado es un pal co mayor que el K+ hidratado y se difunde a
travs del la membrana con menor rapidez que el K + . Los catio-l nes divalentes,
como Mg2+ y Ca2 +, tienen densidades! de carga superiores a las de Li o K +, se unen
a unil docena de molculas de agua y se absorben con mui cha mayor lentitud que

los cationes monovalentes. Pol otra parte, cationes divalentes como el Fe2 + se absorl
ben con mayor rapidez que cationes trivalentes com el Fe3 f. El mismo principio se
aplica a los aniones;el este caso las especies monovalentes Cl~ y N03~ sea sorben
mucho ms rpido que la especie divaleml SO.j~. Adems, la especie monovalente
H2PO; seatl sorbe ms rpido que el HPO.2-, divalente, y an nia|

que el PO.^-, trivalente. A /;H 7 (el /)H aproximado del

jdtosol). la ionizacin de II>PO,~en HPO.,2- y H4 se 'completa a medias, por lo que existen cantidades casi "iguales de las formas divalente
y monovalente de iones fosfato, con casi nada de PO /~. A /jH menor de 6 (co- ,JlK>en pared celular, vacuolas y suelos cidos), predo- Bna el
H2PO.r, monovalente. Tomando en cuenta !_qutelp\\ aproximado de muchas paredes celulares es $ 4r5 (incluso en suelos neutros o ligeramente
alcalinos), d transporte de fosfato hacia el citosol a travs de la tnembrana plasmtica por lo comn incluye sobre to- itlofyPCV. La ionizacin
reversible del H2PO_,~ es co- Kjno sigue:

t 7,6 Principios de la Absorcin Solutos

Nueguida se consideran los cuatro importantes prin- gfios de la absorcin de solutos que se aplican a casi lados los solutos disueltos que los
vegetales deben ob- BCMt de su ambiente o transportar internamente de una Bfcllaaotra. Estos principios dan origen a la teora de HRas protenas
de transporte, denominadas transpor- : ittoYs. controlan la absorcin. De hecho, todos los HnCipios mencionados son consistentes con esta teom Ms adelante se sugiere que los canales protein- 0tB explican mejor algunos resultados que los ^portadores verdaderos, pero por lo dems
parece Ha la teora de que protenas de transporte cspecfi- ftn las membranas controlan la absorcin de los so- ms esenciales.

Hthos Solutos se Acumulan Htl Interior de las Clulas

Mecho notable acerca de todas las clulas es que pue- bsorber ciertos solutos esenciales con tal rapidez, MfrjJeriodos tan prolongados, que las
concern nido
nes de estos solutos se vuelven mucho mayores dentro de las clulas que en la solucin del exterior. A esta absorcin se le conoce con el nombre
de acumulacin. El grado en que la concentracin del interior es mayor que la exterior se denomina razn de acumulacin. Por ejemplo, las
preparaciones de tejidos de almacenamiento (como tubrculos de papa) colocadas en soluciones nutritivas con frecuencia reducen la
concentracin de iones externos hasta casi cero en uno o dos das. Durante este tiempo algunos iones (en especial K * ) alcanzan concentraciones
internas ms de 1 000 veces mayores de las que se presentan al final en la solucin circundante. Los tejidos vegetales por lo comn contienen al
menos 1 % de K+ (en peso seco). Cuando estn vivos, estos tejidos tpicamente contienen de 80 a 90% de agua, por lo que el vegetal vivo contiene
como 0.1% o 25 mM de Kt4. Aun el KdisueJto, incluso en suelos frtiles, con frecuencia no alcanza una concentracin mayor de 0.1 mM, lo que
indica una razn de acumulacin aproximada de 250 a I para la planta en general. Asher y Ozanne (1967) presentan numerosos datos de razones ce
acumulacin para potasio en races y partes areas de cinco especies. Las leyes de la termodinmica, que se expusieron en el Cap.
2 , indican que una difusin libre sin gasto de energa metablica no puede ser la responsable de una acumulacin tan grande. Por consiguiente, se
concluye que las clulas vegetales utilizan energa para la acumulacin; por otros estudios se sabe que el principal compuesto rico en energa es
ATP.
La acumulacin de determinados solutos es un fenmeno universal en las clulas vivas Como se explica en el Cap. 8, algunas clulas del
floema en los haces vasculares acumulan sacarosa u otros carbohidratos en concentraciones elevadas y luego los translocari a otros sitios. Este
transporte es esencial para que las clulas fotosintticas puedan abastecer a otras partes del vegetal. Las algas que viven en agua salada deben
acumular solutos para impedir la plasmlisis; uno de los mecanismos de adaptacin al ambiente salino en que viven es incrementar su
concentracin interna de sales. En la Tabla 7-1 se presentan datos de acumulacin de algunos iones para dos especies de algas que viven
iM Concentracin de los principales iones en el agua de mar comparada con su concentracin en las vacuolas de algas que viven ah

Concentracin en
vacuola

Concentracin en agua Concentracin en

de mar
vacuola

Concentracin en
agua de mar

54 mM

30 mM

257 mM 337 mM 543 .488 mM 12 mM 523

113 mM 206 mM

0.65 mM 35 mM

mM

mM

Figura 7-13 (a) y (b): Aparato que se utiliza para estudiar la absorcin de solutos por segmentos de raz. Los tejidos radicales se colocan en frascos de
plexigls a, los cuales se ponen entonces en pozos de absorcin abiertos, como se muestra en b Para terminar el experimento se da vuelta a la vlvula

de tefln con el objeto de drenar la solucin por vaco hacia la cmara que se halla bajo los frascos. Tomado de Kochian y Lucas, 1982.)

en aguas de mar diferentes. Las clulas de ambas especies poseen grandes vacuolas centrales, de donde se obtuvo la solucin para el anlisis.
Ntese que ambas algas acumulan KJ Nitella tambin acumula C)- y, en menor grado. Na ', en tanto que Halicystus parece estar en equilibrio
respecto al Cl- y, realmente restringe la entrada de Na+. De stos y otros datos se concluye que el que un soluto se acumule o no depende del soluto
y la especie vegetal. Asimismo, debe hacerse nfasis en que la restriccin de la entrada de sodio es comn a la mayora de gimnospermas y
angiospermas. Regresaremos a este tema ms adelante, en trminos de los mecanismos por lo que se presenta esta restriccin. (No ocurre por
accin de una bomba de sodio-potasio, como errneamente algunos textos de biologa general mencionan que pasa en todas las clulas
eucariticas.)

La Absorcin de Solutos es Especfica y Selectiva

El que los solutos se absorben y acumulan por procesos selectivos tambin se hizo evidente a partir de estudios en los que a races separadas de
plntulas se les permiti acumular iones. Emanuel Epstein, pionero de muchos de estos estudios, trabaj con races de cebada en las dcadas de
1950 y 1960. Su ensayo que aparece en este captulo describe algo de esta investigacin, y en su excelente libro (Epstein, 1972) se proporcionan
muchos detalles acerca de cmo es que las races absorben las sales minerales. Con frecuencia se obtuvieron plntulas a partir de semillas
cultivadas en una solucin diluida de sulfato de calcio', por lo que la mayora de las sales minerales provinieron de las reservas de la semilla. Estas
races con bajo contenido de sales" presentan elevada capacidad para la absorcin subsecuente de diversos iones, y esta capacidad se mantiene
por varias horas incluso si se cortan las races de la planta. En la Fig. 7-1 3 se muestra un mtodo por el que races escindidas pueden utilizarse en
estudios de captacin de iones. Se requiere aireacin de las races escindidas, as como de las que quedan unidas a las plntulas para permitir la

respiracin, que es fun-1 damental para la acumulacin normal de iones en la ma-1 yora de las especies (ntese el tubo en la Fig. 7-13b I para
forzar el paso de aire a travs de las soluciones).!
Si a estas races se les suministra una solucin que I contenga KCI diluido (aprox. 0.2 mM) y Ca 2 + 0.2 mM| para mantener un funcionamiento
normal de la mem l brana, la rapidez de absorcin de potasio no se ve afec-l tada por concentraciones similares de sales de Na 4 I Esto se cumple a
pesar de que el Na 1 es qumicamen-I te parecido al KC El proceso de acumulacin de K'I es por lo tanto selectivo, y en estas condiciones no sel ve
influido por algn ion similar. Como es de espenirl se, muchos otros iones monovalentes y divalentes tani 1 poco influyen en la captacin de K 1. En
estudiosB parecidos, la absorcin del cloro no es afectada por lia B luros relacionados como fluoruro y yoduro, ni poifc NO^ -, SO.,2- o HPO._. Los
iones de calcio son estn' ciales para esta selectividad debido a que, sin ellos, bH absorcin de K ' se ve inhibida digamos por las baja.
concentraciones de Na*.
A pesar de esta elevada selectividad aparente, en oa-B siones se puede engaar a los mecanismos de capiaK cin. La absorcin de potasio es
inhibid competitivamente por el ion Rb1; la penetracin dtB las membranas por estos dos iones al parecer es regidB por los mismos mecanismos.
Con frecuencia se obticH nen resultados similares de competitividad con lofl iones monovalentes Cl _ y !3r~, con los divalem Ca2', Sr2 f y a veces
Mg2 4, as como con SO.,2- ystfl
lenato (ScO^2-). Esta selectividad del transporte de iones en las races tambin es vlida para compuestos orgnicos como aminocidos y
azcares, y se presenta en todas las partes del vegetal. La selectividad respalda la teora de que portadores proteinceos presentes en las
membranas ayudan a introducir solutos a las clulas, ya que se sabe de enzimas (que son protenas) las cuales reconocen de manera selectiva
determinados iones o molculas y pueden ser activadas o desactivadas por ellos.

