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DETERMINACION DE VITAMINA C CON 2.

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DICLOROFENOLINDOFENOL
INTRODUCCION
El enantiometro L del acido ascrbico (ascrbico procede de su capacidad para
prevenir y curar el escorbuto), tambin conocido como vitamina C , es un acido
orgnico y un antioxidante perteneciente al grupo de vitaminas hidrosolubles. No se
sintetiza en el organismo, por lo cual tiene que ser aportada en la dieta. Se encuentra,
principalmente en verduras y frutas frescas y en las zumos de ctricos. La mayora de
las especies animales y vegetales sintetizan su propia vitamina C; por lo cual no
constituye una vitamina para ellos. La sntesis se realiza en etapas catalizadas por
cuatro enzimas que convierten la glucosa en acido ascrbico.
producto

Mg/100 g de producto fresco

guayaba

273

Pimenton

131

brocoli

110

kiwi

90

fresa

60

Limn y naranja

50
Contenido de vitamina C por cada 100 g

Se considera que las necesidades diarias de acido ascrbico para un adulto no


exceden de los 60 mg y que las cantidades superiores a las 3 g diarios causan
acidificacin de la orina e incrementa el consiguiente riesgo de clculos urinarios.
La formula molecular de la vitamina C es
y su masa molecular: 176,1 g/mol.
Se presenta en forma de cristales blancos con ligero tono amarillo y posee un sabor
acido caracteristico. La vitamina C se disuelve rpidamente en agua y etanol, pero es
insoluble en cloroformo y eter. Una solucin acuosa del 5% tiene un pH de 2,2 - 2,5. El
acido ascrbico se oxida fcilmente en presencia de la luz y el aire por lo que se
utiliza, como revelador fotografico y como conservante. El acido ascrbico y sus sales
de sodio, potasio y calcio (ascorbatos minerales) son solubles en agua por lo que no
protegen a las grasas de la oxidacin. Los ascorbatos minerales se preparan a partir
de reaccin del acido con los respectivos carbonatos y bicarbonatos de calcio,
magnesio, potasio y sodio. Los ascorbatos minerales pueden ser mejor tolerados que
la vitamina en su forma acida.

El ascorbatos como antioxidantes debido a que su oxidacin es menos energtica que


la de otras especies. Las especies oxidantes, tales como el radical hidroxilo formado a
partir del perxido de hidrogeno, contienen un electron no apareado que las hace
extremadamente reactivas y dainas a nivel molecular, tanto para el ser humano
como para las plantas. Esto se debe a su interaccion con los acidos nucleicos, las
protenas i los lpidos. Las especies oxidantes con oxigenos reactivos pueden abstraer
un atomo de hidrogeno del ascorbato, que se convierte en monodeshidroascorbato
que inmediatamente pierde otro electron para convertirse en deshidroascorbato.
La vitamina C debe su acidez a los grupos OH prximos al doble enlace. Uno de estos,
el que se encuentra sobre el carbono mas alejado del grupo carbonilo, forma un doble
enlace con el carbono prximo (carbono gamma) cediendo un par de electrones, y
convirtindose en un grupo oxonio (=OH+). Simultneamente, el doble enlace C=C se
mueve hacia el carbono del grupo ester de la lactona, y consecuentemente, el par de
electrones del doble enlace carbonilo (C=O) se transfiere al atomo de oxigeno de
oxigeno para formar un enolato (C-O-). Una vez formada, la especie oxonio-enolato se
desprotona dando a un carbonilo el carbono gamma; este protn es el causante de la
acidez del acido ascrbico. Este enolato entra en resonancia con la especie oxonioenolato, lo cual le da gran estabilidad.
El acido ascrbico tambin posee dos tautomeros inestables que se interconvierten
rpidamente con la intervencin del proton.las especies dicetona pueden ser dos: la
1,2 dicetona i la 1,3.

El mtodo usado en la prctica se basa en el poder reductor del acido


ascrbico. El acido ascrbico se determina por valoracin con el colorante 2,6
diclorofenolindofenol que es reducido por el acido ascrbico a una forma
incolora en medio acido. La forma oxidada del reactivo es azul y la reducida
incolora.

OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
- Determinar la presencia y cantidad de vitamina c en muestras de zumos
de frutas mediante el uso de 2,6 Diclorofenolindofenol.

OBJETIVO ESPECIFICO
- Detectar la presencia y cantidad de vitamina c en muestras de zumos de
-

fruta comerciales Tampico y Aruba.


Tomar conciencia de la importancia de conocer la composicin de los
alimentos que consumen como un primer paso para conseguir una dieta
equilibrada y saludable.

