Los cambios de las especies, en composiciones de

lpidos en el hgado de Tiburones de Aguas poco

profundas del Ocano ndico
RESUMEN:
Se estudiaron En el Ocano ndico Los aceites de hgado de cinco especies de tiburones
dominantes, Alopias superciliosus, Carcharhinus falciformis, C. longimanus, Prionace
glauca, y Sphyrna lewini por sus clases de lpidos, cidos grasos y triglicridos (TAG)
composiciones moleculares, con el fin de entender e identificar las especies intercambios
y posibles vas de utilizacin.
En este estudio se obtuvo que:
-

El Triacilglicerol fue el predominante en la clase de lpidos (65,2-86,1%)

El cido graso principal en lpidos totales y TAG fue cido docosahexaenoico
(C22:6n-3; DHA). el macho S. lewini fue a niveles notables (43,4%).
Las combinaciones de cido graso predominante de las molculas TAG en todas
las especies de tiburones fueron palmtico, DHA y cido oleico (DOP 12,5-19,9%) y
palmtico, DHA y cidos palmtico (PDP; 8,4 a 15,4%).

Los tiburones, en contraste con otras especies de peces, no tienen una vejiga natatoria,
pero el hgado del tiburn es un rgano hidrosttico.
El hgado del tiburn:
-

Es el sitio principal de almacenamiento de lpidos.

Es una potencial fuente de productos farmacuticos, especialmente vitamina Una
suplementos, cosmticos y lubricantes, etc.
Los de aguas profundas contienen altas cantidades de hidrocarburos (escualeno)
y lpidos de baja densidad (teres diacylglycerol).

En los ltimos aos, en la Ciencia han surgido pruebas para apoyar las pretensiones de
los valores teraputicos de productos de tiburn, en particular las aletas de tiburn,
cartlago y el aceite de hgado como una buena fuente de n-3 cidos grasos
poliinsaturados.
Como resultado, el mercado fuerte para los productos de tiburn se est desarrollando en
todo el mundo actual.
Los Lpidos marinos contienen una cadena larga n-3 poliinsaturados cidos grasos
(PUFA). cido docosahexaenoico (DHA) y cido eicosapentaenoico (EPA) tienen
convertido en un foco importante de la investigacin de lpidos en la pasada dcada
debido a sus posibles beneficios para la salud para los seres humanos.
Se han encontrado n-3 PUFA diettico para alterar los niveles de lpidos plasmticos
favorablemente, y esto incluye la reduccin de los triglicridos (TAG), reduciendo la

presin arterial en personas con hipertensin leve, as como la inhibicin de la

arteriosclerosis.
El DHA es esencial para el ptimo desarrollo del sistema nervioso de los mamferos; en
particular, se necesita gran cantidad de DHA para la funcin de las barras de pigmento
visual.

Investigaciones recientes afirman:

-

en alta mar el aceite de hgado de tiburn tiene un efecto curativo sobre las
heridas y tiene un beneficioso efecto en las personas que sufren de varios tipos de
enfermedades.
El aceite de hgado de tiburn tiene un efecto positivo en el tratamiento del SIDA.
El hgado de tiburn se ha encontrado para inhibir el crecimiento de las clulas
cancerosas mediante la estimulacin inmune en el sistema.
El aceite reducir los efectos txicos en los pacientes que han sido expuestos a la
radiacin en el tratamiento de cncer.

Al observar todos los beneficios del tiburn, en especial el hgado; hay varios
investigadores para explorar el potencial de la utilizacin comercial de hgado de tiburn
como una fuente de salud beneficiosa de productos.
INVESTIGACION REALIZADA EN SRI LANKA PARA SABER DETALLADAMENTE LOS
CAMBIOS EN LAS ESPECIES DE 5 TIBURONES DOMINANTES, CARACTERISTICAS
QUIMICAS Y POTENCIAL DE APLICACIONES.
Sri Lanka est rodeada por el Ocano ndico y las especies de tiburones en aguas poco
profundas hacen un importante contribucin (12% de la cosecha total) a la pesca marina
de la isla.
46 especies de tiburones que habitan en aguas de Sri Lanka, Carcharhinus falciformis
domina la captura y contribuye aproximadamente el 60,9% del total de los tiburones
seguido de Prionace glauca (12,3%). Con la demanda actual de las fuentes naturales de
nutracuticos y cidos grasos altamente insaturados (HUFA), la utilizacin de los aceites
de hgado de tiburn es muy previsto. Por lo tanto se requiere estudio detallado para
comprender su potencial para aplicaciones contiene componentes bio-activos de alto
valor. En los estudios actuales, los aceites de hgado a partir de cinco especies
dominantes, Se analizaron las especies de tiburones en aguas de Sri Lanka para estudiar
las clases de lpidos, cidos grasos, y la molcula TAG composiciones con el fin de
detallar los cambios en las especies, caractersticas qumicas y el potencial de
aplicaciones.
Materiales y mtodos empleados:
Cinco especies de tiburones:
-

