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Pontificia Universidad Catlica del Ecuador

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales


Escuela de Ciencias Biolgicas
Laboratorio de Gentica
Tema: Epistasis.
Resumen.
La investigacin se centr en la demostracin e identificacin del fenmeno gentico
llamado: epistasis. Para ello se emple como organismo de estudio a Drosophila melanogaster.
Esta se la cruz con cepas puras de dos mutaciones: dumpy (alas reducidas a 1/3 de lo normal) y
vestigial (alas reducidas que impiden el vuelo). Se las cri y reprodujo hasta llegar, en una
primera fase, a la primera generacin (F1) con todos los descendientes de fenotipo silvestre. Se
llev ms lejos estos resultados autofecundando la F1 para obtener una segunda generacin (F2)
con un cambio notable en las proporciones tpicas mendelianas. Esto comprueba la existencia de
la interaccin entre genes de distinto locus y la presencia de la epistasis.
Introduccin.
La segunda ley de Mendel, la de segregacin independiente, dice que dos o ms genes
presentes en un individuo se segregarn y expresarn sus respectivos fenotipos
independientemente de otro. Es as que si se tiene en un individuo un gen A con fenotipo A y un
gen B con fenotipo B, sus respectivos alelos y fenotipos se comportarn exactamente igual que
en un cruce dihbrido sin alterar las proporciones fenotpicas en la progenie (9:3:3:1). Pero esta
ley tiene algunas excepciones y tal es el caso de la interaccin gnica (Gardner, 1998).
La interaccin gnica es el proceso en el que dos genes interactan cambiando o alterando
los fenotipos o sus proporciones que normalmente se tiene. Genera un cambio en la tpica
proporcin fenotpica de un dihbrido, 9:3:3:1, aumentando o disminuyendo segn el caso de la
interaccin (Pierce, 2012).
Existen varios dos tipos de interaccin gnica, las allicas y las epistticas. Las allicas se
generan a nivel de las formas alternativas de un gen, los alelos, como es el caso de la
codominancia y la herencia intermedia. Las interacciones epistticas o simplemente epistasis se
produce cuando dos genes de distinto locus, codifican para una misma caracterstica provocando
que exista un opacamiento o contraste de uno de los dos genes, dependiendo el caso (Puertas,
1999).
La epistasis se puede dar de distintas maneras, y se las identifica segn el cambio que
generan en las proporciones fenotpicas. El siguiente cuadro contiene las distintas formas que
varan segn el estado en que se encuentra dicho gen, es decir en homocigocis o heterocigosis:

Tabla 1. Tipos de epistasis segn el genotipo.

Adems la epistasis se debe tener en cuenta que es una alteracin de las clases fenotpicas o
las proporciones fenotpicas se alteran pero por una interaccin de los genes mas no por una
recombinacin de los mismos en los cromosomas homlogos. Es por eso que se debe mantener
en cuenta que los locus de estos genes no se encuentren juntos y preferiblemente distantes o
mejor an en distintos cromosomas (Griffiths, 2002).
Metodologa.
Se recibi moscas dumpy y vestigial de laboratorio.
Se separaron hembras vrgenes de ambas mutaciones.
Se las puso en un frasco, cada una con tres machos. Se hizo el cruce directo y el recproco.
Directo: hembra vestigial con 5 machos dumpy. Recproco: hembra dumpy con 5 machos
vestigial.
Se esper a obtener la primera generacin.
Con filial 1 igualmente se separaron hembras vrgenes y se las puso en un frasco con tres
machos cada una.
Se obtuvo filial 2 y se procedi a ver cuntos fenotipos existan y la cantidad de moscas de cada
uno. Las moscas y sus respectivos fenotipos se almacenaron en tubos Eppendorf de 2 ml, con
alcohol etlico al 70%.
Resultados.
Tabla 2. Cronograma de trabajo del proyecto.
Fecha
2013-10-03

2013-10-08
2013-10-10

Descripcin de la actividad
Se recibieron dos frascos con cepas de
Drosophila melanogaster. Cada frasco
contena la mutacin dumpyy vestigial. Se
esper eclosin para aislamiento de hembras
vrgenes.
Frasco que contena cepa dumpy no produca
individuos adultos; se lo cambi. Frasco
vestigial con pupas.
Frasco dumpy solo larvas. Frasco vestigial
con pupas an.

2013-10-11
2013-10-15
2013-10-17
2013-10-18
2013-10-22
2013-10-24
2013-10-25
2013-10-29

2013-10-31
2013-11-05
2013-11-07
2013-11-14

Frasco dumpy con larvas. Frasco vestigial con


adultos; se aislaron hembras vrgenes y
machos para cruce directo y recproco
respectivamente (3 frascos de cada uno de los
cruces).
Frasco dumpy con pupas.
Frasco dumpy con adultos. Se aislaron machos
y hembras vrgenes para el cruce directo y
recproco respectivamente. (3 frascos de cada
cruce ms 5 nuevos frascos, 3 directos y 2
recprocos).
3 nuevos frascos de cada cruce.
No existen cambios en los tubos de F1, tanto
en directo como en recproco.
Larvas F1 en tubos directos. En tubos
recprocos solo 2 de ellos con larvas.
Larvas F1 en todos los tubos.
Pupas F1 en todos los tubos; se aislaron los
padres. Se espera eclosin de adultos
silvestres por complementacin gnica. Los
descendientes sern puestos en frascos para su
reproduccin por autofecundacin (F1xF1).
8 frascos F1xF1. Se guardaron tubos para
seguir produciendo este cruce.
Pupas F2 en todos los frascos.
Eclosin de adultos F2. Se contabilizaron los
fenotipos guardndolos en tubos Eppendorf de
2ml.
Se contabiliz todas las moscas. 505 moscas
en total. Se procedi a redactar el informe.