FUNDAMENTO TEORICO

La vitamina C es una vitamina hidrosoluble sensible al calor. Qumicamente


hablando, se trata de cido L-ascorbico y sus sales, los ascorbatos (los ms
comunes, que son ascorbatos de sodio y de calcio).
Accin
La vitamina C es un cofactor enzimtico implicado en diversas reacciones
fisiolgicas (hidroxilacin). Es necesaria para la sntesis del colgeno y de los
glbulos rojos, y contribuye al buen funcionamiento del sistema inmunitario.
Tambin juega un papel en el metabolismo del hierro, en la transformacin de
dopamina en noradrenalina y en la biosntesis de carnitina. Bajo su forma
oxidada, atraviesa la barrera hemato-enceflica para acceder al cerebro y a
varios rganos. Muy frgil en solucin, se destruye al contacto con el aire, por
la luz o el calor. Se trata de un antioxidante, molcula capaz de contrarrestar la
accin nociva de oxidantes como los radicales libres. Con este fin, tambin se
emplea la forma R- del cido ascrbico, la cual, al contrario que la forma L-, no
presenta actividad vitamnica.
FUNCIONES
La vitamina C se necesita para el crecimiento y reparacin de tejidos en todas
las partes del cuerpo. Se utiliza para:

Formar una protena importante utilizada para producir la piel, los


tendones, los ligamentos y los vasos sanguneos.

Sanar heridas y formar tejido cicatricial.

Reparar y mantener el cartlago, los huesos y los dientes.


La vitamina C es uno de muchos antioxidantes, los cuales son nutrientes que
bloquean parte del dao causado por los radicales libres.

Los radicales libres se producen cuando el cuerpo descompone el


alimento o cuando usted est expuesto al humo del tabaco o a la radiacin.

La acumulacin de radicales libres con el tiempo es ampliamente


responsable del proceso de envejecimiento.

Los radicales libres pueden jugar un papel en el cncer, la cardiopata y


trastornos como la artritis.

Los antioxidantes tambin ayudan a reducir el dao corporal causado por


los qumicos y contaminantes txicos como el humo del cigarrillo.
El cuerpo no puede producir la vitamina C por s solo, ni tampoco la almacena.
Por lo tanto, es importante incluir muchos alimentos que contengan esta

vitamina en la dieta diaria. Durante muchos aos, la vitamina C ha sido un


remedio popular para el resfriado comn.

La investigacin muestra que, para la mayora de las personas, los


suplementos de vitamina C o los alimentos ricos en dicha vitamina no reducen
el riesgo de contraer el resfriado comn.

Sin embargo, las personas que toman suplementos de vitamina C


regularmente podran tener resfriados ligeramente ms cortos o sntomas algo
ms leves.

Tomar un suplemento de vitamina C despus de que empiece un


resfriado no parece servir.
INGESTA DIARIA RECOMENDADA
En abril del 2000 en Instituto de Mecicina en EE UU publico las ultimas
recomendaciones sobre las ingestas diarias de vitamina c. Estas sond e 90
mg/dia para un Homre adulto y 75 mg/dia para una mujer adulta (lo que
supone un aumento sobre las ingestas de 60 mg/dia recomendadas
anteriormente). Las dosis mximas tolerables se situan en los 2000 mg/dia.
DEFICIENCIA
Las encuestas alimentarias en muchos pases de Asia, frica y Amrica Latina
indican que grandes segmentos de sus poblaciones consumen mucho menos
cantidad de vitamina C de la que se considera esencial o deseable. Sin
embargo, el escorbuto, la enfermedad clsica y seria que resulta de una
carencia grave de vitamina C, ahora parece ser relativamente poco comn.
Ningn pas informa que el escorbuto es un problema importante de salud,
pero en cambio se verifican epidemias en los campos de refugiados, durante
hambrunas y a veces en las crceles.
El escorbuto se reconoci por primera vez en los siglos XV y XVI como una
enfermedad grave de los marinos en viajes largos por mar, pues no tenan
acceso a alimentos frescos, incluyendo frutas y verduras (vase el Captulo 11).
Antes de la era de la investigacin sobre vitaminas, la marina inglesa
estableci como prctica suministrar limones y otros frutos ctricos a los
navegantes para evitar el escorbuto.
La vitamina C o cido ascrbico es un nutriente esencial y necesario para la
formacin y mantenimiento saludable del material intercelular (vase el
Captulo 11); que es como un cemento que une clulas y tejidos. En el
escorbuto, las paredes de los vasos sanguneos muy pequeos, los capilares,

carecen de solidez y se vuelven frgiles, sangran y sufren hemorragias en


diversos sitios. La carencia moderada de vitamina C puede incidir en una
cicatrizacin pobre de las heridas.
Como se mencion en el Captulo 13, la vitamina C aumenta la absorcin de
hierro y por lo tanto influye en la reduccin de la anemia por carencia de hierro.
Algunos anticonceptivos orales disminuyen los niveles de vitamina C en el
plasma.
MANIFESTACIONES CLNICAS
Se pueden presentar los siguientes sntomas y signos:

cansancio y debilidad;

encas inflamadas que sangran fcilmente en la base de los dientes (Foto


35);

hemorragias en la piel (Foto 36);

otras hemorragias, por ejemplo, sangrado nasal, sangre en la orina o en


las heces, estras hemorrgicas debajo de las uas o hemorragias
subperisticas;

demora en la cicatrizacin de las heridas;

anemia.