Figura 7-14 Desarrollo de la captacin y la salida de iones con el transcurso del tiempo en distintas condiciones. Vase la explicacin en el texto.

los Solutos Absorbidos a Menudo Salen con Lentitud

Una vez que los iones o las molculas orgnicas se absorben en el citoplasma o las vacuolas de las clulas, no escapan con facilidad (esto es, el
movimiento de salida casi siempre es lento). Se puede inducir una salida rpida daando la membrana con calor, venenos o ano- xia y, en cierta
medida, eliminando el Ca24, si bien estas situaciones anormales llevarn a la muerte celular. La salida lenta indica que la absorcin, en especial en
races con bajo contenido de sales, es bsicamente un movimiento unidireccional de entrada.
Si se mide la concentracin de un ion en un tejido con bajo contenido de sales mientras las clulas estn expuestas a ese ion, casi siempre se
obtienen grficas como la que se muestra en la Fig. 7-14. En condiciones normales de temperatura y aireacin (curva superior), hay una rpida
entrada inicial de iones, si bien la mayor parte de este movimiento slo representa la difusin hacia el interior de las paredes celulares, ms que
algn movimiento real a travs de la membrana plasmtica. Luego la rapidez de absorcin se hace en esencia constante, a menudo durante varias
horas.
Ahora supngase que se extraen de la solucin los tejidos, en el momento que se indica por las flechas de la Fig. 7-14, se colocan en agua a
temperatura ambiente, y se mide a intervalos la cantidad de iones que se retienen en el interior. Slo una pequea fraccin de los iones presentes
escapan con rapidez, en cuestin de minutos (lnea superior discontinua en la Fig. 7-14). Estas prdidas de iones ocurren sobre todo desde las
paredes celulares, no del interior de las clulas. Los iones presentes en el citoplasma y las vacuolas permanecen ah ms tiempo y representan, con
mucho, la mayor parte de los iones absorbidos. Slo si los experimentos de escape de solutos se continan por varios minutos u horas se puede
detectar una salida, primero del citoplasma y despus de la vacuola, en especial en races con bajo contenido de sales.
Hasta aqu, el punto principa! es que la mayor parte- de los iones puede transportarse hacia el interior de las clulas, a travs de las
membranas, con una rapidez mucho mayor de aquella a la que salen. Esto constituye una evidencia adicional de que los transportadores de la
membrana o los canales unidireccionales slo aceleran la absorcin hacia el interior. (Sin embargo, ms adelante explicaremos el hecho de que
unos pocos iones, sobre todo Na+, Ca2+ y Mg2+ se difunden hacia el interior a favor de un gradiente en la concentracin y son transportados hacia

fuera con la ayuda de bombas dependientes de ATP.) Adems, la salida de varios iones resulta significativa cuando sus concentraciones internas se
hacen elevadas (races con contenido de sales no bajo). En plantas intactas, la salida es especialmente activa en la oscuridad y, en algunos casos,
inclusive puede exceder a a entrada (Glass, 1989). Una posible explicacin para esto es que, durante los periodos de oscuridad, las races no
reciben los carbohidratos suficientes de las hojas para producir la energa que se necesita para una entrada rpida.
En la Fig. 7-14 (curva inferior) tambin se muestra la duracin de la acumulacin cuando se inhibe la respiracin por ausencia de O,, bajas
temperaturas o por la accin de numerosos compuestos que resultan venenosos para los mecanismos respiratorios. La fase inicial de absorcin
rpida no se ve muy alterada, pero despus la velocidad de absorcin cae drsticamente casi hasta cero (esto es. la curva se vuelve casi horizontal).
Cuando estas races con bajo contenido de sales se transfieren a agua, casi todos los iones aparentemente absorbidos se difunden con rapidez hacia
el agua del exterior. Esta salida es de la misma magnitud que en los tejidos saludables, mientras que la entrada tanto desde tejidos saludables como
enfermos ocurre sobre todo desde las paredes celulares (apoplasto) por difusin simple. Estos resultados ilustran la inhibicin de la abEmmanuel Epstein naci en Alemania, pero realiz sus estudios en los campus de Davis y Berkeley de la University of California. Despus pas
ocho aos (1950-1958) en el United States Departament of Agricul- ture en Beltsville, Maryland; desde entonces labora en la University of
California, en Davis. Es un experto en los mecanismos por los cuales los iones atraviesan as membranas, as como en tolerancia de cultivos a la sal.
Grafi parte de su trabajo se relaciona con partes del vegetal que rara vez vemos: las races. Su investigacin sobre el transporte inico, publicada a
principios de la dcada de I960 y que se describe en este ensayo, le dio reconocimiento internacional. Su aplicacin de la cintica enzimtica de
Michaelis-Menten (que se describe en el Cap. 9) a estudios del transporte de iones puso de relieve el concepto de portador para el transporte a
travs de la membrana. En la actualidad utiliza tcnicas de fisiologa comparada y biologa molecular para estudiar la tolerancia a medios salinos.

Mi inters cientfico siempre ha combinado la simple curiosidad acerca de los procesos de la naturaleza con la conviccin de que el conocimiento
cientfico debe producir contribuciones tiles; esto es, deben tener el potencial de la aplicacin prctica. La ciencia agrcola se adecuaba a esta
inclinacin, y un gusto particular por los rboles, puramente emocional, canaliz estos intereses hacia la pomologa, ciencia que estudia los rboles
frutales y que pertenece al amplio campo de la horticultura. Por aquellas fechas -finales de la dcada de 1930- comenzaban los estudios agronmicos
en la University of California, carppus Berkeley, donde futuras viejas generaciones" tomaron los cursos bsicos de qumica, fsica, matemticas y
biologa y posteriormente pasaron al campus Davis para estudios especficos de agricultura. Yo segu este camino, y cuando acab mi trabajo de
licenciatura permanec en Davis para realizar una maestra en horticultura. Esto lo hice bajo la tutela de Omund Lilleland. l haba observado una
clorosis caracterstica en los rboles de huertos en las faldas de la Sierra Nevada; result que la clorosis se deba a una deficiencia de manganeso, y
as fue como comenz mi inters de toda la vida por la nutricin mineral en vegetales.

por las Races

Emanuel Epstein

Bsqueda y Obtencin de Minerales

En esa poca (1941), una maestra era lo ms lejos que uno poda ir en Davis, de manera que regres a Berkeley y comenz la ardua preparacin
para un doctorado en fisiologa vegetal. Las cosas no fueron muy fciles. La Segunda Guerra Mundial asolaba Europa; el 7 de Diciembre de 1941 los
japoneses atacaron Pearl Harbor y poco despus yo me enamor. Ninguno de estos acontecimientos result propicio para concentrarse en el trabajo
que tena por delante. Hacia principios de 1946, cuando ya el polvo se haba asentado, me encontraba casado y era padre de un varoncito, fui dado de
baja del ejrcito, y me hall de nuevo al principio (en lugar de al final) de mis estudios de doctorado.
En Berkeley, me un a la famosa Divisin de Nutricin Vegetal de Dennis Hoagland, en calidad de estudiante graduado. Perry R. Stout, quien
laboraba en esta divisin, fue mi principal profesor. Lo eleg a l por tres razones: Me impresion como pensador original y era sencillo, sin grandes
aires o pretensiones. Adems, era una de las pocas personas en todo el mundo que, antes de la guerra, haban realizado algunos experimentos con
vegetales en los que se haba utilizado istopos radiactivos de elementos nutritivos. Busqu beneficiarme de esta maravillosa nueva herramienta en el
estudio de la nutricin mineral en vegetales.
Esto fue antes de los das en que ya era posible adquirir radioistopos por correo. Ms bien, los istopos provenan del ciclotrn Ernest Lawrence
de 60 pulgadas que se encontraba colina arriba del campus Berkeley. No haba entonces unidades para medir "salud y seguridad ambiental", pues de lo
contrario no se me habra permitido subir la cuesta, tomar una pieza de la placa deflectora de cobre del ciclotrn y entonces realizar mis propios
experimentos de qumica a fin de separar el cinc 65 y obtener una solucin pura de ste para mis experimentos. An me interesaban los
micronutrimentos, y adems del cinc 65 utilic istopos radiactivos de hierro y manganeso. (Tuve que determinar la vida media del manganeso 52 por
mis propios medios, debido a que an no se haba publicado ningn valor preciso; esto lo realic con ayuda de un electroscopio de fibra de cuarzo, ya
que los contadores Geiger-Mueller de que disponamos eran demasiado inestables de un da a otro.)
Adems de la investigacin, el tomar cursos tambin result muy importante. Tal vez no haba en el mundo otro sitio tan bueno como la Divisin de
Nutricin Vegetal de Hoagland si lo que buscaba uno era estudiar esta parte de la fisiologa vegetal. Hubo dos cursos que fueron cruciales para lo que
buscaba hacer: El curso de bioqumica de D.
M. Greenberg incluy una discusin exhaustiva de la cintica enzimtica, mientras que las conferencias de G. Ledyard Stebbins sobre evolucin
orgnica me abrieron los ojos a los orgenes y la diversidad gentica de la vida vegetal.