Alopias superciliosus (grande trilladora tiburn ojo)

C. falciformis (tiburn sedoso)

C. longimanus (tiburn punta blanca ocenico)

P. glauca ( tiburn azul)
Sphyrna lewini (cabeza de martillo tiburn)

Fueron seleccionados al azar para la estudiar desde la captura comercial de los peces
los mercados a lo largo de la costa del mar occidental (Beruwala y Negambo) de Sri
Lanka durante octubre 1999. Los resultados fueron acerca de La longitud del cuerpo, el
peso corporal, y el hgado pesos de tiburones se registraron (Tabla 1).
Se analizaron las especies con respecto a su gnero separadamente para el contenido de
aceite y el aceite extrado se almacen bajo nitrgeno a ( 20 1 oC) mientras se
esperaba un transporte areo a Japn para su posterior anlisis.
Los productos qumicos utilizados en el presente estudio eran de grado analtico y
comprado a Wako Pure Chemical Industries (Osaka, Japn).
Extraccin y anlisis de lpidos:
Los aceites totales de las muestras de hgado homogeneizadas se extrajeron usando
cloroformo / metanol / agua (2: 2: 1,8, v / v / v) de acuerdo con el procedimiento de Bligh y
Dyer. 20
Los aceites extrados se almacenaron en vidrio viales a ( 20 1 oC) despus de retirar
cloroformo por evaporacin rotatoria y luego de sellado bajo corriente de nitrgeno, la
combinacin de clases de lpidos se analiz por cromatografa de capa fina (TLC). La
muestra de aceite (10 mg) se disolvi en 1 ml de hexano y manchado (5 metro L) en
placas de gel de slice (5 20 cm, 0,25 mm espesor, gel de slice 60 F 254 ; Merck,
Darmstadt, Alemania), utilizando capilares desechables mini-cap (0,5 metro L). Una
muestra manchado sobre placas de TLC se desarrollado usando el sistema disolvente,
petrleo ter / ter dietlico / cido actico (90: 10: 1 v / v / v), rociado con 30% de solucin
(v / v) de cido sulfrico y se mantiene a ( 110 0C ) durante 20 min. Los puntos negros que
se obtuvieron fueron escaneados utilizando un vuelo de doble longitud de onda
densitmetro de barrido (CS 9000, Shimadzu, Kyoto, Japn) para cuantificar clases de
lpidos separados. Los componentes de la clase de lpidos fueron identificados con
comparacin de la R F valores de las normas, y los resultados se expresaron como una
composicin de rea densidad.
La separacin de los triacilgliceroles
Triglicridos de las muestras de aceite se separaron sobre placas de TLC (TLC, 20 *20
cm, 0,5 mm de espesor, El gel de slice 60 F 254 ; Merck) utilizando una mezcla de ter
de petrleo / ter dietlico / cido actico (80: 20: 1 v / v / v).
El TAG separado se recuperaron raspando la banda apropiada y se extrajo utilizando una
mezcla de cloroformo / metanol (20: 1 v / v). El TAG aislados fueron analizados para
composicin de cidos grasos mediante cromatografa de gas-lquido (GC).
Anlisis de composicin de cidos grasos por cromatografa de gas-lquido
El TAG separados de las muestras de lpidos del hgado fueron metilado segn el
funcionario AOCS mtodo.

