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27 de

enero de
2015

BIORREMEDIACION

UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES.


FACULTAD DE INGENIERIA
INGENIERIA PETROLERA

INTEGRANTES:
AGUILAR CHURA JUAN CARLOS
BALLIVIAN VILLEGAS ALVARO ADOLFO
LIMACHI FLORES RUDDY EFRAIN
SERRANO ALCON MARCELO ANDRES
MATERIA:
DOCENTE:

CONTROL AMBIENTAL (PET 233)


LUIS QUIROZ IBAEZ

LA PAZ BOLIVIA
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BIORREMEDIACION

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BIORREMEDIACION
1. INTRODUCCION.
La contaminacin por derrames de combustibles son considerados uno de los
accidentes ambientales ms difciles de remediar. Para remediar estos problemas
se desarrollaron tecnologas cuyo objetivo era el de devolver las caractersticas
naturales (previas a la contaminacin) del ambiente contaminado.
Justamente una de las tecnologas desarrolladas es la denominada
biorremediacin. Se conoce como biorremediacin a cualquier proceso que utilice
microorganismos, hongos, plantas o enzimas derivadas de ellos para retornar un
medio ambiente alterado por contaminantes a su condicin natural. El
procedimiento consiste en la extraccin, eliminado o neutralizado de
contaminantes de suelo, agua o aire mediante la utilizacin de los organismos
vivos y sus propiedades absorbentes, extractivas, degradadoras, purificadoras o
transformadoras de los diferentes medios de sustancias no toxicas o
desactivadas, tales como metales pesados, hidrocarburos, plaguicidas
organoclorados, materiales radioactivos.
La biorremediacin est basada en la capacidad que tienen estos
microorganismos de crecer a partir de la utilizacin de sustancias recalcitrantes al
medio ambiente. Algunos de ellos son capaces de degradar estos compuestos
hasta dixido de carbono, sales, agua y otros productos inocuos al medio
ambiente, los cuales se integran posteriormente a los ciclos biogeoqumicos
naturales. Esta tcnica permite tratar grandes volmenes de contaminantes con
un impacto ambiental mnimo, a diferencia de otros procedimientos de
descontaminacin.
Figura 1. Microorganismo degradador de petrleo

Fuente: Centro de Investigaciones Microbiolgicas, CIMIC

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En la biorremediacin se pueden emplear organismos propios o ajenos del sitio,


tambin la biorremediacin puede realizarse in situ o ex situ. El proceso de
biorremediacin se ha usado con xito para tratar suelos, lodos y sedimentos
contaminados con hidrocarburos de petrleo, solventes, explosivos, cloro fenoles,
pesticidas, conservadores de madera e hidrocarburos aromticos poli cclicos.
Las ventajas que tiene la biorremediacin en comparacin con los otros de tipos
de tratamientos de contaminantes son:
Es mucho menos costosa que las tecnologas alternativas.
Es natural y normalmente no requiere el uso de agentes qumicos.
Transforma los contaminantes a productos no peligrosos, o los
degradacompletamente, en lugar de simplemente transferirlos a una
fasediferente o a otra localidad.

2. OBJETIVOS.
2.1. OBJETIVO GENERAL.
Realizar un estudio general acerca dela importancia de la biorremediacin para la
regeneracin de los suelos y de esa manera minimizar el impacto que tiene la
contaminacin de suelos hacia el medio ambiente.

2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS.


Realizar el estudio del procedimiento y la metodologa a usar en cuanto a la
biorremediacin.
Analizar el estudio de un campo en Bolivia.