En una ocasin el Dr. Stout me present con un visitante, Cecil H. Wadleigh, del U.S. Department of Agricultura.
l estaba buscando talentos para formar un nuevo laboratorio de nutricin vegetal en la principal estacin experi-

mental del U.S.D.A. en Beltsville, Maryland. Este laboratorio se especializara en la aplicacin de radioistopos al estudio de la nutricin

mineral en vegetales. Se me hizo una oferta y tom el trabajo. Pareca ser la oportunidad ide3l para hacer el tipo de investigacin que yo quera

.Balizar y para continuar con el desarrollo de las tcnicas isotpicas que requera. Adems, los ingresos de la familia para entonces de cuatro

miembros) se incrementaran de ? 280 dlares anuales (provenientes en parte de un subsidio gubernamental para veteranos de guerra, en parte de un juesto de
medio tiempo como asistente de investigacin) a
4 600.
En Beltsville tena libertad de dedicarme a lo que yo elidiera -gracias sobre todo a Sterling. B. Hendricks, quien ne dej que me valiera por mis propios medios.
Decid (Studiar la selectividad entre el potasio y el sodio en su absorcin por las races. Yo saba que la selectividad entre dichos elementos era como un hilo que
recorra todos los campos de la biologa y que tena importancia agronmica por los muchos suelos salinos que hay en el oeste de Esta- * dos Unidos.
Aprend solo la tcnica de escisin de races, la cual fiunca haba observado en el laboratorio de Berkeley, donde la desarrollaron D. R. Hoagland y . C.
Broyer; utilic ralees de cebada como ellos lo haban hecho. Los elementos potasio y rubidio, en apariencia similares, consistentemente inhibieron uno la
absorcin del otro, pero la Interferencia en la absorcin de cualquiera de ellos por el sodio era menor y menos consistente. Al mismo tiempo confirm uno de los
dogmas principales de la escuela de Hoagland: La permeabilidad de las membranas celulares vegetales a estos iones eia bastante baja. Los radioiones que
fueron absorbidos por las races tuvieron un intercambio muy lento con los iones sin marcar del mismo elemento en la solucin externa. Cmo fue entonces que
entraron en primer lugar, y cmo poda explicarse esta selectividad? En '} l bibliografa haba referencias a "compuestos enlazantes"
o
"bombas inicas", pero sin un lazonamiento claro, de- |ando de 'ado cualquier tratamiento cuantitativo.
Pero mentalmente yo estaba preparado cuando C. E. Hagen, otro recin llegado a Beltsville, me pregunt si pensaba que la interferencia en la absorcin del
potasio por el .odio que yo haba observado era competitiva o no. Yo no
I lo saba, pero la pregunta hizo surgir una de esas iluminaciones repentinas de las que ios cronistas de la ciencia escriben con tanta frecuencia pero que en
realidad son muy raras. La entrada de iones en las clulas a travs de una membrana impermeable me sugiri la existencia en la mem orara de algn agente
que realizara este transporte -la formacin de un complejo enzima-sustrato en la catlisis enzimtica y la especificidad de este proceso. Si el ; ion era el
"sustrato" y si la combinacin especfica (selectiva) d3 ste con un portador de la membrana (la "enzima") daba por resultado la formacin de un complejo
portador- ion, entonces la cintica del transporte a travs de la membrana poda seguir la bien conocida cintica do la catlisis
enzimtica, o cintica "de Michaelis-Menten". La diferencia estara en el proceso ocurrido: no en la transformacin qumica del sustrato en producto, sino en el
transporte del ion, del lado externo al interno de la membrana. Esto explicara la paradoja de que un ion atraviese una membrana impermeable a l: Podra ser
que no fuese el ion libre el que atravesar la membrana, sino el comp'ejo portador-ion; una vez liberado en la cara interna de la membrana, el ion seria incapaz de
difundirse libremente hacia fuera. La informacin que sustentaba la existencia de una membrana impermeable a iones era por completo consistente con este
esquema. El asunto de la selectividad tambin poda explicarse: As como las enzimas poseen "sitios activos" a los que el sustrato se une de manera especfica,
tambin poda esperarse que los portadores tuviesen sitios a los que, por poner algn ejemplo, pudieran uniise el potasio y otros solutos parecidos, como el
rubidio, pero no el sodio.
Me puse a trabajar con ahnco, utilizando la tcnica de la raz escindida de cebada, y, Eureka! Funcion! era posible aplicar la cintica enzimtica al
transporte de iones. Despus de publicar en 1952 estos hallazgos acerca del transporte de potasio, apliqu el mismo principio a otros iones, pero el trabajo en
verdad definitivo se hizo a principios de la dcada de 1960, despus de que me cambi al entonces Department of Soils and Piant Nutrition de la University of
California en Davis: de vuelta a mis antiguos cotos de baile, en donde he permanecido desde entonces.
La clave del progreso en Davis fue el hallazgo de que la elevada selectividad do los procesos de transporte de potasio, en presencia del sodio, dependa por
completo de la presencia de iones calcio en la solucin externa. Asimismo, ampli la gama de concentraciones del ion cuyo transporte estaba estudiando el
potasio, para empezar a fin de cubrir un intervalo bastante amplio: de 0.002 mM a 50 mM. La velocidad de absorcin de potasio por las races de cebada
segua de manera exacta la cintica de Michaelis- Menten, desde la concentracin ms baja hasta unos 0.2 o
1. 5 mM. A estas concentraciones, la velocidad de absorcin de potasio se nivelaba; esto es, se haca casi independiente de la concentracin externa.
An a concentraciones ms elevadas la velocidad de captacin aument hasta niveles mucho mayores que el mximo terico predicho para el
mecanismo de baja concentracin (elevada afinidad). Adems, este segundo mecanismo de concentracin elevada (baja afinidad) difera
drsticamente del anterior en cuanto a selectividad y otras caractersticas. Al primero lo denomin "mecanismo 1" y al segundo "mecanismo 2"; he

tenido la satisfaccin de ver surgir de estos hallazgos un cuerpo entero de investigacin y publicaciones algunas controvertidas. Muchos fisilogos
se convencieron de que la evidencia cintica para el funcionamiento de las protenas de transporte ameritaba la bsqueda de su identidad bioqumica.
Hay una enseanza que aprender de esta experiencia.
La especializacin es sin duda algo necesario en la investigacin cientfica, en una poca en la que se est apren

diendo cada vez ms en cada campo de la ciencia. Pero tambin es importante mantenerse en contacto con campos afines de la ciencia, ya que pueden
presentarse avances inesperados y fructferos cuando la informacin y los modos de pensar en las diferentes especialidades estn in- terconectados de manera
conceptual. Tal fue el caso cuando yo, sin ser enzimlogo, saba lo suficiente de cintica enzimtica para aplicar sus conceptos al problema del transporte de
iones a travs de las membranas celulares de los vegetales. La enseanza es que hay que dejar el ojo de la mente vagar ms all del enfoque inmediato,
definido puntualmente para ver en qu pueden contribuir a la solucin del problema otros cuerpos de conocimiento, otros puntos de vista. La especializacin con
una mentalidad restringida es el principal riesgo ocupacional en la investigacin cientfica; debemos empezar a combatirla de manera sistemtica.
Ya desde que tom el extraordinario curso de Ledyard Stebbins sobre evolucin biolgica estaba fascinado con la diversidad de los seres vivos y, en
particular, por la diferenciacin genotipica dentro y entre especies estrechamente relacionadas. Durante muchos aos mi inters se centr en la selectividad
inica, en especial en la seleccin entre iones sodio y potasio y la participacin del calcio en este proceso. Mientras viva y trabajaba en el Oeste, me volv muy
consciente de la salinidad de suelos y agua, "salini dad" referida casi sin excepcin a elevadas concentraciones de sales de sodio; elevadas al grado de resultar
nocivas para la mayora de las especies cultivadas. Y sin embargo, existen vegetales que habitan en medios muy salinos: esto lo confirma el fitoplancton marino
y, en tierra, las plantas que habitan en la orilla del mar, marismas y desiertos salinos. Aun dentro y entre especies cultivadas hay considerable variacin en la
tolerancia a la sal. Esta era otra oportunidad de amalgamar conocimientos y enfoques de dos disciplinas distintas: Por una parte nutricin mineral en vegetales y
gentica por la otra. As que a principios de la dcada de 1960 comenc a estudiar por mis propios medios el control gentico del transporte selectivo de iones,
con nfasis en sodio, potasio y cloro y en las respuestas diferenciales a la sal. Tambin hice propaganda de este enfoque gentico publicando artculos originales
y revisiones, as como hacindolo destacar en un libro de texto.
Mis estudiantes graduados y otros colaboradores dirigieron muestreos bastante grandes de diversas lneas genticas de cebada, Hordeum vulgare y trigo,
Tricum aestivum, y hallaron en ambas especies considerable variacin en la tolerancia a la sal. No pudimos encontrar gran variabilidad

