Está en la página 1de 45

GUIA

CONTROL DE CALIDAD DEL DIAGNOSTICO DE PARASITOSIS INTESTINALES

Lima, 2007

ELABORADO:
Biloga Mara Beltrn Fabin de Estrada
Laboratorio de Enteroparsitos
Centro Nacional de Salud Pblica
Instituto Nacional de Salud
mbeltran@ins.gob.pe

INDICE DE CONTENIDO

I.

ANTECEDENTES................................................................. 3

II.

Objetivos .............................................................................4

III.

Centro Evaluador ................................................................4

IV.

Material de control ...............................................................5

V.

Documentacin.......................................................................8

VI.

Calidad .................................................................................8

VII.

Validacin ...........................................................................12

VIII.

Criterios de evaluacin ........................................................14

IX.

Criterios de aceptabilidad ....................................................16

X.

Certificacin ........................................................................16

XI.

Bioseguridad ........................................................................21
Clases de agentes de riesgo..21
Medidas de precaucin para evitar accidentes ..24
Clasificacin de microorganismos por grupo riesgo ..28
Derrames en casos accidentes de material biolgico ...29

XII.

Manejo de residuos slidos.................................................. 31

XIII.

Referencias Bibliogrficas.....................................................37.

ANEXOS
Glosario .................................................................................38
Fichas 1-540

I.

ANTECEDENTES

El Instituto Nacional de Salud, a travs de su Red de Laboratorios de


Referencia en Salud Pblica tiene como misin la promocin, desarrollo y difusin
de la Investigacin Cientfica Tecnolgica alternativa en el diagnstico prestacin de
servicios de salud en los campos de la Salud Pblica, transferencia tecnolgica, el
control de las enfermedades transmisibles, la produccin de material biolgico, el
control de calidad de reactivos y equipos, la proteccin del ambiente centrado en la
salud de las personas y la, para contribuir a mejorar la calidad de vida de la
poblacin.
El reglamento de la Ley 27657, el INS tiene como objetivo general: fortalecer
la capacidad de diagnstico a nivel nacional para la prevencin y control de riesgos
y daos asociados a las enfermedades transmisibles y no transmisibles.
Las determinaciones en el laboratorio estn sometidas a mltiples fuentes de
error, que pueden evitarse o minimizarse con el fin de optimizar la calidad de
anlisis. Para controlar estos errores, el laboratorio debe establecer un sistema de
calidad, basado en las buenas prcticas de laboratorio y los procedimientos de
control interno, lo cual debe reforzarse con un control externo del desempeo y de
control de ensayos intra laboratorio, donde se puede evaluar la competencia tcnica
de cada laboratorio.
La Norma Tcnica Peruana, basada en la experiencia de la implementacin
de la Gua Peruana GP-ISO/IEC 25 1993 y la 45001, contiene los requisitos que los
laboratorios de ensayo y calibracin deben cumplir, para demostrar que operan bajo
un sistema de calidad, que son tcnicamente competentes y capaces de generar
resultados tcnicamente vlidos. La NTP-ISO/IEC 17025, 2001 REQUISITOS
GENERALES PARA LA COMPETENCIA DE LABORATORIOS DE ENSAYO Y
CALIBRACIN, edicin 8-03-2001, es una adopcin de la norma ISO /IEC de 1999.
Las Referencias Normativas Peruanas ISO 9001, 9002 (1995), ahora es
denominada NTP ISO 15189 (2004).
El Laboratorio de Enteroparsitos del equipo de Entricas, IRAS e IIH (antes
Divisin de Parasitologa) del Centro Nacional de Laboratorios de Salud Pblica del
INS, inici la Confirmacin (pruebas de proficiencia) en el Diagnstico de Parsitos
Intestinales desde 1982. En 1986 se desarrollaron cursos de capacitacin a nivel
nacional en coordinacin con la Escuela de Salud Pblica.
El 1992 en el INS, con el propsito de abordar las 5 enfermedades
prioritarias en el Per: tuberculosis (TBC), malaria, Virus de la Inmunodeficiencia
humana (VIH), enfermedades parasitarias intestinales (PIN) y la enfermedad
diarrica aguda (EDA), inici reuniones mensuales con un grupo multidisciplinario y
la DISA Lima, con finalidad de implementar a nivel nacional el Diagnstico y el
control de calidad de los parsitos intestinales, a las que an, no se daba la debida
importancia.
Desde 1996 se desarrollaron cursos de Diagnstico de las Parasitosis
Intestinales en los departamentos de: Tumbes, Piura, Ancash, Cajamarca, Loreto,
2

Lambayeque, Huancavelica, Huanuco, Lima Callao, Cusco, San Martn,


Amazonas, Madre de Dios, Ayacucho, La Libertad y Tacna .
En 1998 se capacit y particip en la instalacin del diagnstico basal de la
Intervencin Integral de la Desparasitacin en la Amazona Peruana en: Ucayali,
Madre de Dios, Loreto y San Martn. En el 2000 se capacit en el diagnstico de los
Agentes Etiolgicos de Diarrea Aguda (EDA) en coordinacin con MINSA,
DIGESA, OGE y DISA Lima Este, Cajamarca, Lambayeque, Loreto. En el mismo
ao se capacit en el Diagnstico del Parasitismo Intestinal y Nutricin en nios de 6
meses a 3 aos de el trapecio andino (Ayacucho, Abancay, Cuzco, Huancavelica y
Puno).
El control de calidad o prueba de proficiencia (Proficiencia Testing), en el
diagnstico de los parsitos intestinales se viene realizando en forma peridica
desde el 2000, teniendo la participacin de los laboratorios de la red, habiendo
participado con ms frecuencia Cajamarca, Lima-Este, Lambayeque, Ayacucho.
II OBJETIVOS
1. Evaluar la eficiencia en la aplicacin de mtodos diagnsticos e identificacin de
los agentes parasitarios intestinales.
2. Determinar la uniformidad operacional para encontrar un proceso reproductivo,
con las mejoras continuas para asegurar la confiabilidad de los resultados.
3. Ser laboratorio adscrito al laboratorio Referencia de Instituto Nacional de Salud.
III CENTRO EVALUADOR
El Instituto Nacional de Salud a travs del laboratorio de Enteroparsitos viene
realizando el control de calidad a nivel nacional (repetibilidad del diagnstico).
3.1 Las tcnicas a evaluar son:
a. Mtodo directo, concentracin para protozoarios y helmintos la
muestra ser remitida en vial y en fijador conservador .
b. Mtodo de Graham para Enterobius vermicularis (lmina de frotis
perianal).
c. Mtodo de coloracin Ziehl Neelsen modificado o Kinyoun para
Cryptosporidium sp Cyclospora cayetanensis, Isospora
belli y
Sarcocystis sp (lmina coloreada).
d. Mtodo de Hematoxilina Frrica de Heidenhain para Entamoeba
histolytica y otros protozoarios (lmina coloreada).
e. Mtodo de Kato Katz para geohelmintos: Ascaris lumbricoides,
Trichuris trichiura, Ancylostoma/Necator, Strongyloides stercoralis, etc.
(lmina frotis con celofn transparente).
f. Identificacin o determinacin de especimen o fragmento de ste,
puede ser nemtode, tremtode o cstode (muestra en frasco o tubo y
v con el lquido fijador conservador alcohol 70% o formol 10%).
3.2 La periodicidad de control debe considerarse por lo menos 2 veces al ao
3

IV. MATERIAL DE CONTROL


El material de control de calidad ser preparado como un set o panel, que
podr estar compuesto por: frasco o vial con muestra con fijador / conservador,
frotis o extendido en lmina coloreada y/o sin colorear, espcimen gusano, esto
para el anlisis cualitativo (determinar el agente etiolgico) y efectuar tambin la
repetibilidad y reproducibilidad de los resultados y el anlisis cuantitativo para
conocer la intensidad o grado de infestacin, considerando leve moderada y severa
(Mtodo Kato Katz, hpg) y como resultado la etiologa observado indicando el
nmero de huevos por gramo de heces (hpg).
A. ANALISIS CUALITATIVO
A.1

MATERIAL COPROLOGICO PRESERVADO O MANTENIDO


EN FIJADOR CONSERVADOR (FRASCO O VIAL)

Se seleccionarn muestras de los pacientes con parsitos (P) y sin


parsitos (N), cuyo concentrado ser fijado (1:3 / 2/3) en formalina 10%, formol
10%, fenol alcohol - formol (PAF), alcohol polivinlico (PVA) o mertiolate - Iodo formol (MIF) o acetato de sodio formol (SAF), lo que disponga en el
laboratorio.
El concentrado de las muestras fijadas y/o conservados sern distribuidas en
viales de 3-5 mL y conservarlas a temperatura ambiente hasta su distribucin a
los laboratorios a evaluar.
A.2 MUESTRAS DE FROTIS O E EXTENDIDO FINO
El control de calidad tambin se puede realizar a travs de frotis, sin
colorear, previamente fijado o coloreado para detectar Cryptosporidium sp,
Cyclospora cayetanensis, Isospora belli, o E.histolytica, etc.
A.3 ESPECIMEN O FRAGMENTO DE GUSANO O HELMINTO
El espcimen, verme o gusano debe estar
caso de gusano segmentado o cilndrico
identificarse los cstodes por aplanamiento
aclarante lactofenol o alcohol fenol (V/v).

fijado en formol 10%, alcohol 70% en


respectivamente, sin embargo puede
entre lmina y lmina o la adicin del
.