Cruce Directo F1:


(macho) dumpy x
dp/dp; +/+
Proporciones Fenotpicas F1 Directo:
100% silvestre (dp/+; vg/+)

(hembra) vestigial.
+/+; vg/vg

Cruce Recproco F1:


(hembra) dumpy
x
dp/dp; +/+
+/+; vg/vg
Proporciones Fenotpicas F1 Recproco:
100% silvestre (dp/+; vg/+)

Cruce F1xF1 (F2):(machos) silvestre x (hembras) silvestre


dp/+; vg/+
dp/+; vg/+

(macho) vestigial.

Proporciones Fenotpicas en F2:


Dumpy: 9/16
Silvestre: 4/16
Vestigial: 3/16
Tipo de Epistasis: Recesiva simple.
Tabla 3. Resultados de X2 de los tres fenotipos obtenidos en F2.
Fenotipo
Dumpy
Silvestre
Vestigial
Total

Observado
300
150
55
505

Esperado
284.0625
126.25
94.6875

Desvo
15.9375
23.75
-39.6875
0

Figura 1. Fenotipo dumpy.

Figura 2. Fenotipo vestigial.

X2
0.89
4.47
16.63
21.99

Figura 3. Fenotipo silvestre.

Discusin.
Los primeros cruces donde se procuraba separarlos en directo y recproco se los realiz con
el objetivo de asegurar que no exista ligamiento. A pesar de que dumpy y vestigial se encuentran
ambos en el cromosoma 2 de D. melanogaster pero a una distancia grande, dp13,0 y vg67,0 (54
cM de distancia) lo cual provoca una alta frecuencia de recombinacin. Tambin los resultados
de estos cruces produjeron descendientes 100% silvestres debidos al fenmeno de
complementacin. Este fenmeno se produce cuando dos genes de distinto locus que se
encuentran en interaccin por sus caractersticas similares (en este caso ambas mutaciones
codifican para el fenotipo tamao de las alas) estn involucrados en la misma ruta metablica
por lo que la ausencia o presencia de uno permite la existencia de un determinado fenotipo. La
existencia del fenotipo silvestre se debe a que, por complementacin, en la va metablica de los
genes para tamao de las alas el hecho de que estn en estado heterocigoto, con presencia del
alelo silvestre para ambas mutaciones, hace que esta ruta siga su camino normalmente sin ser
interrumpida para presentar la alternativa silvestre. Pero si una de las mutaciones est presente
se debe a que esta ha inhibido uno de los intermediarios en la ruta y se presenta el producto no
terminado que sera la respectiva mutacin, ya sea dp o vg (Alhuwalia, 2009).
Los cruces siguientes se los realiz a partir de los descendientes silvestres de F1, una
autofecundacin (F1 x F1), donde se obtuvieron tres clases fenotpicas: silvestre, dumpy y
vestigial. La existencia de tres fenotipos provoc duda ya que sin contabilizar no se poda
deducir las proporciones y por consiguiente el tipo de epistasis. Luego de que se contabiliz
(505 moscas) se pudo deducir el tipo de epistasis segn las proporciones; la epistasis obtenida
fue la simple recesiva con las proporciones 9:3:4 (Pierce, 2012).
Segn el anlisis de X2 que se realiz se puede deducir que los fenotipos dumpy y silvestre
presentan datos no significativos, es decir que ocurrieron al azar. Por otro lado el fenotipo
vestigial tiene un valor de X2 muy significativo, que talvez se deba a una sobrepoblacin de los
otros individuos o un mal conteo de las cepas. Pero por otro lado no se puede descartar que la
proporcin de individuos no se 9:3:4 ya que se obtuvieron como se esperaba: 3 fenotipos con las
proporciones correspondientes (Griffiths, 2002).

Conclusiones.
Para conocer el tipo de epistasis que opera en un organismo, a nivel experimental, no basta
con un solo cruce ya que por la complementacin gnica los genes tienden a presentar fenotipos
completamente distintos a los que se estn utilizando (por ejemplo en la F1 de este experimento
donde se obtuvo 100% silvestre y desparecieron los otros 2 caracteres). Para ello se deben llevar
los cruces experimentales recomendablemente hasta una F2 donde se puedan observar las
proporciones y as definir el tipo de interaccin episttica entre los genes.
Adems los estudios de epistasis permiten conocer cmo se comportan ciertos genes en la
naturaleza. Generalmente se suele asociarlos con la proporcin tpica mendeliana de un cruce
dihbrido (9:3:3:1) pero con estos estudios se comprueba que las leyes de Mendel no siempre se
cumplen, sino que estas pueden estar siendo afectadas por distintos factores, en este caso la
epistasis, para que se alteren las proporciones.
Bibliografa.

Ahluwalia, KavitaB.. Genetics [e-book]. New Delhi: New Age International Pvt.
Ltd., Publishers; 2009 [cited 2013 Nov 28]. Availablefrom: EbookLibraryPierce,
B.A., 2010., Gentica Un enfoque conceptual.,Tercera edicin., Editorial mdica
Panamericana., Madrid-Espaa.
GARDNER, E., Principios de Gentica., Quinta edicin., Editorial Limusa., 1998.,
Mxico D.F.
Griffiths, A.J.F et al., Gentica., Sptima edicin, McGraw Hill Interamericana,
2002., Madrid-Espaa.
Puertas, M.J., 1999., Gentica Fundamentos y perspectivas., Segunda edicin.,
McGraw-Hill Interamericana., Madrid- Espaa.
Stansfield, W.D., 1992., Gentica., Tercer edicin., McGraw- Hill- Interamericana.,
Mxico.