ENSAYO
7-1

sorcin y la acumulacin por condiciones que impiden la respiracin normal. Es probable que la respiracin y la absorcin de solutos estn muy
relacionadas entre s, ya que la respiracin proporciona el ATP que se necesita para la absorcin de solutos.
a este respecto en el tomate, Lycopersicon esculentum, sospecho que debido sobre todo a que no hicimos un muestreo lo suficientemente grande. Pero este
fracaso nos oblig a tomar en consideracin germoplasma poco comn. Nos dirigimos al Departamento de Cultivos Vegetales de Charles M. Rick, la mxima
autoridad en gentica vegetal y germoplasma. l nos proporcion semillas de una especie extica de tomate que haba colectado cerca de la orilla del mar, en
una de las islas Galpagos, en donde se supone que la planta se encuentra expuesta a la sal. Los frutos fueron pequeos, amarillos y amargos, pero en cultivo
en solucin las plantas fueron en efecto tolerantes a la sal. Por fortuna esta especie pudo hibridarse fcilmente con especies cultivadas, y fue as como comenz
el desarrollo de tomates con tolerancia a la sal.
Cultivamos algunas de nuestras mejores selecciones de cebada, trigo y tomate en las dunas del Bodega Marine La boratory en la costa del Pacfico, al
norte de San Francisco. Utilizamos agua de mar y diluciones de sta para irrigar las plantas, y obtuvimos evidencia bastante espectacular para nuestra tesis de
que deba agregarse una dimensin gentica a las tcnicas ordinarias de irrigacin-drenaje para afrontar los problemas que acarrea la salinidad. De hecho,
esperamos que el inmenso reservorio de agua y nutrimentos minerales de los ocanos del mundo algn da podr utilizarse junto con los grandes desiertos
costeros a fin de producir cultivos desarrollados especficamente para utilizar agua de mar.
En la investigacin que nos encontramos realizando actualmente nos concentramos sobre todo en los mecanismos de la tolerancia a la sal, atacando el
problema con las herramientas de la fisiologa comparada una combinacin de gentica y fisiologa vegetal con la biologa molecular ms o menos reciente.
Ha sido, y an lo es, una jornada fascinante. Ser profesor y cientfico es, para m, el trabajo ms importante, ms emocionante y ms satisfactorio que una
persona pueda tener. Una pretensin extravagante? Pienso que no. En toda sociedad hay dos nicas estructuras en desarrollo: La nueva gente joven, que son
nuestros estudiantes, y el nuevo conocimiento que se genera a travs de la investigacin. Son estas dos nicas fuentes de renovacin y desarrollo con las que
trata un profesor en una universidad en donde se realiza investigacin: Discpulos gente joven y el nuevo conocimiento que generamos con la investigacin,
Nada es ms crucial para el avance de la sociedad, y no hay ocupacin ms satisfactoria, que el tratar con estos dos veneros de la sociedad del futuro.

La Rapidez de Absorcin de Solutos Vara con la Concentracin de los Solutos

Para estudiar los mecanismos de la absorcin de solutos y entender las relaciones entre la absorcin de ki-

tilizantes y la frecuencia de su aplicacin se han efectuado cientos de estudios que relacionan las velocidades de absorcin con las concentraciones
externas. Una de las conclusiones principales en lo tocante a vegetales silvestres es que, para nutrimentos que se consumen en abundancia (nitrato, amonio,
fosfato y potasio), el factor limitante es la difusin hacia la superficie radical, y por ello las propiedades de absorcin dlas races slo tienen importancia
limitada para la nutricin vegetal (Nye y Tinker, 1977). Sin embargo, para vegetales cultivados y bien fertilizados con nitrgeno, fsforo y potasio, as como
para otros solutos esenciales y para clulas que no son de la raz, con frecuencia el factor limitante es la absorcin a travs de la membrana. Los especialistas
en fisiologa vegetal interesados en los mecanismos por los cuales los solutos atraviesan las membranas han estudiado el problema durante muchos aos
haciendo uso de numerosas tcnicas. Emanuel Epstein y sus estudiantes investigaron la absorcin de iones especficos por races extirpadas como una
funcin del tiempo y la concentracin externa. Estos investigadores concibieron la idea de que las protenas de las membranas pueden actuar como enzimas,
para las que suele aplicarse una cintica de Michaelis- Menten (Cap. 9). En gran medida esta idea ha resultado ser cierta, lo cual quiere decir que las
membranas contienen numerosas protenas que reconocen de manera especfica determinados solutos, se combinan con ellos y aceleran su introduccin.
Epstein y muchos otros han denominado a estas protenas de transporte portadores. Pasemos ahora a examinar estudios de cintica en los que la rapidez de
absorcin se mide como funcin de un amplio intervalo de concentraciones externas de solutos a los que se encuentran expuestos las races u otras partes
vegetales que se han cortado. En estos estudios, es comn utilizar un dispositivo similar al que se muestra en la Fig. 7-13- Hay dos posibles mecanismos
generales para explicar la absorcin de solutos. En primer lugar, una difusin simple en un solo sentido a travs de la membrana provocara que la velocidad
de absorcin fuese directamente proporcional a la concentracin externa del soluto. En la Fig. 7-15, la lnea inferior es una grfica hipottica para este
mecanismo. Resultados obtenidos con solutos orgnicos a los que nunca haban sido expuestas las clulas en estado silvestre muestran este tipo de cintica.
ste es un ejemplo de absorcin pasiva (que se describe en la Secc. 7.5), y se aplica a solutos como metanol, etanol, urea, valeramida e inclusive ni trgeno atmosfrico. Pero para los solutos que las ce flulas deben acumular (tanto orgnicos como
Inorgnicos), las velocidades reales de absorcin son t mucho mayores, por lo que rara vez se observa un componente lineal de difusin simple. La lnea
superior en la Fig. 7-15 ilustra lo que suele observarse. La velocidad de absorcin (o captacin) se incrementa con
rapidez a medida que aumenta la concentracin del so-

Figura 7-15 Influencia de la concentracin de iones en la proximidad de las clulas vegetales sobre la velocidad de captacin de iones. Si la difusin libre fuese la

responsable de esta captura, la velocidad sera baja y esencialmente proporcional a la concentracin, pero las velocidades reales son mucho mayores y
evidencian una cintica de saturacin.

luto en intervalos de baja concentracin, por lo general similares a los que existen en el suelo (hasta alrededor de O.l mM), pero a concentraciones mayores
la velocidad de absorcin empieza a estabilizarse. Estos hallazgos sugieren que un portador de la membrana acarrea cada soluto tan rpido como puede hasta que es rebasado por el exceso de solutos a altas concentraciones.
Figura 7-16 Absorcin multifsica de fosfato por secciones radicales de maz. En este experimento se obtuvieron cinco curvas separadas, casi en el punto de

saturacin, para un intervalo de concentraciones de fosfato en la solucin nutritiva que vari en un factor de hasta 25 000 (de 3 a 75 mM). Debido ai intervalo tan
amplio de concentrado nes, los datos se graficaron de manera logartmica. La absorcin es para periodos de 1 h. (Modificado de Nandi e al., 1987.)