A.4 FROTIS PERIANAL


La aplicacin de la cinta engomada transparente, el mtodo de Graham se utiliza
para el descarte de Enterobius vermicularis y Taenia sp
A. 5 PORCENTAJE DE MUESTRAS PARA CONTROL DE CALIDAD
A.5.1 La remisin para el control de calidad del 100% de las muestras positivas en
los casos de Cryptosoporidium spp y otros Coccidios o E.histolytica y el 10% de las
4

muestras negativas. Otra alternativa pudiera ser seleccionar por semana 1-2
muestras (4-8 / mes), depender de la demanda.
A.5.2 La remisin para el control de calidad en caso de muestras como: G.lamblia,
B.hominis, A. lumbricoides, T.trichiura, H.nana etc. ser el 10% de las positivas.
B. ANALISIS CUANTITATIVO
En el anlisis cuantitativo, con la finalidad de conocer el grado o
intensidad de infeccin, se indican los agentes y nmero de huevos por gramo de
heces (hpg) por aplicacin del mtodo de kato katz.
C. TRANSPORTE, CONSERVACIN Y ENVIO DE MUESTRAS
Las muestras para diagnstico son todos los materiales de origen humano o animal
(excretas, secreciones, especimenes, sangre y sus componentes, tejidos y lquidos
tisulares, entre otros) enviados con fines de diagnstico.
6. CONTENEDOR:
Para el envo de cualquier espcimen parasitolgico deber emplearse
contenedores que tengan doble revestimiento. El vial, que contiene el
espcimen, se colocar en un primer contenedor metlico (aluminio), el vial
deber estar envuelto en un algodn o material absorbente en caso de derrames
o rotura ; Las fichas correspondientes a la muestra, se colocaran alrededor del
contenedor de metal, antes de colocarlo dentro del otro contenedor de cartn u
de otro material. En el caso de envo de lminas, tales como frotis fecal,
extendido fino de esputo, secrecin o fludo, pueden ser colocadas en cajas
portalminas u otras cajas que las proteja de roturas . Las lminas pueden se
envueltas individualmente en papel toalla u otro similar. Si las lminas han sido
montadas en blsamo de Canad debern estar secas antes de su envo.
Adherir al recipiente secundario (contenedor externo) un ejemplar del formulario
de datos relativos a la muestra, as como las recomendaciones prcticas:.
. Entre otros datos indicar:
- Nombre, direccin y telfono del centro que remite el material.
- Indicar los organismos contenidos en el paquete o etiologa a
determinar.
- Indicar que se trata de Material Infeccioso que afecta a
humanos.
- Colocar la etiqueta de orientacin posicional, especialmente
en el caso de muestras lquidas.
- Indicar en la etiqueta si las muestras deben conservarse a
temperatura ambiente, refrigeradora (4 C.

7. RECOMENDACIONES DE OMS EN CASOS DE ACCIDENTES

Si un paquete que contiene sustancias infecciosas se deteriora durante el


transporte, se sospecha que deja escapar el contenido o tiene algn otro
defecto, el transportista deber ponerse en contacto con el remitente y con el
destinatario, as como con las autoridades de salud pblica

Si se ven vidrios rotos u objetos punzantes, reunirlos con un recogedor y un


cepillo o con pinzas, evitando cortes de las manos o daos fsicos.

Emplear guantes resistentes o introducir las manos en una bolsa de plstico


de manera que sirva de guante de proteccin improvisado.

Con las manos protegidas de ese modo, coger el paquete y colocarlo en un


saco de plstico de dimensiones apropiadas.

Introducir los guantes o bolsas usadas en la misma bolsa.

Cerrar la bolsa y colocarla en un lugar seguro.

Si se ha escapado lquido del paquete, desinfectar la zona contaminada.

Lavarse las manos con agua y jabn, en lo posible utilizar alcohol etlico 70%.
6

V. DOCUMENTACION
El laboratorio a evaluar ser identificado con un cdigo o clave con la finalidad de
conservar el anonimato.
Los materiales biolgicos para evaluacin, deben estar acompaados con los datos
de la muestra e indicar el fijador / conservador, resultados por mtodo aplicado y
por analista usar la fichas de la presente gua CCPIN y las fichas 1-2 de la norma
37.
5.1 REPORTE DE RESULTADOS
El reporte de resultado ser por uso de la ficha CCPIN 1 y 2 la lista de los
parsitos con el cdigo de la nomenclatura internacional de los parsitos (CI) estn
la clasificacin internacional norma 37.
Se utilizarn los siguientes siglas y/o abreviaturas (tabla 1 y 2)
CI = Clasificacin internacional de las enfermedades parasitarias
P = Nombre del agente y sealar el estado evolutivo (huevo, quiste, trofozoto)
N = No se observ quistes trofozotos ni huevos de parsitos
X.x = Iniciales del agente (gnero o especie) e iniciales de las formas evolutivas
observadas por ejemplo G.l (q,t) = Giardia lamblia (quistes, trofozotos).
Los laboratorios en evaluacin podrn enviar sus resultados en un plazo mximo de
30 - 40 das, si fuera necesario consultar a travs del email: mbeltran@ins.gob.pe
Como indicadores se seala la concordancia o discordancia en la identificacin
morfolgica del agente. A su vez en la discordancia hay 4 variantes:
Error de especie EE, cuando el resultado lo dan un agente por otro.
Error de parcial EP, cuando el resultado es dado slo con parte de los
agentes.
Positivo por negativo (falso negativo) P/N
Negativo por positivo (falso positivo) N/P
VI.

CALIDAD
Calidad, es el conjunto de propiedades o caractersticas de un bien fsico
o servicio que les permite satisfacer los deseos, necesidades del
consumidor o usuario y diferenciar de otros.
No ocurre casualmente
Se logra a travs de un proceso

6.1 GERENCIA DE CALIDAD


Planear apropiadamente
Controlar en forma ptima
Medir apropiadamente
Mejorar continuamente
Evaluar la calidad
6.2 PERSONAL
7

Bilogos
Tecnlogos mdicos
Tcnicos de laboratorios
Auxiliares
6.3 INVERSION
Inversin y
Gastos
La calidad del laboratorio es la suma de todos los anteriores (gerencia, personal e
inversin).
6. 4 CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad es una tcnica de control de procesos, mtodos y tcnicas para
conocer, cuantificar y ver el comportamiento de los resultados o datos de una
patologa y o problema de salud. Siempre se debe trabajar con un programa.
El programa de calidad del laboratorio, debe comparar las demandas de la calidad
interna (brindar un servicio o producto), con las expectativas externas (los usuarios)
6.5 GARANTIA DE CALIDAD
Es el conjunto de medidas que cumple el personal de laboratorio para asegurar la
calidad de trabajo y contar con resultados confiables, exactos, oportunos a travs de
los cuales se contribuye a mejorar la calidad de atencin. La confiabilidad de los
resultados de los anlisis clnicos se garantiza solamente con una vigilancia total y
permanente, tratando de evitar las posibles causas de errores. Los componentes
bsicos de un programa de Garanta de calidad son las medidas de control, las que
aseguran la validez.
6.5.1 Algunas variables que pueden afectar la calidad:
Competencia del personal
Calidad de los reactivos y materiales
Mantenimiento de los equipos
Condiciones de las muestras o especimenes
Muestras control o referencia
Interpretacin de los resultados
Interpretacin de los datos
Informe y remisin de los resultados.
6.5.2 Vigilar o monitoreo de los procesos:
Observar que el cdigo de la muestra, solicitud de anlisis y la ficha
coincidan.
Registrar condiciones de las muestras
Monitorear el desarrollo de las pruebas o ensayos
Considerar el ambiente apropiado para los anlisis
Hablar sobre los problemas con diplomacia para corregirlos en caso de
errores.
8

6.6 CONTROL DE CALIDAD (QC)


El control de calidad est relacionado con aquellas medidas que deben
incluirse durante cada prueba, para verificar que funciona en forma correcta, esto
significa que cada corrida o ejecucin de los anlisis debe dar resultados confiables.
6.1.1 El control de calidad es interno o externo
El control de calidad interno, se determina:
La uniformidad operacional
Monitorear el proceso productivo
Promover las mejoras contnuas
Asegurar la confiabilidad de resultados
Fases pre analtica, analtica y post analtica
Anlisis estadstico
Discusin multiprofesional.
6.1.2 Evaluacin externa del desempeo:
Evaluacin semestral o anual
El control de calidad externo se estara iniciando el presente ao en la que
comprenden 3 fases principales:
1 Fase preanaltica:

Seleccin para el control de calidad


Recomendaciones al paciente para la obtencin de muestra
Condiciones antes y durante la obtencin de la muestra
Transporte de la muestra de laboratorio
Almacenamiento antes y despus del transporte
Cantidad adecuada de la muestra (3-5 mL)
Temperatura de almacenamiento
Etiquetado e identificacin
2 Fase analtica:
Repetibilidad y reproducibilidad de los resultados
En el diagnstico: Un solo mtodo por muestra es 30-40%
Dos mtodos 41 al 60%
Tres mtodos 61-80%
Cuatro mtodos 98%
3 Fase post analtica:
Reproducibilidad de los resultados: concordancia / discordancia o aceptable e
inaceptable.
El no cumplimiento de estas fases ocurren los errores:
Las interferencias de tipo fsico, causadas por las propiedades fsicas
como el mal manejo o exceso de muestras, mezcla con la orina o contenedor
o frasco inadecuado.
9

Interferencia de tipo qumico, cuando el agente interferente reacciona


directa o indirectamente el incremento o la disminucin de la formacin de
productos de reaccin, precipitacin o deformacin de las formas evolutivas
que se visualiza al microscopio o por agentes radiactivos que hubiera ingerido
el paciente.
Las interferencias biolgicas, efecto causado por individuos originando
algn cambio. Los medicamentos pueden tener efectos biolgicos,
farmacolgicos o toxicolgicos (problemas, materiales, etc).