3. MARCO TEORICO
3.1. LA BIORREMEDIACION
La biorremediacin es el proceso utilizado por el hombre para detoxificar variados
contaminantes en los diferentes ambientes mares, estuarios, lagos, ros y
suelos usando de forma estratgica microorganismos, plantas o enzimas de
estos. Esta tcnica es utilizada para disminuir la contaminacin por los
hidrocarburos de petrleo y sus derivados, metales pesados e insecticidas;
adems se usapara el tratamiento de aguas domsticas e industriales,aguas
procesadas y de consumo humano, aire y gases de desecho.
A continuacin se muestra un cuadro que implica yodos los parmetros que se
deben tomar en cuenta en el proceso de biorremediacin:
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Figura 2. El procedimiento para la biorremediacin

BIORREMEDIACIO
BIORREMEDIACIO
N
N

CARACTERISTICA
CARACTERISTICA
S
DEL
S DEL
CONTAMINANTE
CONTAMINANTE

COMPOSICION
COMPOSICION
TOXICIDAD
TOXICIDAD

OPTIMIZACION
OPTIMIZACION
MICROBIOLOGIC
MICROBIOLOGIC
A
A

NUTRIENTES
NUTRIENTES
HUMEDAD
HUMEDAD

TEGNOLOGIA
TEGNOLOGIA
APLICADA
IN
APLICADA IN
SITU
SITU
SITU Vs
Vs EX
EX SITU
COMBINADA
COMBINADA

LANDFARMING
LANDFARMING
COMPOSTAJE
COMPOSTAJE
BIOVENTING
BIOVENTING

METODOS
METODOS
ANALITICOS
ANALITICOS

ADECUACION
ADECUACION

MUESTREO
MUESTREO

ESTADISTICA
ESTADISTICA
PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO
S
S

REGULACION
REGULACION
LEGAL
LEGAL

VALORES
DE
VALORES DE
REFERENCIA
REFERENCIA

Fuente. Tesis de grado; Vernica Paulino Orosco

3.2. ASPECTOS A CONSIDERAR EN LA BIORREMEDIACION.


El proceso de biorremediacin debe incluir invariablemente una demostracin
cientfica vlida de la efectividad del proceso y la seguridad ambiental.
Efectividad en el caso de la biorremediacin de petrleo, significa el
establecimiento de que:
a. La remocin o desaparicin del petrleo es primeramente atribuible a la
biodegradacin y no a otro proceso.
b. El porcentaje de incremento de la degradacin es suficientemente rpido
(con verificacin estadstica) que la velocidad natural. Para poder justificar
el gasto del esfuerzo de implementar el proceso de biorremediacin a una
gran escala. La seguridad ambiental requiere considerables esfuerzos para
verificar que ocurren efectos ecolgicos no adversos como resultado de la
aplicacin de fertilizantes.

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3.3. MEDIDAS DE LA EFECTIVIDAD DE LA


BIORREMEDIACION.
Se deben considerar los siguientes aspectos:
1. Cambios cualitativos en la composicin de los hidrocarburos que son
indicativos de procesos biolgicos. Se realiza la cromatografa gaseosa,
teniendo en cuenta los procesos de los factores ambientales (fotlisis,
disolucin fsica, lavado qumico, volatilidad, etc.) que pueden contribuir a
la desaparicin del petrleo.
2. Los grupos indicadores de la degradacin son los hidrocarburos aromticos
seleccionados ya que s estos se degradan, los hidrocarburos alifticos
sern siempre tambin intensamente degradados.
3. Disminucin del porcentaje de la masa de petrleo que son tambin
indicativos de procesos biolgicos.
4. Reduccin del peso total del petrleo, determinando la prdida de peso en
las distintas fracciones de hidrocarburos del petrleo
5. La medicin del nmero de microorganismos degradadores de petrleo es
un indicador inicial de la factibilidad de la biorremediacin.
6. Estudio de la mineralizacin (mediciones de la produccin de CO 2 total).
7. Efecto de la accin del nitrgeno.
El procedimiento de biorremediacin se lo puede representar mediante un
diagrama de flujo determinando los pasos a seguir para la realizacin del trabajo.
Figura 3. Los pasos a seguir para la realizacin del trabajo.