Otros investigadores (en especial Per Nissen, de Noruega) han realizado experimentos parecidos y cuidadosos anlisis por computadora de los datos
cinticos obtenidos por Epstein y sus colegas, as como por otros investigadores. De manera por dems sorpresiva, Nissen y colaboradores encontraron que
la curva general de absorcin de la Fig. 7-15 en realidad consta de nu merosas fases de incremento y nivelacin (Nissen, 1986, 1991; Nissen y Nissen, 1983).
Epstein y colegas antes haban encontrado evidencias distintas de dos (y para el cloro, tres) de tales fases cinticas (lo cual se revisa en Epstein, 1972). En la
Fig. 7-16 se grafican datos de velocidad de absorcin de fosfato para un amplio intervalo de concentraciones de este ion. Como el intervalo de concentracin
era tan amplio (3 Mm ;I 7 mM), los datos se grafican de forma logartmica. Los resultados muestran una serie de curvas, cada una de las cuales aumenta y
despus se nivela antes de que la curva siguiente haga lo propio. Estos resultados generales se han obtenido en races y tallos con capas multicelulares, en
organismos unicelulares e inclusive en plastidios aislados. Adems, se aplican a varios cationes y aniones que las clulas vegetales absorben de manera normal, as como a aminocidos y glucosa. Al parecer, los resultados son vlidos para todas las membranas vegetales y todos los solutos a los que las plantas se
han adaptado en el curso de la evolucin. A dichos resultados se les conoce como cintica multifsica. An no sabemos cmo explicar esta cintica, pero es
claro que la difusin simple a travs de lpidos o protenas de la membrana no es la respuesta. En cambio, deben participar protenas transportadoras
(portadores, canales o bombas).

7.7 Energtica de los Transportes Pasivo y Activo

Ya se insisti en que muchos solutos que las clulas absorben se acumulan en concentraciones superiores en el interior que en el exterior. Por ejemplo, la
mayora de las clulas acumulan potasio, mientras que los tubos cribosos del floema acumulan sacarosa antes de translocarla (vase la Secc. 8.3). Pero unos
pocos solutos que son absorbidos con rapidez por las clulas nunca alcanzan concentraciones superiores en el interior que en el exterior. Un buen ejemplo
es el gas N2, pero es probable que ste slo entre y salga por difusin a travs de la bicapa lipdica. En la Tabla 7-1 se muestra que las algas (como la mayora
de los vegetales) en realidad restringen el movimiento del sodio, de manera que las tasas de acumulacin para este ion casi siempre son menores de 1.0.
Dejando de lado los mecanismos y toda protena transportadora, qu nos dicen las consideraciones termodinmicas del Cap. 2 acerca de la factibilidad de la
acumulacin de solutos, la no acumulacin y su restriccin?
Para cualquier soluto sin carga (sobre todo gases y azcares), la diferencia de concentracin entre ambos lados de la membrana es en esencia el nico
factor que determina el gradiente de potencial qumico. Pero para solutos con carga (iones), hay an otro factor implicado: el gradiente de electropotencial
(o potencial clctri co). En pocas palabras, este gradiente tiene que ver con la atraccin o repulsin de iones que resulta de una diferencia en la carga
elctrica de un lado a otro de la membrana. Estamos acostumbrados a pensar que las , cargas positivas o negativas en cualquier solucin de sales deben estar
en un balance exacto; esto suele ser cierto para soluciones en las que no hay vida. Pero las clulas utilizan energa, para bombear protones, Na + y Ca2 + hacia
fuera de la pared celular (como se descri-1 be en la siguiente seccin); esta prdida de cationes hace I que el citosol se torne un poco negativo. Tal carga
elc-1 trica se puede medir mediante electrodos colocados si-1 limitneamente dentro y fuera de la clula. Miles de tales I mediciones demuestran que el
potencial es pequeo,! si bien el citosol tiene carga negativa de unos 100 a 1501 mili volts (mV).1 Asimismo, el citosol es un poco ms I negativo respecto a
la gran vacuola central en las clu-l las del parnquima, en unos 30 mV (Sze, 1985). Comol la carga del citosol respecto a la solucin exterior a las clulas
atrae cationes y repele aniones, el efecto de lasB cargas se debe agregar a las diferencias de concentra 1 cin a fin de determinar el gradiente total de
potencia! qumico para los iones. El gradiente total de potencialB qumico a travs de una membrana cualquiera se co-B noce como gradiente
electroqumico.
La ecuacin de Nernst es una ecuacin matemtica que suma el gradiente qumico de concentracin a travs de la membrana al gradiente elctrico (la
diferencia de potencial), y en forma un tanto simplificada es como sigue:
A/l A(R/ InC) + ( z l

th)

(7

Tabla 7 2 Uso de la ecuacin de Nernst en races de chcharo para predecir si los iones se absorbieron de manera pasiva o activa 3

Ion

Conc. de la
solucin

Conc.
tsular
medida

Razn de
acumulacin

G?
predicha

Conc. tisular
medida
C, predicha

\ K'

1.0 mM

75 mM

75

72 mM

1.04

1.0

8.0

.8.0

72 j

0.111

\ Mg '

0.25

1.5

6.0

1 310

0.00115

Ca

1.0

0.80

0.80

5 250

0.000152

: N0j-

2.0

27

14

0.0276

978

ci-

1.0

5.3

5.3

0.0138

384

HjPO.f

1.0

25

25

0.0138

1 810

SO^-

0.25

9.5

38

0.000048

198 000

Na*
2

* Se agitaron varios segmentos radicales de 1 a 2 cm de longitud (0.20 g de peso fresco total de to dos los segmentos en 50 mi de una solucin nutritiva a 25C durante 48 h. La diferencia de electropo- toncial entre
la solucin y las clulas radicales promedi 110 mV. Los segmentos se lavaron, congelaron y luego se sumergieron dos veces en agua hirviente para determinar la concentracin de cada ion en el teiido (columna 3).
La razn de acumulacin (columna 4) es el cociente de la concentracin tis lar medida sobre la concentracin en la solucin nutritiva. El valor prodicho para C, (columna 5) se calcul mediante la ecuacin de Nerst,
para lo gue se dan dos ejemplos enseguida. La ltima columna indica cun lejos se hallaba del equilibrio electroqumico cada ion en los tejidos. (Datos de N, Higin botham el al., 1967.)
Ejemplos de clculos de Cr I Para K * :

Aqu, A^ representa la diferencia tota! de potencia! qumico (gradiente electroqumico) a travs de la membrana, en joules/mol; RTXnC es la aportacin
qumica al gradiente electroqumico para el soluto, que resulta Slo de! logaritmo natural de la diferencia en la concentracin; zPV es la aportacin elctrica.
R es la constante de los gases (8.314 .1 mol'K1) y 7' es la temperatura absoluta en kelvins. C es la concentracin inica en moles por litro, y el signo A que
precede a la expresin (RT\nC) significa que debe medirse la diferencia en la concentracin a travs de la membrana: res el numero de cargas en el ion (por
ejemplo, + I para el K+ y 2 para el SO^~)-, F es la constante de Fa- raday (96 400 joules por volt por mol); y AV es la diferenda de carga electropotendal a
travs de la membrana, en voltios.
Si se supone que la temperatura es la misma a ambos lados de la membrana (como casi siempre ocurre) y los valores se pasan a una escala logartmica
de base 10, entonces la licuacin 7.3 puede simplificarse para facilitar su uso:

Aqu, C\fC6 es la razn predicha de las concentraciones inicas dentro y fuera de la membrana en equili brio cuando A^ = cero. Si A^ es de cero o menor, el
gradiente de energa libre (gradiente de potencial electroqumico) permite la absorcin por transporte pasivo, pero si es positivo la clula debe utilizar
energa para transportar el ion hacia el interior mediante un transporte activo. As, las absorciones pasiva y activa estn definidas por la ecuacin de Nernst,
que toma en cuenta diferencias tanto en la concentracin como en la carga elctrica.
En la Tabla 7-2 se muestran datos representativos para secciones radicales de chcharo a las que se permiti absorber iones de una solucin nutritiva
balanceada durante 24 h. Con la Ecuacin 7.4 se predijeron las concentraciones tisulares de diversos iones para el caso en que no hubiese absorcin alguna
(valores C), mientras que las concentraciones medidas en las clulas representan datos reales. Despus de la absorcin. a travs de las clulas de la raz fue
de 110 mV. Hubo acumulacin de casi todos los iones, por lo cual la razn de acumulacin (C/Cu) casi siempre fue mayor de
1 (columna 4), pero las comparaciones interesantes son entre las concentraciones predichas y las medidas (ltima columna). Para el K + , las
concentraciones que se predijeron y las cuantificadas son similares, lo cual indica que el ion se encuentra cerca del equilibrio y que probablemente se
absorbi de manera pasiva. Para Na + , Ca2 + y Mg2'1, la concentracin tisular medida casi siempre fue menor que la predicha, de manera que estos iones
pueden haber entrado pasivamente por difusin, seguramente con ayuda de una protena portadora. (De hecho, deben haber sido transportados
activamente hacia afuera, tema al que regresaremos ms tarde.) Lo importante es que, en trminos de energa, la entrada de estos iones fue pasiva.
Resultados similares que se obtuvieron en otros experimentos para Mn-+, Fe2 + , Zn2 + , Cu2+ y boro en forma de H^BO^ indican que su absorcin
tambin es pasiva, aun cuando este proceso pasivo depende de la produccin de ATP dependiente de energa y de la hidrlisis de este producto para poder
dar carga negativa al citosol. En el caso de todos los aniones, las concentraciones internas medidas fueron mucho mayores que las predichas, lo cual
demuestra que los aniones se absorbieron de forma activa. Probablemente las clulas siempre utilizan energa para acumular aniones, debido a que la carga
negativa dentro de la membrana siempre los repele. Este factor de repulsin tambin ayuda a explicar por qu tanto C0 2 como H2CO<, se absorben ms
rpido que HCO^- y CO^2-, y por qu el HPO.~ se absorbe ms rpido que el HPO42, como se menciona en la Secc. 7.5. En la siguiente seccin se estudia
cmo utilizan energa las clulas para mantener una carga negativa en su citosol.