Se hace necesario e imperativo la monitorizacin de procesos: fichas, planes,


protocolos y trabajo de no conformidades y su registro correspondiente.

7. CONTROL DE CALIDAD
Y MANTENIMIENTO DE EQUIPOS DE
LABORATORIO:
SE CONSIDERA MANTENIMIENTO PREVENTIVO Y
CORRECTIVO

El mantenimiento preventivo es importante para asegurar la exactitud y


longevidad de los instrumentos, se debe realizar en forma peridica
con el fin de minimizar la necesidad de servicio de reparaciones.
Las responsabilidades se pueden asignar al personal de los
laboratorios, en coordinacin con las empresas proveedoras, casas
matrices para puedan realizar el mantenimiento preventivo,.
Elaborar una Gua con los manuales de operacin de los equipos
(GMOE): Incluir las instrucciones de operacin, precauciones de
seguridad, limpieza y cuidado de los instrumentos. Incluir el historial
del equipo considerando todos los registros del mantenimiento
preventivo, fallas del instrumento, etc. La Gua que deber dividirse en
secciones: refrigeradores, estufas, etc. (indicar series, cdigos,
localizacin especfica, etc.) debe ser accesible a todo el personal. El
proveedor, deber realizar la instruccin del manejo de los equipos
en servicio (en el laboratorio).
Procedimientos de Limpieza de Equipos: Seguir las instrucciones del
fabricante, incluir estos procedimientos en la GMOE .Las superficies
externas e internas, hechas de acero inoxidable u otro metal debern
ser desinfectadas con leja al 10% (4-5% Hipoclorito de Sodio),
enjuagar con agua. El fabricante deber indicar que material es
corrosible. La limpieza final se puede realizar con un desinfectante tal
como fenol 0,5%.
Validacin de Equipos: Los nuevos equipos requieren ser validados
con el fin de determinar si su eficacia es similar al equipo existente o a
un stndar provisto.
Elaborar documentos de Control de Calidad para informar incidentes:
Incluir informacin sobre la Fecha y Datos del Incidente, Evaluacin del
Problema, Medidas Correctivas, Resolucin y Presentacin de
Resultados. (ficha CCPIN).

7.1 Instrumentos que requieren monitoreo de temperatura (Refrigeradores,


Estufas, Baos de agua, etc.):
10

Las temperaturas son registradas diariamente, en formatos. Deber


incluirse el rango de temperaturas aceptables (ficha n 3).
7.2 Cabinas de Bioseguridad

Cabinas empleadas para manejar patgenos de clase 2 (M.tuberculosis


E.histolytica, P.falciparum, etc.) Cualquier derrame en el interior de la cabina
debe ser desinfectado con Fenol 0,5% u otro similar, mientras el sistema este
todava operando. La luz ultravioleta debe estar apagada antes de usar la
cabina.
Evitar el uso de mecheros dentro de la cabina (use un microincinerador)
El servicio de mantenimiento debe considerar principalmente la revisin de: 1.
Revisin de la lmpara UV (reemplazo de bulbo) 2. Ajuste y registro de flujo de
aire 3. Revisin del filtro (limpieza o cambio) 4. Sistema de alarma 5. Fuente de
iluminacin
El interior de la cabina debe ser limpiado diariamente con 0,5% de fenol. Antes
de limpiar semanalmente, se puede tomar una muestra con una torunda y
cultivarla en TSB.
7.3 Centrfuga

Limpiar cualquier derrame inmediatamente con leja al 10% (u otros similares) y


enjuague, para posible corrosin.
Semanalmente limpie y desinfecte los rotores, soportes de tubos, tapa, etc.
Considerar el sistema de mantenimiento y calibracin anual
7.4 Microscopios de Campo claro
Un microscopio es un sistema de magnificacin , en el cual el observador mira la
imagen primaria con los lentes que producen una imagen secundaria (virtual)
agrandada. Los dos lentes convexos estn alineados en tal forma que el
observador mira una imagen agrandada del objeto. La resolucin de un
microscopio es la distancia ms pequea que permite diferenciar dos puntos
separados.
Mantenimiento de rutina: Diariamente:
Quitar restos de aceite de los objetivos, condensador, la platina.
Apagar la fuente de luz
Cubrir el microscopio
Quitar el polvo de las superficies pticas
Limpiar los objetivos, condensadores, diafragma con papel lente embebido en
el liquido limpiador (alcohol isoproplico), no echar directamente el lquido en
los lentes.

VII. VALIDACIN DE PRUEBAS DIAGNOSTICAS


Actualmente, gran nmero de pruebas diagnsticas son implementadas y las
existentes son continuamente mejoradas, mediante la introduccin de nuevas
tecnologas. Es necesaria una evaluacin rigurosa de las pruebas antes de ser
adoptadas por un laboratorio.
Una buena prueba diagnstica es la que ofrece resultados positivos en enfermos y
negativos en sanos, sin embargo desde el ngulo prctico en el diagnstico de los
11

parsitos intestinales puede la persona estar infectada y los resultados de


laboratorios son negativos, por ello es que generalmente se solicite examenes
seriados, ms an en casos de nios menores de 7 aos, un examen intestinal
completo es cuando se solicita adems el examen de Enterobius. Por lo tanto, las
caractersticas que debe exigrsele a un mtodo de ensayo son:

Validez: Es el grado en que un ensayo mide, sealando como negativo o


positivo, en este ltimo se indica los nombres del gnero o especie de los
agentes observados; en el caso negativo indicar no se observ quistes,
trofozotos ni huevos de parsitos.
Reproducibilidad: es la capacidad del ensayo para ofrecer los mismos
resultados cuando se repite su aplicacin en diferente lugar y en
circunstancias similares. La variabilidad biolgica del hecho observado, la
introducida por el propio observador y la derivada del propio ensayo,
determinan su reproducibilidad.
Seguridad: La seguridad viene determinada por el valor predictivo de un
resultado positivo o negativo. Esta probabilidad est muy influenciada por la
prevalencia de la patologa.

En los estudios de validacin, las nuevas pruebas diagnsticas se deben comparar


con la prueba de oro o gold standard, es decir el mtodo de referencia establecido,
el cual es considerado el mejor mtodo para establecer la presencia o ausencia de
la patologa, en este caso es el mtodo directo o lmina hmeda.
Las pruebas generalmente no son 100% exactas ( pueden darse falsos positivos o
falsos negativos). Una prueba es validada, si detecta mucha gente con la
enfermedad (es decir tiene alta sensibilidad) y si excluye ms gente sin el desorden
o enfermedad (alta especificidad).
El caso ms sencillo que se puede plantear es el de una prueba dicotmica, donde
un resultado positivo se asocia con la presencia de enfermedad y un resultado
negativo con la ausencia de la misma. Cuando se estudia una muestra de
pacientes, los datos obtenidos permiten clasificar a los sujetos en cuatro grupos
segn una tabla 2x2 como la que se muestra. En ella, se enfrenta el resultado de la
prueba diagnstica (en filas) con el estado real de los pacientes (en columnas) o, en
su defecto, el resultado de la prueba de referencia o gold standard que se utilice.
El resultado de la prueba puede ser correcto (verdadero positivo VP y verdadero
negativo VN) o incorrecto (falso positivo FP y falso negativo FN). El anlisis de su
validez puede obtenerse calculando los valores de sensibilidad y especificidad, o
.
haciendo la comparacin de mtodos o de 2 analistas
Las siguientes frmulas corresponden a: sensibilidad, especificidad, valor
predictivo positivo, valor predictivo negativo
Sensibilidad
Especificidad

S= a /(a+c)
E= d/(d+b)

Valor predictivo negativo


Valor predictivo negativo

VPN = d/c+d . 100


VPP = a/(a+b). 100

12

Pe = ((a+b) (a+c) ) + ( c+d ) (b+d)