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Evaluacin del sitio y
muestreo

Determinacin del nivel


y caractersticas del
contaminante
Estimacin del potencial
de biodegradacin
Estimacin de nmero
de bacterias en suelo
Diseo de la unidad
bsica de tratamiento
Ajuste del pH del suelo
Ajuste del contenido de
humedad del suelo
Adicin de fertilizantes
Adicin de agentes
Remocin e irrigacin

Fuente. Elaboracin propia

TECNOLOGIAS DE LA BIOREMEDIACION.
Tecnologas
de
Biorremedia
cin

Definicin

Aplicaciones

Limitaciones

Costos y Tiempo
de Remediacin

Bioventeo

Estimula la
biodegradaci
n natural de
cualquier
compuesto
biodegradable
en condiciones
aerbicas

Compuestos
orgnicos
biodegradabl
es. Ej.
Hidrocarburos
de petrleo,
solventes no
clorados,pesti
cidas y
conservadore

El tipo y la
concentracin
de los
contaminantes,
falta de
nutrientes, bajo
contenido de
humedad,
dificultad para
alcanzar elflujo

Tiempo de duracin
de algunos meses
hasta varios aos.
Costo de operacin
vara entre 10 y 70
$us/m^3.

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Bioestimulac
ion

Bioaumenta
cin

Biolabranza

Circulacin de
soluciones
acuosas
(nutrientes y/u
oxgenos) a
travs del
suelo
contaminado
para estimular
la actividad de
los
microrganismo
s autctonos.
Se utiliza
cuando la
microflora
autctona es
insuficiente.
Consiste en la
adicin de
microorganism
os vivos, que
tengan la
capacidad de
degradar el
contaminante
en cuestin
La superficie
del suelo
contaminado
es tratada en
el mismo sitio
por medio del
arado.

s de la
madera.

de aire
necesario.

Compuestos
orgnicos
biodegradabl
es, suelos
contaminados
con gasolina
y pesticidas.

No es
recomendable
para suelos
arcillosos,
altamente
estratificados
ya que pueden
provocar
limitaciones en
la trasferencia
de oxgeno.

Se lo utiliza
para tratar
suelos
contaminados
con
herbicidas,
insecticidas,
nitrofenoles,
hidrocarburos
de petrleo e
hidrocarburos
aromticos
cclicos.

Antes de llevar
a cabo la
bioaumentaci
n deben
realizarse
cultivos de
enriquecimient
o, aislar
microorganism
os y cultivarlos
hasta obtener
grandes
cantidades de
biomasa.
La biolabranza
debe
manejarse con
cuidado para
prevenir
contaminacin
de acuferos,
superficies de
agua o la
cadena
alimenticia.

Son usados
para tratar
disel,
gasolina,
lodos
aceitosos,
coque y
algunos
pesticidas.

Tiempo de duracin
puede ser de varios
aos. Su costo
oscila entre 10 y 30
$us/m^3 aunque
de acuerdo a la
naturaleza y la
profundidad de los
contaminantes y el
uso de
bioaumentacin
puede aumentar
sus costos.
Puede durar varios
meses o aos. Su
utilizacin no
implica mucho
capital ni costos de
operacin.

Puede durar varios


meses o aos. Su
utilizacin no
implica mucho
capital ni costos de
operacin.

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4. METODOLOGIA.
4.1. LANDFARMING.
La tcnica ms usada para la biorremediacin de los lodos contaminados con
hidrocarburos y de otros desechos de la industria petrolera es la denominada
landfarming.
Se realiza trasladando los contaminantes a un suelo no contaminado, el cual ha
sido preparado con anterioridad para evitar su contaminacin y la de las aguas
subterrneas con sustancias que puedan producirse durante el tratamiento.
Para ello se efecta el diseo del lugar donde se depositan los contaminantes,
aislando el material de tratamiento del rea no contaminada con una tela
impermeable.
Figura 4. Preparacin del suelo para landfarming