7.8 Mecanismo de Transporte de Calcio y Otros Protones por las Bombas de ATPasa
Como se indic antes, las clulas utilizan la energa almacenada en el ATP para absorber solutos de manera activa. Cmo extraen la energa del ATP para
realizar esto? Consideremos en primer lugar el ATP y su hidrlisis.

El ATP cede su energa cuando su fosfato terminal se hidroliza para liberar ADP y fosfato inorgnico (HjPO:} o HPO.j. , que se abrevian colectivamente c
mo Pi) de la manera siguiente:
ATP(Mg) + H,G ADP(Mg) + Pi

(7

Esta reaccin es catalizada por una enzima que al pa cer se encuentra en todas las membranas de todas clulas vivas. Se le conoce como ATP fosfohidrolas;
se abrevia ATPasa. Es una de las protenas de transpi te que se mencionaron antes. Cada molcula de A y ADP se quela con un Mg f, lo cual subraya la imp1
tanda del magnesio para toda forma de vida. La re cin es muy excrgnica hacia la derecha, con liberacin de unos 32 kj (7.6 kcal) por cada mol de A que se
hidroliza. Si se mezclan cantidades iguales ATP, ADP, Pi y Mg-f en agua, y se agrega ATPasa | ra acelerar la reaccin, sta se desarrollar casi por co pleto sin
dejar en esencia ningn ATP en equilibrio. C toda la energa se libera en forma de calor.
Sin embargo, en las membranas la mayora de A TPasas ms bien aseguran que gran parte de e: energa se utilice para transportar protones de un do a
otro de la membrana contra un gradiente eh troqumico. Este transporte de II+ proporciona energa que despus se utiliza en el transporte de sai minerales
esenciales. Es probable que en los vegetal (como ocurre en los animales) exista otra ATPasa, p lo general mucho menos activa, que bombee Ca fuera del
citosol a la vez que bombea H+ hacia de tro, pero apenas se empieza a estudiar esta posibilida Se piensa que esta Caz+/H+ ATPasa siempre bomb calcio hacia
fuera del citosol, ya sea fuera de la clul va membrana plasmtica, o hacia el interior de la v cuola, va tonoplasto (Hepler y Wayne, 1985; Gianni; eta I., 1987).
Adems, hay evidencia de que existe oti bomba de calcio en la membrana plasmtica de algi as especies (Grf y Weiler, 1989; Kasai y Muto, 1990 A sta se le
denomina (Ca + Mg)-ATPasa porque d< pende de un quelato de Mg24 y ATP para moviliza Ca2+ hacia fuera de la clula. Esta bomba no introdu ce 111 de la
misma manera que extrae Ca2 +, y es proj bable que dependa de la calmodulina para efectuara actividad (vanse exposiciones acerca de la calmo na en las
Seccs. 6.6 y 17.1).
El mecanismo por el cual las ATPasas bombean HJ y Ca?1 de un lado al otro de la membrana an nol comprende del todo, si bien se conocen varios clelJ
factores participantes. Todas las ATPasas son lo basta grandes para abarcar de un lado a otro cualquier mai brana (a menudo ms de una vez), por lo que se
ca can como protenas integrales, que se mencionan la Secc. 7.4. Adems, parte de cada molcula de ATI sa sobresale de la membrana en el citosol
acuoso, donde dicha parte reacciona con ATP y agua. Es bable que la ATPasa contenga un orificio potencia se extienda de un lado a otro de la
membrana, pcroijH este orificio slo se abra cuando el ATP se est hidnfl lando. Adems, slo cuando esto ltimo est ocurriendo la ATPasa se puede
combinar con un protn para movilizarlo por dicho orificio a travs de la membrana.
Hay tres grandes tipos o clases de ATPasas transportadoras de H+ que se sabe existen en las membranas tile diversos procariotes y eucariotes (lo cual es
revisa- j dopor Blumwald, 1987; Rea y Sanders, 1987; Nelson, 1988; Poole, 1988; Serrano, 1989). Estas protenas slo transportan H4 . Primero se resumirn
algunas de las propiedades de la ATPasa transportadora de H+ que Ljr encuentra en las membranas plasmticas de vegetales y hongos, ya que esta ATPasa
controla de manera Kuy estricta lo que entra primero en cualquier clula, ^ascomo la velocidad de entrada. Esta ATPasa se ener- Jua catalizando una
transferencia de vida breve del fos- 'MO terminal del ATP a una parte de s misma que lobresale en el citosol, donde hay ATP disponible. La tombinacin
del fosfato terminal del ATP con la ATP- feMahace a esta ltima rica en energa y que se libere
> ,ADP- Durante la formacin del estado rico en energa, IJllATPasa cambia de forma, se combina con un protn El, probablemente, abre el orificio que
contiene, por BWKlc el protn puede atravesar la membrana. Ense- Ejuda, se utiliza ITO para hidrolizar el fosfato de la ATP rastel protn pasa por el agujero y
se libera en la cara Huerna de la membrana plasmtica (en la regin de la E.pifed celular). Entonces la ATPasa recupera su forma rainal de baja energa y
queda lista para funcionar de nuevo. An no se comprende bien cules son los cam- UKMdc conformacin que experimenta la ATPasa du- HpUe estos
procesos, y cmo es que tales cambios Hriginan el transporte de protones de un lado al otro febmembrana; Pedersen y Carafoli (1987) y Serrano H| 9)
revisan de manera concisa avances y problemas Hkpor resolver en este campo. Un detalle importante Hca de esca ATPasa es que requiere de K + para reaHfi.su actividad, aun cuando es posible que no trans- Hklc K* a travs de la membrana, al menos de Bptra directa.
fe piensa que la H+ ATPasa de la membrana plas- Ittca transporta hacia la pared celular, fuera ciel cito- fr. slo un protn por cada ATP que se hidroliza.
De fresgrandes clases de ATPasas que se conocen, esta Bisa es la menos eficiente en cuanto a energa (gran HjjC de la energa del ATP se pierde como
calor), si H tiene tres efectos importantes:
Btfoc? que se incremente el pll en el citosol. Este fi&ambio en el p\\ casi siempre es pequeo, debido |y que el citosol se amortigua a s mismo para pre- teir
la prdida de H ' . Por lo comn, el /;II del Btitosol est entre 7 y 7.5.
H{ace que el p// de la pared celular disminuya. La Kurcd celular tiene mucho menor capacidad amor Hjguadora que el citosol, por lo que su pH con fre- H|
encifl disminuye hasta valores de 5 5 o 5.0. Este
fenmeno tambin ayuda a explicar la capacidad de las races de acidificar suelos, si bien la liberacin de CO, que experimentan durante la respiracin
tambin provoca acidificacin por la formacin de cido carbnico, como se muestra en la Reaccin 7.1.
3. Hace que el citosol se vuelva electronegativo respecto a la pared celular en tanto el citosol pierde H* pero retiene OH~. La retencin de un anin y la
prdida de un catin por el citosol explican la diferencia negativa de electropotencial ya descrita a travs ele la membrana plasmtica.
Si bien la membrana plasmtica es el primer obstculo para la absorcin, la mayora de los solutos entran en la vacuola, por lo que tambin deben
penetrar en la membrana del tonoplasto. El tonoplasto posee una ATPasa que bombea protones hacia el interior de la vacuola, lo cual la hace cida (con
frecuencia hasta cerca de un pH 5, pero an ms bajo en frutas ctricas y en algunas otras partes del vegetal). Esta ATPasa se diferencia en varios aspectos de
la que se encuentra en la membrana plasmtica. Lina diferencia importante es que transporta H + sin combinarse con un fosfato proveniente del ATP. Una
segunda diferencia es que transporta dos H+ hacia el interior de la vacuola por cada ATP que se hidroliza, de modo que es ms eficiente, en trminos
energticos, que la ATPasa de la membrana plasmtica. Una tercera diferencia es que no depende de K*. No se sabe cmo transporta los protones, pero es
probable que la energa que se libera cuando el ATP se hidroliza haga que cambie su estructura, de manera que se abre un orificio a travs del cual se fuerzan a pasar dichos protones. Las membranas de retculo endoplsmico y dictiosomas tambin poseen una ATPasa que bombea protones de manera
semejante a como ocurre en el tonoplasto; esta bomba transporta H + hacia el interior de los organelos y los hace un poco cidos.
Adems de la ATPasa, el tonoplasto posee una piro- fosfatasa para bombeo de protones que utiliza la energa del pirofosfato inorgnico (Rea y Sanders,
1987). Como en el ATP, participa la hidrlisis de un ster de pirofosfato:

El pirofosfato en realidad existe en forma de quelato con Mg2 + ,.corno el ADP y el ATP. Es posible que la bomba de pirofosfatasa transporte slo un H + hacia
dentro de la vacuola por cada pirofosfato que se hidro- liza, pero esto an no se ha comprobado. Al parecer, dicha bomba contribuye menos a la absorcin
de solutos por las vacuolas que la ATPasa, en parte debido a. que la concentracin de PP en el citosol es menor que la de ATP.
Por ltimo, existe otra clase ms de ATPasa que transporta protones a travs de las membranas de cloroplas- tos y mitocondrias. Como se describe en
los Caps. 10 y 13, esta bomba sintetiza ATP, ms que hidrolizarlo.