Un sujeto con escorbuto que muestre algunos de los sntomas anteriores,


aunque no parezca muy gravemente enfermo, puede fallecer de repente por
insuficiencia cardaca.
Aunque el escorbuto es una enfermedad relativamente rara, la inflamacin y
sangrado de las encas es bastante frecuente en ciertas regiones geogrficas y
puede deberse a falta de vitamina C. La carencia subclnica de vitamina C
tambin puede ocasionar una cicatrizacin lenta de las heridas o lceras. Los
pacientes que se van a someter a ciruga deben recibir vitamina C si muestran
carencia.
La anormalidad en los niveles de vitamina C puede tambin contribuir a la
anemia durante el embarazo.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Tomar 5 ml de muestra en un Erlenmeyer de 125 ml y se disuelve con 10 ml de
agua destilada recientemente hervida y enfriada se aade 10 ml de acido
oxlico al 2% y se agita la solucin.
Se procede a la valoracin con diclorofenolindofenol contenido en una bureta
graduada hasta que se obtiene coloracin dbilmente rosada.
El cambio de coloracin suele ser difcil observar debido a la coloracin que
posee la solucin problema.
En este caso se aade ter cuando se provee que esta a punto de alcanzar el
punto final de la valoracin para distinguir los colores.

DATOS Y CALCULOS

RESULTADOS Y OBSERVACIONES
La muestra de Aruba dio resultados de :

La muestra de Tampico dio como resultado de:

La vitamina C es un fuerte reductor que cambia el color de la disolucin de 2,6


diclorofenolindofenol al pasar este de su estado oxidado a reducido.
La disolucin patrn de vitamina c es de concentracin conocida: 1% en masa,
por lo que 15 gotas (aprox 0,76 ml) contendr 0,03 mg de vitamina c. Como
con 15 gotas de este patrn logramos la decoloracin del indicador del
indicador sabemos que son necesarios como mximo 0,03 mg de vitamina C
para reducir 0,3 ml de la disolucin del indicador.
Sabiendo esto podemos calcular la cantidad de vitamina C que contienen los
distintos zumos investigados segn el volumen que necesitemos para producir
la decoloracin.
Los resultados obtenidos son acordes a los datos estadsticos respectivos que
se conoca de las muestras analizadas.

CONCLUSIONES
En nuestra prctica de laboratorio se determino la presencia y la cantidad en
mg de Vitamina C en las muestras de los zumos de frutas comerciales de Aruba
y Tampico.
Con los conocimientos tericos adquiridos entendimos que el consumo de la
Vitamina C es importante para tener una dieta equilibrada y saludable ya que

su deficiencia puede conducirnos a diferentes enfermedades en distintas


etapas de la vida.

CUESTIONARIO
1. INDICAR OTROS METODOS PARA LA DETERMINACION DE VITAMINA C.
Podemos indicar los siguientes mtodos:
La determinacin de Acido Ascrbico puede realizarse fcilmente
mediante titulacin con DCFI pero solo se esta determinando AA y en
algunos casos pueden ocurrir interferencias.
El mtodo de DEUTSCH Y WEEKS con el derivado de quinolina
fluorescente formado con fenilendiamina proporciona una manera
confiable de medir la vitamina c total.
Si ha de determinarse el acido ascrbico TOTAL, HPLC puede
proporcionar una alternativa confiable suponiendo que utilizan
condiciones apropiadas, extraccin para la reduccin ADA a AA previo a
cuantificacin con HPLC.
2. QUE INCOVENIENTES TIENE EL USO DEL METODO 2,6
DICLOROFENOLINDOFENOL PARA
LA DETERMINACION DE
VITAMINA C.
El mtodo aunque es bastante usado, sin embargo da valores
demasiados altos, si existen
en la solucin otras sustancias reductoras
como compuestos orgnicos con grupos
sulfidrilos y el anhidro sulfuroso,
presente como aditivo. Adems el 2,6
diclorofenolindofenol no
reacciona con el acido dehidroascorbico, presente en los
productos
naturales y dotados tambin de actividad fisiolgica de la vitamina C.
El inconveniente mas comn seria a la hora de titular encontrar el color
rosado que nos
indica que la titulacin ah finalizado y as proceder a la
lectura de cuanto gastamos de nuestro reactivo en cuestin.

UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN


SIMON
FACULTAD DE CIENCIAS Y
TECNOLOGIA
INGENIERIA DE ALIMENTOS

DETERMINACION DE VITAMINA C
CON 2,6
DICLOROFENOLINDOFENOL

DOCENTE: LIC. MARIA ESTHER GIANNINI Z.


NOMBRES: ALVARO LIMACHI CORO
STEFFI CAPRILES CHIRINOS
JHANICE CAPRILES CHIRINOS

MAURICIO ESCOBAR
JHOSEF SOTO ROJAS
MATERIA: LABORATORIO DE ANALISIS DE ALIMENTOS

COCHABAMBA BOLIVIA