Fuente. Elaboracin propia

Para empezar el procedimiento, se hace una bsqueda y seleccin de bacterias


nativas aisladas de las muestras de suelos que se encuentran contaminados, ya
que estas tienen la capacidad catablica para crecer bajo las condiciones fsicoqumicas y de estrs a las que estn sometidas, y tendrn un mejor desempeo a
la hora de la biorremediacin.
La bsqueda comienza en el procesamiento de una muestra de suelo mediante
una serie de diluciones, tratando de obtener aquellos morfotipos cultivables; ya
que una gran parte de los microorganismos del suelo no pueden ser recuperados
en medios para el cultivo de microorganismos.
Adems de una bsqueda general, se realiza una especfica a travs de medios
selectivos y diferenciales, en la cual se pretende aislar ciertos morfotipos como
las Pseudomonasp. y bacterias lactosa positivas bacterias capaces de utilizar la
lactosa, debido a su bien conocida actividad degradadora de hidrocarburos.
Luego, estas diluciones son sembradas en diferentes medios de cultivo donde
grandes familias de morfotipos se hacen presentes; stas varan en densidad y
diversidad. La diversidad est determinada por los morfotipos recuperados que se
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diferencian segn su morfologa macroscpica su aspecto fsico, mientras que


la densidad est determinada por el nmero total de individuos que pertenecen a
un grupo con una morfologa macroscpica comn.
Estos datos de densidad y diversidad son de gran valor. Primero, porque nos
indican acerca de la calidad microbiana del suelo, ya que un suelo que tiene gran
nmero de morfotipos, es un suelo que tiene vida y por ende presentauna buena
prospeccin para la biorremediacin debido a su posible alta actividad
microbiana. Segundo, porque aquellos morfotipos que se encuentren en mayor
nmero sern seleccionados por su habilidad para sobrevivir a la presin selectiva
del contaminante y para usarlo como fuente de energa y carbono, pues por eso
estn creciendo.
Figura 5.Diversidad microbiana presente en una muestra contaminada con crudo

Fuente: Centro de Investigaciones Microbiolgicas, CIMIC.

Ya seleccionados los morfotipos se conforma un consorcio o pool de


microorganismos degradadores de hidrocarburos y, utilizando la estrategia de
bioaumentacin, se hace una produccin a mayor escala y en
proporcionesestratgicas de estos. En esta produccin debe tenerse en cuenta el
volumen de suelo contaminado para biorremediar, la concentracin del
contaminante y las clases de morfotipos que se aislaron.
VENTAJAS DEL MTODO LANDFARMING:
Es til en un amplio rango de hidrocarburos, por ejemplo;
Contaminacin del terreno por derrames de hidrocarburos
Residuos de fondo de tanque
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Recortes de perforacin
Residuos de piletas API
Independiente de las concentraciones presentes de los materiales

DESVENTAJAS DEL MTODO LANDFARMING:


Este tratamiento presenta una serie de limitaciones, generalmente
relacionadas con parmetros que puedan desacelerar la actividad biolgica
durante la biodegradacin
Es difcil predecir el tiempo de requerido para un proceso adecuado y el
seguimiento y control de la velocidad y/o extensin del proceso. El proceso
se retarda por inclemencias climticas

5. APLICACIN PRCTICA.
APLICACIN DE LA BIORREMEDIACIN EN SUELOS CONTAMINADOS CON
HIDROCARBUROS,MEDIANTE BIOAUMENTACIN Y BIOESTIMULACIN
(LANDFARMING) DE CEPAS BACTERIANAS AUTCTONAS
Autora: Silvia Mayte Cedillo Gmez.
Lugar de Investigacin: REFISUR (Chuquisaca).

5.1. DISEO METODOLOGICO.


5.1.1.Variables.

Para lograr el cumplimiento de los objetivos y como resultado de la revisin


bibliogrfica de los mtodos, para determinar los parmetros de la
factibilidad de aplicar la biorremediacin en suelos contaminados con
hidrocarburos, se describen a continuacin las variables que influyen en su
determinacin, as como las variables a medir para determinar la
factibilidad del proyecto. Entre estos se encuentran:
Tiempo de degradacin.- El trabajo se realiz en un lapso de 80
das.
Humedad.-Cantidad de agua presente en el suelo cada 20 das
mediante desecamiento hasta obtener un peso constante.
Potencial de hidrogeno.- Sellev a cabo la disolucin del suelo en
agua destilada para determinar el pH mediante un potencimetro.
Densidad poblacional de microorganismos.- mediante el
recuento de colonias en placa.
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Concentracin de hidrocarburos totales.


