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Las sales actúan en forma tóxica antes que como estímulo de la germinación de la semilla. La acción tóxica del catión o del anión puede superar al efecto producido sobre la presión osmótica (Guerrier, 1981). Los efectos de la salinidad varían dependiendo del estadío de crecimiento y de la duración del estrés. En algunas especies, la tolerancia a la salinidad en la germinación es independiente de la tolerancia a la salinidad en la emergencia, crecimiento vegetativo, floración y fructificación. (Priano y Pilatti, 1989; Ferreiro y Peinemann, 1972). Bibliografía : www.scielo.cl/pdf/ciagr/v35n3/art05.pdf 2da cita se evaluó el efecto del estrés salino con soluciones de MgCl2 y CaCl2, sobre la germinabilidad de sus semillas. El MgCl2 provocó una reducción significativa en la germinación de C. bonariensis, mientras que el CaCl2 redujo la germinación en C. canadensis, a partir de concentraciones de 4,0 y 6,0 cmolc·dm-3, respectivamente. En general, para ambas especies y tipos de sal, la tasa de germinación se redujo a partir de 2,0 cmolc·dm-3, (Bioagro, 2011). Los experimentos se efectuaron en el Laboratorio de Semillas de la Universidad del estado de Mato Grosso, Campus de Alta Floresta, MT, Brasil, entre noviembre 2007 y mayo 2008, (Bioagro, 2011). Los experimentos se efectuaron en el Laboratorio de Semillas de la Universidad del estado de Mato Grosso, Campus de Alta Floresta, MT, Brasil, entre noviembre 2007 y mayo 2008, (Bioagro, 2011). Se colectaron semillas de C. canadensis y C. bonariensis en áreas cultivadas, cuando estaban listas para la dispersión por el viento y se realizó una selección visual, desechando las semillas con evidencia de daño o deformes, para luego almacenarlas a 12,0 ± 0,5 ºC hasta su uso, (Bioagro, 2011). Las semillas fueron sembradas en dos hojas de papel Germibox esterilizado, como sustrato, humedecido hasta saturación en soluciones de MgCl2 o CaCl2, colocadas en cajas de acrílico de 11 x 11 x 3,5 cm, previamente desinfectadas con lejía comercial. Cada caja, con 50 semillas, representó una unidad experimental, y las mismas fueron colocadas en una cámara de germinación a 25 °C y 12 horas de fotoperíodo. Los papeles fueron rehumedecidos con las soluciones cada cuatro días. Se emplearon cuatro concentraciones diferentes más un testigo por sal, en un diseño completamente al azar con arreglo factorial 2 x 5 (dos soluciones salinas y cinco concentraciones) con cuatro repeticiones. Las distintas concentraciones salinas y los potenciales hídricos correspondientes (calculados mediante la ecuación de Vant’Hoff) se presentan en el , (Bioagro, 2011). Segunda bibliografía: http://www.scielo.org.ve/scielo.php Tercer El estrés salino es un complejo estrés abiótico en el que se implica un componente iónico y un componente osmótico, (REBIOL, 2009). En el presente trabajo es nuestro objetivo demostrar el efecto de luz y salinidad en la germinación de semillas y crecimiento del hipocotilo de Solanum pimpinifollium “tomatillo silvestre” , (REBIOL, 2009). MATERIAL Y MÉTODOS Obtención del material biológico Las semillas de Solanum pimpinellifolium L. fueron obtenidas del campus universitario (U.N.T.) e identificadas taxonómicamente en el herbario de la U.N.T (HUT). La experiencia se realizó en el Laboratorio de Fisiología y Cultivo de Tejidos Vegetales. (Universidad Nacional de Trujillo, UNT, Perú) (Fig. 1a), (REBIOL, 2009). Germinación de semillas Previo a este proceso se realizó una prueba de viabilidad cuyos resultados fueron de 80% de semillas viables para S. pimpinillifolium. Para el ensayo de germinación propiamente dicho, las semillas fueron desinfectadas con lejía (1.5%) por 5 minutos y se enjuagaron 3 veces con agua destilada estéril para eliminar residuos del desinfectante. A este grupo de semillas se les sometió a pruebas de germinación que se hizo en placas petri estériles. En su interior se colocó papel de filtro estéril humedecido, (REBIOL, 2009). Todas las placas petri con semillas en su interior, de los diferentes tratamientos, fueron llevadas a la sala de incubación donde recibió luz blanca (1200 unidades lux) proporcionada por tres fluorescentes de 45 w cada uno. Se evaluó cada dos días hasta el