7.9 Forma en que Portadores y Canales Aceleran el Transporte Pasivo

En esta seccin se especula acerca de los posibles mecanismos por los que portadores y canales aceleran de manera pasiva el movimiento de solutos a
travs de las membranas, valindose del gradiente de potencial elctrico establecido por bombas como la ATPasa o la pi- rofosfatasa. Se piensa que los
portadores se unen de manera especfica a uno o unos pocos solutos relacionados (de forma muy semejante a como una enzima se une a su sustrato).
Tambin se piensa que los portadores son protenas integrales que atraviesan la membrana de un lado a otro. El trmino portador implica que estas
protenas se unen a solutos y se desplazan a travs de la membrana con ellos, pero es casi seguro que no sea ste el caso. Es ms probable que sufran un
cambio conformacional (estructural) reversible que facilite la transferencia del soluto. La Fig. 7-17 proporciona una explicacin, muy esquemtica, de cmo
puede funcionar un portador para movilizar un soluto a favor de un gradiente en energa libre hacia el interior de una clula.

Sabemos mucho ms acerca de las protenas de canal que de los portadores, en especial en las clulas animales. La investigacin de las protenas de
canal en los
Figura 7-17 Modelo simplificado de la difusin facilitada o uniporte. Aqu se supone que una protena integral de membrana, un portador, consta de dos mitades
guales (es un dmero) con un agujero en el centro por el que puede desplazarse un soluto a favor de su gradiente electroqumico. Para simplificar, este ejemplo
implica que slo la diferencia de concentraciones es importante para establecer el gradiente electroqumico.

vegetales no comenz sino hacia 1984, por lo que an hay mucho por aprender de ellas (vanse las revisiones de Hedrich et al., 1987; Satter y Moran, 1988;
He- drich y Schroeder, 1989; Schroeder y Hedrich, 1989; y Tester, 1989). Las protenas de canal son protenas integrales. Como todas las protenas, existen
en slo una estructura conformacional que tiene la energa libre ms baja posible en el medio celular particular en cualquier momento dado; la conformacin
vara cuando vara el medio celular. Algunas de tales conformaciones poseen un orificio central, por el que los solutos pueden pasar a muy altas velocidades.
Satter y Moran (1988) establecieron que iones especficos pueden desplazarse a travs de los canales abiertos con una rapidez de 108 iones por segundo,
que ellos sugieren es tres o cuatro rdenes de magnitud ms rpido que el movimiento va portadores.
El que los canales estn abiertos, cerrados o parcialmente abiertos depende del medio. Hasta ahora se han descubierto dos tipos principales de canales:
Uno tiene un sistema de compuerta que responde al gradiente de voltaje que existe a travs de la membrana, mientras que el otro responde a estmulos
moduladores externos como luz u hormonas. En la Fig. 7-18 se muestra

Figura 7-18 Modelo hipottico de un canal inico. Las protenas integrales que atraviesan la membrana contienen un orificio central por el que pueden pasar
iones, como el potasio, siguiendo su gradiente electroqumico. En este modelo, los iones potasio pueden desplazarse de izquierda a derecha hacia el citosol, a
favor de un gradiente electroqumico (ntese el exceso de cargas negativas a la derecha del canal) pero contra un gradiente de concentracin de potasio. La
protena sensora, inmersa cerca o dentro de una protena integral, es capaz de responder, tanto en su porcin externa a la clula como en el citosol, a estmulos
qumicos causados por luz, hormonas o incluso iones calcio. La protena de canal tiene una compuerta (centro a la derecha) que se abre o se cierra, por
mecanismos desconocidos, en respuesta a gradientes de voltaje a travs de la membrana o a sustancias producidas por estmulos ambientales.

el modelo de un canal inico y cmo puede permitir la entrada de iones K+ al interior de la clula.

7.10

Cmo las Membranas se Valen de las Bombas de Protones para el Transporte de Iones

Como sugiri Peter Mitchell en 1961 (vase su revisin en Mitchell, 1985), las bombas de protones que se describieron aqu (en gran parte desconocidas
para l en 1961) proporcionan a las clulas dos fuentes utilizables de energa: el gradiente de pW y el gradiente de potencial elctrico. (Esta investigacin
dio a Mitchell el premio Nobel de qumica en 1978.) Por lo comn, una de estas dos fuentes de energa se utiliza para transportar aniones, cationes o
molculas neutras a travs de las membranas. (Evidencias adicionales sugieren que la membrana plasmtica puede oxidar ciertos compuestos que hay en el
citosol, y utilizar la energa que se libera para inducir la absorcin de algunos solutos. Aqu DO se analizar este tema, revisado por Bienfait y Ltt- ge, 1988, y
por Crane y Barr, 1989.)
Primero consideremos la membrana plasmtica. La absorcin de cationes es favorecida por el gradiente de potencial elctrico (el electropotencial es
negativo en el citosol). Para K + , NH4 + , Mg2+ y Ca2 + , esta absorcin casi siempre se da con la ayuda de un portador ode un canal. La difusin a travs de una
bicapa lipdi- ca es mucho ms lenta y no puede explicar la inhibicin por iones relacionados o la cintica multifsica de dichos iones. Slo la participacin
de una protena de transporte puede explicar lo que sabemos acerca de la absorcin de cationes. En especial, los investigadores han buscado evidencias de
una verdadera bomba de r potasio en vegetales, pero no se ha encontrado ninguna (vanse las revisiones de Kochian.y Lucas, 1988, y de Lttge y Clarkson,
1989). Por lo general, el bombeo dfrecto de K+ hacia el interior de la clula por una ATP- asa slo se presenta en animales que poseen una bomba de sodio y
potasio. La explicacin ms sencilla para la absorcin de cationes en las clulas vegetales es un proceso conocido como uniporte o difusin facilitada. En
este proceso participan protenas de transporte especficas que aceleran en gran medida el movimiento de cada catin hacia el interior de las clulas, a favor
de su gradiente global de energa libre (electroqumico). Para K+ y NH4+ , la proporcin de concentraciones medidas dentro y fuera de la clula indica los
gradientes aproximados de concentracin a travs de la membrana plasmtica, ya que estos dos cationes monovalentes no estn unidos con fuerza a anin
alguno. La quelacin de Mg2 + y Ca2 + por clorofila, protenas, ATP u otros ligandos que hay en el citoplasma hace mucho ms difcil medir sus
concentraciones como especies libres en el interior de las clulas. De cualquier forma, una difusin facilitada hacia el interior de las clulas a travs de la
membrana plasmtica, por medio de un uniportador, puede funcionar mediante un mecanismo como el que ilustra el modelo de un portador sencillo que
se muestra en la Fig. 7-17.
El gradiente de potencial elctrico no favorecer la absorcin de molculas neutras como azcares, y repeler aniones como bicarbonato, nitrato,
cloruro, fosfato y sulfato (Dunlop, 1989). Para azcares y aniones, las clulas se valen del gradiente de pH entre la pared celular y el citosol (digamos, valores
de pH de 5 y 7,
o una diferencia de 100 veces en la concentracin de H+). Este gradiente de pU, junto con el gradiente en el potencial elctrico, favorece la resorcin
pasiva de H +, aunque los iones H + entran con mucha lentitud, a menos que se combinen con un portador o pasen a travs de un canal. Es importante el que
dichos portadores permiten la entrada de H + slo si al mismo tiempo se pueden combinar con un anin y ayudar a transportarlo al interior de la clula. ste
es un ejemplo de simporte o cotransporte (Fig. 7-19). Se cree que existen transportadores distintos para aniones diferentes, lo cual explica la especificidad en
la absorcin de