Las composiciones de cidos grasos de metil steres se analizaron mediante

cromatografa de lquidos de gas (GC 14-B; Shimadzu) equipado con un Omegawax 320
columna capilar de slice fundida (30m * 0,32 mm i.d., 0,25 metro espesor de pelcula m;
Supelco, PA, EE.UU.). los perfiles de temperatura de cromatgrafo fueron como sigue.
La temperatura del horno se program desde 170 oC a 200 oC con una tasa de rampa de
0,5 oC.
Temperatura puerto de inyeccin fue en 250 oC, y las llamas del detector de ionizacin
estaba en 260 OC Presin C. La entrada del helio fue en 2 kg / cm 2 y velocidad de flujo fue
en 32 cm/s. Los Picos cromatogrficos del cido graso steres metlicos fueron
identificados por comparacin de sus tiempos de retencin con los estndares y los
cidos grasos se cuantificaron para la composicin relativa por zonas en porcentaje.
Anlisis de triglicridos de alta cromatografa lquida de rendimiento y evaporando
detector de dispersin de la luz.
La composicin TAG determin un alto rendimiento para la cromatografa lquida (HPLC)
de acuerdo con el mtodo modificado de Shirai et al. 21 Aproximadamente 50 mg de TAG
separadas de crudo aceite de hgado de tiburn se disolvi en 1 ml de acetona. Diez
microlitros de esta solucin se inyectaron en la HPLC (LC-10AD; Shimadzu) equipado con
un inyector (Rheodyne 7125; Cotati, CA, EE.UU.) y un evaporando detector de dispersin
de luz (PL-ELS 1000; Polymer Laboratories, Iglesia Stratton, Reino Unido).
Los condiciones del detector fueron los siguientes: evaporacin temperatura 90 oC,
nebulizador 40 oC, y la presin de aire 0,5 MPa. La fase mvil era una mezcla de
acetona / acetonitrilo (60:40, v / v) y se pas a travs de la columna a 1 ml / min a 20 oC.
Dos columnas, Develosil C30-UG 5, silano triacontacyl (tamao de poro 5 metro m, 4,6
mm I.D. Longitud 250 mm; Nomura, Aichi, Japn) y Docosil-B, silano dococyl (tamao de
poro 5 metro m, 4,6 mmI.D.*Longitud 250 mm; Senshu Scientific, Tokio, Japn) conectado
en serie se utilizaron. Los datos fueron grabados con la grabadora Chromatopac (C-R6A;
Shimadzu). Las composiciones de TAG se cuantificaron de acuerdo a su porcentaje de
rea obtenida por la integracin del rea del pico de la luz de evaporacin detector de
dispersin (ELSD) como un cromatograma mtodo semicuantitativo.
La Identificacin de los triglicridos por la alta cromatografa lquida de rendimiento y
qumica a presin atmosfrica espectrometra de masas de ionizacin Las especies de
TAG se identificaron por HPLC y qumica a presin atmosfrica de ionizacin masa
espectrometra (APCI-MS). Las condiciones de HPLC fueron las mismos que
anteriormente. El HPLC-MS analiza que se realizaron en un sistema de suministro de
disolvente (Alianza 2690; Waters, MS, EE.UU.), junto a la Alianza Micromass ZMD
equipado con una fuente APCI por la adquisicin de barrido completo. La adquisicin de
datos, procesamiento y control de instrumentos se realizaron con Software MassLynx
(Waters, MS, EE.UU.). las condiciones instrumentales fueron las siguientes: temperatura
del vaporizador de 400 oC, voltaje capilar de 4,0 kV, y tensin en corona 40 V. Los
espectros se obtuvieron durante el alcance m / z 0 a 1.200, con un tiempo de ciclo de 1,0
s. Identificado
Las Especies de TAG se compararon con la retencin tiempos obtenidos a partir de
HPLC-ELSD.

anlisis estadstico
Los anlisis se realizaron por triplicado en todas las muestras.
Las medias con desviacin estndar fueron reportados para cada muestra. Microsoft
Excel combina con el statcel de cuatro pasos sobresalen se utiliz sistema de estadsticas
para transformar los datos; entonces el anlisis de la varianza ( ANOVA ) Y Boniferroni
prueba de comparacin mltiple se realizaron a una probabilidad ( P ) nivel de P < 0.05
para evaluar la significacin de las diferencias entre valores medios.
Los resultados obtenidos de la investigacin fueron:
Morfomtrico composiciones de datos y de clase de lpidos de estas especies se dan en
la Tabla 1 y la Tabla 2, respectivamente.
-