N
+
-

a+b

c
a+c

d
B+d

c+d
N

VIII. CRITERIOS DE EVALUACION


A. LA CALIDAD TCNICA DE LA MUESTRA
8.1. EN CASO DE FROTIS Y/O COLORACION
Considerar:
Frotis fino
Presencia de precipitado
Exceso de colorante
Decoloracin inadecuada
Lmina rayada, etc
8.2 EN CASO DE LA MUESTRA EN FIJADOR / CONSERVADOR
Considerar:
Concentracin adecuada de la muestra y la etiologa se indica las iniciales de
los agentes y el estadio evolutivo entre parntesis ( )
El anlisis se realiza por aplicacin del mtodo de concentracin por sedimentacin
de la muestra original diluda (3-4gr de muestra y 20 mL del solucin salina o agua
destilada). El sedimento conservado en fijador volumen a volumen (1/3 a 2/3 ).
8.3 EN CASO ESPECIMEN, el helminto o fragmento de este, si est correctamente
conservado (fijado, aplanado), es decir que permita observarse sus estructuras
internas. En caso de cstodes y trmatodes que no estn aplanados, iniciar el
proceso en el laboratorio. Ver Norma 37 del INS en fijacin y conservacin de
helmintos.
B. EVALUACIN DE LOS RESULTADOS
Los resultados reportados por los laboratorios que estn siendo evaluados sern
comparados con los obtenidos por el laboratorio de referencia. El laboratorio
evaluado debe remitir con los resultados por mtodo; se pueden dar abreviando o
con las iniciales del gnero especie (tabla 1, 2):

13

b.1 por aplicacin de la frmula:


No. de diagnsticos correctos

x 100

No. de diagnsticos del Lab. Ref. + No. de diagnsticos incorrectos


b. 2. Por comparacin con la unidad, considerando el total de agentes del
laboratorio evaluador y el porcentaje respectivo % = N Concordante / N total

TABLA 1 RESULTADOS DEL CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DE PIN


Mtodo
N

Directo

Concentracin

Coloracin

1.

A.l (hf)
G.l (q)
H.n (h)

H.n (h)
G.l (q)
E.c (q)

E.h (t)

10.

Graham

Identif.verme
aplanamiento

E.v (h)

24.

D.p (h)

En caso que hiciera algn cambio o modificacin del manual o gua durante el
proceso debe llenar en el formulario 1..
C. INFLUENCIA AL AZAR
Esto considerado si observara un parsito diferente, esto debe ser fijado en la
lmina con una capa de esmalte, evitar que no queden burbujas entre portaobjetos y cubreobjetos, si no alterara la muestra. Luego enviarlas junto con la
plantilla de resultados para verificar que una posible discordancia sea causada al
azar. El hallazgo de nuevos elementos, implica agregarlos en el anlisis de
evaluacin.
IX. CRITERIOS DE ACEPTABILIDAD.
El porcentaje mnimo de aceptabilidad, es igual o mayor al 75%. Es el resultado del
uso la frmula b1 anlisis b2.
BUENO
REGULAR
DEFICIENTE

91% - 100%
75% - 90%
menor del 75%

14

X. CERTIFICACION
Este documento est en validacin desde el 2005 los laboratorios que han
participado en este curso de capacitacin, seran los candidatos a la adscripcin al
Laboratorio de Referencia Nacional, al haber obtenido una buena repetibilidad en
los diagnsticos.
En caso que de la evaluacin obtuvieran un criterio deficiente, se analizar y
evaluar al personal del laboratorio donde se encontr la deficiencia, se capacitar
y darn las recomendaciones para superar este impase.

15

TABLA 2 CLASIFICACIN INTERNACIONAL DE ENFERMEDADES/AGENTE ETIOLOGICO


CI

ENFERMEDAD

AGENTE ETIOLGICO

ABREVIACIN

0 06. 0

Amebiosis

007.0
007.1
007.2
007.3

Blastocistosis
Balantidiosis
Giardiasis o lambliasis
Coccidiosis (isosporiaiss)
Tricomoniasis intestinal

Entameba histolytica
Entamoeba coli
Blastocystis hominis
Balantidium coli
Giardia lamblia
Isospora belli
Trichomonas intestinalis

E.h
E.c
B.h
B.c
G.l
I.b
T.h
Cryp.sp
C.c
S.h
Ch.m
R.i
Clon

07.9

Criptosporidiosis
Ciclosporiosis
Sarcocistosis
Chilomastiosis

121.1

Clonorquiosis

Cryptosporidium parvum
Cyclospora cayetanensis
Sarcocystis hominis
Chilomastix mesnili
Retortamonas intestinaleis
Clonorchis sp

121.2

Paragonimus peruvianus =
P.mexicanus
Fasciola hepatica

P.p

121.3

Paragonimiosis o (distomatosis
pulmonar)
Fasciolosis o dist. heptica

123.0
123.2

Teniasis (intestinal)
Teniasis x saginata

Taenia solium
T.saginata

T.sol
T.sag

123.4

Difilobotriasis

Diphyllobothrium pacificum

D.p

123.6

Himenolepiasis

123.8

Dipilidiosis

Hymenolepis nana
Hymenolepis diminuta
Dipylidium caninum

H.n
H.d
D.c

126.0

Ancilostomiosis

Ancylostoma duodenale

A.d

126.1

Necatoriosis

Necator americanus

N.a

127.0

Ascariasis

Ascaris lumbricoides

A.l

127.2

Estronfiloidiasis

Strongyloides stercoralis

S.s

127.3

Trichuriasis

Trichuris trichiura

T.t

127.4

Enterobiasis u oxiuriasis

Enterobius vermicularis

E.v

127.5
127.6

Capilariosis
Trichostrongiliasis

134.0

Miasis*

Cap.
Trichost.
Meloi
Rhab
D.h
O.o
C.h

134.8

Macracantorrinchosis

Capillaria sp
Trichostrongylus sp
Meloidogyne sp
Rhabditis
Dermatobia hominis
Oestrus ovis
Callitroga hominivorax
Macracanthorhynchus
hirudinaceus

007.8

F.h

M.h

* opcional, remitir al INS

16

Formulario 1 Variaciones de las condiciones de trabajo

17

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD


CENTRO NACIONAL DE SALUD PUBLICA
LABORATORIO DE REFERENCIA DE ENTEROPARASITOS
Tlf 4719920 - 137 mbeltran@iins.gob.pe

FICHA CCPIN 1

REGISTRO Y CONTROL DE CALIDAD DE LOS PARASITOS INTESTINALES


Nmero de
remisin del control de
calidad

10 11

12 Total

N MUESTRAS
N LAMINAS
N *+*
N *-*
CI
AGENTES:
006,1 E. histolytica
E. dispar
B. hominis
007,0 Balantid coli
007,1 G lamblia
007,2 Coccidios I.belli
07.8 Cryptosporidium
Cyclospora
007,3 T.intestinalis
121.1 Clonorchis sp*
121,2 Paragonimus*
121,3 F. hepatica **
123.1 T. solium intest
123.2 T.saginata
123,4 D.pacificum.
123,6 H. nana
H. diminuta
123.8 D.caninum
126 Ancilost / Necat
126.0 A.duodenale
126.1 N.americanus
127,0 A. lumbricoides
127,2 S.stercoralis
127,4 E. vermicularis
127.5 Capillaria sp
127.6Trichostrongylus
Rhabditis sp
Meloidogyne sp
134.0 Miasis
134.8 Macracanthorhy
*pulmonar
**heptico
18

19

XI. BIOSEGURIDAD
Bioseguridad, es el conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la
salud del personal frente a los riesgos laborares. Involucra a todo el personal,
el cumplimiento requiere:








Manual de bioseguridad
Inspecciones peridicas de la bioseguridad en relacin a las
tcnicas, mtodos y procesos.
Personal capacitado
Aplicar el mtodo de descontaminacin
Asumir la responsabilidad de descontaminacin
Llevar adelante un registro
Mantener el registro de material patgeno.

Los riesgos de contaminacin pueden clasificarse en, biolgicos, fsicos,


qumicos, ergonmicos y accidentes .
11.1 CLASES DE AGENTES DE RIESGO
11.1.1 Agentes biolgicos: parsitos, bacterias, virus y hongos
Vas o rutas de contaminacin / infeccin:
o Pipeteo
o Consumo de alimentos
o Bebida de agua y otros lquidos
o Contacto directo
o Por inoculacin con agujas
o Contacto en superficies contaminados

Protozoarios intestinales
Cryptosporidium sp
Cyclospora cayetanensis
Entamoeba histolytica
Giardia lamblia

va oral y mucosas
va oral
va oral
va oral

Helmintos
Ascaris lumbricoides
por va oral
Enterobius vermicularis por va oral
Taenia sp
por va oral
Otros
20

Otros Protozoarios parsitos


por heridas y los ojos
por heridas y los ojos

Acanthamoeba
Babesia

11.1.2 Agentes fsicos:


o Temperatura extremas o falta de confort
o Descargas elctricas, originadas por equipos y conexiones
o Radiaciones por exposicin a altas dosis en corto tiempo ejm. Luz
ultravioleta.
o Rudos excesivos en frecuentes o en el tiempo producidos por equipos
sin graduaciones o defectuosos.
o Vidrios resquebrajados de recipientes daados
11.1.3 Agentes qumicos:
Corrosivos
 Acido actico
 Acido frmico
 Acido ntrico
 Acido sulfrico
 Benceno
 Formaldehdo
 Fenol
 Hidrxido de sodio
Por inhalacin