Masa de sustrato.
Concentracin de nutrientes.
Temperatura ambiente y presin atmosfrica.

5.1.2.Delimitacin de campo de estudio.


Los tratamientos de biorremediacin ex situ, se llevaron a cabo durante un
periodo total de 80 das de tratamiento, dentro de una cmara de
biorremediacin, instalada en el Laboratorio de Microbiologa de la Universidad
San Francisco Xavier, en Yotala, Bolivia.
Las muestras de suelos contaminados fueron extradas de la ex refinera Carlos
Montenegro, administrada por la empresa Yacimientos Fiscales Petrolferos
Bolivianos, la cual se encuentra en periodo de desmantelacin y abandono.
5.1.3.Tipo de estudio y diseo general.
La investigacin se centr en la biorremediacin, mediante la degradacin de los
hidrocarburos en suelos crnicamente contaminados, realizando
estainvestigacin de forma experimental a travs de la evaluacin de 6
tratamientosdiferentes y un blanco en estudio, los cuales permitieron determinar
eltratamiento ms eficiente en la degradacin de HTP.
5.1.4.Recoleccin y ordenamiento de la informacin.
Los datos para evaluar del proceso de biorremediacin de suelos contaminados
con hidrocarburos, por medio de bioaumentacin y bioestimulacin de cepas
bacterianas autctonas, se obtuvieron al medir en un semestre acadmico las
variables mencionadas durante 80 das de tratamiento.
5.1.5.Eleccin del diseo experimental.
La investigacin se lo realizo en 3 fases:
Caracterizacin del suelo contaminado.
Obtencin y reproduccin de cepas bacterianas autctonas para
produccin de un cultivo microbiolgico usado para la bioaumentacin.
Se prepararon seis diferentes tratamientos, con diferentes porcentajes de
suelo contaminado, materia orgnica, cantidades diferentes de adicin de
cultivo bacteriolgico y concentraciones de nutrientes.
Posteriormente de la aplicacin del cultivo microbiolgico, nutrientes y aireacin,
se realizan las pruebas de pH, temperatura, recuento de colonias en placas e
hidrocarburos totales de petrleo a los 20, 40, 60 y 80 das de tratamiento
evaluando as la degradacin de los hidrocarburos totales y el desarrollo de los
microrganismos en el tiempo.
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MUESTREO: La recoleccin de la muestra se lo realizo en un rea de 300 metros


recolectando 10 muestras al azar a una profundidad de 20 cm. Luego se procedi
a colocar la muestra en una lona o plstico limpio.

Figura 6.Esquematizacin de los tratamientos o cmara de remediacin.


T1
25% SUELO CONTAMINADO
75% SUSTRATO
0.5 g/l DE NUTRIENTES
50 ml CULTIVO MICROBILOGICO

T2
25% SUELO CONTAMINADO
75% SUSTRATO
1 g/l DE NUTRIENTES
1000 ml CULTIVO MICROBILOGICO

T3
50 % SUELO CONTAMINADO
50 % SUSTRATO
0.5 g/l DE NUTRIENTES
50 ml CULTIVO MICROBILOGICO

T4
50 % SUELO CONTAMINADO
50 % SUSTRATO
1 g/l DE NUTRIENTES
100 ml CULTIVO MICROBILOGICOSFS

T5
75% SUELO CONTAMINADO
25% SUSTRATO
0.5 g/l DE NUTRIENTES
50 ml CULTIVO MICROBILOGICO

T1
75% SUELO CONTAMINADO
25% SUSTRATO
1 g/l DE NUTRIENTES
100 ml CULTIVO MICROBILOGICO

Figura. Elaboracin propia

5.1.6.Resultados.
1. CARACTERIZACION DEL SUELO CONTAMINADO.
Tabla 1. Caracterizacin del suelo contaminado