Las especies pertenecan a tres familias: Alopidae, Carcharhinidae, y que son

Sphyrnidae
El contenido de aceite de hgado de promedio de aguas poco profundas tiburones
estaba en el intervalo de 26,1 a 60,1%.
El aceite de hgado contenido de tiburones hembras fue mayor que la de los
tiburones machos en todas las especies (Tabla 1). Esta diferencia entre los
gneros era notable por C. falciformis y la especie A. superciliosus.
El ndice hepatosomtico fue alta en C. longimanus pero no hubo correlacin
discernible entre contenido de aceite de hgado y el ndice hepatosomtico.
Todas las especies que figuran principalmente TAG como el clase de lpidos
principal, con un promedio de entre 65.2 y 86,1% de los lpidos totales (Tabla 2).
El contenido de TAG fue significativamente (P <0,05) mayor en C. falciformis
(hembra) en comparacin con todas las especies estudiadas aqu
independientemente de su sexo
ster de esterol (SE) de contenido P. glauca, sin embargo, fue significativamente
mayor que en C. falciformis.
El hidrocarburo (HC) contenido es tambin mayor en las especies P. glauca. En
diacylglycerol teres (Dage; <3,0%), y steres de cera (WE; <1.0%) fueron
considerablemente ms bajos (Tabla 2).

Composicin de cidos grasos de los triglicridos

-

Aceite de hgado de cinco especies de tiburones contena un promedio de 27.041.0% de cidos grasos saturados (SFA), 16.3- cidos grasos monoinsaturados
38,7% (MUFA) y 30,2-55,8% PUFA en sus lpidos totales del hgado (datos no
mostrado).
En todas las especies de la graso predominante cidos eran C22: 6n-3 (DHA),
C16: 0 (cido palmtico), y C18: 1n-9 (cido oleico).
No hubo significativa diferencia en C22: 6n-3 PUFA y composiciones totales en los
aceites de hgado entre las diferentes especies.
Los C18: 1n-9 y el total de contenidos MUFA fueron significativamente (P <0,05)
menor en C. falciformis y S. lewini que las otras especies examinadas (datos no
mostrada).
El contenido total de SFA de aceite de hgado de C. longimanus y C. falciformis
fueron significativamente (P <0,05) ms alta en comparacin con A. superciliosus.

No hubo diferencia significativa en C16: contenido de cido graso 0 entre las

especies examinado por sus lpidos totales.
Los principales cidos grasos de TAG fueron los mismos que los de los lpidos
totales (Tabla 3). El ms abundante de cido graso en el grupo de SFA fue C16: 0
(14,7-27,5%), mientras que C18: 1n-9 (8,2-25,0%) y C22: 6n-3 (15.5- 43,9%)
fueron los cidos grasos dominantes de la MUFA y grupos AGPI, respectivamente.
Aceites de hgado de C. falciformis y S. lewini mostraron un patrn de distribucin
de cidos grasos diferente.
Notablemente,el (promedio MUFA, 17,4% para C. falciformis y, 20,7% para S.
lewini) fue menor, mientras que el PUFA contenido era ms alto que los de las
otras especies.
El n-6 PUFA contenido total fue significativamente (P <0,05) mayor en C.
falciformis que en A. superciliosus, pero ninguna diferencia podra ser observado
con otras especies. Curiosamente, en estos dos especies C22: 6n-3 representaron
el 80% de la PUFA total de la fraccin TAG.
la composicin de cidos de aceites de hgado de S. lewini era marcadamente
diferenciado de otros tiburones con respecto a su gnero (es decir, los tiburones
machos tenan 43,4% C22: 6n-3, mientras que los tiburones hembra solamente
registran 14,6% de cidos grasos totales).