Acido actico
Acido clorhdrico
Alcohol metlico
Anilina
Creosota
Formaldehdo







Por ingestin

Acetona
Alcohol
Fenol
Perxido de hidrgeno

Por contacto





Anilina
Cresol
Bixido de carbono (hielo seco)
Insecticidas
21

Carcinognicos
2 acetil amino fluoreno
Alfanatilamina
Bencidina
Ortotolouidina






Inflamables explosivos:

Inestables







Acetona
Benceno
Etanol
Xileno
Acetileno
Acido pcrico
Azida
Perxidos

Gase comprimidos

1.1.4 Ergonmicos

Dixido de carbono
Hidrgeno
Oxgeno
Diseo de muebles
Instalacin fsica y ventilacin
Trabajo solidario
Trabajo prolongado de pie o sentado
Microscopa contnua

11.2 TECNICAS DE BIOSEGURIDAD


En cualquier actividad existen riesgos, por lo que es necesario observar medidas de
prevencin y proteccin tanto al personal como al producto o servicio que est
atendiendo, existen 3 tcnicas:
A. Tcnicas de identificacin de riesgos. - Estas son de seguimiento analtico
para identificar los posibles factores causales, estos son de bajo, mediano y alto
riesgo.
B. Tcnicas de prevencin.- Son tcnicas operativas, que intentan la prevencin
de accidentes, mediante la eliminacin de riesgos o produciendo condicionantes
para su disminucin, as como mejorar los mtodos de trabajo, diseo,
desarrollo, aplicacin e instalacin de normas.
22

C. Tcnicas de proteccin.- Estn orientadas a evitar o disminuir los daos


mediante tratamiento de emergencia y el uso de barreras de proteccin.
13.3 MEDIDAS DE PRECAUCIN PARA EVITAR ACCIDENTES:
13.3.0 De los ambientes.
13.3.1 Obtencin de informacin: Es el rea o espacio donde se obtiene los datos
de informacin y/ o registro de los pacientes donde se entrega los resultados. Se
debe disponer slo del material necesario: cuadernos, plumn, fichas, lapiceros,
etc.
13.3.2 Obtencin de las muestras: Este ambiente debe ser adecuado y ventilado.
Todas las muestras deben ser tratadas como altamente contaminantes; para lo cual:
* Debe haber un recipiente apropiado para desechar el material contaminado
* Debe haber un recipiente con desinfectante para eliminar el material que est
utilizando.
* Las mesas de trabajo deben ser de material slido, superficie lisa, impermeable y
resistente a las sustancias corrosivas y de fcil limpieza
* Las paredes y pisos deben ser lisos e impermeables para facilitar la limpieza con
soluciones desinfectantes. Despus de cada jornada de trabajo no se debe barrer el
piso, ni encerar, usar trapo hmedo.
* Las muestras deben estar correctamente identificadas, con su nmero correlativo,
nombre, fecha de obtencin hasta el momento de su procesamiento.
13.3.3 Del procesamiento de la muestra:
* Disponer con los materiales e insumos necesarios para el procesamiento.
* Debe contar con iluminacin suficiente.
* Debe haber equipo y material apropiado para el disponer el material contaminado
o los procesos de esterilizacin del material contaminado (solucin sulfocrmica o
leja), etc.
13.3.4 Ambiente para la decontaminacin y/o almacenamiento de desperdicios o
residuos:
* Los materiales empleados en el manejo de agentes microbiolgicos o material
contaminado deben ser sometidos a esterilizacin o descontaminacin.
* Si no se cuenta con autoclave, hervir el material en un recipiente metlico.
* Eliminar al sistema de desage los agentes biolgicos, qumicos o radioactivos,
previamente descontaminados, neutralizados e inactivados.
23

* Culminado los anlisis de la muestra, adicionarle solucin desinfectante como


fenol 5% o hipoclorito de sodio 5% para inactivarlas por 30-40 minutos, luego
eliminarlas como basura comn.
* No acumular inadecuadamente el material contaminado.
13.3. 1 Del Personal:
13.3.1.1 En el ambiente de obtencin de muestras:
* El personal debe estar presentable en buenas condiciones higinicas.
* Debe lavarse las manos al inicio de cada jornada de trabajo y despus de cada
interrupcin.
* El personal debe estar vacunado contra Hepatitis B y Ttanos, adems de las
vacunas necesarias para la regin/ localidad.
* Usar gorro, si tiene pelo largo amarrarlo, usar gorro.
* El personal que labora en el procesamiento de muestras, debe conocer los
procedimientos y estar calificado para hacerlos.
* Debe usar mandil largocon mangas largas, y cuando el caso lo requiera, guantes y
mascarilla.
* Hacer correctamente la identificacin de las muestras.
13.3.1.2 En el procesamiento de las pruebas:
* El personal debe estar libre de heridas o mantenerlas muy protegidas y bajo
tratamiento.
* Slo el personal autorizado debe ingresar al ambiente de trabajo.
* Usar guantes y mascarilla, en el manipuleo de muestras y reactivos que as lo
requieran.
* No pipetear directamente las muestras, hacerlo con las propipetas o bulbos
apropiados o hacer el trasvase directamente.
* El material contaminado debe colocarse en solucin desinfectante, por ejemplo,
leja al 5% durante 30 minutos como mnimo. Todo material biolgico se inactiva o
neutraliza antes de ser eliminado.
* Esta prohibido comer, fumar, maquillarse o rasurarse en el ambiente del
laboratorio.
* Evitar el almacenamiento de alimentos, junto a los materiales y reactivos de
laboratorio, horno, estufa o refrigeradora.
24

* El personal debe estar instrudo sobre los peligros potenciales y las medidas de
bioseguridad en los laboratorios.
* En caso de accidentes, como el derrame de muestras sobre la mesa de trabajo o
piso, cubrir el rea con papel peridico empapado en fenol al 5%, formol al 2% o
creso al 3%, por lo menos durante 30 minutos; luego de lo cual, limpiar y trapear
correctamente.
13.3.1.3 Limpieza, desinfeccin y esterilizacin
13.1. Limpieza:
Es el proceso fsico de eliminacin de material inorgnico u orgnico, mediante el
lavado del material tratado con fenol o hipoclorito con agua con o sin detergente. El
propsito de la limpieza es la eliminacin del material indeseable mediante el
arrastre por lavado. Es una etapa indispensable antes de someterse el material a la
desinfeccin o esterilizacin.
13.2. Desinfeccin:
Es el proceso fsico o qumico que elimina a los agentes infecciosos. De acuerdo a
la naturaleza de los que se desean eliminar, depender el tipo de desinfeccin a
elegirse: desinfectante qumico lquido, radiacin ultravioleta, pasteurizacin a 75C,
etc.
El grado de desinfeccin depender de varios factores, pero esencialmente del
agente antimicrobiano, la naturaleza de la contaminacin y el tiempo de exposicin.
El alcohol 70%, el formol y el fenol al 5%, etc., suelen ser buenos desinfectantes.
13.3. Esterilizacin:
Es el proceso fsico o qumico en que se destruye toda forma de vida.
Las formas ms comunes de hacerse son mediante el calor hmedo (autoclave) o
calor seco (horno); en ocasiones, para evitar el deterioro que produce el calor en el
material que se esteriliza, se usan procedimientos fsicos como el ultrasonido, o el
hervido,con lquidos.
11.4 BARRERAS DE PROTECCIN
Los equipos e insumos son las barreras de proteccin, desde los ms simples hasta
los ms complejos o de alta tecnologa. Estos son:
11.4.1 Personal: mandil, guantes, mascarillas, zapatos, gafas, gorros etc
11.4.2 Ambiente: seales o letreros de riesgo.
11.4. 3 Equipos: cubculo, cabinas de bioseguridad.

25

TABLA 3 NIVELES DE BIOSEGURIDAD DEL LABORATORIO


Grupo
de
riesgo
1

Nivel de
Bioseguridad

Equipos de
seguridad

Prcticas de
laboratorio

Ejemplo de
laboratorio

Laboratorio bsico
de nivel
bioseguridad 1

Ninguno, trabajo
en la mesa de
laboratorio

Enseanza
bsica

Laboratorio bsico
de nivel
bioseguridad 2

Uso de
barreras de
proteccin

Laboratorio de
contencin nivel
bioseguridad 3

Trabajo en la
mesa de
laboratorio y cabina de seguridad
tipo I y II
Uso de cabinas
tipo II y III en
todas las
actividades

Laboratorio de
contencin nivel
bioseguridad 4

Uso de cabinas
tipo III y IV en
todas las
actividades

Diagnstico
especial, hay
unidades de
alto riesgo

Enseanza
bsica
Centros de
salud
Atencin
centros de
salud y
hospitales de
apoyo
Prcticas nivel
2 y ropa
especial,
acceso
controlado y
flujo direccional
Prcticas nivel
3 y ropa y
entrada con
cmara
especial

Diagnstico
especial

TABLA 4 NIVELES DE LABORATORIO Y DE BIOSEGURIDAD


NIVELES
I
II

III

IV

LABORATORIO

NIVEL DE BIOSEGURIDAD

Es poco probable que cause


enfermedad en el hombre, no se
conoce factores de virulencia
Puede causar enfermedad en el
hombre y supone peligro para los
trabajadores,
siendo
poco
probable se propague a la
colectividad
Puede causar enfermedad grave
en el hombre y presenta serio
peligro para los trabajadores.
Implican patologa de difcil y
largo tratamiento, puede causar
secuelas y ocasionalmente la
muerte
Causa enfermedad grave en el
hombre, supone un serio peligro
para los trabajadores, muchas
probabilidades que se propague a
la colectividad

Agentes de bajo riesgo I,


C.Salud, C.enseanza
Agentes de riesgo II y III,
hay cmaras de bioseguridad

Agentes de clase III, acceso


es restringido.