Figura 7-19 Cotransporte (simporte) y transporte de intercambio (antiporte) de solutos a travs de la membrana plasmtica inducidos por la energa del ATP. La
ATPasa translocadora de protones que se muestra a la izquierda extrae H + del citosol. Estos protones pueden regresar al citosol por cotransporte, va portadores
que a la vez introducen aniones como nitrato o azcares como sacarosa. El sistema antiportador implica tambin el regreso de protones al citosol, pero se
intercambian uno o ms protones por cada catin que sale, como NA +, mg2+ o Ca2 +

aniones que se mencion en la Seco. 7.6. Existen otros transportadores que movilizan azcares y aminocidos al interior de las clulas por cotransporte con
H (Gia- quinta, 1983; Reinhold y Kaplan, 1984; Lemoine et a!., 1989). En todos estos ejemplos de cotransporte. el H ' entra en la clula a favor de su
gradiente de potencial electroqumico, mientras que el anin o la molcula neutra se transportan de forma activa; esto es, un proceso que libera energa
activa para otro que la requiere.
La absorcin pasiva de H+ tambin puede utilizarse para transportar cationes fuera de la clula de manera simultnea, como se muestra en la Fig. 7-19.
En este caso, se piensa que un portador se combina con H 4 en la cara externa de la clula y con, por ejemplo, Na + en el interior; a continuacin, de alguna
manera transporta estos iones en sentidos opuestos. Este es un ejemplo de antiporte o transporte de intercambio. (Parece imposible que un canal pueda
efectuar un transporte de este tipo.) El transporte de intercambio de Na* es un recurso importante de las clulas de la raz para eliminar este ion de su citosol
cuando la planta crece en suelos salinos (Briskin y Thornley, 1985). Adems, como se mencion en el Cap. 6, la concentracin de Ca2+ en el citosol de los
eucariotes se mantiene extremadamente baja (con frecuencia de 0.1 a 1.0 ^M). La energtica que se describe en la ecuacin de Nernst favorece mucho la

difusin libre de Ca+ hacia el citosol, por lo que debe utilizarse energa para eliminarlo (por medio de las bombas de Ca 2' que se mencionaron en la Seccin
7.8).
El transporte de solutos a travs del tonoplasto hasta la gran vacuola central hace uso de energa procedente de la ATPasa o de la bomba de
pirofosfatasa. Este- proceso permite el almacenamiento de iones y molculas que el citosol puede recuperar cuando se requiera. En el caso del Na4 , el
transporte de intercambio hacia la vacuola impide que este ion se acumule en el citosol en cantidades peligrosas. (Algunos vegetales acumulan y toleran Na +
, tema que se estudia en el Cap. 26.) El calcio tambin se transporta al interior de la vacuola por antiporte con H4 (Hlumwald y Poole, 1986; Bush y Sza, 1986;
Kasai y Muto, 1990). Los mecanismos por los cuales la vacuola absorbe aniones no han sido bien estudiados. Es probable que los aniones entren por un
proceso de uniporte, ya que la vacuola es ligeramente positiva respecto al citosol. Sin embargo, tambin es posible que los aniones entren en la vacuola por
transporte de intercambio con protones.

7.11

Absorcin de Molculas muy Grandes, Incluso Protenas, por Organelos

Un ltimo tipo de transporte que deseamos mencionar tiene que ver con el movimiento de protenas de un organelo a otro dentro de una misma clula.
Estamos acostumbrados a pensar que las molculas muy gra des son incapaces de penetrar las membranas, y sin er bargo s lo hacen. Hasta donde sabemos,
cada una c las cientos o miles de protenas que hay en el ncle deben ser absorbidas por ste despus de ser sintetiz das sobre los ribosomas del citosol; y la
mayora de I; protenas que hay en cloroplastos y mitocondrias se sii tetizan, no en el interior de estos organelos, sino tan bin sobre los ribosomas del
citosol. Otras proten; se transportan hacia el interior de vacuolas, paredes c hilares, retculo endoplsmico, glioxisomas y perox somas. Cmo puede
cualquier organelo absorber tali protenas?; y, cmo es que stas son absorbidas sl por el organelo apropiado?
En gran parte se desconocen las respuestas a est; preguntas, pero cada vez hay ms informacin al re pecto (Dingwall y Laskey, 1986; Della-Cioppa et al
1987; Jones y Robinson, 1989; Keegstra et al., 1989 Lo que ya se sabe y lo que se sospecha puede resumi se en unas pocas conclusiones principales:
2. Siempre o casi siempre se requiere ATP que sum nistre energa para el transporte, pero es improbabl que dicha energa se utilice principalmente para
esta blecer un gradiente de /;H o de potencial elctrico. Un; hiptesis popular seala que el ATP proporciona I; energa necesaria para desenredar la
estructura globu lar de las protenas (hacer ms lineales y alargadas laca dena o cadenas de polipptidos), de manera que la penetracin sea ms fcil (Hurt,
1987).
3. Existe gran especificidad respecto a qu organelo absorbe determinada protena. Esta especificidad es resultado del pareamiento de los sitios de
reconocimiento de una protena de membrana que se encuentra en b] superficie del organelo y de la protena por absorber Parece ser que cloroplastos y
mitocondrias carecen dd glicoprotenas en sus membranas externas, por loqufl es poco probable que haya participacin de polisactl dos como los que dan
las propiedades de reconoc miento a la mayora de las otras membranas (Secc, 7.4)1
4. La especificidad en la protena se limita a slo un parte relativamente pequea de ella, con frecuencia di unos 20 a 50 aminocidos unidos a uno de los
exirtl mos de la molcula. Esta secuencia de aminocidos conoce en los cloroplastos como secuencia de trnsiiJ en las mitocondrias como secuencia
directora (o secutil cia lder) y en ncleo y retculo endoplsmico como*! cuencia sealizadora (o secuencia seal). (Es de esperar qi* se idearn los nombres
suficientes para cada organd celular, a menos que se llegue a un acuerdo para ims* lo trmino inclusivo que represente lo que pareces* un mismo proceso
general de reconocimiento.) I
5. Despus de que el organelo apropiado absorbeS protena, la secuencia de reconocimiento se escindeflB droliza) y se libera la proteina madura funcional,
lis probable que la secuencia de reconocimiento sea hidrolizada an ms hasta fragmentarse en cada uno de sus 20 a 50 aminocidos. De alguna manera, la
proteina madura encuentra el camino que la lleva al lugar adecuado en el organelo donde realiza su funcin para ayudar a mantener la vida.

7.12

Correlaciones entre las Funciones de la Raz y la Parte Area en la Absorcin de Minerales

Excepto por ciertas especies del desierto que poseen , sistemas radicales inusualmente grandes, casi todas las
especies destinan la mayor parte de su biomasa a la parte area (Secc. 7.1) Por consiguiente, parece razonable que la absorcin de sales minerales deba
estar controlada en parte por procesos que ocurren en las partes areas. Hay dos formas de ver este control. En un sentido de demanda, la parte area puede
incrementar la absorcin de sales minerales en la raz haciendo un uso rpido de dichas sales para destinarlas a productos de crecimiento (protenas, cidos
nucleicos y clorofila, por ejemplo). En un sentido de aporte, la parte area aporta carbohidratos, por medio del floema, que la raz debe respirar para
producir el ATP que se necesita para la absorcin de sales minerales (vase, por ejemplo, Gas- tal y Saugier, 1989). Es probable que la parte area tambin
proporcione a las races ciertas hormonas que influyen en la absorcin radical. De hecho, hay muchos
i datos de que existe interdependencia entre las actividades de raz y parte area (lo cual se revisa en Wild , etal., 1987; Ingcstad y gren, 1988; Cooper y
Clark- ; son, 1989; y Glass, 1989). As por ejemplo, se han obtenido correlaciones excelentes entre la rapidez de Crecimiento de la parte area y la rapidez
de absorcin

Figura 7-20 Interrelaciones entre algunos procesos fisiolgicos que ocurren en races y partes areas y que influyen en la absorcin de sales minerales

provenientes del suelo. (Tomado de Starr y Taggart, 1989.)

de nitrgeno, fsforo y potasio. Las tasas de respiracin de las races a travs del tiempo en ocasiones estn muy correlacionadas con las tasas de fotosntesis
(con un mximo cerca del medio da). La respiracin radical se ha correlacionado con la velocidad ele translocacin de azcar hacia las races. La absorcin
mxima de iones nitrato y amonio se corrclaciona con tasas fotosintticas mximas, excepto que la absorcin se retrasa unas 5 h, lo cual sugiere la
necesidad de translocacin de carbohidratos y respiracin radical durante este periodo de retraso. Las correlaciones no demuestran una relacin de causa y
efecto, pero en una planta en crecimiento la interdependencia de las actividades de raz y parte area parecen obvias. En la Fig. 7-20 se resume este
concepto de manera sencilla.

Im*/,- >L br