Distribucin de composiciones moleculares de triacilglicerol

-

El cromatograma de HPLC de especies moleculares TAG de C. longimanus aceite

de hgado lo muestra la figura 1.
A pesar de que ms de 40 componentes del TAG molculas se identificaron en los
tiburones de aguas poco profundas aceite de hgado, la proporcin relativa de los
principales TAG composiciones de especies moleculares estn presentes en Tabla
4.
El graso predominante en general combinaciones de cido en TAG fueron DOP
(12,5-20,0%) seguido de PDD (8,4-15,4%), y POO (1,0- 18,0%) (P, cido palmtico
(C16: 0); O, cido oleico (C18: 1n-9); D, cido docosahexaenoico (C22: 6 n-3)).
Variaciones similares en composiciones TAG fueron encontrado en A.
superciliosus, C. falciformis, C. longimanus y P. glauca con respecto a la especies.
Las combinacines de cidos grasos de tridocosahexaenoin (DDD) exista en S.
lewini (masculinos) aceites de hgado en el nivel de 3,0%, aunque DDD no se
encuentra abundantemente en naturaleza.
Para obtener caractersticas generales y funcional propiedades de los lpidos de
los tiburones de aguas poco profundas, datos sobre la composicin TAG se
reordenan en el base de saturacin e insaturacin (Tabla 4).
La combinacin de los
cidos grasos era abundante en TAG especies
moleculares de C. falciformis (42,5-45,4%), C. longimanus (29,1-32,1%) y S. lewini
(28,6-49,0%) los aceites de hgado, mientras que el cido graso combinaciones de
A. superciliosus y P. glauca fueron distribuido por igual en tres grupos 1, saturados
y poliinsaturados; 2, cidos grasos saturados y monoinsaturados; 3, cidos grasos
saturados, monoinsaturados y poliinsaturados
La combinacin de los cidos grasos dentro del grupo de cidos grasos
(saturados mismo solamente, monoinsaturados slo y slo poliinsaturados) no era
abundante en los aceites de hgado de aguas poco profundas tiburones del
Ocano ndico.

Discusion:
El contenido de aceite de los tiburones de aguas someras (26.1- 60,1%) hgados en el
presente estudio no fue tan alta como la reportada para los hgados de tiburones de
aguas profundas (~ 75,0%). 4 Esta diferencia se expres por la ndice hepatosomtico de
los tiburones de aguas someras (5,0-10,0%), que es inferior a las de aguas profundas
tiburones (15,0-25,0%). Los resultados observados son de conformidad con las especies
de tiburones de aguas someras atrapados en el Ocean13 ndico y el Golfo de California
waters.18
El contenido de aceite de hgado de tiburones hembras general tena un valor alto en
comparacin con los de los tiburones machos en todas las especies examinadas. Esta
diferencia es ms probable debido al aumento de la deposicin de grasa en el hgado de
la hembra antes de ser trasladado a el desarrollo de los ovarios durante la reproduccin.
Sin embargo, los lpidos depositados en el hgado de los tiburones tambin depender de
las conductas migratorias de tiburones y la alimentacin hbitats. Por lo tanto, la
capacidad de acumulacin de los lpidos en el hgado depende de nmero de factores
biolgicos tales como el tamao, el sexo, estadio del desarrollo embrionario, el rea y la
temporada.
Se observaron muy bajos los contenidos PL (<2,7%), y el bajo contenido de PL y de alta
contenido del TAG hacen que el hgado, su aceite en los tiburones de aguas poco
profundas sea
dominada por TAG (media: 72,0 a 80,0%), pero slo contena una
pequea cantidad de lpidos como HC y de baja densidad. Sin embargo, las especies
examinadas en el presente estudio contena muy poco HC (3,1-5,0%). Una excepcin fue
P. glauca, que contenida cantidad considerablemente mayor de HC (11,0%). Se ha
informado de que el aceite de hgado de P. glauca-Superficie atrapado en el Golfo de
Vizcaya en Portugal, que figura 58.0% y 39.0% TAG HC.30 Aunque P. glauca se
encuentran generalmente en aguas poco profundas aguas, estas especies pueden vivir a
profundidades de hasta 500 M31 Por lo tanto, P. glauca podra contener mucho HC o
hepticos baja densidad lpidos.
Por lo tanto, la cantidad de lpidos hepticos de baja densidad no tiene relacin directa
con la cantidad de elevacin hidrosttica proporcionada por el hgado en las especies de
aguas poco profundas, y flotabilidad debe lograrse en parte por hidrodinmico ascensor.
Composicin de cidos grasos de los triglicridos:
El patrn de distribucin de cidos grasos en diferentes rganos de peces se ve afectada
por la temporada, agua la temperatura, la naturaleza de las grasas en la dieta, la
madurez, y el gnero. En el pasado reciente, una serie de investigaciones se han
realizado sobre cidos grasos composicin de los aceites de hgado de pescado para las
fuentes potenciales de n-3 PUFA.5-9 Por ejemplo, Somniosus pacificus, 15 Peces perro
Atlntico, 27 puffer ndico, Atlntico 28 merluza, 29 platija plana cabeza, 33 dice, 34 y
monje pescado, 34 han sido examinados. Sin embargo, todas estas especies contenida
cantidad relativamente baja de DHA (C22: 6n-3) <15,0%. El TAG de hgado de merluza
del Atlntico contenida 14,4% de DHA (C22: 6n-3) y 6,9% de EPA (C20: 5 n-3), mientras
que su PUFA represent slo 28,8% 0,29 Se ha informado de que hay un alto cantidad de
C22: 6n-3 (33,0-36,0%) en el aceite de hgado de S. zygaena y S. lewini atrapados desde