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Fuente. Ing. Silvia Mayte Cedillo Gmez

2. RESULTADOS OBTENIDOS DE LA INVESTIGACION.


Figura 7. Concentracin de hidrocarburos totales de petrleo (HTP) durante los 80
das de tratamientos

Fuente. Ing. Silvia Mayte Cedillo Gmez


Figura 8. Eficiencia de cada tratamiento en la degradacin de HTP

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Fuente. Ing. Silvia Mayte Cedillo Gmez

Durante la investigacin se evaluaron las diferentes variables,que determinan las


condiciones del suelo contaminado con hidrocarburos depetrleo, con el objetivo
de hacer evidente el proceso de biorremediacin, logrando alcanzar los
parmetros de sanidad que caracterizan a un suelo sano. En el tratamiento 6 fue
calificado como el ms eficiente, en lse aplic el inoculobacteriano y a estos
microorganismos se les proporcionaron las condicionesptimas tanto del medio
(humedad, temperatura, pH, aireacin y sustrato) comode nutrientes (fsforo y
nitrgeno) y carbono presente en el suelo contaminado,como nica fuente de
energa, metabolizndolos y logrando as la completadegradacin de HTP. Con un
75 % de suelo contaminado y un 25 % desustrato, en este tratamiento se alcanz
un alto ndice de degradacin en untiempo relativamente corto.
Lo antes expuesto nos demuestra la importancia de la biorremediacin, ya que
mediante esta se logra reducir el tiempo de degradacin de los
sueloscontaminados con hidrocarburos, siendo esto sumamente importante
paragarantizar la eficiencia de cualquier proyecto de descontaminacin; los
cualespor el contrario, al no ser sometidos a ningn proceso de biorremediacin,
tardaran demasiado tiempo en degradar los HTP presentes, siendo esto
unafuente potencial de riesgo de contaminacin latente a largo plazo, por su alto
contenido de txicos.

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6. CONCLUSIONES
6.1.1.Conclusiones.
LA BIOREMEDIACION ES UN METODO MUY UTIILIZADO POR SU BAJO COSTO
Y FACIL APLICACIN EN GRANDES VOLUMNES DE SUELOS MINIMAMENTE
CONTAMINADOS
ESTE TRATAMIENTO DE SUELOS ES CONVENIENTE PARA SUELOS UBICADOS
EN AREAS INOSPITAS. ESTE SE HACE IN SITU (El uso de cepas bacterianas
autctonas hace ms eficiente el proceso de biorremediacin)
EL LANDFARMING ES LA TECNOLOGA DE REMEDIACIN PREFERIDA POR LA
EMPRESAS PARA RECUPERAR LAS CARACTERISTICAS ORIGINALES DEL
SUELO ANTES DE SUFRIR CONTAMINACIN

7. BIBLIOGRAFIA.

APLICACIN DE LA BIORREMEDIACIN EN SUELOS CONTAMINADOS CON


HIDROCARBUROS,MEDIANTE BIOAUMENTACIN Y BIOESTIMULACIN DE
CEPAS BACTERIANAS AUTCTONAS; tesis; Silvia Mayte Cedillo Gmez
BIORREMEDIACION DE VEGETACIN CONTAMINADA CON PETRLEO POR
DERRAMES EN EL CAMPAMENTO; tesis de grado; autor Vernica Paulina
Orosco.
POTENCIAL DE LA BIORREMEDIACION DE SUELO Y AGUA IMPACTADOS POR
PETROLEO EN EL TROPICO MEXICANO; Randy H. Adams Schroeder1.
BIORREMEDIACIN DE RESIDUOS DEL PETRLEO; Paola Andrea Vargas
Gallego / Ren Ricardo Cullar / Jenny Dussn

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