Mxima contencin, agentes


de riesgo IV

26

11.5 CLASIFICACIN DE MICROORGANISMOS POR GRUPO DE RIESGO


CLASE I
Bacillus subtilis
Bacillus cereus
CLASE II
Parsitos
Entamoeba histolytica
Cryptosporidium sp
Cyclospora cayetanensis
Giardia lamblia
Ancylostoma duodenale

Ascaris lumbricoides
Trichuris trichiura
Enterobius vermicularis
Balanadidium coli

Bacterias:
Aeromonas
Bordetella
Bartonella bacilliformis
Clostridium jejuni
Treponema pallidum
Escherichia coli
Mycobacterium
Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas
Staphylococcus
Aeromonas
Chlamydia trachomatis
Brucella
Klebsiella
Streptococcus

Acanthamoeba castellani
Ascaris suum
Babesia microti
Necator americanus

Legionella
Campylobacter
Leptospiras
Shigella
Neisseria
Treponema

Hongos:
Aspergillus fumigatusCoccidioides inmitis
Candida albicans
Cryptococcus neoformans
CLASE III
Parsitos:
Taenia solium
Leishmania
Plasmodium falciparum
Trypanosoma cruzi
Bacterias:
Yersinia pestis
Mycobacterium leprae
Paracoccidioses brasiliensis

Echinococcus granulosus

Yersinia pestis

Virus
Virus hepatitis B VHB
CLASE IV
VIH
Virus de fiebre hemorrgica
Virus ebola
Virus dengue
Virus rabia
27

TABLA 5 CARACTERSTICAS DE ALGUNOS DESINFECTANTES


AGENTE
CARACTERSTICAS
Glutaraldehdo solucin acuosa Esporocida, txico, solucin activada inestable.
Fecha de expiracin 14 das de su preparacin
activada
Perxido de hidrgeno
estabilizado

Esporocida, solucin en uso estable hasta 6


semanas. Escasa inactivacin por materia
orgnica. Txico para ojos y va oral, es menos
txico para piel

Formaldehdo + alcohol

Esporocida, txico, voltil, emanaciones nocivas

Yodo + alcohol

Accin rpida, corrosivo, inflamable, irrita la piel,


mancha

Alcohol

Accin microbicia rpida, excepto las esporas


bacterianas y algunos virus resistentes. Voltil,
inflamable, seca e irrita la piel

Acido actico glacial

Es irritante,

Compuestos de cloro

Accin rpida, inactivado por materia orgnica,


corrosivo, irrita la piel
Estable corrosivo, escasa inactivacin por materia
orgnica, irritante para la piel

Compuestos de fenol
Compuestos de amonio
cuaternario

Poco irritante, inactivado por jabn y compuestos


aninicos, absorbidos por telas. Soluciones
diluidas o antiguas permiten el crecimiento de
bacterias Gram negativas

Compuestos de mercurio

Poco irritante, muy inactivadas por materia


orgnica, debidamente bactericidas.

11.6 DERRAMES ACCIDENTALES DE MATERIAL BIOLGICO CONTAMINADO


El manejo de derrames accidentales de materiales biolgicos depende del agente
infeccioso, la cantidad del material derramado y de la posibilidad de que se hayan
generado aerosoles. El empleo de algunos desinfectantes qumicos viricidas y
tuberculisidas, utilizados en la desinfeccin de reas, instrumentos, etc. en los
cuales se hayan producido derrames.
MATERIALES
28

A. Desinfectantes (ver Anexo 1 )


1. Compuestos clorados:
Clorox (5.25% Hipoclorito de sodio ); Alcide
(1.4-2.7% clorito de sodio)
2.Compuestos fenlicos: Fenol 3-5%
3. Glutaraldehido: (2%)
4. Compuestos iodforos
B. Equipos y otros suplementos
1. Papel toalla
2. Autoclave
3. Bolsas plsticas autoclavables
4. Contenedor de desechos bio-contaminados
C. PROCEDIMIENTO
1. Desinfeccin de grandes derrames (posible formacin de aerosoles)
- Evacuar el rea , previniendo la aspiracin de materiales aerolizados
- Alertar la personal en el laboratorio para evacuar el laboratorio
- Cerrar las puertas en el rea afectada
- Despus de 30 45 minutos cuando los aerosoles han
asentado,ingresar al rea a limpiar:
a. La limpieza debe ser realizada por el personal que ocasion el
derrame o por otro personal asignado.
b. Se emplearan guantes, calzado especial, mascarillas, mandiles
largos.
c. Para agentes de alto riesgo, deber emplearse mascarillas con
filtro HEPA.
- Remover y descartar cualquier material de vidrio quebrado u otro
objeto y descarte estos materiales en contenedores plsticos para
material de riesgo biolgico.
- Cubrir el derrame con papel toalla, peridico u otro material similar
absorbente.
- Absorbido el liquido, descartar todo el material contaminado en el
contenedor de desechos de riesgo biolgico.
- Cuidadosamente limpie el sitio de derrame de cualquier material
visible, desde la parte externa del derrame hacia la zona central, con
una solucin detergente acuosa.
- Dejar que el desinfectante permanezca en el sitio por 20-30 minutos.
- Recoger el papel usado y dejar que el desinfectante se seque.
- Enjuague el sitio del derrame con agua y deje secar al aire.
- Descartar todos los papeles toalla, guantes u otros dentro de bolsas
autoclavables o dentro del contenedor de desechos de riesgo
biolgico.
- Colocar los mandiles o batas en un container para autoclavarlas
despus de que se haya concluido con el proceso de limpieza.
- Lavarse las manos con agua y jabn.
2. Limpieza de derrames menores.
-

Se deben emplear guantes y mandiles largos


29

Cubrir el material derramado o contaminante derramado con papel


peridico, toalla empapado con desinfectante.
Dejar unos 20 minutos
Enjuagar los materiales con agua si es necesario
Descartar todos los materiales en un contenedor de desechos
biolgicos
Lavarse las manos con abundante agua y jabn

D. LIMITACIONES
- No verter soluciones de hipoclorito dentro de frascos con orina,
sangre o heces. Se pueden producir gases altamente irritantes
- No use desinfectantes de bajo nivel, tales como componentes de
amonio cuaternario para desinfectar derrames.
E. CONTROL DE CALIDAD.
- Completar el reporte del incidente ocurrido y reportarlo al Comit de
Bioseguridad, usar ficha 1.
XII. MANEJO DE RESIDUOS SOLIDOS
Se debe tener en cuenta
Aspectos tcnicos

Uso de autoclave
Trituracin

Guas
Manuales
Recipientes
Contenedores
Etiquetas
Esterilizacin

*Falta de recursos presupuestales


*No hay tecnologa para el
tratamiento
*Desconocimiento de tecnologa
*Desconocimiento de riesgos
*Falta
de
capacidad
entrenamiento

12. 1 FASES DEL CICLO DE VIDA DE LOS RESIDUOS


*Generacin: lugar de origen, interviene todo el personal de laboratorios
* Neutralizacin e inactivacin: Inactivar todo ser vivo
*Almacenamiento primario: lugar o fuente de generacin
*Almacenamiento secundario: un rea comn de almacenamiento
*Recoleccin: es la manipulacin de los contenedores, bolsas con
residuos modificacin y caractersticas de los resduos para que pierdan
su peligrosidad.
*Tambin se acondicionan para que no sean reconocidos para evitar el
reciclaje y comercio informal
*Transporte: diseo de una ruta ptima para eliminacin
* Disposicin final: Inactivacin o tratamiento
* almacenamiento terciario (acopio central de desechos)
* recuperacin, neutralizacin o reciclaje
* recoleccin externa
30

* transporte municipal o externa de desechos


* tratamiento externo
* botadero o relleno sanitario
* Desinfeccin
* fumigacin y limpieza
12.2 PARAMETROS PARA EL MANEJO DE RESIDUOS
* Parmetros bsicos
* Parmetros especiales
* Procedimientos para determinar los parmetros bsicos
*Generacin global de resduos que produce un
laboratorio diariamente. Este parmetro se obtiene sumando el peso
de generados diariamente en cada divisin y se expresa en Kilogramo
/ da .
* Tasa de generacin de resduos (TGR) de laboratorio, se define
como el peso de los resduos slidos y se generan diariamente por
cada diagnstico.
* Es un indicador de la tasa de resduos y se obtiene dividiendo la
generacin global de resduos para el N total de diagnstico
realizados y se expresa en Kgr./Dx./da.
TGR = Peso total de resduos x da
N Diagnsticos realizados
Para obtener este parmetro se requiere:
a) Pesar por separado los resduos peligrosos y no peligrosos de cada
uno de los laboratorios o equipo del CNLSP/INS
b) Obtener informacin sobre los tipos de diagnstico realizado en
cada equipo.
c) Realizar el clculo para cada parmetro