el Pacfico Ocano. En el mismo estudio un nivel muy bajo (10.0- 12,0%) de DHA (C22: 6
n-3) tambin se ha encontrado en algunos ejemplares (datos no indicados).
Cuando se comparan los datos antes mencionados con la del presente estudio, es
evidente que en aguas poco profundas los aceites de hgado de tiburn de agua son
comparativamente altos en n-3 PUFA, especialmente DHA (C22: 6 n-3). Por lo tanto, sera
sostenible al utilizar tiburn en aguas poco profundas TAG hgado como una fuente
potencial de n-3 PUFA o DHA(C22: 6n-3).
Distribucin de las especies moleculares en triacilgliceroles
Aunque se evaluaron las composiciones de cidos grasos como el estado nutricional de
los lpidos, su bienestar fsico y propiedades funcionales pueden ser explicados por la
composicin de TAG. La composicin y sus correspondientes cantidades tambin son
responsables para ciertas propiedades fsicas importantes del producto final
Se ha observado que el aceite de Atlantic el arenque y el lanzn contena principalmente
saturada / doble monoinsaturadas (SSM) de cidos grasos de tipo combinacin, que
comprende 14,3% y 14,5%, respectivamente, del total de TAG
En el caso del aceite de hgado de bacalao del TAG dominante era Popo (Po,
palmitoleico) y en papardas aceite era el PED (E eicosapentaenoico,). La presencia de
DDD molcula en el listado y el aceites de atn en cantidades traza ha sido
reported.37,38 Debido a que DHA (C22: 6 n-3), palmtico (C16: 0) y cidos oleico (C18:
1n-9) son los principales cidos grasos en petrleo esos cidos grasos del hgado de
tiburn se distribuyen predominantemente en las molculas de TAG. Sin embargo, desde
nuestro conocimiento, este es el primer estudio llevado a cabo para la determinacin de la
etiqueta de composiciones moleculares de aceite de hgado de especies de tiburones de
aguas poco profundas en el Ocano ndico. Se concluye que la principal TAG
composiciones moleculares del aceite de hgado de especies de tiburones examinados no
son diferentes a los de otros aceites de pescado que se utilizan actualmente en el la
industria para nutracuticos, especialmente DHA o EPA suplementos.
Aunque los tiburones son una especie objetivo o Submeta, varias toneladas terminan en
los mercados de pescado cada ao.
Los productos quieren ganar popularidad y la demanda de los mismos aumenta, cada vez
es ms importante encontrar nueva fuentes de n-3 PUFA. Se ha demostrado que el
hgado lpidos de tiburones de aguas poco profundas se podan permitir un importante
fuente de cidos grasos poliinsaturados, y especialmente el DHA (C22: 6n-3), por lo que
sera ms til utilizar el aceite de hgado de las especies estudiadas aqu, en lugar de
perder el hgado a bordo o despus aterrizaje de pescado en los mercados.
ANEXOS:
TABLA 1

TABLA 2

TABLA 3

TABLA 4