día diez anotándose cuántas semillas germinaron en ese lapso de tiempo. Se tomó como indicador de germinación la aparición del ápice radicular Se hicieron los siguientes ensayos: Semillas Tratamiento luz/ oscuridad: Se llevaron a cabo ensayos de germinación en condiciones de luz - oscuridad. Para la luz fue 16-8 horas y en condiciones de oscuridad (O), ambas siembras entre papel húmedo, a 25º C constante durante 10 días, Para ello se utilizó 450 semillas y colocadas en placas petri grandes (15 cm x 4 cm). Una placa fue cubierta completamente con papel de aluminio y colocada en una gaveta donde no hubo fuente luminosa. La otra placa fue llevada a la sala de incubación (Fig. 1b), (REBIOL, 2009). Tratamiento de salinidad: Para los ensayos de salinidad se utilizaron 150 semillas para cada tratamiento. Se utilizaron concentraciones de 50, 100 y 150 mM de NaCl. (Fig. 1e) , (REBIOL, 2009). Tratamiento de imprimación Para este ensayo se utilizó 450 semillas para cada tratamiento. Se utilizaron como sustancias imprimantes 50 mM de CaCl2, CaSO4 y NaCl respectivamente. Se colocaron las semillas en estas soluciones por 6 horas, luego se cambiaron a placas petri con papel de filtro humedecido con 100mM de NaCl. (Fig. 1e), (REBIOL, 2009). Hipocotilo Se trabajó con 15 plántulas que se obtuvieron del proceso de germinación y cuyo tamaño promedio fue de 1 cm. Éstas fueron colocadas en depósitos plásticos (20x15x10) en cuya base había papel filtro humedecido con agua estéril más el cloruro de sodio en diferentes concentraciones según el tratamiento (0mM, 25mM, 50mM y 100mM. Se taparon los depósitos con una lámina de vidrio a fin de evitar la evaporación de la solución del tratamiento. Estos depósitos se colocaron en los anaqueles con luz fluorescente (3 unidades) a un fotoperiodo de 16:8(sala de incubación). Se evaluó el crecimiento del hipocotilo a los 8 días, midiendo la longitud del mismo (cm) utilizando una regla plástica milimetrada. (Fig. 1c,d) Análisis estadístico Los datos obtenidos se analizaron utilizando el índice de germinación, t-student y para el hipocótilo se obtuvo promedios y desviación estándar. Tanto para semillas e hipocótilos se aplicó ANAVA, con una significancia de (p < 0.05) usando statgraphic. Plus 5.1, al encontrarse diferencia significativa se comprobó con prueba Tukey, (REBIOL, 2009). RESULTADOS Se recolectaron 203 frutos de S. pimpinifollium con las siguientes características (en promedio): peso por fruto 1.16 g, semillas por fruto 33.1, peso fresco 0.1710 g y peso seco de 0.0705 de cada semilla respectivamente, el porcentaje de humedad fue de 58.78, (REBIOL, 2009). En el primer ensayo relacionado a la luz / oscuridad no hay diferencias significativas para ambos tratamientos. y ello se refleja en los índices de germinación (IG) de 5.3 y 4.7 para luz y oscuridad respectivamente ya que son similares estadísticamente, prueba T-student (0.05) (Tabla 2) a pesar que los porcentajes de germinación son muy diferentes (72% para luz y 46% para oscuridad) , (REBIOL, 2009). Las semillas de “tomatillo silvestre” al ser expuestas a diferentes concentraciones de NaCl la germinación se vio afectada a 150mM (2.6), pero su IG fue alto (6.0), los estadísticos (anava y tukey) mostraron diferencias significativas entre tratamientos respectivamente, (REBIOL, 2009). Con la finalidad de aumentar su capacidad germinativa se colocaron las semillas en un pretratameinto (imprimación) con CaCl2, CaS04 , NaCl a 50mM cada uno y luego de seis horas se acondicionaron en NaCl 100 mM: Después de 10 días encontramos datos de germinación similares solo que 150mM NaCl presento un IG bajo (5.6). Luego las semillas no germinadas se lavaron en agua destiladas tres veces y se volvieron acondicionar para que germinen en agua destilada y a los ocho días encontramos que las semillas provenientes de 150mM NaCl germinaron en mayor número (57.31%) en relación a 100mM (18.46%) y en 50mM solo 5.08%, (REBIOL, 2009). En el crecimiento del hipocotilo en longitud disminuyó (1.1 cm) a 100mM NaCl y aumentó al ser expuesto a la concentración de 25mM de NaCl (4.0 cm), mostrando diferencia significativa (ANAVA 95% / entre el tratamiento de 100mM de NaCl para con los tratamientos de 25Mm y 50mM, (REBIOL, 2009).