Tasa de generacin de resduos clasificado por laboratorio por


divisin: La tasa se puede obtener por cada divisin, dividiendo los
pesos parciales de cada divisin sobre el nmero de diagnsticos
realizados en el mismo
d) Densidad de almacenamiento:
* Se define como la relacin que existe entre el peso y el volmen de
un cuerpo . Este parmetro se expresa en kilogramos / m3 y sirve para
* Estimar los requerimientos de recipientes y bolsas de bioseguridad,
para el Almacenamiento; y tambin para definir el tipo y capacidad del
autoclave que la institucin necesita.
Densidad _ Peso (Kgr)
Volumen (m3)
El propsito de efectuar estas determinaciones es conocer las diversas
caractersticas de los resduos que permitan seleccionar, aplicar y
monitorear de manera efectiva las tcnicas de inactivacin
31

Incineracin ( uso limitado por la contaminacin ambiental)


Autoclave (esterilizacin)
Desinfeccin qumica
12.3 CLASIFICACION DE LOS RESIDUOS DE LABORATORIO
Los residuos se clasifican de varias formas, por el estado, caracterstica u
origen, en cuanto al estado consideramos: slidos, lquidos y gaseoso. Nos
vamos a referir a los resduos de laboratorio en: slidos y lquidos
12.3.1 RESIDUOS SOLIDOS
Resduos solidos comn.- Son aquellos que no representan un riesgo para la
salud humana, animal o el medio ambiente y que no requieren de un manejo
especial y son: papel, cartn, plstico, desechos de alimentos y tiles de
escritorio.
Resduos solidos biocontamiandos.- Son aquellos que tienen grmenes
patgenos que implican un riesgo inmediato o potencial para la salud humana
y no han recibido un tratamiento previo antes de ser eliminados, se incluyen:
cultivos de agentes infecciosos (placas petri,
tubos, etc), todos los
instrumentos usados para manipular, mezclar o inocular microorganismos.
Resduos anatomopatolgicos, de tejidos y rganos humanos o
de animales de laboratorio.
Insumos usados para obtener las muestras de laboratorio
Materiales descartables contaminados con sangre, tejidos,
exudados, secreciones, fludos y heces.
Residuos especiales.- Generado por los laboratorios y servicios especiales que
por sus caractersticas fsico-qumicas, representan un riesgo o peligro
potencial para los seres humanos, animales o medio ambiente y son los
siguientes:
.Resduos qumicos.- Son sustancias o productos qumicos con
caractersticas txicas , corrosivas, inflamables y/o explosivas.
. Resduos radioactivos.- Aquellas que contienen uno o varios
materiales que irritan espontaneamente partculas radioactivas,
electromagntica o que fusionan espontaneamente, son
producidos en laboratorios de anlisis qumicos.
.Resduos farmacuticos.- Son los medicamentos slidos
caducados, drogas citotxicas (mutagnicas, teraputica) etc.
Residuos punzo-cortantes.- Son los materiales u objetos
Utilizados en cuidado de los seres humanos o animales en la
investigacin como: bistur, jeringas hipodrmicas, pipetas,
materiales de vidrio u otro material corto-punzante, desperdicios
que han estado en contacto con agentes infecciosos o
materiales rotos.
Almacenaje, descontaminacin, transporte y descarte de residuos,
32

Materiales y objetos punzo cortantes.


Las agujas y otros elementos cortantes usados deben colocarse en un
recipiente rgido, resistente a las punturas y debidamente rotulado.
12.4

RESIDUOS LIQUIDOS

12.4.1 Resduos liquidos biocontaminados.- Se consideran:


. Cultivos de agentes infecciosos y resduos lquidos de
productos biolgicos, vacunas vencidas.
. Sangre y derivados, suero, plasma
. Muestras de orina, heces y exudados corporales
. Vacunas lquidas vencidas/
. Agua contaminadas
12.4.1 Resduos liquidos quimicos.- Son sustancias inflamables como:
Alcohol, fenol.
Xilol, creosota, tolueno, etc.
. Sustancias corrosivas.- Acido sulfrico, cido: ntrico, actico.
. Sustancias txicas.- Bromuro de ethidio
. Colorantes: Fucsina bsica, alcohol yodado, azul de metileno,
giemsa, verde malaquita, carmn, cristal violeta, Chromotrope,
May Grnwald, Hematoxilina Frrica, Allium carmn etc.
12.5 GENERACION Y SEPARACION DE LOS RESIDUOS
. Los desechos deben ser clasificadas y separadas inmediatamente despus
de su generacin, en el mismo laboratorio donde se genera.
. Los objetos punzo-cortantes debern ser colocados en recipientes a prueba
de perforacin. Se debe usar equipos de recoleccin y a prueba de
perforacin. Se debe usar equipos de recoleccin y destruccin de agujas
dentro del servicio que lo genera.
. Los resduos lquidos o semilquidos especiales. Deben ser colocados en
recipientes resistentes en cada etapa para luego ser descontaminado.
. Los resduos slidos comunes, debern ser embolsados en bolsas negras
para su disposicin final.
. Los resduos slidos biocontaminados, deben ser llamados en bolsas rojas y
para su manipulacin, se debe usar guantes industriales. Por sus
carctersticas algunos de llos debern ser neutralizados en el laboratorio
donde se genera.
. Los resduos lquidos biocontaminados deben ser inactivados y luego ser
eliminados al desage comn.
12.6 ALMACENAMIENTO Y CARACTERISTICAS DE LOS RECIPIENTES.
.De acuerdo al nivel de complejidad, el INS tiene 2 sitios de almacenamiento
Almacenamiento primario.- Es el que se realiza en el laboratorio o lugar
donde se genera.
Almacenamiento secundario.- Es aquel rea destinado para el acopio de
todos los resduos de la institucin previa clasificacin, tratados
33

adecuadamente donde deben permanecer durante 24 hs para luego ser


transportado por el carro recolector.
. Deber contar con dos recipientes reutilizables, como para resduos
comunes ( y otro para los biocontaminados y otros), los recipientes debern
de ser de 20 L ms para almacenamiento primario y de 500 L par el
secundario (depende la capacidad de servicio.
.Los recipientes descartables deben reunir las sgtes. Caractersticas:
Espesor y resitencia, ms de 35 m (0.035 mm) para volmenes de 30 Lts,
60 m para las de mayor tamao y en casos especiales se usarn de 120
m.
.Material: debe ser opaco, para impedir la visibilidad.
.No es reciclable.
Los recipientes reutilizables y deshechables deben tener las sgtes colores:
a. Rojo..- Biocontaminados y especiales
b. Negro.- Desechos comunes
c. Los recipientes para objetos cortopunzantes deben ser rgidos, resistentes
de plsti co. La abertura de ingreso debe ser pequea para que no ingrese
las manos su capacidad nunca exceder los 6 litros. Deben estar
rotulados peligro: objetos punzocortantes
12.7 ALMACENAJE, DESCONTAMINACION, TRANSPORTE Y DESCARTE DE
RESIDUOS
Descarte de agujas y objetos cortantes

Las agujas y otros elementos punzo cortantes deben colocarse en recipiente


rgido, resistente a las punturas y con rtulo de material contaminado
Deben ser de fcil accesibilidad en el laboratorio
Las agujas no deben ser envainadas, dobladas, rotas, cortadas ni retiradas
de la jeringa. Debe descartarse la jeringa con su aguja
Si por alguna razn se retira la aguja usar guantes, si se mancha con sangre
debe eliminarlos.

12.8 MANEJO DE RESIDUOS POTENCIALMENTE INFECCIOSOS

El manejo de residuos potencialmente infecciosos, el uso de guantes es


obligatorio
hasta que sea colocado en recipiente adecuado.
Los objetos cortantes deben ser empacados y distribuidos en recipientes de
paredes rgidas, resistente a los cortantes y punturas. Colocar su etiqueta
material contaminado.
Otros residuos depositarlos en bolsa, en la etiqueta sealar material para
esterilizar.
Es necesario la descontaminacin del resduo potencial infeccioso antes de
la disposicin final, hasta donde
sea posible estos deben ser
descontaminados en el lugar donde se genera.
La esterilizacin y desinfeccin del material
reusable o descartable,
desinfectar las superficies del rea de trabajo.
34

El material contaminado debe autoclavarse a 23 Lb de presin o 121C por


30 minutos.
El material reusable puede desinfectarse colocando en desinfectante como
hipoclorito de leja 3-5% o glutaraldehdo al 5%.

XIII REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS


35

Beltrn Mara, Tello Ral y Nquira Csar Manual de Procedimientos de Diagnstico


de los Parsitos del Hombre. Normas Tcnicas. 37, 2003.
Digesa y Minsa. Manual de manejo de residuos slidos hospitalarios (MARSSH)
Per. 1995
Guilln Alfredo, Quispe Neyda, Beltrn Mara y Valverde Ada. Manual de Normas de
Bioseguridad. Serie de Normas segunda edicin Tcnicas N 18 1997
Hiplito Nio y Luis A. Barrera. Garanta de Calidad en el Laboratorio Clnico
INDECOPI ISO 15189. Norma de los procedimientos de Laboratorios del Insituto
Nacional de Salud. 2004.
ISO (International Standard Organization = Cumplimiento de normas del sistema de
calidad) 15189. Instituto Uruguayo de Normas Tcnicas, 1993.
Consuelo Meneses. Gua de diagnstico y caracterizacin de
Hospitalarios. Fundacin Natura. Consejo Britnico Quito Ecuador. 1998

desechos

Miller JM, Holmes H. Specimen collection and storage. In: Murray PR, Baron EJ,
Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH. Manual of Clinical Microbiology, 7 ed.
Washington DC. American Society for Microbiology; 1999. p. 33-63.
Rosa Mostorino y col. Manual de Bioseguridad para los Laboratorios Normas
Tcnicas N 18, 2002
Comit de Bioseguridad. Manual de Procedimientos Bioseguridad en los
Laboratorios de Ensayo Biomdicos y Clnicos., 2005

ANEXOS
36

1. GLOSARIO
1.1

DEFINICIONES Y ABREVIATURAS

1.1.1

Acreditacin: es un instrumento de gestin como medio para crear


confianza en los resultados.
Auditora: verificacin del proceso, registro, anlisis e informes es correcto
Almacenamiento primario: lugar o fuente de generacin
Almacenamiento secundario: un rea comn de almacenamiento
Biocontaminado: material que incluye concentracin alta de agentes
infecciosos de riesgo potencial
bioseguridad: conjunto de medidas de proteccin contra cualquier tipo de
accin que ponga en peligro la salud del ser humano.
BPL: buenas prcticas de laboratorio.
Calidad: es trabajar bien, preciso, exacto y confiable.
Cstode, helminto formado por segmentos.
CI: Clasificacin Internacional de las enfermedades producidos por
parsitos.
centrifugacin: obtencin de la sedimentacin del contenido de una
suspensin mediante la fuerza centrfuga.
Control de calidad:
Desecho: es producto o subproducto como resultado de los anlisis
Desecho contaminado: desechos grandes cantidades de microorganismos
o sus productos potencialmente infecciosos.
Esterilizacin: es el proceso que se destruye al organismo vivo
fijacin: incorporacin de un producto qumico a la muestra a analizar para
la conservacin de las formas parasitarias.
Generacin: lugar de origen, interviene todo el personal de laboratorio
HACCP = Hazard, anlisis, crtico, control puntos. Anlisis y riesgos de
puntos crticos de control.
heces: mezcla de productos de excrecin y secrecin que se eliminan por el
intestino.
helminto o gusano: ser pluricelular con exoesqueleto flexible, ausencia de
apndices y de movimientos reptantes.
huevo: producto de la fecundacin, con potencialidad de desarrollar un
nuevo ser.
herida: prdida de piel y potencial puerta de entrada de agentes patgenos.
Inactivar: inactivar o matar todo ser vivo
invasivo(a): Agente infectante que tiene capacidad de invadir tejidos
ISO: organizacin Internacional de Normalizacin
larva: estadio evolutivo de algunos seres vivos como los helmintos y los
artrpodos en quienes an no han desarrollado los aparatos genitales.

1.1.2
1.1.3
1.1.4
1.1.5
1.1.6
1.1.7
1.1.8
1.1.9
1.1.10
1.1.11
1.1.12
1.1.13
1.1.14
1.1.15
1.1.16
1.1.17
1.1.18
1.1.19
1.1.20
1.1.21
1.1.22
1.1.23
1.1.24
1.1.25
1.1.26

1.1.27 Medio de cultivo: componentes apropiados para lograr el


multiplicacin los microorganismos

crecimiento y

1.1.28 MIF: fijador de Yodo, mertiolate y formol para conservar los parsitos.

37

1.1.29 Montar: es fijar al espcimen con blsamo de canad entre lmina y


laminilla para la conservacin permanente y mantenerlo como material de
referencia.
1.1.30 Nemtode: gusano o helminto de forma cilndrica.
1.1.31 Neutralizar: incorporacin de un agente qumico a la muestra biolgica para
matar todo agente vivo.
1.1.32 Ooquiste: quiste que contiene el huevo y su posterior transformacin en
esporoblastos y esporoquistes, constituyendo los ooquistes inmaduros y
maduros respectivamente.
1.1.33 organolptico: caractersticas orgnicas de una sustancia: consistencia,
color, olor, etc.
1.1.34 PAF: fijador y/o conservador para muestras con parsitos, sobre todo los
protozoarios.
1.1.35 PVA: fijador de alcohol polivinlico para conservar los parsitos en muestras
fecales.
1.1.36 parsito: ser vivo de escala zoolgica inferior que vive a expensas de otro
de escala superior.
1.1.37 Peligro: es cualquier elemento fsico, biolgico o qumico que contamine al
producto y pueda causar problema de seguridad.
1.1.38 Punto crtico de control: es el punto de proceso de produccin que a falta de
control se producira un riesgo.
1.1.39 quiste: forma de resistencia de los protozoos, los cuales se rodean de una
membrana dura e impermeable, tambin es la forma inmvil.
1.1.40 Reproducibilidad: es la capacidad de la prueba o examen para ofrecer los
mismos resultados, cuando se repite su aplicacin en circunstancias
similares.
1.1.41 Resduo: material, medio reactivo como producto de anlisis de laboratorio
1.1.42 Resduo lquido: medios lquidos, orina, sangre.
1.1.43 Resduo slido: frascos, contenedores, muestras biolgicas
1.1.44 Riesgo: es la fuente o situacin potencial de dao.
1.1.45 SAF: Fijador acetato de sodio
1.1.45 Segregacin: consiste en convertir el material infeccioso en comn para
reducir los riesgos para la salud y el ambiente
38

1.1.46 Seguridad: La seguridad viene en determinado momento con el valor


predictivo de su resultado positivo o negativo.
1.1.47 solucin sobre-saturada: solucin en que el soluto est en su mxima
concentracin para su dilucin.
1.1.48 trofozoto: forma vegetativa, libre en movimiento, de los protozoos.
1.1.49 tremtode: Gusano aplanado o platelminto, tiene el cuerpo sin dividir, cuyos
adultos poseen dos ventosas.
1.1.50 Tratamiento: reducir o eliminar el potencial contaminante que tiene el
residuo y lo convierte de contaminante a comn.
1.1.51 Validez: es el grado que mide una prueba o ensayo, la validez responde a
los indicadores de peticin y anlisis.
2. SOLUCIONES DESINFECTANES
a. Glutaraldehido solucin 2-12% : No deber emplearse en desinfeccin de
superficies en general debido a sus vapores irritantes y prolongado tiempo de
contacto.
b. Bicromato de potasio
Bicromato de potasio ..... 100,00 g
Acido sulfrico .
..... 100,00 mL
Agua destilada
..... 1000,00 mL
Disolver el bicromato de potasio en agua destilada sobre un recipiente
conteniendo agua de cao para enfriar, aadir el cido poco a poco y agitar
continuamente. Nunca aadir agua al cido.

Ficha 1
39

REPORTE DE INCIDENTE

OCURRIDOS EN EL LABORATORIO

REPORTE DE INCIDENTE LABORATORIAL


LABORATORIO:
FECHA:
PROBLEMA / INCIDENTE:

PROCEDIMIENTO REALIZADO PARA RESOLVER EL PROBLEMA.

ACCION PREVENTIVA CON EL FIN EL EVITAR EL PROBLEMA EN EL


FUTURO

COMENTARIOS ADICIONALES

REPORTADO POR:
REVISADO POR:

FECHA:
FECHA:

Ficha 2
40

: REGISTRO DE CONTROL DE CALIDAD DE CENTRIFUGA


Instrumento
: Centrfuga

Modelo:
Serie:

Cdigo:

Fecha
de Laboratorio:
Recepcin:
Seccin:

FECHA

VELOCIDAD PROBLEMA

ACCION
CORRECTIVA

Ficha 3
41

CONTROL DIARIO DE EQUIPOS


Mes

Equipo

Fecha

Hora

Cdigo
Temperat
equipo

Serie

Laboratorio:
Seccin:
Temperat. Firma
del observacin
Instrumento Responsable
referencia

42

FICHA 4
TASA DE GENERACIN DE DESECHOS POR SERVICIO DURANTE LOS
ANALISIS
ESTABLECIMIENTO...................................................Laboratorio................................
......
Fecha---------------------------Laboratorio
Responsabl
e

DESECHOS PELIGROSOS
DESECHOS NO PELIGROSOS
Generac
Peso Kg N
Genrc pcte Peso Kg N
pacientes Kg/pcte/d
pacientes Kg/pcte/d
a
a

Desecho peligroso: todo muestra biolgica, fluido, secrecin,


un agente vivo, se incluyen sustancias qumicas.
Desecho no peligroso: cartn, papel, caja etc.

tejido,

antgeno de

FICHA 5
43

GENERACIN DE DESECHOS POR DE LABORATORIO


Laboratorio...................................................Institucin............................Fecha---------

FECHA

DENSIDAD DE ALMACENAMIENTO Kg/m


DESECHOS PELIGROSOS
DESECHOS NO PELIGROSOS
Muestra Muestra 2 Muestra 3 Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3
1

1
2
3
4
5
6
21

TOTAL
DENSIDAD
ALMACENAM
POR
TIPO
DE
DESECHO

(A)

(B)

A + B + C / 21

(C)

(D)

(E)

(F)

D + E + F / 21

44